desenvolvimento e anÁlise “in vitro” do efeito ... · oportunidade de ter feito parte do seu...

ANNELYZE PODOLAN KLOSTER

DESENVOLVIMENTO E ANAacuteLISE ldquoIN VITROrdquo DO EFEITO ANTIMICROBIANO DE BANDAGEM BUCAL

Dissertaccedilatildeo apresentada a Faculdade de Odontologia de Bauru da Universidade de Satildeo Paulo para obtenccedilatildeo do tiacutetulo de mestre em Odontologia Aacuterea de concentraccedilatildeo Odontopediatria Orientador Profa Dra Maria Aparecida de Andrade Moreira Machado

BAURU 2011

Kloster Annelyze Podolan Desenvolvimento e anaacutelise ldquoin vitrordquo do efeito antimicrobiano de bandagem bucal Annelyze Podolan Kloster ndash Bauru 2011 101 p il 31cm Dissertaccedilatildeo (Mestrado) ndash Faculdade de Odontologia de Bauru Universidade de Satildeo Paulo Orientador Profa Dra Maria Aparecida de Andrade Moreira Machado

K697d

Autorizo exclusivamente para fins acadecircmicos e cientiacuteficos a reproduccedilatildeo total ou parcial desta dissertaccedilatildeotese por processos fotocopiadores e outros meios eletrocircnicos Assinatura Data

Comitecirc de Eacutetica da FOB-USP Protocolo nordm Data

(Folha De Aprovaccedilatildeo)


Dados Curriculares

Nascimento

Naturalidade

Filiaccedilatildeo

2002 ndash 2006

2007 ndash 2008

2007 ndash 2008

2009 ndash 2011

17 de fevereiro de 1984

Cuiabaacute ndash MT

Ronaldo Kloster

Emeri Fatima Podolan Kloster

Curso de Graduaccedilatildeo em Odontologia pela Universidade

de CuiabaacuteUNIC ndash Cuiabaacute ndash MT

Curso de Especializaccedilatildeo em Sauacutede Coletiva pelo

Instituto IBPEX Facinter ndash Cuiabaacute ndash MT

Curso de Especializaccedilatildeo em Odontopediatria pela

Universidade de CuiabaacuteUNIC ndash Cuiabaacute ndash MT

Curso de Poacutes-Graduaccedilatildeo em Odontologia niacutevel de

Mestrado Aacuterea de Concentraccedilatildeo Odontopediatria pela

Faculdade de Odontologia de Bauru ndash Universidade de

Satildeo Paulo ndash Bauru ndash SP

DEDICATOacuteRIA

A Deus Pelo dom que me deste pelas oportunidades que me apresentaste e pela vitoacuteria

alcanccedilada obrigada Senhor

ldquoQuando a solidatildeo doeu em mim ()

Quando eu natildeo soube compreender a vida Tu vieste compreender por mim

Quando os meus olhos natildeo podiam ver Tua matildeo segura me ajudou a andar

Quando eu natildeo tinha mais amor no peito Teu amor me ajudou a amar

Quando os meus sonhos vi desmoronar me trouxeste outros pra recomeccedilar

Quando me esqueci que era algueacutem na vida Teu amor veio me relembrarrdquo

Aos meus pais Ronaldo e Emeacuteri

Mais uma vez este sonho realizado eacute nosso Obrigada pela confianccedila Acredito

que vocecircs nunca imaginaram que eu chegaria tatildeo longe Sei que natildeo foi tatildeo simples

como da uacuteltima vez a saudade foi nossa companheira e a nossa rotina foi diferente

nestes uacuteltimos anos mas o amor de vocecircs foi o combustiacutevel para que eu realizasse

mais este projeto e mesmo com mais esse tiacutetulo continuo sendo o reflexo de vocecircs e

dos valores que me ensinaram Amo muito vocecircs

Ao meu irmatildeo Filype

Dines vocecirc continua sendo o meu maior orgulho Obrigada por ter cuidado do

pessoal de casa enquanto eu natildeo pude estar laacute Obrigada pela paciecircncia e pela

compreensatildeo Espero que esta minha vitoacuteria lhe sirva de inspiraccedilatildeo agora eacute a sua

vez

Ao meu amor Paulo Artur

ldquoE mesmo que eu viva pra sempre e todos os meus sonhos sejam realizados as

minhas lembranccedilas de amor sempre seratildeo suasrdquo (Perhaps love)

Obrigada pelo seu amor pelo incentivo por ser mais ldquorazatildeordquo por ter me

esperado e por ter vencido comigo mais esse desafio Acredito que dessa vez

descobrimos o valor que temos na vida um do outro e hoje vivemos de amor sincero e

admiraccedilatildeo muacutetua pois muito do que sou hoje devo a vocecirc TE AMO

AGRADECIMENTOS ESPECIAIS

Agrave Professora Dra Maria Aparecida de Andrade Moreira Machado que

se tornou uma referencia iacutempar para mim todo o meu agradecimento e minha

admiraccedilatildeo sua disposiccedilatildeo contagiante e seu espiacuterito inovador me fizeram aceitar a

ideacuteia de colocar em praacutetica esta pesquisa que hoje apresentamos com um resultado

muito feliz e que foi comemorado com muito entusiasmo aprendi com vocecirc que

nunca devemos desistir de uma ideacuteia por mais inusitada que ela seja Agradeccedilo a

oportunidade de ter feito parte do seu time de alunos orientados e de ter aprendido

muito com vocecirc Foi uma honra ter convivido com vocecirc professora Muito Obrigada

Agrave Professora Dra Silgia Aparecida da Costa que deu ldquovidardquo agraves nossas

bandagens e prontamente nos ajudou a realizar este projeto Sua disponibilidade

atenccedilatildeo e a maneira carinhosa com que sempre nos atendeu satildeo raras de serem

encontradas Obrigada pela sua preciosa colaboraccedilatildeo

Aos professores do Departamento de Odontopediatria da Faculdade de

Odontologia de Bauru sou imensamente grata por ter sido aluna de vocecircs e vou levar

cada ensinamento como liccedilotildees para toda a vida Prof Dr Ruy Abdo praacutetico e

dinacircmico Prof Dr Joseacute Eduardo de Oliveira Lima pelas conversas sinceras e

pelos conselhos que recebi durante as cliacutenicas da graduaccedilatildeo receba todo o meu

carinho e a minha admiraccedilatildeo Profa Dra Salete Moura Bonifaacutecio Silva agradeccedilo

pela atenccedilatildeo dedicaccedilatildeo e conhecimentos transmitidos e por ter despertado em mim

um apreccedilo pelos gatinhos Profa Dra Daniela Rios que nos recebeu tatildeo bem ouviu

nossas duacutevidas e sempre nos deu muito afeto continue recebendo bem os proacuteximos

que passarem por aqui e nunca perca o olhar doce de quem um dia jaacute foi aluna como

noacutes Agrave vocecirc que me permite chamaacute-la de Dani todo o meu carinho e amizade Agrave

Profa Dra Thais Marchini de Oliveira obrigada por ter me ensinado bem mais do

que eu vim aprender aqui Te levo no coraccedilatildeo e nunca vou me esquecer dos seus

conselhos e da sua maneira de levar a vida conte sempre comigo

Aos funcionaacuterios do Departamento D Lia Lilian Estela Faacutetima e

Alexandre companhias diaacuterias que foram muito importantes para que nossas

atividades dessem certo Sempre preocupadas para que nos sentiacutessemos bem

fizeram o nosso dia a dia ser muito mais agradaacutevel na companhia de vocecircs Obrigada

por tudo

Ao Andreacute teacutecnico do laboratoacuterio de Microbiologia que contribuiu

imensamente para que a fase laboratorial dessa pesquisa desse certo e que vibrou

junto comigo quando vimos os microrganismos crescendo no meio de cultura muito

muito obrigada Sua gentileza e paciecircncia comigo valeram ouro

Aos meus pacientes que me permitem ser ldquoTia Annerdquo e me motivam a

aprimorar meus conhecimentos para ganhar sorrisos como a maior recompensa do

meu trabalho

Aos colegas da Poacutes Graduaccedilatildeo em Odontopediatria Ana Paula Flaacutevia

Janaiacutena Maisa Vanessa Adriana Ana Liacutedia Akio Carla Juliana Natalino Susi

Sileide Tatiana e Priscila agradeccedilo a vocecircs os momentos de convivecircncia a

oportunidade de partilhar conhecimentos e de aprender com vocecircs Espero que a

distacircncia natildeo nos deixe perder o contato e que eu receba sempre boas notiacutecias de

vocecircs Sucesso amigos

Luciana bahiana linda e chique Muito sucesso pra vocecirc em todos os seus

projetos Obrigada pela companhia e pelas conversas animadas

Aos amigos da Patologia e da Dentiacutestica que navegaram comigo neste

mesmo barco e que foram oacutetimas companhias do meu dia a dia de mestrado

Tamara e Bianca lindas Obrigada pela companhia divertida de vocecircs

Sucesso Contem sempre comigo

Aos meus amigos que resistiram agrave minha ausecircncia que torceram por mim

e que eu pude contar em todos os momentos mesmo de longe amo vocecircs Em

especial a Juliana e a sua famiacutelia que me hospedaram com muito carinho em cada

maratona de idas e vindas o meu carinho e a minha amizade sempre

Ao Prof Dr Luiz Evaristo Ricci Volpato meu professor e amigo de todos

os momentos obrigada por me apresentar agrave FOB e toda a sua dimensatildeo e pelo

incentivo para que eu realizasse mais este sonho Seus conselhos valem ouro pra

mim e esse foi mais um precioso que eu recebi

Ao Prof Dr Heitor Marques Honoacuterio que colaborou na realizaccedilatildeo dos

testes estatiacutesticos desta pesquisa o meu agradecimento

Ao Cnpq pela concessatildeo da bolsa de estudos deste mestrado

Agraves minhas amigas Flaacutevia Janaiacutena e Maisa

ldquoQuem me daraacute um ombro amigo quando eu precisar

E se eu cair se eu vacilar quem vai me levantarrdquo

ldquoSou eu quem vai ouvir vocecirc quando o mundo natildeo puder te entender

Foi Deus quem te escolheu pra ser o melhor amigo que eu pudesse terrdquo

Amigos pra sempre Bons Amigos que nasceram pela feacute (de que tudo daria certo)

Amigos pra sempre Para sempre amigos sim se Deus quiser

ldquoQuem eacute que vai me acolher na minha indecisatildeo

Se eu me perder pelo caminho quem me daraacute a matildeordquo

ldquoFoi Deus quem consagrou vocecirc e eu para sermos bons amigos num soacute coraccedilatildeo

Por isso eu estarei aqui quando tudo parecer sem soluccedilatildeordquo

Peccedilo a Deus que te guarde e te decirc a sua Paz

Eu jamais poderia imaginar que o meu mestrado em Bauru me daria de presente 3

amigas como vocecircs Eu apenas tinha pedido a Deus que me desse forccedila pra dar

conta desse projeto e Ele me mandou vocecircs Natildeo foi por acaso natildeo foi forccedilado natildeo foi

arranjado foi sincero foi amizade verdadeira dessas que a gente leva pela vida toda

Acreditem vocecircs fizeram a diferenccedila na minha vida nesses dois anos e eu sei que

tambeacutem marquei a vida de vocecircs Aqui fomos um grupo tudo nosso foi dividido os

pacientes os seminaacuterios os problemas as anguacutestias as decepccedilotildees as coisas boas

as conquistas as risadas as caronas tudo absolutamente tudo Fomos o apoio a

ldquofamiacuteliardquo o socorro a conselheira uma da outra a companhia do fim de semana

chuvoso o desabafo quando a professora ldquoenlouqueciardquo ou quando o namorado pisava

na bola Cada uma sabe o quanto esses momentos foram importantes e levaremos

para sempre essa amizade que nos fez ser pessoas melhores que nos fez felizes

durante esse momento uacutenico para cada uma de noacutes Obrigada pelos momentos felizes

e pela amizade sincera que vivemos Amo muito vocecircs

Anne

ldquoNunca houve noite que pudesse impedir o nascer do sol e a

esperanccedilardquo

Autor desconhecido

ldquoEacute apenas com o coraccedilatildeo que se pode ver direito o essencial eacute

invisiacutevel aos olhosrdquo

Antoine Saint-Exupeacutery

RESUMO

A busca por um dispositivo terapecircutico que possa ser aplicado em feridas e

lesotildees da mucosa oral eacute um desafio para a Odontologia O objetivo deste trabalho foi

desenvolver uma bandagem bucal com capacidade de liberaccedilatildeo de faacutermacos e avaliar

in vitro sua eficiecircncia antimicrobiana sobre os microrganismos Streptococcus mutans e

Candida albicans A bandagem foi feita a partir de quitosana que eacute um biopoliacutemero

com caracteriacutesticas especiacuteficas Este biopoliacutemero eacute biocompatiacutevel biodisponiacutevel

biodegradaacutevel tem accedilatildeo antimicrobiana pode ser indicado para uso em vaacuterios

segmentos da aacuterea da sauacutede e possui baixo custo A bandagem possibilitou a

incorporaccedilatildeo de um faacutermaco antimicrobiano e neste caso foi incorporada a clorexidina

eficaz no tratamento de lesotildees ulceradas traumatismos e feridas ciruacutergicas

amplamente utilizado em odontologia Sendo assim foram desenvolvidas cinco tipos

de bandagens bandagem de quitosana a 5 + clorexidina a 02 bandagem de

quitosana a 5 + clorexidina a 06 bandagem de quitosana a 5 + clorexidina a

10 bandagem de quitosana a 5 + clorexidina a 20 e quitosana a 5 sem

adiccedilatildeo de clorexidina Obtidas as amostras foi testada a accedilatildeo antimicrobiana das

bandagens frente aos microrganismos Calbicans e Smutans atraveacutes de antibiograma

Para efeito comparativo foram testados geacuteis nas seguintes formulaccedilotildees gel de

quitosana gel de quitosana e clorexidina 02 e 20 e gel de clorexidina 02 e 20

sobre os mesmos tipos de microrganismos Os resultados obtidos foram submetidos agrave

anaacutelise estatiacutestica onde se observou que as bandagens que continham quitosana pura

natildeo inibiram o crescimento de microrganismos e as bandagens com clorexidina a 20

formaram os maiores halos de inibiccedilatildeo para Calbicans e Smutans (166mm e 250mm

respectivamente) Dentre os geacuteis testados o gel de clorexidina 20 teve melhor

resultado para ambos os microrganismos e o gel de quitosana pura assim como a

bandagem de igual composiccedilatildeo tambeacutem natildeo foram eficientes Conclui-se que a

bandagem possui eficaacutecia na inibiccedilatildeo do crescimento dos microrganismos Candida

albicans e Streptococcus mutans Sugerimos que mais estudos ainda satildeo necessaacuterios

para o aprimoramento deste dispositivo inovador

Palavras chave curativos hidrocoloacuteides quitosana clorexidina teste de

sensibilidade microbiana cicatrizaccedilatildeo

ABSTRACT

DEVELOPMENT AND IN VITRO ANALYSIS OF ANTIMICROBIAL EFFECT OF ORAL BANDAGE

The search for a therapeutic device that can be applied to wounds and oral

lesions is a challenge for dentistry The purpose of this study was to develop a bandage

capable of release drugs and evaluate in vitro yours antimicrobial efficiency on

Streptococcus mutans and Candida albicans The bandage was made of chitosan

whichrsquos a biopolymer with specific characteristics This biopolymer are biocompatible

biodegradable bio-obtainable antimicrobiotic can be indicated for use in several

segments of healthcare and have low cost The bandage allowed the incorporation of

antimicrobial drugs and in this case was incorporated chlorhexidine effective on

treatment of ulcerated lesions trauma and surgical wounds widely used in dentistry

Thus were developed five types of bandages with the following concentrations of

chlorhexidine chitosan bandage 5 + chlorhexidine 02 chitosan bandage 5 +

chlorhexidine 06 chitosan bandage 5 + chlorhexidine 10 chitosan bandage 5

+ chlorhexidine 20 and chitosan 5 without addition of chlorhexidine With obtained

samples the antimicrobial action of the bandages were tested against Calbicans and

Smutans microorganisms through sensitivity For comparison we tested gels with

these formulations chitosan gel chitosan gel and chlorhexidine 02 and 20 and

chlorhexidine 02 and 20 over the same kind of microorganisms The obtained

results were analyzed statistically where were observed that the pure chitosan

bandages didnrsquot inhibit the growth of microorganisms and the bandage with 20

chlorhexidine formed the largest halo of inhibition for Calbicans and Smutans (166

mm and 250 mm respectively) Among the tested gels 20 chlorhexidine gel showed

better results for both microorganisms and the pure chitosan gel as well as the

bandage with the same composition was also not effective We conclude that the oral

bandage has efficacy in inhibiting the growth of microorganisms Calbicans and

Smutans More studies are still needed for improving this innovative device

Key words Bandage chitosan chlorhexidine products with antmicrobial action wound healing

LISTA DE ILUSTRACcedilOtildeES

- FIGURAS

Figura 231 - Estrutura quiacutemica da quitina 47

Figura 232 - Reaccedilatildeo da conversatildeo da quitina em quitosana 48

Figura 233 - Estrutura quiacutemica da quitosana 49

Figura 411 - Quitosana pura em flocos 60

Figura 412 - Bandagem de quitosana contendo faacutermaco embalada e esterilizada 60

