manual de bioquimica da nutrição

7/29/2019 Manual de Bioquimica da Nutrio

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MANUAL DE AULAS PRTICAS

DATA:12/08/2013

CURSO: NUTRIOPROFESSOR:

Jos Roberto C. Lima

MANUAL DE AULAS PRTICAS DA DISCIPLINA DE BIOQUMICA DA NUTRIO

Professor: Jos Roberto da Cunha Lima

Bloco II

Parnaba Piau


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SUMRIO

Prtica 1: Do estudo e uso do laboratrio de qumica,

bioqumica, biofsica e fisiologia 01

Prtica 2: Vidrarias e equipamentos 10

Prtica 3: pH e tampes 15

Prtica 4: Determinao da concentrao das protenas 19

Prtica 5: Presso Sangunea Arterial no Homem 25

Prtica 6: Registro e Interpretao de um

Eletrocardiograma 27

Bibliografia 29

PRTICA 1:

DO ESTUDO E USO DO LABORATRIO DE QUMICA,BIOQUMICA, BIOFSICA E FISIOLOGIA

RECOMENDAES GERAIS

a) De Ordem Pessoal

Trabalhe com ateno e NO FUME, COMA OU BEBA dentro do

laboratrio;

Use calados e avental de mangas compridas fechadas;

Use sempre culos de segurana no laboratrio;

Use EPIs apropriados nas operaes que apresentarem riscos

potenciais; No use roupas de tecido sinttico, facilmente inflamveis;

No coloque reagentes de laboratrio no seu armrio de roupas;

No picote nenhum tipo de produto com a boca;

No leve as mos boca ou aos olhos quando estiver trabalhando

com produtos qumicos;

No use lentes de contato quando estiver trabalhando em

laboratrios;

No se exponha a radiaes ultravioleta, infravermelho etc; Feche todas as gavetas e portas que abrir;

Leia o roteiro, atenciosamente, antes de executar a prtica;

Planeje o trabalho a ser realizado;


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Trabalhe com quantidades indicadas de substncias evitando o

desperdcio dos reagentes, gs, luz e outros.

Verifique as condies de aparelhagem;

Em caso de incndio NUNCA USE EXTINTOR EM HUMANOS; Conhea as periculosidades dos produtos qumicos que voc

manuseia.

b) Referentes ao Laboratrio

Mantenha as bancadas sempre limpas e livres de materiais

estranhos ao trabalho;

Faa limpeza prvia, com material apropriado, aps esvaziar um

frasco de reagentes, antes de coloc-los para lavagem;

Rotule os reagentes ou solues preparadas e as amostras

coletadas;

Jogue papis usados e materiais inservveis no lixo somente

quando no apresentar riscos de contato com produtos qumicos

oxidantes;

Use pinas e materiais de tamanho adequado e em perfeito

estado de conservao;

Utilize a capela ao trabalhar com reaes que liberam fumos

venenosos ou irritantes; Evitar descartar produtos qumicos nas pias de laboratrio.

Em caso de derramamento de produtos txicos, inflamveis ou corrosivos,

tomar as seguintes precaues:

parar o trabalho, isolando na medida do possvel a rea;

advertir pessoas prximas sobre o ocorrido.

s efetuar a limpeza aps consultar a ficha de emergncia do

produto; alertar a chefia;

verificar e corrigir a causa do problema;

no caso do envolvimento de pessoas, lavar o local atingido com

gua corrente e procurar o servio mdico.

EQUIPAMENTOS DE SEGURANA

Os seguintes equipamentos de segurana devem estar ao alcance de

todos:

luvas e aventais;

protetores faciais;

culos de segurana;

mscaras contra gases e ps;

extintores de incndio;

chuveiros de emergncia;

lavador de olhos;

cobertores de segurana.

Use-os corretamente, em caso de dvidas, consulte o seu PROFESSOROU TECNICO DO LABORATORIO.

USO DE EQUIPAMENTOS E APARELHAGEM EM GERAL


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Planeje as operaes com novos equipamentos;

Leia previamente as instrues sobre o equipamento a ser

utilizado;

Saiba de antemo o que fazer em uma situao de emergncia.

USO DE EQUIPAMENTOS ELTRICOS

Instrues Gerais:

S opere equipamentos eltricos quando:

fios, tomadas e plug estiverem em perfeitas condies;

o fio terra estiver ligado;

tiver certeza da voltagem compatvel entre equipamentos e

circuitos;

No instale nem opere equipamentos eltricos sobre superfcies midas;

Verifique periodicamente a temperatura do conjunto plug-tomada;

Caso esteja anormal desligue-o e comunique ao PROFESSOR;

No use equipamentos eltricos sem identificao de voltagem.

Solicite ao Departamento competente que faa a identificao.

No confie completamente no controle automtico de

equipamentos eltricos;

Inspecione-os quando em operao;

No deixe equipamentos eltricos ligados no laboratrio, fora doexpediente normal, sem avisar a Superviso de turno e anotao

em livro de avisos ou dispositivo similar;

Remova frascos de inflamveis do local onde ir usar

equipamentos eltricos ou fonte de calor;

Enxugue qualquer lquido derramado no cho antes de operar

com equipamentos eltricos.

Chapas ou Mantas de Aquecimento

Use chapas ou mantas de aquecimento, para evaporao ou

refluxos de produtos inflamveis, dentro da capela;

No ligue chapas ou mantas de aquecimento com resduos

aderidos sobre suas superfcies;

Use termo-isolantes sob chapas ou mantas de aquecimento.

(Amianto ou similar).

USO DE CHAMA EM LABORATRIO

Use chama na capela ou nos locais onde for permitido.

No acenda o bico de Bunsen sem verificar e eliminar os seguintes

problemas:

Vazamentos;

dobra no tubo de gs;

ajuste inadequado entre o tubo de gs e conexes;

existncia de inflamveis ao redor; Fechar o registro da linha de gs aps seu uso;

No acenda maaricos, bico de Bunsen, etc, com a vlvula de gs

combustvel muito aberta;


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No deixe o bico de Bunsen aceso quando no estiver sendo

utilizado.

OPERAO EM CAPELASA capela s oferecer mxima proteo se for adequadamente utilizada.

OPERAO EM CAPELA COMUM

Nunca inicie um servio em capelas, sem que:

O sistema de exausto esteja operando;

Piso e janela estejam limpos;

As janelas estejam funcionando perfeitamente;

Nunca inicie qualquer trabalho que exija aquecimento, sem

remover produtos inflamveis da capela;

Deixe na capela apenas a poro de amostra a analisar, remova

todo o material desnecessrio, principalmente produtos txicos. A

capela no local de armazenamento de reagentes ou solues;

Mantenha as janelas das capelas com o mnimo de abertura

possvel, para maior proteo e maior velocidade facial do ar;

No coloque o rosto dentro da capela;

O sistema de exausto somente deve ser desligado 10 a 15

minutos aps o trmino dos trabalhos, para permitir limpeza dosistema. (gases txicos).

