POTENCIAL DA ERVA MEDICINAL (Cymbopogon c-UacU ua) NO

CONTROLE DE FITOPATÓGENOS DO FEIJOEIRO^

Pedro Jose Valarini^ Rosa T.S. Frighetto^

Itamar S. de Melo^

INTRODUÇÃO

As plantas superiores produzem metabõlitos secundá­

rios com efeitos sobre outros organismos vivos. Na grande

industria dos fãrmacos estes compostos podem possuir pro­

priedades tais como analgésicas, anticancerígenas, antibiõ ticas, anti-inflamatõrias, sedativas e hipote n s i v a s .

No controle de pragas agrícolas, tres classes de inse

ticidas botânicos sao importantes: os alcalóides relaciona

dos a nicotina, piretrõides e rotenóides . No tocante ao controle de doenças de plantas, os estudos sao ainda modes

tosj mas demonstram o potencial de sua utilização (MUKHER

JEE & BISMAS, 1981; KISHORE et alii, 1989; FAWCETT & SPEN­

CER, 1970; BEYE, 1978; KHAN et alii, 1974; ROSS et alii,

1989; SINGH et alii, 1980) .

Na cultura do feijoeiro, diversos patõgenos de raí­

zes têm sido fatores limitantes ã produção de grãos. E n ­

tré estes citam-se: FlUOA-ium òotani f. sp. phdieoZ-í, Rkc-

zòttonla -ioiani, ScíefiotlyUa ôcIiiAotio'iwn e ScítAotíiun

AjÒÍfjAÁÂ. 0 controle desses patogenos se baseia quase exclu sivamente na utilizaçao de fungicidas sintéticos, que nem betnpre apresentam eficiência adequada, além de provocar afeitos danosos ao ambiente quando usados indiscriminada— itaente. Na busca de medidas alternativas para o controle de

fitopatõgenos, surge como opçao viável o emprego de sub- jrtodutos naturais de plantas.

Rev. de Agricultura, Piracicaba, V. 69, fase. 2, 199A

*,jTraballio parcialmente financiado pela 1'APESP.

LeMBRAPA/CNPMA. Caixa Postal 69. CEP 13820-000 Jaguariú- S P .

0 presente trabalho teve por objetivo estudar o po­

tencial do Capim-Limão ou Erva-Cidreira (Cymbopogon CÃ.-

tA0X.UA) no controle de alguns fungos que atacam o feijoe^

ro.

MATERIAL E MÉTODOS

A partir de materiais vegetais coletados em lavouras

irrigadas da região de Gualra-SP, fez-se em laboratório o

isolamento dos fungos causadores de podridoes de raizes

de feijão e de tomate: VuAO/tÂum ò o Z a n if . sp. phaò&o-tí, Rhi

zocXouía òotayU, ScZeAotÁ.nla &cJtQAX}tÁ.ofwim e ScX.zn.otÁ.m\

em meio de cultura batata-dextrose-igar (BDA) acrescido do antibiótico sulfato de estreptomicina a 1%.

0 inóculo produzido dos fungos foi purificado e m a n ­

tido na forma de micilio em frascos de vidro com ãgua des tilada esterilizada em temperatura ambiente, sob condi­

ções de laboratório.

Para testar a atividade antifúngica de C. CÃÃACltuò

in vitro, utilizou-se a metodologia de difusão em ãgar,

que consistiu em colocar discos de micélio do fungo no

centro da placa de Petri com BDA, incubar por 2 dias e,

em seguida, perfurar 3 pequenos orifícios no meio de cul­

tura, preenchidos com 0,1 m^ de solução do extrato de C.

CÁXAotuò a 10%. Após 3 a 4 dias de incubaçao a 25°C, fez-

se a avaliaçao através da d e t e m i n a ç a o do tamanho do halo de inibição medido em m m e em porcentagem e através de

uma escala de notas de fraca (+) até total (++++) .

