gastroenterites virais lígia galhardi laboratório de virologia dep. microbiologia/ccb/uel

GASTROENTERITES VIRAIS

Lígia Galhardi

Laboratório de Virologia

Dep. Microbiologia/CCB/UEL

Associados a G-E:Associados a G-E:

• Rotavirus• Adenovirus entéricos (40, 41, 50 e 51)• Calicivirus• Astrovirus• Coronavirus• Torovirus

Vírus que infectam o intestino?

Infecção viral X doença

Não associados a G-ENão associados a G-E

• Polio• Coxsackie A e B• Echovírus• Enterovírus 68-71• Hepatite A e E• Adenovírus 1-39• Reovírus

Mais comuns:

Adenovírus

Calicivírus

Astrovírus

Norovírus - Norwalk

Rotavírus

Sapovírus

Cunliffe, N.A., et al. 2010. Healthcare-associated Viral Gastroenteritis among Children in a Large Pediatric Hospital, United Kingdom. Vol. 16, No. 1.

Epidemiologia:

Epidemiologia:

Kane EM, Turcios RM, Arvay ML, Garcia S, Bresee JS, Glass RI. The epidemiology of rotavirus diarrhea in Latin America. Anticipating rotavirus vaccines. Rev Panam Salud Publica. 2004;16(6):371–7.

Epidemiologia:

GASTROENTERITES VIRAIS

ROTAVÍRUS Família – Reoviridae Diâmetro: 65-75 nm 7 grupos (A, B, C) - subgrupos e sorotipos Virion:

Core (proteínas VP1, VP2 e VP3) Capsídeo interno (VP6 - grupos) Capsídeo externo (sorotipos)

VP7 - Sorotipo G (14) VP4 - Sorotipo P (12)

Classe I Classe II Classe III Classe IV

ROTAVÍRUS Ácido Nucléico – RNA df segmentado (11 genes) – 16.500 - 21.000 pb

REPRESENTAÇÃO ESTRUTURAL DO ROTAVÍRUS

ROTAVÍRUS

Modulação de Ca intracelular

Classificação fenotípica

(eletroforétipos) dos Rotavírus

Mutações ou rearranjos

Sorotipos (neutralização ou EIA) e genótipos (RT-PCR);

Classificação genômica e

sorológica dos Rotavírus grupo A

(Glicosilação)

(Proteólise)

1) Cepas mais comuns: G1P1A[8], G2P1B[4], G3P1A[8] e G4P1A[8] – (92% casos humanos).

2) Cepas circulantes no Brasil: G5, G8, G10, G12 E P3.

3) Cepas já identificadas em áreas em desenvolvimento: G3P8[11], G4P6[1], G4P8[11], G5P2A[6], G5P1A[8], G1P1A[8], G6P3[9], G6P11[14],

G8P6[1], G1P1A[8], etc.

Classificação genômica e

sorológica dos Rotavírus já

descritos

EPIDEMIOLOGIA - Sorotipos

R.Q. Gurgel et al. . Rotavirus genotypes circulating in Brazil before national rotavirus vaccination: A review Journal of Clinical Virology 43 (2008) 1–8

(Soares LS, et al. Molecular characterization of G1 human rotaviruses detected in

children from Belém, Pará, Brazil. Rev Pan-Amaz Saude 2010; 1(1):125-130):

G1P[8], G2P[4], G3P[8], G4P[8] and G9P[8].

Classificação genômica e sorológica dos Rotavírus grupo A

R.Q. Gurgel et al. . Rotavirus genotypes circulating in Brazil before national rotavirus vaccination: A review Journal of Clinical Virology 43 (2008) 1–8

VACINA No Brasil

DIAGNÓSTICO LABORATORIAL

Material: fezes

Coleta: entre o 1º e o 4º dia

Pesquisa do vírus: Microscopia eletrônica

Pesquisa de Antígeno Viral:

Imunofluorescência

Enzimaimunoensaio

Aglutinação em Látex

Eletroforese em gel de poliacrilamida (EGPA)

PCR

DIAGNÓSTICO LABORATORIAL

Pesquisa do vírus: Microscopia eletrônica

detecção dos RV em 80 a 90 % das fezes positivas

DIAGNÓSTICO LABORATORIAL

Imunoensaio enzimático

DIAGNÓSTICO LABORATORIAL

Imunocromatografia

DIAGNÓSTICO LABORATORIAL

Aglutinação em látex

DIAGNÓSTICO LABORATORIAL

EGPA

DIAGNÓSTICO LABORATORIAL

PCR

DIAGNÓSTICO LABORATORIAL

Isolamento do vírus em célula:

- rim de macaco (MA-104 e LLC-MK2) e de carcinoma de cólon intestinal

humano (Caco-2).

ECP em MA-104: aumento de refringência, seguido de redução do volume

citoplasmático, com formação de grumos celulares e células repuxadas, com

distribuição focal

Sorotipagem e neutralização

DIAGNÓSTICO LABORATORIAL

MA-104 cells, mock- (A, D and G), SA-11 (B, E and H) and 1154 (C, F and I) infected cells at 24, 48 and 72 hpi (lanes A, D and G), respectively