1. 1. PRODUTOS DE ORIGEMPRODUTOS DE ORIGEM BIOTECNOLGICA APLICADOSBIOTECNOLGICA APLICADOS CADEIA PRODUTIVA DO CAF CADEIA PRODUTIVA DO CAF Sara MariaSara Maria ChalfounChalfoun XIX Simpsio de Pesquisa dos Cafs do Brasil Sara MariaSara Maria ChalfounChalfoun Pesquisadora EPAMIGPesquisadora EPAMIG
2. 2. Dvida histrica da cafeicultura Cultivo no sustentvel do caf gera consequncias - Contaminao lenol fretico (com os defensivos e os fertilizantes usados na lavoura) - Diminuio da rea florestal (desmatamento) - Alteraes climticas, intoxicao pelo uso de agrotxicos Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR - Alteraes climticas, intoxicao pelo uso de agrotxicos - Degradao do patrimnio gentico, - Degradao dos solos (plantaes de caf sem realizar as curvas de nvel) - Poluio dos mananciais, etc
3. 3. Novo Cenrio Um novo cenrio no qual o caf, como maior riqueza brasileira, precisa ser exemplo em conscincia ambiental, sendo precursor em sustentabilidade. Imposio de mudana pela alterao no perfil dos consumidores, cada vez mais conscientes quanto a aspectos de segurana aplicados a todos os elos da cadeia produtiva.
4. 4. Viso de futuro 1 Avanar mais no caminho da sustentabilidade 2 Sanar conflitos localizados entre 2 localizados entre cafeicultura e questes sociais 3 Sanar conflitos localizados entre cafeicultura e questes ambientais Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
5. 5. Oportunidades e desafios 1 Rever o modelo de cultivo vigente,fortemente dependente de produtos qumicos. 2 Aprimorar as tecnologias Curitiba/PR Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun 2 tecnologias alternativas ou complementares. 3 Pesquisar, desenvolver e ofertar produtos de origem biotecnolgica.
6. 6. Vantagens da utilizao de microrganismos No h necessidade de grandes locais para o seu desenvolvimento; Fatores de crescimento como pH, concentrao de nutrientes,oxignio podem ser facilmente manipulados. Conseguem degradar e crescer em variados substratos, inclusive resduos agroindustriais. Possuem rpido crescimento em condies favorveis, podendo, em relao aos fungos, a populao dobrar em um intervalo de 4 a 12 horas, as leveduras de 1 a 3 horas e as bactrias de 0,5 a 2 horas.leveduras de 1 a 3 horas e as bactrias de 0,5 a 2 horas. Podem ser manipulados geneticamente. (Bravo et al.,2000) Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
7. 7. Critrios para a seleo de um agente biolgico Geneticamente estvel Efetivo em baixas concentraes Vigoroso Desenvolvimento em condies ambientais adversas Desenvolvimento em meio de baixo custoDesenvolvimento em meio de baixo custo Ser facilmente transportado e armazenado No ser prejudicial ao homem Compatvel com tratamentos qumicos e fsicos do produto No ser patognico ao hospedeiro Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
8. 8. Critrio para a seleo de agentes biolgicos - bioprocessos Elevada atividade capaz de converter rapidamente o substrato em produto com altos rendimentos Estabilidade sob condies ambientaisEstabilidade sob condies ambientais extremas (elevada presso osmtica do meio, elevada temperatura, elevada fora inica ). Tolerante a substncias txicas que podem ser geradas no processo de tratamento da matria prima ou encontradas em resduos e efluentes. Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
9. 9. Definir o produto de interesse:enzimas,cidos orgnicos,etc. Selecionar e melhorar os isolados produtores. 4 1 Seleo de agentes biolgicos- bioprocessos com clulas vivas Identificar, na literatura,agentes biolgicos portadores das caractersticas desejadas ou com potencial para possu-la. Adquirir os isolados de colees de culturas e/ou isolar amostras naturais. 23 Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
10. 10. Melhoramento de isolados produtores Tcnicas de Biologia Molecular e Engenharia Metablica para maximizar as propriedades desejveis. Ex.penicilina tcnicas deEx.penicilina tcnicas de mutao e otimizao do processo fermentativo- aumento do rendimento de 0,06 a 26gL Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
11. 11. Produtos biotecnolgicos para cadeia produtiva do caf-oportunidades e desafios Melhor aproveitamento de fertilizantes fosfatados-inoculantes. Preservao da qualidade-microrganismos competitivos. Controle de pragas e doenas-bioinseticidas e bionematicidas. Melhoria de processos - acelerador da desmucilagem / biofiltros Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