Observe os seguintes cuidados, ao sinal de paralisao do exaustor de

capelas:

pare a anlise imediatamente;

feche ao mximo a janela da capela;

coloque mscara contra gases, quando houver risco de exposio

a gases e vapores; avise o supervisor e o pessoal do laboratrio;

s reinicie a anlise no mnimo 5 minutos aps a normalizao de

exausto;

Procure instalar os equipamentos, vidros, dispositivos que gerem

contaminantes (gases, fungos e poeiras), a uma distncia maior

que 20 cm da face da capela;

Proteja o tampo da capela com folha plstica ou similar, quando

manusear cido fluordrico;

Nunca utilize a capela comum para cido perclrico ou

substncias radioativas.

RESDUOS

Definio

Toda substncia, no desejvel, resultante de um processo qumico no

qual ocorre transformao.

Cuidados

No jogue fora nenhum tipo de resduo sem antes verificar o localadequado para faz-lo;


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Para cada tipo de resduo existe uma precauo quanto a sua

eliminao, em funo da sua composio qumica e/ou biolgico.

Ex.:

no jogue produtos corrosivos concentrados na pia, eles spodem ser descartados depois de diludos ou neutralizados;

no descarte lquido inflamveis no esgoto

descarte os materiais biolgicos em local adequado

(DESCARTEX).

RECOMENDAES FINAIS

Tenha este Guia sempre mo no laboratrio e releia-o periodicamente.

O risco de acidente maior quando nos acostumamos a conviver com o

perigo e passamos a ignor-lo.

A segurana de um laboratrio est apoiada na determinao de cada um

de seus elementos:

VOC TAMBM RESPONSVEL

193 BOMBEIROS.

192 SAMU

INSTRUES GERAIS PRIMEIROS SOCORROS (BSICOS)

cido na peleLave imediatamente com soluo de bicarbonato de sdio.Aplique glicerina com Mg (OH)2 a 10%.Bata esta mistura at obter uma pasta homognea.Passe sobre a queimadura.

cido na bocaFaa bochecho com leite de magnsia. Aps, lavar com bastante gua.

cido nos olhosLave imediatamente com soluo de bicarbonato de sdio 1%.

lcali na pele

Lave o local com soluo de cido actico 0,1 mol/L ou vinagre.lcali nos olhosLave os olhos com soluo de cido brico 2%.

lcali na bocaFaa bochecho com soluo de vinagre 1: 4

Slido nos olhos ou ouvidosPingue algumas gotas de leo de cozinha.

Queimadura na pele (fogo, gordura, metais quentes, etc).Aplique uma pasta de Picrato de Butesin sobre o local.


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RISCO QU MICO(VERMELHO)

F SICO(VERDE)

BIOL GICO(MARROM)

ERGON MICO(AMARELO)

ACIDENTES(AZUL)

Fumos metlicos e

vapores

Rudo e ou som muito

alto

Microorganismos

(Vrus, bactrias,protozorios)

M postura do corpo em

relao ao posto detrabalho

Equipamentosinadequados,

defeituosos ouinexistentes

Gases asfixiantes H,He, N e CO2

Oscilaes e vibraesmecnicas

Lixo hospitalar,domstico e de animais

Trabalho estafante e ouexcessivo

Mquinas eequipamento sem

Proteo e oumanuteno

Pinturas e nvoas emgeral Ar rarefeito e ou vcuo Esgoto, sujeira, dejetos

Falta de Orientao etreinamento

Risco de queda de nvel,leses por impacto de

objetos

Solventes (emespecial os volteis) Presses elevadas Objetos contaminados

Jornada dupla e outrabalho sem pausas

Mau planejamento dolayout e ou do espao

fsico

cidos, bases, sais,alcois, -teres, etc.

Frio e ou calor eradiao

Contgio pelo ar e ouinsetos

Movimentos repetitivos Cargas e transportes emgeral

Reaes qumicasPicadas de animais

(ces, insetos, rpteis,roedores, aracndeos,

etc.)

Lixo em geral, fezes eurina de animais,

contaminao do solo egua

Equipamentosinadequados e no

ergonmicos

Risco de fogo,detonao de

explosivos, quedas deobjetos

Ingesto de produtosdurante pipetagem

Aerodispersides noambiente (poeiras

vegetais e minerais)

Alergias, intoxicaes equeimaduras causadas

por vegetais

Fatores psicolgicos(no gosta do trabalho,presso do chefe, etc)

Risco de choque eltrico(corrente contnua e

alternada)

A

G

E

N

T

E

S

CA

U

S

A

D

O

R

ES


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DIAMANTE DE HOMMEL

OXY Oxidante Forte

ACID cido Forte

ALK - Alcalino (Base) Forte

COR - CorrosivoW - No misture com gua

Vermelho Inflamabilidade:

4 - Gases inflamveis, lquidos muito volteis, materiais pirotcnicos

(


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RELATRIOS

Os relatrios, quando solicitados, devero ser entregues nas datas

combinadas, para no haver diminuio de nota. Eles devero ser escritos

de acordo com o modelo apresentado a seguir, que tambm se baseia

nas normas da ABNT.

O relatrio dever apresentar a seguinte estrutura:

(1) Capa Deve identificar, de forma clara e organizada, a autoria do

trabalho, a instituio na qual ele foi realizado e o ttulo do mesmo. Os

itens que devem constar da capa so:

(a) Nome da Universidade; (b) Centro de Cincias...; (c) Curso; (d)

disciplina; (e) ttulo; (f) aluno; (g) professor; (h) local; (i) data. Nesta ordem.

Deve conter ainda:Introduo uma espcie de carto de visitas e deve conter uma breve

apresentao do trabalho, a problemtica e os objetivos sem distino em

itens, ou seja, tudo isso presente no mesmo item

Introduo. Deve conter, tambm, a fundamentao terica, se esta no

vier em um tpico parte.

Metodologia Deve responder s seguintes perguntas: (a) Que

materiais, reagentes etc. voc usou e (b) o que e como voc fez?

Resultados e Discusso Voc expe os dados obtidos, os valores

determinados e deve discutir esses resultados a luz dos pressupostos

tericos, das previses feitas e dos objetivos. Nessas discusses

buscamos responder a perguntas do tipo: Os resultados eram esperados?

Os valores tm sentido? Que informaes importantes podemos tirar?

Que implicaes esses resultados podem ter?

Concluses um tpico mais resumido, deve ser objetivo e trazer

apenas aquilo que foi obtido.

Bibliografias Relaciona todas as fontes que voc usou para

fundamentar seu trabalho, buscar mtodos que foram usados etc. Deve

seguir as normas ABNT. Caso no tenha sido usado nenhum livro ou

outra fonte, colocar: Manual fornecido pelo professor.

Da Introduo em diante, todos os itens devem vir em sequncia

corrida. Isso quer dizer que voc no deve separar em pginas diferentes

os diferentes itens, ou seja, terminado um item, j escrever o item

seguinte, na mesma pgina se couber, com separao de dois espaos

(duas vezes a tecla Enter).


