CAT NQ01400Samente paraUsa in Vitro

COLESTEROLMETODa ENZlMA TICO

DEFINIC;AOo teste e feito no soro para a determinac;;ao do nivel de Iipidio que e produzido nofigado.o Colesterol esM presente nos gl6bulos vermelhos e musculos, mas a maioria doColesterol esta combinado com os acidos graxos no sangue circulante.Existe 0 Coiesterol HDl (bom Colesterol) e 0 lDl (mau Colesterol). As pessoas comaltos nlveis de lDl him grande risco de doenc;;asdo corac;;ao.

FISIOPATOlOGIAo Colesterol e necessario na digestao das gorduras, forma9ao dos hormonios adrenal,ova riano e testosterona.

SIGNIFICADO CLiNICOValores elevados - tnfarto do· miocardio, obstruc;;ao do tracto biliar, nefrose,hipotireoidismo, 32 trimestre de gravidez, dieta rica em Colesterol.Valores baixos - Sindrome de Cushing, Desnutric;;ao, Hipertireoidismo, Infecc;;oesagudas, Anemia e Cirrose.

INTERFERENCIAFalso valor alto - Ester6ides, anticoncepcional oral, bromatos, fenotiazinasulfonamidas, fenitoina, aspirina, epinefrina.Falso valor baixo - Ester6ides aspirina, canamicina, neomicina, tetraciclina,estr6genos, heparina, colchicina, agentes antidiabeticos.

METODOEnzimatico, Colesterol Oxidase, Colorimetrico e de Ponto Final.

L1NEARIDADE E ESTABILIDADE DA REAC;:AOA reac;;ao e linear ate 500 mg/dl. Para resultados com valores superiores, diiuir asoluc;;ao colorida final 1:2 ou 1:4 com 0 Reativo de Trabalho e multiplicar 0 resuitadopelo fator da dilui9ao utilizada. A cor final da reac;;aoe estavel por 120 minutos.

COMPOSIC;:AO DO KITReativo Padrao CAT N: 01401Soluc;;aode Colesterol (200 mg/dllVolume = 4 mlReativo Enzimatico CAT N.o 01402Lipase 2300 U/mlCOD 23 U/mlPOD ~ 20 U/mlVolume = 5 mlReat'vo cie Coo(i iGAT-rU 0;-4054 aminofenazona 0,025 mol/lVolume = 13 mlReativo de Cor (2) CAT N.- 01404Fenol 0,055 mol/lVolume = 13 mlAtenc;;ao:0 reativo (2) e t6xico e irritante.

MATERIAL NAO FORNECIDO (NECESSARIO)Agua deionizada.Espectrofotometro ou Colorlmetro.Micropipetas, pipetas e provetas capazes de medir os volumes indicados na tecnica.Tubos de ensaio para 0 aparelho a ser utilizado. Frasco de vidro ambar.Banho-maria 37°C.Rel6gio ou cronometro.

Todos os reativos vem prontos para usoN.o de prQvas Rvo. 1 Rvo. H2O Rvo. (2) RVQ. Enzimatico

10-20 0,5 mL 19mL 0,5mL 0,2 ml20 - 40 1 mL 38 mL 1 ml 0,4 ml

80 - 160 4 mL 152 mL 4 ml 1,6 ml250 - 500 12,5 mL 475 ml 12,5 mL 5,0 mL

o Reativo de trabalho e estavel por urn mes, quando refrigerado e acondicionado emfrasco ambar (colocar 0 r6tulo auto-adesivo com a data de prepara9ao).

ESTABILIDADE DO REATIVO DE TRABALHOLeituras de Biank aciffla de O•.i60 ern ausorbancia indiGdifr uetedCJfar;80 do Reativo deTrabalho. Neste caso despreza-Io.

CONCENTRAC;:AO DO REATIVO DE TRABALHOLipase ~ 6000 U/lCOD ~ 60 U/lPOD ~ 400 U/lRvo (1) = 0,00125 mol/lRvo (2) = 0,00275 mol/LPH =7,4±0,1

VIDA UTIL E ARMAZENAMENTOo kit e estavel ate seu vencimento indicado na caixa, quando mantido refrigerado.Evitar deixa-Io a temperatura ambiente por period os prolongados, impedindo assim adeteriorac;;ao das enzimas.

PRECAUC;:OESo kit mio contem derivados de sangue humano, porem, considerar qualquer amostrade paciente como potencial mente infectante. Evitar 0 contato direto com as amostras.Nao pipetar reagentes ou amostras corn a boca .Descartar as sobras das reac;;oesde acordo com as Boas Praticas de laborat6rio emlocal pr6prio para materiais potencial mente infectantes.

AMOSTRASoro ou Plasma heparinizado.Outros anticoagulantes interferem no resultado final. Naousar amostras visivelmenle hemolisadas. As amostras podem ser guardadasrefrigeradas antes da dosagem por uma sernana ou por dois meses congeladas.

TECNICAColocar em 3 tubos de ensaios marcados: B (blank), P (padraO) e D (desconhecido)

B P D20 ~llPadrao

DesconhecidoRvo Trab.

Incubar a 37° C por 10 minutos.Retirar do banho-maria e ler em Espectrofotometro a 505 nm ou ern fotocoiorimetrocom filtro verde (490-530 nm), zerando 0 aparelho em Absorbancia com B (blank).A cor e estavel por 120 minutos.Nota: Os volumes de amostra e Rvo de Trabalho podem ser modificados

proporcionalmente .Ex.: 10 ;ll de amostra + 1 ml de Rvo de Trabalho ou 50 IIIdeamostra + 5 mL de Rvo de Trabalho, etc.

CALCULOSColesterol mg/dL = 0 x f

200mg/dL

p

VALORES DE REFERENCIADesejavel: Inferior a 200 mg/dLLimitrofe: de 200 a 239 mg/dlElevado: superior a 239 mg/dl

INTERFERENCIASOS deteroentes. metais oesados e os cianetos sao inibidores enzimaticos.. Uma

peffeita IimpeZa de vidraria utilizada enecessaria.Utilizar agua deionizada ou destilada recente no preparo de Reativo de Trabalho . 0nlvel de agua no banho-maria deve ser superior ao dos tubos de ensaio que contam asrea90es. A temperatura e 0 tempo de rea9ao nao sao criticos: 3rC ± 2 e 10 a 20minutos.A turvac;;aoque pode ser observada na incuba9ao e devida ao tensoativo incorporado,mas, desaparece quando os tubos esfriam.

Caracterlstlcas de desempenhoRecupera9aoForam feitos estudos de recupera9ao, utilizando 20 amostras de concentra90esconhecidas, adicionando quantidades de colesterol determinadas, obleve-se umarecupera9ao entre 98 e 101% para todo nivel de colesterol em estudo.

