Resumo: 21.001

LASER DE BAIXA POTÊNCIA MODULA O REMODELAMENTO DA MATRIZ EXTRACELULAR NO MÚSCULO ESQUELÉTICO DE RATOS EM PROCESSO DE REPARO APÓS CRIOLESÃO.

Autores

1ALVES, A. N.

1,2, FERNANDES, K. P. S.

1, MELO, C. A. V. D.

1, YAMAGUCHI, R. Y.

1,

CARDOSO, B. G. R. 3, NUNES, F. D.

2, FRANÇA, C. M.

4, TEIXEIRA, D. F.

1, BUSSADORI, S. K.

1,2, MESQUITA-FERRARI, R. A.

1 Ciências da Reabilitação - UNINOVE,

2 Biofotônica aplicada às

Ciências da Saúde - UNINOVE, 3 Patologia Oral - FOUSP,

4 Exatas - UNINOVE

Apoio Financeiro: FAPESP (2011/17638-2; 2011/04452-8; 2012/11461-6) e CAPES

Resumo Introdução As lesões musculares representam um dos principais quadros clínicos encontrados nos centros de reabilitação. A terapia com laser de baixa potência (LBP) tem apresentado bons resultados no que diz respeito à modulação do processo de reparo muscular e prevenção na formação de fibrose. Objetivos Avaliar os efeitos do LBP sobre a deposição e organização das fibras colágenas e sobre a atividade gelatinolítica da metaloproteinase de matriz 2 (MMP-2) no músculo esquelético de ratos em processo de reparo. Código de Experimentação Animal AN0012/2012 Código de Experimentação Humana Métodos A metodologia deste estudo foi aprovada pelo Comitê de Ética em Pesquisa Animais da Universidade Nove de Julho (AN0012/2012). Foram utilizados 100 animais ratos, machos, da linhagem Wistar , com 12 semanas de idade e pesando entre 180-200 gramas divididos em 05 grupos: (1) Grupo controle; (2) Grupo “Sham”; (3) Grupo criolesionado sem tratamento; (4) Grupo criolesionado tratado com LBP e (5) Grupo sem lesão e irradiado com LBP. Os grupos criolesionados e o grupo irradiado sem lesão foram analisados nos períodos de 1, 3 e 7 dias após a lesão. A criolesão foi realizada por meio de duas aplicações de um bastão metálico de extremidade plana previamente resfriado em nitrogênio diretamente no ventre do músculo TA. O tratamento iniciou-se 2h após a indução da lesão e foi realizado diariamente utilizando o LBP (Twin Laser® MM Optics, São Carlos – SP, Brasil) com potência de 40 mW (densidade de potência de 1W/cm²), área do feixe de 0.04 cm², e comprimento de onda 780nm, meio ativo de Arseneto de Gálio e Alumínio ( AsGaAl ), com densidade de energia de 10 J/cm² (energia de 0.4 J) e tempo de aplicação de 10 segundos. Após o período experimental, os animais foram eutanasiados por inalação de CO2 e os músculos TA foram removidos e submetidos às análises das fibras colágenas por técnica histológica (coloração de Picrosirius sob luz polarizada), atividade e identificação da MMP-2 pelas técnicas de Zimografia e Western Blotting, respectivamente. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística (p ≤ 0,05 ANOVA/Tukey). Resultados A análise qualitativa das fibras colágenas permitiu verificar que após 7 dias estas começaram a apresentar maior organização em feixes. No grupo criolesionado foi observada distribuição difusa e desorganizada do colágeno predominantemente nas regiões de endomísio e perimísio. Já o grupo submetido à laserterapia apresentou maior organização dos feixes de colágeno dispostos de forma compacta, principalmente na região do perimísio. A análise

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quantitativa demonstrou que não houve diferença entre os grupos avaliados após 1 e 3 dias ( p > 0,05). Contudo, observou-se um aumento significativo na concentração de colágeno no grupo criolesionado sem (p≤0,01) e com (p≤0,05) tratamento após 7 dias em comparação com os demais grupos experimentais. No entanto, não foi observado diferença na concentração de fibras colágenas entre esses grupos ( p > 0,05). A análise da atividade gelatinolítica da MMP-2 demonstrou que o LBP promoveu um aumento de 75% (p≤0,01) na atividade da banda Pró e 91 % (p≤0,01) na banda ativa em comparação ao grupo lesionado que não recebeu tratamento após 7 dias. Conclusão O LBP promoveu efeitos positivos sobre o reparo do músculo esquelético modulando a atividade da MMP-2 e a organização e distribuição do colágeno neste tecido muscular.

Palavras-chaves: Colágeno, Laser, Lesão, Metaloproteinase de matriz 2, Músculo esquelético

Resumo: 21.002

EFEITOS DO LASER VERMELHO DE BAIXA INTENSIDADE PARA TRATAMENTO DE HERPES LABIAL NA SOBREVIVÊNCIA DE PLASMÍDIOS E NA TRANSFORMAÇÃO BACTERIANA

Autores

1SERGIO, L. P. D. S.

1, CANUTO, K. S.

1, MARCIANO, R. S.

1, TEIXEIRA, G. R.

1, POLIGNANO,

G. A. C. 1, GUIMARÃES, O. R.

2,1, GELLER, M.

3, PAOLI, F.

5,1,4, FONSECA, A. S.

1 Centro de

Ciências da Saúde - UNIFESO, 2 Setor de Facomatoses do Serviço de Genética Clínica - UFRJ,

3

Departamento de Morfologia, Instituto de Ciências Biológicas - UFJF, 4 Departamento de Ciências

Fisiológicas, Instituto Médico - UNIRIO, 5 Departamento de Biofísica e Biometria, Instituto de

Biologia Roberto Alcântara Gomes - UERJ

Apoio Financeiro: FAPERJ e UniFESO

Resumo Introdução A terapia com lasers de baixa intensidade na faixa do vermelho e infravermelho próximo do espectro eletromagnético é usada para tratamento de doenças em tecidos moles baseadas nos efeitos bioestimulativos. Protocolos terapêuticos baseados em lasers de baixa intensidade também são usado para o tratamento e prevenção/recorrência da manifestação de vírus da herpes simples. Objetivos O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do laser vermelho de baixa intensidade no DNA em fluências utilizadas para tratamento da herpes labial. Código de Experimentação Animal Código de Experimentação Humana

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Métodos Alíquotas de culturas de Escherichia coli AB1157 (selvagem), BW9091 (deficiente xthA) e BH20 (deficiente fpg/mutM) hospedando plasmídio pBSK, em fase exponencial e estacionária de crescimento, foram irradiadas com laser(660nm) em diferentes fluências (0, 45 e 60J/cm2) e a sobrevivência foi avaliada em meio contendo ampicilina. A partir de outras alíquotas foi realizada extração de plasmídios e a porcentagem da forma superespiralada em gel de agarose foi quantificada. Ácidos nucleicos e proteínas totais destas preparações de plasmídios foram quantificados para determinação do fator de bioestimulação. Células competentes de E. coli foram também irradiadas com laser e calculado o fator de transformação com plasmídios pBSK. Resultados Os dados obtidos na fase exponencial de crescimento para a fração de sobrevivência (controle e 60 J/cm2), para AB1157 foram (X±SD): 1,0±0,18 e 0,8±0,12; para BW9091: 1,0±0,21 e 2,4±0,29; para BH20: 1,1±0,23 e 0,5±0,13; na fase estacionária, para AB1157: 1,0±0,20 e 0,4±0,15; para BW9091: 1,0±0,23 e 1,8±0,30; para BH20: 1,0±0,15 e 1,2±0,20; as porcentagens da forma superespiralada (controle e 60 J/cm2) foram, para AB1157: 39,1±2,10 e 30,5±2,49; para BW9091: 32,9±3,10 e 38,8±0,94; para BH20: 39,4±3,72 e 31,4±2,04; os fatores de bioestimulação (ácidos nucleicos e proteínas) foram, para AB1157: 2,1±0,20 e 1,9±0,74; para BW9091: 1,5±0,10 e1,5±0,15; para BH20: 0,9±0,16 e 0,8±0,16; fatores de transformação (controle e 60 J/cm2) foram, para AB1157: 1,0±0,17 e 1,0±0,21; para BW9091: 1,1±0,12 e 1,0±0,18; para BH20: 1,0±0,14 e 1,4±0,30. Conclusão Os resultados obtidos sugerem que exposição ao laser vermelho de baixa intensidade em fluências utilizadas pra tratamento da herpes labial altera a sobrevivência do plasmídio pBSK em células de E. coli, a porcentagem da forma superespiralada, o conteúdo de ácidos nucleicos e proteínas, bem como a transformação de células competentes de E. coli com plasmídios pBSK.

Palavras-chaves: Laser, Escherichia coli, Reparo de DNA

Resumo: 21.003

ABCB1 AND ABCC1 TRANSPORTERS PROTECT SEA URCHIN EMBRYOGENESIS AGAINST UVB INJURIOUS EFFECTS.

Autores

1,2LEITE, J. C. D. A.

1,2, SIQUEIRA-JUNIOR, J. P.

1,2, MARQUES-SANTOS, L. F.

1 Departamento de

Biologia Molecular - UFPB, 2 Programa de Pós-Graduação em Produtos Naturais e Sintéticos

Bioativos - UFPB

Apoio Financeiro: CAPES/CNPq

Resumo Introdução UVB radiation (280-315 nm) may damage gametes and embryos of marine organisms that spawn in shallow waters. The first line of cellular defense against chemical or physical stresses is the activity of efflux pumps known as ATP Binding

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Cassette (ABC), a large integral membrane protein family that are involved in the transport of several compounds. Recently, our group characterized ABC transporters activity in Echinometra lucunter sea urchin gametes and embryos (Biosci Rep. 30:257, 2010). Objetivos The aim of the present study was to investigate the involvement of ABC transporters on the resistance to UVB in E. lucunter eggs and embryonic cells. Código de Experimentação Animal Código de Experimentação Humana Métodos Animals were collected at João Pessoa coast (Paraíba/Brazil – ICMbio authorization code: 32105-2) and gametes were obtained by KCl intracoelomic injection. Eggs or zygotes were irradiated with several UVB doses (112.5 to 3600 J/m 2 ) in the presence or absence of ABC proteins blockers: reversin205 (REV205, ABCB1 blocker), MK571 (ABCC1 blocker) or glybenclamide (GLY, ubiquitous ABC blocker). Embryos were cultured in the dark and the early embryonic development was monitored under optical microscopy. Resultados ABC blockers increased the UVB inhibitory effects on the progression to 2-cell embryos stage when eggs were exposed to radiation. MK571 treatment enhanced UVB effect at 30 ± 5.8% (112.5 J m -2 ), 25 ± 4.3% (450 J m -2 ) and 16 ± 0.6% (3600 J m -2 ) when compared to untreated group. GLY treatment increased UVB deleterious effect at 21 ± 4.8% (450 J m -2 ) when compared to irradiated untreated group. However, REV205 treatment did not alter UVB effect over 2-cell embryos progression. Similar results were obtained on the progression to the 4-cell embryos stage. ABC blockers also increased the UVB inhibitory effects on the progression to 2-cell and 4-cell embryos stages when zygotes (10 minutes post-fertilization) were exposed to radiation. REV205 increased UVB damage to 4-cell embryos progression at 900 and 1800 J m -2 (inhibition of 88 ± 0.8% and 100 ± 0.0%, respectively) when compared to irradiated untreated group (inhibition of 69 ± 3.4% and 93 ± 1.0%, respectively). GLY enhanced UVB injurious effect at 450, 900 and 1800 J m -2 (inhibition of 72 ± 3.2%, 87 ± 1.4% and 99 ± 0.8%, respectively) when compared to irradiated untreated group (inhibition of 38 ± 5.6%, 69 ± 3.4% and 93 ± 1.0%, respectively). Nevertheless, MK571 treatment did not increase UVB injurious effects on the progression to both stage analyzed. Conclusão These data show that ABCC1 protein protects eggs against UVB injurious effect and ABCB1 protein protects zygotes against UVB damage. Studies have shown an increase in ceramide levels, a well-known apoptosis inducer, after cell exposure to ultraviolet radiation (Chem. Biol. Interact. 180:327, 2009). ABCB1 and ABCC1 transporters may be involved in sphingomyelin externalization, a ceramide precursor. Further studies must be conducted to investigate the mechanisms whereby ABC transporters protect sea urchin eggs and zygotes to UVB injurious effects.

Palavras-chaves: ABC transporters, UVB, Sea Urchin, Gametes, Zygotes

Resumo: 21.004

EVALUATION OF THE SURGICAL PROCEDURE AND PARENCHYMAL CHANGES IN IMPLANTS OF BIODEGRADABLE SEEDS OF HOLMIUM IN BRAIN OF RATS

Autores

1DINIZ, M. F.

1, FERREIRA, D. M.

2, LIMA, W. G. D.

2, PEDROSA, M. L.

3, TOLEDO, J. M.

1,

SOUZA, I. K. F. D. 3, CAMPOS, T. P. R. D.

1, SIQUEIRA, S. L.

1 Escola de Medicina - UFOP,

2

Departamento de Ciências Biológicas - UFOP, 3 Departamento de Engenharia Nuclear - UFMG

Apoio Financeiro: FAPEMIG, UFOP

Resumo Introdução The cancer affects a large portion of the world population. Techniques for controlling neoplastic tissue must be carefully investigated, and one effective method of treatment is the brachytherapy, in which radioactive seeds are implanted in the tumor, giving a high local dose of radiation that can eliminate tumor cells and protect the surrounding healthy tissue. These seeds must be thoroughly investigated since they can provide an effective radiation for various types of tumors. Objetivos To investigate the biocompatibility and biodegradability, evaluate the surgical procedure and parenchymal abnormalities in implants ceramic seeds of Holmium-166 in rat's brain. Código de Experimentação Animal 2012/034 Código de Experimentação Humana Métodos The experiments in this study were approved by the Ethics Committee on Animal Use (CEUA), Federal University of Ouro Preto, protocol number 2012/034. Twenty-one female Fischer rats, with six months, weighing approximately 230 grams, were used divided into three groups: control group (CTL) - the absence of surgical procedure; Group Sham (SHAM) - underwent the surgical procedure without implantation of seeds; Group with seed implantation of biodegradable Holmium (ISBH) - submitted to the surgical procedure and implantation of the seeds. The animals were weighed prior to their surgical procedure and after 30 days of it, which correspond to the day of euthanasia. Surgical procedures for implantation of biodegradable seeds consisted of a perforation in the skull of rats, allowing the deployment of a group of three seeds, and thirty days after the implant were performed radiographic examination and biopsy of the brain. Neurological tests were performed to exclude any injury resulting from surgery or implantation of the seeds. For the statistical analysis we used the software Prism 5.0, with significance level of 5% (p <0,05). Resultados There was no difference between the weight of the animals in any of the two moments (before surgery: CTL: 238.9±4.7, SHAM: 244.0±3.3, ISBH: 247.0±7.7; after surgery: CTL: 246.4±5.6, SHAM: 235.1±4.3, ISBH: 238.5±8.2). Radiographic examination was possible to confirm the location of the seeds, due to their radiopacity. Neurological testing animals showed regular spontaneous activity, symmetry in the movement of all four limbs when suspended by the tail, legs symmetrical when the animal is held on a surface by the tail, climbing wire cage with a clamping force as this rose/grabbed easily, body proprioception equal on both sides, balance (wooden bar of 1.5 cm wide) 24h: 2 feet well supported, and 15 days: 4 feet well supported (CTL: 100%, SHAM: 100%, ISBH: 86%). The histological analysis showed an increase of inflammatory cells in brain of ISBH when compared with SHAM group and CTL group (ISBH: 20±2; SHAM: 5±1; CTL: 4±1 cells by microscopic field, p <0.0001). Conclusão

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Our results indicate that the procedure performed is safe, since no animal showed alteration of neurological parameters evaluated and the seeds were not able to promote architectural histological changes in brain. We are accessing new histological and biochemical analyzes in brain trying to understand mechanism and effects of the seeds over tissues.

Palavras-chaves: Brachytherapy, Brain, Holmium, Morphometry, Seeds

Resumo: 21.005

RADIOLABELING AND ENCAPSULATION SYNTHESIS PROCEDURES FOR THE PREPARATION OF 99mTc LABELED PEPTIDES FOR ASSESSMENT OF AMYLOIDAL PLAQUES

Autores

1SOBRAL, D. V.

