UNIVERSIDADE FEDERAL DE GOIS ESCOLA DE VETERINRIA E ZOOTECNIA

PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM CINCIA ANIMAL

APLICAO DOS EXAMES COMPLEMENTARES NO DIAGNSTICO DA INSUFICINCIA RENAL CRNICA EM CES

Saura Nayane de Souza Orientadora: Maria Clorinda Soares Fioravanti

GOINIA 2011

ii

SAURA NAYANE DE SOUZA

APLICAO DOS EXAMES COMPLEMENTARES NO DIAGNSTICO DA INSUFICINCIA RENAL CRNICA EM CES

Dissertao apresentada para a obteno do grau de Mestre em Cincia Animal junto

Escola de Veterinria e Zootecnia da Universidade Federal de Gois

rea de concentrao: Patologia, Clnica e Cirurgia Animal

Linha de Pesquisa: Alteraes clnicas, metablicas e toxmicas dos

animais e meios auxiliares de diagnstico

Orientadora: Prof Dr Maria Clorinda Soares Fioravanti UFG

Comit de Orientao: Prof. Dr. Adilson Donizeti Damasceno- UFG Prof Dr Naida Cristina Borges UFG

GOINIA

2011

ii

Dados Internacionais de Catalogao na Publicao (CIP)

GPT/BC/UFG

S729a

Souza, Saura Nayane.

Aplicao dos exames complementares no diagnstico da

insuficincia renal crnica em ces [manuscrito] / Saura Nayane de Souza.

- 2011.

72 f. : il.

Orientadora: Prof. Dr. Maria Clorinda Soares Fiorvanti; Co-

orientador: Prof. Dr. Adilson Donizeti Damasceno, Prof Dr Naida

Cristina Borges.

Dissertao (Mestrado) Universidade Federal de Gois, Escola de

Veterinria e Zootecnia, 2011.

Bibliografia.

1. Ces Nefropatia. 2. Ces Diagnstico por imagem - Nefropatia.

I. Ttulo.

CDU: 599.742.12:616.61

iii

iv

Dedico s minhas irms

Juliana e Priscila e ao meu

namorado Renato pela

amizade, apoio e

compreenso aos quais

sempre poderei contar.

v

AGRADECIMENTOS

Agradeo a Deus por conceder que eu esteja aqui evidenciando este

momento to feliz da minha vida.

minha orientadora, professora Maria Clorinda Soares Fioravanti, por

sempre ter guiado meus passos desde a graduao e pelo constante aprendizado,

acrescentando na minha formao profissional e pessoal.

Aos meus co-orientadores, professores Adilson Donizeti Damasceno e

Naida Cristina Borges pela imensurvel colaborao nas correes finais deste

trabalho.

s professoras Maria da Conceio, da Escola de Veterinria e

Zootecnia da UFG, e Suely Nunes Esteves Beloni, da Universidade Estadual de

Londrina, pela disponibilidade em participarem como membros da banca

examinadora desta dissertao.

Aos colegas do Programa de Ps-Graduao em Cincia Animal Andria

de Melo Bogoevich, Andra Cruvinel Rocha Silva, Liliane Aparecida Tanus Benatti,

Juliana Job Serdio, Ana Paula Arajo Costa, Thas Domingos Meneses e Suzana

Akemi Tsuruta pela grande boa vontade demonstrada em auxiliar nas colheitas e

nas anlises laboratoriais.

Aos colegas veterinrios do Hospital Veterinrio da UFG Juliana

Aparecida Silva, ngela Moni Fonseca, Fernanda Maria Ozelim de Pdua, Nathlia

Bragato, Vernica Christiane de Melo Silva e Apstolo Ferreira Martins pela imensa

colaborao na realizao deste trabalho.

Ao funcionrio do Laboratrio de Patologia Clnica do HV/UFG, e Wesley

Francisco Neves pelos ensinamentos, contribuindo para a minha formao.

Aos alunos da graduao Neryssa Alencar de Oliveira, Daniela Cardoso,

Romrio Gonalves Vaz Junior, Kamilla Malta Laudares, Helton Freires Oliveira e

Weyguer Cirilo Fernandes pelo auxlio na execuo do projeto.

Aos amigos Mayara Fernanda Maggioli, Mariana Brito Lobo, Tales Dias

Prado, Lorena Fernandes dos Reis, Andra Cintra Bastos Torres, Adriana Reis B.

Silva, Lucas Jacomini Abud e Gustavo Lage Costa pela amizade e

companheirismo.

CAPES pela bolsa concedida.

vi

A todos os colegas e funcionrios da Escola de Veterinria e Zootecnia

da UFG.

A todos que contriburam e acreditaram nesse projeto.

Meus sinceros agradecimentos.

vii

Animais so anjos disfarados,

mandados terra por Deus para

mostrar ao homem o que

fidelidade.

Arthur Tvola

O que vale na vida no o ponto

de partida e sim a caminhada.

Caminhando e semeando, no fim

ters o que colher.

Cora Coralina

viii

SUMRIO

1 INTRODUO................................................................................................ 01

2 REVISO DA LITERATURA.......................................................................... 03

2.1 Morfologia do nfron.................................................................................... 03

2.2 Filtrao glomerular..................................................................................... 05

2.3 Etiopatogenia da doena glomerular........................................................... 07

2.3.1 Proteinria................................................................................................ 09

2.3.2 Hipertenso sistmica.............................................................................. 11

2.3.3 Sndrome nefrtica................................................................................... 12

2.4 Diagnstico da insuficincia renal crnica................................................... 13

2.5 Justificativa.................................................................................................. 17

3 OBJETIVOS.................................................................................................... 18

4 MATERIAL E MTODOS............................................................................... 19

4.1 Planejamento do estudo.............................................................................. 19

4.2 Anamnese e exame clnico.......................................................................... 20

4.3 Critrios de incluso no grupo DRC............................................................ 21

4.4 Avaliaes laboratoriais............................................................................... 21

4.5 Ultrassonografia........................................................................................... 25

4.6 Presso arterial sistmica............................................................................ 26

4.7 Anlise estatstica........................................................................................ 26

5 RESULTADOS E DISCUSSO...................................................................... 27

5.1. Avaliao da funo e doena renal........................................................... 29

5.1.1 Perfil hematolgico................................................................................... 29

5.1.2 Fibrinognio.............................................................................................. 32

5.1.3 Perfil bioqumico sanguneo..................................................................... 33

5.1.4 Perfil bioqumico urinrio.......................................................................... 39

5.1.5 Urinlise.................................................................................................... 43

5.2 Ultrassonografia........................................................................................... 48

5.3 Presso sangunea...................................................................................... 51

5.4 Matriz de distncias euclidianas.................................................................. 53

6 CONCLUSES............................................................................................... 55

REFERNCIAS................................................................................................. 56

ANEXOS............................................................................................................ 69

ix

LISTA DE FIGURAS

FIGURA 1 Fotomicrografia eletrnica de transmisso da parede capilar

glomerular de um co normal. MB: membrana basal; LC: lmen

capilar; E: clulas endoteliais; P: podcitos; PM: podcitos

maiores; EU: espao urinrio......................................................

03

FIGURA 2 Fotomicrografia de crtex renal. P: tbulos contorcidos

proximais; D: tbulos contorcidos distais; G: glomrulos............

04

FIGURA 3 Esquema representativo dos mecanismos de leso glomerular r

imune que levam proteinria....................................................

09

FIGURA 4 Patognese da perda de nfrons na doena renal

progressiva..................................................................................

11

FIGURA 5 Procedimento de mensurao de presso arterial (A), de

colheita de urina por cistocentese (B) e de tosquia para

realizao de ultrassonografia (C), Goinia, 2011.....................

20

FIGURA 6 Animal sadio pertencente ao grupo C1 em bom escore corporal

(A) e animal pertencente ao grupo DRC apresentando caquexia

(B), Goinia, 2011........................................................

20

FIGURA 7 ndice de proteinria urinria obtido utilizando o escore de

gravidade da leso renal observada no exame de urina de rotina,

nos grupos de ces saudveis (C1, C2 e C3) e com doena renal

(DRC)...................................................................

45

FIGURA 8 Mdia dos escores de gravidade da leso renal estabelecida

pelo somatrio das alteraes detectadas no exame de urina

de rotina, Goinia, 2011.............................................................

47

FIGURA 9 Imagens ultrassonogrficas dos rins de ces do grupo DRC:

corte sagital do rim direito onde se observa a crtex

hiperecognica e alterao na arquitetura renal (A); corte

transversal do rim esquerdo onde se observa a

hiperecogenicidade renal comparada ao bao (B); corte sagital

do rim direito onde nota-se o contorno renal irregular (C) e corte

sagital do rim esquerdo onde se observa-se a perda de

definio do limite crtico-medular (D)........................

51

FIGURA 10 Dendograma UPGMA de similaridade entre grupos, utilizando

a distncia euclidiana padronizada............................................

53

x

LISTA DE QUADROS

QUADRO 1 Doenas associadas s glomerulonefrites em ces.................

08

QUADRO 2 Escore de gravidade da leso renal observada no exame de

urina de rotina...........................................................................

24

QUADRO 3 Parmetros renais em 100 ces hgidos, de raas variadas e

sem distino sexual.................................................................

25

xi

LISTA DE TABELAS

TABELA 1 Frequncia absoluta e relativa dos sinais clnicos observados

em (n=29) ces com insuficincia renal crnica, Goinia,

2011.........................................................................................

28

TABELA 2 Perfil do eritrograma dos ces dos grupos C1, C2, C3 e DRC,

com valores de mdia, desvio-padro (DP), mediana,

coeficiente de variao (CV) e intervalo de confiana (IC),

Goinia, 2011............................................................................

30

TABELA 3 Perfil do leucograma dos ces dos grupos C1, C2, C3 e DRC,

com valores de mdia, desvio-padro (DP), mediana,

coeficiente de variao (CV) e intervalo de confiana (IC),

Goinia, 2011............................................................................

32

TABELA 4 Parmetros de fibrinognio dos ces dos grupos C1, C2, C3 e

DRC com valores de mdia, desvio-padro (DP), mediana,

coeficiente de variao (CV) e intervalo de confiana (IC),

Goinia, 2011............................................................................

33

TABELA 5 Perfil bioqumico sanguneo dos ces dos grupos C1, C2, C3 e

DRC, com valores de mdia, desvio-padro (DP), mediana,

coeficiente de variao (CV) e intervalo de confiana (IC),

Goinia, 2011............................................................................

34

TABELA 6 Parmetros urinrios e de excreo fracional de eletrlitos dos

ces dos grupos C1, C2, C3 e DRC com valores de mdia,

desvio-padro (DP), mediana, coeficiente de variao (CV) e

intervalo de confiana (IC), Goinia, 2011................................

40

TABELA 7 Valores mdios dos pontos obtidos no escore de gravidade da

leso renal baseado no exame de urina nos animais saudveis

(grupos C1, C2, C3) e com doena renal (DRC), Goinia,

2011...........................................................................

46

TABELA 8 Caracterstica ultrassonogrfica observada no parnquima

renal direito e esquerdo dos ces do grupo controle (C1, C2 e

C3), Goinia, 2011....................................................................