Figura 413 - Gel de Quitosana 5 Gel de clorexidina a 02 Gel de clorexidina a

20 Gel de Quitosana 5 + clorexidina a 02 e Gel de Quitosana 5 + clorexidina

a 20 61

Figura 441 ndash Placa de petri contendo meio de cultura Aacutegar Sabourad 63

Figura 442 ndash Microrganismo inoculado em meio de cultura pronto para ser

plaqueado 63

Figura 443 ndash Plaqueamento de Calbicans sobre meio de cultura 64

Figura 444 ndash Bandagens dispostas sobre meio de cultura Agar Sabourad 64

Figura 445 ndash Discos contendo gel em diferentes composiccedilotildees dispostos sobre meio

de cultura Agar Sabourad 65

Figura 446 ndash Cultivo de Calbicans apoacutes 48 horas de incubaccedilatildeo evidenciando a

formaccedilatildeo de halos de inibiccedilatildeo de crescimento 65

Figura 451 ndash Placas de cultura contendo meio de cultura SB20 66

Figura 452 ndash Streptococcus mutans visto por microscopia 67

Figura 453 ndash Plaqueamento de Smutans sobre meio de cultura 68

Figura 454 ndash Bandagem sobre meio de cultura 68


Figura 456 ndash Discos contendo gel sobre meio de cultura SB20 69

Figura 457 ndash Placas de petri em microaerofilia em estufa bacterioloacutegica a 37degC 70

Figura 458 ndash Halo de inibiccedilatildeo formado ao redor das amostras de bandagem sobre

cultura de Smutans 71

Figura 459 ndash Mediccedilatildeo dos halos de inibiccedilatildeo 71

- GRAacuteFICOS

Graacutefico 51 - Valores de meacutedia (em miliacutemetros) do halo de inibiccedilatildeo formado por

bandagens e geacuteis sobre cultura de Calbicans em ordem

decrescente de tamanho

77


bandagens e geacuteis sobre cultura de Smutans em ordem


79

LISTA DE TABELAS

Tabela 51 - Meacutedia e desvio padratildeo do halo de inibiccedilatildeo das amostras de

bandagem sobre Calbicans (plt005) n=03

75

Tabela 52 -

Tabela 53 -

Meacutedia e desvio padratildeo do halo de inibiccedilatildeo das amostras de gel

sobre Calbicans(plt005) n=03

Meacutedia e desvio padratildeo do halo de inibiccedilatildeo das amostras de

bandagem sobre Smutans (plt005) n=03

76

77

Tabela 54 -


sobre Smutans(plt005) n=03

78

LISTA DE ABREVIATURA E SIGLAS

Smutans Streptococcus mutans

Calbicans Candida albicans

UTIN Unidade de Terapia Intensiva Neonatal

UTI Unidade de Terapia Intensiva

FDA Food and Drug Admnistration

ADA American Dental Association

DNA Acido desoxirribonucleacuteico

RNA Acido ribonucleacuteico

min minutos

h hora

Ltda limitada

FOB Faculdade de Odontologia de Bauru

USP Universidade de Satildeo Paulo

BHI Brain Heart Infusion

ufc unidade formadora de colocircnia

LISTA DE SIacuteMBOLOS

percentual

degC grau Celcius

C Carbono

H Hidrogecircnio

Cl Cloro

N Nitrogecircnio

O Oxigecircnio

g grama

cmsup3 centiacutemetro cuacutebico

Ca Caacutelcio

β beta

p valor da probabilidade

lt menor

ml mililitro

trade trademark

mm miliacutemetro

nm nanocircmetro

m metro

reg marca registrada

SUMAacuteRIO

1 INTRODUCcedilAtildeO 33

2 REVISAtildeO DE LITERATURA 39

21 MICROBIOTA ORAL 41

211 STREPTOCOCCUS MUTANS (Smutans) 41

212 CANDIDA ALBICANS (Calbicans) 43

22 CLOREXIDINA 45

23 QUITINA E QUITOSANA 47

3 PROPOSICcedilAtildeO 53

4 MATERIAIS E MEacuteTODOS 57

41 MATERIAIS 59

42 DESENVOLVIMENTO DOS GEacuteIS 61

421 PREPARO DO GEL DE QUITOSANA 61

422 PREPARO DO GEL DE QUITOSANA COM CLOREXIDINA 61

43 DESENVOLVIMENTO DAS BANDAGENS 62

44 MEacuteTODO AGAR DIFUSAtildeO E TESTE ANTIMICROBIANO Calbicans 62

45 MEacuteTODO AGAR DIFUSAtildeO E TESTE ANTIMICROBIANO Smutans 66

46 ANAacuteLISE ESTATIacuteSTICA 72

5 RESULTADOS 73

6 DISCUSSAtildeO 81

7 CONCLUSOtildeES 89

REFEREcircNCIAS 93

1 Introduccedilatildeo

1 Introduccedilatildeo 35

1 INTRODUCcedilAtildeO

A busca por alternativas terapecircuticas que possam ser aplicadas em

feridas ciruacutergicas feridas oriundas de traumatismos fiacutesicos eou quiacutemicos e outras

lesotildees ulceradas nos tecidos moles da boca eacute realizada haacute algumas deacutecadas por

pesquisadores (ANDERS 1989 NEEDLMAN 1997 SENEL 2000) Esta questatildeo se

faz particularmente significativa quando relacionada ao tratamento destas feridas

eou lesotildees em crianccedilas nas diversas faixas etaacuterias A obtenccedilatildeo de um veiacuteculo

alternativo que natildeo seja liacutequido poacute gel ou creme para aplicar nestas feridas que

permita o contato do faacutermaco por um tempo mais prolongado com o tecido afetado

seraacute de grande contribuiccedilatildeo para favorecer o processo de reparo pois a peliacutecula de

saliva que por vezes atua como um elemento protetor da mucosa lubrificando-a

constantemente em outras impede a penetraccedilatildeo de medicamentos nos tecidos

solubilizando-os mais rapidamente antes da sua completa accedilatildeo Nesta oacutetica o

controle da infecccedilatildeo bucal eacute sempre um desafio pois a boca eacute um meio onde

existem muitos microrganismos Aleacutem disso quatro fatores podem comprometer a

cicatrizaccedilatildeo a presenccedila de corpos estranhos no tecido mole necrose isquemia e

tensatildeo na ferida ciruacutergica mesmo em indiviacuteduos saudaacuteveis Com relaccedilatildeo aos corpos

estranhos algumas consequecircncias podem acontecer durante o processo cicatricial

caso eles estejam presentes O mais comum eacute a proliferaccedilatildeo de bacteacuterias e fungos

contaminando o tecido e favorecendo sua proliferaccedilatildeo (PETERSON 2005)

Sendo assim satildeo justificados esforccedilos em pesquisas para desenvolver

algum tipo de produto eou material com accedilatildeo antimicrobiana que possa ser utilizado

em tecidos uacutemidos como eacute o caso da mucosa oral Este produto eou material

idealmente deveraacute ter a capacidade de adesatildeo nestas aacutereas e ser reabsorvido no

meio bucal apoacutes o tempo necessaacuterio para que a accedilatildeo do faacutermaco possa ser efetiva

Outro elemento que deveraacute ser cuidadosamente avaliado eacute o tipo de faacutermaco a ser

utilizado e a sua compatibilidade com o produto que seraacute utilizado como veiacuteculo para

a incorporaccedilatildeo dos mesmos

Dentre a grande variedade dos poliacutemeros naturais que podem ser

utilizados para aplicaccedilotildees na aacuterea da sauacutede especial interesse tem sido dado agrave

quitina e agrave quitosana (SENEL 2000 HOVEN et al 2007 JAYAKUMAR et al 2007

LI et al 2005 AZEVEDO et al 2007 PILLAI 2009) A quitina eacute um poliacutemero natural

sendo o segundo polissacariacutedeo mais abundante na natureza depois da celulose


(BERGER et al 2004 PANCHENCE et al 2000 KUBOTA et al 2000) Pode ser

encontrada em abundacircncia no exoesqueleto da maioria dos crustaacuteceos como

caranguejos camarotildees lagostas e cutiacuteculas de alguns insetos (HOVEN et al 2007

HIRANO 1999) Modificando quimicamente a quitina se obteacutem a quitosana que eacute

um derivado soluacutevel em soluccedilotildees de aacutecido aceacutetico diluiacuteda A quitosana eacute um

biopoliacutemero relevante no que tange a biodisponibilidade biocompatibilidade e

biodegradabilidade de baixo custo e de grande importacircncia econocircmica e ambiental

jaacute que as carapaccedilas dos crustaacuteceos satildeo resiacuteduos abundantes que satildeo rejeitados

pela induacutestria pesqueira o que reduz assim o impacto ambiental Eacute utilizada na aacuterea

farmacecircutica nutricional agricultura e terapia geneacutetica entre outras aacutereas

(AZEVEDO et al 2007 PILLAI 2009) A quitosana possui propriedades uacutenicas o

que a torna interessante para inuacutemeras aplicaccedilotildees na aacuterea de sauacutede (KURITA et al

2000 TOLAIMATE et al 2000) Este poliacutemero apresenta grande versatilidade para

formar filmes geacuteis fibras matrizes polimeacutericas para liberaccedilatildeo controlada de

faacutermacos estruturas porosas para engenharia de tecidos o que a torna bastante

atrativa para aacuterea da sauacutede (WESKA et al 2007 JAYAKUMAR et al 2007 REGE

et al 2003 MADIHALLY et al 1999)

Dentre os faacutermacos de accedilatildeo antimicrobiana utilizados em Odontologia

a clorexidina eacute um dos mais potentes sendo que vaacuterios estudos confirmaram que eacute

altamente eficaz no controle dos microrganismos bucais (FARDAK e TURNBULL

1985 FERJERSKOV e THYLSTRUP 1996 ADDY 2005 VON BLUCHER 2007

ZANATTA 2007 SEMENOFF et al 2010) Pode ser apresentada na forma de

diversos sais como o gluconato o digluconato o acetato e o hidrocloridrato sendo

que o digluconato eacute a forma mais indicada por ter maior solubilidade em aacutegua e em

pH fisioloacutegico dissociar-se liberando o componente catiocircnico (ADDY 2005) Em

baixas concentraccedilotildees (menor que 012) a clorexidina eacute bacteriostaacutetica e em altas

concentraccedilotildees (acima de 05) bactericida (SASSONE et al 2008)

Contudo como a maioria dos antimicrobianos e antifuacutengicos a clorexidina

natildeo possui capacidade intriacutenseca de se ligar agrave mucosa oral O uso dessas

substacircncias pode ser feito com formulaccedilotildees melhoradas por meio de agentes

carreadores A quitosana eacute um poliacutemero biocompativel que tem sido proposto como

um poliacutemero bioadesivo capaz de fixar o medicamento na mucosa buca

(KNAPCZYC 1994 MIYAZAKI et al 1994) Estudos mostraram que hidrogeacuteis de


quitosana prolongam tanto o tempo de retenccedilatildeo quanto o de liberaccedilatildeo da droga na

mucosa bucal (NEEDLEMAN et al 1997)

Considerando o exposto se faz pertinente o desenvolvimento e a

avaliaccedilatildeo de um material eou produto incorporado de um antimicrobiano que possa

ser aplicado na mucosa bucal


2 Revisatildeo de Literatura

2 Revisatildeo de Literatura 41

2 REVISAtildeO DE LITERATURA

21 - Microbiota Oral A cavidade oral eacute uma extensatildeo da parte externa do corpo humano e

possui uma microbiota proacutepria compreendendo um grupo diversificado de

microrganismos que incluem bacteacuterias fungos micoplasmas protozoaacuterios e

possivelmente uma microbiota viral que pode existir de tempos em tempos em

situaccedilotildees de desequiliacutebrio no organismo A mucosa jugal o dorso da liacutengua e as

superfiacutecies dentaacuterias satildeo altamente colonizadas por estes microrganismos A

aquisiccedilatildeo da microbiota oral residente ocorre no nascimento e eacute um processo natural

de colonizaccedilatildeo sendo que espeacutecies distintas de bacteacuterias podem ser isoladas na

boca de bebecircs apoacutes poucas horas do seu nascimento (FEJERSKOV 1996)

A microbiota oral estaacute diretamente relacionada com a formaccedilatildeo de

biofilme dentaacuterio e com as doenccedilas decorrentes dele Prevenir e controlar as

afecccedilotildees que ocorrem na boca do ser humano consiste em reduzir estes

microrganismos de maneira eficiente (SILVA 2010 OLIVEIRA 2004)

Satildeo vaacuterios os microrganismos bucais mas neste capiacutetulo seratildeo feitas

referecircncias a apenas dois de maior interesse na Odontologia e que foram alvos do

presente trabalho que satildeo eles Streptococcus mutans e Candida albicans

211 - Streptococcus mutans (S mutans)

Os estreptococos constituem um dos mais populosos grupos de bacteacuterias

da boca Formados por um conjunto heterogecircneo de cocos que se dividem num soacute

plano os estreptococos agrupam-se em cadeias de tamanhos variaacuteveis e embora

estes microrganismos faccedilam parte da microbiota oral normal muitos deles satildeo

considerados importantes agentes infecciosos para o homem quando haacute um

desequiliacutebrio e sua contagem aumenta Satildeo agentes etioloacutegicos associados agrave

bacteremias endocardites abcessos infecccedilotildees do trato geniturinaacuterio e infecccedilotildees de

feridas em geral

O biofilme dentaacuterio aderido agrave superfiacutecie do dente eacute o habitat principal de

mais de 500 diferentes espeacutecies bacterianas e entre elas estatildeo os estreptococos Os

do grupo mutans (S mutans) estudados em especiacutefico neste trabalho satildeo cocos

gram-positivos alfa hemoliacuteticos e anaeroacutebios facultativos (NISERGARD E

NEWMAN 1997 OLIVEIRA 2004 RODRIGUES 2008 BANU2010 PARTHO


2010) Satildeo considerados como os principais microrganismos causadores da caacuterie

dentaacuteria devido agrave sua capacidade de metabolizar os carboidratos presentes na dieta

e transformaacute-los em aacutecidos sendo o principal o aacutecido laacutectico Sua presenccedila

aumentada no meio bucal resulta na diminuiccedilatildeo do pH e provoca a desmineralizaccedilatildeo

do esmalte e dentina quando esta estaacute exposta Aleacutem da produccedilatildeo de aacutecido a partir

de accediluacutecares a capacidade de aderir agrave superfiacutecie dentaacuteria onde crescem em forma

de biofilmes a toleracircncia de pH baixo e produccedilatildeo de bacteriocinas satildeo importantes

fatores de virulecircncia de S mutans (NISERGARD E NEWMAN 1997 OLIVEIRA

2004 RODRIGUES 2008 BANU2010 PARTHO 2010) Eacute um dos microrganismos

responsaacuteveis pela formaccedilatildeo do biofilme maduro que de fato eacute imprescindiacutevel para a

ocorrecircncia da caacuterie tambeacutem eacute o principal agente causador da endocardite

bacteriana (PARTHO 2010) O acuacutemulo do biofilme pode ser considerado um

promotor da alteraccedilatildeo da composiccedilatildeo microbioloacutegica local e consequentemente

conduz ao estabelecimento de outras doenccedilas bucais(BAEHNI E TAKEUCHI

2003)

A produccedilatildeo de polissacariacutedeos extracelulares caracterizados por sua

viscosidade favorece a aderecircncia do Smutans agrave superfiacutecie dentaacuteria contribuindo

para a formaccedilatildeo do biofilme dentaacuterio cariogecircnico

Linhagens de S mutans satildeo classificadas dentro de trecircs sorotipos (c e e f) e

a especificidade soroloacutegica eacute definida pelo polissacariacutedeo ramnose-glicose (RGP)

presente em sua parede celular A maioria dos indiviacuteduos eacute colonizada com somente

um sorotipo de S mutans e suspeita-se que o sorotipo c deva ser o progenitor dos

outros sorotipos As linhagens com sorotipo e e f devem ter sido originadas a partir

de uma mutaccedilatildeo pontual no loco determinante do sorotipo c ou uma deleccedilatildeo de uma

porccedilatildeo deste loco O papel das mutacinas (produtos gerados pelo Smutans) in vivo

ainda natildeo estaacute claro entretanto a atividade antimicrobiana destas substacircncias deve

conferir uma vantagem ecoloacutegica para a produccedilatildeo de linhagens na comunidade

bacteriana assim como no biofilme dentaacuterio e pode tambeacutem ser importante para o

estabelecimento do microrganismo in vivo (RODRIGUES et al 2008) As mutacinas

podem apresentar um importante papel bioloacutegico na regulaccedilatildeo e composiccedilatildeo do

biofilme dental tanto na atividade de sinergismo como de antagonismo sugerindo

que o largo espectro de mutacinas pode ser mais importante na colonizaccedilatildeo e

estabilizaccedilatildeo das espeacutecies cariogecircnicas mantendo e estabelecendo nichos e

atividade microbiana altamente complexa Talvez esse componente explique por que


uma vez que Smutans estejam estabelecidos satildeo dificilmente eliminados da

microbiota oral (RODRIGUES et al 2008 PARTHO 2010)

Assim estudar agentes que possam atuar no controle da populaccedilatildeo do

Smutans eacute de grande importacircncia para o controle das doenccedilas bucais e manter o

equiliacutebrio da microbiota oral favorecendo processos de reparo de lesotildees e feridas

212 - Candida albicans (C albicans)

As leveduras do gecircnero Candida satildeo microrganismos integrantes da

microbiota oral do homem desde o nascimento (VIEIRA et al 2005) Esta condiccedilatildeo

microbioloacutegica propicia comumente uma relaccedilatildeo de equiliacutebrio entre parasita-

hospedeiro diante da manutenccedilatildeo da integridade das barreiras teciduais relaccedilatildeo

harmocircnica da microbiota autoacutectone e funcionamento adequado do sistema

imunoloacutegico humano havendo em contrapartida por parte do fungo leveduriforme

permanecircncia equilibrada da capacidade de aderecircncia e da produccedilatildeo de enzimas e

toxinas (NISERGARD E NEWMAN 1997 VIEIRA 2005 BOTERO 2008 RORIG

2009) Alteraccedilotildees fiacutesicas quiacutemicas iatrogecircnicas e mecacircnicas que ocorrem na

cavidade oral bem como a mastigaccedilatildeo podem entre diversos fatores descritos

favorecer a ruptura do equiliacutebrio estabelecido entre o fungo e o hospedeiro fazendo

com que as infecccedilotildees por Candida sejam de origem geralmente endoacutegena

(GIANNINI E SHETTY 2011 BOTERO 2008 MENEZES 2008 VIEIRA et al

2005)