2, CABRAL, F. R.

3, NAKAIE, C. R.

4, MARTINS, O. P.

4, TEDESCO, A. C.

1,

MALAVOLTA, L. 1 Ciências Fisiológicas - FCMSCSP,

2 Instituto do Cérebro - IIPAE,

3

Departamento de Biofísica - UNIFESP, 4 Departamento de Química - USP - Ribeirão Preto

Apoio Financeiro: FAPESP

Resumo Introdução Considerable efforts have been made to design new peptide-carrier macrostructures which allow a stable and controlled release form of peptides in the brain. Recent findings demonstrate that the use of nanotechnology and molecular imaging methods have been used to assess diagnostic data of the central nervous system (CNS) Neuropeptides 45; 309, 2011. Objetivos The goal of the present work was to test encapsulation and radiolabeling strategies applicable for monitoring fibril formation induced by peptide aggregation process, responsible for some types of brain disorders. Código de Experimentação Animal 001/11 Código de Experimentação Humana Métodos Based upon the (1-42) AΒ-amyloid peptide present in Alzheimer’s disease, the VHHQKLVFFAED (12-24) fragment and also the (36-42) and (16-20) but attaching a His residue at their C-terminal positions (VGGVVIAH and KLVFFH, respectively), were synthesized, purified and tested as potential biomarkers. The microspheres using the biodegradable polymer PLGA (poly-lactic-co-glycolic acid) were used as the support for inducing controlled biomarkers releasing system. The nanoparticles (Np) were prepared using the method of double emulsification and solvent evaporation In regard to the radiolabeling approach, the 99mTc radioisotope was used to label the peptide sequences at His residues. Resultados

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All peptides were efficiently entrapped by PGLA nanoparticles. Higher encapsulation efficiency was verified in the order KLVFFH (72.3%) ≥ VGGVVIAH (69.8%) ≥ VHHQKLVFFAED (51.6%) These results showed that the encapsulation degree of the larger (12-24) segment was less effective than the others thus stressing the importance of the peptide length to this internalization process. Visualization of the penetration in the hippocampus of mice with confocal microscope was carried out by testing both the PLGA and PLGA polymers derived with phthalocyanine probe. The analyses of the images obtained in the in vivo experiments showed clearly that the nanoparticles with PLGA-phthalocyanine were able to cross the blood brain barrier, thus suggesting improved bioavailability and uptake for Np delivery into the brain. The radiolabeling studies showed that stable metal-peptide complexes were obtained in 10-5 to 10-6M peptide concentration range. Noteworthy, higher metal labeling yield was achieved with peptide segments bearing His residues at peptide C-terminal position, thus pointing to a position-dependent effect for the 99mTc coupling reaction. Conclusão The findings indicate potentials for the proposed encapsulation and radiolabeling strategies applicable for in vitro and in vivo diagnostic assays with these peptides for the study of amyloid plaques.

Palavras-chaves: Peptide, Amyloidal plaques, Radiolabeling, Encapsulation, Alzheimer

Resumo: 21.006

EFEITOS DO LASER VERMELHO DE BAIXA INTENSIDADE NO CRESCIMENTO BACTERIANO, NA FILAMENTAÇÃO E EM PLASMÍDIOS

Autores

2SANTOS, J. N.

2, ROOS, C.

2, GUIMARÃES, O. R.

2, GELLER, M.

3, PAOLI, F.

2,4,5, FONSECA, A.

S. 2 Centro de Ciências da Saúde - UNIFESO,

3 Departamento de Morfologia - UFJF,

4 Ciências

Fisiológicas - UNIRIO, 5 Biofísica e Biometria - UERJ

Apoio Financeiro: FAPERJ, UNIFESO

Resumo Introdução A exposição de microorganismos não fotossintetizantes à luz pode aumentar a divisão celular em culturas, fenômeno denominado bioestimulação. Entretanto, dados sobre a importância das características genéticas das células neste efeito são ainda escassos. Objetivos O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos do laser de baixa intensidade no crescimento, indução de filamentação e em plasmídios em células de Escherichia coli proficientes e deficientes no reparo do DNA. Código de Experimentação Animal Código de Experimentação Humana

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Métodos Culturas de E. coli AB1157 (selvagem) e BW9091 (deficiente em exonuclease III) foram expostas ao laser vermelho (658 nm) em diferentes fluências (0, 1 e 8 J/cm2) para avaliar o crescimento bacteriano e filamentação por até 4 horas. Também, culturas bacterianas hospedando plasmídios pBSK foram expostas ao laser para avaliar a forma superespiralada do DNA plasmidial através do perfil eletroforético em géis de agarose. Resultados Os dados obtidos para fator de crescimento bacteriano para AB1157 (controle e 8 J/cm2) foram (média±desvio padrão): 5,1±0,77 e 5,9±2,11; para BW9091: 9,8±3,53 e 11,0±2,71. As porcentagens de filamentação para AB1157 foram: 4,7±0,58 e 21,0±1,00; para BW9091: 28,0±4,00 e 77,7±3,79. As porcentagens da forma plasmidial superespiralada em AB1157 foram: 66,5±1,43 e 56,5±5,40; para BW9091: 76,4±1,96 e 79,4±5,35. Conclusão Os resultados obtidos sugerem que a exposição ao laser vermelho de baixa intensidade não alteraria o crescimento das culturas bacterianas avaliadas, mas seria capaz de alterar a porcentagem da forma superespiralada do plasmídio pBSK e de induzir filamentação em células de E. coli selvagem e deficiente em exonuclease III.

Palavras-chaves: Bioestimulação, Reparo do DNA, Escherichia coli, Plasmídios

Resumo: 21.007

EFEITO DO LASER DE BAIXA POTÊNCIA 780NM SOBRE A PROLIFERAÇÃO DE CÉLULAS MUSCULARES CULTIVADAS NA PRESENÇA DE LPS

Autores

1VICTOR, E. C.

1, SILVA, R. E. C. D.

1, CARDOSO, V. D. O.

1,2, FERNANDES, K. P. S.

2,

BUSSADORI, S. K. 1, MESQUITA-FERRARI, R. A.

1 Biofotônica aplicada as ciências da saúde e

Ciências da Reabilitação - UNINOVE

Apoio Financeiro: (473710/2011-0; 143580/2012-4), CAPES/PROSUP

Resumo Introdução O laser de baixa potência (LBP) é muito utilizado na prática clínica com o intuito de acelerar o processo de reparo do tecido muscular esquelético. Após situações de lesão muscular inicia-se o processo de reparo muscular que requer a ativação de células satélites (CS) que passam a proliferar sendo então chamadas de mioblastos. O lipopolissacarídeo (LPS), comumente utilizado para mimetizar quadros de infecção, é uma endotoxina presente na camada externa de bactérias gram-negativas. A administração do lipopolissacarídeo (LPS), nas células musculares induz a alterações na fisiologia muscular e liberação de diversas citocinas. Objetivos Assim o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do LBP em mioblastos cultivados na presença de lipopolissacarídeo

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(simulação de miosite). Código de Experimentação Animal Código de Experimentação Humana Métodos Para os experimentos as células musculares foram cultivadas em meio de cultura DMEM suplementado com 2% de soro de cavalo para indução do processo de diferenciação. Além disso, as células receberam tratamento com LPS na concentração de 0,1 μg/ml. Posteriormente, as células foram submetidas a tratamento com laser de baixa potência (LBP) Arseneto de Gálio Alumínio (780 nm), potência de 40 mW/cm 2 , densidade de energia de 20 J/cm 2 com o tempo de 20 segundos. A viabilidade celular (atividade mitocondrial) foi avaliada após 1, 2 e 3 dias utilizando o método de MTT. Foram realizados três experimentos independentes em cada condição citada e células não irradiadas serviram como controle. Resultados Houve um aumento na atividade mitocondrial das células tratadas com LPS após 1 dia (D.O. 0,206±0,010), 2 dias (D.O. 0,36±0,029) e 3 dias (D.O. 0,615±0,031) em relação aos grupos controle avaliados nestes mesmos períodos (D.O. 0,144±0,024 após 1 dia; 0,151±0,025 após 2 dias; 0,193±0,005 após 3 dias). Os grupos tratados com LPS e que receberam a irradiação laser evidenciaram uma redução na atividade mitocondrial após 1 dia (D.O. 0,153±0,0166), 2 dias (D.O. 0,177±0,147) e 3 dias (D.O. 0,193±0,023) em relação aos grupos somente tratados com LPS avaliados nos mesmos períodos. Conclusão O tratamento com laser promoveu uma redução da atividade mitocondrial de células cultivadas na presença de LPS, sendo que esta pode refletir em uma redução da proliferação celular compatível com o processo de diferenciação que foi induzido concomitantemente.

Palavras-chaves: LASER, LIPOPOLISSACARÍDEO, MIOBLASTOS

Resumo: 21.008

EFEITOS ANTAGÔNICOS DO LASER EM BAIXA INTENSIDADE NA EXPRESSÃO E PRODUÇÃO DE IL-6 POR MACRÓFAGOS.

Autores

1SOUZA, N. H. C.

1,2, MESQUITA-FERRARI, R. A.

4, SILVA, D. F. T.

1, ALVES, B. M.

3, ROCHA,

L. A. 3, NUNES, F. D.

1,2, FERNANDES, K. P. S.

1 Programa de Pós-graduação em Ciências da

Reabilitação - UNINOVE, 2 Programa de Pós-graduação em Biofotônica aplicada às Ciências da Saúde

- UNINOVE, 3 Departamento de Patologia Oral - FOUSP,

4 Exatas - UNINOVE

Apoio Financeiro: PROSUP/CAPES e FAPESP 2011/14474-9.

Resumo Introdução Após a ocorrência de uma lesão muscular, células inflamatórias invadem o local a fim de reparar este tecido. Dentre estas, os macrófagos merecem destaque por orquestrarem as diferentes fases do reparo muscular por meio da produção de diferentes citocinas, enzimas e fatores de crescimento. Dentre estes produtos, já foi descrito que a IL-6 tem papel de atrair células satélites musculares e mielóides para local da lesão e ainda é capaz de promover a proliferação de células satélites. Por outro lado, o laser em baixa intensidade (LBI) tem sido bastante utilizado clinicamente nos quadros de lesão muscular, mas pouco se conhece sobre seu efeito sobre as funções dos macrófagos e em especial sobre a produção de IL-6. Objetivos O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do LBI na produção e expressão de IL-6 por macrófagos J774. Código de Experimentação Animal Código de Experimentação Humana Métodos Macrófagos da linhagem J774 foram ativados por 24 h com IFN-gamma (0,2 μg/mL) e LPS (1μg/mL) para simular a ativação ocorrida em um quadro inflamatório, e então foram irradiados com 2 parâmetros de LBI (780nm; 70 mW; 3J/cm 2 e 660nm; 15mW; 7,5J/cm 2 ). Após 1 e 3 dias das irradiações, o sobrenadante das culturas dos diferentes grupos experimentais foi usado para dosagem de proteínas pelo método ELISA. A expressão gênica de IL-6 foi avaliada por qPCR após 4 e 24 h das irradiações. O grupo controle foi constituído de células não ativadas (não tratadas com LPS e IFN-gamma) e não irradiadas. Foram realizados três experimentos independentes e os resultados foram submetidos à análise

estatística por ANOVA utilizando o software OriginPro 8 (OriginLab Corporation, EUA) com p ≤0,05. Resultados Nos experimentos de dosagem de proteínas, após 1 dia de cultivo, os macrófagos ativados produziram mais IL-6 (838,65±56,45 pg/mL) do que os do grupo controle (0±23,45 pg/mL) evidenciando a eficiência do método de ativação. A irradiação com laser de 660nm aumentou significativamente a quantidade de IL-6 produzida pelos macrófagos ativados (978,78±84,77 pg/mL), já a irradiação com laser de 780 nm diminuiu a produção desta proteína (617,37±121,55 pg/mL) de maneira estatisticamente significante quando comparada a produção das células somente ativadas. Após 3 dias de cultivo, os macrófagos ativados continuaram produzindo mais IL-6 (870,83±105,43 pg/mL) do que os do grupo controle (433,01±61,26 pg/mL), já nos grupos irradiados com lasers de 660nm (869,74±151,72 pg/mL) e 780nm (769,67±115,05 pg/mL) a modulação deixou de ocorrer. Nos experimentos de expressão gênica, após 4h da irradiação, os macrófagos ativados demonstraram uma maior expressão de IL-6 (2,42±0,32 UI) que os do grupo controle (0,35±0,01 UI), porém o LBI (nos 2 parâmetros testados) não foi capaz de modular esta expressão (660nm 2,79±1,27UI e 780nm 2,21±0,39 UI). Após 24h da irradiação, o grupo ativado e irradiado com laser de 660nm expressou mais IL-6 (4,32±0,96 UI) que o grupo somente ativado (2,50±1,04 UI) e que o grupo ativado e irradiado com laser de 780nm (1,88±1,24 UI). Conclusão O LBI pode ter efeitos opostos sobre a produção de IL-6 por macrófagos ativados e esta diferença deve estar relacionada aos parâmetros dosimétricos. Assim, mais estudos são necessários para avaliar os seus efeitos sobre os outros produtos dos macrófagos, bem como os mecanismos envolvidos nesta modulação.

Palavras-chaves: Citocinas, Inflamação muscular, Laser em baixa intensidade, Macrófagos

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Resumo: 21.009

Avaliação do processo de reparo tecidual em tendão de Aquiles de ratos após indução de tendinopatia por colagenase: efeito do laser de baixa intensidade e de drogas anti-inflamatórias

Autores

1ROSSI, R. P.

2, MARCOS, R. L.

2, LEAL JUNIOR, E. C. P.

3, FRIGO, L.

1, SILVA, P. A. D.

4,

BJORDAL, J. M. 5, PARIZOTTO, N. A.

2, TORRES, R.

1,2, LOPES-MARTINS, R. A. B.

