Experincia 01Testes para carboidratosLeandro AlvesJanine BiesekStefani Laise da Silva12 de Setembro de 2014Universidade Federal de Santa CatarinaCentro de Cincias Fsicas e Matemtica CFMDepartamento de Qmica da UFSCQMC !21" Qmica #r$%nica &iol'$ica ()perimental*rma+ 0,20!-ro.essor+ /icardo 0os1 2nesResumo 2este trabal3o e)perimental abordo4se a identi.ica56o de di.erentes amostras decarboidratos atrav1s de t1cnicas 7alitativas8 tili9ando o rea$ente de Molisc38 detecto4se a presen5a de carboidratos: Utili9o4se o teste de &ar.oed para di.erenciarmonossacardeos de dissacardeos8 o teste de &enedict para identi.ica56o de a5;caresredtores8 o teste de &ial para identi.icar pentoses de 3e)oses8 teste de Seli?2#@no seAa8 carbono 3idratado: 2's nos alimentamos desses compostos8 7ando comemos a5;car8 p6es8 batatas8arro98 etc: #al$od6oeolin3o8 .ibras tradicionais deman.atra56odetecidos8 amadeira e o papel materiais indispensveis nos dias de 3oAe8 s6o compostos 7ase 7ee)clsivamente de carboidratos: = prod56o de carboidratos na natre9a ocorre nas plantas verdes8 atrav1s da.otossntese8 onde a cloro.ila catalisa a convers6o de C#2 e $a em a5;cares: (n7antoasplantassinteti9amcarboidratos8 apartirdeC#2e$a8 osanimaisde$radamoscarboidratos a C#2e $a: #s animais comem as plantas e combinam os carboidratoscomo #2do ar para e)ectar a rea56o inversa da .otossntese: =o)ida56o decarboidratos d aoanimal a ener$ia necessria para manter os processos vitais ere$enera o C#2 7e a planta tili9ar na .otossntese:ClassifcaoSe$ndo a ocorrncia o n6o de 3idr'lise os carboidratos s6o classi.icados em+#onossacar$deos#s monossacardeos $eralmente tmsabor adocicado8 de .'rmla estrtralCn>?2#@n: -odendovariar deBa,carbonos >trioses8 tetroses8 pentoses8 3e)oses e3eptoses@8 sendo os mais importantes as pentoses e 3e)oses: Pentoses:4/ibose C!?10#! .orma o /2=4Deso)iribose C!?10#4 .orma o D2=-entoses s6o monossacardeos de ! carbonos: -ara os seres vivos8 as pentoses maisimportantess6oariboseeadeso)irribose8 7eentramnacomposi56o7micadoscidos nclecos8 os 7ais comandam e coordenam as .n5Ces cellares:Hexoses:4Dlicose CE?12#E4Frtose CE?12#E4Dalactose CE?12#E?e)osess6omonossacardeosdeEcarbonos8 7eobedecemF.'rmla$eralCn?2n0n>nGE@: =s3e)osesmais importantes s6oa$licose8 a.rtoseea$alactose8principais .ontes de ener$ia para os seres vivos: /icas emener$ia8 as 3e)osesconstitem os principais combstveis das c1llas: %li&ossacar$deosDrpamentodedoisade9monossacardeosatrav1sdeli$a56o$licosdica: #smaisimportantes s6o os dissacardios: 'issacar$deos( Qando8 por 3idr'lise8 prod9em dois monossacardeos:Exemplo+SacaroseH?2#I$licoseH.rtoseMaltoseH?2#I$licoseH$licoseJactose H ?2# I $licose H $alactose Trissacar$deos(Qando8 por 3idr'lise8 prod9em trs monossacardeos:/a.inose: Exemplo+ /a.inose H 2 ?2# I $licose H .rtose H $alactose #s oli$ossacardeos o a5;cares pe7enos s6o carboidratos constitdos de das ade9mol1clasde monossacardeos:Knteressa4nos8 a7i8apenas a7eles .ormados pordas nidades de monossacardeos8 tamb1m c3amados dissacardeosDissacardeos s6o a5;cares constitdos8 por li$a56o $licossdica8 de doismonossacardeos com desprendimento de ma mol1cla de $a >3idr'lise@:Dissacardeos tm mol1clas relativamente pe7enas8 sol;veis em $a8 ra96o por 7einter.erem8 assimcomoosmonossacardeos8noe7ilbrioosm'ticodasc1llas:S6otamb1m a principal .orma de transporte dos carboidratos:= sacarose8 o La5;car de canaL o de beterraba8 1 constitdo por ma mol1cla de$licoseli$adaa ma.rtose: = maltose 1m dissacardeo8pois 1 .ormada por dasmol1clas de $licose: = lactose 1 encontrada somente no leite: /eslta