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PRTICA 2:

VIDRARIAS E EQUIPAMENTOS

ALMOFARIZ COM PISTILO

Usado na triturao e pulverizao de slidos.

BALO DE FUNDO CHATO

Utilizado como recipiente para conter lquidos ou solues ou

mesmo fazer reaes com desprendimento de gases. Pode seraquecido sobre oTRIPcomTELA DE AMIANTO.

BALO DE FUNDO REDONDO

Utilizado principalmente em sistemas de refluxo e evaporaovcuo, acoplado aROTAEVAPORADOR.

BALO VOLUMTRICO

Possui volume definido e utilizado para o preparo de solues emlaboratrio.

BECKER

de uso geral em laboratrio. Serve para fazer reaes entresolues, dissolver substncias slidas, efetuar reaes deprecipitao e aquecer lquidos. Pode ser aquecido sobre aTELA DE AMIANTO.

BURETA

Aparelho utilizado em anlises volumtricas.
http://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#TRIP%C3%89#TRIP%C3%89http://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#TRIP%C3%89#TRIP%C3%89http://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#TRIP%C3%89#TRIP%C3%89http://www2.fc.unesp.br/lvq/teladeamianto.gifhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/teladeamianto.gifhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/rotoevaporador.gifhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/rotoevaporador.gifhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/rotoevaporador.gifhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#TELA%20DE%20AMIANTO#TELA%20DE%20AMIANTOhttp://void%280%29/http://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#TELA%20DE%20AMIANTO#TELA%20DE%20AMIANTOhttp://void%280%29/http://void%280%29/http://www2.fc.unesp.br/lvq/rotoevaporador.gifhttp://void%280%29/http://www2.fc.unesp.br/lvq/teladeamianto.gifhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#TRIP%C3%89#TRIP%C3%89http://void%280%29/http://void%280%29/


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CADINHO

Pea geralmente de porcelana cuja utilidade aquecersubstncias a seco e com grande intensidade, por isto

pode ser levado diretamente ao BICO DE BUNSEN.

CPSULA DE PORCELANA

Pea de porcelana usada para evaporar lquidos dassolues.

CONDENSADOR

Utilizado na destilao, tem como finalidade condensarvapores gerados pelo aquecimento de lquidos.

DESSECADOR

Usado para guardar substncias em atmosfera com baixondice de umidade.

ERLENMEYER

Utilizado em titulaes, aquecimento de lquidos e para dissolversubstncias e proceder reaes entre solues.

FUNIL DE BUCHNER

Utilizado em filtraes a vcuo. Pode ser usado com a funo deFILTROem conjunto com o KITASSATO.
http://void%280%29/http://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#BICO%20DE%20BUNSEN#BICO%20DE%20BUNSENhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/buchkitassato.gifhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/buchkitassato.gifhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#KITASSATO#KITASSATOhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#KITASSATO#KITASSATOhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#KITASSATO#KITASSATOhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/buchkitassato.gifhttp://void%280%29/http://void%280%29/http://void%280%29/http://void%280%29/http://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#BICO%20DE%20BUNSEN#BICO%20DE%20BUNSENhttp://void%280%29/


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FUNIL DE SEPARAO

Utilizado na separao de lquidos no miscveis e na extrao

lquido/lquido.

FUNIL DE HASTE LONGA

Usado na filtrao e para reteno de partculas slidas. Nodeve ser aquecido.

KITASSATO

Utilizado em conjunto com o FUNIL DE BUCHNER emFILTRAES a vcuo.

PIPETA GRADUADA

Utilizada para medir pequenos volumes. Mede volumes variveis.No pode ser aquecida.

PIPETA VOLUMTRICA

Usada para medir e transferir volume de lquidos. No pode seraquecida, pois possui grande preciso de medida.
http://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#FUNIL%20DE%20BUCHNER#FUNIL%20DE%20BUCHNERhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/buchkitassato.gifhttp://void%280%29/http://void%280%29/http://www2.fc.unesp.br/lvq/buchkitassato.gifhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#FUNIL%20DE%20BUCHNER#FUNIL%20DE%20BUCHNERhttp://void%280%29/http://void%280%29/http://void%280%29/


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PROVETA OU CILINDROGRADUADO

Serve para medir e transferir volumes de lquidos. No pode seraquecida.

TUBO DE ENSAIO

Empregado para fazer reaes em pequena escala, principalmenteem testes de reao em geral. Pode ser aquecido com movimentoscirculares e com cuidado diretamente sob a chama doBICO DEBNSEN.

VIDRO DE RELGIO

Pea de Vidro de forma cncava usada em anlises eevaporaes. No pode ser aquecida diretamente.

ANEL OU ARGOLA

Usado como suporte do funil na filtrao.

BALANA DIGITAL

Para a medida de massa de slidos e lquidos no

volteis com grande preciso.

BICO DE BNSEN

a fonte de aquecimento mais utilizada emlaboratrio. Mais contemporaneamente tem sidosubstitudo pelasMANTAS E CHAPAS DEAQUECIMENTO.

ESTANTE PARA TUBO DE ENSAIO

usada para suporte dosTUBOS DE ENSAIO.

GARRA DE CONDENSADOR

Usada para prender o condensador haste do suporte

ou outras peas como bales, erlenmeyers etc.
http://void%280%29/http://void%280%29/http://void%280%29/http://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#BICO%20DE%20BUNSEN#BICO%20DE%20BUNSENhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#BICO%20DE%20BUNSEN#BICO%20DE%20BUNSENhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#BICO%20DE%20BUNSEN#BICO%20DE%20BUNSENhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/mantadeaquecimento.gifhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/mantadeaquecimento.gifhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/mantadeaquecimento.gifhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#TUBO%20DE%20ENSAIO#TUBO%20DE%20ENSAIOhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#TUBO%20DE%20ENSAIO#TUBO%20DE%20ENSAIOhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#TUBO%20DE%20ENSAIO#TUBO%20DE%20ENSAIOhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#TUBO%20DE%20ENSAIO#TUBO%20DE%20ENSAIOhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/mantadeaquecimento.gifhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/mantadeaquecimento.gifhttp://void%280%29/http://void%280%29/http://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#BICO%20DE%20BUNSEN#BICO%20DE%20BUNSENhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#BICO%20DE%20BUNSEN#BICO%20DE%20BUNSENhttp://void%280%29/http://void%280%29/


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PINA DE MADEIRA

Usada para prender o TUBO DE ENSAIO durante oaquecimento.

PINA METLICA

Usada para manipular objetos aquecidos.

PISSETA OU FRASCO LAVADOR

Usada para lavagens de materiais ou recipientesatravs de jatos de gua, lcool ou outros solventes.

SUPORTE UNIVERSAL

Utilizado em operaes como: Filtrao, Suporte paraCondensador, Bureta, Sistemas de Destilaoetc. Serve tambm para sustentar peas em geral.