1

Farmacologia - USP, 2 PPG BIOFOTONICA - UNINOVE,

3 CIENCIAS DA SAÚDE - UNICSUL,

4

HEALTH SCIENCES - PHYSIOTHERAPY - UiB, 5 Fisioterapia - UFSCar

Apoio Financeiro: FAPESP;CAPES;

Resumo Introdução Tendinopatias, osteoartrite e afecções envolvendo a coluna vertebral, são as desordens musculoesqueléticas mais comuns na sociedade atual. Dentre os acometimentos citados, podemos destacar a tendinopatia do tendão do calcâneo, mundialmente conhecido como tendão de Aquiles. A tendinopatia é uma alteração clínica caracterizada pela dor e edema na região do tendão e em torno do mesmo, afetando a funcionalidade e a realização dos movimentos. Nas últimas três décadas a incidência deste estado clínico cresceu consideravelmente, resultado da grande participação da população em atividades físicas recreativas e competitivas. Tendo em vista a alta incidência desta lesão, diversas terapias e tratamentos são utilizados para inibir a evolução dos sinais e sintomas. Entre as várias opções descritas atualmente, temos: drogas anti-inflamatórias aplicadas localmente ou por via oral, eletroterapia, técnicas de mobilização articular, cinesioterapia, terapias comportamentais, entre outras. Nota-se a grande variedade de tratamentos colocados a disposição da população, porém, a utilização de drogas anti-inflamatórias obtém destaque através de sua ação analgésica a curto prazo. Apesar dos mecanismos e efeitos destas drogas serem compreendidos, estudos analisando seus efeitos a longo prazo representam uma pequena parcela das pesquisas. Buscando novas alternativas no tratamento, a laserterapia de baixa intensidade vem sendo amplamente estudada e utilizada na atualidade, tendo um número razoável de publicações de caráter científico comprovando o seu efeito anti-inflamatório e reparador em diferentes afecções, incluindo a tendinopatia de Aquiles. Objetivos O presente estudo teve como objetivo avaliar o processo de reparação e reorganização tecidual em tendões de Aquiles de ratos submetidos a tendinopatia por injeção de colagenase, sendo estes tratados unicamente com laserterapia de baixa intensidade, anti-inflamatório esteroidal ou anti-inflamatório não-esteroidal. Código de Experimentação Animal 144-78 Código de Experimentação Humana Métodos Ratas Wistar fêmeas foram submetidas a injeção transcutânea de colagenase (100 μg/tendão) na região peritendínea das patas e posteriormente divididas e tratadas nos seguintes grupos: laser (3 J), diclofenaco potássico (1,1 mg/kg) e

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dexametasona (0,02 mg/kg). Foram realizadas análises histomorfológicas, incluindo o score de achados, quantidade de colágeno presente no tecido e nível de agregação/organização das fibras colágenas por microscopia óptica e de bi-refringência. Foi utilizado um Laser operando no infra-vermelho próximo (830nm) com 100 mW de potência e área de spot de 0,028 Cm2 em 30segundos de irradiação. Energia total liberada de 3 Joules (Thera-Lase DMC). Resultados Quanto a quantidade de colágeno, após 12 horas da indução da lesão, observamos uma redução significativa da quantidade de colágeno nos grupos lesão (86 ± 2,8), 3J (95 ± 3,9), Diclo (88 ± 6,1) e Dexa (71 ± 2,6) comparados ao grupo Hígido (132 ± 5,8). Após 24h ainda observamos diferenças significativas da quantidade de colágeno nos grupos lesão (82 ± 3,1), 3J (94 ± 4,2), Diclo (78 ± 8,4) e Dexa (64 ± 2,2) comparados ao grupo Hígido (132 ± 5,8). No entanto, o grupo tratado com Laser 3J apresentou os maiores valores de colágeno. Quanto a orientação das fibras de colágeno, analisado por bi-refringência, observamos os valores do retardo óptico no tendão de Aquiles 12 horas após a injeção de colagenase. Houve diferenças significativas destes valores nos grupos 3J (69 ± 1,4), Diclo (61 ± 1,1) e Dexa (50 ± 1,4) comparados ao grupo lesão (38 ± 1,2) com ***p < 0,001. O grupo hígido de referência apresentou valores semelhantes ao grupo tratado com laser (70 ± 1) Conclusão Podemos dizer que a terapia com laser de baixa intensidade e a aplicação de diclofenaco potássico, apresentaram resultados positivos sobre a lesão em tendão de Aquiles de ratos. Estes dois recursos modularam o quadro inflamatório agudo desencadeado pela colagenase, através da redução da quantidade de leucócitos, edema e hemorragia. Entretanto, se relacionarmos todas as nossas análises, a laserterapia parece ser a melhor opção de tratamento. Juntamente com a modulação da reposta inflamatória, o laser promoveu um incremento na quantidade de colágeno nos primeiros dois tempos experimentais, além de revelar um efeito protetor sobre organização das fibras de colágeno na área lesada. É importante ressaltar ainda, que a laserterapia de baixa intensidade é uma terapia com relativo baixo custo, não-invasiva e sem efeitos colaterais.

Palavras-chaves: Tendinite, Inflamação, Laser, LLLT, Colagenase

Resumo: 21.010

AÇÃO DO LASER DE BAIXA POTÊNCIA EM CAMUNDONGOS mdx SUBMETIDOS AO EXERCÍCIO FORÇADO POR MEIO DE QUANTIFICAÇÃO DA CREATINA QUINASE.

Autores 1SILVA, A. A. O.

1, NISHIDA, J. A.

1, ARARUNA, A. C. A.

1, RAMBO, C. D. M.

1, CARVALHO, P.

T. C. 1 Departamento de Pesquisa Programa de Pós-graduação em Ciências da Reabilitação - Uninove

Apoio Financeiro: Fapic–Uninove / Cnpq Nº Fomento 472334/211-5.

Resumo Introdução A Distrofia Muscular de Duchenne é causada por uma mutação do gene responsável pela expressão da proteína distrofina no qual o seu papel é a união de proteínas citoesqueléticas às glicoproteínas do sarcolema, tornando-a mais resistente a lesões. Nesta patologia a capacidade do músculo de regenerar é perdida e resulta em uma progressiva perda da força. A lesão muscular pode ser induzida durante o exercício físico, iniciando por microlesões nas células musculares. A ruptura do sarcolema permite o extravasamento do conteúdo intracelular, causando o aparecimento de enzimas como a creatina

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quinase e fragmentos de proteína no sangue. Portanto verificar o aparecimento da creatina quinase no sangue é um indicador de lesão tecidual. Como modelo experimental foi escolhido os camundongos mdx que demonstram a mutação do gene da distrofina. Estudos relacionados à ação do laser em tecidos biológicos demonstram sua ação no metabolismo celular, reduzindo os efeitos do estresse oxidativo e da atividade da enzima creatina quinase, contribuindo para a prevenção de lesões musculares. Objetivos Avaliar a ação do laser em camundongos mdx submetidos ao exercício forçado por meio de quantificação da creatina quinase. Código de Experimentação Animal comitê de ética (AN 0023_2011) Código de Experimentação Humana Métodos Após aprovação do comitê de ética (AN 0023_2011), utilizou 24 camundongos Mus musculus machos, linhagem C57Black10 mdx e linhagem C57Black10, idade de 04 semanas (peso +15-18g). Para cada linhagem os animais foram divididos em dois grupos de 06 animais, o grupo placebo no qual a terapia foi realizada com equipamento desligado e o grupo tratado no qual os animais receberam o laser, AsGaAl da marca DMC® modelo Photon Laser III, com potência de 30mW, fluência 3J/cm2, comprimento de onda de 808nm, durante 03 dias consecutivos, aplicado na forma de ponto único pelo método transcutâneo na pata traseira, sobre o m. gastrocnêmio. No terceiro dia após a aplicação os dois grupos foram submetidos ao exercício forçado no qual correram em uma esteira rolante, até a sua fadiga. O teste foi interrompido quando o animal não conseguiu correr e/ou houve queda repetida, por mais de 10 segundos 3 vezes consecutivas. Amostras de sangue foram coletadas 24hs após a fadiga. A análise estatística comparou a média e o desvio padrão, no programa Graphpad Prism 4.0, two-way ANOVA e o nível de significância estabelecido em p Resultados Os animais mdx do grupo placebo apresentaram o valor de creatina quinase aumentado 4531U/l em comparação aos animais mdx tratados 2772U/l, sendo significativos ao observar a média e o desvio padrão 1759 + 448.0 ( p < 0.0044), nos animais C57black10 do grupo placebo 7781U/l e tratados 8615U/l quando comparados não houve diferença significativa 834.7 ± 946.6 ( p < 0.4118). Durante a fadiga na esteira, observamos que os animais mdx tratados atingiram uma velocidade maior do que os animais mdx placebo (0.08857 ± 0.02187 K/h, p < 0.0016). Os animais C57black 10 não apresentaram diferenças significativas entre o grupo placebo e tratado. (0.1129 ± 0.08192 K/h, p < 0.1935). Conclusão Nos animais mdx placebo foi observado o aumento dos níveis de creatina quinase quando comparados com os animais mdx tratados, evidenciando o efeito protetor do laser. Em relação à velocidade máxima, os animais mdx tratados atingiram uma velocidade maior que os animais mdx placebo. Nos animais C57black 10 placebo e tratados não apresentaram resultados significativos para a creatina quinase e nem na velocidade máxima atingida.

Palavras-chaves: camundongos mdx, laser de baixa potência, creatina quinase

Resumo: 21.011

Efeito do LLLT sobre a expressão de mediadores inflamatórios, neutrófilos e macrófagos na inflamação articular aguda.

Autores 1ALVES, A. C. A.

1, RAMBO, C. S. M.

1, SILVA, A. A. O.

1, DOS SANTOS, S. A.

1, CARVALHO,

P. T. C. 1 Programa de Pós Graduação em Ciências da Reabilitação - UNINOVE

Apoio Financeiro: FAPESP 2011/04834-8. CNPQ Nº307665/2012-7.

Resumo Introdução A inflamação da membrana sinovial tem um papel de grande importância na fisiopatologia da Osteoartrite (OA). O tecido sinovial de pacientes com OA inicial é caracterizado por infiltração de células mononucleares, produção de citocinas pró-inflamatórias e mediadores articulares de lesão. Objetivos Investigar o efeito do laser de baixa potência (LLLT) operacional de 50mW e 100mW na inflamação articular em ratos induzidos pela papaína, através da análise histopatológica, bem como contagem diferencial de células inflamatórias (macrófagos e neutrófilos), a expressão gênica de IL-1β, IL-6 e expresão proteica do TNF-α. Código de Experimentação Animal AN 0016/2011 Código de Experimentação Humana Métodos Materiais e Métodos: Todos os procedimentos experimentais foram aprovados pelo Comitê de Ética em Pesquisa Institucional (AN 0016/2011). 60 ratos Wistar machos, com peso aproximado de 250g, foram distribuídos aleatoriamente em 4 grupos de 15 animais, que foram: controle (grupo controle negativo); Lesões (grupo controle positivo); LLLT 50mW, grupo submetido à lesão e tratado com LLLT em 50 mW; e LLLT 100 mW, grupo tratado com LLLT 100 mW. Os animais foram submetidos à inflamação articular(solução de papaína 4%) e, em seguida, submetidos a LLLT. No dia da eutanásia, foi recolhida a lavagem articular, que foi imediatamente centrifugada e o sobrenadante foi armazenado para análise de proteínas de expressão de TNF-&alpha por ELISA e expressão gênica do IL-1β e IL-6 por RT/PCR, também foi realizado exame histologico do tecido articular . Para a analise estatística foi determinado ANOVA, com pós hoc teste de Tukey utilizado para comparações entre cada grupo. Todos os dados são expressos como valores médios e desvio padrão, considerado p < 0,05. Resultados Os dois grupos de laser foram eficientes na redução da inflamação, mas o grupo 50 mW apresentou resultados com diferença estatistica na redução de neutrófilos (18,88 SD± 10,64) e macrófagos (3,023 SD± 1,411) em relação ao grupo controle (4,185 SD± 1,826 e 0,81 SD± 0,5228, respectivamente). O grupo 50 mW demonstrou ainda diminuição da expressão de IL-1&beta e IL-6 (0,28 SD± 0,1032 e 0,196 SD± 0,118) em comparação ao grupo lesão (0,798 SD± 0,5065 e 0,544 SD± 0,2364). No entanto, o grupo de 100mW foi melhor em relação à redução de TNF-&alpha (71,03 SD± 13,88) em relação ao grupo de 50mW(182 SD± 14,28). Conclusão A LLLT a 50 mW foi mais eficiente na modulação dos mediadores inflamatórios (IL-1&beta, IL-6) e de células inflamatórias(macrófagos e neutrófilos)e apresentou histologicamente diminuição do processo inflamatório.

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Palavras-chaves: células inflamatórias, inflamação articular, lllt

Resumo: 21.012

ABCB1 AND ABCC1 TRANSPORTERS PROTECT SEA URCHIN SPERMATOZOA AGAINST UVA EFFECTS

Autores

1VASCONCELOS, R. B.

1,2, LEITE, J. C. A.

1,2, SIQUEIRA-JUNIOR, J. P.

1,2, MARQUES-SANTOS,

L. F. 1 Departamento de Biologia Molecular - UFPB,

2 Programa de Pós-Graduação em Produtos

Naturais e Sintéticos Bioativos - UFPB

Apoio Financeiro: CAPES/CNPq

Resumo Introdução The UV radiation levels on the sea surface have increased in the last decades. UVA radiation induces oxidative stress due to accumulation of reactive oxygen species (ROS), which may cause indirect damage to DNA. Evidences suggest that an increase in UVA radiation levels on the sea surface have negative impacts on marine organisms. ABC transporters constitute the first line of cellular defense against chemical and physical stress. Recently, our group characterized ABC proteins functional activity in Echinometra lucunter sea urchin embryos and gametes (Biosci Rep. 30:257, 2010). Objetivos The aim of the present study was to investigate the involvement of ABC proteins on the deleterious effects of UVA on Echinometra lucunter gametes and embryonic cells. Código de Experimentação Animal Código de Experimentação Humana Métodos Animals were collected at João Pessoa coast (Paraíba/Brazil) and gametes were obtained by KCl intracoelomic injection (ICMBio authorization code: 32105-1). Gametes or embryos were irradiated with several UVA doses (3.6 to 14.4 kJ/m2) in the presence or absence of the ABCB1 protein blocker reversin205 or the ABCC1 protein blocker MK571. Embryos were cultured in the absence of white light and early embryonic development was monitored under optical microscopy. Resultados UVA irradiation of gametes or embryos did not inhibit the progression to 2-cell and 4-cell embryos stages. Irradiation of eggs or embryos in the presence of ABC protein blockers did not affect the progression to the first and second cleavage. However, irradiation of spermatozoa in the presence of ABC protein blockers significantly inhibited the embryonic development. Reversin205 inhibited the progression to 2-cell embryos at 25 ± 6.7% (3.6 kJ/m²), 31 ± 7.6% (7.2 kJ/m²) and

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50 ± 7.5% (14.4 kJ/m²) when compared to untreated group. Similar results were obtained on the progression to 4-cell embryos stage. Furthermore, MK571 treatment showed a higher decrease in the embryonic development rate. The inhibition on the progression to 2-cell embryos was 61 ± 7.5% (3.6 kJ/m²), 81 ± 3.6% (7.2 kJ/m²) and 95 ± 0.3% (14.4 kJ/m²), and the progression to 4-cell embryos was 56 ± 5.5% (3.6 kJ/m²), 63 ± 5.2% (7.2 kJ/m²) and 93 ± 0.1% (14.4 kJ/m²), when compared to untreated group. Conclusão This is the first report about the effect of UVA on gametes and embryonic cells of a tropical sea urchin. Our data show the involvement of ABCB1 and ABCC1 protein in the protection of spermatozoa against the UVA injurious effects.

Palavras-chaves: ABC transporters, sea urchin, spermatozoa, UVA

Resumo: 21.013

ESTUDO-PILOTO PARA AVALIAÇÃO DE COMPORTAMENTO BIOCINÉTICO DO 99mTc-DMSA EM CINTILOGRAFIA RENAL DE PACIENTES PEDIÁTRICOS

Autores

1SIMAS, F.

2, BIANCARDI, R.

3, KASAI, E. T. P.

1, VELASQUES DE OLIVEIRA, S. M.

1,

VELASQUES DE OLIVEIRA, S. M. 1 Divisão de Dosimetria (DIDOS) - IRD/CNEN,

2 Serviço de

Medicina Nuclear - H.F.S.E., 3 Serviço de Medicina Nuclear - HUPE - UERJ

Apoio Financeiro: CAPES e CNEN

Resumo Introdução Para avaliar a função renal, são realizados estudos com os radiofármacos, Ácido dimercaptosuccínico (99mTc-DMSA) e Ácido dietilenotriamino pentacético (99mTc-DTPA) e exames laboratoriais. Os métodos dosimétricos para rins são úteis porque altas doses absorvidas em rins podem comprometer seu funcionamento. Objetivos Analisar o comportamento biocinético do 99mTc-DMSA em estudos renais de pacientes pediátricos com captação fisiológica normal usando métodos de quantificação de atividade nos rins e bexiga em cintilografias com 99mTc-DMSA e determinação da atividade residual em corpo inteiro através do método de bioanálise de urina. Código de Experimentação Animal Código de Experimentação Humana 1095-CEP/HUPE Métodos Estudo retrospectivo não-randomizado, aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa do HUPE-UERJ (autorização UERJ-

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CEP), realizado em 2010, para quantificação absoluta de atividades nos rins. Imagens estáticas (AP, PA e oblíqua incidências abdômen posterior) foram adquiridas com câmara de cintilação de NaI (Siemens E-Cam), colimador LEHR, matriz de 256x256 e 5 min por imagem 4 h após a administração intravenosa de 115,69±42,31. Estudo prospectivo de pacientes selecionados do estudo anterior coletaram todas as excreções urinárias desde a administração do 99mTc-DMSA até 6 h, enquanto que simultaneamente foram adquiridas imagens AP e PA da região abdominal com equipamento Philips modelo Picker Prism 2000XP. Alíquotas da cada amostra de urina foram medidas em contador de poço GenesysTM Gamma 1com detector de NaI(Tl). Resultados Em 2010, de 51 pacientes submetidos a estudos renais, 19 pacientes com 9±4 anos de idade e massa corporal de 31,8±20,8 kg apresentaram absorção relativa do 99mTc-DMSA entre 45% e 55%. Em 2012, 3 pacientes (9,3±2,1 anos, 31,97±10,75 kg) do estudo anterior foram acompanhados em estudo prospectivo. Para corpo inteiro, a meia-vida biológica estimada foi 11,0±2,0 h e o tempo de residência de 5,6±0,4 h enquanto que a literatura apresenta 4,1 ±0,5 h para a faixa etária estudada. O tempo de residência para rins foi de 0,7±0,4 h, enquanto que a literatura registra 3,07 h e de 1,4 h para pacientes normais e com patologias renais, respectivamente. Esta variação pode ser atribuida à metodologia adotada, pois enquanto as imagens foram realizadas nas primeiras 6 h, Smith (1996) realizou imagens dos rins e de corpo inteiro 30 h após a administração do 99mTc-DMSA, incorporando o termo lento da meia-vida biológica. Para fígado, foi encontrado o tempo de residência médio de 3,0±0,4 min, enquanto que Smith (1996) e ICRP (1998) indicam 20,8 min e 25,1 min, respectivamente. Conclusão Recomenda-se incluir no protocolo imagens de corpo inteiro no primeiro dia e 24 h após a administração do 99mTc-DMSA. Para a quantificação da atividade em corpo inteiro, recomenda-se realizar o mapa de atenuação do paciente através de uma imagem de emissão. Para imagens de órgãos, recomenda-se usar simulador físico para a obtenção do fator de calibração do respectivo órgão. O tempo de aquisição das imagens deve acompanhar ao tempo estimado para a meia-vida biológica com 2 termos (rápido e lento).

