Universidad Científica del Sur

“Año de la Diversificación Productiva y del Fortalecimiento de la Educación”

Facultad de: Ing. de Negocios Agro-Forestal

-Curso: Laboratorio de Química de Recursos Naturales

-Profesora: Ing. Gladys Esther Buitron Delgado

-Título: MARCHA FITOQUÍMICA DE UN RECURSO NATURAL

-Integrantes: More Ipanaque, Juan Pablo

-Horario de práctica

Día: lunes

Hora: 03:10 – 8:00 pm

-Fecha: 07/09/2015

LIMA-PERÚ

2015

PRACTICA 3

“MARCHA FITOQUÍMICA DE UN RECURSO NATURAL”

I.- OBJETIVO:Desarrollar la marcha fitoquímica de un recurso natural.

II.- ANTECEDENTES:

La marcha fitoquímica consiste en la identificación preliminar de los principales metabolitos secundarios.

III.- MATERIALES:3.1 Materiales:30 Tubos de ensayo3 Pinzas para tubos de ensayo3 Beaker x 250 mL3 Beaker x 50mL3 Matraz Erlenmeyer x 125mL3 Embudo pequeñoPapel de filtro6 Pipeta x 5mL2 Probeta x 25mL

3.2. Reactivos:CloroformoAlcohol etílicoAlcohol amílicoMagnesio metálicoHidróxido de sodio 5%Cloruro de sodioCloruro férricoReactivo de DragendorfReactivo de MayerReactivo de WagnerReactivo de BaljetReactivo de SudanReactivo de FehlingReactivo de KeddeReactivo de Legal

3.3. Equipos:Balanza analíticaPlancha calefactora

IV.- PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:Obtener un extracto acuoso y alcohólico de una muestra de le jugo puro del fruto de Cucumis anguria, en una relación de materia prima a solvente, igual a 1:5 ml. Seguir la marcha fitoquímica. Pero para la etapa de extracto alcohólico, el extracto se evaporizó con el mechero hasta dejar un una gota aproximado (Imagen 3).

4.1.- IDENTIFICACIÓN DE ALCALOIDES:

4.1.1- REACTIVO DE DRAGENDORF:

4.1.2.- REACTIVO DE MAYER: 4.1.3.- REACTIVO DE WAGNER:

4.2.- QUINONAS: 4.3.- CUMARINAS:REACTIVO DE BORNTRAGER: REACTIVO DE BALJET:

Evaporación

Extracto orgánico

Extracto acuoso

Calentar

Enfriar

+3 gts. Reactivo

+ Opalescencia

++

+++ Precipitado

Solución ácida

Pizca NaCl

Agitar

+ 3 gts. Reactivo

+ Opalescencia

++

+++ Precipitado

Solución ácida

+ 3 gts. Reactivo

+

++

+++ Precipitado

Extracto

1 mL Cloroformo

1mL NaOH 5%

Extracto

Evaporación

1 mL Etanol

1 mL Reactivo

4.4.- ACEITES ESENCIALES: 4.5.- AZUCARES REDUCTORES:

REACTIVO DE SUDAN: REACTIVO DE FEHLING:

4.6.- SAPONINAS: 4.7.- FENOLES / TANINOS:

PRUEBA DE LA ESPUMA: REACTIVO DE FeCl3:

Agitar + Rojo

Reposar

Fase superior rosada o roja, Reacción Positiva.

Extracto

1 mL Sudan

Calentar hasta evaporación

Extracto

Calentar 10-30’

Evaporación

2 mL Agua destilada

2 mL Reactivo

+ Gotas oleosas

+ Precipitado rojo

Extracto

5 veces Vol. H2O

Agitar x 2min.

Extracto

Taninos:

+ Verde: Catequina

Azul: Pirogálicos

3 gts. FeCl3

+ 2 mm espuma

Por 2 min.

4.8.- AMINAS: 4.9.- FLAVONOIDES:

REACTICO DE NINHIDRINA: REACCION DE SHINODA:

4.10.- GLICOSIDOS: 4.11.- CAROTENOS

REACTIVO DE KEDDE: REACTIVO DE LEGAL:

Extracto alcohólico

2 mL Reactivo Ninhidrina

Calentar 5-10min.

Extracto alcohólico

1mL HCl conc. + Mg metálico x5’

+ Color azul violáceo

1mL Alcohol amílico

Mezclar y reposar

+ Fase alcohólica coloreada

Extracto alcohólico

1 mL Reactivo

Reposos 5-10min.