A C albicans eacute considerada o principal agente etioloacutegico da candidiacutease

uma infecccedilatildeo oportunista relacionada com locais e fatores predisponentes

sistecircmicos (GIANNINI E SHETTY 2011 PINTO et al 2006 NISERGARD E

NEWMAN 1997) Em consequecircncia haacute interesse nos fatores de virulecircncia destas

leveduras para estabelecer estrateacutegias de prevenccedilatildeo e de controle com antifuacutengicos

A habilidade de produzir enzimas hidroliacuteticas eacute considerada um importante fator de

virulecircncia As principais enzimas produzidas por leveduras do gecircnero Candida satildeo

as proteinases e as fosfolipases Outra caracteriacutestica associada com a

patogenicidade em humanos eacute a propriedade de multiplicaccedilatildeo a altas temperaturas

como 39ordmC e 42ordmC (RORIG 2009) Devido agrave neutropenia decorrente do tratamento

de pacientes submetidos agrave quimioterapia infecccedilotildees por C albicans satildeo mais


frequentes e tendem a potencializar os sinais e sintomas causando desconforto e

dificultando a recuperaccedilatildeo do paciente (PINTO et al2006 HESPANHOL 2010)

O tratamento da candidiacutease oral em geral eacute instituiacutedo empiricamente

apesar desta infecccedilatildeo apresentar-se com sintomas e aparecircncia macroscoacutepica

bastante variaacuteveis (GIANNINI E SHETTY 2011 WINGETER et al 2007) Esse

polimorfismo exigiria do cliacutenico a necessidade de adequaccedilatildeo da terapecircutica e isto

contribui para o aparecimento de espeacutecies de leveduras resistentes Este fato aliado

a pouca disponibilidade de novos produtos desenvolvidos pela induacutestria

farmacecircutica tem motivado vaacuterios estudos sobre a susceptibilidade in vitro dos

fungos agentes de infecccedilotildees humanas bem como alternativas para seu tratamento

(WINGETER et al 2007)

Infecccedilotildees fuacutengicas de origem hospitalar passaram a ter grande

importacircncia nos uacuteltimos anos pelo aumento progressivo e pelas elevadas taxas de

morbidade e mortalidade O ambiente hospitalar contribui para a disseminaccedilatildeo

dessas infecccedilotildees que satildeo de origem endoacutegena e outras podem tambeacutem ser

adquiridas por via exoacutegena pelas matildeos dos funcionaacuterios do hospital infusos

contaminados biomateriais e fontes inanimadas ambientais (MARTINS-DINIZ et al

2005) Segundo estudo de Martins-Diniz e colaboradores (2005) que isolou e

quantificou fungos em ambiente hospitalar e de funcionaacuterios para medir niacuteveis de

contaminaccedilatildeo verificaram que C albicans foi a espeacutecie que prevaleceu nas

amostras da equipe de profissionais e concluiu que a presenccedila de leveduras nas

matildeos desses profissionais tem preocupado as equipes de controle de infecccedilatildeo

hospitalar pois podem ser fonte potencial de contaminaccedilatildeo e disseminaccedilatildeo de

microrganismos Candida albicans eacute a principal espeacutecie capaz de provocar infecccedilatildeo

hospitalar tambeacutem em Unidade de Terapia Intensiva Neonatal (UTIN) Acredita-se

que a maioria dos episoacutedios de candidemia sejam adquiridos de origem endoacutegena

pela translocaccedilatildeo do patoacutegeno atraveacutes da mucosa do trato gastrointestinal local

onde a colonizaccedilatildeo por este fungo ocorre em ateacute 70 da populaccedilatildeo normal

Qualquer variaacutevel que provoque desequiliacutebrio da microbiota ou lesatildeo da mucosa

gastrointestinal pode ser um agente facilitador de translocaccedilatildeo de Candida do luacutemen

intestinal para os capilares mesenteacutericos (BORGES et al 2009) Segundo Oliveira et

al(2007) infecccedilotildees respiratoacuterias adquiridas em ambiente hospitalar podem estar


associadas ao biofilme bucal jaacute que estes pacientes possuem higiene deficiente da

boca durante o periacuteodo de internaccedilatildeo Este biofilme tambeacutem pode ajudar a abrigar

colocircnias de patoacutegenos pulmonares facilitando assim o desenvolvimento de

pneumonias Os autores propotildeem uma revisatildeo dos procedimentos especiacuteficos para

o controle destes patoacutegenos na cavidade oral e que devem ser considerados na

prevenccedilatildeo de pneumonia nasocomial especialmente em pacientes de UTI

22 - Clorexidina

A clorexidina eacute um composto quiacutemico sintetizado em laboratoacuterio desde

1954 Eacute definida como uma biguanidina catiocircnica que apresenta uma moleacutecula

simeacutetrica consistindo de dois aneacuteis 4-clorofenil e dois grupos biguanida conectados

por uma cadeia de hexametileno central (11rsquo hexametilenobis [5-(p-

clorofenil)biguanida]) Entre os antisseacutepticos de uso bucal eacute um dos agentes

antimicrobianos mais potentes e estudados sendo considerada altamente eficaz e

em geral referenciada como padratildeo para estudos de comparaccedilatildeo da eficaacutecia de

outros agentes antimicrobianos aplicados em Odontologia Pode ser apresentada na

forma de diversos sais como o gluconato digluconato acetato e hidrocloridrato

sendo que a digluconato eacute a forma mais indicada por ter maior solubilidade em aacutegua

e dissociar-se em pH fisioloacutegico liberando o componente catiocircnico Sua foacutermula

molecular eacute C22H30Cl2N10 2C6H12O7 com peso molecular de 89777 densidade =

106 g cm3 e ponto de ebuliccedilatildeo = 134ordmC (LASCALA 2002)

Em baixas concentraccedilotildees (menor que 01) moleacuteculas de baixo peso

molecular escoam especialmente potaacutessio e foacutesforo dando a clorexidina a

caracteriacutestica de ser bacteriostaacutetica e em altas concentraccedilotildees (acima de 01) a

clorexidina atua de forma bactericida devido a precipitaccedilatildeo ou coagulaccedilatildeo do

citoplasma das bacteacuterias causada pela ligaccedilatildeo cruzada com as proteiacutenas

(SASSONE et al 2008 MENEZES 2008) Devido a sua carga positiva eacute adsorvida

sobre a hidroxiapatita do esmalte dentaacuterio proteiacutenas salivares biofilme dentaacuterio e

macromoleacuteculas aacutecidas das superfiacutecies bucais Atraveacutes destes locais de retenccedilatildeo o

faacutermaco eacute gradualmente liberado por difusatildeo e a concentraccedilatildeo na boca eacute mantida

em um niacutevel suficiente para criar um meio bacteriostaacutetico ateacute 24 horas apoacutes a sua

utilizaccedilatildeo(ZANATTA 2007VON BLUCHER 2007 BONESVOLL et al 1974) A

moleacutecula catiocircnica (positiva) da clorexidina interage com a bacteacuteria provavelmente


em decorrecircncia da adsorccedilatildeo agrave parede celular aniocircnica (negativa) alterando as

estruturas da superfiacutecie e aumentando a permeabilidade da membrana bacteriana

facilitando a entrada da clorexidina no citoplasma O equiliacutebrio osmoacutetico eacute perdido e

em consequumlecircncia ocorre uma precipitaccedilatildeo dos constituintes citoplasmaacuteticos o que

impede a reparaccedilatildeo da membrana celular causando a morte da bacteacuteria

(MENEZES 2008VON BLUCHER 2007)

Pesquisas tecircm revelado que a clorexidina aleacutem de possuir uma accedilatildeo

imediata sobre os microrganismos bucais devido agraves suas propriedades catiocircnicas

une-se tambeacutem agrave hidroxiapatita do esmalte dos dentes e agrave mucina salivar formando

uma peliacutecula orgacircnica na superfiacutecie dos dentes e nas proteiacutenas salivares que

funciona como um reservatoacuterio (ZANATTA 2007)

Os mecanismos de adsorccedilatildeo e liberaccedilatildeo gradual foram testados in vitro e

in vivo com clorexidina marcada radioativamente sendo que moleacuteculas de

clorexidina aderidas agraves proteiacutenas salivares satildeo liberadas sob a forma ativa quando a

sua concentraccedilatildeo no meio diminui o que pode ocorrer de 8 a 12 horas apoacutes a

absorccedilatildeo inicial e apoacutes 24 horas concentraccedilotildees reduzidas podem ainda ser

detectadas prevenindo assim a colonizaccedilatildeo bacteriana e o efeito inibidor residual da

formaccedilatildeo do biofilme dentaacuterio (ZANATTA 2007VON BLUCHER 2007 LASCALA

2002 BONESVOLL et al 1974)

A quantidade de clorexidina retida na cavidade bucal aumenta quase que

proporcionalmente com a concentraccedilatildeo da foacutermula farmacecircutica A penetraccedilatildeo da

clorexidina atraveacutes da mucosa oral intacta eacute inexistente ou muito limitada Cerca de

30 da clorexidina utilizada para bochechos fica retida ou adsorvida na peliacutecula

adquirida nas proteiacutenas salivares e na mucosa oral Apoacutes o bochecho a quantidade

retida na boca eacute constantemente deslocada dos seus siacutetios de ligaccedilatildeo pelos iacuteons

Ca++ presentes na saliva (ZANATTA 2007)

A clorexidina tem se mostrado um efetivo agente antimicrobiano no

tratamento de gengivite dispersor da placa jaacute formada e na inibiccedilatildeo da

recolonizaccedilatildeo do biofilme dentaacuterio (ZANATTA 2007 CURY et al 1999) Esta accedilatildeo

pode ser atribuiacuteda a uma reduccedilatildeo do nuacutemero de bacteacuterias na saliva evitando o

desencadear do quadro inflamatoacuterio da gengivite O digluconato de clorexidina sob a

forma de bochechos (02) aplicaccedilatildeo toacutepica (2) ou em pastas dentifriacutecias (06 ou

08) em humanos ou animais reduz a formaccedilatildeo do biofilme dentaacuterio e

consequentemente a gengivite (LASCALA 2002)


O uso repetido da soluccedilatildeo de clorexidina faz com que o nuacutemero de

microrganismos aeroacutebicos e anaeroacutebicos na saliva seja reduzido em 80-90 A

FDA (Food and Drug Administration) e a ADA (American Dental Association)

autorizaram o uso da clorexidina como agente efetivo para controle de placa

baseado em suas propriedades anti-placa e para o combate agrave gengivite (ZANATTA

2007 ROSING et al 2005 CARRANZA 1997)

23 - Quitina e Quitosana

A quitina eacute um poliacutemero natural sendo o segundo polissacariacutedeo mais

abundante na natureza depois da celulose (LENARDON et al 2010

BURKATOVSKAYA et al 2008 BERGER et al 2004 PANCHENCE et al 2000

KUBOTA et al 2000) Eacute um mucopolissacariacutedeo que compotildee a estrutura do

exoesqueleto de crustaacuteceos insetos e algumas espeacutecies de fungos sendo

degradada pela enzima quitinase (KUMAR 2000 VIEIRA 2005 SPIN NETO 2008

MARTINEZ-CAMACHO 2010) A quitina in natura eacute encontrada como um material

esbranquiccedilado duro e anelaacutestico com baixiacutessima solubilidade e reatividade

quiacutemica sendo tambeacutem natildeo imunogecircnico Por ser altamente nitrogenada eacute utilizada

rotineiramente como material quelante em reaccedilotildees quiacutemicas (MUZZARELLI 1973)

Eacute um poliacutemero natildeo ramificado formado por unidades de N-acetil-Dglucosaminas

unidas por ligaccedilotildees -(14) formando cadeias de vaacuterias centenas de unidades

(Figura 231) (HOVEN et al 2007 CANELLA et al 2001) A sua estrutura quiacutemica

eacute semelhante agrave da celulose na qual os grupos hidroxila (celulose) da posiccedilatildeo C-2

satildeo substituiacutedos pelo grupo acetamida (KUMAR 2000)

Figura 231 - Estrutura quiacutemica da quitina


Partindo-se da mateacuteria-prima bruta apoacutes lavagem abundante banhos

aacutecidos retiram todo o conteuacutedo mineral das cascas e banhos baacutesicos promovem

sua desproteinizaccedilatildeo aliada a uma leve desacetilaccedilatildeo (SPIN NETO 2008) Este

processo chamado de N-desacetilaccedilatildeo consiste na remoccedilatildeo controlada dos grupos

acetil (C2H3O) em meio alcalino de modo a tornar o produto final soluacutevel em

soluccedilotildees de aacutecidos diluiacutedos Natildeo eacute um processo faacutecil devido agrave natureza cristalina da

quitina (CANELLA et al 2001 ARGUELLES et al 2001)Da desacetilaccedilatildeo da

quitina obteacutem-se a quitosana (Figura 232)

Figura 132 ndash Reaccedilatildeo da conversatildeo da quitina em quitosana

A quitosana eacute um biopoliacutemero com relevantes propriedades estruturais

como a biodisponibilidade biocompatibilidade aos tecidos e biodegradabilidade

Estas propriedades incluem a formaccedilatildeo de filmes quelaccedilatildeo de iacuteons metaacutelicos e

caracteriacutesticas estruturais oacutepticas (MARTINEZ-CAMACHO2010

BURKATOVSKAYA et al 2008 VIEIRA 2005 SENEL 2000 NEEDLMAN 1997)

Possui baixo custo e de grande importacircncia econocircmica e ambiental jaacute que as

carapaccedilas dos crustaacuteceos satildeo resiacuteduos abundantes e que satildeo rejeitados pela

induacutestria pesqueira reduzindo assim o impacto ambiental (AZEVEDO et al 2007

PILLAI 2009)

Quimicamente a quitosana tem alto peso molecular sendo uma

poliamina que apresenta propriedades que se relacionam com a presenccedila de grupos

aminos livres em sua estrutura (Figura 233) o que a torna apta agrave aplicaccedilatildeo em

diversas aacutereas (PILLAI 2009 BURKATOVSKAYA et al 2008 AZEVEDO et al

2007 VIEIRA 2005 SENEL 2000 NEEDLMAN 1997)


Figura 232 - Estrutura quiacutemica da quitosana

A dissoluccedilatildeo da quitosana daacute origem a fibras filmes lacircminas e geacuteis que

podem ser utilizados diretamente ou transformados em outros materiais na tentativa

de utilizaccedilatildeo como biomateriais(MARTINEZ-CAMACHO et al 2010)

Algumas das principais aacutereas de aplicaccedilatildeo da quitosana satildeo agricultura

(mecanismos defensivos e adubo para plantas) tratamento de aacutegua (floculante para

clarificaccedilatildeo remoccedilatildeo de iacuteons metaacutelicos poliacutemero ecoloacutegico e reduccedilatildeo de odores)

induacutestria alimentiacutecia (fibras dieteacuteticas redutor de colesterol conservante para

molhos fungicida e bactericida recobrimento de frutas) induacutestria de cosmeacuteticos

(esfoliante para a pele tratamento de acne hidratante capilar creme dental) e

biofarmacecircutica (imunoloacutegico antitumoral hemostaacutetico e anticoagulante) Poreacutem

sua aplicaccedilatildeo mais nobre eacute na aacuterea biomeacutedica (suturas ciruacutergicas implantes

dentaacuterios reconstituiccedilatildeo oacutessea lentes de contato liberaccedilatildeo controlada de drogas

em animais e humanos encapsulamento de materiais) (PILLAI 2009

BURKATOVSKAYA 2006 KHOR 2003)

Camacho-Martinez et al 2010 afirmam que a quitosana possui propriedades

antimicrobianas e fungistaacuteticas Trecircs mecanismos tecircm sido propostos para explicar

as propriedades antimicrobianas da quitosana No primeiro as cargas positivas

presentes na cadeia polimeacuterica de quitosana devido ao seu grupo amino interagem

com as cargas negativas obtidas a partir dos resiacuteduos de macromoleacuteculas

(lipopolissacariacutedeos e proteiacutenas) nas membranas das ceacutelulas microbianas

interferindo com a troca de nutrientes entre o exterior e o interior da ceacutelula Essas

cargas podem tambeacutem competir com o caacutelcio para os locais eletronegativos na

membrana comprometendo a sua integridade e causando a liberaccedilatildeo de material

intracelular resultando em morte celular O segundo mecanismo propotildee que a

quitosana atua como um agente quelante criando compostos a partir de metais


essenciais para ceacutelula o terceiro mecanismo estabelece que a quitosana de baixo

peso molecular eacute capaz de entrar nuacutecleo da ceacutelula interagindo com o DNA

interferindo na siacutentese de RNA mensageiro afetando a siacutentese de proteiacutenas e

inibindo a accedilatildeo de vaacuterias enzimas Esses mecanismos satildeo baseados em resultados

de investigaccedilotildees anteriores onde a quitosana foi adicionada ao meio de cultura em

estado liacutequido ou soacutelido No caso dos filmes de quitosana o mecanismo de inibiccedilatildeo

natildeo foi explicado mas existem fatores externos como condiccedilotildees anaeroacutebicas ou

asfixia que devem ser considerados Filmes de quitosana satildeo biodegradaacuteveis

biocompatiacuteveis flexiacuteveis duraacuteveis fortes duros e difiacuteceis de quebrar tem valores

moderados de aacutegua e permeabilidade ao oxigecircnio Apesar de natildeo ter realizado

testes em estreptococos ou candida este estudo de Martinez-Camacho et al 2010

mostrou que a atividade antifungica de filmes de quitosana foi positiva para diversos

tipos de fungos (MARTINEZ-CAMACHO et al 2010)

Burkatovskaya et al 2006 desenvolveu uma bandagem feita de acetato de

quitosana associada a um agente hemostaacutetico A hemostasia que antes era feita a

partir da compressatildeo do ferimento com ataduras de gaze hoje pode ser realizada a

partir da aplicaccedilatildeo desta bandagem que conteacutem elementos que favorecem esse

processo de reparo Os pesquisadores mostraram que em muitos casos ao fechar

um ferimento jaacute infectado com um curativo comum pode-se aumentar a proliferaccedilatildeo

bacteriana no local e tornar a ferida potencialmente contaminada para o individuo