Palavras-chaves: Radiofarmacos, Biodistribuição, Cintilografia, Radiosensibilidade, Pediatria

Resumo: 21.014

AVALIAÇÃO DE MÉTODOS DE MONITORAÇÃO EXTERNA DE PACIENTES SUBMETIDOS À RADIOIODOTERAPIA

Autores

1,2SORIANO, S. C. S.

3,2, BIANCARDI, R.

3, CARDOSO, N. C.

3, GABBAY, S.

3, ROZEMBLUM, S.

2,1, VELASQUES DE OLIVEIRA, S.M.

1 INSTITUTO DE FÍSICA - UFRJ,

2 DIVISÃO DE

DOSIMETRIA - IRD, 3 SERVIÇO DE MEDICINA NUCLEAR - HFSE

Apoio Financeiro: CNPq, CNEN

Resumo Introdução Pacientes com carcinoma diferenciado da tireóide (CDT) submetidos à radioiodoterapia recebem doses de 131I-NaI entre 3,7 e 7,4 GBq e permanecem internados até que a atividade residual estimada seja menor ou igual a 1,1 GBq. Essa estimativa é baseada em valores obtidos através de monitorações com diferentes equipamentos, métodos de

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posicionamento dos detectores e intervalos de monitoração. Não se pode garantir que a alta hospitalar seja equivalente entre instituições. Procedimentos inadequados podem aumentar o risco radiológico de familiares ou, ao contrário, prolongar a internação e gerar custos desnecessários. Objetivos Testar equipamentos, avaliar procedimentos de monitoração externa e analisar hipóteses e métodos matemáticos para padronização da técnica de monitoração de pacientes visando alta hospitalar. Código de Experimentação Animal Código de Experimentação Humana HFSE-CEP 0000.485 de 25/7/2012 Métodos Os pacientes foram pesados e classificados segundo o Índice de Massa Corporal (IMC) e monitorados simultaneamente com 2 detectores de radiação (Geiger-Muller e cintilador de NaI) desde a ingestão do 131I-NaI até a alta hospitalar. A radiação de fundo foi medida com o paciente afastado para não interferir no resultado e excluída da medida com o paciente. Foram testados 3 métodos de posicionamento dos detectores em relação ao paciente (1 m frente, 3 m frente e 3 m costas). Foi determinada experimentalmente a constante da radiação gama no ar, tomando o valor da primeira medida realizada após a ingestão do material radioativo e antes da primeira micção, usando o modelo de fonte pontual porque a cápsula ainda não tinha se rompido, e dividindo o valor pela atividade real administrada. Os resultados de medidas realizadas a 3 m foram avaliados segundo modelos de geometria do corpo do paciente como fonte pontual e planar. Resultados 15 pacientes (13 F, 2 M, 54±17 anos, IMC de 31±10) receberam 6±2GBq de 131I em cápsulas (1 paciente recebeu material sob forma líquida). Foram realizadas 2.298 monitorações durante 28±6 h. As constantes gama estimadas foram

5,3±1,4Sv/h.GBq e 7,8±1,4Sv/h.GBq, respectivamente com detector GM e cintilador posicionados a 3 m e as atividades residuais estimadas foram 1,6±1,2 GBq e 1,8±1,0 GBq. 4 pacientes acima do peso e 4 pacientes no 1° grau de obesidade apresentaram medidas maiores nas costas do que na frente. Conclusão Constatou-se que, independente da distância de medição e levando em consideração o tempo entre administração do 131I-NaI e monitoração, imediatamente após ingestão da cápsula a biodistribuição do 131I-NaI segue o modelo de fonte planar e após fixar-se em tireoide, glândulas paratireoides, fígado e rins e eventuais metástases, o 131I circulante no sangue é eliminado principalmente por via urinária e a biodistribuição aproxima-se de uma fonte pontual. Recomenda-se que, caso o paciente receba alta no primeiro dia da terapia, a atividade residual seja estimada utilizando a hipótese de fonte planar. O IMC é um parâmetro importante a ser considerado para o posicionamento do detector. Pacientes possuem diferentes constantes de taxa de dose no ar, as quais devem ser estimadas individualmente para garantir a segurança da alta hospitalar.

Palavras-chaves: radiofármacos, radioproteção, terapia, tireóide, instrumentação

Resumo: 21.015

OPTIMIZATION OF RADIOLABELING SYNTHESIS PROCEDURES FOR THE PREPARATION OF RADIOIODINATED PEPTIDES FOR ASSESSMENT OF TUMOR CELLS

Autores 1SOBRAL, D. V.

2, MIRANDA, A. C. C.

2, BARBOZA, M. F.

1, MALAVOLTA, L.

1 Ciências

Fisiológicas - FCMSCSP, 2 Instituto do Cérebro - IIEPAE

Apoio Financeiro: FAPESP

Resumo Introdução Human cancer cells overexpress many peptide receptors as molecular targets. Radiolabeled peptides that bind with high affinity and specificity to the receptors on tumor cells hold great potential for both diagnostic imaging and targeted radionuclide therapy Theranostics 2; 481, 2012. The epidermal growth factor receptor (EGFR) is a transmembrane protein on the cell surface that is overexpressed in a wide variety of human cancers Int. J. Nanomedicine 8; 1541, 2013. In this work, we present new approaches to try identifying EGFR-targeted small molecule peptides as possible biomarkers to cancer cells. Objetivos The aim of this work was to establish the labeling and the quality control procedures of the peptide fragments derived from EGFR as potential biomarkers. Código de Experimentação Animal Código de Experimentação Humana Métodos Based upon peptides derived from EGFR, the Glu-Glu-Glu-Glu-Tyr-Phe-Glu-Leu-Val and Glu-Asp-Glu-Asp-Tyr-Phe-Glu-Leu-Val fragments were synthesized, purified and radiolabeled with the I-131. We have investigated and optimized (radio-) iodination using chloramin-T technique as function of reaction temperature and time and concentration of reactants, including peptide fragments, iodine and oxidizing agent in order to obtain radiolabeled peptides with higher stability and activity. Resultados Both peptides were efficiently radiolabeled with radioactive iodine (I-131). In regard to the radiolabeling approach, the I-131 radioisotope was used to label the peptide sequences at Tyr residues, as previously described Curr. Top. Med. Chem. 12; 2668, 2012. The labelling was performed at pH 7.0 with 250 – 500μCi of Na- I-131 in phosphate buffer at 25 C for 25, 60, 180 and 240 minutes using peptide concentrations of 25 - 50 μg. The radiochemical purity was determined by Whatman in 85% methanol as solvent. The labeled peptides migrate from the origin Rf = 0.1–0.2 and the radionuclide migrates with the solvent front Rƒ = 0.9. Radiochemical purity was also determined using Sep-Pak, C18. The free radionuclide was eluted with 5 mL of saline and the labeled peptide with 5 mL of methanol. The labeling conditions for both peptide fragments in 25 minutes, presented a radiochemical purity of (84,21±0.22)% and (86,06±1.07)%, at 25 and 50μg peptide concentrations, respectively (n = 5), meanwhile, no significant difference in the radiochemical purity was observed between the peptides. In 240 minutes, the radiochemical purity drops to 73%. Conclusão This is the first study to synthesize small radiolabeled peptides derived from of EGFR for targeted delivery. The findings indicate potentials for the proposed radiolabeling strategies applicable for in vitro and in vivo diagnostic assays with these

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peptides for the study of tumor cells.

Palavras-chaves: Radiolabeling, Peptides, Tumor cells, EGFR, Radioisotope

Resumo: 21.016

Efeito do Laser de Baixa Intensidade (LBI) e do exercício físico moderado em um modelo de obesidade experimental em ratos Wistar.

Autores

1,4DE AQUINO JUNIOR, A. E.

2,4, CASTRO, C. A.

2, SILVA, K. A.

3,4, SENE-FIORESE, M.

4,

DUARTE, F. O. 2,4

, DUARTE, A. C. G. O. 3,1

, BAGNATO, V. S. 1, PARIZOTTO, N. A.

1 Programa

de Pós-Graduação em Biotecnologia - UFSCar, 2 Programa de Pós-Graduação em Ciências

Fisiológicas - UFSCar, 3 Instituto de Física de São Carlos - USP,

4 Departamento de Educação Física e

Motricidade Humana - UFSCar, 5 Departamento de Fisioterapia - UFSCar

Apoio Financeiro: CNPq⁄CEPOF‾ INOF⁄IFSC‾USP

Resumo Introdução A obesidade acomete cerca de 20% da população mundial. Atualmente no Brasil, são gastos anualmente cerca de 490 milhões de reais no tratamento de doenças advindas deste estado inflamatório subclínico crônico. Como metodologia preventiva, o exercício é a terapia não farmacológica mais indicada para o tratamento dessa doença. A associação entre exercício e fototerapia pode potencializar os efeitos promovidos pelo exercício. Objetivos O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos do exercício moderado associado à fototerapia, sobre a massa corporal (Delta), os triglicerídeos sanguíneos (TG), a área dos adipócitos brancos epididimal (EPI), retroperitoneal (RET) e visceral (VIS) e da enzima citrato sintase (CS) de ratos Wistar obesos. Código de Experimentação Animal Parecer 067⁄2010 comitê de ética UFSCar Código de Experimentação Humana Métodos O projeto foi aprovado pelo comitê de ética da Universidade Federal de São Carlos sob o parecer nº 067⁄2010. Utilizou‾se 64 ratos machos da linhagem Wistar (idade 90 dias; peso 317±18,5), onde durante 3 semanas prévias, foi induzida obesidade por meio de dieta rica (n=32) em gordura e posteriormente, divididos em oito grupos com oito animais: sedentário dieta padrão (C); sedentário dieta padrão laser (CL), treinado dieta padrão (E); treinado dieta padrão laser (EL); sedentário dieta hiperlipídica (H); sedentário dieta hiperlipídica laser (HL); treinado dieta hiperlipídica (EH); treinado dieta hiperlipídica laser (EHL). Os animais foram submetidos a um programa de treinamento de natação durante 8 semanas ⁄90

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minutos diários e ao Laser de Baixa Intensidade (LBI) (GA‾Al‾AS, 830nm) com uma dose de 4.7J⁄ponto e energia total 9.4J⁄animal, aplicada em ambos os músculos gastrocnêmios após o exercício. Analisou‾se o delta da massa corporal (final − inicial), o triglicerídeos sanguíneo (kits enzimáticos laborlab®), a área dos adipócitos brancos (J Lipid Res. 9; 110‾119, 1968) e a enzima citrato sintase (J Biol Chem. 273; 29540‾29544, 1998). Foi utilizado o teste de normalidade de Kolmogorov‾Smirnov a a análise de variância Anova two way, com uso de teste de post‾hoc (Tukey‾Kramer) para diferença estatística de significância de p ≤ 0.001 (Instat 3.0 for Windons). Resultados Observou‾se diferença significativa no Delta da massa corporal (EH = 32,99±5,7 x EHL = 22,99±1,8) e nos triglicerídeos séricos (SH = 120,1±22 x SHL = 89,6±7,5; SHL = 89,6±7,5 x EHL = 41,6±7; EH = 63,1±9,8 x EHL = 41,6±7 mg⁄dl); Também houve diferença nas áreas dos adipócitos do tecido epididimal = (SH = 15,5±3,7 x EH = 11±3; SHL = 15,8±4,7 x EHL = 7,9±2; EH = 11±3 x EHL = 7,9±2 x10−3μm2); retroperitoneal = (SH = 14,3±4,5 x SHL = 16,1±5; SHL = 16,1±5 x EHL = 13±4; EH = 14,9±4 x EHL = 13,4±4,4 x10−3μm2); e visceral = (SH = 8,5±2,3 x SHL = 5,9±1,5; EH = 6±1,6 x EHL = 5,7±1,7 x10−3μm2); Os valores da atividade da enzima citrato sintase apresentaram aumento = (EH=5.58±1.03 x EHL= 7.44±0.8 nmol⁄sec⁄mg proteína). Conclusão Conclui‾se que a associação entre exercício e fototerapia, promoveu a diminuição do delta da massa corporal, dos triglicerídeos séricos e das áreas dos adipócitos brancos. Também se constatou o aumento da enzima citrato sintase dos grupos obesos, potencializando o efeito do exercício.

Palavras-chaves: Laser de baixa intensidade, Exercício físico, Triglicerídeos, Área de adipócitos, Citrato sintase

Resumo: 21.017

Ação da Terapia a Laser de baixa Intensidade na produção da metaloproteinase MMP2 e MMP9 e porcentagem de colágeno tipo I e III em modelo de lesão da cartilagem induzida por papaína.

Autores 1ALVES, A. C. A.

1, SANTOS, S. A. D.

1, RAMBO, C. S. D. M.

1, SILVA, A. A. O.

1, ALBERTINI,

R. 1, CARVALHO, P. T. C.

1 Programa de Pós Graduação em Ciências da Reabilitação - Uninove

Apoio Financeiro: FAPESP 2011/04834-8 CNPQ Nº307665/2012-7

Resumo Introdução A lesão da cartilagem e a sua destruição são comuns em osteoartrite (OA) e estão associadas com o aumento dos níveis de várias metaloproteinases de matriz (MMPs), essas proteinases podem degradar todos os componentes da matriz extracelular (ECM). Objetivos Investigar o efeito da terapia com laser de baixa intensidade (LLLT) operando no nível de potência 50mW e 100mW em lesões articulares em ratos induzidos pela papaína, por meio de análise histopatológica, bem como a produção de metaloproteinases de proteína 2 e 9, e expressão de colágeno tipo I e III.