da ni6o de ma$licose com ma $alactose: )olissacar$deosSo.rem 3idr'lise prod9indo $rande 7antidade de monossacardeos: #correm no talo e.ol3as ve$etais e camada e)terna de revestimento de $r6os e s6o insol;veis em $a:Exemplo+ Cellose8 =mido e Dlico$nio #s polissacardeos o a5;cares m;ltiplos s6o carboidratos .ormadas pela ni6o demais de de9 mol1clas monossacardeas8 constitindo8 assim8 mpolmero demonossacardeos8 $eralmente de 3e)oses: =o contrrio dos mono e dos dissacardeos8 ospolissacardeoss6oinsol;veisem$aMn6oalteram8 pois8 oe7ilbrioosm'ticodasc1llas e se prestam mito bem F .n56o de arma9enamento o reserva ntritiva: Deacordo com a .n56o 7e e)ercem os polissacardeos classi.icam4se em ener$1ticos eestrtrais: -olissacardeos ener$1ticos tm.n56o de reserva ntritiva: #s maisimportantes s6o o amido e o $lico$nio: Amido4 principal prodto de reserva ntritiva ve$etal >mandioca8 batata doce8car@8 cales do tipo tb1rclo >batatin3a@8 .rtos e sementes >pin36o@: Constitim polmero de $licose >mais o menos 1:400 nidades de $licose@ com li$a56o$licosdica: # amido constiti4se de dois tipos di.erentes de polissacardeos+ a amilose com cerca de1:000 nidades de $licose nma lon$a cadeia n6o rami.icada enrolada em 31lice e aamilopectina com cerca de !0 a E0 nidades de $licose dispostas em cadeias mais crtase rami.icadas: (spiral 3elicoidal da amilose *lico&nio4 polissacardeodereservantritivadosanimais8 o$lico$nio1encontrado8 principalmente8 nosm;sclos:*amb1m1prodtodereservados.n$os: Constiti m polmero de $licose >mais o menos B0:000 resdos de$licose@ com li$a56o $licossdica e vrias rami.ica5Ces: %b+etivos#s testes tmpor obAetivo identi.icar e distin$ir carboidratos8 como pore)emplo8 distin$ir aldoses de cetoses8 pentoses de 3e)oses8 a5;cares redtores de n6oredtores e di.erenciar mono8 di e polissacardeos: #ateriais e m,todos 1- Teste de #olisc.( veri.icar se a mol1cla 1 m carboidrato=dicionam4se de9 $otas das sol5Ces 1N de $licose8 sacarose e amido em trstbos de ensaio distintos: Dili4se cada sol56o com dois mililitros de $a: =dicionam4se das $otas de sol56o de O4na.tol em cada m dos tbos e a$ita4se: Sem a$itar o tbode ensaio8 inclina4se o tbo de ensaio e adiciona4se lenta e cidadosamente trsmililitros de cido sl.;rico concentrado para .ormar ma .ase abai)o da sol56o dea5;car: = .orma56o de m anel p;rpra na inter.ace indica a presen5a de carboidrato:Fa9er o teste para trs amostras:-repara56o da sol56o de O4na.tol+ dissolver 10 $ de al.a na.tol em 100 mJ de etanolP!N:/- Teste de Barfoed( distin$ir mono e dissacardeos:=dicionam4se 28! mililitros do rea$ente de &ar.oed a di.erentes tbos de ensaioe aos mesmos adiciona4se 28! mJ de sol56o 1N de di.erentes carboidratos: =$ita4se ecolocam4se os tbos >todos ao mesmo tempo@ em ban3o de $a .erventeQ #s tbos s6oa7ecidosporcercadeBmin: Dranteestetempoobserva4seostboseanota4se7al7er mdan5ade cor: *este positivo para monossacardeos indica a.orma56o deprecipitadovermel3otiAolodeC2#dentrode1a2mintos: =n6o.orma56odeprecipitado neste tempo indica a presen5a de dissacardeo: /e$istra se os tempos em7easmdan5asdecolora56oaconteceram: Comointitodecompararascores8 1aconsel3vel sar m tbo controle >branco@ contendo somente $a:-repara56o do rea$ente de &ar.oed+ dissolver EE8! $ de acetato de cobre KK em "00 mJde $a8 adicionar E80 mJ de cido ac1tico $lacial e completar8 com $a destilada8 ovolme at1 1000 mJ:0- Teste de Benedict( a5;cares redtores Fi9eram4se os testes sando sol5Ces de carboidrato a 1N: =diciono4se 28! mJdo rea$ente de &enedict e 1 mJ da sol56o de cada carboidrato em di.erentes tbos