49

TABELA 9 Caracterstica ultrassonogrfica observada no parnquima

renal direito e esquerdo dos ces do grupo DRC, Goinia,

2011..........................................................................................

49

TABELA 10 Caracterstica ultrassonogrfica observada na vescula urinria

dos ces do grupo controle (C1, C2 e C3) e do grupo DRC,

Goinia, 2011............................................................................

50

TABELA 11 Parmetros de presso arterial sistlica dos ces dos grupos

C1, C2, C3 e DRC com valores de mdia, desvio-padro (DP),

mediana, coeficiente de variao (CV) e intervalo de confiana

(IC), Goinia, 2011....................................................................

52

xii

RESUMO

A manuteno do paciente insuficiente renal crnico um grande desafio para os clnicos veterinrios. O diagnstico da insuficincia renal crnica em estgios iniciais possibilita aumentar a taxa de sobrevida do animal, pois permite instituir o protocolo de tratamento adequado para cada tipo de paciente. Este trabalho teve como objetivo avaliar as diferentes tcnicas de diagnstico na avaliao da funo e da integridade renal. Foram estudados 61 ces sadios, machos e fmeas de variadas raas e 29 ces doentes renais crnicos. Os ces sadios foram subdivididos em trs subgrupos. O subgrupo C1, compreendeu dez animais com idades variando entre seis e 12 meses para ces de pequeno e mdio porte, e seis e 18 meses para ces de grande porte; o subgrupo C2 compreendeu 40 animais entre 12 meses e oito anos para ces de pequeno e mdio porte e 18 meses e sete anos para animais de grande porte; o subgrupo C3 foi composto por 11 animais com idade acima de oito anos para animais de pequeno e mdio porte, e acima de sete anos para animais de grande porte. A avaliao dos animais constou de anamnese; exame clnico; ultrassonografia; mensurao da presso arterial e exames laboratoriais: hemograma, fibrinognio, urinlise, avaliao srica de creatinina, uria, protena total, albumina, globulina, colesterol, clcio, fsforo, sdio e potssio; avaliao urinria de gama glutamil transferase (GGT) e relao protena/creatinina; excreo fracional de sdio e potssio. Constatou-se que os sinais clnicos mais freqentes no grupo DRC foram poliria/polidipsia, mese, emagrecimento e apatia. Os ces com DRC apresentaram anemia normoctica normocrmica, elevao srica de creatinina, uria e fsforo; reduo de albumina; aumento da relao PU/CU; da GGT urinria e da excreo fracionada de sdio e potssio, diminuio da densidade urinria e diminuio da definio do limite crtico-medular.

Palavras-chave: Caninos, diagnstico por imagem, funo renal, nefropatia.

xiii

ABSTRACT

The patient with chronic renal failure and its medical support are a great challenge for veterinarians. The diagnosis of chronic renal failure in early stages helps to increase the survival rate of the animal, because it allows establishing the appropriate treatment protocol for each type of patient. The objective of this study was to evaluate the different diagnostic techniques in the evaluation of renal function and integrity. We studied 61 healthy dogs, males and females of various breeds and 29 dogs with chronic renal disease (CRD group). The healthy dogs were divided into 3 groups. The C1 group had 10 animals aged 6 to 12 months, small and medium-sized and aged 6 to 18 months for large dogs, the C2 group had 40 animals aged 12 months to 8 years, small and medium-sized and 18 months to 7 years for large animals, the C3 group had 11 animals over 8 years old, small and medium-sized, and over 7 years old for large animals. The evaluation consisted of anamnesis, clinical examination, ultrasound, blood pressure measurement and laboratory tests: blood count, fibrinogen, urinalysis, assessment of serum creatinine, urea, total protein, albumin, globulin, cholesterol, calcium, phosphorus, sodium and potassium , evaluation of urinary gamma-glutamyl transferase (GGT) and ratio of protein/creatinine; fractional excretion of sodium and potassium. It was found that the most common clinical signs in the CRD group were polyuria/polydipsia, vomiting, weight loss and apathy. Dogs with CRD showed normocytic normochromic anemia, elevated serum creatinine, urea and phosphorus; reduction in albumin, increase of the UP/UC, urinary GGT, and fractional excretion of sodium and potassium; decreased urine density and decreased definition of the corticomedullary boundary.

Keywords: Canine, image diagnosis, nephropathy, renal function.

1

1 INTRODUO

A doena renal crnica que resulta em insuficincia renal crnica uma

das principais causas de morbidade e mortalidade em ces. Diversos estudos

realizados em animais que apresentam doena renal apontam para a importncia

de identificar, compreender e controlar os processos que desempenham um papel

na progresso desde o incio at a fase final da insuficincia renal.

A insuficincia renal ocorre quando trs quartos dos nfrons dos dois

rins se tornam afuncionais. Na insuficincia renal crnica (IRC) essa perda de

funo irreversvel. As variaes morfolgicas variam desde atrofia, substituio

por tecido fibroso cicatricial at hipertrofia. A IRC progride em semanas, meses e

anos e geralmente a causa difcil de ser determinada, porm sabe-se que

glomerulopatias primrias esto entre as maiores causas da IRC nos caninos

(WARE, 2006a).

NOTOMI et al. (2006) observaram que a maioria dos ces com IRC

possua idade superior a sete anos, com maior prevalncia do Cocker Spaniel entre

as raas definidas, tanto entre os jovens quanto os animais com idade mais

avanada. Entretanto, a doena tambm acomete adultos jovens (idade inferior a

trs anos) e pode ter origem congnita, hereditria e adquirida (RUBIN, 1997;

POLZIN et al., 2005).

O conjunto dos eventos clnicos varia com a progresso da doena

subjacente. Alguns ces nas fases iniciais da IRC podem apresentar-se

assintomticos (RUBIN, 1997). NOTOMI et al. (2006) em estudo retrospectivo de

casos de IRC em ces relataram como principais manifestaes clnicas a disorexia

(83%), mese (70%), apatia (70%), poliria/polidipsia (52%) e emagrecimento

progressivo (38%).

As alteraes nos resultados de exames laboratoriais mais comumente

encontradas em ces com IRC incluem azotemia, hiperfosfatemia, aumento srico

de paratormnio (PTH), acidose metablica, anemia no-regenerativa,

hipercalcemia ou hipocalcemia, isostenria, proteinria, hipercolesterolemia e

infeco do trato urinrio (KRONFELD,1993).

2

O reconhecimento das principais manifestaes clnicas e das

alteraes laboratoriais permite a definio do estadiamento da doena, bem como

o estabelecimento do prognstico. BROWN (2006) destacou a importncia de

realizar o estadiamento da doena, de modo a permitir a instituio do protocolo de

tratamento mais adequado.

Este estudo teve o propsito de avaliar os diferentes exames

complementares quanto eficincia no diagnstico da insuficincia renal crnica

em ces, considerando que a deteco precoce da doena aumenta as

possibilidades de estabilizao da enfermidade, o aumento da expectativa de vida,

acompanhada da melhoria na qualidade de vida.

3

2 REVISO DA LITERATURA

2.1 Morfologia do nfron

O rim formado por quatro componentes bsicos: glomrulos, tbulos,

interstcio e vasos sanguneos. A unidade funcional do rim, o nfron, composta

por um sistema de glomrulos e tbulos renais. O glomrulo um tufo capilar

revestido por endotlio fenestrado que est intimamente associado com as clulas

epiteliais tubulares. Componentes do glomrulo incluindo o endotlio, membrana

basal e clulas epiteliais especializadas, conhecidas como podcitos, compem a

barreira de filtrao renal (Figura 1). A funo dessa barreira selecionar a

passagem de macromolculas, de acordo com seu tipo, tamanho e carga eltrica

(JONES et al., 1997).

FIGURA 1 - Fotomicrografia eletrnica de transmisso da parede capilar glomerular de um co normal. MB: membrana basal; LC: lmen capilar; E: clulas endoteliais; P: podcitos; PM: podcitos maiores; EU: espao urinrio

Fonte: GRAUER (2007)

4

Os tbulos renais que constituem o nfron so o tbulo contornado

proximal, ala de Henle e tbulo contornado distal (Figura 2). A principal funo dos

tbulos contornados proximais a reabsoro de gua, solutos inorgnicos como

sdio, cloro, bicarbonato, potssio e clcio, e de solutos orgnicos, incluindo

glicose, aminocidos e protenas de baixo peso molecular. A ala de Henle

constituda de uma poro descendente, uma poro curva e uma poro

ascendente. Envolvida por amplo sistema vascular, a ala de Henle responsvel

pela absoro de gua na poro descendente e de sdio, cloreto e uria na poro

ascendente (JONES et al., 1997). A organizao anatmica das alas de Henle e

dos vasos retos proporciona um sistema de contracorrente, cuja funo

estabelecer uma alta osmolalidade nas partes mais internas da medula renal a fim

de concentrar o fluido tubular (REECE, 1996).

FIGURA 2 Fotomicrografia de crtex renal. P: tbulos contorcidos proximais; D: tbulos contorcidos distais; G: glomrulos

Fonte:http://pt.scribd.com/doc/15726548/ImagensHistologia-Basica-9

5

O tbulo contornado distal e os ductos coletores so importantes locais

de secreo de potssio e ons hidrognio (H+) (FINCO, 1995). A mcula densa

marca o incio do tbulo distal. As clulas do msculo liso das arterolas aferentes

e eferentes que fazem contato com a mcula densa so clulas musculares lisas e

especializadas e so denominadas clulas justaglomerulares. Estas clulas tm

grnulos secretrios que contm renina. O espao entre a mcula densa e as

arterolas aferentes e eferentes conhecido como regio mesangial, constituda

pelas clulas mesangiais. Estas clulas possuem atividade fagoctica e secretam

prostaglandinas. O aparelho justaglomerular constitui-se de mcula densa, clulas

justaglomerulares e clulas mesangiais. O aparelho justaglomerular est envolvido

em mecanismos de feedback que participam da regulao do fluxo sanguneo renal

e da taxa de filtrao glomerular (REECE, 1996).

O suprimento sanguneo do nfron fornecido por ramos das artrias

interlobulares. A arterola aferente conduz o sangue ao glomrulo e a arterola

eferente conduz o sangue para fora do glomrulo, redistribuindo-o para os capilares

peritubulares, responsveis pela perfuso dos tbulos do nfron. Os vasos retos

so ramos dos capilares peritubulares e esto associados aos nfrons de alas

longas. Aps a perfuso dos rins, o sangue retorna veia cava caudal pelas veias

renais (REECE, 1996).

2.2 Filtrao glomerular

Os trs processos envolvidos na formao da urina so filtrao

glomerular, reabsoro tubular e secreo tubular. A formao da urina inicia-se

quando o ultrafiltrado passa atravs do endotlio capilar glomerular, membrana

basal e epitlio da cpsula de Bowman para o espao urinrio da cpsula de

Bowman (FINCO, 1995).

Segundo OSBORNE & FLETCHER (1995), a filtrao atravs dos

capilares glomerulares influenciada por diversos fatores, entre eles: perfuso dos

capilares glomerulares; tamanho, configurao e carga das molculas; arquitetura

das paredes dos capilares glomerulares; carga negativa das sialoprotenas que

revestem as clulas endoteliais e epiteliais viscerais facilitando a passagem das

macromolculas catinicas e impedindo a passagem das aninicas; membrana

6

basal glomerular que impede a passagem das macromolculas sem carga; fendas

das membranas que impedem a passagem das molculas menores e clulas

epiteliais viscerais que podem recuperar as protenas que passaram atravs dos

filtros.