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Código de Experimentação Animal AN 0016/2011 Código de Experimentação Humana Métodos Todos os procedimentos experimentais foram aprovados pelo Comitê de Ética em Pesquisa Institucional (AN 0016/2011). Sessenta ratos Wistar , machos, pesando entre 250 e 300g e idade aproximada de 90 dias foram distribuídos aleatoriamente em 4 grupos de 15 animais que foram: controle, lesão, LLLT 50mW, e LLLT 100mW. Os animais foram submetidos a OA (solução de papaína 4%) e, em seguida, submetidos a LLLT. No dia da eutanásia, foi recolhido o lavado articular, que foi imediatamente centrifugado e o sobrenadante armazenado para análise da produção de proteína por meio de Western Blot. Após coleta das amostras, o joelho dos animais foi corado com HE (Hematoxilina e Eosina) para a descrição histopatológica e Picrosirius Red, para estimar o percentual de fibras colágenas. Como a distribuição normal foi determinada, foi utilizado ANOVA com teste post hoc de Tukey para comparações entre os períodos de 7, 14 e 21 dias, bem como entre os grupos. Todos os dados são expressos como valores médios e desvio padrão, com a hipótese nula de p < 0,05. Resultados Os dois grupos LLLT mostraram bons resultados na reparação da cartilagem, no entanto, os nossos resultados sugerem que o tratamento com laser de 50 mW foi melhor do que 100 mW. Na reparação de tecidos, em 14 e 21 dias, o grupo de LLLT a 100mW estava atrasado em comparação com o processo de reparação do grupo LLLT a 50mW. Analisando a expressão de colágeno tipo I, também em 14 dias, o grupo LLLT a 50 mW diminuiu sua expressão (7,252 SD±5,318) sob níveis do grupo controle (8,494 SD±3,214). E, finalmente, em 21 dias, há uma diferença estatistica entre os dois grupos de tratamento, para a produção de MMP-9, onde o grupo LBI de 50 mW, apresentou melhores resultados (0,5851 SD±0,1404) que o grupo 100 mW (0,8843 SD± 0,1651). Conclusão O grupo LLLT a 50 mW foi mais eficiente na modulação de metaloproteinases de matriz e reparação dos tecidos no modelo experimental utilizado.

Palavras-chaves: LLLT, Osteoartrite, Colágeno, Metaloproteinases de Matriz

Resumo: 21.018

UNCERTAINTIES OF IMAGES QUANTIFICATION TECHNIQUES FOR INTERNAL DOSIMETRY OF PATIENTS IN THYROID ABLATIVE THERAPY

Autores

1CARVALHO, S. M.

2, BIANCARDI, R.

2, DUARTE, N. C.

2, GABBAY, S.

2, ROZENBLUM, S.

3,

BRUNETTO, S. Q. 3, RAMOS, C. D.

1, OLIVEIRA, S. M. V. D.

1 Dosimetria - IRD,

2 Medicina

Nuclear - HFSE, 3 Medicina Nuclear - UNICAMP

Apoio Financeiro: CAPES and CNEN

Resumo Introdução The differentiated thyroid carcinoma (DTC) has the capacity to concentrate iodine. Image studies with radioactive iodine were used for reminiscent tissue evaluation after surgery and/or metastasis. In radiotherapy, it is recommended to adopt the maximum absorbed doses in order to destroy reminiscent masses (ablation) without to impair inadequate absorbed doses for radiosensitive organs or tissues. The images quantification obtained through a gamma scintillation chamber is the most used method for organ dosimetry. Objetivos The aim of this study was to compare the uncertainties of techniques for image quantification based on emission computed tomography (SPECT) with the results of the conventional planar imaging quantification for dosimetry proposes. Código de Experimentação Animal Código de Experimentação Humana CEP/HFSE 000.485 Métodos A non-randomized prospective study was performed in a public hospital in Rio de Janeiro. The images were performed with a dual-head gamma camera detection system (GE Millennium). The whole-body scans were performed 24h, 4 days and 10 days after the therapy dose administration in order to use the 131I activity still incorporated by the patient. It was used the planar images conjugate-view method, single source model, attenuation correction, triple-energy windows for scatter correction and considering organs homogeneous uptake. The SPECT technique was performed directly after the whole-body scans over the upper abdomen, with 64 projections and 40 s exposure time per projection. Reconstruction was performed with OSEM algorithm (4 subsets and 2 iterations) followed by Butterworth filtering with a cut-off of 0.28 and power 14. Regions of interest (ROI) were drawn with contour lines. Two different sensibility calibrations for the SPECT were performed, first with the cylinder water phantom (Jaszczak Phantom) with a centrally placed cylinder 131I source (5ml, 37MBq) and another with the source placed in the periphery at the phantom. Resultados 7 patients with 48.9±11.4 years-old were studied. They received 4.9±1.4 GBq of 131I-NaI for thyroid ablation. The equipment sensibilities calculated with the source placed at the central and periphery at the phantom were 2.2 (ctg/μCi.Voxel) and 4.18 (ctg/μCi.Voxel), respectively. The quantification of the stomach for 3 patients with planar images was 115±52% greater in comparison to SPECT. As expected, the uptake is 18±7% when using the peripheral calibration value for SPECT acquisition. For intestine, one patient with great uptake in the peripheral port of the strap, the planar imaging overcomes in 253±143% the values obtained with SPECT for central calibration and in 86±60% for peripheral calibration. Otherwise, for the patient with homogeneous uptake the relative deviations were 33.48 % and 33.05 % respectively. Conclusão The equipment system used was adequate for image quantification for dosimetric purposes, since they provided good quality images which allowed uncertainties estimation of the techniques used. The results demonstrated the need to use the correct calibration factor, peripheral or central, depending on the location of the organ of interest.

Palavras-chaves: DOSIMETRY, IMAGES, QUANTIFICATION, UNCERTAINTIES

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Resumo: 21.019

AVALIAÇÃO DE EFEITOS DE RADIAÇÃO DICROMÁTICA NÃO IONIZANTE EM PLASMÍDIOS BACTERIANOS

Autores

1MARTINS, W. A.

1, CANUTO, K. S.

1, POLIGNANO, G. A. C.

1, GELLER, M.

2, PAOLI, F. D.

3,4,

FONSECA, A. S. 1 Centro de Ciências da Saúde - UNIFESO,

2 Morfologia - UFJF,

3 Ciências

Fisiológicas - UNIRIO, 4 Biofísica e Biometria - UERJ

Apoio Financeiro: FAPERJ, UNIFESO

Resumo Introdução Lasers são fontes de radiação monocromática e colimada que, em baixas intensidades e fluências, são utilizadas em protocolos terapêuticos para tratamento de diferentes doenças em tecidos moles. Seu efeito bioestimulador está relacionado à excitação de cromóforos endógenos com produção de radicais livres. Entretanto, há poucos dados sobre os efeitos da exposição do DNA à radiação laser. Objetivos Neste trabalho foi avaliada a indução de lesões no DNA de plasmídios bacterianos expostos à radiação laser dicromática. Código de Experimentação Animal Código de Experimentação Humana Métodos Alíquotas de plasmídio pUC19 foram expostas ao laser vermelho (660 nm) na fluência de 100 J/cm2 e ao laser infravermelho (808 nm) em diferentes fluências (25, 50 e 100 J/cm2). Como controles, alíquotas de pUC19 não irradiadas ou irradiadas somente com laser vermelho ou infravermelho. Em seguida, foi realizada eletroforese em gel de agarose neutro, para avaliação da indução de quebras simples e duplas, bem como em gel alcalino, para avaliação da indução de sítios álcali-lábeis. As formas plasmidiais foram visualizadas em sistema transiluminador e as imagens capturadas para determinação da porcentagem da forma circular aberta, linear e superespiralada. Resultados Nas maiores fluências utilizadas, os porcentuais das formas circular aberta, linear e superespiralada, respectivamente, em gel neutro foram (média±desvio padrão): 15,5±0,88; 18,6±0,62 e 65,8±1,33 (controle não irradiado), 14,0±0,73; 18,1±0,80 e 68,1±1,52 (controle laser 660 nm), 12,7±2,86; 18,6±1,48 e 69,3±4,16 (controle laser 660 nm), 13,8±2,94; 20,1±1,74 e 61,7±4,48 (laser 660 nm + laser 808 nm). Em gel alcalino as porcentagens da forma superespiralada foram (X±SD): 100±0,00 (controle não irradiado), 100±0,00 (controle laser 660 nm) e 100±0,00 (laser 660 nm + laser 808 nm). Conclusão Os resultados obtidos sugerem que a exposição à radiação não ionizante laser dicromática, nas fluências avaliadas, não

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induziria significativamente (p > 0.05) quebras simples, duplas ou sítios álcali-lábeis no DNA de plasmídios pUC19.

Palavras-chaves: DNA, Eletroforese, Laser

Resumo: 21.020

EFEITOS DE CETAIS DERIVADOS DE BIODIESEL NA SOBREVIVÊNCIA E FILAMENTAÇÃO DE Escherichia coli

Autores

1AMORIM, P. F.

1, MARCIANO, R. S.

1, SERGIO, L. P. S.

1, GUIMARÃES, O. R.

1, GELLER, M.

1,

POLIGNANO, G. A. C. 2, PAOLI, F. D.

1, GONÇALVES, V. L. C.

3,4, FONSECA, A. S.

1 Centro de

Ciências da Saúde - UNIFESO, 2 Morfologia - UFJF,

3 Ciências Fisiológicas - UNIRIO,

4 Biofísica e

Biometria - UERJ

Apoio Financeiro: FAPERJ, UNIFESO

Resumo Introdução A produção de biodiesel como alternativa aos combustíveis derivados do petróleo gera alto quantitativo de glicerina como co-produto. Uma das alternativas para a comercialização desta glicerina é a transformação química em formas derivadas. Entretanto, há poucos estudos sobre os efeitos biológicos destes compostos químicos. Objetivos O objetivo deste trabalho foi avaliar efeitos dos cetais de glicerina 2,2 dimetil-1,3-dioxolano-4-metanol e 1,4 dioxaspiro [4.5] decan-2-ylmethanol na sobrevivência e filamentação de culturas de Escherichia coli proficientes e deficientes em mecanismos de reparo do DNA. Código de Experimentação Animal Código de Experimentação Humana Métodos Culturas de Escherichia coli AB1157 (proficiente em mecanismos de reparo do DNA) e BW9091 (deficiente em exonuclease III), em fase exponencial de crescimento, foram incubadas com 2,2 dimetil-1,3-dioxolano-4-metanol (DDM) e 1,4 dioxaspiro [4.5] decan-2-ylmethanol (DDY) (0,24; 2,4 e 24 μg/mL). Como controles, culturas incubadas com NaCl 0,9%. Alíquotas destas culturas bacterianas forma diluídas em NaCl 0,9%, espalhadas em placas de Petri contendo meio nutritivo, incubadas (18 horas, 37 oC), as unidades formadoras de colônias foram contadas e as frações de sobrevivência (FS) foram calculadas. Outras alíquotas foram espalhadas em lâminas de microscópio, coradas pelo método de Gram e observadas em microscópio de luz (40x). A análise das imagens foi realizada com o programa Image Proplus (2 lâminas para cada concentração, 3 campos para cada lâmina, 200 células por campo) para determinação das porcentagens de

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filamentação bacteriana (%F). Resultados Os dados obtidos para FS no controle e na maior concentração de DDM e DDY, para AB1157, foram (média±desvio padrão): 1,1±0,31; 0,4±0,12 e 0,6±0,25; para BW9091 foram: 1,0±0,16; 0,7±0,20 e 0,6±0,20. Para AB1157 os dados obtidos para %F foram: 2,3±0,50; 35,3±3,50 e 27,6±2,00; para BW9091 foram: 23,6±3,2; 45,3±4,00 e 52,6±2,50. Conclusão Os resultados obtidos sugerem que os compostos químicos avaliados são capazes de reduzir a sobrevivência e induzir filamentação em culturas de E. coli proficientes nos mecanismos de reparo de lesões no DNA e em culturas deficientes em exonuclease III.

Palavras-chaves: Escherichia coli, Curva de sobrevivência, Filamentação, Radicais livres

Resumo: 21.021

FOLLOWING THE STEPS OF AN EMERGING VIRUS ON ITS WAY INTO THE CELL BY LASER-SCANNING CONFOCAL FLUORESCENCE MICROSCOPY

Autores 1CARVALHO, C.A.M.

1, SILVA, J.L.S.

1, GOMES, A.M.O.

1 Instituto de Bioquímica Médica - UFRJ

Apoio Financeiro: CAPES, CNPq, FAPERJ, FINEP, INBEB and PRONEX.

Resumo Introdução Arboviral infections are a major public health problem worldwide. Of the 210 different species of arboviruses circulating in Brazil, Mayaro virus (MAYV) is the fourth in number of infected individuals, behind only dengue, yellow fever and Oropouche viruses. Although Mayaro fever in humans is even more debilitating than dengue and its urbanization from the Amazon region is imminent, the disease is largely neglected and many details of the replication cycle of the virus are still unclear, including the early events of infection. Objetivos The aim of this work was to analyze the behavior of MAYV particles during their entry into host cells, evaluating the dynamics of the infection process. Código de Experimentação Animal Código de Experimentação Humana Métodos

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To our purpose, MAYV was labeled with the lipophilic fluorescent probe DiD without impairment to viral infectivity and the fluorescent signals were tracked in the host cells by laser-scanning confocal fluorescence microscopy in real time. Resultados Our results show that fluorescent signals from labeled virus particles could be visualized inside the cell a few seconds after virus binding to receptors on the cell surface. Following DiD fluorescence dequenching at the single particle level, we could capture the moment of the fusion between the viral envelope and the endosomal membrane, that occured around 3 min post-binding. Conclusão Altogether, our data reveal that MAYV entry into cells occurs by an endocytic mechanism involving fast internalization of the endocyted cargo, and that its membrane fusion reaction is triggered faster than for other arboviruses. This work provides unique kinetic insights into the entry of virus particles in living cells. Understanding the dynamics of virus infection may provide important insights to the development of antiviral strategies.

Palavras-chaves: ALPHAVIRUS, FLUORESCENCE MICROSCOPY, MAYARO VIRUS, SINGLE-PARTICLE TRACKING, VIRUS ENTRY

Resumo: 21.022

A PILOT-STUDY FOR INDIVIDUAL DOSIMETRY IN THYROID ABLATIVE THERAPY IN PEDIATRIC PATIENTS

Autores 1BIANCARDI, R.

2, MAMEDE, M.

2, CORBO, R.

1, OLIVEIRA, S. M. V. D.

1 SEMIN - IRD/CNEN,

2 Departamento de Medicina Nuclear - INCA

Apoio Financeiro: CAPES, CNEN

Resumo Introdução The optimization of radiation doses in healthy organs or tissues is emphasized in diseases with good prognosis, as differentiated thyroid carcinomas (DTC), especially in pediatric patients, since the radiation risk is conversely proportional to age. After thyroid surgery, 131I-NaI is used for thyroid reminiscent tissue. The treatment divided into two phases: tracer (a low activity is administered to verify the 131I-NaI uptake organ distribution) and ablative (the treatment itself). Objetivos A pilot-study aiming to establish individual dosimetry protocol for radioiodine therapy of pediatric patients, comparing biokinetic behavior both in tracer dose and ablative dose phases. Código de Experimentação Animal

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Código de Experimentação Humana CEP INCA nº. 51/09 Métodos In a phase II non-randomized prospective trial, urine was separately collected in hospital and residences and measured during 2 weeks and blood samples from periphery vein were collected in hospital from 2 h to 76 h after 131I administration. Urine and blood samples were measured in a sodium iodine Genesys well counter. Blood activities were estimated multiplying the 131I activities concentration in the blood volumes normalized per the patient corporal weight. After the first urine excretion, there was performed patient external dose monitoring, in the therapeutic room or in the patient residence. Before each patient external monitoring, the background radiation was measured without the patient. It was used sodium iodine scintillator detector positioned at 2 m in front of the cervical region of the seated patient. The measures were performed in dose rate mode. Three whole-body scans per phase (tracer and ablative) were performed per patient in a dual-head gamma camera detection system (GE Millenium MG) by planar imaging conjugate-view method, single source model and considering organs homogenious uptake. Regions of interest were drawn with ImageJ v.1.45 software. One patient lateral projection was performed for determining organ thickness. Attenuation correction map and sensitivity tests were applied. Resultados 4 female patients ranged between 11 and 14 years-old and 39 to 61 kg corporal weight received between 81 MBq and 120 MBq for tracer dose and 5.4 and 6.1 GBq for thyroid ablation. For the external monitoring, the estimated effective half-lives were 12.4 h and 21.7 h for the first patient, respectively for tracer and therapeutic phases. For the second patient, the effective half-lives were 23.9 h for both phases. For the third patient, effective half-lives were 12.8 h (tracer) and 16.9 h (therapeutic). For the fourth patient, effective half-lives were 23.4 h (tracer) and 23.1 h (therapeutic). From image organs quantification, ablative residence times ranged between 28.5-36.0 h (submandibular glands); 18.1-31.2 h (stomach) and 55.0-102.0 h (thyroid tissue). Conclusão For external monitoring, despite the uncertainties associated to measurements, equipment used and procedures performed were adequate. For urine bioassay, there were not similarities among the patient whole-body effective half-lives. Through blood bioassay, it was observed that iodine administered for ablative dose remained in the blood until 76 hours after iodine administration. It is recommended to collect blood samples until 7 days after therapy, in order to achieve best estimation in the 131I long-term decay. The acquisition time images shall be extended to 7 days after therapy, in order to achieve best estimation in the long term decay.

