Vacinas: das vacas as vacinas

recombinantes

Prof. Fabricio Rochedo Conceição fabricio.rochedo@ufpel.edu.br

04 de junho de 2013

Graduação em Biotecnologia Disciplina de Biotecnologia Microbiana II

O que é uma vacina?

Produto biológico produzido pelo homem que contém um ou

mais agentes imunizantes capazes de induzir uma resposta

imune em indivíduos suscetíveis

Por que vacinar?

Prevenir é melhor do que remediar!

“ A utilização de vacinas eficientes impede que um indivíduo seja

acometido por uma determinada doença, além de ser o meio

mais econômico para isso. Além disso, a vacinação beneficia

também os indivíduos não imunizados”

Figure 1-33

Figure 14-22

Tipos de vacinas

1. Replicante ou atenuada

2. Inativada ou morta

3. Subunidade

4. Toxóide

5. Recombinante

Biotecnologia convencional

Biotecnologia moderna

“DNA recombinante”

Vacinas recombinantes

• Produzidas mediante tecnologia de DNA recombinante

• Tipos: Subunidade, Vetorizada ou Gênica (DNA)

• Para humanos: Hepatite B, HPV

• Para animais: Raiva (vaccinia virus), Leucemia felina (canarypox virus), Doença de Marek e Doença de Newcastle (herpesvírus de peru), Cinomose, Leishmaniose...

Vacinas de subunidade

Recombinant clones

Mais de 120 produtos terapêuticos recombinantes

Insulina, fatores de coagulação, hormônio do crescimento, interferons, vacina hepatite B...

Vacinas vetorizadas

Vacinas gênicas (DNA)

Produção de vacinas

1. Seleção de cepas ou antígenos

2. Preservação de cepas

3. Multiplicação

4. Purificação

5. Inativação ou atenuação

*Operações Unitárias

1. Seleção de cepas ou antígenos

Sorotipos

Streptococcus pneumoniae: + 90

Cápsula

Streptococcus pneumoniae sorotipos 1, 4, 5, 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 19F e 23F

VACINA PNEUMOCÓCICA DECAVALENTE

A defesa do hospedeiro contra o

Streptococcus pneumoniae é tipo-específica.

2. Preservação de cepas

Liofilização

Nitrogênio líquido -196

Ultrafreezer -80

3. Multiplicação

- Meios de cultivo (25 a 3500 L)

- Fermentação (bioreatores, tipos de fermentação)

- Ampliação de escala (scale up)

Relação volume meio – capacidade do frasco 0,2 (20%)

Inóculo – 5 a 10%

Cultivo celular

Ovos entre 7 a 19 dias Estático

Homogênio

Células renais de bovino – cultivo primário

Efeito citopático – 30 h

Efeito citopático – 48 h

4. Purificação

4. Purificação

Centrífugas

4. Purificação

Cromatografia

Figure 14-24 5. Atenuação

Os vírus são tradicionalmente atenuados pelo crescimento

seletivo em células não humanas

Figure 14-25 5. Atenuação

* A atenuação pode ser obtida de

forma mais rápida e

confiável pelo emprego de técnicas

de DNA recombinante

5. Inativação

• Métodos físicos

* calor

* ultravioleta

• Métodos químicos

* Formaldeído

* Agentes alquilantes (-propiolactona, etieneimina)

Ligam cruzadamente as cadeias de ácido nucléico

• Estabilizantes

• Conservantes

• Adjuvantes

Controle de vacinas

• Inocuidade

• Pureza

• Esterilidade

• Eficácia

- sorologia

- desafio

ETAPAS DE DESENVOLVIMENTO

TECNOLÓGICO DE VACINAS

-

~= 10-20 anos

Descoberta

- 1 -

Estudos

Experimentais

- 2 -

Estudos

Clínicos

- 3 -

Scale-up

- 4 -

Estudos Clínicos Fase I

- 5 -

Estudos Clínicos Fase II

- 6 -

Estudos Clínicos Fase III

- 7 -

Registro

- 8 -

Produto - 9 -

Fase IV

- 10 - Características: multidisciplinar; longo período de maturação; alto risco

de investimento.