deensaio e .oi a$itado: Colocaram4se os tbos em ban3o4maria >todos ao mesmo tempo@:=p's !4E min .oram observadas as altera5Ces 7e est6o anotadas na tabela: =diciono4se 44! $otas de sol56o de ?Cl BM a ! mJ de sol56o de sacarose ea7ece4seem ban3o4mariapor!min:Foi .eito o mesmocomma sol56o1Ndeamido onde .oi dei)ado a7ecer por cerca de B0 min: Foi reali9ado o teste de &enedictsando 142 mJdas sol5Ces acidi.icadas >sacarose e amido@ e comparo4se osresltados obtidos com as sol5Ces sem a adi56o de cido:1- Teste de Bial( distin$e pentoses de 3e)osesAdicionou2se08!mJdesol5Cesdecarboidratos emdi.erentestbosdeensaio e aos mesmos adiciono se 2 mJ do rea$ente de &ial acidi.icado: =$ita se ecolocamseostbosemban3o4mariapor10mintos: Umtestepositivoparapentose 1 indicado pelo desenvolvimento de corverde a a9l intenso: ?e)oses prod9emcor marrom o marrom esverdeada: /eali9o se s teste com trs amostras:-repara56o do rea$ente de &ial+ dissolver E $ de orcinol em 200 mJ de etanol P!N eadicionar 40 $otas de sol56o 10N de FeClB:E?2#:3- Teste de Seli4anoff( distin$e cetoses e aldoses:Coloco4se24B $otas de sol5Ces de carboidratos em di.erentes tbos de ensaio:=diciono 4 se ! mJ de sol56o de resorcinol >dissolver 080! $ de resorcinol em 100 mJde sol56o de ?Cl dildo ?Cl+?2#8 1+2@: (nt6o8 leva4se todos os tbos para ban3o4maria: =nota 4 se a cor emcada tbo de ensaio ap's 1 min e ap's 4 min: #desenvolvimentodecor vermel3aap's 4minconstiti testepositivoparacetoses:=ldoses rea$em mais lentamente:Ceto43e)oses+ sol56o vermel3o4cereAaCetopentoses+ sol56o a9l esverdeada:=ldoses+ n6o 3 desenvolvimento de cor:Dissacardeos+ n6o 3 desenvolvimento de cor:5- Rea!"o com iodo((m m tbo de ensaio coloca se!80 ml de $a destilada8 10 $otas de amido1N e ma $ota de J$ol >sol56o iodo4iodetada@: Reri.ica se o aparecimento de maintensa colora56oa9l8 7e desaparece peloa7ecimentobrando>ban3omaria@8 ereaparece8 por1m8 mais .raca8 pelo res.riamento rpido:6- Rea!"o de .idr7lise do amido( >c3apa de a7ecimento8 temperatra bai)a@+Coloca se apro)imadamente de 2080 ml de sol56o de $oma de amido 1Nemm.rasco erlenmeSer de 100 ml: =diciono4se 180 ml de cido clordricoconcentrado(procedimento deve ser realizado na capela!)a$ita4se e trans.ere4seimediatamente 180 mJ da mistra para m tbo de ensaio: =crescenta4se F esta8 1 $ota de J$ol e veri.ica4se a mdan5a cor: Coloca4se oerlenmeSer sobre a c3apa metlica8 em ban3o Maria:Kniciada a ebli56o8 retira4se cerca de 180 ml da amostra8 a cada 4 mintos8 em tbos deensaiopreviamentenmerados>ser6onecessriosEa,tbos@: =diciona4seemcadatbo8 com exceo do ltimo tubo8 1 $ota de J$ol:8- Rea!"o de .idr7lise da sacarose- 9Inverso da Sacarose: -repara se !0 mJ de ma sol56o de sacarose 10N: Medir a rota56o 'tica dasol56o preparada no polarmetro: Calcla 4 se a sa rota56o espec.ica: *rans.ere4 seasol56o>apro)imadamente40ml@paramerlenmeSer eadicionam4se 20 $otas de cido clordrico concentrado8 tapa 4 se com m .ilme8 n6ose es7ecendo de .a9er m .ro no .ilme: Coloca4se em ban3o4maria contendo $a .ervente8 por apro)imadamente de 10 41! mintos >ou at que a soluo ique levemente amarelada@: =p's o res.riamento8mede4se a rota56o 'tica novamente: Resultados e 'iscuss;es1- Teste de #olisc. T tili9ado para indicar a presen5a de carboidratos atrav1s da desidrata56o dos$rpos 4#? com o so de m cido .orte8 e $erando desta maneira monossacardeos87al7er $rpo pode ser 3idrolisado >dissacardeos o polissacardeos@ e todos resltamem m monossacardeo: Uma 3e)ose 1 desidratada para o composto .r.ral8 A mapentose para o 3idro)imetil.r.ral:=mbos resltam em ma colora56o p;rpra8 