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Faculdade de Ciências Farmacêuticas Universidade Estadual Paulista – UNESP
Departamento de Analises ClínicasDisciplina de Micologia Aplicada a Farmácia
Profa. Ana Maisa Fusco Almeida
APRESENTAÇÃO DO ARTIGO:
Introdução
• Infecções fúngicas oportunistas são observadas com
grande freqüência em indivíduos imunocomprometidos.
Criptococose causada por Cryptococcus neoformans vem
assumindo papel relevante por ser considerada uma das
micoses mais comuns nos pacientes com AIDS p roduzindo
lesões principalmente no sistema nervoso central (SNC), em
particular as meninges
•A membrana citoplasmática dos fungos apresenta
estrutura e funções similares às das membranas das
células de mamíferos, sendo constituída por uma camada
dupla de fosfolipídios e um arranjo de proteínas embebidas na
bicamada lipídica, com proteínas de superfície fracamente
ligadas à membrana e pequenas quantidades de carboidratos. A
membrana plasmática dos fungos difere das membranas animais
por apresentar o esterol não-polar ergosterol, ao invés de
colesterol, como esterol principal. Os esteróis da membrana
conferem estrutura, modulação da fluidez e possivelmente
controlam alguns eventos fisiológicos
•O sítio de ação da maioria dos agentes antifúngicos é o
ergosterol na membrana ou sua via biossintética. A
anfotericina B liga-se ao ergosterol formando complexos
que permitem a rápida saída de íons celulares como o potássio e
moléculas menores; a perda de potássio resulta na inibição da
glicólise e da respiração celular. O imidazol e o triazol inibem a
atividade de uma das enzimas da via biossintética do ergosterol,
impedindo sua síntese. A ausência de ergosterol causa alterações
na permeabilidade da membrana plasmática e inibição do
crescimento.
HO
CH3
CH3
H H
CH3
CH3H3C
CH3
H
ergosterol
HO
CH3
CH3
H H
CH3
CH3H3C
H
colesterol
•Ação: inibição do ergosterol;
•Ergosterol: estrutura lipídica que confere estabilidade à membrana celular fúngica;
•Fungistático para leveduras;
•Fungicida aos fungos filamentosos pois exerce maior atividade intrínseca na inibição da enzima 14-alfa-esterol desmetilase.
Resultados
Melanização do C. neoformans• Proteção– Resistência à ácido
• Prodizida por adição de L-dopa
HO
HO
O
O
NH2
O
O
O
O
NH2
HO
HO
O
O
NH3
O
O
O
O
NH3
HO
HO
O
O
NH2
O
O
O
O
NH2
Melanina Polimerizada + H2O
dopadopaquinona (DQ)
leucodopacromodopacromo
5,6-diidroxiindolindol-5,6,-quinona
DQdopa
dopaDQ
lactoseO2
Minimum Inhibitory Concentration(MIC)
• Sem diferenças entre C. neoformans melanizados e não melanizados
• Sem diferenças entre voriconazol e amfotericina B
Time-kill assay(tempo de morte)
• Direto– Voriconazol efetivo contra melanizadas e não melanizadas– Redução da atividade de amfotericina B contra
melanizadas
Time-kill assay(tempo de morte)
• Antifúngico pré-tratado– Redução da atividade de amfotericina B
Microscopia• Eletromicroscopia de varredura– Fibras polissacarídeas menores, mais juntas à celula e mais
entrelaçadas entre si
Microscopia• India ink analysis (análise por tinta India)– Célula e capsula com tamanho reduzido na presença de
voriconazol
Microscopia• India ink analysis (análise por tinta India)
Microscopia• Presença de soro– Não houve inibição do crescimento de célula e cápsula em
presença de voriconazol
Índice de fagocitose• Não houve diferenças consideráveis de fagocitose
por macrófagos em C. neoformans na presença do antifungico
Discussão
• Em comparação com outros estudos do autor,
considerou-se o voriconazol um fungicida, enquanto o
itraconazol e o fluconazol são fungistáticos.
• Volume celular e tamanho da cápsula
• Grande parte dos tratamentos antifúngicos são
inadequados. O voriconazol tem sido usado
recentemente em tratamentos de infecções
fúngicas de difícil cura, incluindo meningite
criptococócica refratária.
• A melanização de C. neoformans não afetou a atividade do voriconazol.
• Liberação de cápsula – a taxa se mantém na mesma proporção que outros antifúngicos
• Voriconazol – menor CIM em relação aos da mesma classe para C. neoformans
Atividade Comparada
• Azois – apresentam efeito fungistático
• Voriconazol – produto demodelagem molecular.
N
N
N
HN
N
N
OH
F
F
N
N
N OH
F
F
N
N
F
fluconazol voriconazol
• Comparação a anfoterecina B
• Apresenta melhores resultados em vitro em parâmetros como:
• C no tecido cerebral, e ainda apresentam atividade fungicida
• Não e afetado pela melanização do fungo
• Diminui tamanho da célula e da cápsula, sem aumentar a liberação da capsula
Críticas e Sugestões
Críticas e Sugestões
• Não relata a resistência da cepa aos antifúngicos triazólicos
• Não discuti os resultados contrastantes entre soro e meio de cultura
• Falta de algum screening em vivo.