TELA DE AMIANTO

Suporte para as peas a serem aquecidas. A funo doamianto distribuir uniformemente o calor recebidopeloBICO DE BUNSEN.

TRIP

Sustentculo para efetuar aquecimentos de soluesem vidrarias diversas de laboratrio. utilizado emconjunto com aTELA DE AMIANTO.
http://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#TUBO%20DE%20ENSAIO#TUBO%20DE%20ENSAIOhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#BICO%20DE%20BUNSEN#BICO%20DE%20BUNSENhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#BICO%20DE%20BUNSEN#BICO%20DE%20BUNSENhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#BICO%20DE%20BUNSEN#BICO%20DE%20BUNSENhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#TELA%20DE%20AMIANTO#TELA%20DE%20AMIANTOhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#TELA%20DE%20AMIANTO#TELA%20DE%20AMIANTOhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#TELA%20DE%20AMIANTO#TELA%20DE%20AMIANTOhttp://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#TELA%20DE%20AMIANTO#TELA%20DE%20AMIANTOhttp://void%280%29/http://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#BICO%20DE%20BUNSEN#BICO%20DE%20BUNSENhttp://void%280%29/http://void%280%29/http://www2.fc.unesp.br/lvq/prexp02.htm#TUBO%20DE%20ENSAIO#TUBO%20DE%20ENSAIO


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PRTICA 3:

BICO DE BNSEN

Introduo

utilizado no laboratrio como fonte de calor para diversas

finalidades, como: Aquecimento de solues, estiramento e

preparo de peas de vidro entre outros. Possui como

combustvel normalmente G.L.P (butano e propano) e como

comburente oxignio do ar atmosfrico que em proporo

otimizada permite obter uma chama de alto poder energtico.

a) Zona externa: Violeta plida, quase invisvel, onde os

gases fracamente expostos ao ar sofrem combusto

completa, resultando em CO2 e H2O. Esta zona chamada

de zona oxidante (Temperaturas de 1560-1540C).

b) Zona intermediaria: Luminosa, caracterizada por

combusto incompleta, por deficincia do suprimento de O2.

carbono forma CO, o qual se decompe pelo calor, resultando

diminutas partculas de C (carbono) que, incandescentes, do

luminosidade chama. Esta zona chamada de zona

redutora (Temperaturas abaixo de1540C).

c) Zona interna: Limitada por uma casca azulada contendoos gases que ainda no sofreram combusto mistura

carburante (Temperaturas em torno de 300C).

FENMENO DE EMISSO

Acontecem a nvel atmico ou molecular pela excitao de

um ou mais eltrons que absorvem energia trmica no

presente caso, passando a um estado excitado obedecendosempre os limites de transio permitidos dentro da

eletrosfera em seu sub-nvel. A desexcitao desse eltron ou


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eltrons acontece de maneira muito rpida com a

conseqente emisso de ftons com comprimento de onda

especfico para o tomo em questo.

Objetivos

- Aprender a utilizar o bico de Bunsen.- Aprender a aquecer tubos de ensaio e bquer em

laboratrio.

MATERIAL UTILIZADO:

Bico de Bunsen; Cpsula de porcelana; Trip de ferro;Fio de cobre; Tela de amianto; Fio de alumnio;

Suporte universal; Tubo de ensaio; Anel de ferro; Pina de madeira;

Mufa; Pina metlica; Bequer de 300 mL; Termmetro.

Para acender o bi co do gs, proceda da seguinte maneira:

a) Feche completamente a entrada de ar no bico;

b) Abra lentamente a vlvula do gs e aproxime a chama de

um fsforo lateralmente, obtendo uma chama grande e

luminosa, de cor amarela.

c) Abra vagarosamente a entrada de ar de modo que a chama

fique completamente azul;

d) Caso a chama se apague ou haja combusto no interior do

tubo, feche a entrada do gs e reinicie as operaes

anteriores. O gs combustvel geralmente o gs de rua ou o

G.L.P. (gs liquefeito de petrleo). O comburente, via de

regra, o ar atmosfrico.

Aquecimento de tubos de ensaio

Os tubos de ensaio com lquidos podem ser aquecidos

diretamente na chama do bico de Bunsen. A chama deve ser

mdia e o tubo deve estar seco por fora, para evitar que se

quebre ao ser aquecido. O tubo deve ficar virado para a

parede ou numa direo em que no se encontre ningum,

pois comum, aos operadores sem prtica, deixar que

repentinamente o lquido quente salte fora do tubo, o que

pode ocasionar queimaduras. O tubo seguro prximo de

sua boca, pela pina de madeira e agita-se brandamente,

para evitar superaquecimento do lquido.


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Procedimento Experimental

1. Uso do bico de Bunsen

A. Luminosidade da chama

Note o que acontece chama quando cada uma das

partes ajustveis do bico movimentada,

particularmente quando a vlvula de ar aberta e

fechada; qual ajuste das partes regulveis do bico

produz uma chama no luminosa e qual produz chama

luminosa?

Mantenha, segurando com as prprias mos, por

alguns segundos, uma cpsula de porcelana contendo

um pouco de gua fria, na chama luminosa por 2-3

segundos. No que consiste o depsito preto formado

na cpsula? Por que se coloca gua na cpsula?

B. Regies da chama:

Ajuste o bico e a velocidade de fluxo de gs de forma

que a chama seja no luminosa. Note que ela forma

um cone bem definido e faa um esquema da chama

indicando as 3 regies bem definidas.

C. Temperatura da chama:

Para ter uma ideia das temperaturas relativas em diferentes

regies de uma chama no luminosa proceda da seguinteforma:


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Mantenha horizontalmente por 30 seg. um fio de

cobre e um de alumnio nas seguintes posies da

chama:

a. no topo da chama;

b. no topo do cone inferior;

c. na base do cone inferior.

Observao: O cobre funde a 10830C e o Alumnio a 6600C.

D. Aquecimento de lquidos em bquer Colocar cerca de 100 mL de gua em um bquer de

250mL; acrescente gua, algumas prolas de

ebulio;

Colocar o bquer sobre a tela de amianto, suportada

pelo anel ou pelo trip de ferro;

Aquecer o bquer com a chama forte do bico de

Bunsen (janelas abertas e torneira de gs totalmenteaberta). Observar a ebulio da gua e anotar sua

temperatura de ebulio. T = ---------C.

Apagar o bico de Bunsen e deixar o bequer esfriando

no mesmo local.

E. Aquecimento de lquidos em tubo de ensaio

Coloque cerca de 4ml de gua em um tubo de ensaio;

Com pina de madeira, segurar o tubo, prximo a boca,

conforme Figura 1b;

Aquecer a gua, na chama mdia do bico de bunsen

(torneira de gs aberta pela metade e janelas abertas

pela metade), com o tubo voltado para a parede, com

inclinao de cerca de 45 e com pequena agitao,

at a ebulio da gua.

Retirar o tubo do fogo e deix-lo esfriar na estante para

tubos de ensaio.