Desta maneira a bandagem feita com quitosana que possui propriedades

naturalmente antimicrobianas agregou duas vantagens relevantes potencial

antimicrobiano e capacidade hemostaacutetica

Spin Neto et al (2008) ressaltaram que a proacutepria estrutura quiacutemica da

quitosana similar agrave estrutura do aacutecido hialurocircnico reforccedila a indicaccedilatildeo do uso deste

biopoliacutemero como agente cicatrizador e reparador pois a quitosana eacute capaz de

aumentar as funccedilotildees de ceacutelulas inflamatoacuterias como os leucoacutecitos polimorfonucleares

e macroacutefagos promovendo organizaccedilatildeo celular e atuando no reparo de feridas

amplas Berger (2004) avaliou os benefiacutecios da quitosana em forma de hidrogeacuteis e

suas aplicaccedilotildees biomeacutedicas e concluiu que haacute viabilidade da utilizaccedilatildeo deste veiacuteculo

para aproveitar as propriedades antimicrobianas e de cicatrizaccedilatildeo da quitosana

Senel et al (2000) desenvolveram formulaccedilotildees contendo quitosana como

agente carreador de clorexidina para a cavidade oral Geacuteis (na concentraccedilatildeo de 1 ou

2) e filmes de quitosana foram preparados contendo 01 ou 02 de clorexidina e


suas propriedades de liberaccedilatildeo in vitro foram avaliados A accedilatildeo antifungica da

quitosana em si bem como as vaacuterias formulaccedilotildees contendo clorexidina foram

examinadas A liberaccedilatildeo de clorexidina gel foi mantida por 3 horas e a liberaccedilatildeo

prolongada foi observada para os filmes Nenhum atraso foi observado em liberaccedilatildeo

de Clorexidina de ambos os geacuteis ou filmes e a maior atividade antifuacutengica foi

observada no gel de quitosana 2 adicionado Clorexidina 01 Senel et al (2000)

concluiram que a quitosana aleacutem de ter potencial antifungico eacute capaz de prolongar o

tempo e a quantidade de clorexidina na cavidade oral

Needlman (1997) investigou o possiacutevel papel da quitosana goma xantana e

poli oacutexido de etileno como auxiliares de administraccedilatildeo de medicamentos toacutepicos

aplicados sobre a mucosa oral jaacute que os trecircs possuem boas propriedades de

bioadesividade Foram realizados estudos in vitro que mostraram que a liberaccedilatildeo

do medicamento que continha quitosana foi significativamente maior do que para

outros geacuteis ou o grupo controle Em contraste a goma xantana deu tempo mais

prolongado de adesatildeo na mucosa oral (1535 min) seguido de (oacutexido de etileno)

(893 min) e quitosana (426 mim) e esses tempos foram significativamente

diferentes entre si (p lt005) Os resultados deste estudo sugerem que as

propriedades bioadesivas de um gel aquoso podem ser diretamente relacionadas agrave

sua manutenccedilatildeo na cavidade oral

Desta maneira haacute justificativas na literatura para o desenvolvimento de um

novo produto capaz de agregar os benefiacutecios da quitosana e clorexidina na reduccedilatildeo

de microrganismos do meio bucal


3 Proposiccedilatildeo

3 Proposiccedilatildeo 55

3 PROPOSICcedilAtildeO

O presente estudo teve como objetivo

31- Desenvolver uma bandagem bucal biodegradaacutevel incorporada a

um faacutermaco e avaliar sua accedilatildeo antimicrobiana nos seguintes microrganismos

bucais Streptococcus mutans e Candida albicans

32 - Comparar a efetividade da accedilatildeo antimicrobiana da bandagem com

um gel de clorexidina em diferentes concentraccedilotildees


4 Materiais e Meacutetodos

4 Materiais e Meacutetodos 59

4 MATERIAIS E MEacuteTODOS

41 Materiais

A quitosana empregada neste estudo eacute um produto comercial

(Sigma Aldrich St Louis USA) sendo segundo informaccedilatildeo do fabricante

procedente da purificaccedilatildeo de quitinas extraiacutedas de cascas de caranguejos O

material apresenta-se em aspecto de flocos com tom levemente amarelado e eacute

classificado como de meacutedia massa molar (Figura 411)

O faacutermaco empregado neste estudo foi a clorexidina (soluccedilatildeo a

20) - CEP- grade CAS nordm 1847251-0 da Empresa Evoluk Degussa Brasil Ltda

Todos os demais solventes empregados neste estudo foram de grau analiacutetico

As amostras das bandagens em diferentes concentraccedilotildees e os geacuteis

testados foram preparadas no Laboratoacuterio de Quiacutemica da Escola de Artes Ciecircncias

e Humanidades da Universidade de Satildeo Paulo As Bandagens foram embaladas

individualmente e esterilizadas em oacutexido de Etileno (ESTERICAP Brazil) (Figura

412)

Cinco bandagens de diferentes composiccedilotildees foram testadas sobre cada

microrganismo Bandagem com Quitosana 5 Bandagem com Quitosana 5 +

clorexidina a 02 Bandagem com Quitosana 5 + clorexidina a 06 Bandagem

com Quitosana 5 + clorexidina a 10 e Bandagem com Quitosana 5 +

clorexidina a 20

Para efeito comparativo tambeacutem foram testados 5 tipos de gel nas

seguintes composiccedilotildees Gel de Quitosana 5 Gel de clorexidina a 02 Gel de

clorexidina a 20 Gel de Quitosana 5 + clorexidina a 02 e Gel de Quitosana

5 + clorexidina a 20 (Figura 413)

Para os testes in vitro da accedilatildeo antimicrobiana das bandagens e dos geacuteis

foram utilizados os microrganismos Candida albicans e Streptococcus mutans de

estoque do laboratoacuterio de Microbiologia da FOB USP congelados a - 85degC em BHI

(Brain Heart Infusion) com 20 de glicerol


Figura 411 ndash Quitosana pura em flocos (Foto gentilmente cedida por Eduardo Cesar Revista Fapesp 2010)

Figura 412 ndash Bandagem de Quitosana contendo faacutermaco (embalada e esterilizada)


42 Desenvolvimento dos Geacuteis

421 Preparo do gel de quitosana

Os geacuteis foram preparados dissolvendo-se 5 g de quitosana em 100 ml de

uma soluccedilatildeo de aacutecido aceacutetico 2 (mv) obtendo-se assim a concentraccedilatildeo de 5 A

soluccedilatildeo foi mantida sob agitaccedilatildeo durante 24 h Posteriormente a soluccedilatildeo foi filtrada

em tela de nylon utilizando-se uma bomba de vaacutecuo O gel filtrado foi colocado em

um banho de ultra-som sendo mantida a temperatura de 30ordmC por 1 h Apoacutes esta

etapa o gel foi armazenado a 4ordmC para posterior utilizaccedilatildeo

422 Preparo do gel de quitosana com clorexidina

O gel de quitosana preparado no item 421 foi utilizado para incorporaccedilatildeo

do faacutermaco clorexidina nas concentraccedilotildees de 02 e 2 (mm) Para o preparo do

Figura 413 ndash Gel de Quitosana 5 Gel de clorexidina a 02 Gel de clorexidina a 20 Gel de Quitosana 5 + clorexidina a 02 e Gel de

Quitosana 5 + clorexidina a 20


gel de clorexidina a 02 (mm) foi pesada em uma balanccedila analiacutetica uma massa do

faacutermaco de 004g e a seguir foi feito a adiccedilatildeo do gel de quitosana ate que o peso

atingisse 20 g O gel a 2 (mm) foi preparado pesando-se uma massa do faacutermaco

de 04 g e a seguir foi feito a adiccedilatildeo do gel de quitosana ate que o peso atingisse 20

g Apoacutes a adiccedilatildeo do faacutermaco e do gel a mistura foi homogeneizada lacrada e

mantida a temperatura de 4ordmC

43 Desenvolvimento das Bandagens







g Apoacutes a adiccedilatildeo do faacutermaco e do gel a mistura foi homogeneizada e foi colocada

em um banho ultra-som durante 15 min Posteriormente 5 g do gel a 02 (mm) foi

adicionado sob uma placa de Petri que foi colocada em uma balanccedila analiacutetica

devidamente tarada Apoacutes a pesagem efetuou-se a homogeneizaccedilatildeo do gel sob a

placa para garantir a uniformidade das bandagens O mesmo procedimento foi

repetido para o gel na concentraccedilatildeo a 2 (mm) sendo preparado um total de 4

placas para cada concentraccedilatildeo As placas preparadas foram colocadas em uma

estufa a 45ordmC durante 24 horas para a secagem das bandagens Apoacutes 24 horas as

bandagens foram removidas das placas foram embaladas e esterilizadas com em

oacutexido de Etileno

44 Meacutetodo Aacutegar Difusatildeo e Teste Antimicrobiano para C albicans

O meio de cultura Sabouraud Aacutegar (Difcotrade) utilizado para os testes com

C albicans foi preparado seguindo as recomendaccedilotildees do fabricante em frascos tipo

ldquoalematildeordquo contendo 65g do meio para 100ml de aacutegua destilada que em seguida

foram autoclavados a 121degC por 15 minutos Foi distribuiacutedo 20ml do meio de cultura

ainda em estaacutegio liacutequido em placas de petri (90x15mm) esterilizadas (Figura 441)

Estas placas foram incluiacutedas em estufa a 37degC por 24 horas para verificaccedilatildeo do

teste de esterilidade


Figura 442 ndash Microrganismo inoculado em meio de cultura pronto para ser plaqueado

Os microrganismos utilizados (C albicans) foram repicados em meio Agar BHI

(Brain Heart Infusion Difcotrade) caldo 20 de glicerol e foram armazenados em

estufa a 37degC por 24 horas Foram entatildeo suspensos por espectrofotometria a 660nm

(OD 800) a morada de turbidez 15 x 108ufc ml-sup1 equivalente ao padratildeo 05 de

McFarland (figura 442)

Figura 441 ndash Placa de petri contendo meio de cultura Aacutegar Sabourad


Figura 444 ndash Bandagens dispostas sobre meio de cultura Aacutegar Sabourad

Swabs esteacutereis foram mergulhados na suspensatildeo de Calbicans e foi

realizado o plaqueamento das amostras sobre o meio de cultura Sabouraud Agar

(Figura 443) Sobre o meio plaqueado foram colocadas trecircs amostras de cada

bandagem recortadas em discos de 06mm (Figura 444) e trecircs amostras de cada

gel (discos de papel esteacuteril de 06mm embebidos em gel) a serem testadas (Figura

445) As placas de petri contendo C albicans foram incluiacutedas em estufa

bacterioloacutegica a temperatura de 37degC pelo periacuteodo de 48 horas a fim de se observar

o crescimento dos microrganismos (Figura 446)

Figura 443 ndash Plaqueamento de Calbicans sobre meio de cultura


Figura 445 ndash Discos contendo gel em diferentes composiccedilotildees dispostos sobre meio de cultura Aacutegar Sabourad

Figura 446 ndash Cultivo de Calbicans apoacutes 48 horas de incubaccedilatildeo evidenciando a formaccedilatildeo de halos de inibiccedilatildeo de crescimento


Figura 451 ndash Placas de petri contendo meio de cultura SB20

45 Meacutetodo Aacutegar Difusatildeo e Teste Antimicrobiano para Smutans

O meio de cultura Sacarose-Bacitracina 20 - SB20 (Difcotrade) utilizado

para os testes com Smutans foi preparado de acordo com a recomendaccedilatildeo do

fabricante onde foram utilizados 200g de sacarose e 20g do meio para 100ml de

aacutegua destilada e 10ml de bacitracina Este preparo foi autoclavado a 121degC por 15

minutos e em seguida foi distribuiacutedo 20 ml do meio de cultura ainda em estaacutegio

liacutequido em placas de petri (90x15mm) esterilizadas (Figura 451) Estas placas

foram incluiacutedas em estufa a 37degC por 24 horas para verificaccedilatildeo do teste de

esterilidade

Os microrganismos utilizados (S mutans) (Figura 452) foram repicados

em meio Agar BHI (Brain Heart Infusion Difcotrade) caldo 20 de glicerol e foram

armazenados em estufa a 37degC por 24 horas Foram entatildeo suspensos por

espectrofotometria a 660nm (OD 800) a morada de turbidez 15 x 108ufc ml-sup1

equivalente ao padratildeo 05 de McFarland


Figura 452 ndash Streptococcos mutans visto por microscopia

Swabs esteacutereis foram mergulhados na suspensatildeo de Smutans e foi

realizado o plaqueamento das amostras sobre o meio de cultura SB20 (Figura

453) Sobre o meio plaqueado foram colocadas trecircs amostras de cada bandagem

(Figuras 454 e 455) e trecircs amostras de cada gel a serem testadas (Figura 456)

As placas contendo Smutans foram incluiacutedas em microaerofilia (Figura 457) e

levadas a estufa bacterioloacutegica a 37degC tambeacutem pelo periacuteodo de 48 horas a fim de

promover o crescimento dos microrganismos e posteriormente observarmos os halos

de inibiccedilatildeo de crescimento bacteriano formados (Figura 458)


Figura 453 ndash Plaqueamento de Smutans sobre meio de cultura

Figura 454 ndash Bandagem sobre meio de cultura


Figura 455 ndash Bandagens sobre meio de cultura

Figura 456 ndash Discos contendo gel sobre meio de cultura SB 20


As amostras de bandagem possuiacuteam o formato circular com 6mm de

diacircmetro Os discos de papel esteacutereis os quais foram mergulhados no gel tambeacutem

mediam 6mm de diacircmetro

Zonas de inibiccedilatildeo de crescimento dos microrganismos ao redor das

amostras de bandagens e discos contendo os geacuteis foram medidas apoacutes o periacuteodo de

incubaccedilatildeo Para medir a zona de inibiccedilatildeo foi considerada a distacircncia em linha reta

entre uma margem a outra do halo (circunferecircncia) de inibiccedilatildeo passando pelo centro

do discobandagem A mediccedilatildeo repetida 3 vezes foi realizada com reacuteguas esteacutereis

divididas em miliacutemetros (001m) (Figura 459)

Figura 457 ndash Placas de petri em microaerofilia em estufa bacterioloacutegica a 37degC


Figura 458 ndash Halo de inibiccedilatildeo formado ao redor das amostras de bandagem sobre cultura de Smutans

Figura 459 ndash Mediccedilatildeo dos halos de inibiccedilatildeo


46 Anaacutelise Estatiacutestica

Os dados obtidos foram compilados no programa Excel (Windows 7reg) e

os procedimentos estatiacutesticos foram realizados no programa SigmaPlot 110 for

Windows

Os dados obtidos foram analisados por meio do teste de Anaacutelise de

Variacircncia (ANOVA) a um criteacuterio (grupo) Como os resultados apresentaram

diferenccedila estatisticamente significante entre os grupos aplicou-se o Teste de Tukey

para as comparaccedilotildees muacuteltiplas adotando-se sempre um niacutevel de significacircncia de

5 Contudo na comparaccedilatildeo entre os grupos de geacuteis para Smutans os dados natildeo

apresentaram distribuiccedilatildeo normal (Teste de Kolmogorov-Smirnov) sendo para estes

utilizado o teste natildeo parameacutetrico de Kruskal-Wallis seguido do teste de Tukey

(plt005)

5 Resultados

5 Resultados 75

5 RESULTADOS

Cinco amostras de bandagens ndash bandagem de quitosana a 5 +

clorexidina a 02 bandagem de quitosana a 5 + clorexidina a 06 bandagem

de quitosana a 5 + clorexidina a 10 bandagem de quitosana a 5 + clorexidina

a 20 e quitosana a 5 sem adiccedilatildeo de clorexidina ndash foram testadas a fim de

avaliar o seu potencial antimicrobiano frente ao microrganismo Calbicans O halo de

inibiccedilatildeo formado por cada bandagem foi medido em miliacutemetros e a meacutedia e o desvio

padratildeo de cada resultado apresentado na tabela 51


bandagem sobre C albicans (plt005) n=3

BANDAGEM Calbicans

Meacutedia Desvio Padratildeo

02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

QUITOSANA PURA

0000 d 0000

Letras diferentes indicam diferenccedila estatisticamente significantes entre os grupos

O teste comparativo das diferentes formulaccedilotildees de bandagem (ANOVA a um

criteacuterio seguido do teste de Tukey) mostrou que a bandagem de concentraccedilatildeo 20

de clorexidina teve maior diferenccedila de meacutedia quando comparada a bandagem de

quitosana pura O halo de inibiccedilatildeo formado pela bandagem de clorexidina a 02 foi

o menor seguido das bandagens de clorexidina a 06 e 10 que natildeo tiveram

diferenccedila estatisticamente significante entre si O melhor resultado foi o da

bandagem de clorexidina a 20 que formou o maior halo de inibiccedilatildeo sobre C

albicans (TABELA 51)

Para efeito comparativo foram analisados tambeacutem o efeito antimicrobiano

de cinco tipos de geacuteis sobre C albicans nas seguintes concentraccedilotildees gel de

clorexidina a 02 gel de clorexidina a 20 gel de clorexidina + quitosana a 02

gel de clorexidina + quitosana 20 e gel de quitosana pura O halo de inibiccedilatildeo

5 Resultados 76

formado por cada disco impregnado pelo gel foi medido em miliacutemetros e a meacutedia e o

desvio padratildeo apresentados na tabela 52

Tabela 52 - Meacutedia e desvio padratildeo do halo de inibiccedilatildeo das amostras de gel sobre C albicans (plt005) n=3