PrecisaoIntra-ensaio: Foram testadas 5 amostras em 10 replicatas, durante um ensaio, para 0nivel de colesterol indicado, os resultados obtidos foram os se9uintes:Media em mg/dl = 160 mg/dlCoeficiente de variac;;ao (CV %) = 3,0 %Entre-ensaios Foram testadas replicatas de 5 amostras em 10 ensaios diferentes,para 0 nivel de cole sterol indicado, os resultados obtidos foram os seguintes:Media em mg/dl = 290 mg/dlCoeficiente de variac;;ao(CV%) = 2,7%

EstabilidadeOs estudos de estabilidade efetuados em um lote durante 0 perlodo desde afabrica9ao ate a data do vencimento, utitizando padroes com concentra90esconhecidas de colesterol, determinaram que nao houve alterac;;ao dos resultadosquando 0 kil e esiocauo em gE:ldJeira. Os resultados variar"am ria faixa de +-2'Y~de.valor esperado. Ap6s 0 vencimento esses valores vao se alterando progressivamente.Portanto, recomenda-se nao utilizar 0 kit ap6s a data de validade especificada nasembalagens do kit.

APRESENTACAOKit suficiente para 0 preparo de 500 mL de Reativo de Trabalhorea90es (1 mL)

BIBLIOGRAFIA1 - Abell, L.L.; Levy, B.B.; Brodie, B.B., Kendall, F.E :J. BioI. Chem195:357 (1952)2 - Trinder, P .• Ann. Clin. Biochem. 6/24 (1969)3 - Castelli, W.P. - Current Prescribing 6/77: 39 (1977)

REG. M. S N.o 10246810011LABORLAB PRODUTOS PARA LABaRATORIOS LTDA.Fone: ( 11) 6480-1306 ( Central de Atendimento ao Cliente)

REV.O:Estr. do Capao Bonito, 937 07263-010 - Guarulhos - SP CNPJ 72807043/0001-94

Resp. Tee.: Ugia Monaro da Silva CRBM 1£ Regiao N2 2573

CAT NQ02300Somente paraUso in Vitro

HDL COLESTEROLPRECIPIT ANTE

PRINCIPIOAs lipoproteinas de alta densidade (HDL), sac separ'adas seletivamentepOl' precipitayao das de baixa e muito baixa densidade (LDL e VLDL)usando-se 0 Sulfato de Dextran em presenya de Ions Mg++o sobrenadante e separado POl' centrifugayao e as HDL nele contidosac quantificadas pelo seu teor de colesterol, utilizando-se 0 kitColesterol metoda Enzimatico da LABORLAB.

METODOo metodo preconizado pela Lipid Research Clinic (Atlanta USA)emprega a precipitayao com heparina/Mn++. Este metodo tem uminconveniente po is nao pode ser adaptado para uso em laboratorios oepequeno porte. A utilizayao do Sulfato de Dextran/Mg++ emprega umunico reativo estavel a temperatura ambiente, e e mais senslvel.

COMPOSlc;AO DO KITReativo Dextran CAT N2 02301Soluyao de Sulfato de Dextran (PM = 500.000), 0.032 mmol/L Volume= 5 mLReativo Magnesio CAT N2 02302Soluyao de Cloreto de Magnesio, 1,5 mmol/LVolume = 5 mL

Frasco vazio para a preparayao do reativo Predpitante CAT N'02303Volume = 15 mL

PREPARAc;AO DO REATIVO PRECIPITANTEMisturar PARTES IGUAIS DOS REATIVOS e colocar a mistura nofrasco vazio anotando no rotulo a data de prepara9ao.Nao existe a necessidade de preparar todo 0 reatlvo de uma so vez. 0reativo assim preparado e estave) pOl' 6 meses a temperatura ambienteou 1 ana refrigerado.

IYIATERIAL NAO FORNECIDO (NECESSARIO)Agua deionizadaEspectrofotometro ou Colorimetro.Micropipetas e pipetas capazes de mediI' os volumes indicados na

= --teenie6'~. ---~----_._-~-----------Tubos de ensaio.Rel6gio ou cronometro.Kit de Colesterol metodo Enzimatico (CAT N2 01400)

VIDA UTIL E ARMAZENAMENTOo kit e estavel em temperatura ambiente ate a data de vencimentoimpressa na caixa.

PRECAUc;OESo kit nao contem derivados de sangue humano, porem, considerarqualquer amostra de paciente como potencial mente Infectante. Evitar 0contato direto com as amostras.Nao pipetar reagentes ou amostras com a boca .Descartar as sobras das reayoes de acordo com as Boas Praticas deLaborat6rio em local pr6prio para materiais potencialmente infectantes.

AMOSTRASOl'O ou plasma coletado somente com heparina.Manter as amostras refrigeradas e processa-Ias dentro de 24 horas.

TECNICAErn um tuba de ensaio colocar 500 pL (250 pL) de amostra e agregar50 ~lL (25 ~lL) de Reativo Precipitante. Hornogeneizar agitando, seminverter 0 tubo, pOl' 20 segundos. Deixar no refrigerador pOI' 30 a _40minutos ou em banho de agua (4 a 10°C) POl' 15 minutos. NAOCONGELARCentrifugal' POl' 15 minutos a 3000 rpm. UsaI' 0 sobrenadante Iimpidocomo arnostraEm 3 tubos de ensaio, marcados B. P e 0, colocar:

B P DSobrenadante 100 ~lLPadrao - 20~lL -Rvo trabalho Colesterol 2 mL 2 mL 2 mLMisturar e incubar pOI' 15 minutos a 37°C. Ap6s, retirar do banho eesfriar. LeI' a 505 nm em espectrofotometro ou em colorlmetro comfiltro verde (490-530 nm), zerando a aparelho com tubo B (blank) Videbula Colesterol metodo Enzimatico A cor da reayao e estavel pOl' 2horas.

REG. M. S . N210246810008LABORLAB PRODUTOS PARA LABORAT6RIOS LTDA.Fone: (11 )6480-1306 (Central de Atendimento ao Cliente)

CALCULOSHDL Colesterol mg/dL = D x f f = 1.§2

PHDL Colesterol mg/dL x 0.026 = HDL Colesterol mmol/L45,7 = 200 mg/dL x VFE..x VRE x ~onde:

VA VRp VEVFE = volume final do extra to = 0,55 mLVA = volume da amostra processada = 0,5 mLVRE = volume de reayao com amostra = 2,1 mLVRp = volume de reayao com padrao = 2,02 mLVP = volume de padrao na reayao = 0, 02 mLliE = volume de extrato na reayaa '" 0,1 mLOBS. Em aparelhos que permitem utilizar menores volumes dereagentes, pOl' exemplo 1 mL usaI' 50 ilL de sobrenadante e 10 ~lL depadrao. Neste caso 0 fator sera 0 mesmo.