As protenas so relativamente excludas do filtrado devido ao seu

grande tamanho molecular. As protenas com peso molecular acima ou igual a

70.000 daltons (Da) no esto presentes no filtrado. A albumina, a menor das

protenas plasmticas, tem peso molecular mdio de 69.000 Da e

aproximadamente 0,3% de sua concentrao plasmtica pode estar presente no

filtrado (REECE, 1996). A permeabilidade seletiva da parede do capilar glomerular

restringe a filtrao da maioria das protenas plasmticas, de acordo com o peso

da protena e, em menor medida, com base na carga da protena e configurao

alostrica. As protenas menores e com carga eltrica positiva ou neutra so mais

facilmente filtradas do que as protenas maiores e com carga eltrica negativa

(GRAUER, 2007). Isso ocorre por causa da repulso eletrosttica pelos stios

aninicos na membrana basal glomerular que so compostos principalmente de

proteoglicanos e por possurem carga negativa repelem as molculas com carga

similar (REECE, 1996).

A reabsoro tubular envolve o transporte de gua e solutos do fluido

tubular para os capilares peritubulares (FINCO, 1995). O restante do filtrado

continua ao longo do tbulo e submetido a vrios mecanismos passivos e ativos

que resultam na reteno ou excreo de solutos e gua. A quantidade de solutos

excretada determinada pela dieta, limiar renal de reabsoro, influncia hormonal,

ou uma combinao desses fatores. Alguns solutos, como a creatinina, so

livremente filtrados e no reabsorvidos, enquanto que outras substncias so

liberadas pelo rim em resposta a uma leso, tais como as enzimas da borda em

escova dos tbulos (WALDROP, 2008).

Aproximadamente 99% das substncias filtradas so reabsorvidas pelos

epitlios tubulares. Quanto reabsoro pelos tbulos, aproximadamente 75%

ocorre nos tbulos proximais, 5% na ala de Henle, 15% no tbulo distal e 4% no

ducto coletor (FINCO, 1995). Como grande parte do filtrado reabsorvida no tbulo

proximal, os processos de transporte esto sujeitos a pequeno grau de controle. Os

hormnios (antidiurtico e aldosterona) atuam nos processos reguladores por meio

7

de suas aes no nfron ajustando a reabsoro e regulando o equilbrio

eletroltico. A secreo tubular transporta substncias dos capilares peritubulares

para o lmen tubular. O transporte renal de potssio ocorre por reabsoro no

tbulo contornado proximal e distal e por secreo no tbulo contornado distal

(REECE, 1996).

2.3 Etiopatogenia da doena glomerular

A doena glomerular ou glomerulonefrite no co a principal causa de

insuficincia renal crnica. A presena de imunocomplexos nas paredes dos

capilares glomerulares uma das maiores causas de doena glomerular (VADEN,

2011). Outras causas incluem anormalidades estruturais, como por exemplo, nefrite

hereditria; anormalidades hemodinmicas como hipertenso intraglomerular e

deposio glomerular de amilide (GRAUER, 2011).

Vrias doenas infecciosas e inflamatrias tm sido associadas

deposio glomerular de complexos imunes (Quadro 1). Em muitos casos a doena

de base ou a fonte de antgeno no identificada. Em estudo retrospectivo com

137 ces que apresentavam doena glomerular, 48% no apresentavam doena

previamente identificada, 20% tinham neoplasia, 12% tinham infeco e 15%

tinham doena inflamatria (COOK & COWGILL, 1996).

Alm das glomerulopatias, dentre outras causas potenciais de IRC em

ces esto a pielonefrite bacteriana, clculo renal, leptospirose, linfoma renal,

doenas hereditrias ou congnitas e isquemia renal (OSBORNE & FLETCHER,

1995; GRAUER, 2005a).

8

QUADRO 1 Doenas associadas s glomerulonefrites em ces

Infecciosas

Adenovrus canino I, Endocardite bacteriana, Brucelose, Dirofilariose,

Erliquiose, Leishmaniose, Piometra, Borreliose, Infeces bacterianas crnicas,

Febre maculosa das montanhas rochosas, Tripanossomase, Sepse.

Inflamatrias

Pancreatite, Lpus eritematoso sistmico e outras doenas imunomediadas,

Prostatite, Hepatite, Doena intestinal inflamatria.

Neoplasia

Leucemia linfoctica, Carcinoma clulas transicionais, Linfoma,

Adenocarcinoma broncognico.

Outras

Idioptica, Familiar (raas Doberman Pinsher, Bernese, Beagle, Samoieda,

Golden Retriever e Cocker Spaniel).

Fonte: GRANT & FORRESTER (2001), GRAUER (2005a)

A diminuio do nmero de nfrons funcionais aumenta o risco de

doena renal progressiva. Na IRC os nfrons so lentamente destrudos de forma

progressiva e irreversvel. Com a perda de nfrons a taxa de filtrao glomerular

(TGF) diminui, resultando em aumento das concentraes de substncias que em

condies normais so eliminadas pela excreo renal (GRAUER, 2006). Os

nfrons intactos hipertrofiam-se na tentativa de aumentar a taxa de filtrao

glomerular, ocorrendo assim hiperfiltrao glomerular, hipertenso intraglomerular

e sistmica e proteinria (GRAUER, 2005a).

9

2.3.1 Proteinria

A proteinria, na ausncia de um sedimento urinrio ativo, o principal

marcador de leso glomerular, podendo indicar a presena de doena renal crnica

antes do incio da azotemia ou a presena de doena renal crnica avanada aps

o aparecimento da azotemia (Figura 3) (COUSER, 1993; VADEN, 2011). A

proteinria ocorre devido ao aumento da filtrao glomerular das protenas

plasmticas associada com hipertenso intraglomerular ou com a presena de

complexos imunes e de inflamao vascular dos capilares glomerulares (GRAUER,

2007).

FIGURA 3 - Esquema representativo dos mecanismos de leso glomerular imune que levam proteinria

Fonte: COUSER (1993)

Evidncias indicam que as protenas podem causar prejuzo para as

clulas mesangiais glomerulares e para as clulas dos tbulos proximais. As

protenas plasmticas que cruzaram a parede capilar glomerular podem acumular-

se dentro do tufo glomerular e estimular a proliferao de clulas mesangiais

(GRAUER, 2005a). A leso das clulas mesangiais tem sido atribuda aos

Clulas

mesangiais

Complemento

Deposio glomerular de anticorpos

Neutrfilos --

Plaquetas

MacrfagosClulas epiteliais

glomerulares

Oxidantes -- Proteases

C5b-9 C5a

Clulas sensibilizadas

Proteinria

InflamatriaNo-inflamatria

10

componentes das lipoprotenas de baixa densidade (LDL) ou aos produtos de sua

oxidao, os quais podem causar aumento da matriz mesangial, atuar como

agentes quimiotticos para moncitos e aumentar a gerao de fatores de

crescimento que estimulam a esclerose (FINCO et al., 1999).

Excessivas quantidades de protenas no filtrado glomerular danificam as

clulas epiteliais tubulares, levando inflamao intersticial, fibrose e morte celular.

Alm disso, protenas do complemento que passam atravs da barreira glomerular,

juntamente com outras protenas sricas, podem tornar-se ativadas na borda em

escova do epitlio tubular e levar a uma cascata de eventos que culminam em leso

celular (TANG et al., 2002).

A leso tubular tambm pode ocorrer por obstruo tubular pelas

protenas. Aumento da permeabilidade glomerular s protenas do plasma permite

o contato de clulas tubulares com transferrina, complemento e lipoprotenas

(FINCO et al., 1999). A transferrina aumenta a absoro do ferro por clulas

epiteliais. Uma vez dentro da clula, ons de ferro catalisam a formao de espcies

de oxignio reativo que podem causar leso peroxidativa (GRAUER, 2005a).

Uma vez que qualquer parte do nfron est irreversivelmente danificada,

todo o nfron torna-se afuncional e substitudo por tecido fibroso (GRAUER et al.,

2000). Os nfrons remanescentes viveis compensam a diminuio do nmero total

de nfrons com aumento da taxa de filtrao glomerular. A hiperfiltrao aliada

proteinria resulta em perdas progressivas de nfrons (Figura 4) (GRAUER,

2005a).

Os danos s clulas tubulares ocorrem por diversos processos. As

clulas tubulares normalmente reabsorvem as protenas do filtrado glomerular por

endocitose. As protenas acumulam-se nos lisossomos e so degradadas em

aminocidos. Em condies de proteinria, os lisossomos se rompem causando

leso enzimtica ao citoplasma (FINCO et al., 1999).

11

FIGURA 4 - Patognese da perda de nfrons na doena renal progressiva

Fonte: GRAUER (2005a)

2.3.2 Hipertenso sistmica

A hipertenso sistmica provavelmente resulta da combinao de

reteno de sdio, cicatrizao dos capilares e das arterolas glomerulares,

diminuio da produo renal de vasodilatadores, alteraes na funo endotelial

com sntese prejudicada do xido ntrico e ativao do sistema renina-angiotensina

(BORTOLOTTO, 2008).

Diferentes valores tm sido propostos para definir a hipertenso em

ces. Presses arteriais com valores acima de 160 ou de 180 mmHg foram

sugeridas (COOK & COWGILL, 1996; FINCO, 2004).

A hipertenso sistmica contribui para a perda progressiva de funo

renal e falncia renal (GRAUER, 2005a). Em estudo modelo, FINCO (2004)

demonstrou uma associao entre hipertenso arterial e leso renal. A proteinria

foi diretamente relacionada extenso do aumento da presso arterial sistmica e

diminuio da taxa de filtrao glomerular em ces.

COWGILL (1991) descreveu que 84% dos ces com doenas

glomerulares eram hipertensos. Outros estudos citaram a prevalncia de

hipertenso sistmica em at 93% dos ces acometidos por doena renal crnica

(BROWN et al., 2007).

12

Os ces e gatos hipertensos e doentes renais crnicos podem

apresentar ausncia de azotemia ou azotemia leve independentemente do estgio

da doena. Ces e gatos azotmicos possuem maior probabilidade de adquirir

leso renal quando a presso sangunea atinge valores maiores que 160 mmHg

(BROWN et al., 2007).

JACOB et. al. (2003) descobriram que o aumento da presso sistmica

em decorrncia de crise urmica diminui a funo renal, estando associada com a

magnitude da proteinria.

As leses oculares so comuns em ces hipertensos. Esta sndrome

denominada retinopatia hipertensiva e as leses comumente encontradas no

exame de fundo de olho so leses de retina, como descolamento retinal

exsudativo, hemorragia, edema multifocal, edema perivascular, tortuosidade

vascular, papiledema, degenerao da retina (sequela tardia), alm de hemorragia

vtrea, hifema e glaucoma (SANSOM & BODEY, 1997).

2.3.3 Sndrome nefrtica

A proteinria persistente pode levar aos sinais clnicos de sndrome

nefrtica, em que se associa ascite, edema, hipoalbuminemia e

hipercolesterolemia (BROWN, 1995; BUEMI et al., 2005). Em adio a esses sinais

clnicos, hipertenso sistmica e hipercoagulabilidade so complicaes frequentes

em ces com sndrome nefrtica (WARE, 2006a).

