utilização de própolis no controle da mastite bovina

Júlia Gazzoni Jardim

Orientação: Profª DSc. Regina Conceição Garcia

UNIVERSIDADE ESTADUAL DO OESTE DO PARANÁ - UNIOESTE

CENTRO DE CIÊNCIAS AGRÁRIASCURSO DE ZOOTECNIA

MARECHAL CÂNDIDO RONDON – PR

2009

INTRODUÇÃOO que é mastite?IN 51;

Mastite Clínica Mastite Subclínica

Microrganismos ContagiososStaphylococcus aureus;

Streptococcus agalactiae;

Streptococcus dysgalactiae;

Mycoplasma bovis.

CCS Mastite Clínica

Microrganismos Ambientais

Streptococcus uberis ;

Pseudomonas aeruginosa;

Escherichia coli.Mastite Clínica

CCS

PRÓPOLISComposição: Composição: 55% resinas e bálsamos;30% cera;10% óleos voláteis;5% pólenPropriedades : Propriedades : Atividade anti-inflamatória,antibacteriana,

antifúngica,analgésica, cicatrizante,anestésica

OBJETIVO

Avaliar as atividades terapêuticas e anti-sépticas da própolis no controle da mastite bovina.

MATERIAL E MÉTODOS

MATERIAL E MÉTODOS

72 fêmeas bovinas da raça Holandês Preto e Branco;

Foram utilizadas somente fêmeas com mastite subclínica;

Diagnóstico de situação de mastiteMastite Clínica Mastite Subclínica

Identificação da bactéria causadora

Preparação dos meios de cultura

Agar Sangue MacConkey Agar BHI

Inoculação dos meios de cultura

Estudo morfológico da colônia

CAMP TEST

Preparo do Extrato de PrópolisColeta de própolis: raspagem manual e

posterior remoção de impurezas;Armazenamento: seca , ao abrigo da luz, calor

excessivo, predadores, poeiras e umidade.Estocada a uma temperatura de -4° C à -10°C;Solvente : Álcool de cereais a 70° GL ;EAP 30%: 30g de própolis bruta para cada

100mL de solvente, na proporção peso a peso

Preparo do Extrato de Própolis

Separação e filtração do extrato

PERÍODO DE INFUSÃO Duração: 30 dias;

O frasco foi protegido do calor e luz solar direta a fim de se prevenir fotodegradação

Realizou-se agitação diariamente, por 30 segundos, uma vez ao dia;

Última agitação, deixar decantar por três dias ou mais e remover por meio de sifão, o sobrenadante

ANÁLISE DO EXTRATO DE PRÓPOLIS

Análises Físico-químicas:Análises Físico-químicas:Extrato Seco (%);Compostos Fenólicos (%);Teor de Flavonóides em Quercetina (%); pH;• Propriedade Antioxidante:Solubilidade ao Acetato de ChumboSolubilidade ao Hidróxido de Sódio

TRATAMENTOSTRATAMENTOS

Grupo 1 ( Oral): 5mL de extrato alcoólico de própolis (EAP) a 30%, via oral, durante 7 dias consecutivos, após cada ordenha;

Grupo 2 ( Álcool): 5 mL de álcool de cereais a 70o GL , via oral, durante 7 dias consecutivos, após cada ordenha;

Grupo 3: Grupo 3: Imersão + OralImersão + Oral

Pré-dipping: 5mL EAP via oral + 5mL água filtrada e fervida com EAP

Pós-dipping: 5ml EAP via oral + 5mL glicerina líquida

Grupo 4Grupo 4

Grupo controle: não receberam tratamento

Análise dos dados

Teste não paramétrico Qui-quadrado em nível de 5% de probabilidade.

