aula 1 fundamentos e técnicas de microbiologia

Sejam Bem-Vindos!!!!

“O sonho encheu a noite

Extravasou pro meu dia

Encheu minha vida

E é dele que eu vou viver

Porque sonho não morre.”

Adélia Prado

Fundamentos e Técnicas de

Microbiologia

Profa. Mariana Paz

Fundamentos e Técnicas de Microbiologia:

• Competências:

• Compreender os mecanismos relacionados à

bacteriologia na área da saúde.

• Caracterizar e identificar as técnicas necessárias para a

execução de análises em microbiologia.

• Habilidades:

• Reconhecer as diferentes formas bacterianas, suas

características morfológicas e estrutura celular.

• Executar técnicas para identificação morfológica e

estrutural das células bacterianas.


• Cronograma

• Plano de Ensino

• Carga horária: 84 horas


• Bibliografia Básica:

• Tortora, GJ, Funke B.R., Case, C.L. Microbiologia. 10a

edição. Porto Alegre: Artmed; 2012.

• Oplustil, CP, Zoccoli, CM, Tobouti, NR, Sinto, SI.

Procedimentos Básicos em Microbiologia Clínica. 2ª

edição. São Paulo: Editora Sarvier; 2000.

• ANVISA. Manual de Microbiologia Clínica para o

Controle de Infecções em Serviços de Saúde. Brasil,

2004.


• Avaliações:

• NP1+NP2+NP3+Trabalho/4

• NP1 – 04/03/2015

• NP2 – 08/04/2015

• NP3 – 30/04/2015

• Trabalho: apresentação dias 06/05/2015 e 07/05/2015.


CUIDADO COM

OS ATRASOS E

FALTAS!!!!!!


• Aulas Práticas:

• NORMAS DE SEGURANÇA PARA AS AULAS PRÁTICAS

DE MICROBIOLOGIA

• É indispensável o uso de avental no laboratório. O avental

deve ser comprido, de mangas compridas e estar abotoado;

• Os calçados devem ser fechados (protegendo toda a

extensão do “peito do pé”), os cabelos compridos devem

estar presos e é proibido o uso de bijuterias.

• Atenção ao uso dos EPIs indicados para cada procedimento.


• O Material pessoal (bolsas cadernos, mochilas, agasalhos,

etc.) deve ser mantido longe das bancadas de trabalho.

Utilizar na bancada somente o material necessário ao

trabalho prático, como: roteiro de aula, papel e lápis ou

caneta para anotações;

• Não comer (inclusive balas e chicletes), beber e fumar no

laboratório;

• Em caso de qualquer acidente (derramamento de culturas,

quebra de placas, ferimentos, aspiração de culturas, etc)

comunicar imediatamente o professor ou o técnico

responsável pela aula prática;

• Lavar as mãos sempre antes de entrar e ao sair do

laboratório.

• Não utilizar aparelho celular.


• Descarte de material:

• Materiais contaminados devem ser colocados nos recipientes

próprios, existentes nos laboratórios. NUNCA deixá-los nas

bancadas ou pias;

• Placas de petri deverão ser deixadas tampadas sobre a

bancada;

• Lâminas fornecidas para visualização deverão ser deixadas

sobre as bancadas;

• Tubos com culturas deverão ser deixados nas estantes.


• Prestar atenção às atividades dos colegas ao lado para

evitar acidentes!

• Terminados os trabalhos práticos:

• Esterilizar alças e fios de platina;

• Verificar se as torneiras de água e gás estão fechadas;

• Desligar lâmpadas e microscópios;

• Limpar microscópios;

• Tirar o avental e guardar;

• Lavar cuidadosamente as mãos com água e sabão ou anti-

séptico.


• Sugestões de Passeios:

• Museu de Microbiologia do Instituto Butantan

• Catavento Cultural

Fundamentos e Técnicas de

Microbiologia

REVISÃO

Fonte: Tortora et al, 2012.

Reino Monera - Bactérias e Arquibactérias:

1. Procariontes (Seu DNA não esta envolvido por uma

membrana e não está associado a Histonas, não

possuem organelas revestidas por membrana, suas

paredes celulares quase sempre contem o

polissacarídeo complexo peptideoglicano, se

repoduzem por fissão binária).

2. Unicelulares.

3. Tamanho da bactéria: 0,2 a 2,0 µm de diâmetro e 2 a 8

µm de comprimento.

4. Morfologia bacteriana: coco, bacilo e espiral.

5. Monomórficas ou pleomórficas Rhizobium e a

Corynebacterium.