PRTICA 4:

pH E TAMPES

Introduo

Soluo tampo ou soluo tamponada aquela que, ao adicionarmosuma pequena quantidade de cido ou base, mesmo que fortes, mantm o

seu pH praticamente invarivel.


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19

provvel que a observao destes fatos leve ao seguinte

questionamento:

Como as solues tampo conseguem manter o seu pH praticamente

constante?

Vamos imaginar uma soluo tampo constituda por uma base fraca

(BOH) e um sal (BA) derivado desta base.

Nesta soluo, ocorrem os seguintes fenmenos:

-Pequena dissociao da base (Conceito de Bronsted):

(Na soluo predominam frmulas da base BOH)

-Dissociao total do sal:

BA B+ + A-

(Na soluo predominam ons B+ e A-)

Observao: Note que o on B+ comum base e ao sal.

Ao juntarmos a esta soluo uma base forte, esta ir liberar ons OH-, que

sero consumidos pelo equilbrio:

Como consequncia, este equilbrio desloca-se para a esquerda, e com

isso a basicidade da soluo no aumenta e o pH no sofre variao.

Perceba que no ir faltar o on B+ para que o equilbrio acima se

desloque para a esquerda, uma vez que a dissociao do sal BA B+

+A- fornece uma boa reserva deste on.

Se juntarmos soluo tampo um cido qualquer, este ir se ionizar

colocando ons H+ em soluo. Estes ons H+ sero consumidos pelos

ons OH- resultantes da dissociao da base, e, desta forma, a acidez no

aumenta e o pH no muda.

H+ + OH- H2O

Perceba que no iro faltar ons OH - para reagir com o H+ do cido, pois a

base BOH fraca, e o estoque de frmulas BOH que continuar se

dissociando e fornecendo OH- muito grande.

Desta forma, conseguimos compreender que a soluo tampo s

resistir s variaes de pH at que toda base BOH ou todo sal BA sejam

consumidos. A resistncia que uma soluo tampo oferece s variaes

de pH recebe o nome de efeito tampo.

Caso a soluo tampo fosse constituda por um cido fraco e um sal

derivado deste cido, a explicao para o comportamento desta soluo

seria semelhante anterior.Conclumos, ento, que uma soluo tampo usada sempre que se

necessita de um meio com pH praticamente constante e preparada

dissolvendo-se em gua:

um cido fraco e um sal derivado deste cido;

uma base fraca e um sal derivado desta base.

CLCULO DO pH DE UMA SOLUO TAMPO

Vamos supor uma soluo tampo constituda por um cido fraco (HA) e

um sal (BA) derivado deste cido.

Neste caso, teremos:


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Deduzindo a expresso da constante do equilbrio para o cido fraco,

temos:

Como o cido fraco, a sua concentrao praticamente no varia durante

a ionizao, e a quantidade de on A- produzida muito pequena. Por

outro lado, o sal se dissocia totalmente, produzindo quase todo on A-,

presente na soluo.

[HA] [CIDO] e [A-] [SAL]

Portanto, a expresso da constante de equilbrio ficar:

Aplicando logaritmo aos dois membros da equao, teremos:

Para uma soluo tampo de base f raca e um sal derivado desta base,

podemos demonstrar que:

Como pH + pOH = 14, neste caso ficamos com: pH = 14 - pOH

Com isso teremos:

Para determinar o pH de uma soluo com indicadores de pH, adicionam-

se algumas gotas de soluo de um ou dois indicadores e compara-se acor desenvolvida com a cor de uma srie de solues-tampo de pH

conhecido e contendo a mesma quantidade de indicador.

Os indicares universais so misturas de vrios indicadores, cujos pK in se

sobrepem, o que permite abranger um intervalo de pH. Os papis

indicadores so papis impregnados de um indicador ou de indicadores

usados para determinao aproximada do pH. Veja a tabela abaixo:

INDICADOR pKa INTERVALO DE PH E CORAzul de timol 1,7 1,2 Vermelho 2,8 Amarelo

Amarelo de Metila 3,3 2,9 Vermelho 4,0 AmareloAlaranjado de Metila 3,5 3,1 Vermelho 4,4 LaranjaAzul de bromofenol 4,0 3,8 Amarelo 5,4 Azul

Verde de Bromocresol 4,7 3,8 Amarelo 5,4 AzulVermelho de Metila 5,0 4,2 Vermelho 6,3 AmareloVermelho de clorofenol 6,0 5,1 Amarelo 6,7 VermelhoPrpura de Bromocresol 6,2 5,2 Amarelo 6,8 Roxo

INDICADOR pKa INTERVALO DE PH E COR

Azul de Bromotimol 7,1 6,1 Amarelo 7,7 Azul

Vermelho de fenol 7,8 7,0 Amarelo 8,6 VermelhoVermelho de cresol 8,3 7,4 Amarelo 9,0 Vermelho

Azul de timol 8,9 8,0 Amarelo 9,6 AzulFenolftalena 9,4 8,3 Incolor 10,0 VermelhoIndicador Universal (Laranja demetila+Vermelho de metila+Azulde bromotimol+Fenolftalena)

3,0-Vermelho; 4,0-Alaranjado; 5,0-Laranja;6,0-Amarelo; 7,0-Verde;


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8,0-Verde azulado; 9,0-Azul; 10,0-Violeta; 11ou +prpura.

Papel de tornassol 4,5-Vermelho-8,3-AzulPapel vermelho de congo 3,0-Azul-4,5-Vermelho

Papel Indicador Universal

ACIDOSE E ALCALOSE

O pH dos fludos corporais deve permanecer dentro de l imites prximos. A

morte pode resultar de aumentos ou diminuies relativamente pequenos

de pH. A razo para nossa sensibilidade ao pH depende das enzimas que

catalisam as reaes qumicas do corpo. Sua atividade cai rapidamente

quando o pH muda. Uma vez que as enzimas desempenham papel to

crucial, sua inativao pode ser fatal.

Os tampes do plasma sanguneo so as primeiras defesas do corpo

contra as mudanas do pH interno. Seu papel manter o pH sanguneo

dentro dos limites 7,35 a 7,45. Se o pH do sangue de uma pessoa cai

abaixo de 7,35, diz que ela est com acidose, ou baixo pH sanguneo. A

acidose causa desorientao, coma e finalmente morte. Se o pH sobe

alm de 7,45, diz-se que ela est com alcalose, ou baixo pH sanguneo. A

alcalose pode causar respirao fraca e irregular, cibras musculares e

convulses. A acidose e a alcalose podem ser "respiratria", resultando de

mudanas na concentrao de H2CO3 ou "metablicas", resultando demudanas na concentrao de HCO3

-.

A acidose e a alcalose podem resultar de mudanas na concentrao de

HCO3-. Acidose metablica, ou baixa concentrao de HCO 3

-, pode

resultar de desidratao severa ou de diabetes mellitus no tratada.

Alcalose metablica, ou alta concentrao de HCO3-, pode resultar de

vmito ou overdose de anticidos.