GEL Calbicans Meacutedia Desvio Padratildeo

CHX 02 14667a 0577 CHX 20 22667b 0577

CHX+QUIT 02 10000c 0000 CHX+QUIT 20 20333d 0577

QUITOSANA PURA

0000e 0000


O potencial antimicrobiano do gel de clorexidina a 20 foi maior

apresentando meacutedia do halo de inibiccedilatildeo de 226 mm seguido do gel de clorexidina +

quitosana a 20 que apresentou halo de 203 mm O teste comparativo das

diferentes formulaccedilotildees de gel (ANOVA a um criteacuterio seguido do teste de Tukey)

mostrou que o gel de clorexidina a 20 teve maior diferenccedila de meacutedia quando

comparada ao gel de quitosana pura como ilustrado na tabela 52

As meacutedias obtidas por cada formulaccedilatildeo de gel e bandagem testados

sobre Calbicans foram dispostas na figura 51 que mostra em ordem decrescente

qual formulaccedilatildeo foi mais eficiente ou seja formou o maior halo de inibiccedilatildeo sobre o

microrganismo

Para avaliar o potencial antimicrobiano frente ao microrganismo Smutans

cinco amostras de bandagens com diferentes concentraccedilotildees de faacutermaco (clorexidina

a 02 clorexidina a 06 clorexidina a 10 clorexidina a 20 e apenas com

quitosana pura) foram testadas O halo de inibiccedilatildeo formado por cada bandagem foi

medido em miliacutemetros e a meacutedia e o desvio padratildeo de cada resultado apresentado

na tabela 53

5 Resultados 77

Figura 51 ndash Valores de meacutedia (em miliacutemetros) do halo de inibiccedilatildeo formado por

bandagens e geacuteis sobre Calbicans em ordem decrescente de tamanho



BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

QUITOSANA PURA

0000d 0000


O teste comparativo das diferentes formulaccedilotildees de bandagem (ANOVA a

um criteacuterio seguido do teste de Tukey) sobre S mutans mostrou que a bandagem de

concentraccedilatildeo 20 de clorexidina teve maior diferenccedila de meacutedia quando comparada

a bandagem de quitosana pura O halo de inibiccedilatildeo formado pela bandagem de

clorexidina a 02 foi o menor (206mm) Entre os valores meacutedios dos halos

formados pelas bandagens de clorexidina a 06 e 10 natildeo houveram diferenccedilas

5 Resultados 78

estatisticamente significantes entre si bem como entre as bandagens de clorexidina

a 10 e a 20 A bandagem de clorexidina a 20 formou o maior halo de inibiccedilatildeo

sobre S mutans (TABELA 53)

Foram analisados tambeacutem o efeito antimicrobiano de cinco tipos de geacuteis

sobre S mutans nas seguintes concentraccedilotildees gel de clorexidina a 02 gel de

clorexidina a 20 gel de clorexidina + quitosana a 02 gel de clorexidina +

quitosana 20 e gel de quitosana pura O halo de inibiccedilatildeo formado por cada disco

impregnado pelo gel foi medido em miliacutemetros e a meacutedia e o desvio padratildeo

apresentados na tabela 54

54 ndash Meacutedia desvio padratildeo e mediana do halo de inibiccedilatildeo das amostras de gel

sobre Smutans (plt005) n=3

GEL Smutans

Meacutedia Desvio Padratildeo Mediana

CHX 02 2400a 0000 24000 CHX 20 29000ab 1000 29000

CHX+Q 02 22000a 0000 22000 CHX+Q 20 27000a 0000 27000 QUITOSANA

PURA 0000ac 0000 0000





diferentes formulaccedilotildees de gel (teste natildeo parameacutetrico de Kruskal-Wallis seguido do

teste de Tukey) mostrou que o gel de clorexidina a 20 teve maior diferenccedila de

meacutedia quando comparada ao gel de quitosana pura uacutenica comparaccedilatildeo que teve

diferenccedila estatisticamente significante Os demais valores natildeo obtiveram diferenccedilas

estatisticamente significante como ilustrado na tabela 54


sobre S mutans foram dispostos na figura 52 que mostra em ordem decrescente

qual formulaccedilatildeo foi mais eficiente ou seja formou o maior halo de inibiccedilatildeo sobre S

mutans (em miliacutemetros)

5 Resultados 79


bandagens e geacuteis sobre Smutans em ordem decrescente de tamanho

5 Resultados 80

6 Discussatildeo

6 Discussatildeo 83

6 Discussatildeo

Este estudo teve como finalidade o desenvolvimento de um dispositivo

inovador chamado de ldquobandagem bucalrdquo que pudesse ser utilizada em tecidos

uacutemidos no interior da cavidade oral ulcerados eou cortados em funccedilatildeo de um

procedimento ciruacutergico ou traumatismo A intenccedilatildeo eacute que permaneccedila em iacutentimo

contato com o tecido e libere um agente antimicrobiano eliminando a contaminaccedilatildeo

bacteriana do tecido e assim favoreccedila a cicatrizaccedilatildeo dessas feridas O processo de

elaboraccedilatildeo deste novo produto foi intenso e vaacuterios testes foram feitos ateacute que se

chegasse a um resultado que pudesse dar iniacutecio aos testes propostos

Uma consideraccedilatildeo a ser feita eacute que pelo fato da bandagem bucal ser

uma proposta nova houve dificuldade em detectar na literatura trabalhos correlatos

que permitam uma discussatildeo mais aprofundada do tema

Quando o paciente adulto ou infantil apresenta lesotildees na mucosa oral

(aftas ulceraccedilotildees rompimento da continuidade da mucosa) as opccedilotildees de

tratamento mesmo que paliativo satildeo limitadas A Odontologia tem hoje a disposiccedilatildeo

geacuteis e soluccedilotildees antisseacutepticas colutoacuterios e formulaccedilotildees em orabase que apresentam

eficiecircncia para o fim a que se destinam poreacutem dificultam a adesatildeo do paciente ao

tratamento (SENEL 2000 PETELIN et al 2004 TOLENTINO 2010) Volpato et al

(2007) em revisatildeo de literatura a respeito de opccedilotildees de tratamento para mucosite

bucal radio e quimio induzida em pacientes com cacircncer elucidaram que muitas satildeo

as intervenccedilotildees potencialmente possiacuteveis de serem empregadas nesses pacientes

poreacutem os benefiacutecios das teacutecnicas ainda satildeo desconhecidos e ainda natildeo haacute um

consenso com relaccedilatildeo a protocolos de controle e prevenccedilatildeo prejudicando a

qualidade de vida dos pacientes envolvidos (VOLPATO et al 2007) Para o

tratamento de estomatite aftosa recorrente tambeacutem natildeo haacute consenso quanto ao tipo

de tratamento mais indicado Estudos apontam que corticoacuteides toacutepicos e

enxaguatoacuterios satildeo alternativas para minimizar a dor e aumentar o tempo de

cicatrizaccedilatildeo da ferida poreacutem a eficaacutecia do tratamento consiste no maacuteximo tempo de

contato entre a ferida e o medicamento (QUIJANO et al 2008)

A bandagem bucal desenvolvida neste estudo tem como componente

estrutural principal a quitosana (originaacuterio do esqueleto de crustaacuteceos) um agente

biodisponiacutevel encontrado em abundacircncia na natureza A quitosana eacute tambeacutem

biodegradaacutevel e natildeo poluente do meio ambiente (BERGER et al 2004

6 Discussatildeo 84

PANCHENCE et al 2000 KUBOTA et al 2000) Outra caracteriacutestica que favorece

a escolha desta mateacuteria prima no desenvolvimento das bandagens eacute o baixo custo

jaacute que satildeo aproveitadas as carapaccedilas de crustaacuteceos rejeitados pela induacutestria

alimentiacutecia e pesqueira Sendo assim a bandagem bucal torna-se uma alternativa

viaacutevel do ponto de vista da sustentabilidade

A biocompatibilidade da quitosana eacute evidenciada em vaacuterios estudos

(BURKATROVSKAYA 2006 AZEVEDO et al 2007 PILLAI 2009) Pelas

caracteriacutesticas de conjugar a biodegradabilidade biocompatibilidade e bioatividade eacute

ampla a aplicabilidade da quitosana na formulaccedilatildeo de biomateriais Na aacuterea

odontoloacutegica a quitosana foi utilizada pela primeira vez em forma de geacuteis

antimicrobianos em mucosa e canais radiculares mas estudos vecircm demonstrando

que a quitosana pode ser utilizada como membrana periodontal agente cicatrizador

de defeitos oacutesseos e bolsas periodontais Outra aplicaccedilatildeo importante da quitosana eacute

como agente facilitador na entrega de drogas sistecircmicas ou locais os chamados

ldquodrug-delivery systemsrdquo Estes sistemas satildeo capazes de proporcionar a liberaccedilatildeo

lenta e controlada dos medicamentos mantendo uma oacutetima resposta da droga e

diminuindo seus efeitos colaterais Desta maneira a quitosana estaacute sendo testada e

utilizada como liberador de medicamentos na mucosa oral canais radiculares

dentina cariada e bolsas periodontais (SPIN-NETO et al 2008)

Diante das boas propriedades apresentadas pela quitosana e da

necessidade de se desenvolver um novo dispositivo ineacutedito capaz de promover o

reparo da mucosa oral e a descontaminaccedilatildeo da mesma este estudo se ateve ao

desenvolvimento de uma bandagem bucal com accedilatildeo antimicrobiana e a anaacutelise

deste dispositivo frente a Calbicans e Smutans

A quitosana aleacutem de ser o componente estrutural da bandagem bucal

desenvolvida possui tambeacutem accedilatildeo antimicrobiana comprovada por vaacuterios autores

Ballal et al (2009) e Oliveira (2004) evidenciaram em seus estudos que a quitosana

quando associada a clorexidina tem alto potencial antimicrobiano frente a Candida

albicans e Streptococcos mutans Aleacutem da accedilatildeo antimicrobiana possui tambeacutem accedilatildeo

hemostaacutetica e estimula a cicatrizaccedilatildeo Burkatovskaya (2006) apresenta em seu

estudo uma bandagem hemostaacutetica feita a base de acetato de quitosana que tem

por finalidade o controle do sangramento e a accedilatildeo antimicrobiana quando colocada

em contato com feridas ciruacutergicas Esta bandagem mostrou ser bactericida com

6 Discussatildeo 85

relaccedilatildeo ao alginato curativo e a prata sulfadiazina quando em contato com feridas

feitas em ratos contaminadas por estafilococos e pseudomonas

Optou-se pela clorexidina como agente antimicrobiano a ser associado

agrave quitosana na bandagem bucal por ser o antimicrobiano largamente utilizado pela

odontologia quando se deseja controlar Smutans e Calbicans (ZUCCO 2010

TOLENTINO 2010 MEIRA et al 2007 KARL 2007 ZANATTA 2007 CURY et al

1999) Clorexidina eacute eficaz como um enxaguatoacuterio bucal mas em comparaccedilatildeo agraves

soluccedilotildees as formulaccedilotildees em geacuteis podem prolongar significativamente o tempo de

permanecircncia na cavidade bucal e consequentemente melhorar o efeito terapecircutico

do antimicrobiano No estudo de Senel (2000) que avaliou geacuteis e filmes com accedilatildeo

antimicrobiana para tratamento de doenccedilas periodontais tanto o gel quanto o filme

de clorexidina foram preparados com quitosana como agente liberador do

antimicrobiano para a cavidade oral permanecendo na mucosa e liberando a droga

por um longo periacuteodo de tempo aumentando assim o efeito cliacutenico devido agrave

propriedade bioadesiva e alta viscosidade da quitosana

O presente estudo utilizou Aacutegar Sabourad e Sacarose- Bacitracina 20

como meio de cultura uma vez que estes meios satildeo facilmente disponiacuteveis e

comumente usados para cultura de C albicans e S mutans O teste de difusatildeo em

aacutegar foi empregado neste estudo para determinar a eficiencia antimicrobiana das

bandagens e geacuteis testados O teste de difusatildeo em aacutegar geralmente eacute um meacutetodo

aceito para testar a atividade antimicrobiana de medicamentos e soluccedilotildees

odontoloacutegicas Eacute um teste padronizado tornando-o reprodutiacutevel e simples para

executar e relativamente barato No entanto alguns fatores como o pH do substrato

periacuteodo de incubaccedilatildeo sensibilidade toxicidade e capacidade de difusatildeo da droga

pode ter um impacto sobre a atividade antimicrobiana dos meios de cultura nas

placas

Neste estudo foram testadas bandagens feitas a partir de quitosana (5g) e

que continham ou natildeo clorexidina em diferentes concentraccedilotildees (02 06 10 e

20) Para efeito comparativo tambeacutem foram desenvolvidos geacuteis de quitosana

(20g) clorexidina (02 e 20) e quitosana associada a clorexidina (02 e 20)

Para que houvesse uma padronizaccedilatildeo os testes foram realizados tendo por base o

meacutetodo de antibiograma (Kirby-Bauer) onde se tem a difusatildeo do medicamento

atraveacutes de discos de papel esteacutereis sobre meio de cultura rico em nutrientes onde os

microrganismos podem se multiplicar O agente antimicrobiano se difunde na aacuterea

6 Discussatildeo 86

ao redor de cada disco e um halo de lise bacteriana se torna visiacutevel Como a

concentraccedilatildeo do medicamento eacute maior no centro e menor nos limites do halo o

diacircmetro eacute sugestivo para a Concentraccedilatildeo Inibitoacuteria Miacutenima Dessa maneira as

bandagens tambeacutem foram esterilizadas e dimensionadas em circulos com o

diacircmetro semelhante aos discos de papel utilizados para que os halos formados

pudessem ser comparados

A bandagem feita apenas de quitosana natildeo permitiu a formaccedilatildeo de halo

de inibiccedilatildeo de crescimento em cultura de Calbicans natildeo tendo portanto a accedilatildeo

antimicrobiana da quitosana comprovada Como jaacute foi elucidado estudos afirmam

que a quitosana tem propriedade antimicrobiana e outros atestam esta propriedade

como eacute o caso do estudo de Burkatovskaya et al (2006) que mostrou a eficaacutecia de

acetato de quitosana frente aos microrganismos Stafilococcus aureus

Pseudomonas aeruginosa e Proteus mirabilis O estudo de Ballal et al (2009)

verificou a formaccedilatildeo de halo de inibiccedilatildeo do gel de quitosana frente a Calbicans e

Enterococcus faecalis mas considerou a formulaccedilatildeo feita apenas de quitosana a

menos eficiente quando comparada a quitosana combinada a outros agentes

antimicrobianos No presente estudo os resultados obtidos mostraram a ineficiecircncia

da bandagem de quitosana frente a Calbicans jaacute que natildeo houve a formaccedilatildeo de

halo de inibiccedilatildeo Alguns ajustes na composiccedilatildeo da bandagem bem como na

concentraccedilatildeo de quitosana empregada na foacutermula podem ser feitos e novos testes

poderatildeo ser realizados para que dados conclusivos sejam obtidos

Quando analisadas as amostras de bandagem compostas por quitosana e

clorexidina em diferentes concentraccedilotildees frente a C albicans observamos que todas

as bandagens que continham Clorexidina nas concentraccedilotildees 02 06 10 e

20 foram eficientes ou seja todas elas inibiram de certa forma o crescimento de

Calbicans Apenas entre as bandagens com concentraccedilotildees de 06 e 10 natildeo

houveram diferenccedilas estatisticamente significantes entre o tamanho do halo de

inibiccedilatildeo formado (130mm e 143 mm respectivamente) A bandagem na

concentraccedilatildeo de clorexidina a 20 formou o maior halo de inibiccedilatildeo (166mm)

podendo ser considerada a mais eficaz Poreacutem sabe-se que em concentraccedilotildees

acima de 01 a clorexidina jaacute possui potencial bactericida fato que natildeo inviabiliza o

uso da bandagem de menor concentraccedilatildeo jaacute que a reduccedilatildeo da dose do

antimicrobiano natildeo diminui a eficaacutecia da bandagem e favorece a diminuiccedilatildeo dos

efeitos colaterais que possam ocorrer (manchamento nos dentes alteraccedilatildeo do

6 Discussatildeo 87

paladar entre outros) O estudo de Senel et al(2000) que testou filmes e geacuteis de

quitosana contendo clorexidina mostrou que os filmes contendo baixas

concentraccedilotildees de clorexidina (01 e 02) foram eficazes frente a Calbicans

concordando com dados obtidos em nosso estudo

Como meacutetodo comparativo aos testes realizados com as bandagens

foram testados geacuteis de quitosana pura geacuteis de quitosana e clorexidina a 02 e a

20 e geacuteis de clorexidina a 02 e a 20 jaacute que estas uacuteltimas formulaccedilotildees jaacute satildeo

utilizadas pela Odontologia como medicamento toacutepico sobre a mucosa bucal com o

intuito de reduccedilatildeo de microrganismos No caso dos geacuteis que foram testados frente a

Calbicans o melhor resultado foi obtido com o gel de clorexidina a 20 (226mm)

seguido do gel de quitosana e clorexidina a 20 (203mm) Apesar de haver

diferenccedila estatisticamente significante entre a accedilatildeo destes geacuteis (com ou sem

quitosana) ambos foram eficazes e alguns pontos devem ser considerados Para

Senel et al (2000) a quitosana combinada a clorexidina na forma de geacuteis funciona

como um potencializador do agente antimicrobiano que aumenta o tempo de

liberaccedilatildeo da clorexidina para o meio bucal Needlman (1997) estudou as

propriedades de bioadesividade da quitosana e verificou que esta tem a capacidade

liberar maior quantidade de faacutermaco para o meio

No estudo de Ballal et al (2009) concluiacuteram que o gel de clorexidina

20 combinado a quitosana foi mais eficaz que o gel que continha apenas

clorexidina a 20 quando este foi testado sobre cultura de Calbicans e Efaecalis

estes dados satildeo inversos aos obtidos em nosso estudo poreacutem podem atestar que a

quitosana quando combinada a clorexidina natildeo anula a eficiecircncia antimicrobiana da

mesma e pode potencializar a foacutermula a partir de suas outras caracteriacutesticas (tempo

e quantidade de medicamento liberado para o meio) de acordo com a accedilatildeo

esperada

A accedilatildeo do gel de quitosana pura testado neste estudo tambeacutem foi nula

para Calbicans Ballal et al (2009) comprovaram a eficiecircncia do gel de quitosana

sobre Calbicans poreacutem seu resultado (halo de 166 mm) ficou muito aqueacutem do

resultado obtido pelo gel de quitosana combinado a clorexidina (halo de 252mm)