Cocos:

• Esféricos ou ovais;

• Cocos que

permanecem unidos

após a divisão:

• Diplococos

• Tétrades

• Estreptococos

• Estafilococos

• Sarcinas Fonte: Tortora et al, 2012.

Bacilo ou Bastonete (em forma de bastão):

• Possui forma de

bastão;

• O agrupamento é

menos frequente, na

maioria das vezes são

encontrados em forma de

bastonete;

• Cocobacilo, são ovais

parecidos com os cocos.

•Bacilo x Bacillus spp


Espirais:

• Possui uma ou mais

curvaturas

• Ocorrem,

predominantemente, como

células isoladas.

• Vibriões (em forma de

vírgula).

• Espirilo (forma helicoidal,

como um saca-rolha, com

o corpo rígido).

• Espiroqueta (forma

helicoidal, com o corpo

flexível. Fonte: Tortora et al, 2012.

Estrutura Bacteriana:

• Estruturas externas à parede celular:

• Glicocálice: Revestimento de açúcar. Funções:

proteção, fixação e comunicação.

• Flagelos: apêndices filamentosos. Função: Locomoção.

• Filamentos Axiais: exclusivo das espiroquetas.

Função: Locomoção.

• Fímbrias e Pili: presentes em bactérias gram negativas.

São como pelos. Funções: Transferência de DNA,

fixação e mobilidade.

Parede Celular:

o Estrutura semirrígida, circunda a bactéria, é

externa a membrana plasmática e é

responsável por manter a sua forma.

o Protege-a contra as condições desfavoráveis do

meio ambiente e da ruptura da membrana

plasmática (pressão osmótica).

o Importância médica – características

antigênicas.

Peptideoglicana:

• Composição: Associação de dissacarídeos com

polipeptídeos.

• Alguns antibióticos agem alterando a constituição

química da parede bacteriana, provocando a lise celular.

• Diferenças estruturais nessa macromolécula irão

colaborar na distinção de bactérias entre gram positivas

e gram negativas.

• Bactérias Gram- Positivas:

• A Parede celular de bactérias Gram- positivas possuem

MUITAS camadas de peptideoglicana, formando uma

estrutura espessa e rígida.

• Associada sua estrutura possuem ácidos tecóicos

(álcool+fosfato).

• Bactérias Gram- Negativas:

• A Parede celular das bactérias gram-negativas é

constituída por uma ou poucas camadas de

peptideoglicana.

• É circundada por uma membrana externa constuída de

lipopolissacarídeos

• São mais suscetíveis ao rompimento mecânico.

• Paredes celulares atípicas

• Álcool-ácido-resistentes:

• Gênero Mycobacterium

• Ácido micólico + fina camada de

peptídeoglicanas.

• Previne entrada de corantes.

• Mycoplasma:

• Não possui parede celular

Fonte: www.infoescola.com.br

Estruturas internas a parede celular:

• Membrana Plasmática

• Citoplasma

• Nucleóide

• Ribossomos

• Inclusões

Endoesporos:

• Clostridium e Bacillus.

• Quando as condições ambientais são desfavoráveis,

alguns gêneros formam uma estrutura de “repouso”,

altamente resistente.

Metabolismo Bacteriano:

• Metabolismo: reações químicas (degradam ou

constroem substâncias) que liberam ou requerem

energia (balanceamento energético).

• ATP: a bactéria necessita de ATP (energia) para

transporte de substâncias através da membrana

plasmática, movimento flagelar, manutenção dos

componentes celulares.

• Nutrição bacteriana: quase que a totalidade das

bactérias de interesse clínico são quimio-heterotróficas,

ou seja utilizam compostos orgânicos como fonte de

energia e carbono.

Respiração celular: processo de obtenção do ATP:

• Aeróbia: processo biológico de obtenção de energia,

onde há degradação de moléculas orgânicas com

participação de O2.

• Anaeróbia: não utiliza O2 na obtenção de energia e sim

outros compostos inorgânicos como o nitrito, sulfato e

carbonato. Possui um rendimento energético menor.

Fermentação:

• Libera energia a partir de açucares ou outras moléculas

orgânicas, como aminoácidos.

• Não utiliza O2, ciclo de Krebs e Cadeia de elétrons.

• Produz pouco ATP, a maioria da glicose permanece nos

produtos finais como o ácido lático ou etanol.

• Tempo de Geração:

É o tempo necessário para

uma célula se dividir e sua

população duplicar.