VALORES DE REFERENCIASegundo a Lipid Research Clinic (Bethesda-USA)Idade HDL Colesterol mg/dL HDL Colesterol mg/dL

H M~-M ~-ro~-ro ~-~30 - 65 35 - 80~-M ~-~30 - 65 35 - 85

0-1920-2930-3940-4950-59

Valores de HDL Colesterol em pessoas normais com idades entre 34 e66 anos (X ± DP)

H (n=63) 52 ±13mg/dLM (n=68) 65 ± 16mg/dL

Fator de risco segundo Castellirisco normal = 1,00Observou-se que 0 risco para um homem com 25 mg/dL de HDLColesterol e 0 dobro que para outro com 45 mg/dL e 0 quadruplo para,..,,,Im c.."'m p5 mf1/rll P::lr::l Q1l1lhereR 4Q m,..,/d..L rlA...Hnl (Colp-stArnl IAQJrisco dobrado sObre 55mg/dL e quadruplicado sobre 70 mg/dL.

IN DICE DE RISCO DE ECC ( *)HDL Colesterol

mg/dL75 ou mais70656055504540353025 ou menos

H Mslndrome de longevidade

0,520,640,801,001,251,551,94

0,45

0,550,670,821,001,251,501,75

2,00

RELAc;AO ENTRE COLESTEROL TOTAL E HDL COLESTEROLCol. totallHDL Col. RiscoH --- 3,43 ------ 0,5 do normal

4,97 NORMAL9,55 2 x normal24,00 3 x normai

M--- 3,27 ------ 0,5 do normal4,44 NORMAL7,05 2 x normal11,04 3 x normal

(*) ECC = Enfermidades cardiacas coronarias

APRESENTAc;AOKit suficiente para 0 preparo de 10 mL de Reativo Precipitante (Permiteprocessar 200 a 400 amostras)

BIBLIOGRAFIA1 - Castelli, WP.; Levitas, I.M - Current Prescribing 6/77:39 (1977)2 - Gordon, T., Castelli, W P.; Hjortland, M C: Kannel W B, DawberT R. - The American Journal of Medicine 62:707 (1977)

REV.01Estr.do Capao Bonito, 937 07263010 - Guarulhos - SP CNPJ 72807043/0001-94

Resp.Tec.: Ligia Monaro da Silva CRBM 1~ Regiao N22573

Tf!~tline-~-

METODO:Metodo Enzimatico Colorimetrico com Fator Clareante de Lipides (LCF)

FINALIDADE:Metodo enzimatico para a determina,ao de trigliceride:; no soro e plasma.Somente para uso diagnostico IN VITRO.

FUNDAMENTO:Os triglicerides sao determinados apos hidrolise enzimatica com lipases. 0indicador e a quinonimina formada a partir do peroxido de hidrogenio, 4-aminoantipirina e 4-c1orofenol sob a influencia catalitii:a da peroxidase.

Glicerol + ATP ) Glicerol-3-fosfato + ADGPO

Gllcerol-3-fosfato + 02 ) Fosfato de dihidroxiacetona + H202POD

H202+4-aminoantipirina ) Quinonimina+HCI+H20+ 4-c1orofenol

PROP.1.Ii:DADES:• A metodologia permite obter resuitados em curto espa,o de tempo.• 0 teste pode ser realizado a 250C ou 370C.

SIGNIFICADO CLINICO:OS triglicerldes formam a maior parte do tecido adiposo, constituindo porisso uma forma de armazenamento de energia.o movimento de acidos graxos no organismo se produz com grande rapidezem resposta a diversos estimulos (dieta, atividade flsica, stress, idade, etc).Por este motivo e de se esperar que os triglicerides, um dos maisimportantes veiculos para 0 transporte dos acidos graxos, tenham suaconcentra,ao modificada em resposta a estes fatores fisiol6gicos.Os triglicerides sao um dado importante para a classifica,ao dashiperlipoproteinemias e na correla,ao que se obsrrva entre seu nivelaumentado e 0 aumento do risco cardiovascular nas muiheres.o valor dos triglicerides encontra-se aumentado nas hiperlipoproteinemiasprimaria ou secundaria nos tipos I, lIb, III, IV e v.As hiperlipoproteinemias podem estar associadas a doen,a cardiovascular eocorrem comumente no diabetes, alcoolismo, p,lncreatite, sindromenefrotica, gravidez, usa de anticoncepcionais, mieloma multiplo, doen,a dearmazenamento de gllcogenio.

IDENTIFICA<;:AO E ARMAZENAMENTO:Conservar entre 2 a 8°C.Reagentes:Rl - Monoreagente: Contem Tampao Pipes (pH 7,5) 50 mmol/L, 4-clorofenol5 mmol/L, 4-aminoantipirina 0,25 mmol/L, ions Magne3104,5 mmol/L, ATP 2mmol/L, L1pases > 1300 U/L, Peroxidase> 500 U/L, gllcerolquinase > 400U/L, Glicerol 3-fosfato oxidase> 1500 U/L, Azida s6dica 0,05%.

R2 - Padrao: Contem Triglicerides 20ll mg/dL ou 2,28 mmol/L. Azida sodica0,05%.

ESTABILIDADE:Os reagentes sao estaveis, mesmo depois de abertos, ate 0 vencimento dadata de validade quando armazenado.; entre 2 e 8° C. Entre 20 e 250 C 0Monoreagente e estavei por 4 semanas .. 0 fabricante garante a qualidadedo produto, se este for armazenado como descrito acima e em suaembalagem original.

PREPARODO REAGENTE DE USO:o Monoreagente e 0 Padrao estao prol1tos para uso.

PRECAU<;:OES:• Os cuidados habituais de seguran,a devem ser aplicados l1a manipula,aodo reagente. Todos os reagentes contem azida s6dica como conservante.Nao ingerir ou aspirar. Evitar contato com a pele e mucosa.• Os reagentes nao possuem substan('ias contaminantes.• Como nao se pode assegurar que arnostras biologlcas e soros controle naotransmitem infec,oes, recomenda-se Inanusea-Ios de acordo comasinstru,oes de biosseguran,a.• Para descarte segura dos reagentes e materiais blologicos, sugerimosutllizar as regulamenta,oes normativas locais, estaduais ou federais para apreserva,ao ambiental.

NOTAS:Para corrigir 0 glicerol livre, subtrair 10 mg/dL (0,11 mmol/L) do valor dotrigllcerides calculado.

AMOSTRAS BIOLOGICAS:SORO, PLASMA(heparinizado, EDTA) IEstabilidade: 3 dias entre 2 e 80 C, 4 roeses a-200 C.Amostras Iipemicas geralmente cau,am turbidez no reagente provocandoresultados fa!samente elevados. 0 Tl.:STLlNE Trigllcerldes evita estes falsosresultados por possuir 0 Fator Cla.'eante de Lipides (LeF). 0 LCF tlratotalmente a turbidez causada por amostras lipemicas .

