Caracterização de Caracterização de VibrioVibrio spp. e spp. e AeromonasAeromonas spp. ocorrentes em spp. ocorrentes em

animais marinhos capturados no animais marinhos capturados no litoral do Brasil.litoral do Brasil.

Dalia dos Prazeres Rodrigues

Ambiente natural de Vibrio spp. e Aeromonas spp

ANIMAISHomem

AlimentosÁgua

Microrganismos

Meio Ambiente

ANIMAIS Homem

AlimentosÁgua

Microrganismos

Meio Ambiente

Cadeia Alimentar

Ambiente aquático

Gêneros:

Vibrio: 48 espéciesPhotobacterium: 8 espéciesAllomonas: 1 espécieListonella: 2 espéciesEnhydrobacter: 1 espécieSalinivibrio: 2 espéciesEnterovibrio: 1 espécie

Gêneros:

Aeromonas: 26 espéciesOceanomonas: 2 espéciesTolumonas: 1 espécie

FamíliaVibrionaceae Aeromonadaceae

Microrganismos predominantes

Distribuição de Vibrio spp. em diferentes fontes aquáticas

Espécie Isolamento

Oceano Estuário Moluscos Sedimento Peixes Crustáceos Corais Água doce

V.aestuarinus X

V.alginolyticus X X X X X X X X

V.anguillarum X X X X X X

V.campbellii X

V.carchariae X X X X X X

V.cholerae X X X X

V.cincinnatiensis X

V.damsela X X X

Espécie Isolamento

Oceano Estuário Moluscos Sedimento Peixes Crustáceos Corais Água doce

V.diazotrophicus X

V.fisheri X X X X

V.fluvialis X

V.furnissii X

V.harveyi X X

V.hollisae X X

V.marinus X X X X X

V.mediterranei X

V.metschnikovii X X X X X

V.mimicus X

V.ordalii X X X X X

V.orientalis X

V.parahaemolyticus X X X X X

V.pelagius X X

Distribuição de Vibrio spp. em diferentes fontes aquáticas

Vibrio cholerae O1

Vibrio alginolyticus

Vibrio vulnificus

Características Morfológicas

V.parahaemolyticus

Vibrio cholerae

Pili

Flagelo

A.hydrophila

A.hydrophila (adesão- epitelio intestinal)

Características Ecológicas:

Vibrio spp

• Habitat: ambiente aquático• Recursos: celulose e quitinase

• Temperatura ótima: 17°C a 35°C

• Salinidade: 0.5 a 3.5 %

• Maior número de espécies:

água salgada

• Áreas poluídas X Patógenos

Aeromonas spp.

• Habitat: ambiente aquático

• Contato com espécies de

peixes e anfíbios

• Temperatura: 4°C a 37°C

com ótimo a 28°C

• Ocorrência espécies:

água doce> água salobra>

água salgada

Fatores de patogenicidade

Vibrio spp

• Enterotoxina CT, Zot, Ace• Toxina semelhante a CT• Toxina NAG-ST• Citolisina• Shiga Like Toxin• TDH - TRH• Colagenase, elastase,

hemolisina,...

Aeromonas spp

• Camada S• Hemolisinas• Enzimas Extracelulares• Sideróforos• Exotoxinas• Enterotoxina Citotóxica e

Citolítica• Enterotoxinas citotônicas• Invasinas• Plasmídeos• Adesinas

Vibrio spp

Homem: 12 espécies (?)

Animais: 14 espécies (?)

Aeromonas spp

Homem: (?)

Animais: (?)• sangue quente• sangue frio

Espécies patogênicas

Espécies patogênicas para o homem

Vibrio spp.V.alginolyticusV.carchariaeV.cholerae O 1, O139, não O1V.cincinatiensisV.damselaV.fluvialisV.furnissiiV.hollisaeV.metschnikoviiV.mimicusV.parahaemolyticusV.vulnificus

Aeromonas spp.• A.hydrophila• A.caviae• A.veronii biog. sobria• A.veronii biog.veronii• A.media• A.jandaei• A.schubertii