+ Color violeta

Extracto alcohólico

2 gts. Reactivo

+ Color rojo

V.- RESULTADOS Y CONCLUSIONES

Tabla 1: Identificación de metabolitos secundarios

  ENSAYO RESULTADO  ALCALOIDES:  

EST

RA

CT

O

AC

UO

SO

1.      DRAGENDORF + +2.      MAYER --------3.      WAGNER + +4.      AZUCARES REDUCTORES + +5.      SAPONINAS + + + +6.      FENOLES / TANINOS --------

EST

RA

CT

O

AL

CO

HO

LIC

O

7.      QUINONAS ---------8.      CUMARINAS ---------9.      ACEITES ESENCIALES + +10.  AMINAS + + +11.  FLAVONOIDES --------12.  GLICOSIDOS --------13.  CAROTENOS +

CONCLUSIONES: Al hacer el análisis fitoquimico del jugo puro de la fruta de Luffa preculata, se ha encontrado que el principal metabolito secundario que presenta es la saponina ya que al

Imagen 3: Extracto se evaporizó con el mechero hasta dejar un una gota aproximado

Imagen 1: Tubos de ensayo con muestras de extracto acuoso: 1. Dragendorf, 2 Mayer, 3. Wagner, 4. Azúcares Reductores, 5. Saponinas, 6. Fenoles / Taninos, 7. Muestra sin ningún reactivo.

Imagen 2: Tubos de ensayo con muestras de extracto alcohólico: 1. Quinonas, 2 Cumarinas, 3 Aceites Esenciales, 4 Aminas, 5 Flavonoides, 6 Glicósidos, 7 Carotenos.

medir nos dio una altura de 4 cm de espuma, lo que es una gran cantidad que presenta en una concentración de 1:5 ml, los siguientes metabolitos que le siguen son la presencia de las aminas (color morado), azucares reductores, aceites esenciales.Con los resultados obtenidos concluimos que el fruto de Luffa operculata presenta una gran cantidad de saponina, metabolito secundario que se va a utilizar más adelante para seguir haciendo la investigación. Con el resultado obtenido se puede llegar a comprobar que esta planta si presenta gran cantidad de saponina.

VI.- CUESTIONARIO

1.- ¿Cuáles son los últimos cambios en la estrategia de investigación de los productos naturales a partir de los vegetales? La Biotecnología vegetal. La Biotecnología vegetal abarca la investigación sobre propagación vegetal, el desarrollo de nuevas variedades de plantas, la identificación y detección de organismos patógenos y la planificación y producción de productos naturales, (metabolitos secundarios) a partir de vegetales) Imagen 1.Se encarga de estudiar las basesBioquímica ecológica .Se encarga de estudiar las bases moleculares de las interacciones entre microorganismos, plantas y animales y su adaptación al medio ambiente. Su contenido abarca también los fundamentos a nivel molecular de las estructuras de control que permiten a los seres vivos censar los cambios ambientales y modificar su morfología, fisiología y metabolismo para poder responder a dichos cambios. Una parte de esta rama de la ciencia estudia las rutas metabólicas que las plantas utilizan para sintetizar compuestos químicos como mecanismos de defensa contra la herbivoría (Arango, 2013).

Farmacognosia

Ilustración 1: Biotecnología vegetal. (IICA, 1993)

En la actualidad se ha empezado a tomar más interés en las plantas como droga. La medicina herbolaria presenta hoy en día una alternativa útil frente al elevado costo de los medicamentos.Es por eso que la mayoría de las industrias farmacéuticas ha reconocido que las plantas utilizadas en la medicina folclórica probablemente proveen mayor fuente de productos que pueden servir como droga o prototipos de estas. En la actualidad de ha presentado la gran revolución de la ingeniería genética y la generación de nuevas técnicas para cultivos monoclonales y micropropagación in vitro ha permitido el desarrollo de la FARMOCOTECNOLOGÍA permitiendo producir e producto bioactivos en cantidades apreciables.

2.- Indique otros métodos analíticos para la determinación cualitativa y cuantitativa de los metabolitos secundarios.Marcha fitoquímica preliminar

Se han desarrollado una serie de métodos para la detección preliminar de los diferentes contribuyentes químicos, basados en la extracción de estos con solventes apropiados en la aplicación de prueba de coleccionen. En la siguiente Imagen 1 se presenta como para determinar los alcaloides, saponinas, flavonoides, antraquinonas, triterpenos y/o esteroides, etc.

Análisis fitoquímico.

Imagen 1: Marcha fitoquímica preliminar (Lock de Ugz, 2000).

Tiene como objetivo determinar los metabolitos secundarios presentes en las especies vegetales a estudiar, por ejemplo en las pala las plantas una serie de métodos para la extracción, separación, purificación y determinación de estructural, (UV. IR, RMN, EM) Tabla 1.

Fuente: (Lock de Ugz, 2000)

Bibliografía

Tabla 1: técnicas generales a aplicar en un análisis fitoquímico

Arango, M. C. (2013). INTERVENCIÓN DE LOS COMPUESTOS SECUNDARIOS EN LAS INTERACCIONES BIOLÓGICAS. En J. Ringuelet, & S. Viña, Productos Naturales Vegetales (págs. 191-261). La Plata: EDULP.

IICA. (1993). Requerimientos técnicos para la investigación y desarrollo en agrobiotecnologías. Bogotá: ISSN.

Lock de Ugz, O. (2000). Analisis fitoquimico y metabolitos secundarios. En V. López, & V. Vargas, Manual de fitoterapia (págs. 41-64). lima: ISALUD.