MATERIAlS NECESsARIOS E NAO FORNECIDOS:• Espectrofotometro UV/VIS calibrado• Cubetas para amostras e reagentes.• Pipetas calibradas.• Cronometro.• Banho-maria/Termostatizador• Tubo de ensaio

METODO DE ANALISE:A- Leltura em espectrofotometro:Comprimento de onda: 500 nm, Hg 5·16 nmCubeta: 1 emTemperatura: 20 a 250 C ou 37°C ,Medida: Contra reagente branco (RE!). Somente um reagente branco porserie e necessaria.

Pipetar dentro das Reagent:e Branco (RB) Amostra ou PadraocubetasAmostra/Padrao ----- 10:LMonoreaoente 1,000 :L 10001000 :L

Homogeneizar. Incubar por 10 minutos entre 20-250 C, ou por 5 minutos a37°C. Ler a absorbancia em no maximo 60 minutos contra 0 ReagenteBranco.

)A amostra = 0,280)A pad,!o = 0,250

C = 200 x)A amo"",)A pad,!o(mg/dL)C = 200 x (0,280/0,250)C = 224 mg/dLOuC = 2,28 x)A amo"",)A pad,!o (mmol/L)C = 2,28 x (0,280/0,250)C = 2,6 mmol/L

LINEARIDADE:A rea,ao e linear ate 1000 mg/dL ou 11,4 mmol/L. Amostras comconcentra,oes altas devem ser diluidas 1 + 4 com soro fisiologico (0,9%) etestadas nova mente. Multiplicar 0 resultado por 5.

INTERFERENCIAS:o teste nao e influenciado por valores de hemoglobina ate 150 mg/dL ou porvalores de bilirrubina ate 20 mg/dL. ACido ascorbico pode interferir emconcentra,oes superiores a 4 md/dL.

AUTOMA<;:AO:Adaptu~ao especial :~cira an.:;lisadorts pode Ser forrlt:cida quando solicitada.

VALORES DE REFERENCIA PARA RISCO ATEROSCLEROTICO:Suspeito: acima de 150 mg/dL ou 1,71 mmol/LAumentado: acima de 200 mg/dL ou 2,28 mmol/L

CONTROLE DE QUALIDADE:• Antes de serem liberadas para consumo as materias primas e os reagentessao avaliados pelo Departamento de Controle de Qualidade da In Vitro.• Para controle e verifica,ao do desempenho do kit sao utiiizados os soroscontrole de origem roacional fornecidos pela SBAC e SBPC, e os de origemInternacional referenciados pela General Medical Council of The GermanFederal Republic.• Todo soro controle contendo valores determinados por este metoda podeser empregado. Recomendamos 0 usa dos soros controle TESTLINE SOROCONTROLE NORMAL (cat. nO T200), TESTLINE SORO CONTROlEPATOLOGICO(cat.no T210).

RECUPERA<;:AOEM SOROS CONTROLES:Soros controle comer;:ials dlsponiveis foram usados. Os soros controle foramreconstituidos/preparados de acordo com as instru,oes do fabricante. Cincodetermina,oes de cada soro controle foram realizadas. A media dos valoresfoi calculada e comparada com os valores tabelados. Tambem imprecisoesforam calculadas com 5 determina,oes que foram encontradas em boaconcordancia com os estudos de imprecisao.

MEDIA68,30

CV(%)0,61

Amostra (pool medio) 60 170,73 0,87 0,51Amostra (pool alto) 60 970,80 3,34 0,34

REPRODUTIBILIDADE:N MEDIA DP CV(%)

Amostra (pool baiXO) 60 67,64 0,73 1,08Amostra (pool medio) 60 169,02 1,71 1,01Amostra (pool alto) 60 963,34 7,5!j 0,78

SENSIBILIDADE:o limite de detec,ao foi calculado com 20 determina,o~s de uma amostratriglicerides-zero. A media foi - 0,16 mg/dL e 0 desvio oadrao respectivo foi0,47. Tipicamente 0 limite de detec,ao pode ser expresso como 3 vezes 0desvio padrao de uma amostra-zero, que significa:

COMPARACAODOS METODOS:o kit TESTLINE Triglicerides foi comparado contra 0 metodo de triglicerides(Boehrin~er Mannheim) disponivel comercialmente. Baseado nos resultadosoe 50 amostras clinicas ambos os metod os mostraram uma excelentecorrela,ao. 0 coeficiente de correla,ao fol: r = 1,tOO e a equa,ao deregressao linear foi: Y = 1,025 X + 1,715.

OBSERVACOES:• A limpeza da vidraria deve ser feita com detergente neutro. 0 enxaguedeve ser exaustivo sendo 0 ultimo enxague com agua destilada oudeionizada.• Tra,os de amonia nos materia is utilizados interferem decisivamente narea,ao.• A rigorosa observa,ao da temperatura, do tempo de incuba,ao, da limpezada vidraria, da estabilidade dos reagentes e da pipetagem e de extremaimportancia para se obter bons resultados.

"-Cat. NO ReaQen~- ---VOiume- -- --NOTe---ste-

T160 Monoreagente(Rl ) 1 x 100 mL 100Padrao (R2) 1 x 3 mLT170 Monoreagente( R1) 2 x 200 mL 400Padrao (R2) 1 x 3 mL

DEPARTAMENTODE SERVICOS ASSOCIADOS:Para esclarecimentos de duvidas do consumidor quanta ao produto:Telefax (031) 38346400; e-mail: nucleo@invltro.com.llr.No DO LOTE, DATA DE FABRICACAO,DATA DE VALIDADE VIDE ROTULODOPRODUTO.

BIBLIOGRAFIA:1. Schettler, G., NOssel, E., Arb. Med. Soz. Med. Pray. ned. 10,25 (1975).2. Jacobs, N. J., VanDemark, P. J., Arch. Blochem. Biophys. 88, 250-255(1960).3. Kodistschek, L. K., Umbreit, W. W., J. Bacteriol. 68, 1063-1068 (1969).4. Trinder, P., Ann. Clin. Biochem. 6, 24-27 (1969).

Produzldo e Dlstrlbuido por Nucleo Olagnostico ProdutClsEspecializados Ltda- Rua Sao Paulo NO377 - Salas 06 a 09 - Bairro Amazonas - Itabira - MGCEP: 35900-373 - Telefax: (31) 3834-6400E-mail: nucleo@invitro.com.br - CNPJ: 00.560.477/0001-21Farm. Resp.: Geraldo Celio Fontes Lopes - CRF-MG: 4225

Reg. M.S. 10302240342

SIGNIFICADO DOS SiMBOLOS UTILI;~ADOS NOS ROTULOS DO PRODUTO

INSTRUC;OES DE usaALBUMINA

(Verde de Bromocresol) - Metodo colorimetricopara a determina(fao da Albumina.