os resltados positivos .oram obtidos parasacarose8 amido e $licose:/- Teste de Barfoed# rea$ente de &a.oed consiste em ma sol56o contendo acetato de cobre KK emcido ac1tico $lacial: T sado na caracteri9a56o de monossacardeos resltando assimem m positivo 7ando a sol56o apresentar ma cor vermel3o tiAolo8 7e 1 resltado dao)ida56o pelo on C2Hresltando emmcido carbo)lico e o precipitado corvermel3o tiAolo >C2#@#testepositivosed7andooprecipitadose.ormaemmenos deBmintos: #resltado positivo .oi obtido para .rtose8 $licose8 $alactose8 manose8 e )ilose:0- Teste de Benedict#rea$ente 1 ma sol56oalcalina constitda deons de C2He ons decomple)o de citrato c;prico: #s a5;cares cont1m $rpos aldedos e cetonas capa9es dered9ir saisdemetaispesados8 dessesmaissadoss6osaisdecobreKK:= sol56omencionada acima o)ida e .ornece teste positivo na presen5a de aldoses8 cetoses e todosos carboidratos 7e possem m $rpo 3emiacetal: 2essa sol56o alcalina8 cetoses s6oconvertidas em aldoses 7e s6o ent6o o)idadas pelos comple)os c;pricos: = .orma56ode m precipitado vermel3o tiAolo8 C#28 sr$e 7ando ma aldose 1 o)idada8 indicando7e o teste de positivo: Carboidratos 7e apresentam $rpos acetais s6o c3amados dea5;cares n6o redtores:2aprimeira etapa desse teste8 obteve4se resltadopositivopara a lactose .rtose8$licose8 $alactose8 manose e )ilose: 2a se$nda etapa8 em meio cido8 ocorre 3idr'liseda sacarose e assim decompondo o acetal: 2a 3idr'lise da sacarose 1 prod9ido a D4$licose e a D4.rtose8 o 7e reslto em m teste positivo:1- Teste de Bial T ma rea56o de identi.ica56o de pentoses e carboidratos contendo pentoses8 area56o intenciona obter ma colora56o a9l8 tpica 7ando 3 pentoses:# rea$ente consiste de orcinol em meio cido concentrado na presen5a de FeBH: #.r.ral provenientedadesidrata56odepentoses8 7andoa7ecidonapresen5adorea$entede&ial damacolora56overde: #3idro)i.r.ral >3e)ose@ rea$e7andodando ma colora56o 7e vai do amarelo ao marrom: =p's o ban3o4maria8 constato4se 7e a amostra de lactose apresento ma colora56omarrom4esverdeada8 7eindicasetratar dema 3e)ose: =s demais amostras s6o8portanto8 para a $alactose ma 3e)ose cor marrom e para a )ilose 7e se trata de mapentose aparece ma colora56o a9l intensa:3- Teste de Seli4anoff#testedeSeliYOZD G HEE8B,[@ em m polarmetro emasol56ode$licosee.rtose e7imolar8observamos 7e elas possem atividade'ptica inversa8 sendo 7e a sol56o de sacarose desvia o plano de l9 polari9ada para adireita e 1 dextro&ira< A a sol56o de O4D4$licose >YOZD G H !28! \@ e W4D4.rtose >YOZD G4P2\@desviaoplanodel9polari9adaparaaes7erdae1levo&ira:Devidoaesteresltado e)perimental8 di9 se 7e s6o Ua5cares invertidosV: Clclo da rota56o espec.ica+ D=( l .C) Dterico=19,63 D=x( 2. C) =66,65C=13,00( 2. 66,65) =0,099 g/ mL D=x( 2 x0,099)y180=x176,9180=3,1 D=3,1( 2 x0,099) =15,65=onclus"o #s carboidratos s6o os constitintes or$%nicos mais abndantes nas plantas e de$rande import%ncia para os animais8 al1m de serem .onte de ener$ia para os or$anismosvivoseles tamb1ms6oimportantes naestrtra56odetecidosdesportetantoemanimais como ve$etais: Con3ecer as estrtras dos carboidratos 1 .ndamental para oentendimentode sas respectivas .n5Ces8 e por meiodos testes reali9ados nestee)perimento podemos distin$ir os carboidratos como sendo redtores8 n6o redtores8polissacardeo8 monossacardeo8 dissacardeo8 aldoses8 cetoses8 pentoses e 3e)oses:Referncias Biblio&r>ficasQmica #r$%nica] 2orman =lin$er Yet alZ /io de 0aneiro8 Danabara8 1P"!: -$: E214E22Solomons *:^:Dr: Qmica #r$%nica Rol KK E\: (dp$ B!43ttp+]]7nesc:sb7:or$:br]online]7nesc2P]0B4CCD42P0,:pd.3ttp+]]