Em estudo experimental modelo para a sndrome nefrtica canina, CHOI

& LEE (2003) confirmaram o desenvolvimento de glomerulonefrite e sndrome

nefrtica em cinco ces entre nove estudados. Aumento da PU/CU (>1,0),

hipoalbuminemia (240 mg/dl) e edema foram

observados. A albumina foi a protena predominante na urina (48%). Um

decrscimo significante na albumina srica foi acompanhado por aumento das

concentraes da frao -2 globulinas. Todos os ces apresentaram edema na

presena de hipoalbuminemia.

O edema ou ascite ocorrem como resultado da diminuio da presso

onctica plasmtica e reteno de sdio pelo aumento da atividade da aldosterona

13

(BROWN, 1995).H tambm a hiptese de que mecanismos intra-renais

independentes da concentrao circulante de aldosterona contribuam para o

desenvolvimento de reteno de sdio em alguns casos (GRAUER, 2005a).

A hipercolesterolemia atribuda ao aumento na sntese heptica de

protenas e lipoprotenas e reduo no catabolismo das protenas e lipoprotenas

ricas em triglicrides, resultando em acmulo de lipoprotenas ricas em colesterol

que no so facilmente perdidas atravs das paredes dos capilares glomerulares.

Esses transtornos lipdicos e lipoproticos que ocorrem na sndrome nefrtica

produzem um mecanismo de auto manuteno que pode acelerar a progresso da

insuficincia renal crnica (BUEMI et al., 2005).

Secundariamente s vrias anormalidades no sistema de coagulao,

tais como elevao do fibrinognio e dos fatores V e VIII, deficincia de antitrombina

III, hipersensibilidade plaquetria e alterao na fibrinlise, ocorrem

hipercoagulabilidade e tromboembolismo (CAVALCANTE et al, 2006). A

antitrombina III uma protena de baixo peso molecular e facilmente perdida na

urina. Sua funo inibir a cascata de coagulao e sua deficincia a explicao

mais comumente proposta na instituio da doena tromboemblica em pacientes

com glomerulonefrite (GRANT & FORRESTER, 2001). Alm disso, estudos de

agregao plaquetria em ces com sndrome nefrtica demonstraram aumento da

sensibilidade das plaquetas em situaes de hipoproteinemia. Esta

hipersensibilidade plaquetria faz com que a adeso e agregao aumentem em

proporo da magnitude da hipoalbuminemia (GREEN et al., 1985).

2.4 Diagnstico da insuficincia renal crnica

Os indicadores bioqumicos comumente utilizados no diagnstico da IRC

em ces so a uria, creatinina, colesterol, fsforo, assim como a avaliao do

equilbrio cido-bsico, o acompanhamento da presso sangunea, dos ndices

eritrocitrios e dos sinais clnicos da insuficincia renal (KRONFELD, 1994).

As alteraes laboratoriais normalmente encontradas em ces com

insuficincia renal crnica incluem azotemia, hiperfosfatemia, aumento srico de

paratormnio (PTH), acidose metablica, anemia no regenerativa, hipercalcemia

14

ou hipocalcemia, isostenria, proteinria, hipercolesterolemia e infeco do trato

urinrio (POLZIN et al., 2005).

De acordo com o protocolo de tratamento institudo, ces com IRC

apresentam mdia de sobrevida de 594 dias (VADEN, 2007). A IRIS (International

Renal Interest Society) props um sistema de classificao da IRC em

estadiamentos a fim de facilitar o tratamento e acompanhamento do paciente. A

classificao baseia-se na concentrao plasmtica de creatinina e divide-se em

quatro estgios. Aps, os animais so divididos em subcategorias por meio da

mensurao da proteinria e presso arterial (BROWN, 2006):

Estgio I: animal no-azotmico e geralmente no apresentam sinais clnicos;

creatinina < 1,4 mg/dl; presena de proteinria e/ou hipertenso;

Estgio II: animal apresenta azotemia renal discreta, geralmente com ausncia

de sinais clnicos; creatinina entre 1,4 2,0 mg/dl; presena de proteinria e/ou

hipertenso;

Estgio III: animal apresenta azotemia renal moderada devido ao declnio da

taxa de filtrao glomerular e sinais de uremia. creatinina entre 2,1 5,0 mg/dl;

presena de proteinria e/ou hipertenso;

Estgio IV: animal apresenta sinais clnicos referentes ao quadro de sndrome

urmica; creatinina > 5,0; presena de proteinria e/ou hipertenso.

Ces e gatos com IRC so mais susceptveis a infeces do trato

urinrio. A perda da capacidade em concentrar urina ocasiona diminuio da

funo antibacteriana da urina (GRAUER, 2005b). Alm disso, o animal urmico

mais susceptvel a infeces em consequncia de uma resposta inflamatria

alterada e diminuio da imunidade celular (WARE, 2006b).

A anemia no regenerativa resultante de uma combinao de fatores,

incluindo produo diminuda de eritropoetina, menor sobrevida das hemcias,

perda de sangue pelo trato gastrointestinal e efeitos das toxinas urmicas sobre a

eritropoese (WARE, 2006b).

A acidose metablica pode associar-se a doena renal progressiva,

perda de massa muscular e desenvolvimento de osteodistrofia (VADEN, 2007).

NASSAR (2000) observou que 60% dos ces com IRC apresentavam acidose

metablica.

15

A hiperfosfatemia ocorre frequentemente em ces com IRC. LAZARETTI

et al. (2006) determinaram concentraes sricas de paratormnio intacto, fsforo

e clcio em ces com IRC. Observaram correlao entre PTH e fsforo, o que no

ocorreu entre PTH e clcio. O aumento srico na quantidade de PTH est

relacionado hiperfosfatemia, indicando o hiperparatireoidismo secundrio renal.

A hipercalcemia apresentada em ces com aumento srico de PTH, no presente

estudo, sugeriu hiperparatireoidismo tercirio, devido estimulao persistente da

paratireide que secreta PTH mesmo em presena da hipercalcemia, o que pode

ocorrer em estgios avanados da IRC.

A excreo fracionada dos eletrlitos pode ser utilizada na avaliao da

funo tubular, sendo definida como a relao entre o eletrlito em questo e a

eliminao de creatinina (DIBARTOLA, 2000). O valor de excreo fracional de

sdio em ces sadios

16

urina sobre a concentrao de protena em uma nica amostra anulado. A

condio para realizao dessa relao o sedimento urinrio estar inativo. Ces

hgidos apresentam ndice PU/CU menor que 0,5, sendo valores acima de 0,5

indicativos de leso glomerular (GRAUER, 2007).

JACOB et al. (2003) avaliaram a relao protena: creatinina urinria de

45 ces e demonstraram que ces com IRC que apresentaram relao protena:

creatinina >1,0 apresentaram maior risco de desenvolver crise urmica do que ces

com IRC com relao protena: creatinina

17

utilizada para avaliar o tamanho, a posio e o dimetro dos rins. Alm disso,

permite a mensurao qualitativa da funo renal (HEUTER, 2005).

Por meio da utilizao de todas as ferramentas laboratoriais citadas

possvel realizar o diagnstico da doena precocemente. Em estgios iniciais, o

tratamento da IRC se realizado adequadamente estabiliza os sinais clnicos,

melhora a qualidade de vida e consequentemente aumenta a sobrevida do

paciente.

2.5 Justificativa

A longevidade dos animais de companhia tem aumentado com o passar

dos anos. Este fato deve-se ao maior cuidado dos donos em relao sade de

seus animais, principalmente no que se diz respeito alimentao. A

disponibilidade no mercado de ampla variedade de formulaes dietticas

especficas, que variam de acordo com a idade, porte fsico, raa e sexo, permite

um melhor aporte nutricional e qualidade de vida. Assim, doenas que acometem

animais senis esto mais freqentes. A doena renal crnica, com evoluo para

insuficincia renal crnica, uma das principais afeces que acometem ces de

meia idade. Pelo fato de ser uma doena insidiosa, na maioria dos casos, o

diagnstico feito tardiamente. As chances de sucesso no tratamento so

inversamente proporcionais ao estgio em que a doena se encontra.

Com a evoluo das metodologias de diagnstico laboratorial possvel

realizar o diagnstico em estgios iniciais. Diante desses aspectos, o presente

estudo visa colaborar para uma melhor compreenso das alteraes laboratoriais

resultantes de mecanismos que desencadeiam a insuficincia renal por meio de

exames complementares que ainda no fazem parte da rotina clnica na Medicina

Veterinria.

18

3 OBJETIVOS

3.1 Objetivo geral

O presente trabalho teve como objetivo geral avaliar as diferentes

tcnicas de diagnstico como mtodos de avaliao da funo e da integridade

renal em ces sadios e doentes renais crnicos.

3.2 Objetivos especficos

Os objetivos especficos consistiram em avaliar a funo e integridade

renal de ces sadios e com doena renal crnica, por meio da realizao de:

Exame clnico;

Hemograma e fibrinognio;

Bioqumica srica: uria, creatinina, protenas totais, albumina, globulinas,

fsforo, clcio, sdio, potssio, e colesterol;

Bioqumica urinria: sdio, potssio, GGT, protena e creatinina;

Urinlise;

Determinao da relao protena/creatinina urinria;

Ultrassonografia do sistema urinrio;

Determinao da presso arterial sistmica.

19

4 MATERIAL E MTODOS

4.1 Planejamento do estudo

O estudo foi desenvolvido no Hospital Veterinrio da Escola de

Veterinria e Zootecnia da Universidade Federal de Gois (HV-UFG), Goinia. O

estudo foi aprovado pelo Comit de tica em Pesquisa da UFG.

Os animais selecionados para o grupo controle pertenciam a

proprietrios (domiciliados) e a Associao Protetora e Amiga dos Animais

(ASPAAN), que consentiram a colheita das amostras. Os ces de proprietrios

foram atendidos na rotina do HV-UFG, no perodo de 24 meses (agosto 2009 a

junho 2011). Os que pertenciam ao abrigo ASPAAN foram atendidos no local em

junho de 2011. Foram estudados 61 ces sadios, machos e fmeas de variadas

idades e raas e 29 ces doentes renais crnicos (grupo DRC). Os ces sadios

foram subdivididos em trs subgrupos. O subgrupo C1 compreendeu dez animais

com idades variando entre seis e 12 meses para ces de pequeno e mdio porte,

e seis e 18 meses para ces de grande porte; o subgrupo C2 compreendeu 40

animais entre 12 meses e oito anos para ces de pequeno e mdio porte, e 18

meses e sete anos para animais de grande porte e finalmente o subgrupo C3 foi

composto por 11 animais com idade acima de oito anos para animais de pequeno

e mdio porte, e acima de sete anos para animais de grande porte.

A avaliao dos animais constou de anamnese, exame clnico,

ultrassonografia, mensurao da presso arterial e da realizao dos seguintes

exames laboratoriais: hemograma, urinlise, fibrinognio, dosagem srica de

creatinina, uria, protena total, albumina, globulinas, colesterol, clcio, fsforo,

sdio e potssio e determinao da relao protena/creatinina na urina,

determinao da atividade urinria da gama glutamiltransferase (GGT) e excreo

fracional de sdio e de potssio (Figura 5). Foi includo no presente estudo uma

avaliao laboratorial de cada animal estudado em ambos os grupos. Para os

animais doentes foram realizadas demais avaliaes laboratoriais para

acompanhamento clnico e tratamento.