FINAL/DADEo conjunto e um sistema que se destina a determinar;;ao da albumina nosoro sanguineo,

PRINCiPIO DE AC;AoA albumina forma um complexo com 0 verde de bromocresol em pHacido modificando a absorr;;ao espectral deste corante. E 0 princfpio do"erro proteico dos indicadores", A absorr;;ao em 630 nm do complexo eproporcional a concentrar;;ao de albumina na amostra. 0 metodoproposto e facilmente automatizavel, adaptando-se a todos osanalisadores automaticos disponiveis.

REAGENTES

CODIGO 02B

Conjunto para 250 determinar;;6es de albumina, contendo:1.Reagente de Cor-Estoque: 01 frasco com 50 mL de solur;;aotamponada em pH 3,80, 10x concentrada, contendo verde debromocresol 1,7 mmol/L e azida sodica 8,5 mmollL.2. Padrao: 01 frasco com 2,0 mL de solur;;ao aquosa de albuminabovina 3,8 g/dL, con tendo azida sodica 8,5 mmol/L,

MATERIAlS NECESsARIOS NAG FORNECIDOSEspectrofot6metroCentrifugaBanho-mariaCron6metroVidrariaF'lpela5 Illalloal5 OU aUlolllaticas

Agua destilada ou deionizada

CUIDADOS NO ARMAZENAMENTO E TRANS PORTE DOSREAGENTESAs datas de fabricar;;ao e validade aparecem no rotulo da embalagem,Nao usar reagentes cuja data de validade tenha expirado.Todos os reagentes devem ser mantidos sob refrigerar;;ao, na faixa de 2a 8°C. Nao congelar. Manter ao abrigo da luz, Antes de serem abertos,os reagentes podem ser transportados na faixa de temperaturas entre10 e 18°C, ate um limite de 4 dias.

Somente para usa diagnostico "in vitro".

o uso de agua deionizada na diluir;;ao do Reagente de Cor-Estoque (1)oriunda de colunas saturadas, pode provocar a contaminar;;aoirreversivel do reagente,Evitar contaminar;;ao com ions metalicos ou agentes oxidantes,o espectrofot6metro ou mesmo equipamentos automatizados devemficar livres de contaminar;;ao microbian a, serem calibrados corretamentee receberem manutenr;;ao de acordo com as instrur;;6es do fabricante.Nao misturar ou trocar diferentes lotes de reagentes, Evitarcontaminar;;ao microbiana dos reagentes e nao utilizar reagentes q'ceten ham sinais de contaminar;;ao ou precipitar;;ao.Usar pipetas de vidro e ponteiras descartaveis separadas para cadaamostra, controle (se utilizado) e reagente, e nao trocar as tampas dosfrascos dos reagentes, a fim de evitar contaminar;;ao cruzada, 0 quepoderia causar resultados err6neos.Nao dispensar os reagentes em tubular;;ao contendo ferrogalvanizado. Os reagentes 1 e 2 contem azida sodica, irritante parapele e mucosas. Caso haja contato com esses reagentes, lavarimediatamente a area afetada com agua em profusao Em caso deingestao acidental, procurar auxilio medico imediato.

o Padrao (2) e fornecido em concentrar;;ao usual fixa 0 desempenhodo ensaio pode ser afetado se este reagente for modificado ou nao forarmazenado nas condir;;6es recomendadas, Ver cuidados noarmazenamento e trans porte dos reagentes.Usar luvas descartaveis quando manusear reagentes,Nao comer, beber, fumar, armazenar ou preparar alimentos, ou aplicarcosmeticos dentro da area de trabalho onde reagentes e amostrasestiverem sendo manuseados.

Soro.

Sob refrigerar;;ao, a albumina no soro e estavel por tres dias,Em virtude de sua sensibilidade, 0 metodo propos to nao e adequadopara a dosagem de albumina em outros liquidos biologicos, Todo 0

material biologico deve ser processado como sendo potencial mentecontaminante, Usar luvas descartaveis durante a manipular;;ao, Asamostras devem ser descartadas, apos 0 use, em recipientesespecfficos. Nao dispensar em coletores de lixo comuns ou nas redesde agua e esgoto, Lavar sempre as maos apos trabalhar com materialpotencial mente infeccioso,

Ler cuidadosamente as instrur;;6es desta bula.

Preparo do Reagente de Cor de Uso: Transferir 0 conteudo do frascoReagente de Cor-Estoque llilJara um balao volumetrico de 500 ml ecompletar 0 volume com agua destilada ou deionizada, Armazenar emfrasco de vidro ambar. Este reagente e estavel 6 (seis) meses entre 2e 8°C.

Dosagem (soro):

Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir:

Branco Amostra PadraoAmostra ,- ..•. 0,01 mL .Padrao - 0,01 mLReaq. Cor de Uso 2,0 mL'" 2,0 mL 2,0 mL

Homogeneizar bem e aguardar 15 minutos na temperatura ambiente,Determinar as absorbancias do teste e do padrao em 630 nm, acertandoo zero com 0 branco, A cor formada e estavel 3 horas.

CALCULOS- Albumina(g/dL) = (Absorbancia da amostra 7 Absorbancia do Padrao)x-3,8- Fator de calibrar;;ao = 3,87 absorbancia do padrao- Albumina (g/dL) = Absorbancia da amostra x Fator- Albumina (mmoI/L) = g/dL x 0,145

Exemplo:- Absorbancfa do teste = 0,280 Absorbancia do padrao = 0,250- Albumina (g/dL) = (0,280 7 0,250) x 3,8 = 4,26 g/dL- Fator de calibrar;;ao = 3,8 7 0,250 = 15,2- Albumina (g/dL) = 15,2 x 0,280 = 4,26 g/dL

L/NEARIDADEA rear;;ao e linear entre 0,5 e 6,0 g/dL. Para valores acima de 6,0 g/dL,diluir a amostra 1:2 com solur;;ao de NaCI 0,85% e repetir a dosagem,Multiplicar 0 resultado obtido por 2,

CONTROlE DE QUALIDADEo laborat6rio deve ter como pratica de rotina 0 usa de soros controlecomerciais,Preferivelmente deve participar de programas de controle externo dequalidade, a exemplo daqueles oferecidos pela SBAC e SBPC,

VAlORES DE REFERENCIASoro: 3,5 a 5,5 g/dL,

Recupera~ao : 101,7%,

Coeficiente de varia~ao intra-ensaio (repetitividade): A realiza9ao de20 determina90es de uma mesma amostra com valor dentro da faixa derefereRcia, mostrou um coeficlen.te de variE9~o ig~al a 2,01%,