12. 12. A Biofbrica foi instalada na Universidade Federal de Lavras, Minas Gerais como parte do Programa de Inovao (PI) da UFLA (2007). ESTRUTURA Inovao (PI) da UFLA (2007). Startup Tbio, criada para dar suporte para a proteo, registro e comercializao dos produtos, baseado no fato que tem sido demonstrado que universidades e institutos de pesquisa podem criar com sucesso start-ups de alta tecnologia(De-Jin Su, D.; ALI, M.; and SOHN, D.,2011). Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
13. 13. Normas e Padres Anlises dos produtos so conduzidas segundo protocolos padronizados e reconhecidos, devidamente documentados (POP, 5S,etc) Se necessrio utilizar recursos estatsticos e matemticos (clculos de ndices, grficos, tabelas, diagramas, para realizao de inferncias). Anlises de interesse conduzidas na prpria instituio (EPAMIG/UFLA) ou em laboratrios de referncia. Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
14. 14. Avaliao de qualidade dos produtos biolgicos Contagem dos esporos mnimos 1x10 condios/g Germinao mnima80% 8 Viabilidade mnima 8,5x10 UFC/g Vida de prateleira 30 180 dias Temperatura ambiente Vida de prateleira 180 360 dias Geladeira /cmara fria (4- 6C) 7 Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
15. 15. Tipos de produtos de origem biotecnolgica para cadeia produtiva do caf Bioprotetor da qualidade do caf. Solubilizador de fsforo. Bioinseticida / bionematicida. Biorremediador adsoro de metais. Bioprodutos ou produtos biolgicos Biorremediador adsoro de metais. Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR Produtos de origem biolgica Acelerador da desmucilagem. Bioinseticida / bionematicida. Biossurfactantes.
16. 16. Bioprodutos ou produtos biolgicos Primeiro relato Bitancourt,1957. Agente bioprotetor da qualidade do caf Cladosporium apresentava um comportamento diferente dos outros fungos; ele no era encontrado no solo, mas no campo associado ao Pesquisas relativas a relao microrganismos e qualidade do caf,EPAMIG,1989. fungos; ele no era encontrado no solo, mas no campo associado ao caf mais seco na planta. Nas regies de elevada umidade relativa do ar, havia menor incidncia de Cladosporium e a qualidade era pior, o contrrio ocorrendo em regies de clima seco. Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
17. 17. Bioprodutos ou produtos biolgicos Agente bioprotetor da qualidade do caf Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
18. 18. Estabelecimento da Qualified Presumption of Safe(QPS). Sistema da EU correspondente ao sistema Generally Recognized as Safe(GRAS) dos EUA. Agente bioprotetor da qualidade do caf Qualified Presumption of Safe(QPS) 1.Identificao Taxnomica Gnero Espcie 2. Familiaridade Experincia prtica Compreenso e previso de ausncia de efeitos adversos 3. Finalidade Ao sobre os frutos na planta Ao durante a secagem Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
19. 19. Verde Cana (25%) Agente bioprotetor da qualidade do caf Dinmica de colonizao do Fungo Cereja Passa Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
20. 20. Agente bioprotetor da qualidade do caf Modo de Ao Simples presena fsica do microrganismo inibindo o desenvolvimento de outras populaes microbianas a mais provvel. Produo de antibiticos. Parasitismo e hiperparasitismo. Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
21. 21. Agente bioprotetor da qualidade do caf Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
22. 22. Agente bioprotetor da qualidade do caf Formas de utilizao Manejo da ocorrncia natural. Introduo ou reintroduo do microrganismo. Utilizao de 2L de suspenso de esporos na concentrao de 1x10 / 8 Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR Utilizao de 2L de suspenso de esporos na concentrao de 1x10 / ha Uso de duas aplicaes com intervalo de 30 a 45 dias, sendo a primeira aplicao no incio da maturao dos frutos
23. 23. Agente bioprotetor da qualidade do caf Produo Bioprotetor da qualidade: fase de produo massal(esquerda) e produto para teste(direita). Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
24. 24. Agente bioprotetor da qualidade do caf Apresentao do Bioprotetor Suspenso concentrada de esporos contendo no mnimo 1x10 esporos/ml de suspenso. 8 Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
