aula 1 cromossomos [modo de compatibilidade] - universidade federal de … · 2010-09-08 · (falta...
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Sibele [email protected]
CromossomosCromossomos
O cromossomo éconstituído por uma longafita dupla de DNA. Ocromossomo é composto deproteínas chamadashistonas, envolvidas pelamolécula de DNA.
CromossomosCromossomos
centrômero
Braço curto (p)
Braço longo (q)
Telômero (TTAGGG)n
CromossomosCromossomos-- EstruturaEstrutura
•Proteção das extremidades dos cromossomos
de exonucleases e ligases.
•Previne recombinações e fusão dos
cromossomos.
•Regula reconhecimento e separação do
cromossomo mitótico.
•Permite a completa replicação do DNA linear.
Propriedades dos Propriedades dos TelômerosTelômeros
Centenas a milhares
TELOMERASETELOMERASE
• Células somáticas Telomerase
• Encurtamento do tamanho dos telómeros
• Activação dos sistemas de senescência e apoptose celular
• MORTE
TelômeroTelômero
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- No desenvolvimento embrionário
- Na falta de hormônios estimulatórios
- Na renovação de células lábeis
- Apoptose mediada por linfócitos T
citotóxico, na imunidade celular
- Danos no DNA
APOPTOSEAPOPTOSE Ovelha Ovelha DollyDolly
• Telomerase
(falta /mutação da proteína p53)
• Cancro
• Imortalidade (células somáticas)
ImortalizaçãoImortalização
• Células cancerígenas Telomerase
• Manutenção do tamanho dos telómeros
• Sistemas de senescência e apoptose celular não são activados
• Células imortais
ImortalizaçãoImortalização
Heterocromatina: zonas onde a cromatina se encontraaltamente condensada.
-constitutiva- centrômero-facultativa
Eucromatina: regiões com menor grau de condensação que,como se encontram menos enroladas.
Complexo de DNA e proteínas (que juntas denomina-se cromossomo )
CROMATINACROMATINA
As histonas H2A, H2B, H3 e H4 formam grupos de 8 proteínas (2 de cada)
que se associam ao DNA em intervalos de 200 pares de bases
(nucleossoma).
HistonasHistonas
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EmpacotamentoEmpacotamento
1. O primeiro envolve o empacotamento do DNA comouma espiral em nucleossomos de aproximadamentede 10nm de diâmetro. Este passo envolve umoctâmero de histonas(b).2. O segundo envolve a estrutura de solenóide, umsegundo nível de epiralamento, produzindo uma fibrade 30nm (c).3. O terceiro são os "loops" de solenóides, ligados aum esqueleto central protéico. Esta estrutura temaproximadamente 300nm de diâmetro (d).4. O quarto são "loops" do esqueleto protéico,formando uma estrutura gigante, super enrolada,com 700nm (e).5. Por fim, na sua máxima condensação, a cromátidecromossômica conta com cerca de 1400nm dediâmetro (f).
Tipos
A) TelocêntricoB) AcrocêntricoC) SubmetacêntricoD) Metacêntrico
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A) Telocêntrico: O centrômero está localizado na regiãoterminal do cromossomo, possui braço único.
B) Acrocêntrico: O centrômero está bem afastado docentro do cromossomo, próximo a uma das extremidades,resultando em um braço bem maior que o outro; Relaçãode 3:1 a 10:1.
C) Submetacêntrico: O centrômero está um poucoafastado do meio do cromossomo.
D) Metacêntrico: O centrômero se localiza no centro docromossomo, sendo os braços do mesmo tamanho. Osdois braços tem relação de comprimento 1:1 até 2,5:1.
Espécien de
cromossomosEspécie
n de
cromossomos
Drosófila 8 Humano 46
Centeio 14 Macaco 48
Cobaia 16 Carneiro 54
Rôla 16 Cavalo 64
Caracol 24 Galo 78
Minhoca 32 Carpa 104
Porco 40 Borboleta ~380
Trigo 42 Samambaia ~1200
Números de cromossomos em diferentes espécies
Utilizar cromossomos na fase mitóticaTecidos com alta divisão celular
MicrotécnicaBandeamento cromossômicoCitogenética molecular - FISH
Metáfase
CARIÓTIPO
CROMOSSOMOS HUMANOSCROMOSSOMOS HUMANOSN= 46N= 46
É o conjunto cromossômico ou a constantecromossômica diplóide (2n) de uma espécie.
A representação do cariótipo pode ser um cariograma(imagem dos cromossomos) ou um idiograma (esquemados cromossomos).
Cromossomos autossomosCromossomos sexuais
CARIÓTIPOCARIÓTIPO
- coleta de sangue venoso periférico
- temperatura ambiente, (sedimentação das hemácias )
- coloca-se as células em meio de cultura com fito-hemaglutinina
(grande número de células em divisão).
- adiciona-se colchicina que impede a formação do fuso (divisão da
célula)
- coloca-se a cultura em solução hipotônica para inchar as células.
- fixa-se o material em lâmina
- cora-se.
11--Cultura de leucócitosCultura de leucócitos-- MicrotécnicaMicrotécnica
Análise dos Cromossomos HumanosAnálise dos Cromossomos Humanos
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Cariótipo Humano Normal
Masculino (15 cromossomos no grupo C e 5 cromossomos no grupo G) -
Cariótipo Humano Normal
Feminino - (16 cromossomos no grupo C e 4 cromossomos no grupo G)
2-Bandeamento
No bandeamento G (tripsina + Giemsa) e R (reverso) utiliza-se o corante Giemsa, após pré-tratamento das preparaçõescom soluções proteolíticas (tripsina) Aparecem bandascoradas ao longo de todo o cromossomo.