A tabela seguinte resume as mudanas que ocorrem em cada uma destas

quatro condies:

CONDI O DIST RBIO pH

Acidose respiratria P(CO2) sobe diminui

Alcalose respiratria P(CO2) cai aumenta

Acidose metablica HCO3- diminui diminui

Alcalose metablica HCO3- aumenta aumenta

Para diagnosticar a condio cido-base de um paciente, uma amostra de

sangue arterial retirada. Medidas de pH, P (CO2) e CO2(H2CO3) total so

ento realizadas.Resumindo temos:

SOLUO TAMPO

Tampo H2CO3/HCO3-

- Responsvel pela manuteno do pH do sangue.

Objetivos

- Determinar o pH de solues utilizando os mtodos colorimtricos

(indicadores de pH);


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- Relacionar os conhecimentos adquiridos ao funcionamento dos tampes

de importncia biolgica

Procedimento

a) Experimento 1

Preparar uma bateria de 4 tubos de ensaio

TUBO 1: 5 gotas de indicador universal + 10mL de gua destilada

TUBO 2: 5 gotas de indicador universal + 1mL do tampo fosfato + 9mL

de gua destilada

TUBO 3: 5 gotas de indicador universal + 10mL de gua destilada

TUBO 4: 5 gotas de indicador universal + 1mL do tampo fosfato + 9mL

de gua destilada

Determinar o pH de cada soluo e anotar o resultado.

b) Experimento 2

TUBO 1: adicionar 1 gota de NaOH 0,1 mol/L.

TUBO 2: adicionar 1 gota de NaOH 0,1 mol/L.

Observar a mudana de cor, determinar o pH e anotar o resultado na

tabela.

TUBO 3: adicionar 2 gotas de HCl 0,1 mol/L.

TUBO 4: adicionar 2 gotas de HCl 0,1 mol/L.

Observar a mudana de cor, determinar o pH e anotar o resultado na

tabela.

Continuar a adio de HCl ao tubo 4, gota a gota, at a cor 3.

Determinar quantas gotas de HCl devem ser adicionadas at que se

obtenha a mesma colorao de tubo 3.

pHAntes Depois

TUBO 1

TUBO 2

TUBO 3

TUBO 4

N de gotas______ para obter pH=3


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PRTICA 5:

DETERMINAO DA CONCENTRAO DAS PROTENAS

Introduo

Os mtodos espectroscpicos baseiam-se na absoro e/ou emisso deradiao eletromagntica por muitas molculas, quando os seus eltrons

se movimentam entre nveis energticos. A espectrofotometria baseia-se

na absoro da radiao nos comprimentos de onda entre o ultravioleta e

o infravermelho (Fig. 1).

Figura 1. Espectro eletromagntico. A espectrofotometria utiliza a

radiao compreendida entre o ultravioleta (ultraviolet) e o infravermelho

(infrared).

A chamada radiao luminosa corresponde a uma gama de comprimentos

de onda que vai desde o ultravioleta ao infravermelho no espectro da

radiao eletromagntica (Fig. 2).

O espectro do visvel est contido essencialmente na zona entre 400 e800 nm (Tabela 1).

Tabela 1: Comprimentos de onda da luz visvel.


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Um espectrofotmetro um aparelho que faz passar um feixe de luz

monocromtica atravs de uma soluo, e mede a quantidade de luz que

foi absorvida por essa soluo (Fig. 3). Usando um prisma o aparelho

separa a luz em feixes com diferentes

comprimentos de onda (tal como acontece no arco-ris com a separao

das cores da luz branca). Pode-se assim fazer passar atravs da amostra

um feixe de luz monocromtica (de um nico comprimento de onda, ou

quase). O espectrofotmetro permite-nos saber que quantidade de luz

absorvida a cada comprimento de onda.

Fig. 3. Espectrofotmetro. A luz dividida em feixes de diferentes

comprimentos de onda por meio de um prisma ptico e passa atravs da

amostra, contida numa cubeta ou clula de espectrofotmetro.

1. Espectros de absoro

O conjunto das absorbncias aos vrios comprimentos de onda para um

composto chamasse espectro de absoro e varia de substncia parasubstncia. Se uma substncia verde, por exemplo, ento deixa passar

ou reflete a cor nesse comprimento de onda, absorvendo

mais a luz na regio do vermelho. A seguir podem ver-se espectros de

vrias substncias diferentes (Fig. 4).


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Fig. 4. Espectros de absoro de absoro de diferentes substncias (1:

bacterioclorofila; 2: clorofila a; 3: clorofila b; 4: ficoeritrobilina; 5: beta-

caroteno). A substncia 1, por exemplo, absorve pouco na regio do

visvel, logo deve ser praticamente incolor para os nossos olhos.

Uma vez que diferentes substncias tm diferentes padres de absoro,

a espectrofotometria permite-nos, por exemplo, identificar substncias

com base no seu espectro. Permite tambm quantific-las, uma vez que a

quantidade de luz absorvida est relacionada com a concentrao da

substncia, como vamos ver adiante. s vezes uma substncia, quando

alterada quimicamente, pode passar a apresentar um espectro de

absoro diferente. Quando isto acontece, temos uma maneira de

detectar essas mesmas alteraes. Por exemplo, o NADH reduzidoabsorve a 340 nm, enquanto que a forma oxidada no tem absorbncia

significativa a esse comprimento de onda (Fig. 5).

Essas diferenas de espectro podem ser utilizadas laboratorialmente para

seguir o percurso de reaes que se esteja a estudar, por exemplo,

reaes metablicas que envolvam a oxidao do NADH ou a reduo do

NAD+.

Fig. 5. Espectros de absoro do NAD+ e do NADH.

3.2. Espectrofotometria e quantificao

3.2.1. Princpios de absoro da luz:

1. A absoro da luz tanto maior quanto mais concentrada for a

soluo por ela atravessada:


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2.A absoro da luz tanto maior quanto maior for a distncia percorrida

pelo feixe luminoso atravs das amostras:

Juntando (1) e (2), temos a lei de Beer-Lambert:

Normalmente usam-se cubetas com 1 cm de comprimento, de modo que a

equao fica:

Ou seja, a absorbncia da luz a cada comprimento de onda l

diretamente proporcional concentrao da soluo contida na cubeta.

Esta linearidade deixa de ocorrer a concentraes muito elevadas da

substncia, podendo nesses casos diluir previamente a amostra a medir.

3.2.2. Mtodos colorimtricos


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Com alguma frequncia necessrio quantificar substncias em misturas

complexas, ou que no absorvem significativamente a luz a nenhum

comprimento de onda. Nestes casos utilizam-se os chamados mtodos

colorimtricos - o composto a quantificar posto em contacto com um

reagente especfico, de modo a desenvolver uma cor cuja intensidade

diretamente proporcional concentrao da substncia na mistura

original.