Coeficiente de varia~ao inter-ensaio (reprodutibilidade): Arealiza9ao de 20 determina90es de uma mesma amostra com valordentro da faixa de referencia, mostrou um coeficiente de varia9ao iguala 2,41%,

Especificidade analitica: A compara9ao com metoda similar validado(que tambem utiliza a metodologia do verde de bromocresol)demonstrou um coeficiente de correla9ao, r, igual a 0,991 a partir daanalise de amostras aleatorias oriundas de pacientes de ambulatorio, Aequa9ao de regressao obtida foi : y = 0,95x + 0,16

Sensibilidade analitica: 0 metodo apresenta uma varia9ao deabsorbancia em 630 nm igual a 0,076 em cada acrescimo de 1 9 /dL naconcentra9ao de albumina, 0 limite de detec9ao do metodo e igual a 0,5g/dL,

INTERFERENTESAcido ascorbico, mesmo em concentra90es elevadas (acima de 20mg/dl), hemoglobina ate 200 mg/dl , hiperlipemia e bilirrubina ate 20mg/dl nao interferem,

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS1. Doumas,B,T"Watson,WA & Biggs, H,G, Clin,Chim, Acta

31:87,19712. Gasbarro, et.a!. Clin, Chim. Acta 36:255,19723. Bartholomew, RJ. & Delaney A,M, Proc, Austral Assoc, Clin,

Biochem,1:,214,19664. Katal: Dados de arquivo

Codigo02B

N° de testes250

Volume / teste2,0 mL

CONDIr;OES DE GARANTIA DA QUALIDADE DO PRODUTO

o desempenho deste sistema diagnostico, medido pelas propriedadesdescritas nesta Instru9ao de Usa, esta garantido ate a sua data devencimento, desde que obedecidas as seguintes condi90es:

1. A adesao estrita, pelo usuario, ao quadro de procedimento tecnico,2. As condi90es de armazenamento estarem de acordo com 0

recomendado nesta Instru9ao de Uso,3. Os materiais necessarios e nao fornecidos com 0 produto, estarem

em boas condi90es de usa,

AUTOMAr;Ao

Aplica90es para analisadores automaticos estao disponiveis, sesolicitadas,

ASSESSORIA TECNICAPara eselareeimentos de duvidas e assessoria teeniea quanta aoproduto, ligue para 0 Servi<;o de Atendimento ao Cliente (SAC) :

(Oxx11) 5183 27 22e-mail: comercial@interteck.com.brProdu<;ao/Distribui<;ao: Katal Bioteenol6giea Ind, Com, Ltda,Av. Jose Candido da Silveira, 2100 - CEP 31170 - 000Belo Horizonte - MG - Brasil- CNPJ: 71.437.917/0001-04Responsavel Teenieo: Leonides Rezende Jr. -CRMMG 7382

Registro ANVISA 10377390077Edi93a desta InstrU93a de Usa Fevereiro/05

Tf!~t'.~

METODO:Teste Enzimatico-Colorimetrico com Fator Clareante de Upedes (LCF).

FINALIDADE:Reagentes para a determina<;ao quantitativa do acido crico presente nosoro, plasma e urina humana.Somente para uso diagnostico IN VITRO.

FUNDAMENTO:Determina<;ao do acido crico pela rea<;ao com a uricase. 0 H,O, formadoreage sob a catalise de peroxidase com 3,5-dicloro-2-hidroxibenzenosulfonico acido (DCHBC) e 4-aminofenazona (PAP) para daruma cor vermelho violeta, quinonimina como indicador.

SIGNIFICADO CLINICO:Numerosas doen<;as, condi<;6es fisiologicas, mudan<;as bioquimicas e mesmofatores sociais e comportamentais estao associ ados •com as alterac;5es na(oncentra<;ao plasmiitica do urato. 0 aumento e mais frequente do que 0decrescimo. Entre as etiologias mais comuns da hiperuricemia esta afah'!ncia renal, a cetoacidose, 0 excesso de lactato e 0 uso de diureticos. Ahiperuricemia tambem tem uma rela<;ao positiva com a hiperglicemia,obesidade, aterosclerose, diabetes mellitus, hipertensao, ciasse social,exerdcio. A gota e uma desordern do metabolismo das purinas ou daexcre<;ao renal do acido crico caracterizada por hiperuricemia, precipita<;aodo urato monossodico como um deposito prlncipalmente nas juntas ecartilagem periarticular, ossos, bursa e tecidos subcutaneos; ataquesclinicos recorrentes de artrite; nefropatia e frequentemente nefrolitiase.A gota e frequentemente dividida como prima ria, secllndaria ou idiopaticacom base se a doen<;a for decorrente de um erro inato do metabolismodiretamente envolvido com a sintese de excre<;ao de acido crico ou se estaassoci ado com hiperuricemia decorrente de alguma das outras numerosasetiologias.Os homens constituem mais de 90% de todos os casos de gota. A gota erara nas mulheres antes da menopausa.As causas de hipouricemia sao relativamente pOllcas, ocorrendo nasindrome de Falconi, doen<;a de Wilson, doen<;a de HodgKin, mielomamcltiplo e carcinoma broncogenico.

IDENTIFICAl;AO E ARMAZENAMENTO:Conservar entre 2 a saCReagentes:

RGT - Reagente Enzimatico: Tampao fosfato 50 rnmol/L (pH 7,0); 4-Aminofenazona 0,3 mmol/L; DCHBS 4 mmol/L; Uricase > 200 U/L;Peroxidase> 1000 U/L.

STD - Padrao de Acido Urico: Acido Urico 8 mg/dL ou 476 ilmol/L; Azidasadica 0,1% •

ESTABILIDADE:Os reagentes sao estaveis ate a data de validade impressa no rotulo,quando armazenado de 2 - BOC. Se aberto, evitar contamina<;ao. 0 RGT eestavel por 2 semanas a 15-250C, protegido da luz.o fabricante garante a qualidade do produto, se este for armazenado comodescrito acima e em sua embalagem original.

PRECAUC;OES:• Os reagentes nao necessitam ser tracados como amostras contaminantes,• Os cuidados habltuais de seguran<;a devem ser aplicados na manipula<;aodo reagente, 0 padrao contem azida sodica como conservante. Nao ingerirau aspirar, Evitar cantata com a pele E: mucosa;• Como nao se pode assegurar que amostras biologicas e soros controle naotransmitem infec<;5es, recomenda-se manusea-Ias de acordo com asinstru<;6es de biosseguran<;a;• Para 0 descarte segura dos reagentes e materiais biologicos, sugerimosutilizar as regulamenta<;6es normativas locais, estaduais ou federais para apreserva<;ao ambiental.