25. 25. Produto de origem biolgica O acelerador da desmucilagem do caf, um pool de enzimas obtido de microrganismos selecionados. Acelerador da desmucilagem do caf Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
26. 26. Acelerador da desmucilagem do caf- vantagens Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
27. 27. Acelerador da desmucilagem do caf Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
28. 28. Bioprodutos ou produtos biolgicos Solubilizador de fosfato Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR Fonte: ANDA
29. 29. Solubilizador de fosfato Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
30. 30. Relevncia da pesquisa O avano com as pesquisas nesta tecnologia pode ter alto impacto econmico na agricultura nacional , incluindo a cafeicultura devido a diversos fatores. Os principais seriam a reduo da dependncia do pas a fertilizantes Solubilizador de fosfato microrganismos selecionados Os principais seriam a reduo da dependncia do pas a fertilizantes qumicos processados, o uso em larga escala de reservas nacionais de fosfato de baixa reatividade (Gomes et al., 2010). Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
31. 31. Solubilizador de fosfato Assim, caso algumas limitaes forem superadas em condies de campo, a inoculao com um nmero alto de microrganismos pode fazer com que as plantas recebam mais benefcios da Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR as plantas recebam mais benefcios da solubilizao dos fosfatos por estes (Rodrgues & F& Fraga, 1999).
32. 32. Solubilizador de fosfato Questes tcnicas para a produo de inoculantes Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
33. 33. Solubilizador de fosfato Questes tcnicas para a produo de inoculantes Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
34. 34. Resultados indicativos Solubilizador de fosfato 16% - Aumento na altura da planta 90% - Aumento nmero de vagens 66% - Aumento nmero de gros por planta 57% - Aumento peso dos gros 59% - Aumento de Fsforo na planta Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
35. 35. Produtos biolgicos/origem biolgica Bionematicida Nematides na cafeicultura geram prejuzos econmicos: Reduo de 15% na produo mundial Reduo de at 75 % Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR mundial Reduo de 20% na produo brasileira de at 75 % em algumas regies Fonte: IAPAR (Dhalton Shiguer Ito)
36. 36. Produtos biolgicos/origem biolgica Bionematicida Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR Danos Clorose; Depauperamento das plantas; Crescimento desigual; Alteraes das caractersticas da cultivar; Reduo na capacidade produtiva; Morte da planta; Fonte: IAPAR (Dhalton Shiguer Ito) Foto: Experimento Tbio
37. 37. Etapas de execuo da pesquisa Determinar o potencial de produo de metablitos a partir de uma coleo de fungos- literatura e novos. Determinar tratamentos mais eficazes no controle do nematide Bionematicida Meloidogyne paranaensis Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR Determinar tratamentos mais eficazes no controle do nematide Meloidogyne paranaensis, em condies de laboratrio e casa de vegetao-controle biolgico e produtos de origem biolgica. Desenvolvimento de uma formulao eficaz e econmica. Testes em condio de campo (dependendo de registro).
38. 38. Resultados indicativos Bionematicida Meloidogyne paranaensis Gneros Testados Beauveria Lecanicillium Pleurotus Penicillium + Metablitos Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR 23% - Reduo da taxa de ecloso 100% - Imobilidade do J2 em 24h Penicillium Cladosporium
39. 39. Resultados indicativos Bionematicida Meloidogyne paranaensis Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
40. 40. Produtos biolgicos/origem biolgica Bioinseticida para broca-do-caf Prejuzos qualitativos abertura de porta Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR abertura de porta de entrada para microrganismos
41. 41. Bioinseticida para broca-do-caf Os prejuzos quantitativos - perda de peso de 20% do caf beneficiado. Prejuzos causados pela broca- do-caf Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR Outro prejuzo no tipo de caf produzido, j que 2 a 5 sementes broqueadas constituem um defeito.