Em condiçoes de casa-de-vegetaçao (telada), realiza­

ram-se os ensaios para determinar a eficiencia do C, ci-

tA a tm , aplicado a semente de feijão na forma de extra­

to, e incorporado ao solo na forma de pó, controle de R.

óotani e F. óoiatU f. sp. pliaòeotl. As sementes foramimersas em suspensão aquosa a 10% do extrato vegetal de C. CÃ-t^atui durante 5 minutos e, em seguida, foram semea­das em vasos com solo pasteurizado, previamente infestado com os p a t ó g e n o s . Também, no mesmo solo infestado foi in­

corporado material vegetal (follia), seco e moldo (po) , na

140_________________REVISTA DE AGRICULTURA_______________________

concentraçao de 30 g/kg de solo e, em seguida, fez-se o

plantio de sementes de feijão. Realizaram-se quatro ava­

liações de emergência de plântulas de feijoeiro. Posterior

mente, fez-se a avaliaçao ín vitro da eficiência dos ex­

tratos fracionados de C. cÁJUuvtüÁ sobre R. òotanÁ. e S. 4 àíeAo-tio^um.

Cymbopogon C-CÍAOÍOÓ Stapf (família das Gramineas), si

nonimia ÁndAopogon CÁXfuxtuò, ê conhecida no Brasil com no~

mes de Capim-Limão ou Erva-Cidreira (lemongrass). E rico

em oleo essencial com grande emprego na industria de perfu

maria. Possui forte odor de limão devido a alta concentra” çao do composto citral como seu componente principal. Da planta fresca, cortada em pedaços, foi extraído o oleo por arraste a vapor. 0 oleo foi separado da fase aquosa com cloreto de metileno, secado sobre sulfato de sodio anidro

e concentrado em evaporador rotativo. 0 óleo foi fraciona- do em coluna de silica gel desativada, empacotada adicio­

nando-se silica gel suspensa em pentano. Passou-se v á ­

rias vezes o solvente para melhor empacotamento da silica.

0 oleo essencial foi adicionado na coluna e os componentes eluídos com pentano e gradiente pentano-iter etilico (5-

100%). As frações foram coletadas e concentradas em evapo­

rador rotativo. As placas de cromatografia em camada delga

da de sílica (CCD) foram eluldas com hexano, hexano-êter

5% e hexano-acetato de etila a 10%, dependendo das frações,

visualizadas em lâmpada de U.V., pulverizadas com revela­dor específico para terpenos, e em seguida aquecidas. 0

revelador específico para terpenos utilizado foi: 50 m£ de

ácido acêtico, 1 m£ de ácido sulfurico concentrado e 0,5 ro£ de anisaldeído. As frações semelhantes foram agrupadas

e utilizadas para os testes de atividade antifungica.

CONTROLE DE FITOPATÕGENO DO FEIJOEIRO_______________141

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Efeitos do Extrato de C. cÃ.t^atu6 aobre Fitopatõgenos in vitro

0 extrato, assim obtido, constituiu um óleo que, após

1A2 RlíVISTA DE AGRICULTURA

diluído, foi utilizado nos testes in vitro, usando-se pa­

ra tanto alxiuotas de 10 colocados em discos de papel

de filtro e/ou incorporados diretamente em poços de 5 mm

no meio de cultura.

0 extrato de C. CXÍAOÍOÓ obtido de folhas inibiu to­

talmente o crescimento micelial de F. -iotan^ f . sp. pha-

■i&oti (Fs), 5. òcl^.eAotioAwri (Ss) e RkizoctoyUa òotani

(Rs) (TABELA I). S. fioZ{^òyiÁ mostrou-se mais resistente ao

extrato, apesar de o produto ter diminuído sensivelmente

o diâmetro mSdio das colônias do fungo.

C. CÁXAíltuò tem sido selecionada, dentre várias plan tas mantidas, com atividade contra fitopatogenos, no Cen~ tro Nacional de Pesquisa de Monitoramento e Avaliação de

Impacto Ambiental - C N P M A / E M B R A P A .