AMOSTRA BIOLOGICA:• Soro, Plasma (heparina, EDTA), urina.• 0 transporte da amostra biologica, ouando necessario, deve ser feito pel arota mais direta e evitando sua chegada nos finals de semana e ferlados nolocal de destino. A amostra biologica deve ser acondicionada em recipientehermeticamente fechado, em segllida embalada de forma a mante-Ia emtemperatura recomendada (2 a 80C) desde 0 remetente ate a entrega aodestlnatario, Esta amostra deve ser identificada com 0 simbolo de amostrabiologica.

INTERFERENCIAS: IAmostras lipemicas geralmenl1e geram turbidez na mistura

amostra/reagente levando a resultados falsamente elevados. 0 Uric Acidliquicolor evita favoravelmente estes resultados atraves do fator clareantede lipedes (LCF), 0 LCF clareia totalmente a turbidez causada par amostrasIipemlcas (ate 1000 mg/dL).• 0 teste nao e influenciado por hemoglobina ate 100 mg/dL ou portrlglicerides ate 2500 mg/dL. Soros ictericos e de pacientes em terapia comvitamina C nao devem ser usados no teste.

MATERIAlS NECESsARIOS E NAO FORNECIDOS:• Fot6metro UV/VIS,• Pipetas• Tubos de ensaio

Leitura em espectrofotometro:Comprimento de onda: 520 nm, Hg 546 nmCubeta: 1 cmTemperatura: 20-250C ou 370CMedida: Contra reagente branco. Somente um reagente branco por serie enecessario.

Pi etar nas cubetasAmostra/STD

RGT

Homogeneizar, incllbar por 10 minutos a 20 - 250C ou por 5 minutos a370C. Medir a absorbancia da amostra/STD contra 0 reagente branco em

no maximo 15 minutos I\A

CALCULO DA CONCENTRAC;AO DE DO ACIDO URICO:Aamostra= absorbancia da amostraASTO= absorbancia do padrao8 = concentra<;ao do padrao (mg/dL)

SORO, PLASMA

C=8x Aamostra [rng/dL] ouASTD

C = 476 x 8.amostra [~mol/L]ASTO

URINA

C = 88 x ~amostra [mg/dL] ouASTO

C = 5235 x Aamostra [~mol/L]ASTD

Utllizando 0 fator de calibra<;ao (Fc):Fc = 8 : ASTO

Acido crico (mg/dL) = Aa x Fc

Exemplo:Aamostra = 0,118

ASTD= 0,157

AUTOMAC;AO:Adapta~ao especial para analisadores esta disponivel e sera enviada aoconsumidor quando solicitada.

LINEARIDADE:o teste e linear na concentra<;ao de 20 mg/dL au 1190 ~mol/L, Dlluiramostras com uma concentra<;ao alta 1 + 1 com salina fisiologica (0,9%),Multlplicar 0 resultado por 2,

VALORES DE REFERENCIA:HOMEM: 3,4 - 7,0 mg/dL ou 200 - 420 ~mol/l

MULHER: 2,4 - 5,7 mg/dL ou 140 - 340 ~mol/L

URINA: 250 - 750 mg/24h 1,5 - 4,5 mmol/24h,

CONTROLE DE QUALIDADE:• Todo soro controle contendo valores determinados para 0 Acldo Urico, pelometodo enzlmatico-colorimetrico, pode ser empregado. Recomendamos 0

usa de nossos soros controle HUMATROL e SERODOS.

RECUPERACAO EM SOROS CONTROLES:Vr. Alvo Faixa Resultado mg/dL Desvio (%)mq/dL mq/dL384 2,83 - 4 85 400 422103 845-122 10,29 -006424 348 - 50 4,24 0,00

N Media (ma/dU DP (ma/dU % CV6 248 0,062 2,496 822 0112 1 376 2189 0164 075

N Media (ma/dU DP (ma/dU % CV6 248 0116 4696 822 0292 3 566 21,89 0,487 2,23

COMPARAl;AO DOS METODOS:o kit TESTLINE Acida Urico Enzirmitico foi comparado contra um metodackido urico enzimatico disponivel comercialmente. Soras contrale bem comoamostras de pacientes foram empregadas na camparaC;aa. Os resultadasfaram avaliados pelos metodos. A regressao linear obtida foi a seguinte:

N = 55R = 0,998Y = 0,968*x + 0,120Xmedia = 6,02 mg/dLY media = 5,94 mg/dL

Os metadas foram camparadas empregando amostra de urina (diluida1+10).Os parametras estatisticas faram as seguintes:

N = 54R = 0,999Y = 1,039*x - 2,532Xmedia = 43,11 mg/OLY media = 42,25 mg/dL

Ambos as metodos mostraram uma boa concordancia e naa se observaunehum desvia significativo com as amostras especificas.

APRESENTACAO DO KIT:NOCAT REAGENTE VOLUME NOTESTEST010 RGT 1 x 100 mL 100

STD 1 x 2 mLT020 RGT 2 x 125 mL 250

STD 1 x 3 mL

BIBLIOGRAFIA:1. Barham, D., Trinder, P., Analyst, 97,142 (1972)2. Fossati, P. et aI., Clin. Chem. 26/2, 227 (1980)3. Thefeld, L., et ai, Dtsch. Med. Wschr., 98, 380-384 (1973)

DEPARTAMENTO DE SERVIl;OS ASSOCIADOS:Para esclarecimentos de duvidas da consumidor quanta ao praduto:Telefax (31) 3067-6400 E-mail: nuclea@invitro.com.brN.D DO LOTE, DATA DE FABRICA<;;AO,DATA DE VALIDADE VIDE ROTULODOPRODUTO.

Produzido e Distribuido por Nuclea Diagn6stica Pradutos EspecializadosLtda - Rua Sao Paulo N° 377 - Salas 06 a 09 - Bairra Amazanas - Itabira -MG - CEP: 35900-373 - Telefax: (31) 3067-6400E-mail: nuclea@invitro.com.br - CNPJ: 00.560.477/0001-21Farm. Resp.: Geraldo Celio Fontes Lapes - CRF-MG: 4225Reg. M.S. 10302240360

SIGNIFICADO DOS SIMBOLOS UTILIZADOS NOS ROTULOS DOPRODUTO

CAT NQ01600Samente paraUsa in Vitro

CREATININAMETODO CINETICO OU DlRETOSEM DESPROTEINIZACAO

DEFINI<;:AOo teste e feito para determinar 0 produto final do catabolismo muscular.

FISIOPATOLOGIAOs rins filtram a creatlnina e ela e excretada pela urina.Essa excre'Yao e usuaimente proporcional a massa muscuiar do individuo. Esteteste e considerado confiavel em doen'Yas renais, ja que, a Creatinina e filtradano glomerulo e seu aumento e observado posteriormente ao aumento donitrogElnio ureico sanguineo (BUN). A creatinina e BUN frequentemente sacusados em conjunto no diagnostico de problemas renais.