Vibrio spp. patogênicas para espécies animais

Espécies de Vibrio Peixes Moluscos Crustáceos Cnidários Corais

V.alginolyticus Úlcera Úlcera Úlcera

V.parahaemolyticus Úlcera Úlcera Inf.cutâneas

V.anguillarum Inf. cutâneas septicemia

Inf. cutâneas Inf. cutâneas septicemia

V.carchariae Vasculite

V.damsela Inf. cutâneas Inf. cutâneas Inf. cutâneas

V.ordalli Inf.cutâneas

V.cholerae Hemorragia petéquias

V.vulnificus Inf. cutâneas

V.harveyi Inf. cutâneas, Inf. cutâneas Inf.cutâneas

V.splendidus Inf. cutâneas

V.furnissii Inf.cutâneas

Inf cutâneas

V.fluvialis Inf.cutâneas

Inf cutâneas

V.metschnikovii Inf. cutâneas

V.fisheri Inf. cutâneas

V.orientalis Inf. cutâneas

V.campbelli Inf. cutâneas

Vibrio AK-1 Vibrioses

Fenoespécies de Aeromonas patogênicas para animais

Fenoespécies

A.hydrophila

A.salmonicida

A.caviae

A.media

A.eucrenophila

A.sobria

A.veronii

A.encheleia

A.schubertii

Grupo 501

A.trota

Animais aquáticos

Furunculose

Podridão: rabo, barbatanas

Septicemia hemorrágica

Pneumonia

Hemorragia: guelras, cutânea

Úlceras e estomatite ulcerativa

Abscessos e lesões cutâneas

Exoftalmia

Protrusão de escamas

Flacidez muscular

Distensão abdominal

Aves e Animais terrestres

Pneumonia

Dermatite

Aborto em vacas

Septicemia em cachorro

Diarréia em porcos

Úlcera cutânea Vermelhidão de barbatanas

Septicemia hemorrágica Furunculose crônica

Exemplos de infecções em peixes

Infecções cutâneas em crustáceos

Exemplos de infecções em animais aquáticos

Infecções em Corais

Infecções em Golfinhos

Infecções em peixes

ObjetivoObjetivoMonitorar a presença de microrganismos exóticos e

seu risco para animais residentes em nosso ecossistema marinho e conseqüências para o homem.

Objetivos específicos:Objetivos específicos: Caracterização das diferentes espécies; Determinação fenotípica e genotípica de seus fatores de virulência; Avaliação da suscetibilidade aos antimicrobianos e metais pesados; Rastreamento molecular dos clones circulantes; Caracterização das espécies/clones epidêmicos ocorrentes em paises dos hemisférios norte/sul que representam risco para o homem.

Equipe participanteColeta - Transporte

GEMARS - Ignacio S. Moreno Ignacio S. Moreno FEEVALE - Paulo H. OttPaulo H. Ott GEMM-Lagos DEENSP - - Salvatore Siciliano Salvatore Siciliano

DiagnósticoDiagnóstico LaboratorialLaboratorial

LABENT-LRNCEB

Simone D. Amorim Simone D. Amorim André F.M. SantosAndré F.M. Santos

Christiane S. PereiraChristiane S. PereiraEvaldo Soares Evaldo Soares

Grace Nazareth D. Theophilo Grace Nazareth D. Theophilo Dalia dos P. RodriguesDalia dos P. Rodrigues

Animais marinhosAves marinhas

OrigemOrigem

Coleta Coleta TransporteTransporte

Amostras

Diagnóstico Laboratorial

Agua PeptonadaAlcalina

Agar GSP

Agar TCBS

Agar Nutriente

KIA

LIA

Enriquecimento

IsolamentoTriagemIsolamento

VM VP

10µg

Sensibilidade O/129

150µg

Oxidase

Aminoácidos Via metabólica: glicose

Fonte de Carbono

Caracterização antigênica

Exemplo de testes empregados na caracterização das espécies

Fermentação de Carbohidratos

Fatores de virulência

Rastreamento

Suscetibilidade antimicrobianos e metais pesados

Período de análise: 2003-2005Período de análise: 2003-2005

Total de amostras analisadas: 198Total de amostras analisadas: 198

Mamíferos marinhos - Vibrio spp.: 108 Aeromonas spp.: 93

Aves marinhas - Vibrio spp.: 37

Resultados:

Microrganismo

Bal

eia

Fra

nca

Bal

eia

Bry

de

Bo

to A

mar

elo

Go

lfin

ho

Pin

tad

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Bo

to C

inza

Go

lfin

ho

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m

Bal

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Ju

bar

te

Bal

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Min

ke

Le

ão M

arin

ho

Bal

eia

de

Tru

e

Total

V.orientalis 1 1 V. alginolyticus 8 2 4 1 5 20 V. carchariae 9 2 11 V. harveyi 1 4 1 6 V. vulnificus 1 2 2 1 1 1 8 V. mediterranei 1 1 V. parahaemolyticus 1 5 2 1 1 10 V. cincinnatiensis 1 2 1 4 V. fluvialis 1 1 1 3 V. aestuarinus 3 1 2 6 V. gazogenes 4 4 V. furnisii 2 2 V. pelagius biog. I 1 1 1 3 V. pelagius biog. II 1 1 2 V. damsela 1 1 V. campbelli 1 1 V.mimicus 2 3 5 Vibrio sp. 9 1 3 1 1 1 4 20