20

FIGURA 5 - Procedimento de mensurao de presso arterial (A), de colheita de urina por cistocentese (B) e de tosquia para realizao de ultrassonografia (C), Goinia, 2011

4.2 Anamnese e exame clnico

Os animais sadios foram selecionados de acordo com os dados da

anamnese e exame clnico obtidos em fichas prprias e dos exames laboratoriais,

excluindo-se enfermidades pr-existentes e doena de origem renal. Aps os

exames de triagem e avaliao clnica realizada por veterinrios do HV-UFG, os

animais doentes foram encaminhados para o estudo e avaliados com anamnese,

exame clnico (Figura 6), ultrassonografia, mensurao da presso arterial e

exames laboratoriais. As amostras foram colhidas no momento que o paciente era

levado ao consultrio. Os animais no estavam em jejum hdrico e alimentar.

FIGURA 6 Animal sadio pertencente ao grupo C1 em bom escore corporal (A) e animal pertencente ao grupo DRC apresentando caquexia (B), Goinia, 2011

A B C

21

4.3 Critrios de incluso no grupo DRC

Foram utilizados como critrios de incluso a concentrao srica de

creatinina acima de 1,4 mg/dL ou a presena de relao protena/creatinina urinria

>0,5. Como critrios de excluso, foi considerada a existncia de outras

enfermidades concomitantes, clinicamente detectadas.

4.4 Avaliaes laboratoriais

As anlises foram realizadas no Laboratrio Multiusurio do Programa

de Ps-Graduao em Cincia Animal da Escola de Veterinria e Zootecnia da

UFG.

Para o hemograma e fibrinognio foram obtidos 2,0 mL de sangue por

venopuno jugular em tubo com etilenodiaminotetracetato (EDTA). A contagem

das clulas sanguneas foi determinada pelo mtodo automtico utilizando-se o

aparelho BC 2800 vet (Auto Hematology Analyzer, Mindray Bio-Medical

Electronics Co. Ltda, Shenzhen - Guangdong), adaptado com o carto prprio de

leitura para a espcie canina. O fibrinognio foi determinado pela tcnica de

precipitao no tubo de microhematcrito a 56oC (JAIN, 1993).

Para as provas de bioqumica srica foi obtido 5,0 mL de sangue por

venopuno jugular em tubo sem anticoagulante, que foi centrifugado aps retrao

do cogulo. Em seguida, o soro foi dividido em alquotas, armazenadas em

microtubos de polipropileno de 1,5 mL (Eppendorf, Alemanha) e submetidas ao

congelamento (-20 C) at o momento da realizao dos exames.

Para cada metablito analisado, exceto sdio e potssio, foram

utilizados reagentes comerciais padronizados (Labtest - Labtest Diagnstica S.A.,

Lagoa Santa-MG), com metodologias cinticas, enzimticas ou colorimtricas, em

temperatura de 37C, sendo a leitura realizada em espectrofotmetro semi-

automtico (Analisador Bioqumico Bio-Plus, Produtos para Laboratrios Ltda,

Barueri-SP).

22

O sdio e o potssio foram determinados por meio de fotometria de

chama (Fotmetro de Chama FC-180 CELM, Cia Equipadora de Laboratrios

Modernos, Barueri-SP), utilizando-se um padro de calibrao especfico.

A quantidade de uria foi determinada por meio de mtodo enzimtico

colorimtrico, por reao com a urease e a leitura feita utilizando-se um

comprimento de onda de 610 nm. A creatinina srica e urinria foi determinada por

mtodo colorimtrico, por reao com o picrato alcalino, sendo realizada a leitura

em um comprimento de onda de 510 nm. Para a mensurao da creatinina urinria

utilizou-se diluio da urina nas propores de 1:25 sendo os resultados da leitura

multiplicados por 25.

A protena total srica foi determinada por mtodo colorimtrico, por

reao com o biureto, utilizando-se na leitura um comprimento de onda de 510 nm.

A albumina foi avaliada por meio de mtodo colorimtrico, por reao com o verde

de bromocresol, em um comprimento de onda de 610 nm. As globulinas foram

calculadas pela diferena entre o valor de protena total e albumina. A determinao

da concentrao de protena urinria foi realizada utilizando-se mtodo

colorimtrico, por reao com o vermelho de pirogalol, a uma absorbncia de 610

nm.

Os nveis sricos de sdio e potssio foram determinados aps a

calibrao do fotmetro com gua destilada (ajustada em zero) e com o padro

ajustado em 140 mmol/L para o sdio e 5 mmol/L para o potssio. As amostras e o

padro foram diludos em soluo de gua destilada numa proporo de 1:100. Os

valores urinrios de sdio e potssio foram determinados da mesma forma. As

amostras de urina foram anteriormente diludas em gua destilada nas propores

de 1:11 e posteriormente em 1:100, sendo os resultados da leitura multiplicados

por 11.

A determinao da GGT urinria foi realizada logo aps a colheita e o

resultado calculado segundo DeSCHEPPER et al. (1989), que utilizaram a

densidade urinria de 1.025 como fator de correo para o fluxo urinrio de uma

nica amostra colhida de cada animal, por meio da seguinte frmula:

X= Y x 25

Z

23

onde: X a atividade de GGT urinria calculada; Y a atividade da GGT urinria

da amostra e Z corresponde aos ltimos dois dgitos da densidade urinria da

amostra.

O clcio srico foi analisado pelo mtodo colorimtrico, por reao com

a prpura de ftalena, em um comprimento de onda de 570 nm. Os nveis de fsforo

srico foram obtidos por meio de mtodo colorimtrico, por reao com o

molibdnio, utilizando-se um comprimento de onda de 640 nm.

O colesterol foi determinado por mtodo enzimtico, por reao com a

aminoantipirina, em um comprimento de onda de 600 nm.

As amostras de 10 mL de urina foram obtidas por cistocentese. A anlise

da urina foi realizada logo aps a colheita e compreendeu exame fsico, qumico e

microscpico. O exame fsico avaliou volume, cor, aspecto e densidade. O exame

qumico consistiu na avaliao do pH, de protena, glicose, cetonas, bilirrubina,

hemcias, hemoglobina, urobilinognio, nitrito e leuccitos empregando tiras

reagentes (Biocolor, Bioeasy Diagnstica Ltda, Belo Horizonte-MG). A densidade

urinria foi determinada em refratmetro porttil. Aps a centrifugao da urina, o

sedimento urinrio foi examinado aps sua ressuspenso em uma gota do

sobrenadante, disposto entre lmina e lamnula e observado em microscopia ptica

com objetiva de 40 vezes, antes do congelamento. O exame microscpico avaliou

o sedimento quanto aos componentes: hemcias, leuccitos, cilindros, bactrias,

leveduras, parasitos, cristais, filamentos de muco e artefatos.

Para os testes bioqumicos na urina, as amostras foram centrifugadas,

subdivididas em microtubos de polipropileno de 1,5 mL (Eppendorf, Alemanha) e

congeladas (-20 C) at o momento da realizao dos exames, exceto a alquota

destinada determinao da atividade urinria de GGT.

Para realizar a interpretao estatstica da sedimentoscopia, criou-se um

ndice representativo da gravidade da leso renal observada no exame de urina de

rotina. Foram utilizados valores atribudos a cada componente do exame como est

explicitado no Quadro 2. O valor final dado a cada co foi o somatrio de pontos de

cada item avaliado.

24

QUADRO 2 - Escore de gravidade da leso renal observada no exame de urina de rotina

Urinlise Escore

Protena + 1 ponto para cada +

Cilindros

Hialinos + 1 ponto para cada +

Granulosos finos + 2 pontos para cada +

Granulosos grossos + 3 pontos para cada +

Epitelial + 4 pontos para cada +

Hematnico + 4 pontos para cada +

Leucoctico + 4 pontos para cada +

Cereos + 4 pontos para cada +

Clulas Epitelial transicional + 1 ponto para cada +

Renal + 2 pontos para cada +

Leuccitos e hemcias

1-5 1 ponto

6-10 2 pontos

11-20 3 pontos

Acima de 20 4 pontos

4.4.1 Relao protena/creatinina urinria (PU/CU)

A mensurao da PU/CU foi realizada somente nas amostras de urina que

continham sedimento urinrio inativo.

Os valores obtidos nas mensuraes de protena e creatinina na urina foram

aplicados na seguinte frmula:

PU/CU = Protena total (mg/dL)

Creatinina (mg/dL)

4.4.2 Excreo fracional de sdio e potssio

A excreo fracional (EF) de sdio e potssio foi calculada para a

avaliao da funo tubular, a partir dos resultados obtidos na bioqumica srica e

urinria. A EF, frao de depurao urinria dos eletrlitos em relao creatinina,

foi calculada a partir da frmula proposta por FLEMING et al. (1991), representada

a seguir.

EF (%) = EU x CrS x 100

ES CrU

25

onde: E: eletrlito; Cr: creatinina; U: urinrio; S: srico.

4.5 Ultrassonografia

Para realizao do exame ultrassonogrfico os ces foram tricotomizados

na regio hipocndrica abdominal, ventral aos msculos sublombares e caudal

ltima costela esquerda e aos dois ltimos espaos intercostais direitos. Uma

espessa camada de gel acstico foi aplicada na pele para facilitar o contato do

transdutor com o stio do exame. As imagens sonogrficas em tempo real foram

obtidas com o uso do equipamento de ultrassonografia (Mylab 320 Esaote,

Biosound Esaote Inc., Indianapolis, USA). Os planos de seco longitudinal e

transversal foram utilizados para a mensurao das medidas lineares.

Para a interpretao do tamanho renal (normal, aumentado ou diminudo) foi

utilizada a descrio de BARR et al. (1990) que citou valores de normalidade

conforme a variao do peso corpreo (Quadro 3).

QUADRO 3 - Parmetros renais em 100 ces hgidos, de raas variadas e sem distino sexual

Peso corpreo (kg) Comprimento (cm) Volume mdio (mL)

0 - 4 3,2 - 3,3 3,3 - 3,7

5 - 9 3,2 - 5,2 6,6 - 18,0

10 - 14 4,8 - 6,4 14,1 - 39,6

15 - 19 5,0 - 6,7 19,0 - 40,1

20 - 24 5,2 - 8,0 26,2 - 51,3

25 - 29 5,3 - 7,8 25,2 - 64,0

30 - 34 6,1 - 8,7 30,5 - 75,5

35 - 39 6,6 - 9,3 44,4 - 102,1

40 - 44 6,3 - 8,4 41,2 - 87,7

45 - 49 7,6 - 9,1 58,2 - 98,6

50 - 59 7,5 - 10,6 56,7 - 120,9

60 - 69 8,3 - 9,8 80,0 - 124,9

90 - 99 8,6 - 10,1 133,8 - 149,6

Fonte: BARR et al. (1990)

26

4.6 Presso arterial sistmica

Foram monitoradas as presses arteriais sistlicas nas artrias da regio

do metacarpo atravs de esfigmomanmetro e aparelho de Doppler (Doppler

Vascular Porttil Veterinrio Modelo DV 610, Medmega Indstria de Equipamentos

Mdicos Ltda, Franca, Brasil). Os manguitos utilizados tinham larguras de

aproximadamente 30 a 40% da circunferncia do membro no stio de colocao

dos mesmos. Para cada co foram realizadas, no mnimo, trs determinaes e

registradas as mdias destas. A primeira determinao foi descartada. Foram

considerados como hipertensos, ces com valores de presso sistlica igual ou

acima de 160 mmHg (FINCO, 2004).