TABELA I. Atividade antifungica de Cymbopogon

in vitro.cXt/uxtoó

TratamentosDiâmetro da Colõnia(cm5~ e atividàde antifungica

f.-ò.ph. R.-ò. S.-òc. S .A .

Extrato de

folha de

C. CÂtAatli& 0,0(++++) 1 0,0(++++) 0,0(++++) 2 ,7(++)

Controle 9.0 9,0 9,0 9,0

* (+): fraca in i biçao; (++): media; (+++): a l t a : (++++):

Estudos com estes fungos ja foram realizados (FERRA-

ClNl et alii, 1990; VALARINl et alii, 1991) e demonstra­

ram o potencial de controle do CliQuopodium ambAosio itieò,

Simaba caUion, SimoAuba aniarn, Qiiaòila sp., Ptc^ocauCoH

baf'amac, Media azedoAach e Uouacapoua cv)K"i.ic(uia. KlSHORK et alii (1989) ilemonstraram que o tratamoiitt) tio solo tom

folhas de C. ambn.oòÁ.oi.d(íÁ controlou o tombamento de plantu^

las de feijoeiro causado por R. òotanL.

Efeitos do Extrato de Folhas e do Po de C. cXÜiotaó

sobre a Emergência de Sementes

0 método de difusão do extrato em igar mostrou-se efi

ciente pata testar a atividade biologica de C. CÃXAdtlló

contra F. òolarU e R. -òO-íanÁ. 0 extrato de folhas de C.

CÍtACLtlvi, muito embora tenha apresentado atividade antifún gica in vitro, afetou a emergência de plantulas de feijão

(TABELA I I ) . No entanto, quando se utilizou a planta na forma de po, esta aumentou a emergência de sementes, tanto em solo infestado com Fs e Rs (TABELA III) como em solo com eles não infestado. Verifica-se que C. CÓÍAotu4 tem po^ tencial de controle desses fitopatogenos, pois eles inter­

ferem na germinação de sementes e causam tombamento em pré-emergência (TABELAS II e I I I ) . 0 tratamento do solo in festado com Fs e Rs, com pó de C. CÃ^ViatiUi, proporcionou um índice de emergência de plantulas de 96,7% enquanto a

sua não utilização provocou índices de emergência da ordem

de 75,0 e 88,3%, em solos infestados com R. òoZanyi e F.

òotauí, respectivamente. Também, quando se comparam os tra tamentos que não receberam o pó e onde as sementes foram

plantadas em solo nao infestado, verifica-se diminuição de emergência de plantulas (TABELA III) . Tais efeitos podem

ser atribuídos a eliminação de microorganismos saprofíti-

cos da rizosfera e/ou a patogenos secundários que interfe­

rem com a emergência, jã que nesta fase a espermosfera pro^ picia um micro habitat favorável ao desenvolvimento da mi-

croflora associada ao hospedeiro.

Alguns resultados têm sido relatados quanto à ativida

de de C. citAcitai, contral/eAÍxcuif úmi aCbo-atAim, Fuòa^im

oxy&pofivm f.sp. congtutinanò, UòtUado ave.nao^ CíadoòpofUwn

Cenatocijtú u£mc, V ipíoidia maijdi.i,

attii, Kítcfinoxia tcniUò e F. oxtjòpo^itni f.sp. ítjcopufiòÃci

(Maruzzella & Balter, 1959; citados por GRAINCE & AHMIÍD,

1988) .