No bandeamento C (hidróxido de sódio + Giemsa) utiliza-seo corante Giemsa, após pré-tratamento das preparaçõescom soluções de pH básico. - Aparecem bandas coradas nasregiões de heterocromatina constitutiva. Centrômeros
Bandeamento R - Os cromossomos recebem pré-tratamento com calor antes da coloração Giemsa . Nessecaso, as bandas claras e escuras resultantes (bandas R) sãoo inverso das produzidas por bandeamento G ou Q.
No bandeamento Q (quinacrina) utiliza-se o corante fluorescenteQuinacrina ou seus derivados, aparecem bandas de diferentesintensidades luminosas ao longo dos cromossomos.
Bandeamento T- marcam as regiões teloméricas doscromossomos.
Bandeamento NOR – coram as constrições secundarias. Grupos D e E.
Baixa Resolução – 400 bandas (regiões e bandas)
Alta resolução – 850 bandas (regiões, bandas e sub-bandas)
Altíssima resolução – 2.000 bandas (regiões, bandas, sub-bandas
e sub-sub-bandas)
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bandas coradas nas regiões de heterocromatina const itutiva
Bandas C (hidróxido de sódio + Bandas C (hidróxido de sódio + GiemsaGiemsa)) Bandas Q (Bandas Q (quinacrinaquinacrina))bandas de diferentes intensidades luminosas
Bandas G (Bandas G (tripsina + tripsina + GiemsaGiemsa))
bandas coradas ao longo de todo o cromossomo
Bandas R (calor + Bandas R (calor + GiemsaGiemsa))
CariogramaCariograma--IdiogramaIdiograma3- Hibridação In-Situ por Fluorescência (FISH)
- permite a localização direta através da utilização defluorocromos específicos;
- permite detectar rápida e inequivocamente rearranjoscromossômicos complexos e simples e;
- pode-se caracterizar muitas anormalidadescromossômicas que não eram detectadas pelas técnicas debandeamento tradicionais.
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(FISH)
•Suspeita de microdeleções cromossômicas associadas asíndromes genéticas,
- Síndrome de Down (trissomia do cromossomo 21); - Síndrome de Patau (trissomia do cromossomo 13); - Síndrome de Edwards (trissomia do cromossomo 18); - Síndrome de Turner (monossomia do cromossomo X); - Síndrome de Klinefelter (47,XXY); - Síndrome Cri-du-chat (deleção 5p); -Síndrome de Klinefelter (47, XXY); -Síndrome 47, XYY;-Trissomia do X (47, XXX);- Síndrome de Turner (45, X e variantes); - Outras alterações cromossômicas raras.
Aplicações:
Cromatina sexual do XCromatina sexual do X
-Mulheres com crescimento retardado-Homens com problema de fertilidade-Gestantes
Um dos cromossomos X permanece espiraladoHipótese de Lyon- geneticamente inativo
inativação ocorre cedo (15 a 16º dia)inativação e incompletainativação por metilação
N. C BAAR= n°X-1
Estudos específicos dos cromossomos X e YEstudos específicos dos cromossomos X e Y
Cromatina Sexual
Grupo Características Pares
A Grandes / Metacêntricos ou submetacêntricos 1 a 3
B Grandes / Submetacêntricos. 4, 5
C Médios / Submetacêntricos. 6 a 12 + X
D Médios / Acrocêntricos. 13 a 15
E Pequenos / Metacêntricos ou submetacêntricos. 16 a 18
F Muito pequenos / Metacêntricos. 19, 20
G Muito pequenos / Acrocêntricos. 21, 22 + Y
GRUPOS
Cariótipo Humano
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NOMENCLATURANOMENCLATURA
•Padronização internacional da nomenclatura de
cromossomos
•São identificados pelo seu tamanho, pela posição do
centrômero e padrão de Bandas
•São arrumados em pares de homólogos, em ordem
decrescente de tamanho.
Cariótipo Humano� A – G Grupos cromossômicos
� 1 - 22 Números de autossomos
� X, Y Cromossomos sexuais
� / Separar as linhagens celulares
� + ou - Indica se o cromossomo foi adicionado ou perdido; indica ganho ou perda no
braço cromossômico
� ? Identificação questionável do cromossomo ou da estrutura cromossômica
� * Indica que o cromossomo ou a estrutura deve estar explicada no rodapé
� ace Acêntrico
Nomenclatura
� cen centrômero
� dic cromossomo dicêntrico
� end endoreduplicação
� h heterocromatina
� i isocromossomo
� inv inversão
� Inv(p+q-) Inv(q+p-) inversão
pericêntrica
� mar marcador
� Mat Origem materna
� pat Origem paterna
� p braço curto do cromossomo
� q braço longo do cromossomo
� r cromossomo em anel
� s satélite
� t translocação
� tri tricêntrico
Nomenclatura
� del deleção
� der cromossomo derivativo
� dup duplicação
� ins inserção
� rcp translocação recíproca
� rec translocação recombinante
� Rob translocação robertsoniana
� tan translocação em tandem
� : quebra sem junção dos fragmentos
� :: quebra e junção
� de-para
Nomenclatura
1p22.2
Cromossomo: 1
Braço: Curto
Região: 2
Banda: 2
Sub-banda : 2