4.7 Anlise estatstica

Aps a tabulao dos dados foram avaliados os valores de mdia,

desvio-padro, coeficiente de variao, mediana e intervalo de confiana. Aps

esta avaliao, optou-se por aplicar os testes no-paramtricos para comparao

das mdias, pelo fato dos dados obtidos no apresentarem normalidade e

homogeneidade.

Para comparao entre os grupos foram utilizados o teste de Kruskal-

Wallis (p < 0,05) e o teste de correlao de Spearman de acordo com SAMPAIO

(1998), exceto para a ultrassonografia que foi avaliada por anlise descritiva.

Adicionalmente foi realizado o clculo da matriz de distncias euclidianas entre os

quatro grupos (C1, C2, C3 e IRC) e foi construdo um dendrograma pelo mtodo de

agrupamento UPGMA.

Todos os testes acima citados foram calculados por meio do programa

computacional BIOESTAT 5.0 (AYRES et al., 2007).

27

5 RESULTADOS E DISCUSSO

A seleo dos animais do grupo controle foi criteriosa, procurando-se

escolher apenas aqueles realmente sadios, preocupao fundamentada no fato de

que muitas doenas podem acarretar uma srie de alteraes clnicas e

laboratoriais, refletindo nos exames. Portanto, os animais do grupo controle que

apresentaram enfermidades pr-existentes e doenas de origem renal foram

excludos do experimento.

Quanto ao nmero de ces utilizados no estudo, a definio da amostra

baseou-se na quantidade mnima de animais por grupo que permitiu a adequada

comparao estatstica. O grupo DRC comps-se de 29 animais devido ao fato de

quatro animais doentes terem vindo a bito anteriormente realizao de todas as

anlises propostas.

Em relao ao sexo, 65% dos ces eram fmeas, enquanto os machos

representaram 35% dos casos. A distribuio racial predominante de animais

doentes renais crnicos, neste estudo, foi a raa Pit Bull (17%), seguida de outras

raas como a Basset Hound, Poodle, Cocker Spaniel, Pastor Alemo, Boxer,

Teckel, Pinscher, Shih-tzu, Yorkshire Terrier e Blue Heeler (3% cada). Os animais

sem raa definida totalizaram 45%.

Em relao faixa etria dos animais doentes renais crnicos, 7% (n =

2) tinham idade inferior a dois anos, 41% (n = 12) variaram entre dois e seis anos

e onze meses, 31% (n = 9) entre sete e dez anos e 21% (n = 6) tinham idade

superior a dez anos. A maior freqncia dos casos de DRC em ces com idade

superior a sete anos foi relatada por NOTOMI et al. (2006). Segundo POLZIN

(1995) a incidncia da IRC aumenta com a idade. POMEROY et al. (2004)

demonstrou em um estudo a correlao entre leses renais de origem no-

infecciosa e idade, comprovando que importantes leses renais como fibrose

intersticial, cistos tubulares e glomeruloesclerose aumentam em freqncia e

severidade em ces mais velhos. Neste estudo uma parcela significativa de animais

(48%) apresentou a DRC antes dos sete anos, sugerindo a importncia de

diagnstico mais cuidadoso em animais jovens.

Os ces sobreviveram em mdia trs meses aps o primeiro

28

atendimento. Dos 29 animais doentes estudados, 22 vieram a bito. A alta

mortalidade deveu-se ao fato de que todos os ces que vieram a bito, no momento

do diagnstico, encontravam-se em estgios avanados da doena (estgios III e

IV). O estgio I incluiu 10% (n = 3) dos ces; o estgio II 10% (n = 3); o estgio III,

42% (n = 12) e o estgio IV representou 38% (n = 11) dos animais. VADEN (2007)

citou mdia de sobrevida de 594 dias para ces no estgio III da IRC, sendo o

protocolo de tratamento institudo um fator importante no aumento da sobrevida dos

animais. Entretanto, o sucesso no tratamento menor nos estgios finais, onde as

manifestaes clnicas so exacerbadas e refratrias terapia (WAKI et al., 2010).

Os principais sintomas e sinais clnicos apresentados pelos animais

doentes renais crnicos esto apresentados na Tabela 1.

TABELA 1 - Frequncia absoluta e relativa dos sintomas e sinais clnicos observados em ces (n = 29) com doena renal crnica, Goinia, 2011

Sinais Clnicos Frequncia

Absoluta Relativa

Poliria/polidipsia 24/29 82,8%

Emagrecimento 23/29 79,3%

mese 23/29 79,3%

Apatia 21/29 72,4%

Disorexia 13/29 44,8%

Desidratao 13/29 44,8%

Anorexia 11/29 38,0%

Alterao na cor e consistncia das fezes 8/29 27,6%

Sensibilidade abdominal 7/29 24,1%

A presena de poliria e polidipsia (PU/PD) foram relatadas em 82,8%

dos casos. Segundo RUBIN (1997), a PU/PD esto entre as primeiras

manifestaes clnicas da insuficincia renal crnica em ces. Sua ocorrncia se

d quando h perda de funo de aproximadamente 66% dos nfrons (GRANT &

FORRESTER, 2001). Alm disso, foi observada uma relao entre a presena de

PU/PD e a diminuio da densidade urinria. A perda de capacidade em concentrar

urina e a presena de PU/PD ocorrem anteriormente a azotemia, cuja ocorrncia

se d apenas quando 75% dos nfrons esto comprometidos (REINE &

LANGSTON, 2010).

29

A desidratao, presente em 44,8% dos animais com IRC, ocorre como

consequncia da poliria, mese e diarria. A desidratao intensa pode ocasionar

a hipoperfuso dos rins agravando a funo renal (DiBARTOLA, 1997).

Complicaes gastrointestinais incluindo nuseas, vmitos, disorexia, diarria e

sangramento gastrointestinal, esto entre os sinais mais frequentes da sndrome

urmica. Associam-se a esses sinais emagrecimento e anorexia, que so achados

inespecficos e podem preceder outros sinais de uremia (POLZIN, 2010). O

emagrecimento, observado em 79,3% dos casos, subseqente gastrenterite

urmica, reduo na ingesto de nutrientes, transtornos metablicos e catablicos

em decorrncia da uremia, principalmente a acidose metablica (POLZIN &

OSBORNE, 1995).

5.1 Avaliao da funo e doena renal

5.1.1 Perfil hematolgico

O perfil do eritrograma dos ces dos grupos C1, C2, C3 e DRC e a

comparao entre os grupos esto apresentados na Tabela 2. Os valores mdios

de hemcia nos grupos C1, C2, C3 e DRC foram 5,51 x 1012/L, 5,97 x 1012/L, 6,61

x 1012/L e 4,51 x 1012/L, respectivamente. Foi observada diferena estatstica (p<

0,05) entre os grupos C2 e DRC e C3 e DRC.

Os valores de hemcia, hemoglobina, hematcrito e CHCM no grupo

DRC estiveram abaixo dos valores de referncia descritos para a espcie canina.

Os valores de VCM e HCM mostraram-se dentro da faixa de normalidade, indicando

anemia normoctica normocrmica. Segundo POLZIN (2010) ces e gatos com

doena renal crnica geralmente tm anemia normoctica normocrmica no-

regenerativa, cuja gravidade proporcional diminuio da funo renal. Outras

causas da anemia na DRC incluem deficincia de ferro, deficincia de cido flico

e vitamina B12 (ABENSUR, 2004).

30

TABELA 2 - Perfil do eritrograma dos ces dos grupos C1, C2, C3 e DRC, com valores de mdia, desvio-padro (DP), mediana, coeficiente de variao (CV) e intervalo de confiana (IC), Goinia, 2011

Eritrograma Grupos n Mdia DP Mediana CV(%) IC (0,95)

Hemcias C1 10 5,5ABC 1,1 5,4 19 4,7 6,3

(106/L) C2 40 5,9AB 1,0 6,0 16 5,7 6,3

C3 11 6,6A 1,5 6,4 23 5,6 7,6

DRC 29 4,5C 1,4 4,5 31 4,0 5,0

Hemoglobina C1 10 12,19BC 2,7 12,0 22 10,8 13,6

(g/dL) C2 40 13,23B 2,5 14,2 19 12,4 14,0

C3 11 16,03A 3,5 16,1 22 13,6 18,4

DRC 29 10,20C 4,2 10,8 41 8,6 11,8

Hematcrito C1 10 36,4AB 7,4 35,3 20 31,2 41,7

(%) C2 40 46,7A 46,0 40,6 99 32,0 61,5

C3 11 43,7A 11,3 44,6 26 36,1 51,3

DRC 29 30,9B 12,7 31,6 41 26,1 35,7

VCM C1 10 66,2A 3,4 65,9 5 63,8 68,6

(fL) C2 40 65,5A 6,6 66,9 10 63,4 67,6

C3 11 67,3A 2,8 67,6 4 65,5 69,2

DRC 29 68,4A 7,5 67,3 11 65,5 71,2

HCM C1 10 19,7A 7,0 21,5 36 14,7 24,7

(g/dL) C2 40 22,0A 1,7 22,3 8 21,7 22,8

C3 11 24,3C 1,9 24,8 8 23,0 25,6

DRC 29 21,2AB 2,3 21,7 11 20,3 22,0

CHCM C1 10 29,9AC 10,5 33,65 35 22,4 37,4

(%) C2 40 33,8A 2,2 33,90 7 33,1 34,5

C3 11 36,2B 2,6 36,00 7 34,4 37,9

DRC 29 31,3C 4,1 32,40 13 29,8 32,8

Plaquetas C1 10 357,1A 122,6 378,0 34 269,4 444,8

(103/L) C2 40 263,5A 125,0 260,5 47 223,5 303,5

C3 11 306,9A 130,6 315,0 43 219,2 394,7

DRC 29 291,3A 187,3 245,0 64 220,1 362,5

Mdias seguidas de letras diferentes, dentro da mesma coluna, diferem estatisticamente pelo teste de Kruskal-Wallis (p < 0,05).

A anemia observada nos ces com DRC deste estudo uma

complicao freqentemente encontrada nos pacientes portadores de doena renal

crnica como consequncia de diversas causas, principalmente pela reduo da

sntese de eritropoetina (EPO). A sntese de EPO ocorre primariamente pela

liberao do fator eritropoitico renal, tambm chamado de eritrogenina, pelas

31

clulas do aparelho justaglomerular no rim, sendo responsvel pela ativao do

eritropoietinognio em EPO (KHURANA, 2009). Secundariamente a EPO

produzida por uma pequena frao no fgado pelas clulas de Kupffer e por outros

macrfagos (FELDMAN et al., 2006). Acredita-se que no co a nica fonte de

eritropoietina se d pela liberao do fator eritropoitico renal. Em outras espcies

e seres humanos a produo extra-renal de EPO ajuda a manter a eritropoiese em

casos de anemia provocada por doena renal grave (SWENSON & REECE, 1996).

