EXTRAÇÃO DE DNA DE MILHO (Zea mays L.)

pelo método CTAB

Confresa-MT

2014

Bacharelado em Agronomia - 2013

Acadêmicos:

Adrielly Freitas da Silva Ferreira;

André Alves Barbosa;

João Paulo Lima Christichinni;

Nara Rayane Brandão da Silva;

Waldenyr Rodrigues dos Santos;

Wallace Matheus da Silva.

Disciplina: Genética Básica

Docente: Dr. Pedro Martins Sousa

Msc. Reginaldo Vicente Ribeiro

EXTRAÇÃO DE DNA DE MILHO

• Introdução;

• Objetivo;

• Materiais & Métodos;

• Considerações Finais. FONTE: http://i0.statig.com.br/

FONTE: http://www.tecnologiaetreinamento.com.br/

MILHO (Zea mays L.)

Fonte: www.cotrijui.coop.br

Mapa da produção agrícola – Milho total (primeira e

segunda safras)

Fonte: Conab/IBGE

PROCEDIMENTO DA EMBRAPA MILHO E SORGO PARA

EXTRAÇÃO DE DNA DE TECIDO VEGETAL EM LARGA

ESCALA

• Extração de DNA vegetal;

• Vantagens;

• Objetivo.

Fonte: www.google.imagens

AMOSTRAS

• Preparo das amostras;

• Colocar as amostras

em tubos;

• Colocar as amostras nos

tubos específicos. Alicate utilizado na coleta de tecido vegetal para

extração de DNA.

Tubos específicos para o triturador sem tampa (A) e com tampa (B).

AMOSTRAS

• Fazer um mapa de identificação;

• Armazenamento;

• Maceração.

Placa tampada

ETAPAS

• Extração do DNA:

• Preparo da solução CTAB;

• Colocação das esferas

de aço;

• Equipamento de Maceração.

Imagem do porta-esferas.

Placas balanceadas fixadas no suporte do

triturador.

ETAPAS

• Maceração do tecido;

• Retirada das tampas;

• Capela de exaustão;

• Tampar os tubos e placas.

EXTRAÇÃO DE DNA

• Materiais e Equipamentos

• - Banho-maria

• - Centrífuga de placas

• - Capela de exaustão

• - Esferas de aço

• - Estufa

• - Freezer -20°C

• - Pipeta multicanal eletrônica

• - Porta-esferas

• - Triturador (Geno/Grinder 2000)

EXTRAÇÃO DE DNA

• Incubação das amostras;

• Homogeneização;

• Retirar o sobrenadante;

• Secagem na estufa.

Amostras incubadas em banho - maria.

Placas prontas para homogeneização

por inversão. Uso da pipeta

multicanal eletrônica.

CONSIDERAÇÕES FINAIS

REFERÊNCIA BIBLIOGRÁFICA

• Companhia Nacional de Abastecimento. Acompanhamento da safra brasileira de grãos. – v. 1- Safra 2013/14, n.11- Décimo Primeiro Levantamento, Brasília: Conab, Ago. 2014.

• Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (Embrapa).Procedimento da Embrapa milho e sorgo para Extração de DNA de tecido vegetal em larga escala. Embrapa milho e sorgo.SeteLagoas, MG. 2010.

• GUIMARÃES, P.S.; Desempenho de híbridos simples de milho (Zeamays L.) e correlação entre heterose e divergência genética entre as linhagens parentais.Campinas, SP: Instituto Agronômico, 2007.

REFERÊNCIA BIBLIOGRÁFICA

• SANTOS, J. F.; Heterozigosidade em ciclos de seleção do composto CMS -43 milho de pipoca (Zea mays L.) utizando marcadores microssatélite. Paraná: Dez. 2008.

• SAWAZAKI, E.; PATERNIANI, M.E.A.G.Z. Evolução dos cultivares de milho no Brasil. In: GALVÃO, J.C.C.; MIRANDA, G.V. Tecnologias de produção do milho. 20.ed. Viçosa: Universidade Federal de Viçosa, v.1, p.13-53, 2004.

• ZINSLY, J.R.; MACHADO, J.A. Milho-pipoca. In: PATERNIANI, E.; VIEGAS,

• G.P. (ed.). Melhoramento e produção do milho. Campinas: Fundação Cargill, 1987.

Fonte: www.google.imagens