Palavras-chaves: bioassay, dosimetry, iodine therapy, monitoring, nuclear medicine

Resumo: 21.023

Ação da Terapia Laser de Baixa Potência nos efeitos deletérios da isquemia em rins destinados a transplante: um estudo pré-clínico.

Autores 1MESSIAS, F. D. M.

2, SILVA, P. D. A.

2, PALLOTA, R. C.

1,2, MARCOS, R. L.

1,2, MARTINS, R.

Á. B. L. 1 Diretoria de Pesquisa - Uninove,

2 Farmacologia - USP

Apoio Financeiro:

Resumo Introdução No ano de 2010, a Associação Brasileira de Transplantes de Órgãos (ABTO) realizou um levantamento dos transplantes realizados no País. Foram realizados 6.402 transplantes de órgãos no país. Dentre estes, 4.630 transplantes renais. A Doença Renal Crônica é um problema de saúde pública mundial. Os números projetados atualmente para pacientes em tratamento dialítico e com transplante renal no Brasil estão próximos dos 120.000, a um custo de 1,4 bilhão de reais. A lesão de isquemia e reperfusão é um problema clínico, que ocorre como uma consequência invariável dos transplantes, especialmente renais. O Laser de baixa intensidade tem sido utilizado clinicamente no tratamento de pacientes com doenças inflamatórias. Diversos trabalhos de nosso grupo demonstram a capacidade desta terapia em inibir os principais mediadores inflamatórios envolvidos na LIR renal, a saber, TNF-α&alpha e COX-2 e aumentar a expressão de outros mediadores antiinflamatórios como IL-10. O laser pode ainda reduzir a expressão de determinadas metaloproteinases e de favorecer a proliferação celular. Objetivos Visamos investigar os efeitos da laserterapia na lesão por isquemia em diferentes tempos, em rins de ratos. Código de Experimentação Animal AN0018/2011 Código de Experimentação Humana Métodos Foram utilizados 45 ratos Wistar machos (150-200g), com livre acesso a água e ração, provenientes do Biotério da Universidade Nove de Julho. O protocolo experimental aprovado pelo Comitê de Ética em Experimentação Animal da Universidade Nove de Julho (AN 0018/2011). Os animais foram anestesiados com uma mistura de ketamina 10% e de xylazina 2%, e submetidos à cirurgia bilateral para extração dos rins. Os rins foram acondicionados em solução comercial para manutenção de órgãos, conforme especificações da Rede Brasileira de Transplantes. Os Rins foram irradiados com Laser de baixa potência (810 nm e 100 mW de potência; 0,028 cm2 de área de feixe; Thera Lase, DMC®) em diferentes tempos (2, 12 e 24 horas) durante 10, 30, 60 e 100s (1, 3, 6 e 10 Joules). As irradiações foram realizadas em 2 pontos de cada hemisfério renal. Foram realizadas as dosagens de IL-1, IL-6, IL-10 e TNF-α&alpha. Para histologia, os rins foram delimitados em metade ventral e dorsal, em cassetes plásticos identificados. A análise foi realizada com colorações de Hematoxilina e Eosina e Picrossirius Red. Resultados A análise bioquímica não revelou alterações significativas para as citocinas inflamatórias após a laserterapia. A coloração pelo método HE permitiu visualizar as características estruturais dos néfrons e tubos coletores, em particular, a morfologia celular (epitélio renal) e detalhes do perfil nuclear. A coloração pelo método do picrossírius permitiu visualizar o tecido conjuntivo de preenchimento, restringindo a análise a um dos componentes teciduais (matriz extracelular fibrilar). Deste modo, somente sensíveis alterações puderam ser elucidadas empregando este método de coloração; corroborando, por exemplo, na observação de espessamento membranoso do glomérulo renal, de base patológica. A análise histopatológica revelou que os espécimes apresentaram dois padrões típicos: a) condições de normalidade tecidual ou, ocasionalmente, com leves alterações celulares que não permitem isoladamente caracterizar uma patologia renal (Grupo Controle); b) alterações histopatológicas, restritas aos glomérulos (glomerulopatia membranosa), com intensidades leve ou moderada e/ou associadas à necrose tubular aguda (leve ou moderada). A necrose tubular aguda pode ser decorrente de isquemia (perfusão renal insuficiente) (Grupos Isquêmicos não tratados). A glomerulopatia membranosa observada apresentava principalmente com grau leve e, ocasionalmente moderado. A necrose tubular aguda estava evidenciada nos túbulos contorcidos distais ou proximais, alças de Henle e nos tubos coletores. As alterações mais pronunciadas foram à presença de células vacuolizadas, com granulações citosólicas difusas e a descamação de células necróticas ou viáveis no lúmen dos túbulos. Os grupos isquêmicos tratados com Laser de baixa potência apresentaram leves alterações morfológicas, similares ao Grupo Controle. Em alguns casos, o lúmen estava preenchido por material hialino, celular ou granular. Não foi

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evidenciado processo inflamatório associado, indicando que o processo necrótico estava reduzido. Conclusão Os resultados demonstraram que LLLT foi capaz de preservar o tecido renal de isquemia induzida por lesão.

Palavras-chaves: laser, isquemia renal, transplante, inflamação

Resumo: 21.024

The Effects of Photodynamic Therapy using Methylene Blue on Inflammatory mediators in Walker 256 Tumour.

Autores

1PETRELLIS, M. C.

1, SILVA, P. D. A.

1, CARVALHO, R. L. D. P.

2, MARCOS, R. L.

3, FRIGO, L.

1, TEIXEIRA, S.

4, MARIA, D. A.

1,2, LOPES-MARTINS, R. A. B.

1 Farmacologia - ICB - USP,

2

PPG EM BIOFOTÔNICA - UNINOVE, 3 Ciências da Saúde - UNICSUL,

4 Bioquímica -

BUTANTAN

Apoio Financeiro: FAPESP;CNPq;CAPES;

Resumo Introdução . Light has been used for therapeutic purposes since ancient times. The first generation of drugs for photodynamic therapy, based on derivatives of hematoporphirins compounds, was described in the 50's with effects on tumor regression. Methylene blue is a dye of the class of phenothiazines, with potential for medical applications such as drug in photodynamic therapy. The Walker 256 carcinosarcoma is a well characterized tumor with aggressive biological behavior. Aims. The aims of the present study were to evaluate the regulation and expression of inflammatory mediators in the development and progression of Walker 256 tumor, treated by photodynamic therapy using methylene blue as a photosensitizer agent. We investigated the expression of COX-1 and COX-2 and production of inflammatory mediators, cytokines and prostanoids in the tumor. Objetivos The purpose of the present study was to investigate the effect of photodynamic therapy using methylene blue photoactivated by low level laser radiation on Walker 256 tumour and its correlation to the inflammatory process. Código de Experimentação Animal 67-73/02 Código de Experimentação Humana Métodos

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All procedures involving animals were approved by the Ethical committee of the Institute of Biomedical Sciences, University of São Paulo. Ninety femal Wistar rats (8 weeks, 200g), from the Biotery of the Institute of Biomedical Sciences, University of São Paulo were used in this study. The animals were divided into groups of five animals with food and water ad libitum. The inoculum of tumor cells, Walker 256 was prepared (1x107células/mL) in phosphate buffer. For the implantation procedure of Walker 256 tumor, all animals were first anesthetized with halothane by inhalation at a dose of 1mg/mL. During anesthesia, tumor implantation was performed on the animals by inoculating 1 ml subcutaneous (sc) cell suspension. After the procedure, the animal returned to the animal house, which were kept under observation for evaluating the development of the solid tumor mass for a period of 14 days. Group 1 - Control (Saline - NaCl 0.9%), Group 2 - methylene blue 0.1% + Laser 3J, Group 3 - methylene blue 0.3% + Laser 3J, Group 4 - methylene blue 1, 0% + Laser 3J; Group 5 - Treated with 3.0% methylene blue + Laser 3J. Dosages of the cytokines TNF-α, IL-1β, IL-6 and IL-10 in tumor tissue samples were performed by enzyme immunoassay (ELISA), following the instructions of commercially available kit (R & D System, USA). Resultados Methylene blue alone at the 0.1% concentration was able to induce the increase of IL-6 (200 ± 35%), IL-10 (90 ± 20%) and TNF-α (83 ± 30%) at the tumor mass. Low level Laser Therapy when irradiated alone also induced a dose dependent increase in the levels of IL-1(90 ± 15%), IL-6(100 ± 50%), and TNF-alpha in a dose dependent manner up to 120 ± 22%. COX-1 gene expression was not affected by methylene blue nor by Laser. On the other hand, COX-2 gene expression was significantly increased by both methylene blue(0.1%) and Laser (1Joule). When applied together, methylene blue plus Low level laser irradiation, characterizing the PDT, all of the inflammatory mediators were significantly increased. Tumor mass was reduced and survival rate increased by 50%. Conclusão Photodynamic therapy seems to be modulating or even stimulating an inflammatory reaction within the tumor mass and consequently reducing the tumor letality.

Palavras-chaves: Laser, PDT, Tumor de Walker, LLLT, Câncer

Resumo: 21.025

Organização do colágeno no reparo cutâneo de ratos diabéticos quando tratados com laser de baixa potência: comparação entre densidades de energia

Autores 1SHIBUYA, J. A. F.

1,1, GOMES, M. T.

1,1, MORAES, S. A. M.

1,1, FRANÇA, C. M.

1,1, SILVA., D. F.

T. 1, SILVA, D. D. F. T. D.

1 Pesquisa - UNINOVE

Apoio Financeiro: FAPESP

Resumo Introdução As úlceras cutâneas são um problema de saúde pública no Brasil e no exterior, e a iniciativa da aplicação da Terapia Laser de Baixa Intensidade (TLBI) nestas úlceras, incluindo as provenientes de pacientes diabéticos, tem mostrado resultados positivos, porém há poucos estudos a respeito e, conseqüentemente, há muito que se investigar até o estabelecimento de protocolos otimizados. Objetivos

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Avaliar o ordenamento do colágeno por meio da microscopia de polarização durante o reparo tecidual de lesões cutâneas de animais diabéticos submetidos a dois regimes de entrega de energia: único e fracionado. Código de Experimentação Animal AN0011/2012 Código de Experimentação Humana Métodos A metodologia utilizada neste estudo foi elaborada atendendo aos princípios básicos sensibilidade, bom senso e boa ciência elaborados pelo COBEA (Colégio Brasileiro de Experimentação Animal), entidade filiada ao International Council of Laboratory Animal Science (ICLAS) com base nas normas internacionais, que visam o aprimoramento de condutas na experimentação animal.Foram utilizados 36 ratos machos da linhagem Wistar (Rattus novergicus albinus), com massa corpórea aproximada de 250 g e idade de 3 meses, com diabetes induzida por injeção intraperitoneal de Streptozotocina (50 mg/kg). Houve três grupos experimentais: grupo controle (GC) - a úlcera dorsal não foi submetida a tratamento; densidade de energia única (GU) - a úlcera dorsal recebeu laserterapia duas horas após a realização da ferida; e densidade de energia fracionada (GF) - a úlcera dorsal recebeu laserterapia quatro vezes. A úlcera foi feita com punch de 8 mm no dorso do animal após tricotomia. Os parâmetros da aplicação do laser foram: λ= (660 ± 2) nm, A= 0,79 cm2, P= 30 mW, I= 38 mW/cm2. No grupo GF a dosimetria foi E= 0,78 J, D= 1 J/cm2 e t= 26 s, por irradiação. No grupo GU foi E= 3,12 J, D=4 J/cm2 e t= 104 s. Ao final de 0, 3, 7 e 14 dias após a criação das lesões, os animais foram eutanasiados, as úlceras removidas e processadas rotineiramente para a análise ao micróscópio óptico comum. Os seguintes parâmetros foram qualitativamente analisados por dois avaliadores calibrados e sem conhecimento prévio dos grupos: presença de úlcera, de infiltrado inflamatório agudo e crônico, de tecido de granulacão, de remodelamento de colágeno e de miofibroblasto. Resultados Foi usado o teste de Poisson para verificar diferenças quanto à presença de úlcera entre os grupos, bem como do tecido de granulação, do remodelamento e do miofibroblasto, com nível de significância de 95% (α=0,05). Não houve diferença entre os grupos GC, GF e GU, independentemente da etapa do experimento, quanto à úlcera e ao tecido de granulação. No dia 7 do experimento, GF apresentou remodelamento em detrimento aos demais grupos (p= 0,014). Não houve miofibroblasto no grupo GC, mas houve nos grupos GF e GU, com diferença entre os grupos GC e GF (p= 0,014), GC e GU (p= 0,003). No dia 14, GC ainda não apresentava remodelamento, havendo diferença entre GC e GF (p= 0,003) e GC e GU (p= 0,014), o mesmo ocorrendo quanto ao miofibroblasto. Usando o teste de Friedman, com nível de significância de 95% (α=0,05), foram verificadas as diferenças entre os grupos quanto ao infiltrado agudo e crônico. Houve diferença entre os grupos GC e GF, bem como GC e GU (p= 0,001) no dia 0 do experimento, com o grupo GC apresentando menos infiltrado agudo. No dia 3 do experimento houve diferença entre GU e GC, GU e GF (p= 0,009), com GU apresentando mais infiltrado agudo. No dia 7, houve diferença entre GU e GC, bem como GU e GF (p= 0,011), com GU apresentando mais infiltrado crônico. Conclusão De acordo com a análise qualitativa das fotomicrografias, o grupo cuja dose foi fracionada (GF) apresentou melhor resposta frente à TLBI, em relação aos grupos GU e GC.

Palavras-chaves: Colágeno, Diabetes, Laser, Úlcera

Resumo: 21.026

Efeito do laser de baixa potência no modelo experimental de tendinite induzida por colagenase em ratos.

Autores

1FARIA, R. S.

1, SILVA, R. T.

2, PALLOTTA, R. C.

1, ALVARES, L. M.

1, MOREIRA, H. G. P.

2,

DE ALMENDA, P 1, LEAL-JUNIOR, E. C.

2,1, LOPES-MARTINS, R. Á. B.

1, MARCOS, R. L.

1

Biofotônica Aplicada às Ciências da Saúde - UNINOVE, 2 Farmacologia - ICB-1

Apoio Financeiro: FAPESP, CAPES, CNPq

Resumo Introdução As tendinopatias são desordens músculo-esquelético comuns com uma variedade de terapias e tratamentos e o mais utilizado é o farmacológico para o alívio da dor com resultados pouco satisfatórios devido aos seus efeitos indesejáveis no uso prolongado. Neste cenário, a busca de novas terapias principalmente não farmacológicas no tratamento destas doenças inflamatórias de longa duração, assume papel de destaque na área médica. A terapia com laser de baixa potência aparece como terapia promissora na modulação do processo inflamatório agudo e crônico com ausência de efeitos adversos. No entanto, o estabelecimento de parâmetros clínicos para a utilização desta técnica é extremamente importante para sua validação. Objetivos Investigar o efeito da terapia laser de baixa potência (660nm) no processo inflamatório agudo do tendão calcâneo de ratos. Código de Experimentação Animal CEEA 30112005 nº106 fls 20 livro 2 Código de Experimentação Humana Métodos Foram utilizados ratos wistar, entre 150g à 200g, com 3 meses de idade. Os animais foram anestesiados com associação de cloridrato de xilazina e cloridrato de quetamina (90mg/Kg e 10mg/Kg respectivamente, injeção intraperitoneal). Após anestesiados, cada animal recebeu injeção transcutânea de colagenase na concentração de 1 mg/ml (Sigma Chemical Co, Cat. C-6885) e volume de 100 µl na região posterior da pata direita, no tendão calcâneo. Animais do grupo controle receberam como veículo, 100 µl de salina estéril 0,9%. Os animais foram divididos em 5 grupos de 5 animais: controle (C), tendinite (T), tendinite + anti-inflamatório (D), tendinite + laser 1J (1J) e tendinite + laser 3J (3J). Os tratamentos, farmacológico e a terapia laser (660nm, 100mW), foram realizados imediatamente após a indução da tendinite. Após 2 horas os animais passaram por eutanásia com hiperdosagem do mesmo anestésico e o tecido foi imediatamente retirado para análises da expressão gênica de IL6, IL10, TNFa, MMP3, MMP9 e MMP13. Resultados O grupo tendinite (T) apresentou aumento na expressão de IL6 (314,02), TNFa (35,53), MMP3 (5,64), MMP9 (5.02) e MMP13 (1.33) quando comparados ao grupo controle (C). O grupo (D) não apresentou redução nos mesmos índices ou teve aumento na expressão de IL6 (900,02), IL10 (46,63) e MMP13 (6,64) comparados ao grupo (T). O grupo irradiado (3J) apresentou redução na expressão de MMP3 (1,46), MMP9 (170,61) e MMP13 (0,42). Conclusão O modelo de indução da tendinite por injeção de colagenase aumenta a expressão de mediadores inflamatórios (IL6, IL10, TNFa) e de metaloproteinases de Matriz (MMP3, 9 e 13), apresentado no grupo (T). O antiinflamatório não conseguiu reduzir o processo inflamatório nem a expressão de MMPs responsável pela degeneração do tecido tendíneo. O laser de

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baixa potência (3J) parece modular o processo inflamatório, aumentando IL10 e reduzindo a expressão de mediadores pró-inflamatórios e de MMPs. Sugere que o laser de baixa potência é capaz de reduzir a expressão de mediadores inflamatórios e a degeneração tecidual.