A contagem de plaquetas estava dentro da faixa de normalidade em

todos os grupos. A produo de plaquetas e dos fatores de coagulao normal

em pacientes com DRC, exceto nos casos de sndrome nefrtica (POLZIN &

OSBORNE, 1995).

O perfil do leucograma dos ces dos grupos C1, C2, C3 e DRC e a

comparao entre os grupos esto apresentados na Tabela 3. Os valores de

leuccitos estavam dentro da faixa de normalidade em todos os grupos e no

diferiram estatisticamente (p>0,05).

Os valores de bastonetes, segmentados, eosinfilos e linfcitos estavam

dentro da faixa de normalidade em todos os grupos. Os neutrfilos segmentados

do grupo DRC apresentaram valores maiores do que os outros grupos, diferindo

dos grupos C1 e C2 (p

32

TABELA 3 - Perfil do leucograma dos ces dos grupos C1, C2, C3 e DRC, com valores de mdia, desvio-padro (DP), mediana, coeficiente de variao (CV) e intervalo de confiana (IC), Goinia, 2011

Leucograma Grupos n Mdia DP Mediana CV(%) IC (0,95)

Leuccitos Totais

C1 10 8780,0A 2614,8 8200 30 6909,6 10650,4

C2 40 9110,0A 3196,2 8350 35 8087,6 10132,4

(103/L) C3 11 8972,7A 4198,6 7700 47 6152,2 11793,2

DRC 29 11708,6A 7491,5 9500 64 8859,5 14557,6

Bastonetes C1 10 36,2B 47,3 0 131 2,4 70,0

(/L) C2 40 175,2A 150,2 124 86 127,2 223,3

C3 11 96,6AB 51,5 96 53 62,0 131,3

DRC 29 121,7B 208,9 70 172 42,2 201,1

Segmentados C1 10 4866,0A 1443,3 4396 30 3833,6 5898,4

(/L) C2 40 5535,0AB 2286,7 5373 41 4803,6 6266,4

C3 11 6257,1B 3271,4 5250 52 4059,4 8454,5

DRC 29 9077,6B 6392,5 8112 70 6646,4 11508,6

Eosinfilos C1 10 311,7A 267,0 267 86 120,7 502,7

(/L) C2 40 393,3A 447,6 314 114 250,2 536,6

C3 11 286,91AB 331,0 81 115 64,6 509,3

DRC 29 144,0B 312,6 0 217 25,1 262,9

Linfcitos C1 10 2955,1A 1754,2 2763 59 1700,3 4209,9

(/L) C2 40 2294,6A 1609,3 1852 70 1779,8 2809,4

C3 11 1512,54AB 827,04 1608 55 956,9 2068,1

DRC 29 1486,53B 1198,25 1309 81 1030,8 1942,2

Moncitos C1 10 521,4A 317,7 447 61 294,1 748,7

(/L) C2 40 689,7A 556,9 510 81 511,6 867,9

C3 11 712,4A 576,5 432 81 325,1 1099,7

DRC 29 812,5A 920,8 574 113 462,3 1162,7

Mdias seguidas de letras diferentes, dentro da mesma coluna, diferem estatisticamente pelo teste de Kruskal-Wallis (p < 0,05).

5.1.2 Fibrinognio

Os valores de fibrinognio (Tabela 4) apresentaram-se dentro dos

valores de referncia para a espcie canina e no houve diferena estatstica entre

os grupos (p>0,05).

Para ces, o valor de normalidade do fibrinognio compreendido entre

100 e 500 mg/dL (SCHALM et al., 1970). O fibrinognio considerado uma protena

de fase aguda que se eleva nas primeiras horas aps o incio da inflamao,

33

entretanto, diferentemente dos bovinos e eqinos, nos ces a hiperfibrinogemia de

origem inflamatria persiste apenas 24 a 72 horas (VECINA, 2006).

TABELA 4 - Parmetros de fibrinognio dos ces dos grupos C1, C2, C3 e DRC com valores de mdia, desvio-padro (DP), mediana, coeficiente de variao (CV) e intervalo de confiana (IC), Goinia, 2011

Grupos n Mdia DP Mediana CV(%) IC (0.95)

Fibrinognio C1 10 240,0 A 96,6 200 40 170,9 309,1

(mg/dL) C2 40 255,0 A 161,6 200 63 203,3 306,7

C3 11 227,3 A 100,9 200 44 159,5 295,0

DRC 29 400,0 A 268,6 300 67 297,8 502,1

Mdias seguidas de letras iguais, dentro da mesma coluna, no diferem estatisticamente pelo teste de Kruskal-Wallis (p > 0,05).

5.1.3 Perfil bioqumico sanguneo

A) Creatinina e uria

Os nveis mdios de creatinina srica nos grupos foram de 0,89 mg/dL

(C1), 0,91 mg/dL (C2), 0,79 mg/dL (C3) e 5,36 mg/dL (DRC), sendo o grupo DRC

significativamente maior que os demais (p

34

TABELA 5 - Perfil bioqumico sanguneo dos ces dos grupos C1, C2, C3 e DRC, com valores de mdia, desvio-padro (DP), mediana, coeficiente de variao (CV) e intervalo de confiana (IC), Goinia, 2011

Bioqumica srica

Grupos n Mdia DP Mediana CV(%) IC (0,95)

Creatinina (mg/dL)

C1 10 0,89A 0,34 0,84 38 0,6 1,1 C2 40 0,91A 0,18 0,92 20 0,8 1,0

C3 11 0,79A 0,25 0,90 31 0,6 1,0 DRC 29 5,36B 4,11 4,40 77 3,8 6,9

Uria C1 10 34,62A 7,80 35,60 22 29,0 40,2 (mg/dL) C2 40 39,68A 15,33 35,75 39 34,8 44,6 C3 11 46,30A 15,02 40,50 32 36,2 56,4 DRC 29 206,68B 218,36 155,00 106 123,6 289,7

Protena total (g/dL)

C1 10 6,01C 1,20 5,53 20 5,2 6,9 C2 40 9,25A 1,72 8,92 19 8,6 9,7

C3 11 8,48AB 1,45 8,38 17 7,5 9,4 DRC 29 7,88B 1,97 7,21 25 7,1 8,6

Albumina C1 10 2,33AC 0,63 2,39 27 1,9 2,8 (g/dL) C2 40 2,70BC 0,60 2,57 22 2,5 2,9 C3 11 2,97C 0,94 2,76 32 2,3 3,6 DRC 29 2,35A 1,06 2,13 45 1,9 2,7

Globulina (g/dL)

C1 10 3,70C 1,30 3,34 35 2,8 4,6 C2 40 6,56A 1,92 6,37 29 6,0 7,2

C3 11 5,51AB 1,63 5,11 30 4,4 6,6 DRC 29 5,54B 1,92 5,05 35 4,8 6,3

Colesterol (mg/dL)

C1 10 154,80AB 65,99 131,01 43 107,6 202,0 C2 40 156,70B 94,05 132,00 60 126,6 186,8

C3 11 232,34BC 172,28 168,00 74 116,6 348,1 DRC 29 227,05AC 118,91 210,00 52 181,8 272,3

Clcio C1 10 10,74A 2,11 10,15 20 9,2 12,2 (mg/dL) C2 40 10,89A 1,93 10,65 18 10,3 11,5 C3 11 10,01A 0,87 10,02 9 9,4 10,6 DRC 29 12,96A 10,95 9,70 84 8,8 17,1

Fsforo (mg/dL)

C1 10 6,48A 2,85 6,55 44 4,5 8,5 C2 40 4,09B 1,71 4,30 42 3,5 4,6

C3 11 3,78BC 1,40 3,80 37 2,8 4,7 DRC 29 10,94A 8,80 9,10 80 7,6 14,3

Sdio C1 10 137,90A 10,57 139,50 8 130,3 145,5 (mEq/L) C2 40 129,85B 8,10 129,50 6 127,3 132,5 C3 11 135,10AB 16,34 137,00 12 124,1 146,1 DRC 29 139,10A 13,70 139,00 10 133,9 144,3

Potssio (mEq/L)

C1 10 4,42A 0,52 4,65 12 4,1 4,8 C2 40 4,34A 0,51 4,30 12 4,1 4,5

C3 11 4,46A 0,95 4,20 21 3,8 5,1 DRC 29 5,03A 1,15 4,70 23 4,6 5,5

Mdias seguidas de letras diferentes, dentro da mesma coluna, diferem estatisticamente pelo teste de Kruskal-Wallis (p < 0,05).

35

Para CHEW & DiBARTOLA (1992) a concentrao de creatinina pode

ser influenciada pela idade, sexo e massa muscular; animais jovens apresentam

concentraes mais baixas, enquanto indivduos adultos, de massa muscular

desenvolvida, tendem a apresentar concentraes sricas mais elevadas. Nos

animais deste estudo os valores de creatinina no foram influenciados pela idade

(Tabela 5). Segundo POLZIN (2010) preciso considerar essas variaes de

creatinina no momento da interpretao dos resultados laboratoriais a fim de evitar

uma classificao errnea.

A creatinina mais eficiente que a concentrao plasmtica de uria

para o diagnstico de IRC. Estudos relataram altas ou baixas correlaes entre as

concentraes de creatinina e uria plasmticas (BRAUN et al, 2003). Neste

estudo, houve uma alta correlao (r= 0,73; p= 0.0002) entre as concentraes de

creatinina e uria sricas no grupo IRC.

Os nveis sricos de uria no grupo IRC (Tabela 5) tambm excederam

os valores de referncia. As mdias entre os grupos foram 34,62 mg/dL (C1), 39,68

mg/dL (C2), 46,30 mg/dL (C3) e 206,68 mg/dL (DRC) sendo o estatisticamente

superior aos demais (p

36

B) Protena total, albumina e globulina

Os maiores valores de protena total foram observados nos grupos C2 e

C3 (Tabela 5).

Na avaliao dos ces saudveis, os menores valores de protena foram

observados no grupo C1, composto pelos animais mais jovens, e foi o reflexo dos

baixos valores de albumina. FELDMAN et al. (2006) afirmaram que o nvel de

protena total menor em animais mais jovens. A hipoproteinemia tambm pode

ocorrer em deficincias de protena diettica, podendo haver hipoproteinemia e

hipoalbuminemia concomitantes em caso de inadequada ingesto calrica protica.

FERREIRA (2006) avaliando dietas com diferentes valores de protena bruta (PB)

encontrou valores menores de protena e albumina em grupo de ces que ingeriram

uma dieta com PB de 12% em comparao s outras com 22% e 32% de PB. No

foi possvel estabelecer o histrico alimentar dos ces deste estudo, mas como uma

parcela importante pertencia a um abrigo (AASPAN), no se pode descartar a

possibilidade de m-nutrio calrico-protica.

Os valores mdios de albumina estavam diminudos no grupo DRC,

sendo significativamente inferior aos valores dos grupos C2 e C3 (p

37

glomerulopatias com envolvimento imunolgico.

C) Colesterol, fsforo e clcio

Os valores mdios de colesterol diferiram entre os grupos C2 e DRC.

