UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEAR

FACULDADE DE MEDICINA

DEPARTAMENTO DE FISIOLOGIA E FARMACOLOGIA

PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM FARMACOLOGIA

JOO HENRIQUE CHAVES

Efeito tipo antidepressivo e ansioltico do extrato etanlico de egletes viscosa e

de seu metablito Conizaleucolideo A: Envolvimento de mecanismos

monoaminrgicos, antioxidantes e anti-inflamatrios

FORTALEZA-CE

2016

EFEITO TIPO ANTIDEPRESSIVO E ANSIOLTICO DO EXTRATO ETANLICO DE

Egletes viscosa E DE SEU METABLITO CONIZALEUCOLIDEO A: ENVOLVIMENTO

DE MECANISMOS MONOAMINRGICOS, ANTIOXIDANTES E ANTI-

INFLAMATRIOS

Resultados da tese apresentada Coordenao do

Programa de Ps-Graduao em Farmacologia, da

Universidade Federal do Cear, como requisito parcial

para obteno do grau de doutor em Farmacologia.

Orientadora: Profa. Dra. Danielle Macdo Gaspar

FORTALEZA-CE

JOO HENRIQUE CHAVES

EFEITO TIPO ANTIDEPRESSIVO E ANSIOLTICO DO EXTRATO ETANLICO DE

Egletes viscosa E DE SEU METABLITO CONIZALEUCOLIDEO A: ENVOLVIMENTO

DE MECANISMOS MONOAMINRGICOS, ANTIOXIDANTES E ANTI-

INFLAMATRIOS

Esta tese foi submetida como requisito parcial obteno do grau de Doutor em

Farmacologia, outorgado pela Universide Federal do Cear

Aprovada em : 05/08/2016

BANCA EXAMINADORA

___________________________________________________

Profa. Dra. Danielle Macdo Gaspar (Orientadora)

Universidade Federal do Cear

___________________________________________________

Profa. Dra. Edna Maria Camelo Chaves

Universidade Estadual do Cear

___________________________________________________

Prof. Dr. Ccero Francisco Bezerra de Felipe

Universidade Federal da Paraba

___________________________________________________

Prof. Dr. Jos Eduardo Ribeiro Honrio Jnior

UNICHRISTUS

___________________________________________________

Profa. Dra. Maria Rose Jane Ribeiro Albuquerque

UNIVERSIDADE ESTADUAL VALE DO ACARA

Dedico essa tese aos meus pais,

famlia e amigos

AGRADECIMENTOS

Agradeo primeiramente Deus, por ter me permitido fazer parte dessa grande famlia que o

Laboratrio de Neurofarmacologia da UFCE.

minha famlia, que me deu a base para conseguir chegar at aqui.

Aos meus colegas de laboratrio, que me ajudaram de todas as formas. Sem eles certamente no teria

conseguido os resultados alcanados.

minha orientadora, que me auxiliou em todos os momentos dessa jornada, e que me inspirou e inspira

a sempre buscar o melhor no campo profissional e pessoal.

todos os professores do grupo de pesquisa do Laboratrio de Neurofarmacologia e aos membros das

bancas de qualificao e defesa pelo carinho e ateno para com o trabalho realizado.

CAPES pelo apoio financeiro.

Universidade Federal do Cear, por fazer parte da minha vida desde a graduao, mestrado e agora

concedendo-me o ttulo de Doutor.

A todos o meu muito obrigado!

RESUMO

EFEITO TIPO ANTIDEPRESSIVO E ANSIOLTICO DO EXTRATO ETANLICO DE Egletes viscosa E DE SEU METABLITO CONIZALEUCOLIDEO A: ENVOLVIMENTO DE MECANISMOS MONOAMINRGICOS, ANTIOXIDANTES E ANTI-INFLAMATRIOS

A espcie Egletes viscosa, da famlia Asteraceae, uma erva silvestre frequente no serto e litoral

nordestino do Brasil, popularmente designada por macela verdadeira. A planta apresenta como

principais usos problemas digestivos e intestinais, clicas, gases, azia, m digesto, diarreia e

enxaqueca. Estudos prvios levaram a relacionar possveis efeitos centrais a esta espcie vegetal.

Visando a busca por melhores alternativas teraputicas para tratamentos de depresso e ansiedade

em humanos, avaliou-se seus possveis efeitos centrais nos modelos pr-clnicos em

camundongos. Foram utilizados modelos clssicos de triagem para agentes sedativo/hipntico e

antidepressivos, como o campo aberto (CA), rota rod (RR), Labirinto em cruz elevado ou plus

maze (LCE), nado forado (TNF) e preferncia por sacarose (PS). Para esse estudo, utilizou-se o

extrato etanlico nas doses de 100 e 200 mg/kg, alm do constituinte majoritrio isolado desse

extrato, um diterpeno furnico denominado colizaleucoldeo A (CZA), nas doses de 25 e 50

mg/kg. No modelo do LCE demonstrou-se que as drogas apresentaram atividade ansioltica com

envolvimento do receptor benzodiazepnico, pois o efeito foi revertido pelo Flumazenil.