Palavras-chaves: Tendinitis, LLLT, rats, MMPs, inflammatory mediators

Resumo: 21.027

PHOTODYNAMIC EFFECT OF RIBOFLAVIN ASSOCIATED WITH SILVER-PECTIN NANOPARTICLES IN STREPTOCOCCUS MUTANS

Autores

1BAPTISTA, A.

2, MELO, L. S. A. D.

1, KATO, I. T.

1, NÚÑEZ, S. C.

2, ARAUJO, R. E. D.

1,

RIBEIRO, M. S. 1 Centro de Lasers e Aplicações - IPEN,

2 Laboratório de Óptica Biomédica e Imagem

- UFPE

Apoio Financeiro: The research was entirely supported by FAPESP and CNPq.

Resumo Introdução Antimicrobial photodynamic therapy (APDT) combines a non-toxic photosensitizer with harmless light source of proper wavelength to excite the dye to its reactive triplet state, which will then generate reactive oxygen species such as singlet oxygen and hydroxyl radicals that are toxic to cells . Riboflavin, also known as B2 vitamin, can be used as photosensitizer since it presents 0.54±0.07quantum yield of singlet oxygen production. This molecule presents an absorption band in blue region, which could be an interesting tool for dental clinical practice since dentists use daily hand held blue light sources to photocure composites . In dentistry, APDT has been used to reduce microorganisms in periodontology, endodontics and restorative dentistry. Particularly, in caries disease, one major bacterium is Streptococcus mutans and literature reports that S. mutans may be inactivated by APDT, however, to improve photodynamic efficacy, metallic nanoparticles have been used. Nanoparticulate materials are cluster of atoms with spherical, cubic, and needle-like shape with approximately 5 to 100 nm . Antimicrobial effect of silver nanoparticles is related to its reduced size, which allows them to interact closely with membranes and also to penetrate in microbial cell. Localized plasmons in noncontinuous silver films (2-dimension system) can provide an enhancement of the reactive oxygen production under light excitation. This phenomenon named metal-enhanced singlet oxygen generation was also described in riboflavin silver-pectin colloid. Metal can also enhance singlet oxygen generation during APDT due to photosensitizer-nanoparticle interaction . Objetivos The objective of this study was to evaluate the photodynamic effect of riboflavin associated with silver-pectin nanoparticles in Streptococcus mutans. Código de Experimentação Animal Código de Experimentação Humana

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Métodos Streptococcus mutans strain ATCC 25175 was subcultured from vial stock onto Tryptic Soy Agar at 37°C under a 5% CO 2

atmosphere for 48h. Turbidity of cell suspension was adjusted to an optical density of 0.15 at λ = 540 nm corresponding to about 1x10 7 CFU/mL. Silver-pectin nanospheres with dimension of 13±4 nm were used at concentration of 8.3x10 12 nanoparticles/mL. Riboflavin (Sigma-Aldrich) was diluted in water and in silver-pectin nanoparticles suspension at concentration of 0.35 μM. The light source used was a light emitting diode (LED) with an emission at λ = 455 ± 20 nm (MMOPTICS, São Carlos, Brazil). Bacterial suspensions were irradiated with fluence rate of 90 mW/cm 2 and exposure time of 2, 4 and 6 min. Resultados Riboflavin and silver-pectin nanoparticles alone or in association did not show any toxicity on bacterial cells after incubation for 10 min in the dark (P > 0.05). APDT with riboflavin and nanoparticles showed reduction of 3 logs in the number of viable cells (P < 0.05) and this effect was observed in a fluence-dependent manner. Conclusão PDT using riboflavin and silver-pectin nanoparticles showed significant reduction in S. mutans viability.

Palavras-chaves: Antimicrobial photodynamic therapy, bacteria, LED, riboflavin

Resumo: 21.028

INHIBITION OF CANDIDA ALBICANS VIRULENCE FACTORS BY ANTIMICROBIAL PHOTODYNAMIC INACTIVATION

Autores

1KATO, I. T.

2, PRATES, R. A.

1, SABINO, C. P.

3, HAMBLIN, M. R.

1, RIBEIRO, M. S.

1 Centro de

Lasers e Aplicacoes - IPEN, 2 Dentistry School, Health Division and Biophotonics Program -

UNINOVE, 3 Wellman Center for Photomedicine - MGH

Apoio Financeiro: This work was supported by FAPESP (2010/13313-9) and CNPq (159814/2011-

1). Hamblin was supported by NIH (R01AI050875).

Resumo Introdução Opportunistic fungal infections caused by Candida spp. are recognized as a primary agent of severe fungal infection in immunocompromised patients, and are the fourth most common cause of bloodstream infections. Antimicrobial photodynamic therapy (APDT) is an emerging therapeutic modality that employs a nontoxic dye, termed as photosensitizer (PS), followed by irradiation with harmless low-intensity visible light. After photoactivation, PS accumulated by the pathogen produces reactive oxygen species that react with its biomolecules, promoting cell death while its effects for the host cells are minimal. The emergence of antifungal-resistant Candida strains has motivated study of APDT as an alternative treatment of these infections. Objetivos

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This study aimed to evaluate the pathogenicity of C. albicans submitted to sublethal APDT and the maintenance of these characteristics in daughter cells. Código de Experimentação Animal 38 CEPA-IPEN-CNEN/SP Código de Experimentação Humana - Métodos C. albicans were exposed to sublethal APDT using methylene blue (MB) as PS combined with a red diode laser. C. albicans growth was monitored in a spectrophotometer at λ=600 nm for 15 h, with 30 min intervals. Percentage of germ tube formation was evaluated by standardized optical microscopy count after cells incubation in 10% fetal bovine serum for 3 h at 37oC. Cell wall integrity and response to oxidative stress following APDT were verified with sodium dodecyl sulfate (SDS), H2O2 and menadione sensitivity assays. Fluconazole susceptibility was determined by broth microdilution method. C. albicans pathogenicity in vivo was evaluated by a systemic infection model on BALB/c female mice (9-11 weeks of age; body mass 20-25 g). The procedure was approved by Institutional Ethic Committee on Research Animal Care (Project #38/CEPA-IPEN/SP). In vitro experiments were statistically analyzed by ANOVA and Tukey’s tests after normality and homogeneity evaluation by Shapiro-Wilk and Levene tests. In vivo statistical analysis were performed by Log Rank tests. Resultados Sublethal MB-mediated APDT induced an increase in lag phase and a temporarily fungistatic effect that caused a reduction of growth rate (P Conclusão Our data suggest that APDT may inhibit virulence factors and reduce in vivo pathogenicity of C. albicans. The absence of alterations in daughter cells indicates that these effects are transitory. The reduction of fluconazole MIC following APDT suggests that combination therapies could be a useful approach to treat C. albicans infections.

Palavras-chaves: Candidiasis, photoinactivation, fluconazole, oxidative stress

Resumo: 21.029

AVALIAÇÃO DO CRESCIMENTO TUMORAL ÓSSEO UTILIZANDO TECNOLOGIA HIBRIDA PET/SPECT/CT DEDICADO A PEQUENOS ANIMAIS E RX CONVENCIONAL

Autores

1GUTIERREZ, V. P.

2, PRANDO, S.

1, CARVALHO, J. S. D.

4, BRIGATTE, P.

5, UNRUH, S. M.

2,

MARQUES, F. L. N. 1, CURY, Y.

1 Laboratório Especial de Dor e Sinalização - Butantan,

2 Serviço de

Medicina Nuclear - HCFMUSP, 3 Radiologia/Medicina Nuclear - FMUSP,

4 Biologia - UNESP/RIO

CLARO, 5 Clínica Médica - FMVZUSP

Apoio Financeiro: FAPESP, INCTTOX

Resumo Introdução Os avanços que vêm sendo obtidos nas últimas décadas no diagnóstico e tratamento do câncer passam por estudos experimentais em células e modelos animais. A aquisição de imagens radiológicas de pequenos animais em equipamentos dedicados a seres humanos, nem sempre permitem obter bons resultados. Portanto, tem sido comum o desenvolvimento de equipamentos dedicados a experimentação animal, principalmente para permitir avaliar com riqueza de detalhes as alterações morfológicas e funcionais em doenças como o câncer, doenças cardíacas e neurológicas. Objetivos O objetivo deste trabalho foi avaliar a progressão tumoral do implante de células de Walker 256 na região do fêmur de ratos utilizando o equipamento hibrido PET/SPCET/CT dedicado a imagem de pequenos animais e RX convencional. Código de Experimentação Animal CEEAIB 437/07 Código de Experimentação Humana Métodos O presente trabalho foi aprovado pela Comissão de Ética no uso de animais do Instituto Butantan (CEEAIB 437/07). Foram utilizados ratos Wistar, machos, com 160-180 g. Células de tumor de Walker 256, extraídas de peritônio de ratos, foram inoculadas (4x10 6 ) em região osteotomica de seção exposta do fêmur de ratos (n=6), sobre efeito de anestesia. A osteotomia foi restaurada com adesivo de etil-cianoacrilato. Nos dias 1, 3, 7 e 14, após a cirurgia, sob efeito de anestésico isoflurano, foram injetados os radiofármacos 99m Tc-MDP e 18 FDG, e adquiridas imagens tomográficas por SPECT e PET, além das imagens de tomografia computadorizada (CT), em equipamento TRIUMPH (Gamma Medica Imaging, USA), sendo as imagens de CT reconstruídas pelo método FBP (retroprojeção filtrada) e as imagens de SPECT e PET reconstruídas pelo método iterativo OSEM. As imagens de RX foram obtidas em equipamento RAY-TEC (Brasil), modelo RT 500/125, de 500 mA e 125 kV, impressionando placa de imagem (IP Cassete type CC, Fujifilm, 18x24). Resultados As imagens de RX e de CT mostram pequena reação perióstica na face lateral da região do fêmur com implante de células, três dias após a cirurgia. Ao 7 o dia, as imagens radiológicas mostram claramente a degradação da estrutura óssea. A quantificação da imagem cintilográfica realizada com 99m Tc-MDP, em um dos animais, mostrou, no 3 o dia, razão de captação do radiofármaco no fêmur operado, em relação ao fêmur contralateral, da ordem de 1,6 vezes progredindo para valores de 2,52 e 4,88, nos 7 o e 14 o dias, respectivamente. As imagens dos outros animais foram avaliadas qualitativamente para permitir a realização de outros experimentos. Imagem com 18 FDG, no 14 o dia, mostra captação difusa e heterogênea do radiofármaco, de formação expansiva em partes moles e área central com gás no seu interior, indicando necrose tumoral. Conclusão Embora o RX convencional tenha permitido observar alguma alteração morfológica no osso, a partir do 3 o dia após o implante das células tumorais, a utilização do equipamento híbrido permitiu visualizar com maiores detalhes essas alterações e o uso do radiofármaco 99m Tc-MDP permitiu quantificar e demonstrar importante alteração no metabolismo celular já no 3 o dia. O que nos permite sugerir a importância do equipamento nos estudos experimentais na área oncológica.

Palavras-chaves: Imagem em animais, Radiofarmacos, SPECT, Tecnécio-99m, Tumor de Walker 256

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Resumo: 21.030

Avaliação histológica e biomecânica da ação do laser de baixa potência no processo de cicatrização em pele de ratos

Autores

1CRUZ, L. G. B.

1, DALMASO, R. B. M.

4, ARNOULD, G.

5, RAHOUADJ, R.

1, AZEVEDO, M. R.

1, EGOROFF, M. L. F.

1,2,3, MARCOS, R. L.

1,2, LOPES-MARTINS, R. Á. B.

1 biofotônica aplicada às

ciências da saúde - uninove, 2 Instituto de Ciências Biomédicas - USP,

3 Faculté de Medicine - UL,

4

Laboratoire Physique et Mécanique Textile (LPMT) - UHA, 5 Laboratoire d’Energétique et de

Mécanique Théorique et Appliquée (LEMTA), UMR 7563 CNRS - UL

Apoio Financeiro: CNPq, CAPES, FAPESP

Resumo Introdução Introdução: A pele é um tecido de revestimento que sofre permanente ação do ambiente, muitas vezes de forma agressiva, levando a lesão deste tecido. Geralmente em seu processo de reparo ocorrem alterações estruturais que evoluem para o desenvolvimento de uma cicatriz. Neste caso o tecido pode apresentar alterações morfológicas que interferem em suas propriedades mecânicas e este processo de reparo produz um tecido com propriedades diferentes do tecido original. Dessa forma, a utilização de terapias que favoreçam esta reparação é importante para buscar uma qualidade melhor da cicatriz. A terapia com laser de baixa potência aparece como um recurso utilizado na modulação do processo inflamatório auxiliando no processo de reparo da pele. Objetivos Objetivo: O Objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da terapia com laser de baixa potência no processo de reparo da pele de ratos, após a indução de um processo lesivo, observando aspectos morfológicos e biomecânicos. Código de Experimentação Animal Código de Experimentação Humana Métodos Material e Métodos: Foram utilizados ratos wistar, entre 150g à 200g, com 3 meses de idade. Os animais foram anestesiados com associação de cloridrato de xilazina e quetamina (90mg/Kg e 10mg/Kg respectivamente, injeção intraperitoneal). Depois de anestesiados, foram realizadas 2 lesões cortantes utilizando um bisturi cirúrgico, no dorso do animal. Os animais foram divididos em 5 grupos de 5 animais: Controle (C), Cicatriz (S), Cicatriz + antiinflamatório (D), cicatriz + laser 1J (1J) e cicatriz + laser 3J (3J). O tratamento farmacológico e a terapia laser foram realizados imediatamente após a indução da lesão e mantida a irradiação diária até o sétimo dia. Após 28 dias, os animais passaram por eutanásia com hiperdosagem do mesmo anestésico e o tecido foi imediatamente retirado para análises histológicas e de ensaios de tração. Resultados

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Resultados: Animais do grupo S apresentaram redução de força máxima de ruptura (Fmax = 13,5 N ± 4) e da elongação do tecido = 5,7 mm ± 2, quando comparados ao grupo C onde a força máxima de ruptura (Fmax) foi de 34,5 N ± 4 e a elongação de 12 mm ± 3, corroborando com os resultados histológicos onde foi possível analisar comparativamente e observar a redução de colágeno. O grupo 1J apresentou propriedades mecânicas próximas ao grupo C com Fmax = 31,2 N ± 2 e elongação = 12,2 mm ± 3, quando comparados ao grupo S que apresentou Fmax= 13,5 N ± 4 e elongação = 5,7 mm ± 2. Conclusão Conclusão: Concluímos que o processo de reparação da pele a partir da lesão provocada por bisturi cirúrgico promove alterações histológicas no tecido que reflete na alteração de determinadas propriedades mecânicas da pele. A terapia com laser de baixa potência na energia de 1J e potência de 110 mW contribuiu para o processo de reparo da pele.