Todos os grupos apresentaram valores mdios dentro da normalidade.

A hipercolesterolemia tem sido relatada em ces com sndrome nefrtica

(BUEMI et al., 2005). No presente estudo trs ces do grupo DRC apresentaram

hipercolesterolemia associada proteinria e hipoalbuminemia, sendo

estabelecido o diagnstico de sndrome nefrtica. Estudos iniciais sobre o assunto

detectaram prevalncia da sndrome nefrtica em ces com doena glomerular

variando entre 6% e 15%. Estudos recentes em oito instituies veterinrias de

ensino americanas detectaram a prevalncia de 0,5 caso por ano em um perodo

de 17 anos. Este fato deve-se crescente conscientizao sobre a necessidade de

uma avaliao mais completa e precoce no diagnstico e interveno desses

pacientes (KLOSTERMAN & PRESSLER, 2011).

Os valores mdios de fsforo dos grupos C1 e DRC foram superiores

aos valores de referncia (Tabela 5). Os grupos C1 e C2, C1 e C3, C2 e DRC, e

C3 e DRC diferiram significativamente entre si (p

38

Os valores mdios de clcio no diferiram entre os grupos (p>0,05),

embora os valores mdios de clcio no grupo DRC estivessem discretamente

elevados (Tabela 5). Esses resultados mostraram que os mecanismos

homeostticos foram eficientes na manuteno dos nveis sricos de clcio prximo

da normalidade na maioria dos animais do grupo DRC, inclusive naqueles em

estgios avanados da doena. Resultados semelhantes foram descritos por

MARTINZ & CARVALHO (2010) em estudo com ces com DRC e GIOVANINNI

(2003) em estudo com gatos com DRC. Entretanto, quatro ces apresentaram os

valores de clcio acima da referncia, indicando uma possvel presena do

hiperparatireiodismo tercirio, resultado semelhante ao descrito por LAZARETTI et

al. (2006) que atriburam essas alteraes estimulao persistente da paratireide

que secreta PTH mesmo em presena da hipercalcemia, o que pode ocorrer em

estgios avanados da IRC.

D) Sdio e potssio

Considerando os limites de normalidade preconizados por KANECO et

al. (1997), os valores mdios de sdio estavam diminudos em todos os grupos

(Tabela 5). Entretanto ficaram dentro do intervalo de normalidade considerando os

achados de FERREIRA (2006), que relata valores de sdio entre 128,8 mEq/L a

145,6 mEq/L em ces saudveis alimentados com teores de 22% de protena bruta.

Os valores numericamente muito prximos entre os grupos indicaram que os

mecanismos de regulao do sdio so mantidos at os estgios avanados da

IRC, o que corroborado por observao de CHEW & DIBARTOLA (1992).

Os resultados deste estudo diferiram dos de MARTNEZ & CARVALHO

(2010) que observaram hiponatremia em ces em estgios avanados da IRC. Para

LANGSTON (2008) a concentrao de sdio srico pode estar normal, aumentada

ou diminuda na insuficincia renal e para MARTNEZ & CARVALHO (2010) a perda

da capacidade de manter o balano de sdio na IRC ocorre quando a TFG cai para

menos do que 10% do valor normal.

Os valores mdios de potssio (Tabela 5) no diferiram entre os grupos

(p>0,05) e estavam dentro da normalidade. Similarmente aos achados aqui

encontrados MARTNEZ & CARVALHO (2010) no encontraram diferenas

significativas entre ces com IRC e ces sadios. Conforme os resultados descritos,

39

observou-se que mesmo em estgios avanados da IRC os mecanismos tubulares

compensatrios conseguiram manter a homeostasia do potssio. Esses resultados

diferiram de NOTOMI et al. (2006) que observaram hipercalemia na maioria dos

ces que apresentavam IRC.

A associao entre insuficincia renal polirica e hipocalemia

reconhecida em gatos. Entre 20% e 30% dos gatos com doena renal crnica tm

hipocalemia. Mltiplos mecanismos podem contribuir para o desenvolvimento de

hipocalemia, incluindo a perda renal excessiva associada poliria (LANGSTON,

2008). Em contraste, a hipocalemia parece ser uma manifestao incomum em

ces com IRC, exceto por complicaes iatrognicas, como por exemplo,

fluidoterapia (PHILLIPS & POLZIN, 1998). Os resultados deste estudo confirmam a

menor ocorrncia da hipocalemia em ces com IRC.

5.1.4 Perfil bioqumico urinrio

A) Relao PU/CU

As mdias da relao PU/CU nos grupos (Tabela 6) foram de 0,13 (C1),

0,12 (C2), 0,18 (C3) e 1,53 (DRC), sendo o ltimo significativamente maior que os

demais (p

40

que apresentava doena renal crnica (DRC) e que 36,7% apresentavam relao

PU/CU acima de 0,4.

TABELA 6 - Parmetros urinrios e de excreo fracional de eletrlitos dos ces dos grupos C1, C2, C3 e DRC com valores de mdia, desvio-padro (DP), mediana, coeficiente de variao (CV) e intervalo de confiana (IC), Goinia, 2011

Parmentros urinrios

Grupos n Mdia DP Mediana CV(%) IC (0,95)

Relao PU/CU C1 10 0,13A 0,07 0,10 54 0,1 0,2

C2 40 0,12A 0,10 0,09 79 0,07 0,13

C3 11 0,18A 0,17 0,14 93 0,06 0,29

DRC 29 1,53B 1,75 0,86 114 0,86 2,19

GGT (UI/L) C1 10 36,93A 12,63 38,28 34 27,9 45,96

C2 40 43,84A 44,38 32,71 101 29,6 58,0

C3 11 46,40A 45,87 28,98 99 15,59 77,21

DRC 29 80,49B 45,50 76,94 57 63,19 97,79

Excreo fracional de sdio (%)

C1 10 0,84A 1,04 0,47 125 0,1 1,58

C2 40 0,89A 1,62 0,56 183 0,38 1,42

C3 11 0,44A 0,35 0,35 78 0,2 0,67

DRC 29 8,40B 10,21 6,46 121 4,52 12,3

Excreo fracional de potssio (%)

C1 10 11,35A 11,33 8,75 100 3,24 19,45

C2 40 11,39A 12,63 10,06 111 7,36 15,44

C3 11 9,11A 5,56 8,75 61 5,37 12,84

DRC 29 103,34B 204,43 48,66 198 25,60 181,1

pH C1 10 6,20A 0,89 6,00 14 5,6 6,8

C2 40 6,83B 1,06 6,50 16 6,5 7,1

C3 11 6,45AB 0,93 6,00 14 5,9 7,1

DRC 29 5,90A 0,57 6,00 10 5,7 6,1

Densidade C1 10 1,041A 11,0 1,041 1 1,034 1,050

C2 40 1,041A 13,1 1,042 1 1,036 1,045

C3 11 1,039A 19,8 1,044 2 1,025 1,052

DRC 29 1,014B 7,3 1,013 1 1,011 1,016

Mdias seguidas de letras diferentes, dentro da mesma coluna, diferem estatisticamente pelo teste de Kruskal-Wallis (p < 0,05).

Embora no tenha sido encontrada uma correlao altamente positiva

(r= 0,17) e significativa (p=0,45) entre relao PU/CU e creatinina srica, uma

parcela significativa (52,4%) dos ces que apresentavam relao PU/CU elevada

tinham altas concentraes sricas de creatinina. Esses achados foram diferentes

41

dos observados por CASTRO et al. (2009), que encontraram correlao

significativa entre proteinria e concentrao srica de creatinina em gatos com

DRC. KING et al. (2007) em estudo com gatos apresentando DRC e tratados com

benazepril ou placebo, no relataram correlao significativa entre creatinina e

relao PU/CU, porm consideraram estes como fatores independentes de risco

para menor sobrevida de gatos com DRC. Diante dos resultados aqui observados,

percebeu-se que a intensidade da proteinria esteve relacionada ao decrscimo da

funo renal, conforme descrito por GRAUER (2007).

B) GGT urinria

As mdias da atividade urinria da GGT (Tabela 6) nos grupos foram de

36,93 UI/L (C1), 43,84 UI/L(C2), 46,40 UI/L (C3) e 80,49 UI/L (DRC). O grupo DRC

apresentou valores significativamente superiores em relao aos demais grupos

(p

42

ces saudveis deste estudo (36,93 UI/L a 46,40 UI/L), o que refora a necessidade

de reviso dos valores de normalidade para os ces.

C) Excreo fracional de sdio e potssio

As mdias dos valores de excreo fracional de sdio foram 0,84% (C1),

0,89% (C2), 0,44% (C3) e 8,40% (DRC). As mdias dos valores de excreo

fracional de potssio foram 11,35% (C1), 11,39% (C2), 9,11% (C3) e 103,34%

(DRC). Os ces com DRC apresentaram valores significativamente superiores de

excreo fracional de sdio e potssio (Tabela 6) em relao aos demais grupos

(p1.0, principalmente no grupo com valores de creatinina acima

de 6 mg/dL. A excreo fracional de eletrlitos (Na+, K+, Cl- e Mg2+) foi elevada

principalmente nos grupos com valores de creatinina entre 2,5 a 6,0 mg/dL e acima

de 6,0 mg/dL, apresentando-se como um timo marcador de diminuio da funo

renal.

O presente trabalho tambm obteve resultados similares a TOLEDO

(2001) que estudou o perfil eletrofortico de protenas sricas e urinrias de ces

sadios e portadores de IRC, constatando valores de EF de sdio inferiores a 1%

nos animais normais (0,40% a 0,56%) e superiores a 7% nos animais doentes

(7,24% a 7,79%), refletindo a diminuio da capacidade de conservao da gua e

de sdio, que se manifesta clinicamente pela poliria (POLZIN & OSBORNE, 1995).

5.1.5 Urinlise

43

A) Densidade

A densidade urinria mdia nos diferentes grupos (Tabela 6) foi de 1,041

(C1), 1,041 (C2), 1,039 (C3) e 1,014 (DRC). O grupo IRC apresentou densidade

significativamente menor que os demais grupos (p

44

clulas tubulares proximais e distais em situaes de diminuio do pH extracelular

(intersticial e sanguneo) e da diminuio da absoro de bicarbonato pelos tbulos

proximais (STOCKHAM & SCOTT, 2011).

C) Protena

A protena nos grupos C1, C2 e C3 variou de traos a 1+. A urina de

ces hgidos apresenta ocasionalmente traos ou no mximo 1+ de protena

(KERR, 2003).

O ndice de protenria urinria foi obtido utilizando o escore de

gravidade da leso renal observada no exame de urina de rotina. O grupo DRC

apresentou proteinria moderada que variou entre traos at 3+. O ndice de

proteinria deste grupo foi significativamente superior (p

45

Os achados no grupo DRC confirmaram leso glomerular, que uma

das maiores causas de proteinria em ces (REINE & LANGSTON, 2010). O

aumento da excreo urinria de protenas de alto peso molecular (>100.000 Da),

e de albumina indicativo de transtorno severo da permeabilidade seletiva

glomerular, reabsoro tubular proximal diminuda, ou ambas (TOLEDO, 2001).

D) Cilindros e clulas

Foi observada em alguns animais a presena de cilindros hialinos e de