Quando testada sobre culturas de Smutans as amostras de bandagem

apresentaram comportamento semelhante quando testadas sobre a cultura de

Calbicans A bandagem que continha apenas quitosana natildeo inibiu o crescimento de

Smutans O estudo de Vieira (2005) testou a eficaacutecia de bochechos com soluccedilatildeo de

6 Discussatildeo 88

quitosana a 04 sobre a reduccedilatildeo de estreptococos totais Smutans e lactobacilos

da microbiota oral e concluiu que a soluccedilatildeo de quitosana tambeacutem natildeo foi eficaz para

a reduccedilatildeo de nenhum dos microrganismos pesquisados bem como do iacutendice de

placa visiacutevel nem do iacutendice de sangramento gengival

As bandagens de quitosana contendo clorexidina em diferentes

concentraccedilotildees se mostraram eficientes na reduccedilatildeo de Smutans O melhor resultado

foi obtido com a bandagem que continha clorexidina a 20 formando o maior halo

de inibiccedilatildeo (250mm) Este resultado natildeo demonstrou diferenccedila estatisticamente

significante com relaccedilatildeo agrave bandagem com clorexidina 10 (240mm) a bandagem

de 10 tambeacutem natildeo apresentou diferenccedila quando comparada a bandagem de

clorexidina 06 (halo de 226mm) poreacutem houve diferenccedila entre a bandagem de

20 e 06 Sendo assim o uso da concentraccedilatildeo de 10 seria indicado evitando

possiacuteveis efeitos colaterais que podem ser causados pela clorexidina

Os tipos de geacuteis testados sobre cultura de Smutans foram os mesmos

cinco testados sobre Calbicans O gel de quitosana pura natildeo formou halo de

inibiccedilatildeo demonstrando assim a sua ineficiecircncia frente a Smutans Quando

comparadas as cinco formulaccedilotildees de geacuteis entre si apenas o gel de quitosana teve

diferenccedila estatisticamente significante com o gel de clorexidina a 20 As demais

formulaccedilotildees natildeo apresentaram diferenccedilas estatisticamente significantes entre si Os

halos formados pelos geacuteis de clorexidina 20 gel quitosana com clorexidina a

20 gel de clorexidina a 02 e gel de quitosana com clorexidina 02 formaram

halos inibitoacuterios de 290mm 270mm 240mm e 220mm respectivamente o que

demonstra a eficaacutecia das formulaccedilotildees testadas

Sugerimos que novos estudos sejam realizados a fim de verificar a accedilatildeo

antimicrobiana da quitosana em diferentes concentraccedilotildees sobre microrganismos da

cavidade oral bem como avaliar a sua dinacircmica de accedilatildeo quando estiver combinada

a clorexidina (tempo de liberaccedilatildeo do faacutermaco quantidade de faacutermaco absorvido pela

mucosa tempo de dissoluccedilatildeo da bandagem entre outros)

Desenvolvida a bandagem bucal que foi proposta se faz necessaacuteria a

continuaccedilatildeo desta pesquisa e novos testes devem ser realizados ensaio da

citotoxicidade da bandagem absorccedilatildeo de aacutegua e perda de massa seu tempo de

degradaccedilatildeo e teste de liberaccedilatildeo controlada do faacutermaco

7 Conclusotildees

7 Conclusotildees 91

7 Conclusotildees

Diante dos objetivos propostos para este estudo e da metodologia

aplicada pode-se concluir que

A bandagem bucal proposta foi desenvolvida e eacute estruturalmente

composta por quitosana e incorporada de Clorexidina como agente antimicrobiano

A anaacutelise in vitro desta bandagem foi realizada e constatou-se que a

bandagem bucal foi eficaz na inibiccedilatildeo do crescimento dos microrganismos

Calbicans e Smutans

O gel de clorexidina na concentraccedilatildeo de 20 apresenta-se como a forma

mais eficaz para a reduccedilatildeo de Calbicans e Smutans quando comparado aos

demais geacuteis eou bandagens compostos por quitosana e clorexidina ou apenas

quitosana poreacutem eacute importante elucidar que as formulaccedilotildees contendo os dois

componentes natildeo estatildeo totalmente contra-indicadas


Referecircncias

Referencias 95

REFEREcircNCIAS

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K697d

Autorizo exclusivamente para fins acadecircmicos e cientiacuteficos a reproduccedilatildeo total ou parcial desta dissertaccedilatildeotese por processos fotocopiadores e outros meios eletrocircnicos Assinatura Data

Comitecirc de Eacutetica da FOB-USP Protocolo nordm Data



Dados Curriculares

Nascimento

Naturalidade

Filiaccedilatildeo

2002 ndash 2006

2007 ndash 2008

2007 ndash 2008

2009 ndash 2011



Ronaldo Kloster












DEDICATOacuteRIA




















vez







































por tudo







meu trabalho


















































Anne


esperanccedilardquo

Autor desconhecido




RESUMO































ABSTRACT





























- FIGURAS








a 20 61



plaqueado 63

















- GRAacuteFICOS




77




79

LISTA DE TABELAS



75

Tabela 52 -

Tabela 53 -





76

77

Tabela 54 -



78










min minutos

h hora

Ltda limitada






percentual

degC grau Celcius

C Carbono

H Hidrogecircnio

Cl Cloro

N Nitrogecircnio

O Oxigecircnio

g grama


Ca Caacutelcio

β beta


lt menor

ml mililitro

trade trademark

mm miliacutemetro

nm nanocircmetro

m metro


SUMAacuteRIO






22 CLOREXIDINA 45




41 MATERIAIS 59








5 RESULTADOS 73

6 DISCUSSAtildeO 81


REFEREcircNCIAS 93








































































































feridas em geral





















2003)








































2005)




















































22 - Clorexidina







































































































PILLAI 2009)









































































































41 Materiais













412)





clorexidina a 20


























































































esterilidade








































Windows








(plt005)

5 Resultados

5 Resultados 75

5 RESULTADOS










BANDAGEM Calbicans


02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

QUITOSANA PURA

0000 d 0000














5 Resultados 76





CHX 02 14667a 0577 CHX 20 22667b 0577


QUITOSANA PURA

0000e 0000











microrganismo






na tabela 53

5 Resultados 77





BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

QUITOSANA PURA

0000d 0000








5 Resultados 78












GEL Smutans


CHX 02 2400a 0000 24000 CHX 20 29000ab 1000 29000


PURA 0000ac 0000 0000














5 Resultados 79



5 Resultados 80

6 Discussatildeo

6 Discussatildeo 83

6 Discussatildeo

































6 Discussatildeo 84


































6 Discussatildeo 85


























placas









6 Discussatildeo 86



































6 Discussatildeo 87


























esperada









6 Discussatildeo 88

































7 Conclusotildees


7 Conclusotildees







Calbicans e Smutans







Referecircncias

Referencias 95

REFEREcircNCIAS



Koogan 2005 p 461-77



240




91



processos 2007 2(3) 27-34






35 29ndash33




Immunity 2010 78(5) 2209ndash2220








Referencias 96

































Referencias 97



2007 40 (3) 175-81




2007 14(6)348-351




512ndash519








42 19-21











315



Referencias 98



2007 17(1) 92-98




23-28



1994 Bull 17 745ndash747






394ndash400





(4)




Paulo2004



Press p 263-277






2004 270(1-2) 83-91

Referencias 99


123-145





1847-1851



307



2003 252(1) 41-51












Endod J 2008 34(1) 19-24






203




Referencias 100













38(5)383-386












(3)749-53




40(3)272-276



35-43

Referencias 101




Brasil) RSBO 2010 7(1)27-34



Dados Curriculares

Nascimento

Naturalidade

Filiaccedilatildeo

2002 ndash 2006

2007 ndash 2008

2007 ndash 2008

2009 ndash 2011



Ronaldo Kloster












DEDICATOacuteRIA




















vez







































por tudo







meu trabalho


















































Anne


esperanccedilardquo

Autor desconhecido




RESUMO































ABSTRACT





























- FIGURAS








a 20 61



plaqueado 63

















- GRAacuteFICOS




77




79

LISTA DE TABELAS



75

Tabela 52 -

Tabela 53 -





76

77

Tabela 54 -



78










min minutos

h hora

Ltda limitada






percentual

degC grau Celcius

C Carbono

H Hidrogecircnio

Cl Cloro

N Nitrogecircnio

O Oxigecircnio

g grama


Ca Caacutelcio

β beta


lt menor

ml mililitro

trade trademark

mm miliacutemetro

nm nanocircmetro

m metro


SUMAacuteRIO






22 CLOREXIDINA 45




41 MATERIAIS 59








5 RESULTADOS 73

6 DISCUSSAtildeO 81


REFEREcircNCIAS 93








































































































feridas em geral





















2003)








































2005)




















































22 - Clorexidina







































































































PILLAI 2009)









































































































41 Materiais













412)





clorexidina a 20


























































































esterilidade








































Windows








(plt005)

5 Resultados

5 Resultados 75

5 RESULTADOS










BANDAGEM Calbicans


02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

QUITOSANA PURA

0000 d 0000














5 Resultados 76





CHX 02 14667a 0577 CHX 20 22667b 0577


QUITOSANA PURA

0000e 0000











microrganismo






na tabela 53

5 Resultados 77





BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

QUITOSANA PURA

0000d 0000








5 Resultados 78












GEL Smutans


CHX 02 2400a 0000 24000 CHX 20 29000ab 1000 29000


PURA 0000ac 0000 0000














5 Resultados 79



5 Resultados 80

6 Discussatildeo

6 Discussatildeo 83

6 Discussatildeo

































6 Discussatildeo 84


































6 Discussatildeo 85


























placas









6 Discussatildeo 86



































6 Discussatildeo 87


























esperada









6 Discussatildeo 88

































7 Conclusotildees


7 Conclusotildees







Calbicans e Smutans







Referecircncias

Referencias 95

REFEREcircNCIAS



Koogan 2005 p 461-77



240




91



processos 2007 2(3) 27-34






35 29ndash33




Immunity 2010 78(5) 2209ndash2220








Referencias 96

































Referencias 97



2007 40 (3) 175-81




2007 14(6)348-351




512ndash519








42 19-21











315



Referencias 98



2007 17(1) 92-98




23-28



1994 Bull 17 745ndash747






394ndash400





(4)




Paulo2004



Press p 263-277






2004 270(1-2) 83-91

Referencias 99


123-145





1847-1851



307



2003 252(1) 41-51












Endod J 2008 34(1) 19-24






203




Referencias 100













38(5)383-386












(3)749-53




40(3)272-276



35-43

Referencias 101




Brasil) RSBO 2010 7(1)27-34

DEDICATOacuteRIA




















vez







































por tudo







meu trabalho


















































Anne


esperanccedilardquo

Autor desconhecido




RESUMO































ABSTRACT





























- FIGURAS








a 20 61



plaqueado 63

















- GRAacuteFICOS




77




79

LISTA DE TABELAS



75

Tabela 52 -

Tabela 53 -





76

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Tabela 54 -



78










min minutos

h hora

Ltda limitada






percentual

degC grau Celcius

C Carbono

H Hidrogecircnio

Cl Cloro

N Nitrogecircnio

O Oxigecircnio

g grama


Ca Caacutelcio

β beta


lt menor

ml mililitro

trade trademark

mm miliacutemetro

nm nanocircmetro

m metro


SUMAacuteRIO






22 CLOREXIDINA 45




41 MATERIAIS 59








5 RESULTADOS 73

6 DISCUSSAtildeO 81


REFEREcircNCIAS 93








































































































feridas em geral





















2003)








































2005)




















































22 - Clorexidina







































































































PILLAI 2009)









































































































41 Materiais













412)





clorexidina a 20


























































































esterilidade








































Windows








(plt005)

5 Resultados

5 Resultados 75

5 RESULTADOS










BANDAGEM Calbicans


02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

QUITOSANA PURA

0000 d 0000














5 Resultados 76





CHX 02 14667a 0577 CHX 20 22667b 0577


QUITOSANA PURA

0000e 0000











microrganismo






na tabela 53

5 Resultados 77





BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

QUITOSANA PURA

0000d 0000








5 Resultados 78












GEL Smutans


CHX 02 2400a 0000 24000 CHX 20 29000ab 1000 29000


PURA 0000ac 0000 0000














5 Resultados 79



5 Resultados 80

6 Discussatildeo

6 Discussatildeo 83

6 Discussatildeo

































6 Discussatildeo 84


































6 Discussatildeo 85


























placas









6 Discussatildeo 86



































6 Discussatildeo 87


























esperada









6 Discussatildeo 88

































7 Conclusotildees


7 Conclusotildees







Calbicans e Smutans







Referecircncias

Referencias 95

REFEREcircNCIAS



Koogan 2005 p 461-77



240




91



processos 2007 2(3) 27-34






35 29ndash33




Immunity 2010 78(5) 2209ndash2220








Referencias 96

































Referencias 97



2007 40 (3) 175-81




2007 14(6)348-351




512ndash519








42 19-21











315



Referencias 98



2007 17(1) 92-98




23-28



1994 Bull 17 745ndash747






394ndash400





(4)




Paulo2004



Press p 263-277






2004 270(1-2) 83-91

Referencias 99


123-145





1847-1851



307



2003 252(1) 41-51












Endod J 2008 34(1) 19-24






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Referencias 100













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(3)749-53




40(3)272-276



35-43

Referencias 101




Brasil) RSBO 2010 7(1)27-34
































por tudo







meu trabalho


















































Anne


esperanccedilardquo

Autor desconhecido




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- FIGURAS








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plaqueado 63

















- GRAacuteFICOS




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LISTA DE TABELAS



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Tabela 52 -

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76

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78










min minutos

h hora

Ltda limitada






percentual

degC grau Celcius

C Carbono

H Hidrogecircnio

Cl Cloro

N Nitrogecircnio

O Oxigecircnio

g grama


Ca Caacutelcio

β beta


lt menor

ml mililitro

trade trademark

mm miliacutemetro

nm nanocircmetro

m metro


SUMAacuteRIO






22 CLOREXIDINA 45




41 MATERIAIS 59








5 RESULTADOS 73

6 DISCUSSAtildeO 81


REFEREcircNCIAS 93








































































































feridas em geral





















2003)








































2005)




















































22 - Clorexidina







































































































PILLAI 2009)









































































































41 Materiais













412)





clorexidina a 20


























































































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Windows








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5 Resultados

5 Resultados 75

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BANDAGEM Calbicans


02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

QUITOSANA PURA

0000 d 0000














5 Resultados 76





CHX 02 14667a 0577 CHX 20 22667b 0577


QUITOSANA PURA

0000e 0000











microrganismo






na tabela 53

5 Resultados 77





BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

QUITOSANA PURA

0000d 0000








5 Resultados 78












GEL Smutans


CHX 02 2400a 0000 24000 CHX 20 29000ab 1000 29000


PURA 0000ac 0000 0000














5 Resultados 79



5 Resultados 80

6 Discussatildeo

6 Discussatildeo 83

6 Discussatildeo

































6 Discussatildeo 84


































6 Discussatildeo 85


























placas









6 Discussatildeo 86



































6 Discussatildeo 87


























esperada









6 Discussatildeo 88

































7 Conclusotildees


7 Conclusotildees







Calbicans e Smutans







Referecircncias

Referencias 95

REFEREcircNCIAS



Koogan 2005 p 461-77



240




91



processos 2007 2(3) 27-34






35 29ndash33




Immunity 2010 78(5) 2209ndash2220








Referencias 96

































Referencias 97



2007 40 (3) 175-81




2007 14(6)348-351




512ndash519








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Referencias 98



2007 17(1) 92-98




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1994 Bull 17 745ndash747






394ndash400





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Paulo2004



Press p 263-277






2004 270(1-2) 83-91

Referencias 99


123-145





1847-1851



307



2003 252(1) 41-51












Endod J 2008 34(1) 19-24






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Referencias 100













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(3)749-53




40(3)272-276



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Referencias 101




Brasil) RSBO 2010 7(1)27-34







meu trabalho


















































Anne


esperanccedilardquo

Autor desconhecido




RESUMO































ABSTRACT





























- FIGURAS








a 20 61



plaqueado 63

















- GRAacuteFICOS




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LISTA DE TABELAS



75

Tabela 52 -

Tabela 53 -





76

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Tabela 54 -



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min minutos

h hora

Ltda limitada






percentual

degC grau Celcius

C Carbono

H Hidrogecircnio

Cl Cloro

N Nitrogecircnio

O Oxigecircnio

g grama


Ca Caacutelcio

β beta


lt menor

ml mililitro

trade trademark

mm miliacutemetro

nm nanocircmetro

m metro


SUMAacuteRIO






22 CLOREXIDINA 45




41 MATERIAIS 59








5 RESULTADOS 73

6 DISCUSSAtildeO 81


REFEREcircNCIAS 93








































































































feridas em geral





















2003)








































2005)




















































22 - Clorexidina







































































































PILLAI 2009)









































































































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clorexidina a 20


























































































esterilidade








































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5 Resultados

5 Resultados 75

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BANDAGEM Calbicans


02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

QUITOSANA PURA

0000 d 0000














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CHX 02 14667a 0577 CHX 20 22667b 0577


