THAÍS COLLARES

(collares.thas@gmail.com)

Universidade Federal de Pelotas

Centro de Biotecnologia

Graduação em Biotecnologia

CONTROLE DO CRESCIMENTO MICROBIANO - MÉTODOS FÍSICOS

E QUÍMICOS

• Industrial

• Laboratorial

• Hospitalar...

APLICAÇÕES

A escolha do método depende do objetivo, do tipo de

material e do nível de controle que se deseja obter.

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• Prevenir a transmissão de doenças e infecções;

• Prevenir a contaminação ou crescimento de

microrganismos nocivos;

• Prevenir a deterioração e dano de materiais por

microrganismos;

• Para a segurança biológica do laboratório;

• Para a segurança do técnico e do ambiente;

• Indústrias alimentícias, saneantes, cosméticos

dentre outras;

Porque controlar microrganismos?

Destruir, inibir ou remover microrganismos

Controle da população microbiana

AGENTES FÍSICOS

AGENTES QUÍMICOS

Microrganismos em números aceitáveis ou ausências destes

• Tamanho da população quanto > + tempo p/ morrer

• Concentração do agente Microbicida quanto < + tempo

p/ morrer

• Tempo de exposição quanto > + células mortas

• Temperatura quanto > - tempo p/ morrer

• Características microbianas endósporos + difíceis que

vegetativos

Condições que influenciam a capacidade antimicrobiana

Modo de ação dos agentes antimicrobianos

Eles podem agir causando:

• Alteração da permeabilidade da membrana: – Lesão de lipídeos causa vazamento do conteúdo celular • Dano às proteínas: – Rompimento das ligações de hidrogênio ou das pontes de dissulfeto, causando desnaturação das proteínas (produtos químicos ou calor) • Danos aos ácidos nucléicos: – Calor, radiação ou substâncias químicas afetam ácidos nucléicos resultando em falhas no processo de reprodução

CONTROLE DO CRESCIMENTO MICROBIANO

Conceitos

• Esterilização: É a destruição de todas as formas de vida microbiana. *Vapor sob pressão (autoclave), gás esterilizante (óxido de etileno)

• Esterilização comercial: É o tratamento de calor suficiente para matar os endósporos do Clostridium botulinum nos alimentos enlatados.

• Desinfecção: É a destruição dos patógenos vegetativos em objetos. *Pode utilizar métodos físicos (UV, água fervente ou vapor) ou químicos

(desinfetantes)

CONTROLE DO CRESCIMENTO MICROBIANO

Conceitos

• Antissepsia: destruição dos patógenos vegetativos em tecido vivo pela inibição do seu crescimento ou atividade. *Antimicrobianos químicos (antissépticos)

• Degermação: remoção mecânica dos micróbios de uma área limitada em tecido vivo, como o local em torno de uma injeção na pele. *Algodão embebido em álcool

• Sanitização: tratamento destinado a reduzir as contagens microbianas nos utensílios alimentares, equipamentos industriais e ambientes hospitalares até níveis seguros. *lavagem

com alta temperatura

MÉTODO DE ESCOLHA

Natureza do agente

Tipo de material que contém o

microrganismo

Fervura ou fluxo de vapor

•Ação: Desnaturação de proteínas

•Mata patógenos bacterianos vegetativos e fungos, quase todos os vírus, dentro de 10 minutos e é menos efetivo em endosporos.

•Para esterilizar pratos, pias jarras e equipamentos

MÉTODOS FÍSICOS

CALOR ÚMIDO

Autoclave • Ação: Desnaturação de proteínas

• Todas as células vegetativas e endosporos 15 minutos a (121ºC). • Utilizado para meios, soluções, forros, utensílios, curativos, equipamentos e outros itens que podem suportar temperatura e pressão.

MÉTODOS FÍSICOS

CALOR ÚMIDO

Pasteurização

•Ação: Desnaturação de proteínas

•Utilizado no leite para matar todos os patógenos e quase

todos os não patogênicos (72ºC por 15seg)

•É utilizado no leite, creme e bebidas alcoólicas.

MÉTODOS FÍSICOS

CALOR ÚMIDO

Chama direta

•Ação: Efeito de oxidação até se tornarem cinzas

•Utilizados em alças de inoculação

Esterilização com ar quente

• Ação: Efeito de oxidação.

• Temperatura de 170ºC durante 2h.

• Para vidros vazios, instrumentos, agulhas e seringas de vidro.

MÉTODOS FÍSICOS

CALOR SECO

Incineração

• Ação: Efeito de oxidação

até e tornarem cinzas

• Copos de papel, curativos

contaminados, carcaças de animais,

sacos e panos de limpeza.