Posteriormente, foram realizados testes de avaliao do efeito antidepressivo com dois modelos

comportamentais, o TNF e PS, sendo a depresso induzida pela administrao intraperitoneal de

LPS 0,5 mg/kg. Atravs desses modelos, foi observado um efeito antidepressivo no relacionado

a ao psicoestimulante, e que parece ser mediado, pelo menos em parte, por uma interao com

os sistemas dopaminrgico (receptores D1 e D2), noradrenrgico (receptor 1) e serotonrgico

(receptores 5-HT1A). Tambm foi analisado o efeito anti-inflamatrio e antioxidante, sabidamente

relacionados fisiopatologia da depresso. Usando o lipopolissacardeo como indutor do estado

depressivo, o mesmo atuou alterando os nveis de nitrito, espcies reativas de cido tiobarbitrico

(TBARS), da enzima mieloperoxidase (MPO), bem como reduzindo os nveis de glutationa

reduzida (GSH), efeitos condizentes com o estado depressivo. Verificou-se a atuao dos

materiais extrados de E. viscosa na preveno e na reverso de alteraes no crtex pr-frontal,

hipocampo e ncleos da base de camundongos conseguiu reverter os efeitos do

Lipopolissacardeo nos parmetros estudados. Foi utilizada a imipramina na dose de 10 mg/kg

como droga padro tanto na preveno quanto na reverso do estado depressivo em animais. Os

dados obtidos sugerem efeito antidepressivo do extrato etanlico de E. viscosa assim como seu

constituinte majoritrio, CZA.

Palavras-chave: Lipopolissacardeo. Egletes viscosa. Ansiedade. Depresso.

ABSTRACT

ANTIDEPRESSANT AND ANXIOLYTIC LIKE EFFECT OF ETHANOLIC EXTRACT

OF Egletes viscosa AND ITS METABOLITE CONYZALEUCOLIDE A:

INVOLVEMENT OF MONOAMINE, ANTIOXIDANTS AND ANTI- INFLAMMATORY

MECHANISMS

The Egletes viscosa specie, from Asteraceae family, is a common wild grass in the wilderness

and the northeastern coast of Brazil, popularly known as true macela. The plant has as main uses

digestive and intestinal problems, cramps, gas , heartburn, indigestion, diarrhea and headache.

Previous studies have led to relate possible central effects of this plant species. Aiming to search

for better therapeutic alternatives for treatment of depression and anxiety in humans, it evaluated

its possible central effects in preclinical models of mice. Classic models were used in screening

for sedative / hypnotic and antidepressant agents, such as the open field (CA), rota rod (RR), plus

maze (LCE), forced swimming test (TNF) and suppression of sucrose (SC). For the study, we

used the ethanolic extract at doses of 100 and 200 mg / kg, besides the isolated major constituent

of this extract, a diterpene furan called colizaleucoldeo A, at doses of 25 and 50 mg / kg. It has

been shown that drugs presented anxiolytic and antidepressant activity. A target site to the related

anxiolytic effects is the GABA receptor, which was shown in the plus maze test with the GABA

antagonist flumazenil. Following, evaluation tests of antidepressant effect with two behavioral

models were performed, the forced swimming test (TNF) and the suppression of sucrose (SC),

having de LPS (lipopolysaccharide) intraperitoneal as the inductor of similar to depression

behaviour. Through these models, it was observed an antidepressant effect not related to

psychostimulant actions, and that seems to be mediated, at least in part by an interaction with the

dopaminergic system (D1 and D2 receptors), noradrenergic (receptor 1) and serotonin (receptor

5-HT1A). It was also analyzed the anti-inflammatory and antioxidant effects, known to be related

to the pathophysiology of depression. Using lipopolysaccharide as an inducer of the depressive

state, it changed the nitrite levels, reactive thiobarbituric acid (TBARS), the enzyme

myeloperoxidase (MPO ) as well as reduced the levels of reduced glutathione (GSH), all the

effects consistent with the depressive state. The performance of the materials extracted from E.

viscosa was found in the prevention and reversal of changes in the prefrontal cortex,

hippocampus and nucleus of base, where it could reverse the effects of lipopolysaccharide in the

studied parameters. Imipramine was used as a standard drug both in prevention and in reversing

the depressive state in animals. The data suggest the use of E. viscosa ethanol extract and the

diterpene colizaleucoldeo A as antidepressant.

Keywords: Lipopolysaccharide. Egletes viscosa. Anxiety. Depression.

LISTA DE ILUTRAES

FIGURA 1 Circuitos neuronais da ansiedade e medo 26

FIGURA 2 Ansiedade patolgica: hiperativao de circuitos ligados

amgdala

27

FIGURA 3 Receptor GABAA. 29

FIGURA 4 Correspondncia entre sintomas depressivos e circuitos 31

FIGURA 5 Esquema da composio do LPS na parede celular de bactrias

gram-negativas.

43

FIGURA 6 Mecanismo de ao simplificado do LPS em um macrfago,

culminando com a liberao de citocinas pr-inflamatrias:

45

FIGURA 7 Fotografia de Egletes viscosa Les