42. 42. Etapas de execuo da pesquisa Determinar o potencial de produo de metablitos a partir de uma coleo de fungos- literatura e novos. Determinar tratamentos mais eficazes no controle da praga, em Bioinseticida para broca-do-caf Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR Determinar tratamentos mais eficazes no controle da praga, em condies de laboratrio-controle biolgico e produtos de origem biolgica. Desenvolvimento de uma formulao eficaz e econmica. Testes em condio de campo (dependendo de registro).
43. 43. Bioinseticida para broca-do-caf Beauveria bassiana Resultados da literatura 47 isolados - ndices de eficincia chegaram a 86,7% eleitos dez diferentes isolados de fungo. Teste em campo, quatro melhores isolados foram experimentados no municpio de Machadinho do Oeste, em Rondnia. Processo de avaliao da tecnologia por meio de testes das diferentes (Jose Nilton Medeiros Costa,Embrapa Rondnia,2009) Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR Processo de avaliao da tecnologia por meio de testes das diferentes concentraes e pocas de aplicao.
44. 44. Bioinseticida para broca-do-caf Resultados indicativos mortalidade brocas em laboratrio 76,6% a 100% Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR Desenho base: EPAMIG 100% Fase inicial dos testes em campo Tratamento com Inculos Tbio 006 e 007 METABLITOS
45. 45. Bioinseticida para broca-do-caf Resultados indicativos Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
46. 46. Empresas com linha de produtos biolgicos - Brasil Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
47. 47. Parceiros Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
48. 48. Pesquisadores que apoiam Lus Roberto Batista- taxonomia de fungos, micotoxinas/UFLA Disney Ribeiro Dias-Enzimologia/UFLA Sonia Maria Salgado- Nematologia/EPAMIG Ana Maria Meneguim Entomologia/IAPAR-PR Douglas Ramos Guelfi Silva Fertilidade do Solo/UFLA Mario Lcio Villela-Fitopatologia/UFLA Jlio Csar de Souza-Entomologia/UFLA Clayton Grillo Pinto Consultor em Cafeicultura Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
49. 49. Equipe tcnica e administrativa Samantha Brettas Administrao Igor Chalfoun C.Computao Fernanda Costa Biologia Douglas Tostes Agronomia EQUIPE Lus Roberto Batista- taxonomia de fungos, micotoxinas/UFLA Disney Ribeiro Dias-Enzimologia/UFLA Sonia Maria Salgado- Nematologia/EPAMIG Ana Maria Meneguim Entomologia/IAPAR-PR Douglas Ramos Guelfi Silva Fertilidade do Solo/UFLA Mario Lcio Villela-Fitopatologia/UFLA Jlio Csar de Souza-Entomologia/UFLA Clayton Grillo Pinto Consultor em Cafeicultura Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR Douglas Tostes Agronomia Lvia Fonseca Agronomia Carolina Rezende - Biologia
50. 50. Perspectivas Futuras Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR
51. 51. Base cientfica Autor (a) Ttulo Tipo e Local BATISTA, L. R. ; CHALFOUN, S. M. ; PRADO,G. Identificao de espcies toxignicas de Aspergillus associadas aos gros de caf.. Revista Brasileira de Armazenamento. Viosa-MG, n.3, p. 11-16, 2001 CHALFOUN, S. M. ; CUNHA, Rodrigo Luz da ; CARVALHO, V.L. de. Seletividade de fungicidas ao fungo Cladosporium cladosporioides em cafeeiros. Summa Phytopathologica, Botucatu-SP, v. 33, p. 85-87,2006 CHALFOUN, S. M. et al. Seletividade de fungicidas cpricos e sistmicos sobre o fungo Cladosporium cladosporioides em cafeeiro. Summa Phytopathologica, Botucatu, v. 33, n. 1, p. 93-95. 