Por exemplo, para quantificar protenas numa soluo pura pode medir-se

a absorbncia a 280 nm, sendo esta proporcional concentrao de

protena. Mas se quisermos saber a concentrao de protena num extrato

impuro, este mtodo j no pode ser utilizado, porque outras substncias,

como por exemplo, os cidos nuclicos, tambm absorvem a este

comprimento de onda. Neste caso podemos utilizar, por exemplo, oreagente de Biureto, que reage de modo quantitativo com as protenas,

originando um complexo violeta, que absorve fortemente a radiao a 540

nm.

Para quantificar espectrofotometricamente uma substncia necessria,

obviamente, saber o valor de e. Para isso necessrio preparar uma srie

de solues do composto a quantificar, de concentrao conhecida, faz-

las contactar com o reagente e medir as absorbncias ao comprimento de

onda adequado (Fig. 8).

Fig. 8. Calibrao de um mtodo colorimtrico. A absorbncia ao

comprimento de onda escolhido diretamente proporcional

concentrao do composto na soluo.

No exemplo da Fig. 8, h uma relao linear perfeita entre a concentrao

da substncia (expressa em molaridade, M) e a absorbncia ao

comprimento de onda l de medida. Podemos assim obter uma reta do tipo

Al= el.c (ou Al= el.c + b, caso a reta no passe na origem)

em que Al a absorbncia ao comprimento de onda l de medida, c aconcentrao em M e el a constante de proporcionalidade. Sabendo esta

relao, podemos fazer corresponder uma absorbncia medida, a uma

concentrao de substncia na soluo a analisar.


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Muitas vezes o mtodo s linear at certa concentrao da substncia.

Nesse caso, utiliza-se a zona em que a relao linear, diluindo a soluo

a medir, sempre que necessrio, de modo a que a absorbncia resultante

esteja contida no intervalo da reta de calibrao.

Objetivos

Elaborar curvas de calibrao e trabalhar o conceito de sensibilidade de

um mtodo fotocolorimtrico;

Relacionar os mtodos vistos s aplicaes prticas;

Resolver problemas de clculo de diluies e de concentraes.

Materiais, Equipamentos e Reagentes

7 Tubos de ensaio; 6 Bqueres de 100

Pipetas de 1, 2 e 5 ml (prximas aos reagentes);

7 Pipetas de 2 5 ml;

1 Estante p/ tubos de ensaio;

1 Proveta de 100 ml;

Fotocolormetro (com cubetas).

Reativo do Biureto:

Sulfato de cobre cristalizado (pentahidratado) - 1,5g;

Tartarato duplo de sdio e potssio - 6,0g;

gua destilada - 500 ml;

Adicionar 300 ml de soluo de NaOH a 10% (p/v) (114,9 g/litro de NaOH)

sob constante agitao e completar para 1 litro com gua destilada.

Soluo de casena a 5 % em gua;

gua destilada.

Procedimento:

CURVA DE CALIBRAO

- Numerar 6 tubos de ensaio de 1 a 6;

- Adicionar os reagentes conforme a Tabela 1:

Reagentes

(mL)

Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tubo 5 Tubo 6

Soluo

Padro deProtena

(5mg/mL)

- 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0

gua

destilada 1,0 0,8 0,6 0,4 0,2 -

Reagente

Biureto 5,0 5,0 5,0 5,0 5,0 5,0

- Agitar e deixar em repouso por 10 minutos.

- Utilizar o tubo 1 para calibrar o espectrofotmetro: 100% de

transmitncia em 540 nm (ou o fotocolormetro com filtro verde.

- Determinar a absorbncia das solues dos tubos 2 a 6.


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- Calcular a curva padro construindo o grfico: Concentrao final de

protena (mg/mL) na ordenada e Absorbncia (A) nas abscissas.

DETERMINAO DA CONCENTRAO DE PROTENAS NA

AMOSTRA PROBLEMA

- Separar dois tubos de ensaio e identific-los.

- Adicionar os reagentes conforme tabela abaixo:

Tabela 1 Distribuio de reagentes em diferentes propores

Reagentes (mL) TUBO 1 TUBO 2

Amostra 1,0 0,5

gua destilada - 0,5

Reagente do Biureto 5,0 5,0

PROTEINAS TOTAIS - PP

Fundamento

As ligaes peptdicas das protenas (-HN-CO-)reagem com ons cpricos em meio alcalino (reagente do

biureto), formando um complexo de colorao violeta, cujaabsorbncia medida em 545 nm e diretamente proporcional aconcentrao de protena na amostra.

Amostra

Soro ou plasma (heparinizados). O analito e estvel por8 dias entre 2-8C.

Procedimento

Pipetar em tubos de ensaio identificados:

Tubos Branco Teste Padro

gua destilada 20 L - -

Amostra - 20 L -

Padro - - 20 LBiureto 1000 L 1000 L 1000 L

Agitar bem e deixar os tubos durante 10 minutos atemperatura ambiente.

Ler absorbncia do padro e do teste, zerando oaparelho com o branco em 545 nm.

Calculo


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O calculo pode ser efetuado atravs do Fator deCalibrao.

Cp

Fc = -------

Ap

Ct = Fc x At, onde:

Cp = concentrao do padro

Ct = concentrao do teste

Ap = absorbncia do padroAt = absorbncia do teste

Valores de referencia

Protenas totais

Soro 6,0 a 8,0 g/dL

Plasma 6,8 a 8,3 g/dL

PRTICA 6:

CARA CTERIZA O DE PROTENAS

I INTRODUOAs protenas, que so macromolculas de peso molecular

definido, so eletrlitos cujo comportamento se ajusta aos mesmos

princpios fsicos de eletrlitos de massa molecular menor. A natureza

qumica dos radicais R (cadeias laterais) dos aminocidos que compe a

estrutura primria das protenas determina a sua estrutura secundria

e/ou terciria.

O comportamento fsico-qumico das protenas est relacionado a

vrios fatores. A solubilidade por exemplo, depende pH, fora inica domeio, constante dieltrica do solvente e temperatura. Em geral as

protenas so menos solveis no ponto isoeltrico. Neste pH as protenas

no apresentam carga efetiva (as cargas positivas so iguais s

negativas) e portanto no atuam como foras eletrostticas entre as

outras molculas presentes no meio. De ambos os lados do pH isoeltrico

todas as molculas tero carga efetiva positiva ou negativa. Nestes

casos,pelo fato das molculas de protenas se repelirem, haver menor

tendncia para agregao e precipitao.

II OBJETIVOS ESPECFICOS


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No final deste trabalho prtico o aluno estar familiarizado com as

propriedades fsico-qumicas das protenas, bem como as tcnicas e

reaes de identificao das mesmas.

III REAO DO BIURETO

3.1 FundamentoA reao do biureto ocorre com substncias que contenham

grupos e grupos nitrogenados. Sendo assim, essa reao positiva

para todas as protenas e peptdeos graas s suas ligaes peptdicas.

Estas molculas, quando tratadas com uma soluo diluda de sulfato de

cobre, em meio alcalino, do colorao prpura caracterstica, devido

formao do complexo de coordenao entre o tomo de cobre e 4

tomos de nitrognio.