SIGNIFICADO CLiNICOValores elevados - deficiencia renal aguda ou cronica, lupus' eritematoso,gigantismo, acromegalia, choque, cancer gastrointestinal, cancer de bexig<>,leucemia, doen'Ya de Hodgking's, hipertensao, infarto agudo do miocardio,nefropatia diabetica, etc.Val ores baixos - gravidez, distrofia muscular, eclampsia, etc.

INTERFERENCIASFalsos valores elevados - grande consumo de carne, anfotericina B, cefalozina,cefalotina, c1oranfenicol, dextran, furosemida, gentamicina, kanamicina,meticilina, vitamina C, barbituratos, litlo, mitramicina, metildopa, trlanterene,glicose, proteina, corpos cetonicos.

METODOCinetico ou Colorimetrico direto sem desproteiniza'Yao.

L1NEARIDADENa tecnica direta a rea'Yao e linear ate 10 mg/dL.Na tecnica cinetica a rea'Yao e linear ate 6 mg/dL. Para valores superiores, diluira amostra 1:2 ou 1:4 com agua deionizada e repetir a rea'Yao. Corrigir os calculosmultiplicando 0 resultado pelo fator de dilui'Yao usado.

COMPOSI<;:AO DO KITReativo Padrao CAT NQ01501/01601Solu'Yao de Creatinina (2 mg IdL)Volume =,30 mLReativo Acido Picrico CAT NQ01602Solu'Yao de Acido Picrico 41,4 mmol/LVolume = 120 mLReativo Tampao CAT NQ01603So!uyao de Clielna - ~bm~·1 mal/lVolume = 120 mLReativo Aeidifieante CAT NQ01604Solu'Yao AcidaVolume = 15 mL

PREPARACAO DO REATIVO DE TRABA!-HOMisturar partes iquais do Reativo Aeido Pierieo e Reativo Tampao,aeondieionar a mistura em fraseo plastico. Anotar no fraseo a data deprepara"ao.

ryJATERIAL NAO FORNECIDO (NECESSARIO)Agua deionizada ou destilada reeente.Espeetrofotometro ou eoiorimetro.Mieropipetas, pipetas e provetas eapazes de medir os volumes indicados nastecnicas.Frasco piastico.Tubos de ensaio para 0 aparelho a ser utilizado.Banho-maria a 37°C.Relogio ou cron6metro

VIDA UTIL E ARMAZENAMENTOo kit e estavel a temperatura ambiente ate a data do seu vencimento impressana caixa.o Reativo de Trabalho a temperatura ambiente e ao abrigo da luz e estavelpor 10 dias a partir da data da sua prepara'Yao.

PRECAU<;:OESo kit nao contem derivados de sangue humano, porem, considerar qualqueramostra de paciente como potencialmente infectante. Evitar 0 contato direto comas amostras.Nao pipetar reagentes ou amostras com a boca .oescartar as sobras das rea'Yoes de acordo com as Boas Praticas de Laboratorioem local proprio para materiais potencialmente infectantes.

AMOSTRASora - obtido da maneira usual. Pode ser conservado ate 24 horas apos a coleta,refrigerado.Urina - obter urina de 2 ou 24 horas, empregando um recipiente perfeitamentelimpo e mantido no refrigerador durante a coleta. Medir 0 volume final (diurese),dlluir uma aliquota a 1:50. No caso de diurese de 2 horas, multiplicar 0 volumemedido por 12 para calcular a Creatinina de 24 horas. As urinas podem sermantidas ate 4 dias no refrigerador, sem uso de conservante.

TECNICA METODO DIRETO (PONTO FINAL)Em 3 tubos de ensaio marcados, B (Blank), P (Padrao) e 0 (desconhecido),colocar:

B P 0Agua oeionizada 100 pLPadrao 100 ~ILAmostra 100 pLRvo. Trabalho 1 mL 1 mL 1 mL

Misturar e incubar por 10 minutos em banho-maria a 37°C. 0 nlvel da agua dobanho deve ser superior ao do Iiquido dos tubos de ensaio. Retirar. Esfriar atemperatura ambiente e antes de 15 minutos, ler 0 P (padrao) e 0(desconhecido) em Espectrofotometro a 510 nm ou em colorimetro com filtroverde (500-520 nm), zerando 0 aparelho em absorbancia com B (blank).Adicionar:

Rvo. Acidificante 50 pL no B 50 ~IL no 0Misturar. oeixar os tubos por 5 minutos a temperatura ambiente e voltar a ler 0O2 ' zerando 0 aparelho com B. A cor final da rea'Yao e estavel por 6 horas.

CALCULOS1jCreatinina no soro mg/dL = f x (01 - 02)

2 rngidL

p

2) Creatinina na urina g/24 horas 01· 02 x V--P-V = Volume da diurese em Iitrosl 24 horas

0,020 g/L = concentra'Yao do Padrao50 = fator de dilui'Yao

TECNICA METODO CINETICOEquilibrar 0 Reativo de Trabalho a temperatura da rea'Yao (25°C) antes deagregar a amostra, zerar 0 aparelho em absorbancia com agua deionizadaEm 2 tubos de ensaio mareados P (padriio) e 0 (oesconhecido), colocar:

P 0Rvo. de Tnlbalho 1 ml _1 [Ill.Padrao 100 ~ILAmostra 100 ~ILMisturar imediatamente, disparando ao mesmo tempo 0 cronometro e colocarnovamente os tubos no banho.AOS 30 SEGUNDOS EXATOS, medir a Absorbancia (P1 e 01) e continuar aincuba'Yao. Medir novamente as Absorbancias (P2 e 02) aos 5 minutos.(EXATAMENTE 4 MINUTOS E 30 SEGUNDOS APOS A PRIMEIRA LEITURA).

CALCULOS1) Creatinina no soro

Creatinina mq/dL = (02 - 01) x f

2 rngidL

2) Creatinina na urinaCreatinina g/24 horas 02 - 01 x V

P2 - P13) oepura'Yao de Creatinina endogena (AMBOS METODOS)

oCE mUmin = Creatinina na urina g/24 horas x 694 mUminCreatinina no soro mg/dL x 10

onde:oCE mUmin = Creatinina na urina g/24 horas x 1000 mL x 1000 mg/g

Creatinina no soro mg/dL x 10 1440 min/24 horas

= Creat. Urlna x 1.000.000Creat. Soro 14400

VALORES DE REFERENCIAsoro = 0,6 a 1,4 mg/dLurina = 0,9 a 1,5 g/24 horasoCE = 80 a 140 mUminuto (media 125 mUminuto) para adultos ate 60 anos.

APRESENTA<;:AOKit suficiente para 240 rea'Yoes

BIBLIOGRAFIA1. Biggs, H. G. & Cooper, J.M. - Clin. Chem. 7/6 : 655 (1961)2. Martinek, RG. - Amer. Med. Technol. 32/6 : 700 (1970)

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