Medidas descritivas (média aritmética, desvio padrão e mediana com seus respectivos valores mínimos e máximos) do CMT segundo o grupo e o momento de avaliação

Grupo T 0 T 7 T 143,25 ± 0,89 3,00 ± 1,15 2,60 ± 1,37

4,00 (2,00-4,00) aA 3,00 (1,00-4,00) aA 2,00 (1,00-4,00) aA3,25 ± 0,88 3,62 ± 1,03 2,81 ± 1,28

3,50 (1,00-4,00) aA 4,00 (1,00-6,00) aA 3,50 (1,00-4,00) aA3,32 ± 0,85 3,04 ± 1,09 2,56 ± 1,22

4,00 (2,00-4,00) aA 3,00 (1,00-4,00) aA 2,00 (1,00-4,00) aA3,46 ± 0,71 3,30 ± 0,92 2,84 ± 1,12

4,00 (2,00-4,00) aA 4,00 (1,00-4,00) aA 3,00 (1,00-4,00) aA

Oral

Álcool

Controle

Oral e Imersão

Momentos de avaliação

Maiúsculo: comparação de momento dentro do grupo;Minúsculo: comparação de grupo fixado o momento;

Medidas descritivas da contagem de células somáticas CCS segundo o grupo e o momento de avaliação

Grupo T 0 T 7 T 14583,60 ± 668,61 574,67 ±693,74 134,32 ± 168,76

395,50 (2,00-2927,00) aB 314,50 (1,00-2980,00) aB 67,00 (1,00-664,00) a A514,00 ± 677,01 886,53 ± 1087,64 141,37 ± 190,60

263,50 (1,00-3229,00) aB 482,50 (48,00-5442,00) aC 41,00 (1,00-686,00) a A543,08 ± 547,59 589,68 ± 696,91 158,64 ± 426,59

394,00 (2,00-1977,00) aB 0394,00 (2,00-2306,00) aB 49,00 (1,00-2133,00) a A535,03 ± 511,93 528,46 ± 510,03 97,96 ± 111,71

402,50 (4,00-2090,00) aB 445,50 (1,00-2229,00) aB 65,00 (2,00-526,00) a A

Oral

Álcool

Controle

Oral e Imersão

Momentos de avaliação

Correlação CMT x CCS

Escores do CMT Viscosidade da mistura CCS (10³ cels/mL)Negativo e traços Ausente à leve até 500

+ Leve-moderada 500 à 1.000++ Moderada 1.000 à 5.000

+++ Intensa > 5.000Fonte: Adaptado de Barbosa, et al., 2002.

Correlação do CMT e CCS nos momentos avaliados: imediatamente anterior ao tratamento (T0), sete dias (T7) e 14 dias (T14) após o início dos tratamentos

A correlação foi de 0,71, 0,61 e 0,32 para os momentos imediatamente anterior à aplicação dos tratamentos, 7 e 14 dias após, respectivamente.

Associação Geral (111) Oral (28) Oral+Imersão (32) Alcool (25) Controle(26)CMTT0xCCST0 0,818 (P<0,001) 0,839 (P<0,001) 0,814 (P<0,001) 0,823 (P<0,001) 0,856 (P<0,001)CMTT7xCCS T7 0,850 (P<0,001) 0,839 (P<0,001) 0,580 (P<0,001) 0,721 (P<0,001) 0,838 (P<0,001)

CMTT14xCCST14 0,394 ( P<0,001) 0,532 (P<0,005) 0,588 (P<0,001) 0,265 (P>0,05) 0,124 (P>0,05)

Principais microrganismos isolados das amostras de leite

Microrganismos T0 T7 T14Staphylococcus ssp (%) 21(20,19) 25(24,03) 21(20,19)

Staphylococcus aureus (%) 44(42,30) 35(33,65) 42(40,38)Streptococcus agalctiae (%) 2(19,23) 4(3,84) 4(3,84)

Streptococcus dysgalactiae(%) 9(8,65) 13(12,50) 9(8,65)Streptococcus uberis (%) 15(14,42) 9(8,65) 4(3,84)

Streptococcus intermedius (%) 0(0,00) 2(1,92) 0(0,00)Corynebacterium bovis (%) 7(6,73) 11(10,57) 9(8,65)

Momentos Avaliados

Principais microrganismos isolados das amostras de leite

Análise Físico-química da Própolis

Variáveis Valores MAPAPeso Seco (mg/mL) 121,7 não estabelece

Extrato Seco (%) 13,7 não estabelece Compostos fenólicos (%) 55,5 no mínimo 0,50

Flavonóides (%) 11,92 no mínimo 0,25pH 5,08 não estabelece

Propriedade Antioxidante + +

CONCLUSÃO

Não foi possível observar diferenças entre os tratamentos;

Outros ensaios são necessários a fim de determinar dose, dosagem e vias da administração capazes de determinar seus benefícios terapêuticos in vivo.

OBRIGADA