Nuevos Biomarcadores en Carcinoma de Páncreas

SPARC

Laboratorio de Dianas TerapéuticasCentro Integral Oncológico Clara Campal

Hospital Universitario Sanchinarro

Fernando López-Ríos

INDICE

• Introducción• SPARC como marcador pronóstico• SPARC como marcador predictivo• La IHC de SPARC• Conclusiones

Introducción

Introducción

Introducción

INDICE

• Introducción• SPARC como marcador pronóstico• SPARC como marcador predictivo• La IHC de SPARC• Conclusiones

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• Introducción• SPARC como marcador pronóstico• SPARC como marcador predictivo• La IHC de SPARC• Conclusiones

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• Introducción• SPARC como marcador pronóstico• SPARC como marcador predictivo• La IHC de SPARC• Conclusiones

Objetivos

• Los objetivos del presente estudio son:

– Búsqueda de anticuerpos comerciales para estudioinmunohistoquímico de la proteína SPARC.

– Puesta a punto en máquinas automatizadas.– Análisis de la expresión proteica de SPARC en 50 piezas

quirúrgicas provenientes de páncreas con adenocarcinoma,poniendo especial énfasis en la expresión de las célulasepiteliales tumorales y no tumorales de páncreas, del estromaincluyendo la matriz extracelular, fibroblastos y célulasinflamatorias y de las metástasis.

– Análisis de la expresión proteica de SPARC y su correlación conparámetros clínicos en una cohorte de pacientes tratados conAbraxane.

– Determinación o no de SPARC como biomarcador de Abraxane.

Human Protein Atlas

IHC SPARC

Antibody Clone N of refs

Takara ON-1 3

HaematologicalTechnologies

AON-5031 10

Zymed-Invitrogen ON-1 9

R&D Systems Poly and monoclonal

3

US Biological 8 H 12 2

Abcam Poly and monoclonal

4

Santa Cruz Poly and monoclonal

2

Novocastra 14G12 5

Sigma Polyclonal 2

IHC SPARC

Antibody Clone Retrieval Dilution Incubation

Invitrogen ON-1 CC2 (44 min) 1:500 32 min

Novocastra 15G12 CC1 (36 min) 1:50 60 min

Sigma Aldrich Polyclonal CC2 (44 min) 1:250 32 min

Positive tissue controls: Normal testis

IHC SPARC

Caso 1c (clon ON-1)Adenocarcinoma de páncreas. Lente óptica con aumento 20x. Aproximación de la zona tumoralcon tinción inmunohistoquímica intensa del estroma peritumoral. Ausencia de expresión de lascélulas epiteliales del adenocarcinoma.

Caso 1d (clon ON-1)Adenocarcinoma de páncreas. Lente óptica con aumento 40x. Aproximación de la zona tumoralcon un estroma que presenta abundantes fibroblastos con tinción inmunohistoquímica intensa delcitoplasma. Ausencia de expresión de las células epiteliales del adenocarcinoma.

Caso 2c (clon ON-1)Adenocarcinoma de páncreas. Lente óptica con aumento 20x. Aproximación de la zona tumoral

con tinción inmunohistoquímica intensa del estroma peritumoral. Ausencia de expresión de lascélulas epiteliales del adenocarcinoma.

Caso 2d (clon ON-1)Adenocarcinoma de páncreas. Lente óptica con aumento 40x. Aproximación de la zona tumoralcon un estroma que presenta abundantes fibroblastos con tinción inmunohistoquímica intensa delcitoplasma. Ausencia de expresión de las células epiteliales del adenocarcinoma.

Caso 8a (clon ON-1)Adenocarcinoma de páncreas. Lente óptica con aumento 10x. Aproximación de la zona tumoralcon tinción inmunohistoquímica leve-moderada del estroma peritumoral.

Caso 8b (clon ON-1)Adenocarcinoma de páncreas. Lente óptica con aumento 20x. Aproximación de la zona tumoral con presencia deun escaso número de fibroblastos con tinción inmunohistoquímica moderada en el citoplasma. Presencia devasos con positividad de las células endoteliales. Ausencia de expresión de las células epiteliales deladenocarcinoma y de la celularidad inflamatoria acompañante.

Caso 11b (clon ON-1)Adenocarcinoma de páncreas. Lente óptica con aumento 10x. Aproximación de la zona tumoralcon tinción inmunohistoquímica leve del estroma peritumoral.

Caso 11c (clon ON-1)Adenocarcinoma de páncreas. Lente óptica con aumento 20x. Aproximación de la zona tumoral con presencia de glándulas tumorales negativaspara SPARC. Hay abundante estroma entre las glándulas con mucha matriz extracelular pero escasos fibroblastos que muestran tinción leve-moderada de su citoplasma. Hay pequeños vasos acompañantes con positividad intensa del endotelio y células inflamatorias en númeromoderado que no se tiñen.

IHC 3+ IHC 2+ IHC 1+

IHC:

HER2 testing in gastric carcinoma: interpretation

HER2 Stroma SPARC Levels and Median OS

Pathologist 1

Pathologist 2Log‐rank p‐value 0.1670

Log‐rank p‐value 0.0272

OS-P1 Stroma-Her2

Time To Death/Censoring Jun'10

Perc

ent s

urvi

val

0 5 10 15 20 250

20

40

60

80

100Pos (N = 6): 21.2 moNeg (N = 6): 6.1 mo

OS-P2 Stroma-Her2

Time To Death/Censoring Jun'10

Perc

ent s

urvi

val

0 5 10 15 20 250

20

40

60

80

100Pos (N = 7): 18.5 moNeg (N = 5): 5.5 mo

4/10/2013 27

Agradecimientos

Peter Illei