QUITOSANA PURA

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microrganismo






na tabela 53

5 Resultados 77





BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

QUITOSANA PURA

0000d 0000








5 Resultados 78












GEL Smutans


CHX 02 2400a 0000 24000 CHX 20 29000ab 1000 29000


PURA 0000ac 0000 0000














5 Resultados 79



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6 Discussatildeo

6 Discussatildeo 83

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6 Discussatildeo 86



































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7 Conclusotildees


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Calbicans e Smutans







Referecircncias

Referencias 95

REFEREcircNCIAS



Koogan 2005 p 461-77



240




91



processos 2007 2(3) 27-34






35 29ndash33




Immunity 2010 78(5) 2209ndash2220








Referencias 96

































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2007 40 (3) 175-81




2007 14(6)348-351




512ndash519








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Referencias 98



2007 17(1) 92-98




23-28



1994 Bull 17 745ndash747






394ndash400





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Paulo2004



Press p 263-277






2004 270(1-2) 83-91

Referencias 99


123-145





1847-1851



307



2003 252(1) 41-51












Endod J 2008 34(1) 19-24






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Referencias 100













38(5)383-386












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40(3)272-276



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Brasil) RSBO 2010 7(1)27-34



























Anne


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Autor desconhecido




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LISTA DE TABELAS



75

Tabela 52 -

Tabela 53 -





76

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Tabela 54 -



78










min minutos

h hora

Ltda limitada






percentual

degC grau Celcius

C Carbono

H Hidrogecircnio

Cl Cloro

N Nitrogecircnio

O Oxigecircnio

g grama


Ca Caacutelcio

β beta


lt menor

ml mililitro

trade trademark

mm miliacutemetro

nm nanocircmetro

m metro


SUMAacuteRIO






22 CLOREXIDINA 45




41 MATERIAIS 59








5 RESULTADOS 73

6 DISCUSSAtildeO 81


REFEREcircNCIAS 93








































































































feridas em geral





















2003)








































2005)




















































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clorexidina a 20


























































































esterilidade








































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5 Resultados

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BANDAGEM Calbicans


02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

QUITOSANA PURA

0000 d 0000














5 Resultados 76





CHX 02 14667a 0577 CHX 20 22667b 0577


QUITOSANA PURA

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microrganismo






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5 Resultados 77





BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

QUITOSANA PURA

0000d 0000








5 Resultados 78












GEL Smutans


CHX 02 2400a 0000 24000 CHX 20 29000ab 1000 29000


PURA 0000ac 0000 0000














5 Resultados 79



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6 Discussatildeo

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Calbicans e Smutans







Referecircncias

Referencias 95

REFEREcircNCIAS



Koogan 2005 p 461-77



240




91



processos 2007 2(3) 27-34






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Immunity 2010 78(5) 2209ndash2220








Referencias 96

































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2007 40 (3) 175-81




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Referencias 98



2007 17(1) 92-98




23-28



1994 Bull 17 745ndash747






394ndash400





(4)




Paulo2004



Press p 263-277






2004 270(1-2) 83-91

Referencias 99


123-145





1847-1851



307



2003 252(1) 41-51












Endod J 2008 34(1) 19-24






203




Referencias 100













38(5)383-386












(3)749-53




40(3)272-276



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Brasil) RSBO 2010 7(1)27-34


esperanccedilardquo

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a 20 61



plaqueado 63

















- GRAacuteFICOS




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LISTA DE TABELAS



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Tabela 52 -

Tabela 53 -





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Tabela 54 -



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min minutos

h hora

Ltda limitada






percentual

degC grau Celcius

C Carbono

H Hidrogecircnio

Cl Cloro

N Nitrogecircnio

O Oxigecircnio

g grama


Ca Caacutelcio

β beta


lt menor

ml mililitro

trade trademark

mm miliacutemetro

nm nanocircmetro

m metro


SUMAacuteRIO






22 CLOREXIDINA 45




41 MATERIAIS 59








5 RESULTADOS 73

6 DISCUSSAtildeO 81


REFEREcircNCIAS 93








































































































feridas em geral





















2003)








































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22 - Clorexidina







































































































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41 Materiais













412)





clorexidina a 20


























































































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5 Resultados

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5 RESULTADOS










BANDAGEM Calbicans


02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

QUITOSANA PURA

0000 d 0000














5 Resultados 76





CHX 02 14667a 0577 CHX 20 22667b 0577


QUITOSANA PURA

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5 Resultados 77





BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

QUITOSANA PURA

0000d 0000








5 Resultados 78












GEL Smutans


CHX 02 2400a 0000 24000 CHX 20 29000ab 1000 29000


PURA 0000ac 0000 0000














5 Resultados 79



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6 Discussatildeo

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7 Conclusotildees


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Calbicans e Smutans







Referecircncias

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REFEREcircNCIAS



Koogan 2005 p 461-77



240




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processos 2007 2(3) 27-34






35 29ndash33




Immunity 2010 78(5) 2209ndash2220








Referencias 96

































Referencias 97



2007 40 (3) 175-81




2007 14(6)348-351




512ndash519








42 19-21











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Referencias 98



2007 17(1) 92-98




23-28



1994 Bull 17 745ndash747






394ndash400





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Paulo2004



Press p 263-277






2004 270(1-2) 83-91

Referencias 99


123-145





1847-1851



307



2003 252(1) 41-51












Endod J 2008 34(1) 19-24






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Referencias 100













38(5)383-386












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Brasil) RSBO 2010 7(1)27-34

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Tabela 52 -

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Tabela 54 -



78










min minutos

h hora

Ltda limitada






percentual

degC grau Celcius

C Carbono

H Hidrogecircnio

Cl Cloro

N Nitrogecircnio

O Oxigecircnio

g grama


Ca Caacutelcio

β beta


lt menor

ml mililitro

trade trademark

mm miliacutemetro

nm nanocircmetro

m metro


SUMAacuteRIO






22 CLOREXIDINA 45




41 MATERIAIS 59








5 RESULTADOS 73

6 DISCUSSAtildeO 81


REFEREcircNCIAS 93








































































































feridas em geral





















2003)








































2005)




















































22 - Clorexidina







































































































PILLAI 2009)









































































































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clorexidina a 20


























































































esterilidade








































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BANDAGEM Calbicans


02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

QUITOSANA PURA

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CHX 02 14667a 0577 CHX 20 22667b 0577


QUITOSANA PURA

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5 Resultados 77





BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

QUITOSANA PURA

0000d 0000








5 Resultados 78












GEL Smutans


CHX 02 2400a 0000 24000 CHX 20 29000ab 1000 29000


PURA 0000ac 0000 0000














5 Resultados 79



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6 Discussatildeo

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esperada









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Calbicans e Smutans







Referecircncias

Referencias 95

REFEREcircNCIAS



Koogan 2005 p 461-77



240




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processos 2007 2(3) 27-34






35 29ndash33




Immunity 2010 78(5) 2209ndash2220








Referencias 96

































Referencias 97



2007 40 (3) 175-81




2007 14(6)348-351




512ndash519








42 19-21











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Referencias 98



2007 17(1) 92-98




23-28



1994 Bull 17 745ndash747






394ndash400





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Paulo2004



Press p 263-277






2004 270(1-2) 83-91

Referencias 99


123-145





1847-1851



307



2003 252(1) 41-51












Endod J 2008 34(1) 19-24






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Referencias 100













38(5)383-386












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Brasil) RSBO 2010 7(1)27-34

ABSTRACT





























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Tabela 52 -

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76

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min minutos

h hora

Ltda limitada






percentual

degC grau Celcius

C Carbono

H Hidrogecircnio

Cl Cloro

N Nitrogecircnio

O Oxigecircnio

g grama


Ca Caacutelcio

β beta


lt menor

ml mililitro

trade trademark

mm miliacutemetro

nm nanocircmetro

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SUMAacuteRIO






22 CLOREXIDINA 45




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5 RESULTADOS 73

6 DISCUSSAtildeO 81


REFEREcircNCIAS 93








































































































feridas em geral





















2003)








































2005)




















































22 - Clorexidina







































































































PILLAI 2009)









































































































41 Materiais













412)





clorexidina a 20


























































































esterilidade








































Windows








(plt005)

5 Resultados

5 Resultados 75

5 RESULTADOS










BANDAGEM Calbicans


02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

QUITOSANA PURA

0000 d 0000














5 Resultados 76





CHX 02 14667a 0577 CHX 20 22667b 0577


QUITOSANA PURA

0000e 0000











microrganismo






na tabela 53

5 Resultados 77





BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

QUITOSANA PURA

0000d 0000








5 Resultados 78












GEL Smutans


CHX 02 2400a 0000 24000 CHX 20 29000ab 1000 29000


PURA 0000ac 0000 0000














5 Resultados 79



5 Resultados 80

6 Discussatildeo

6 Discussatildeo 83

6 Discussatildeo

































6 Discussatildeo 84


































6 Discussatildeo 85


























placas









6 Discussatildeo 86



































6 Discussatildeo 87


























esperada









6 Discussatildeo 88

































7 Conclusotildees


7 Conclusotildees







Calbicans e Smutans







Referecircncias

Referencias 95

REFEREcircNCIAS



Koogan 2005 p 461-77



240




91



processos 2007 2(3) 27-34






35 29ndash33




Immunity 2010 78(5) 2209ndash2220








Referencias 96

































Referencias 97



2007 40 (3) 175-81




2007 14(6)348-351




512ndash519








42 19-21











315



Referencias 98



2007 17(1) 92-98




23-28



1994 Bull 17 745ndash747






394ndash400





(4)




Paulo2004



Press p 263-277






2004 270(1-2) 83-91

Referencias 99


123-145





1847-1851



307



2003 252(1) 41-51












Endod J 2008 34(1) 19-24






203




Referencias 100













38(5)383-386












(3)749-53




40(3)272-276



35-43

Referencias 101




Brasil) RSBO 2010 7(1)27-34


- FIGURAS








a 20 61



plaqueado 63

















- GRAacuteFICOS




77




79

LISTA DE TABELAS



75

Tabela 52 -

Tabela 53 -





76

77

Tabela 54 -



78










min minutos

h hora

Ltda limitada






percentual

degC grau Celcius

C Carbono

H Hidrogecircnio

Cl Cloro

N Nitrogecircnio

O Oxigecircnio

g grama


Ca Caacutelcio

β beta


lt menor

ml mililitro

trade trademark

mm miliacutemetro

nm nanocircmetro

m metro


SUMAacuteRIO






22 CLOREXIDINA 45




41 MATERIAIS 59








5 RESULTADOS 73

6 DISCUSSAtildeO 81


REFEREcircNCIAS 93








































































































feridas em geral





















2003)








































2005)




















































22 - Clorexidina







































































































PILLAI 2009)









































































































41 Materiais













412)





clorexidina a 20


























































































esterilidade








































Windows








(plt005)

5 Resultados

5 Resultados 75

5 RESULTADOS










BANDAGEM Calbicans


02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

QUITOSANA PURA

0000 d 0000














5 Resultados 76





CHX 02 14667a 0577 CHX 20 22667b 0577


QUITOSANA PURA

0000e 0000











microrganismo






na tabela 53

5 Resultados 77





BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

QUITOSANA PURA

0000d 0000








5 Resultados 78












GEL Smutans


CHX 02 2400a 0000 24000 CHX 20 29000ab 1000 29000


PURA 0000ac 0000 0000














5 Resultados 79



5 Resultados 80

6 Discussatildeo

6 Discussatildeo 83

6 Discussatildeo

































6 Discussatildeo 84


































6 Discussatildeo 85


























placas









6 Discussatildeo 86



































6 Discussatildeo 87


























esperada









6 Discussatildeo 88

































7 Conclusotildees


7 Conclusotildees







Calbicans e Smutans







Referecircncias

Referencias 95

REFEREcircNCIAS



Koogan 2005 p 461-77



240




91



processos 2007 2(3) 27-34






35 29ndash33




Immunity 2010 78(5) 2209ndash2220








Referencias 96

































Referencias 97



2007 40 (3) 175-81




2007 14(6)348-351




512ndash519








42 19-21











315



Referencias 98



2007 17(1) 92-98




23-28



1994 Bull 17 745ndash747






394ndash400





(4)




Paulo2004



Press p 263-277






2004 270(1-2) 83-91

Referencias 99


123-145





1847-1851



307



2003 252(1) 41-51












Endod J 2008 34(1) 19-24






203




Referencias 100













38(5)383-386












(3)749-53




40(3)272-276



35-43

Referencias 101




Brasil) RSBO 2010 7(1)27-34










- GRAacuteFICOS




77




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LISTA DE TABELAS



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Tabela 52 -

Tabela 53 -





76

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78










min minutos

h hora

Ltda limitada






percentual

degC grau Celcius

C Carbono

H Hidrogecircnio

Cl Cloro

N Nitrogecircnio

O Oxigecircnio

g grama


Ca Caacutelcio

β beta


lt menor

ml mililitro

trade trademark

mm miliacutemetro

nm nanocircmetro

m metro


SUMAacuteRIO






22 CLOREXIDINA 45




41 MATERIAIS 59








5 RESULTADOS 73

6 DISCUSSAtildeO 81


REFEREcircNCIAS 93








































































































feridas em geral





















2003)








































2005)




















































22 - Clorexidina







































































































PILLAI 2009)









































































































41 Materiais













412)





clorexidina a 20


























































































esterilidade








































Windows








(plt005)

5 Resultados

5 Resultados 75

5 RESULTADOS










BANDAGEM Calbicans


02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

QUITOSANA PURA

0000 d 0000














5 Resultados 76





CHX 02 14667a 0577 CHX 20 22667b 0577


QUITOSANA PURA

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microrganismo






na tabela 53

5 Resultados 77





BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

QUITOSANA PURA

0000d 0000








5 Resultados 78












GEL Smutans


CHX 02 2400a 0000 24000 CHX 20 29000ab 1000 29000


PURA 0000ac 0000 0000














5 Resultados 79



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6 Discussatildeo

6 Discussatildeo 83

6 Discussatildeo

































6 Discussatildeo 84


































6 Discussatildeo 85


























placas









6 Discussatildeo 86



































6 Discussatildeo 87


























esperada









6 Discussatildeo 88

































7 Conclusotildees


7 Conclusotildees







Calbicans e Smutans







Referecircncias

Referencias 95

REFEREcircNCIAS



Koogan 2005 p 461-77



240




91



processos 2007 2(3) 27-34






35 29ndash33




Immunity 2010 78(5) 2209ndash2220








Referencias 96

































Referencias 97



2007 40 (3) 175-81




2007 14(6)348-351




512ndash519








42 19-21











315



Referencias 98



2007 17(1) 92-98




23-28



1994 Bull 17 745ndash747






394ndash400





(4)




Paulo2004



Press p 263-277






2004 270(1-2) 83-91

Referencias 99


123-145





1847-1851



307



2003 252(1) 41-51












Endod J 2008 34(1) 19-24






203




Referencias 100













38(5)383-386












(3)749-53




40(3)272-276



35-43

Referencias 101




Brasil) RSBO 2010 7(1)27-34

LISTA DE TABELAS



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Tabela 52 -

Tabela 53 -





76

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Tabela 54 -



78










min minutos

h hora

Ltda limitada






percentual

degC grau Celcius

C Carbono

H Hidrogecircnio

Cl Cloro

N Nitrogecircnio

O Oxigecircnio

g grama


Ca Caacutelcio

β beta


lt menor

ml mililitro

trade trademark

mm miliacutemetro

nm nanocircmetro

m metro


SUMAacuteRIO






22 CLOREXIDINA 45




41 MATERIAIS 59








5 RESULTADOS 73

6 DISCUSSAtildeO 81


REFEREcircNCIAS 93








































































































feridas em geral





















2003)








































2005)




















































22 - Clorexidina







































































































PILLAI 2009)









































































































41 Materiais













412)





clorexidina a 20


























































































esterilidade








































Windows








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5 Resultados

5 Resultados 75

5 RESULTADOS










BANDAGEM Calbicans


02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

QUITOSANA PURA

0000 d 0000














5 Resultados 76





CHX 02 14667a 0577 CHX 20 22667b 0577


QUITOSANA PURA

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microrganismo






na tabela 53

5 Resultados 77





BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

QUITOSANA PURA

0000d 0000








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GEL Smutans


CHX 02 2400a 0000 24000 CHX 20 29000ab 1000 29000


PURA 0000ac 0000 0000














5 Resultados 79



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6 Discussatildeo

6 Discussatildeo 83

6 Discussatildeo

































6 Discussatildeo 84


































6 Discussatildeo 85


























placas









6 Discussatildeo 86



































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esperada









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7 Conclusotildees


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Calbicans e Smutans







Referecircncias

Referencias 95

REFEREcircNCIAS



Koogan 2005 p 461-77



240




91



processos 2007 2(3) 27-34






35 29ndash33




Immunity 2010 78(5) 2209ndash2220








Referencias 96

































Referencias 97



2007 40 (3) 175-81




2007 14(6)348-351




512ndash519








42 19-21











315



Referencias 98



2007 17(1) 92-98




23-28



1994 Bull 17 745ndash747






394ndash400





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Paulo2004



Press p 263-277






2004 270(1-2) 83-91

Referencias 99


123-145





1847-1851



307



2003 252(1) 41-51












Endod J 2008 34(1) 19-24






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Referencias 100













38(5)383-386












(3)749-53




40(3)272-276



35-43

Referencias 101




Brasil) RSBO 2010 7(1)27-34










min minutos

h hora

Ltda limitada






percentual

degC grau Celcius

C Carbono

H Hidrogecircnio

Cl Cloro

N Nitrogecircnio

O Oxigecircnio

g grama


Ca Caacutelcio

β beta


lt menor

ml mililitro

trade trademark

mm miliacutemetro

nm nanocircmetro

m metro


SUMAacuteRIO






22 CLOREXIDINA 45




41 MATERIAIS 59








5 RESULTADOS 73

6 DISCUSSAtildeO 81


REFEREcircNCIAS 93








































































































feridas em geral





















2003)








































2005)




















































22 - Clorexidina







































































































PILLAI 2009)









































































































41 Materiais













412)





clorexidina a 20


























































































esterilidade








































Windows








(plt005)

5 Resultados

5 Resultados 75

5 RESULTADOS










BANDAGEM Calbicans


02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

QUITOSANA PURA

0000 d 0000














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CHX 02 14667a 0577 CHX 20 22667b 0577