Esse tempo varia entre os

organismos e as condições

ambientais.

E. coli: 20 minutos

Maioria das bactérias de 1

a 3 horas.

Algumas podem chegar a

mais de 24h por geração.

Fonte:Tortora et al, 2012

Crescimento Bacteriano

• Número de células e não o tamanho das células;

• Colônias.

• Entender o crescimento bacteriano nos ajuda a

compreender métodos para contê-lo.

• Divisão Bacteriana:

• Fissão Binária (Não é Mitose!)

• Brotamento (Menos comum)

Características Gerais:

• Contêm um único tipo de ácido nucleico, DNA ou RNA.

• Contêm um invólucro proteico (às vezes recoberto por

um envelope de lipídeos, proteínas e carboidratos) que

envolve o ácido nucleico.

• Multiplicam-se no interior de células vivas utilizando a

maquinaria de síntese celular.

• Induzem a síntese de estruturas especializadas na

transferência do ácido nucleico viral para outras células.

Tamanho dos Vírus. Fonte: Tortora et al, 2012.

Estrutura Viral:

• Cápside

• Ácidos Nucléicos

• Envelope lipídico

Morfologia Viral:

• Helicoidais

• Icosaédrico

• Vírus envelopado

• Vírus Complexos

Multiplicação Viral:

• Adsorção: Os sítios de adsorção são as glicoproteínas da

membrana plasmática da célula do hospedeiro.

• Penetração: Vírus não envelopado: pinocitose e vírus envelopado

por fusão (envelope lipídico se funde a membrana plasmática da

célula hospedeira).

• Desnudamento: os vírus são “desmontados”, o capsídeo proteico

é digerido por enzimas no citoplasma da célula hospedeira e o

material genético viral segue para o núcleo da célula.

• Biossíntese

• Maturação: montagem das novas partículas virais.

• Liberação: Liberação dos novos vírus para o meio com morte

celular ou não.

Vírus DNA: Replicação do DNA viral e transcrição em RNA

para produção das proteínas do capsídeo.

Vírus RNA: Alguns vírus: produção de fita de RNA complementar

e outros como o HIV (retrovírus) produz enzima transcriptase

reversa que produz DNA a partir de uma fita simples de RNA.

Características:

• Reino Fungi;

• Célula: Eucariontes - Parede celular: quitina (polissacarídeo);

• Reprodução Sexuada e Assexuada

• Saprófagos (decompositores), parasitas ou associações

mutualísticas (líquens);

• Heterotróficos (não possuem clorofila);

• Liberam enzimas digestivas, que clivam as moléculas fora do

organismo e depois estas são absorvidas por ele.

Características Nutricionais:

• pH 5

• Aeróbicos/ Leveduras são anaeróbicos facultativos

• Crescem em concentrações altas de açúcar e sal

• Abundância de água ou não (mais resistentes a pressão

osmótica)

Fungos x Bactérias

Bactérias Fungos

Célula Procarionte Eucarionte

Parede celular Peptídeoglicana Quitina, principalmente

Esporos Endoseporos Esporos (reprodução)

Metabolismo Heterotróficos ou

autotróficos

Heterotróficos

Características:

• Leveduras (fungos unicelulares)

• Fungos filamentosos (Bolores - multicelulares):

• Fungos Carnosos (Cogumelos – Multicelulares):

Leveduras:

• Fungos unicelulares

• Não filamentosos

• Reprodução assexuada por brotamento (pseudo-hifas)

ou fissão binária.

• Anaeróbios facultativos;

• Na ausência de oxigênio elas fermentam

(Saccharomyces ssp – produção de etanol);

• Candida albicans (levedura de importância médica).

Fungos Filamentosos

• Bolores

• Multicelulares

• Hifas (Septadas e não septadas)

• Micélio (Vegetativo e de Reprodução)

• Reprodução sexuada e assexuada.

Fonte: Tortora, et al (2012).

Fungos Dimórficos:

• Importância médica (patogênicos)

• 37° C – Leveduras

• 25° C – Filamentosos

• Exemplo: Histoplasmose

Micoses:

• Micoses superficiais (pelos, cabelo e camadas mais

superficiais da pele)

• Micoses subcutâneas (tecido subcutâneo)

• Micoses sistêmicas (órgãos)

• Referências Bibliográficas:

• Tortora, GJ, Funke B.R., Case, C.L. Microbiologia. 10a

edição. Porto Alegre: Artmed; 2012.

aula 1 fundamentos e técnicas de microbiologia

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