Biureto - (complexo de coordenao entre

peptdeos e cobre II, de cor prpura)

3.2 Procedimento

Montar uma bateria com:

Tubos

Amostra CuSO4 a0,5% mL

NaOH a 10%mL

1 gua, 2 mL 0,5 0,52 Clara de ovo a , 2 mL 0,5 0,53 Gema de ovo , 2 mL 0,5 0,54 Leite c , 2 mL 0,5 0,55 Extrato de Soja , 2

mL0,5 0,5

Solues preparadas por:

a) homogeneizao de 1 clara de ovo com 50 mL de gua;

b) homogeneizao de 1 gema de ovo com 50 mL de gua;

c) homogeneizao de 50 g (5 colheres mdias) de leite em p com 100

mL de gua;

d) homogeneizao de 10 g de farinha de soja de semente de soja em

100 mL de gua destilada.

Observar que em alguns tubos haver formao de uma colorao violeta,

caracterstica de reao positiva, enquanto que no tubo contendo apenas

gua e os reagentes verificar-se- uma cor azul escura caracterstica do

cobre em meio alcalino (formao de Cu (OH)2 e de xidos de Cu).C O

NH

Cu

HN NH

CHR

CO

HN

HC R

C O

NH


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IV REAES DE PRECIPITA O DE PROTENAS

4.1 Reaes de Precipitao de Protenas com

Desnaturao

4.1.1 Termocoagulao Coagulao pelo calor

As protenas so termolbeis, quando submetidas ao do calor

desnaturam irreversivelmente.

Procedimento Colocar em tubos de ensaio solues contendo protenas (ovo, soro,

etc); Aquecer, e observar a coagulao.

4.1.2 Coagulao com cidos minerais Reao deHeller

Fundamento

Os cidos minerais fortes desnaturam as protenas,transformando-as em metaprotenas, insolveis. A reao de Heller(reao de protenas com HNO3 concentrado) freqentemente utilizada

para a pesquisa de albumina na urina e permite a dosagem semi-quantitativa. Esta reao sensvel a concentrao da ordem 1:30.000.


***OBSERVAO:Para que se garanta a segurana, o experimento

a seguir dever ser efetuado na capela, pelo professor, de maneira

demonstrativa.

Colocar um tubo de ensaio: 2 mL de soluo protica Juntar cuidadosamente e vagarosamente, pelas paredes do tubo, 2

mL de HNO3 concentrado, sem misturar. Observar no limite deseparao das duas camadas um anel branco (protena e meta-protena).

4.1.3 Precipitao com Sais de Metais Pesados

Alguns sais de metais pesados precipitam as protenas, porexemplo: HgCl2, AgNO3 CuSO4, FeCl3, (CH2COO)2Pb (acetato dechumbo), etc. Outros somente precipitam protenas em meio cidos. Porexemplo: Na2WO4 (tungstato de sdio).

Procedimento A

Tubo

SoluoProtica - mL

CuSO40,5%

FeCl3 1% (CH2COO)2Pb 1%

1 22 2 *gotas

3 2 *gotas

4 2 *gotas


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* Adicionar gotas das solues de metais pesados soluoprotica, at observar a formao de precipitado.

PRTICA 7:

ENZIMAS I

Objetivos Especficos

Ao final deste trabalho prtico o estudante deversaber: Manipular experimentalmente solues de enzimas; Identificar experimentalmente as propriedades determolabilidade e especificidade; Manipular reaes catalisadas por enzimas com a

finalidade de determinar semiquantitativamente ainfluncia da concentrao de enzima, temperatura e dopH na atividade enzimtica.


1. Atividade da Catalase

Enzima presente em quase todas as clulas animais.a. Em um tubo de ensaio colocar: 10 gotas de sangue 5 mL de gua destilada homogeneizar

1 mL de H2O2 3% (10 volumes) agitar

b. Note a formao de espuma abundante. Procure umaexplicao para o fato. Esquematize a reao ocorrida.

2. Atividade da Peroxidase

A peroxidase uma enzima encontrada em todas asplantas superiores, sendo rara em tecidos animais. Asexcees so leuccitos, hemcias, fgado e rins.

a. Colocar em dois tubos de ensaio:

Tubos

Reativo Kastle-Meyer

gua -mL

Sanguediludo - mL

H2O2 3%gotas

1 1,0 - 5,0 32 1,0 5,0 - 3

b. Note o aparecimento imediato de cor rosa, que se intensifica,lentamente, no tubo que contm sangue.

OBS.: O reativo de Kastle-Meuer uma soluo alcalina defenolftalena reduza (AH2), que oxida diidroxifenis napresena de H2O2, formando a quinona correspondente. Nosendo oxidada pelo perxido de hidrognio (H2O2), nem pelooxignio molecular (O2). O sangue contm peroxidase, que

transfere dois tomos de hidrognio do substrato (AH2) paraH2O2, que convertido em H2O, oxidando assim afenolftalena, que adquire colorao rsea, em meio alcalino.


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AH2 + H2O2 2H2O + A+

Fenolftalena reduzida Fenolftalenaoxidada

PRTICA 8:

EXTRA O E CARA CTERIZA O DE LIPDEOS

I. Extrao de lipdeos de semente se soja

Procedimento experimental

a. Extrao Em copo de 100 mL pesar 10 g de soja moda e seca Adicionar 25 mL de lcool Agitar por 5 minutos Filtrar atravs de papel de fi ltro, para um bquer Lavar o resduo com 10 mL de lcool por duas vezes Evaporar o filtrado em banho de areia, com agitao

constante at diminuio total do lcool Observar o resduo amarelo e oleoso. Esse leo ser

utilizado como material para as provas seguintes.

b. Caracterizao1. Solubilidade

Em uma bateria de 9 tubos de ensaio numerados, colocar 3 gotas de leo vegetal emcada um e adicionar 3 mL de:

1- gua2- HCl a 4%3- Na2CO3 a 2%4- NaOH a 10%

5- Etanol

6- ter Sulfrico7- Clorofrmio8- Benzeno9- Acetona

Agitar vigorosamente e verificar:

a) Insolubilidade no 1 e 2 tubosb) Emulso estvel n 3 e 4

c) Solubilidade parcial no tubo n 5 que se torna total peloaquecimentod) Solubilidade total no demais tubos.

Juntar mais 20 gotas de leo nos tubos contendo:

ter Clorofrmio Benzeno Acetona

Observar a grande solubilidade do leo nesses solventes.


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Web sites recomendados

Sociedade brasileira de bioqumica e biologia molecular -

http://www.sbbq.org.br/

Faculdade Maurcio de Nassau

Manual de Aulas Prticas

Disciplina: BIOQUMICA DA NUTRIO

Curso de NUTRIO - Bloco II

Colaborador: Jos Roberto da Cunha Lima Professor de

Bioqumica da Nutrio do curso de Nutrio.
http://www.sbbq.org.br/http://www.sbbq.org.br/http://www.sbbq.org.br/

manual de bioquimica da nutrição

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