Total 3 1 48 4 21 8 2 5 4 12 108

Distribuição de Vibrio spp. caracterizadas em mamíferos marinhos

Distribuição de Aeromonas spp. caracterizadas em mamíferos marinhos

Espécie

Bal

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Fra

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Bo

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to C

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Co

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arin

ho

Bal

eia

de

Tru

e

Total

A. veronii biog. sobria 2 1 2 3 4 12 A. hydrophila 1 1 3 2 1 1 9 A. veronii biog. veronii 2 1 15 2 1 1 22 A. schubertii 5 1 6 A. caviae 7 2 1 2 12 A. media 1 1 2 A. eucrenophila 4 1 5 A. sobria 2 1 1 2 2 8 A. jandaei 2 1 1 4 A. trota 1 1 2 Aeromonas sp. 1 1 1 1 1 5 Plesiomonas shigelloides* 4 2 6 Total 3 4 47 9 9 9 9 3 93

Baleia- franca- do- sul

Categoria de ameaça: Vulnerável Espécies identificadas: •V. parahaemolyticus •V. cincinnatiensis•V. fluvialis

Baleia- de- Bryde

Categoria de ameaça: ?

Espécies identificadas: •V. vulnificus

Jubarte

Categoria de ameaça: Vulnerável Espécies identificadas: •V. vulnificus•V. cincinnatiensis

Baleia- de- True

Categoria de ameaça: ?Espécies identificadas: •V. vulnificus•V. parahaemolyticus•V. alginolyticus•V. fluvialis

Baleia- Minke- anã

Categoria de ameaça: ?Espécies identificadas: •V. vulnificus•V. alginolyticus•V. carchariae

Boto-amarelo

Categoria de ameaça: perigoEspécies identificadas: •V. vulnificus•V. alginolyticus •V. carchariae •V. harveyi

•V. parahaemolyticus•V. fluvialis •V. cincinnatiensis•V. furnisii

Boto- cinza

Categoria de ameaça: ?Espécies identificadas: •V. vulnificus •V. alginolyticus •V. damsela•V. parahaemolyticus •V. mimicus •V. pelagius biog. I

Golfinho-pintado-do-atlântico

Categoria de ameaça: ?

Espécies identificadas: •V. pelagius biog. I•V. alginolyticus

Golfinho-comum-de-bico-curto

Categoria de ameaça: ?

Espécies identificadas: • V. parahaemolyticus• V. pelagius biog. I• V. mimicus• V. harveyi

Leão- marinho-do-sul

Categoria de ameaça: baixo risco

Espécies identificadas: • V. pelagius biog. II• V. aestuarinus

Distribuição de Vibrio spp. caracterizadas em aves marinhos

EspécieAtobá Ostreiro Pingüim Fura-

buxoSocozinho Pardella Fragata Garça

BrancaTotal

V. orientalis 1         1

Vibrio sp. 4   2 6 1 1   14

V. alginolyticus 1 1 1 3 2 8

V. carchariae   1     1 2

V. harveyi     3     3

V. metschnikovii     1     1

V. logei     1     1

V. splendidus biog. I 1         1

V. vulnificus       1   1

V. mediterranei       1   1

V. natriegens       1   1

V. anguillarum       1   1

V. parahaemolyticus         1 1

V. pelagius biog. II         1   1

Total 7 2 8 13 1 1 1 4 37

Fatores que propiciam as patogenias em animais marinhos::

Condições de stress resultantes de aprisionamento em redes de pesca;

Elevados índices de poluição, com redução de alimentos e desvio da rota migratória;

Relevância dos resultados : Possibilidade da introdução de espécies bacterianas exóticas com danos para aqüicultura;

Introdução de bactérias exóticas que podem determinar surtos epidêmicos no homem; Possibilidade de transferência de genes de resistência antimicrobiana e/ou virulência para bactérias autóctones com conseqüentes danos para o homem;

Principais aspectos a considerar::Complementar a análise das cepas feno e genotipicamente visando ampliar o Complementar a análise das cepas feno e genotipicamente visando ampliar o

conhecimento quanto as suas características.conhecimento quanto as suas características.

Necessidade de efetivar o monitoramento contínuo para determinar a introdução de Necessidade de efetivar o monitoramento contínuo para determinar a introdução de microrganismos exóticos.microrganismos exóticos.

Ampliar o conhecimento, contribuindo para preservação ambiental, particularmente em Ampliar o conhecimento, contribuindo para preservação ambiental, particularmente em animais ameaçados de extinçãoanimais ameaçados de extinção.

Avaliação parcial dos resultados:Elevado percentual e diversidade de

espécies patogênicas.

Administração Informática

Laboratório de EnterobactériasLab. Ref. Nacional de Cólera e Enteroinfecções Bacterianas

Av. Brasil, 4365 – Pav. Rocha LimaTel # 0 xx 21 2598-4277 R 316

e-mail: dalia@ioc.fiocruz.br

E.Hofer