Palavras-chaves: Reparo tecidual, cicatriz, Laser de Baixa Potência, Propriedades mecânicas, Colágeno

Resumo: 21.031

Tratamento do defeito ósseo pelo uso de plasma rico em fibrina (PRF) e laser de baixa potência (LBP)

Autores

1PALLOTTA, R. C.

1, PETRELLIS, M. C.

1, ALMEIDA, P. D.

2, SAMPAIO, A. B. A.

1, TOMAZONI,

S. S. 1, ROSSI, R. P.

3, FRIGO, L.

2, MARCOS, R. L.

2,1, LOPES-MARTINS, R. Á. B.

1 Instituto de

Ciências Biomédicas - USP, 2 Biofotônica Aplicada às Ciências da Saúde - UNINOVE,

3 Biological

Sciences and Health Center - Unicsul

Apoio Financeiro: CNPq, CAPES, FAPESP

Resumo Introdução Os defeitos ósseos são causados por diversos fatores e o processo de reparo é lento onde as fases inflamatória, proliferativa e de remodelação deste tecido são extremamente importantes para a qualidade do reparo. Existem diversas terapias, farmacológicas e não farmacológicas que auxiliam neste processo, dentre elas a utilização de um concentrado plaquetário rico em fibrina (PRF) e a laserterapia (LBP), respectivamente. Grande parte dos ensaios experimentais e clínicos apresenta conclusões distintas na utilização do PRF e do laser, quando aplicados sobre o reparo ósseo. Objetivos O objetivo deste trabalho foi verificar o eventual efeito somatório da terapia com laser de baixa potência e do concentrado plaquetário rico em fibrina no reparo ósseo em tíbia de ratos. Código de Experimentação Animal CEEA 16032010 nº169 fls 80 livro 2 Código de Experimentação Humana

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Métodos Foram utilizados ratos wistar, entre 150g à 200g, com 3 meses de idade. Os animais foram anestesiados com associação de cloridrato de xilazina e cloridrato de quetamina (90mg/Kg e 10mg/Kg, respectivamente, injeção intraperitoneal). Depois de anestesiados, os animais foram colocados em mesa cirúrgica, a pele foi dissecada e foram confeccionados defeitos ósseos monocorticais na região central da tíbia direita dos ratos. Imediatamente após a cirurgia os ratos foram randomizados e divididos nos seguintes grupos: Hígido (sem lesão), lesão óssea sem tratamento, lesão óssea e tratamento com PRF ou com LBP nas energias de 1, 3 e 6J (810nm - 100mW) ou grupo com lesão e tratamento com associação do PRF e LBP nas energias de 1, 3 e 6J. Após 14 dias os animais passaram por eutanásia com hiperdosagem do mesmo anestésico e a tíbia direita foi imediatamente retirada para análises morfológicas e bioquímicas. Resultados Resultados: Os dados apontam que o laser aplicado no local da lesão foi capaz de inibir algumas citocinas IL-1 (65% ± 7), TNF-a (43% ± 5) e IL-10 (52% ± 7) e aumentaram os níveis de IL-6 (44% ± 8). Já os tratamentos combinados (PRF+Laser) reduziram TNF-a (32 ± 4) e IL-10 (48% ± 6) e aumentaram os níveis de IL-6 (38% ± 8), porém todos animais tratados apresentaram diminuição na dosagem de fosfatase alcalina (33% ± 9). Conclusão Conclusão: O tratamento combinado (PRF + LBP) não demonstrou melhora significativa do reparo ósseo. O tratamento isolado com LBP nas energias de 1J e 6J, apresentaram redução em determinados mediadores inflamatórios, sugerindo que a laserterapia poderia promover um melhor reparo ósseo.

Palavras-chaves: reparo ósseo, laser de baixa potência, plasma rico em fibrina, tíbia de rato, mediadores inflamatórios

Resumo: 21.032

EFEITOS DA RADIAÇÃO LASER DE BAIXA POTÊNCIA NO METABOLISMO MITOCONDRIAL DE CÉLULAS DE MELANOMA

Autores 1SANTOS, ANTONIO JS

2, FRANÇA, C. M.

1, RIBEIRO, MS

1 Centro de Lasers e Aplicações -

IPEN, 2 Programa de Pós Graduação em Biofotônica aplicada às Ciências da Saúde - UNINOVE

Apoio Financeiro:

Resumo Introdução O laser de baixa potência (LBP) é um dos recursos físicos utilizado em tratamentos de fisioterapia, médicos, odontológicos e estéticos. Os efeitos do LBP na proliferação celular ainda permanecem um tópico de interesse na literatura, pois a associação entre os diferentes tipos celulares, parâmetros de irradiação e estado nutricional desencadeiam efeitos controversos. Embora a literatura não apresente estudos que mostrem relação direta entre a terapia com LBP e o desenvolvimento do processo neoplásico, esta ferramenta tem sido utilizada em pacientes com diagnóstico de câncer de forma cautelosa, já que trabalhos sugerem que o LBP pode estimular a proliferação de células tumorais.

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Objetivos Analisar o efeito do LBP em diferentes densidades de energia no metabolismo mitocondrial da linhagem B16F10 de melanoma murino utilizando um laser de emissão vermelha (λ = 660 nm) sob diferentes condições de cultivo. Código de Experimentação Animal Código de Experimentação Humana Métodos A linhagem celular B16F10 de melanoma murino foi cultivada em meio de cultura RPMI suplementado com 10% de soro fetal bovino (SFB) e 1% de solução antibiótico-antimicótica e mantido em estufa a 37ºC e 5% de CO2 até alcançar a subconfluência. Para o experimento, foi utilizado o método de azul de Trypan e as células viáveis foram contadas em hemocitômetro. As células foram plaquadas em placas de 96 poços na concentração de 5x103 células/poço e os experimentos realizados em quadruplicata. Neste momento as células foram cultivadas em meio de cultura RPMI com suplemento nutricional adequado (SFB a 10%) e em déficit nutricional com 5% de SFB. As células foram divididas em cinco grupos experimentais e um grupo controle. Após 24 h, os grupos experimentais foram irradiados uma única vez. O equipamento laser utilizado foi o Twin Flex Evolution (MMOptics Ltda, São Carlos, SP, Brasil), emitindo no comprimento de onda do vermelho (InGaAIP), com comprimento de onda de 660 nm, potência 50mW e a enegia total entregue em cada grupo: G-30 (1,2 J), G-60 (2,4 J), G-90 (3,6 J), G-120 (4,8 J), G-150 (6,0 J) e o tempo de irradiação: 30, 60, 90, 120 e 150 s respectivamente. Após a irradiação, a atividade mitocondrial foi analisada por meio do ensaio de MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) nos tempos 24, 48 e 72 h. Os valores de absorbância obtidos pelo ensaio de MTT foram analisados pelo método ANOVA seguidos pelo teste de Tukey. O nível de significância adotado foi de 5% (p <0.05). Resultados Após 48 h e 72 h da irradiação com LBP, todos os grupos mostraram maior atividade metabólica em relação ao tempo de 24 h (p < 0,05). No entanto, o padrão metabólico foi semelhante para todos os grupos, incluindo o grupo controle sem irradiação, quando houve déficit nutricional (5% SFB). Sem déficit nutricional (10% SFB), todos os grupos também mostraram que 48 h e 72 h após a irradiação com LBP havia maior atividade metabólica em relação ao tempo de 24 h (p < 0,05). Entretanto, o grupo G120 (4,8 J; Δt= 120 s) não mostrou diferença estatística significativa entre os tempos 24 h e 48 h. Conclusão A irradiação com laser de baixa potência no comprimento de onda λ= 660 nm, nas condições experimentais desse estudo, não promoveu mudanças no metabolismo mitocondrial da linhagem B16F10 de melanoma nos tempos 24, 48 e 72 h, independente do estado nutricional.

Palavras-chaves: Melanoma, Metabolismo, Terapia a Laser de Baixa Potência

Resumo: 21.033

Effects in vitro of Photodynamic Therapy on promastigotes of Leishmania amazonensis

Autores

1,2AURELIANO, D. P.

1, NÚÑEZ, S. C.

2, PETRI, S. C. S.

2,3, LINDOSO, J. A. L.

1, RIBEIRO, M. S.

1

Centro de Lasers e Aplicações - IPEN, 2 Laboratório de Soroepidemiologia - LIM38 HCFMUSP -

IMT, 3 Seretaria de Saúde Pública-SP - IIER-SES-SP

Apoio Financeiro: CNPq, FAPESP, LIM-38 (HC-FMUSP)

Resumo Introdução Introduction: Leishmania spp. is an important parasite that causes several neglected diseases such as cutaneous leishmaniasis. There are only few effective treatment options, among them, the most effective treatment is chemotherapy that involves systemic treatment with antiparasitic drugs that can cause a variety of side effects including substantial toxic effect on the organism. It is also possible the establishment of a recurrent infection and treatment resistance developed by the parasite. Nowadays, new approaches have been studied aiming to reduce treatment side effects and overcome the resistance selection. In this context, the antimicrobial photodynamic therapy (APDT) reveals promising results on fungal, bacterial and parasite reduction using different photosensitizers, e.g., methylene blue (MB). However, the literature is scarce about parameters regarding dye concentration and light source on parasite reduction. LEDs (light emitting diodes) have becoming a low cost effective light source for therapeutic applications and its role on parasite reduction has not yet been exploited. Objetivos Objective: The aims of this study were to investigate the MB uptake by Leishmania amazonensis in different concentrations versus incubation time measured by fluorescence spectroscopy and to verify the APDT action on the cell viability of L. amazonensis promastigotes using a red LED via colorimetric MTT assay ((3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide). Código de Experimentação Animal Código de Experimentação Humana Métodos Methods: Tubes with 1.107 L. amazonensis promastigotes were incubated with 50 µM, 100 µM, 250 µM and 500 µM of MB and evaluated in three different times (10, 30 and 60 min) of incubation. Afterwards, tubes were washed once with PBS 0.01 M followed by incubation with lise solution (1:1 - NaOH 2 M and SDS 2%) overnight. The MB fluorescence was measured at &lambda = 690 nm with excitation at &lambda = 532 nm using a spectrophotometer. According to the results of the former investigation, two parameters were selected to investigate the effect of APDT. Infective-stage of L. amazonensis metacyclic promastigotes were isolated from stationary cultures and incubated with MB in 96 well plates during 10 min. After that, the samples were irradiated using two conditions of LED irradiation with powers of 100 mW and 260 mW during one min. MTT assay was carried out according to standard procedures. Statistical analysis of the data was performed using Student’s t test and ANOVA and results were considered statistically significant when p <0.05. Resultados Results:Our results showed no statistically significant differences among tested groups regarding MB uptake and incubation time. However, increasing MB concentration promotes further enhancement on uptake values. After the selection of dye parameters (50 µM and 250 µM- 10 min) we tested two LED parameters and no statistically significant differences between LED powers (100 mW and 260 mW) were observed, although both of them were effective to reduce L. amazonensis prosmatigotes viability in 40%. Conclusão

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Conclusion: We conclude that MB in the tested concentration associated to red LED is able to reduce cell viability of L. amazonensis promastigostes. We did not find a significant correlation between MB concentration and incubation time under the tested conditions.

Palavras-chaves: photodynamic therapy, american tegumentary leishmaniasis, methylene blue

Resumo: 21.034

AVALIAÇÃO DO RISCO RADIOLÓGICO ASSOCIADO À EXPOSIÇÃO DE FAMILIARES E ACOMPANHANTES DE PACIENTES DE RADIOIODOTERAPIA

Autores

1ARANTES, M. V.

2,1, BIANCARDI, R.

1,3, SORIANO, S. C. D. S.

2, CORREA, N. D.

2, GABBAY,

S. 2, KUBO, A. L.

1,3, SILVA, L. A. F. D.

1, OLIVEIRA, S. M. V. D.

1 DIDOS - IRD/CNEN,

2

SERVIÇO DE MEDICINA NUCLEAR - HFSE, 3 INSTITUTO DE FÍSICA - UFRJ

Apoio Financeiro: CNPq, CNEN

Resumo Introdução Os riscos de efeitos estocásticos das radiações são expressos através da grandeza “dose efetiva”. No Brasil, o limite de dose efetiva anual é 1 mSv para indivíduos do público, e restrições de doses para familiares submetidos a procedimentos médicos permitem até 5 mSv por procedimento, considerando que há um benefício direto devido ao uso da radiação. Pacientes menores de 18 anos devem ser acompanhados pelo responsável durante a internação e os demais apenas quando tem dificuldades de locomoção e/ou compreensão das precauções de segurança. Após a alta hospitalar, se a residência possui condições para isolamento do paciente, o risco para seus familiares é menor. Caso o paciente entenda as recomendações de radioproteção, o risco de contaminação poderá ser minimizado. Crianças de até 2 anos e mulheres grávidas devem ser afastadas do paciente e o limite de dose é 1 mSv. Objetivos Avaliar características sócio-econômicas, escolaridade e nível de compreensão cognitiva de pacientes, bem como condições das residências e possibilidades de isolamento, e estimar doses efetivas para familiares e acompanhantes. Código de Experimentação Animal Código de Experimentação Humana HFSE 000.485 Métodos Estudo retrospectivo (2011-2012) de pacientes com carcinoma diferenciado da tireóide (CDT) submetidos à radioiodoterapia em hospital público do Rio de Janeiro. Analisados questionários aplicados pela enfermagem e ficha radiométrica pelos físicos do serviço. A taxa de dose efetiva foi considerada igual à taxa de equivalente de dose ambiente,

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H*(10) obtida através de monitoração com detector Geiger-Muller e cintilador de NaI. A dose efetiva foi calculada através da curva de taxa de dose efetiva em função do tempo. Para estimativa da dose efetiva no hospital, foram utilizadas as medições feitas até o último horário medido antes da alta hospitalar. O valor calculado a partir desse horário foi classificado como dose efetiva na residência. Resultados Foram estudados 82 pacientes (20 M; 62 F), 3 menores de 18 anos (15 e 16 anos), 21 entre 18 e 40 anos e 58 maiores de 40 anos. 62 pacientes receberam entre 3,7 e 5,6 GBq de 131I-NaI, 16> 5,6 até 7,4 GBq e apenas 4> 7,4 GBq. 2 pacientes não informaram escolaridade, 23 eram analfabetos funcionais, 19 com primeiro grau completo, 27 com segundo grau completo e 11 com terceiro grau completo. Apenas 3 pacientes moravam sozinhos, e 54 moravam somente com adultos, 25 moravam com adultos e crianças e nenhum morava exclusivamente com crianças, totalizando 260 indivíduos (222 adultos e 38 crianças) expostos em residências. As condições das residências variaram quanto à possibilidade de isolar o paciente, pois enquanto apenas 13 possuíam um único quarto, 52 possuíam um único banheiro e 18 % não contavam com tratamento de água e esgoto. Os pacientes permaneceram internados 48 h (n= 47), 72 h (n=30) ou 96 h (n=2). Destes, foram monitorados 9 pacientes durante 189 h e 335 h, sendo 8 adultos (22-82 anos) e 1 criança (13 anos), os quais receberam atividade média de 5±2GBq de 131I-NaI. Para 8 pacientes monitorados, as taxas de dose no primeiro dia variaram entre 380 μ Sv/h e 50 &um; Sv/h. As monitorações antes da alta hospitalar variaram entre 90 μ Sv/h e 10 &um; Sv/h. As doses efetivas estimadas para acompanhantes foram inferiores a 5 mSv caso estes posicionarem-se a partir de 2 do paciente. Conclusão Quando são conhecidas os recursos das residências, as estimativas de dose efetiva são mais realistas, permitindo alta hospitalar e liberação do paciente em tempo mais curto, com maior número de pacientes tratados pelo hospital. Por outro lado, quando há indivíduos com maior risco radiológico (crianças e mulheres grávidas), as hipóteses para estimativas das doses efetivas devem ser conservativas. No caso estudado, as estimativas de doses efetivas dos familiares permitem concluir que os limites anuais foram respeitados.

Palavras-chaves: radioiodoterapia, dose efetiva, radioproteção, radiofármacos, medicina nuclear