2007. ELISEI, V.G. Avaliao da viabilidade de fungos encapsulados e armazenados em diferentes temperaturas. Dissertao (Mestrado em Microbiologia Agrcola) Universidade federal de Lavras, Lavras, 2009. SILVA,JF ; CHALFOUN, S. M. . Isotermas de biossoro de cobre(Cu2+) em utilizando o resduo de escria como meio Congresso Latino Americano y del Caribe de Ingenieria Agricola, 2010, Vitria. Congresso Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR utilizando o resduo de escria como meio suporte e o fungo Cladosporium cladosporioides como biomassa. Ingenieria Agricola, 2010, Vitria. Congresso Latino Americano y del Caribe de Ingenieria Agricola. Vitoria: INCAPER, v. 1. p. 849- 852.2010 CHALFOUN, S. M. Biological control and bioactive microbial metabolites: a coffee quality perspective. Cincia e Agrotecnologia, Lavras, v. 34, n. 5, p. 1071-1085, set./out. 2010. Costa, L.M.A.S. Tese (Doutorado em Cincia dos Alimentos - Universidade Federal de Lavras/UFLA) - Universidade Federal de Lavras. C aracterizao de isolados e produo de cido ctico por Aspergillus niger. Tese (Doutorado em Cincia dos Alimentos - Universidade Federal de Lavras/UFLA) - Universidade Federal de Lavras.2011. Anglico, C.L. Aplicao do agente biolgico Cladosporium cladosporioides(Fresen) de Vries "Cladosporin"como bioprotetor da qualidade do caf(Coffea arabica L.). Tese (Doutorado em Cincias dos Alimentos) - Universidade Federal de Lavras.2012
52. 52. Base cientfica Autor (a) Ttulo Tipo e Local Bastos. S.C. 2012. Tese (Doutorado em Cincias dos Alimentos) - Universidade Federal de Lavras. Pectinases de Cladosporium cladosporioides(Fres.)de Vries:condies de cultivo, purificao e caracterizao. Tese (Doutorado em Cincias dos Alimentos) - Universidade Federal de Lavras.2012 FERNANDES, A.P. Utilizao de resduos de processamento via seca e via mida de caf na obteno de pectinases. Tese (Doutorado em Cincias dos Alimentos) - Universidade Federal de Lavras.2013 BASTOS, S.,C. ; PIMENTA, C. J. ; DIAS, D. R. ; CHALFOUN, S. M. ; ANGLICO, C. L. ; TAVARES, L. S. . Pectinases from a New Strain of Cladosporium cladosporioides (Fres.). World Journal of Agricultural Sciences (Print), v. 9, p. 167-172, 2013. CARMO, J. R. ; PIMENTA, C. J. ; SILVA, J. F. DA ; CHALFOUN, S.M. Recovery of copper (II) absorbed in biomass of Cladosporium cladosporioides. Scientia Agrcola (USP. Impresso), v. 70, p. 147-151, 2013. ELIZEI, V. G. ; BOTELHO, D.M.S. ; Imobilizao de fungos filamentosos com Arquivos do Instituto Biolgico (Impresso), v. Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR ELIZEI, V. G. ; BOTELHO, D.M.S. ; REBELLES, Pedro Paulo Reis ; CHALFOUN, S. M. . Imobilizao de fungos filamentosos com potencial para uso agroindustrial. Arquivos do Instituto Biolgico (Impresso), v. 81, p. 165-172, 2014 Pereira,A.R.B. ; Soares,C.R.F. ; SILVA, J. F. ; SILVA, M. ; CHALFOUN, S.M.. Removal of trace element by isolates of Aspergillus brasiliensis EPAMIG 0084 and Penicillium citrinum EPAMIG 0086 in biofilters. African Journal of Biotechnology, v. 13, p. 3759-3773, 2014. BERMEJO, L. P. S. ; BOTELHO, D.M.S. ; SOUZA, S. M. C. . Antifungal activity of extracts of Cladosporium cladosporioides(Fres) de Vries. JOURNAL OF PURE AND APPLIED MICROBIOLOGY, v. 8, p. 2791-2799, 2014. COSTA, L. M. A. S. ; SOUZA,S.M.C.de ; ABREU, P. S. ; BASTOS, S.,C. ; NASCIMENTO, M. N. ; MALLET, A. C. T. . Citric acid production and citrate syntase genes in distinct strains of Aspergillus niger. African Journal of Biotechnology, v. 13, p. 2220-2226, 2014.
53. 53. Produtos de origem biotecnolgica para a cadeia produtiva do caf - Sra Chalfoun Curitba/PR