biologia molecular en micologia

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BIOLOGIA MOLECULAR APLICADA AL DIAGNOSTICO EN MICOLOGIA

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2003

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Page 1: Biologia Molecular en Micologia

BIOLOGIA MOLECULAR APLICADA AL DIAGNOSTICO EN

MICOLOGIA

Page 2: Biologia Molecular en Micologia

CLASIFICACION

• CARIOTIPIFICACION.• ANALISIS DE RESTRICCION.• HIBRIDACION DE ACIDOS NUCLEICOS.• P.C.R.

Page 3: Biologia Molecular en Micologia

ADN

Page 4: Biologia Molecular en Micologia

POLIMORFISMO DE LA LONGITUD DEL CROMOSOMA EN AISLAMIENTOS CLINICOS Y AMBIENTALES DE Cryptococcus neoformans

• TOTAL DE CEPAS: 46 (50% AMBIENTE).

• VARIABILIDAD DE var. neoformans (29 PATRONES – 33 CEPAS. 9 – 13 CROMOSOMAS).

• VARIABILIDAD DE var. gattii (06 PATRONES –13 CEPAS. 7 – 12 CROMOSOMAS).

GARCIA BERMEJO, M. J. Y COL. REV. IBEROAM. MICOL. 2001. 18: 174 – 179.

Page 5: Biologia Molecular en Micologia
Page 6: Biologia Molecular en Micologia

FACTORES QUE AFECTAN AL PCR

• PREPARACION DE LA MUESTRA.• SELECCION DE “BLANCO” Y DISEÑO DE

CEBADOR.• METODOS POST – PCR PARA

IDENTIFICAR PRODUCTO AMPLIFICADO.• REPRODUCIBILIDAD DE LA PRUEBA.• PRECAUCIONES PARA MINIMIZAR

FALSOS POSITIVOS Y NEGATIVOS.

Page 7: Biologia Molecular en Micologia

PATRONES GENETICOS DE AISLAMIENTOS PERUANOS DE Sporothrix schenckii

Neyra, E. R. Velando. B. Bustamante. IV CONGRESO VIRTUAL DE MICOLOGIA.

Page 8: Biologia Molecular en Micologia

VARIABILIDAD GENETICA DE Sporothrix schenckii EN ABANCAY

PACIENTE DISTRITO DE PROCEDENCIA TIPO DE ENFERMEDAD VARIANTE MOLECULAR

1 Abancay Mano izquierda III 2 Abancay Linfocutánea II

3 Tamburco Cutánea fija I

4 Tamburco Linfocutánea I

5 Abancay Linfocutánea I

6 Abancay Cutánea fija I

7 Abancay Cutánea fija I

8 Abancay Cutánea fija IV

9 Tamburco Cutánea fija IV

10 Abancay Linfocutánea V

11 Abancay Cutánea fija III 12 Abancay Linfocutánea II

13 Tamburco Cutánea fija III

14 Abancay Cutánea fija II

15 Tamburco Linfocutánea VI

16 Abancay Cutánea fija I 17 Tamburco Linfocutánea IV

Page 9: Biologia Molecular en Micologia

VARIABILIDAD GENETICA DE Sporothrix schenckii EN ABANCAY

Page 10: Biologia Molecular en Micologia

Phenotyping and Genotyping of Sporothrix schenckii Isolates According tp Geographic

Origin and Clinical Form of Sporotricosis

Mesa – Arango. y col. J. Clin. Microbiol. 2002. 40 (8): 3004 – 3011.

Page 11: Biologia Molecular en Micologia

PCR PARA LA IDENTIFICACION DE Candida albicans

ADN genómico de especies de Candida

1 2 3 4 5 6 7 8

9 10 11 12 13 14 15 16

1: ADN genómico del fago Lambda.2, 7, 12: Candida albicans aislamiento clínico.3, 8, 13: Candida parapsilopsis.5, 10, 15: Candida parapsilopsis ATCC.4, 9, 14: Candida krusei.6, 11, 16: Candida krusei ATCC.

Page 12: Biologia Molecular en Micologia

PCR PARA IDENTIFICACION DE Candida albicans

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13

1: marcador 100pb ladder2, 6 y 10. Candida albicans3, 7, 11: Candida parapsilopsis4, 8 y 12: Candida krusei5, 9, 13: controles negativos

Page 13: Biologia Molecular en Micologia

ESTADO ACTUAL DE LA TIPIFICACION DEL HONGO PATOGENO Histoplasma capsulatum var. capsulatum: UNA REVISION DE LOS HALLAZGOS

• RAPD – PCR.• AISLAMIENTOS DE MEXICO.

GUATEMALA. COLOMBIA. PANAMA. EUA Y CEPAS AMBIENTALES.

• CEPAS MEXICANAS AGRUPADAS MAYORITARIAMENTE EN UN GRUPO.

REYES MONTES, M. Y COL. REV. IBEROAM. MICOL. 2000. 17: 121 – 126.

Page 14: Biologia Molecular en Micologia
Page 15: Biologia Molecular en Micologia

APORTES DE LA BIOLOGIA MOLECULAR Y LA BIOTECNOLOGIA EN LA MICOLOGIA MEDICA

MEJORA METODOS DE DIAGNOSTICO CONVENCIONAL EN MICOSIS INVASIVA Y SISTEMICA (SENSIBILIDAD, ESPECIFICIDAD, RAPIDEZ).IDENTIFICA Y DISCRIMINA ENTRE DISTINTAS ESPECIES Y SUB - ESPECIES DE HONGOS PATOGENOS Y OPORTUNISTAS.MEJORA CONOCIMIENTOS DE LA EPIDEMIOLOGIA Y RUTAS DE TRANSMISION DE ENFERMEDADES MICOTICAS (EPIDEMIAS NOSOCOMIALES, TRANSMISION VERTICAL, TRANSMISION AMBIENTAL EN ZONAS ENDEMICAS).MONITOREA TRATAMIENTO O RESPUESTA TERAPEUTICA.INVESTIGACION EN DISEÑO Y PRODUCCION DE NUEVAS DROGAS Y VACUNAS.