MÉTODOS FÍSICOS

CALOR SECO

Filtração •Ação: Separação das bactérias em suspensão •Para esterilizar líquidos como toxinas, vacinas, enzimas e soluções antibióticas que são destruídos pelo calor

MÉTODOS FÍSICOS

MECÂNICO

Refrigeração

• Ação: Redução das reações químicas

• Efeito bacteriostático.

• Conservação de alimentos, drogas e culturas.

Congelamento doméstico e profundo

• Ação: Redução das reações químicas e alterações nas proteínas.

• Conservação de culturas microbianas, com congelamento rápido a -50 e -95ºC.

• Conservação de alimentos, drogas e culturas.

MÉTODOS FÍSICOS

FRIO

Liofilização

• Ação: Redução das reações químicas

• Água é removida por alto vácuo em

baixa temperatura.

• Conservação de alimentos, drogas e

culturas.

MÉTODOS FÍSICOS

FRIO

RESSECAMENTO

•Ação: Interrupção do metabolismo.

•Envolve a remoção de água dos micróbios.

•Tem efeito bacteriostático.

•É utilizado na conservação de alimentos.

PRESSÃO OSMÓTICA

•Ação: Plasmólise.

•É utilizado na conservação dos alimentos.

MÉTODOS FÍSICOS

Ionizante

•Destruição do DNA por raios

gama e feixe de elétrons

•Esterilizar produtos farmacêuticos e equipamentos

médicos e dentários.

Não ionizante

•Ação: alteram o DNA pela formação de dímeros - UV

•Controle de ambiente fechado- fluxo laminar

MÉTODOS FÍSICOS

RADIAÇÃO

Fenol e compostos fenólicos

FENOL

Ruptura da membrana plasmática, desnaturação de proteínas e

desativação de enzimas.

Raramente usado como desinfetante ou anti-séptico por ser

irritante de mucosas e de odor desagradável.

MÉTODOS QUÍMICOS

BIGUANIDAS (CLOREXIDINA)

Ação: Ruptura da membrana plasmática

É BACTERICIDA CONTRA GRAM (+) E GRAM (-), ATÓXICO e POSSUI

PODER RESIDUAL

Para a antissepsia da pele na preparação cirúrgica

MÉTODOS QUÍMICOS

HALOGÊNIOS

Ação:

O iodo inibe a função das proteínas e é oxidante

o cloro é oxidante alterando as moléculas da célula

O iodo e o cloro podem agir separadamente ou como

componentes de compostos orgânicos e inorgânicos.

O iodo como antisséptico: tintura e iodofor

MÉTODOS QUÍMICOS

Álcoois

Ação: Desnaturação de proteínas

e dissolução dos lipídeos.

É bactericida e fungicida, não sendo efetivo contra

endosporos ou vírus não envelopados.

Álcoois mais usados são o etanol e o isopropanol.

Termômetros e outros instrumentos.

MÉTODOS QUÍMICOS

METAIS PESADOS E COMPOSTOS

Ação: Desnaturação de enzimas

Prata e o mercúrio são germicidas ou anti-sépticos

o mercurocromo é antisséptico da pele e de mucosas

MÉTODOS QUÍMICOS

Agentes de superfície

Sabões e detergentes aniônicos

Ação: Remoção mecânica dos micróbios através da escovação

Detergentes ácido-aniônicos

Ação: pode envolver a inativação ou ruptura das enzimas

atóxicos, não-corrosivos e ação rápida, utilizados na sanitização

MÉTODOS QUÍMICOS

Agentes de superfície

Detergentes catiônicos (compostos de amônio quaternário)

Inibição de enzimas bacteriostáticos

desnaturação das proteínas

ruptura das membranas plasmáticas - Bactericidas

fungicidas e viricidas (vírus envelopados)

Como desinfetantes de instrumentos e objetos de borracha

MÉTODOS QUÍMICOS

Aldeídos

Ação: Desnaturação das proteínas.

É usado para a desinfecção de equipamentos médicos

O glutaraldeído é menos irritante que o formaldeído

MÉTODOS QUÍMICOS

Esterilizantes Gasosos

Ação: Desnaturação das proteínas

O óxido de etileno é o de uso mais comum.

Esterilizante - para objetos que se danificam com calor.

MÉTODOS QUÍMICOS

Peroxigênios

Ação: Oxidação.

Ozônio é usado como suplemento para a cloração;

O peróxido de hidrogênio é anti-séptico e bom desinfetante.

Em superfícies contaminadas

Ferimentos profundos - efetivos contra bactérias anaeróbicas sensíveis ao oxigênio (.....).

MÉTODOS QUÍMICOS

THAÍS COLLARES

(collares.thas@gmail.com)

OBRIGADA PELA ATENÇÃO