enumeração de coliformes totais e coliformes termotolerantes - professora samira mantilla.ppt
Post on 06-Mar-2016
255 Views
Preview:
TRANSCRIPT
-
Enumerao de coliformes totais e coliformes termotolerantes Professora Samira Mantilla
-
Importncia da enumerao de coliformes em alimentos
Microrganismos indicadores de condies higinico-sanitrias insatisfatrias: so grupos de mos que quando presentes em um alimento fornecem informaes sobre a ocorrncia de contaminao de origem fecal, sobre a provvel presena de patgenos.
-
Caractersticas de um bom indicador de contaminao fecalRpida e fcil deteco No deve estar presente como contaminante natural do alimentodeve estar presente quando o patgeno estiverAusente nos alimentos livres de patgenosHabitat exclusivo:trato intestinalOcorrer em nmeros altos nas fezes
-
Caractersticas de um bom indicador de contaminao fecalE. coli como indicador:
habitat: trato intestinal de animais
-
Caractersticas de um bom indicador de contaminao fecalEm alimentos processados, a presena de um nmero considervel de coliformes indica:Processamento trmico inadequado e/ou recontaminao ps processamentoProliferao microbiana que poderia permitir a multiplicao de mos patognicos
-
COLIFORMES TOTAIS OU GRUPO COLIFORME
Famlia EnterobacteriaceaeBastonetes Gram negativos, no formadores de esporos, fermentam a lactose com produo de cido e gs a 35-37C/24-48hExistem os fermentadores tardios de lactose!!!! Gneros:
Escherichia (s a E. coli tem como habitat primrio o trato intestinal)Enterobacter Citrobacter Klebsiella
-
COLIFORMES FECAIS (termotolerantes)
Os coliformes termotolerantes fazem parte do grupo coliformes totais.Caracterstica: continuam fermentando a lactose com produo de cido e gs quando incubados a 44,5 0,5C /24- 48h90% das culturas de E. coli so positivasApenas algumas cepas de Enterobacter e Klebisiella apresentam esta caractersticaE. coli (vrios sorotipos)
-
Escherichia coliCLASSIFICAO
ENTEROPATOGNICA CLSSICA (EPEC)ENTEROTOXIGNICA (ETEC)ENTEROINVASORA (EIEC) ENTEROHEMORRGICA (EHEC)FACULTATIVAMENTE ENTEROPATOGNICA (FEEC)ENTEROAGREGATIVA (EAggEC)
-
Enfermidade transmitida por alimentos EPECGastroenterite em crianasDores abdominais, vmito e febreDurao 6h a 3 diasCapacidade de adeso a mucosa intestinal- destruio das vilosidades intestinais
-
Enfermidade transmitida por alimentos EIECDisenteria, clicas abdominais, febre, mal estar, com eliminao de sangue e muco pelas fezesPI: 8-24h
-
Enfermidade transmitida por alimentos ETECCapazes de produzir enterotoxinasDiarria aquosa, febre baixa, doresa bdominais, nuseasForma mais severa: semelhante a clera: fezes tipo gua de arroz desidrataoPI: 8-44h
-
Enfermidade transmitida por alimentos EHECGado reservatrio naturalSintomas:
E. coli: O157:H7 doena do hamburguerProduo de citotoxinasColite hemorrgica: dores abdominais severas e diarria aguda, seguida de diarria sanguinolenta, sem febrePI: 3-9 diasPode evoluir para sndrome urmica hemoltica (grave)
-
TESTES DA COLIMETRIADividido em:
PRESUNTIVOCONFIRMATIVO COMPLETO
-
Teste presuntivoEste teste realizado tanto para coliforme total como para coliforme fecal.Caldo Lauril Sulfato Triptose (LST) com tubos de Durham invertidos trs sries de trs tubosIncubao :35-37C por 24-48 h. Leitura: Os coliformes utilizam a lactose produzindo cido e gs, sendo este detectado no teste presuntivo atravs da reteno de gs no tubo de Durham.
-
Teste confirmativo para Coliforme Total
Os tubos positivos no teste presuntivo so semeados em Caldo Verde Brilhante Bile Lactose (VBBL) com tubos de Durham em seu interior Incubao:35-37C por 24-48 h. Leitura: os tubos com produo de gs = positivos no teste confirmativo. Clculo do Nmero Mais Provvel (NMP) para ColiformesTotais.
-
Exemplo de Resultado: 10-1 10-2 10-3 3 2 3NMP/g = Nmero da tabela x FDI 100
290 x 102 = 290 = 2,9 x 102 NMP/g 100
-
Teste confirmativo para Coliforme Fecal (coliformes termotolerantes)
Tubos positivos no teste presuntivo - Caldo Escherichia coli (EC) contendo tubos de Durham em seu interior. Incubao: 44,5 0,5C por 24-48 h. Leitura: os tubos com produo de gs = + para o teste confirmativo. Clculo do Nmero Mais Provvel (NMP) para Coliformes a 45C.
-
Teste completoColiformes TotaisOs tubos positivos no teste confirmativo (VBBL) foram semeados para o meio EMB (Eosina Metileno Blue) - possui sais biliares que inibem o crescimento de bactrias Gram (+), favorecendo o crescimento das Gram (-). A placa foi dividida de acordo com o nmero de diluies positivas no VBBLSemeadura por estriamento do inoculo no meio de cultura. incubao foi a 35-37C por 24hLeitura: As UFC so petras com ou sem brilho verde metlico (suspeita de E. coli), os outros CT (Enterobacter, Citrobacter e Klebisiella) apresentam UFC mucides e com tendncia a se conflurem.
-
gar EMBKlebisiellaEnterobacter
-
Teste completoColiformes fecaisOs tubos positivos no teste confirmativo (EC) so semeados para o meio EMB incubao :35-37C por 24 h.Leitura: As UFC so pretas com brilho verde metlico (suspeita de E. coli).
-
Enumerao de E. coliAps o teste completo segue-se para o :IMVICAs UFC tpicas para coliformes fecais, so transferidas com agulha flambada para o meio gar nutriente inclinado, sendo incubado em estufa 35-37C por 24 h, para posterior realizao da bioqumica (IMVIC): prova do indol, Prova do vermelho de metila (VM), prova do Vorges Proskauer (VP), prova do citrato
-
FIM
top related