QUITOSANA PURA

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na tabela 53

5 Resultados 77





BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

QUITOSANA PURA

0000d 0000








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GEL Smutans


CHX 02 2400a 0000 24000 CHX 20 29000ab 1000 29000


PURA 0000ac 0000 0000














5 Resultados 79



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6 Discussatildeo

6 Discussatildeo 83

6 Discussatildeo

































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6 Discussatildeo 85


























placas









6 Discussatildeo 86



































6 Discussatildeo 87


























esperada









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7 Conclusotildees


7 Conclusotildees







Calbicans e Smutans







Referecircncias

Referencias 95

REFEREcircNCIAS



Koogan 2005 p 461-77



240




91



processos 2007 2(3) 27-34






35 29ndash33




Immunity 2010 78(5) 2209ndash2220








Referencias 96

































Referencias 97



2007 40 (3) 175-81




2007 14(6)348-351




512ndash519








42 19-21











315



Referencias 98



2007 17(1) 92-98




23-28



1994 Bull 17 745ndash747






394ndash400





(4)




Paulo2004



Press p 263-277






2004 270(1-2) 83-91

Referencias 99


123-145





1847-1851



307



2003 252(1) 41-51












Endod J 2008 34(1) 19-24






203




Referencias 100













38(5)383-386












(3)749-53




40(3)272-276



35-43

Referencias 101




Brasil) RSBO 2010 7(1)27-34


percentual

degC grau Celcius

C Carbono

H Hidrogecircnio

Cl Cloro

N Nitrogecircnio

O Oxigecircnio

g grama


Ca Caacutelcio

β beta


lt menor

ml mililitro

trade trademark

mm miliacutemetro

nm nanocircmetro

m metro


SUMAacuteRIO






22 CLOREXIDINA 45




41 MATERIAIS 59








5 RESULTADOS 73

6 DISCUSSAtildeO 81


REFEREcircNCIAS 93








































































































feridas em geral





















2003)








































2005)




















































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PILLAI 2009)









































































































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clorexidina a 20


























































































esterilidade








































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5 Resultados

5 Resultados 75

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BANDAGEM Calbicans


02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

QUITOSANA PURA

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CHX 02 14667a 0577 CHX 20 22667b 0577


QUITOSANA PURA

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5 Resultados 77





BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

QUITOSANA PURA

0000d 0000








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GEL Smutans


CHX 02 2400a 0000 24000 CHX 20 29000ab 1000 29000


PURA 0000ac 0000 0000














5 Resultados 79



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6 Discussatildeo

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esperada









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7 Conclusotildees


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Calbicans e Smutans







Referecircncias

Referencias 95

REFEREcircNCIAS



Koogan 2005 p 461-77



240




91



processos 2007 2(3) 27-34






35 29ndash33




Immunity 2010 78(5) 2209ndash2220








Referencias 96

































Referencias 97



2007 40 (3) 175-81




2007 14(6)348-351




512ndash519








42 19-21











315



Referencias 98



2007 17(1) 92-98




23-28



1994 Bull 17 745ndash747






394ndash400





(4)




Paulo2004



Press p 263-277






2004 270(1-2) 83-91

Referencias 99


123-145





1847-1851



307



2003 252(1) 41-51












Endod J 2008 34(1) 19-24






203




Referencias 100













38(5)383-386












(3)749-53




40(3)272-276



35-43

Referencias 101




Brasil) RSBO 2010 7(1)27-34

SUMAacuteRIO






22 CLOREXIDINA 45




41 MATERIAIS 59








5 RESULTADOS 73

6 DISCUSSAtildeO 81


REFEREcircNCIAS 93








































































































feridas em geral





















2003)








































2005)




















































22 - Clorexidina







































































































PILLAI 2009)









































































































41 Materiais













412)





clorexidina a 20


























































































esterilidade








































Windows








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5 Resultados

5 Resultados 75

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BANDAGEM Calbicans


02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

QUITOSANA PURA

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CHX 02 14667a 0577 CHX 20 22667b 0577


QUITOSANA PURA

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5 Resultados 77





BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

QUITOSANA PURA

0000d 0000








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GEL Smutans


CHX 02 2400a 0000 24000 CHX 20 29000ab 1000 29000


PURA 0000ac 0000 0000














5 Resultados 79



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6 Discussatildeo

6 Discussatildeo 83

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6 Discussatildeo 84


































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6 Discussatildeo 86



































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esperada









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7 Conclusotildees


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Calbicans e Smutans







Referecircncias

Referencias 95

REFEREcircNCIAS



Koogan 2005 p 461-77



240




91



processos 2007 2(3) 27-34






35 29ndash33




Immunity 2010 78(5) 2209ndash2220








Referencias 96

































Referencias 97



2007 40 (3) 175-81




2007 14(6)348-351




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42 19-21











315



Referencias 98



2007 17(1) 92-98




23-28



1994 Bull 17 745ndash747






394ndash400





(4)




Paulo2004



Press p 263-277






2004 270(1-2) 83-91

Referencias 99


123-145





1847-1851



307



2003 252(1) 41-51












Endod J 2008 34(1) 19-24






203




Referencias 100













38(5)383-386












(3)749-53




40(3)272-276



35-43

Referencias 101




Brasil) RSBO 2010 7(1)27-34








































































































feridas em geral





















2003)








































2005)




















































22 - Clorexidina







































































































PILLAI 2009)









































































































41 Materiais













412)





clorexidina a 20


























































































esterilidade








































Windows








(plt005)

5 Resultados

5 Resultados 75

5 RESULTADOS










BANDAGEM Calbicans


02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

QUITOSANA PURA

0000 d 0000














5 Resultados 76





CHX 02 14667a 0577 CHX 20 22667b 0577


QUITOSANA PURA

0000e 0000











microrganismo






na tabela 53

5 Resultados 77





BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

QUITOSANA PURA

0000d 0000








5 Resultados 78












GEL Smutans


CHX 02 2400a 0000 24000 CHX 20 29000ab 1000 29000


PURA 0000ac 0000 0000














5 Resultados 79



5 Resultados 80

6 Discussatildeo

6 Discussatildeo 83

6 Discussatildeo

































6 Discussatildeo 84


































6 Discussatildeo 85


























placas









6 Discussatildeo 86



































6 Discussatildeo 87


























esperada









6 Discussatildeo 88

































7 Conclusotildees


7 Conclusotildees







Calbicans e Smutans







Referecircncias

Referencias 95

REFEREcircNCIAS



Koogan 2005 p 461-77



240




91



processos 2007 2(3) 27-34






35 29ndash33




Immunity 2010 78(5) 2209ndash2220








Referencias 96

































Referencias 97



2007 40 (3) 175-81




2007 14(6)348-351




512ndash519








42 19-21











315



Referencias 98



2007 17(1) 92-98




23-28



1994 Bull 17 745ndash747






394ndash400





(4)




Paulo2004



Press p 263-277






2004 270(1-2) 83-91

Referencias 99


123-145





1847-1851



307



2003 252(1) 41-51












Endod J 2008 34(1) 19-24






203




Referencias 100













38(5)383-386












(3)749-53




40(3)272-276



35-43

Referencias 101




Brasil) RSBO 2010 7(1)27-34
















2003)








































2005)




















































22 - Clorexidina







































































































PILLAI 2009)









































































































41 Materiais













412)





clorexidina a 20


























































































esterilidade








































Windows








(plt005)

5 Resultados

5 Resultados 75

5 RESULTADOS










BANDAGEM Calbicans


02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

QUITOSANA PURA

0000 d 0000














5 Resultados 76





CHX 02 14667a 0577 CHX 20 22667b 0577


QUITOSANA PURA

0000e 0000











microrganismo






na tabela 53

5 Resultados 77





BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

QUITOSANA PURA

0000d 0000








5 Resultados 78












GEL Smutans


CHX 02 2400a 0000 24000 CHX 20 29000ab 1000 29000


PURA 0000ac 0000 0000














5 Resultados 79



5 Resultados 80

6 Discussatildeo

6 Discussatildeo 83

6 Discussatildeo

































6 Discussatildeo 84


































6 Discussatildeo 85


























placas









6 Discussatildeo 86



































6 Discussatildeo 87


























esperada









6 Discussatildeo 88

































7 Conclusotildees


7 Conclusotildees







Calbicans e Smutans







Referecircncias

Referencias 95

REFEREcircNCIAS



Koogan 2005 p 461-77



240




91



processos 2007 2(3) 27-34






35 29ndash33




Immunity 2010 78(5) 2209ndash2220








Referencias 96

































Referencias 97



2007 40 (3) 175-81




2007 14(6)348-351




512ndash519








42 19-21











315



Referencias 98



2007 17(1) 92-98




23-28



1994 Bull 17 745ndash747






394ndash400





(4)




Paulo2004



Press p 263-277






2004 270(1-2) 83-91

Referencias 99


123-145





1847-1851



307



2003 252(1) 41-51












Endod J 2008 34(1) 19-24






203




Referencias 100













38(5)383-386












(3)749-53




40(3)272-276



35-43

Referencias 101




Brasil) RSBO 2010 7(1)27-34





















2005)




















































22 - Clorexidina







































































































PILLAI 2009)









































































































41 Materiais













412)





clorexidina a 20


























































































esterilidade








































Windows








(plt005)

5 Resultados

5 Resultados 75

5 RESULTADOS










BANDAGEM Calbicans


02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

QUITOSANA PURA

0000 d 0000














5 Resultados 76





CHX 02 14667a 0577 CHX 20 22667b 0577


QUITOSANA PURA

0000e 0000











microrganismo






na tabela 53

5 Resultados 77





BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

QUITOSANA PURA

0000d 0000








5 Resultados 78












GEL Smutans


CHX 02 2400a 0000 24000 CHX 20 29000ab 1000 29000


PURA 0000ac 0000 0000














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5 Resultados 80

6 Discussatildeo

6 Discussatildeo 83

6 Discussatildeo

































6 Discussatildeo 84


































6 Discussatildeo 85


























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6 Discussatildeo 86



































6 Discussatildeo 87


























esperada









6 Discussatildeo 88

































7 Conclusotildees


7 Conclusotildees







Calbicans e Smutans







Referecircncias

Referencias 95

REFEREcircNCIAS



Koogan 2005 p 461-77



240




91



processos 2007 2(3) 27-34






35 29ndash33




Immunity 2010 78(5) 2209ndash2220








Referencias 96

































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2007 40 (3) 175-81




2007 14(6)348-351




512ndash519








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Referencias 98



2007 17(1) 92-98




23-28



1994 Bull 17 745ndash747






394ndash400





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Paulo2004



Press p 263-277






2004 270(1-2) 83-91

Referencias 99


123-145





1847-1851



307



2003 252(1) 41-51












Endod J 2008 34(1) 19-24






203




Referencias 100













38(5)383-386












(3)749-53




40(3)272-276



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Referencias 101




Brasil) RSBO 2010 7(1)27-34









































22 - Clorexidina







































































































PILLAI 2009)









































































































41 Materiais













412)





clorexidina a 20


























































































esterilidade








































Windows








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5 Resultados

5 Resultados 75

5 RESULTADOS










BANDAGEM Calbicans


02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

QUITOSANA PURA

0000 d 0000














5 Resultados 76





CHX 02 14667a 0577 CHX 20 22667b 0577


QUITOSANA PURA

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microrganismo






na tabela 53

5 Resultados 77





BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

QUITOSANA PURA

0000d 0000








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GEL Smutans


CHX 02 2400a 0000 24000 CHX 20 29000ab 1000 29000


PURA 0000ac 0000 0000














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5 Resultados 80

6 Discussatildeo

6 Discussatildeo 83

6 Discussatildeo

































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6 Discussatildeo 87


























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6 Discussatildeo 88

































7 Conclusotildees


7 Conclusotildees







Calbicans e Smutans







Referecircncias

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REFEREcircNCIAS



Koogan 2005 p 461-77



240




91



processos 2007 2(3) 27-34






35 29ndash33




Immunity 2010 78(5) 2209ndash2220








Referencias 96

































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2007 40 (3) 175-81




2007 14(6)348-351




512ndash519








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Referencias 98



2007 17(1) 92-98




23-28



1994 Bull 17 745ndash747






394ndash400





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Paulo2004



Press p 263-277






2004 270(1-2) 83-91

Referencias 99


123-145





1847-1851



307



2003 252(1) 41-51












Endod J 2008 34(1) 19-24






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Referencias 100













38(5)383-386












(3)749-53




40(3)272-276



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Referencias 101




Brasil) RSBO 2010 7(1)27-34














































































PILLAI 2009)









































































































41 Materiais













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clorexidina a 20


























































































esterilidade








































Windows








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5 Resultados

5 Resultados 75

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BANDAGEM Calbicans


02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

QUITOSANA PURA

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QUITOSANA PURA

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5 Resultados 77





BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

QUITOSANA PURA

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GEL Smutans


CHX 02 2400a 0000 24000 CHX 20 29000ab 1000 29000


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6 Discussatildeo

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7 Conclusotildees


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Calbicans e Smutans







Referecircncias

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REFEREcircNCIAS



Koogan 2005 p 461-77



240




91



processos 2007 2(3) 27-34






35 29ndash33




Immunity 2010 78(5) 2209ndash2220








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Referencias 97



2007 40 (3) 175-81




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512ndash519








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Referencias 98



2007 17(1) 92-98




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1994 Bull 17 745ndash747






394ndash400





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Paulo2004



Press p 263-277






2004 270(1-2) 83-91

Referencias 99


123-145





1847-1851



307



2003 252(1) 41-51












Endod J 2008 34(1) 19-24






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Referencias 100













38(5)383-386












(3)749-53




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Brasil) RSBO 2010 7(1)27-34




































































































41 Materiais













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clorexidina a 20


























































































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5 Resultados

5 Resultados 75

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BANDAGEM Calbicans


02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

QUITOSANA PURA

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QUITOSANA PURA

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5 Resultados 77





BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

QUITOSANA PURA

0000d 0000








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GEL Smutans


CHX 02 2400a 0000 24000 CHX 20 29000ab 1000 29000


PURA 0000ac 0000 0000














5 Resultados 79



5 Resultados 80

6 Discussatildeo

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7 Conclusotildees


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Calbicans e Smutans







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REFEREcircNCIAS



Koogan 2005 p 461-77



240




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processos 2007 2(3) 27-34






35 29ndash33




Immunity 2010 78(5) 2209ndash2220








Referencias 96

































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2007 40 (3) 175-81




2007 14(6)348-351




512ndash519








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Referencias 98



2007 17(1) 92-98




23-28



1994 Bull 17 745ndash747






394ndash400





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Paulo2004



Press p 263-277






2004 270(1-2) 83-91

Referencias 99


123-145





1847-1851



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2003 252(1) 41-51












Endod J 2008 34(1) 19-24






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Referencias 100













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Brasil) RSBO 2010 7(1)27-34


















































































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5 Resultados

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BANDAGEM Calbicans


02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

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BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

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7 Conclusotildees


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Calbicans e Smutans







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240




91



processos 2007 2(3) 27-34






35 29ndash33




Immunity 2010 78(5) 2209ndash2220








Referencias 96

































Referencias 97



2007 40 (3) 175-81




2007 14(6)348-351




512ndash519








42 19-21











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2007 17(1) 92-98




23-28



1994 Bull 17 745ndash747






394ndash400





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Paulo2004



Press p 263-277






2004 270(1-2) 83-91

Referencias 99


123-145





1847-1851



307



2003 252(1) 41-51












Endod J 2008 34(1) 19-24






203




Referencias 100













38(5)383-386












(3)749-53




40(3)272-276



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Brasil) RSBO 2010 7(1)27-34



































Windows








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5 Resultados

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BANDAGEM Calbicans


02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

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BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

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35 29ndash33




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2007 40 (3) 175-81




2007 14(6)348-351




512ndash519








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2007 17(1) 92-98




23-28



1994 Bull 17 745ndash747






394ndash400





(4)




Paulo2004



Press p 263-277






2004 270(1-2) 83-91

Referencias 99


123-145





1847-1851



307



2003 252(1) 41-51












Endod J 2008 34(1) 19-24






203




Referencias 100













38(5)383-386












(3)749-53




40(3)272-276



35-43

Referencias 101




Brasil) RSBO 2010 7(1)27-34

5 Resultados

5 Resultados 75

5 RESULTADOS










BANDAGEM Calbicans


02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

QUITOSANA PURA

0000 d 0000














5 Resultados 76





CHX 02 14667a 0577 CHX 20 22667b 0577


QUITOSANA PURA

0000e 0000











microrganismo






na tabela 53

5 Resultados 77





BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

QUITOSANA PURA

0000d 0000








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GEL Smutans


CHX 02 2400a 0000 24000 CHX 20 29000ab 1000 29000


PURA 0000ac 0000 0000














5 Resultados 79



5 Resultados 80

6 Discussatildeo

6 Discussatildeo 83

6 Discussatildeo

































6 Discussatildeo 84


































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esperada









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7 Conclusotildees


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Calbicans e Smutans







Referecircncias

Referencias 95

REFEREcircNCIAS



Koogan 2005 p 461-77



240




91



processos 2007 2(3) 27-34






35 29ndash33




Immunity 2010 78(5) 2209ndash2220








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2007 40 (3) 175-81




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Paulo2004



Press p 263-277






2004 270(1-2) 83-91

Referencias 99


123-145





1847-1851



307



2003 252(1) 41-51












Endod J 2008 34(1) 19-24






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Referencias 100













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Brasil) RSBO 2010 7(1)27-34

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BANDAGEM Calbicans


02 10667a 0577 06 13000b 0000 10 14333 b 0577 20 16667c 1155

QUITOSANA PURA

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QUITOSANA PURA

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BANDAGEM Smutans


02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

QUITOSANA PURA

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7 Conclusotildees


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Calbicans e Smutans







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REFEREcircNCIAS



Koogan 2005 p 461-77



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processos 2007 2(3) 27-34






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Immunity 2010 78(5) 2209ndash2220








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2007 40 (3) 175-81




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2007 17(1) 92-98




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1994 Bull 17 745ndash747






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Paulo2004



Press p 263-277






2004 270(1-2) 83-91

Referencias 99


123-145





1847-1851



307



2003 252(1) 41-51












Endod J 2008 34(1) 19-24






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Referencias 100













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02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

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02 20667a 0577 06 22667b 1155 10 24000bc 0000 20 25000c 1000

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desenvolvimento e anÁlise “in vitro” do efeito ... · oportunidade de ter feito parte do seu...

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