_________ CONTROLE DE FITOPATOGENOS DO FEIJOEIRO____________ 1̂

144 REVISTA DE AGRICULTURA

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Isolamento e Fracionamento do Oleo Essencial de

C. citn.atuÁ.

0 óleo essencial de C. cJXhatuÁ foi obtido por arra£ te a vapor, cuja técnica serve primeiramente para sepa­rar compostos orgânicos voláteis de n ã o - v o l i t e i s . É conhe

cido da literatura que óleos essenciais de espécies odori

feras são ricos em compostos mono- e sesquiterpênicos. 0

Óleo de C. CÁÂAatuÁ e a principal fonte de extração de ci

trai, com teor de 75 - 80%. Possui, portanto, forte odor

de limão (GUENTHER, 1949). A separação do óleo essencial

em frações oxigenadas e de hidrocarbonetos foi feita com

utilização de silica gel desativada. As diferentes fra­

ções foram testadas contra S. òcLzfiotÃ^Ofium e R. òolanÁ. Ve rificou-se resultado diferenciado das frações quanto ^ atividade biológica (TABELA I V ) . Seis frações inibiram o crescimento micelial de R. òotonÁ. e somente tres foram

inibitórias a S. &cJÍQA.0tÁ.0h.im. Estas frações serão anali­

sadas pro cromatografia gasosa acoplada ã espectrometria

de massa para fins de identificação dos componentes ati­vos, que podem representar compostos com atividade anti—

fungica de importância na agricultura.

RESUMO

Para avaliar a eficiência da erva medicinal Cymbopo- gon cÁXAatuò (Capim-Limão) no controle de FilíoAÍuíii òoíani

f. sp. phaóeoLí (Fs), RivizoctorUa solani (Rs), ScidfiotL- rvia 6cte.AotioA.um (Ss) e ScIeA o t^m fiol^òÃJ, (Sr) na cultu­ra de feijoeiro, foram instalados ensaios in vitro e in

vivo, utilizando material vegetal (folhas) em forma de ex

trato (suspensão aquosa a 10%) e de po (material seco e

nioído) na concentraçao de 30 g/kg de solo. Para avaliar a

atividade antifungica do extrato in vitro, utilizou-se o método de difusão em âgar (BOA) e também a medida do lialo de inibição. Em condiçoes de casa-de-vegetaçao (telada) realizou-se o ensaio, comparando-se as formas de aplita- çao de C. cÁXAatuA em tratamento de sementes (extrato) e em incorporaçao no solo (pó). A avalinçao consistiu em tie

terminar a emergência de plântulas. Posteriormente, realT

U 6r________________ REVISTA DE AGRICULTURA______________________

CONTROLE DE FITOPATÕGENOS DE FEIJOEIRO U 7

zou-se a avaliaçao da eficiência ̂de C. CÃJyuvtuÁ sobre Rs e F s .

dos extratos fracionados

TABELA IV. Avaliaçao da atividade das frações do extrato

de Cymbopogon cXíAoíoò sobre Rhizoctonia òolayU

(Rs) e ScJL2JiotÃ,Yila 6 cZnAotÁ.oHim (Ss) .

Fraçao Di5„,et-ro da colônia (mm)/atividade antifungica^

Exírato <==>

4 70(++) -

5 85(++) 80(++)

7 60(+++) 80(++)

8 60(+++) 80(++)

10 90(++) —

13 80(++) —

16 — —

A2 — —

44 — —

Acetato de

Etilia 65

Testemunha 90 90

(^) (— ): ausência de inibição; (+); fraca; (++) : média;

(+++): alta; (++++): total.

Os resultados mostraram que o extrato de C. c-itAaXuò

obtido de folhas inibiu totalmente o crescimento micelial de Fs, Ss e Rs, enquanto que Sr mostrou-se mais resisten­te, apesar de o produto diminuir sensivelmente o diâmetro médio das colônias do fungo. Por outro lado, o extrato de

folhas de C. citACUtuÁ afetou a emergência, enquanto que o

põ proporcionou aumento no índice de emergência da ordem

de 96,7% contra 75,0% e 86,7% em solos somente infestados

com Rs e Fs, respectivamente. Visto que as folhas de C.

cttfiata& mostraram seu potencial antifúngico quando in­

corporadas ao solo na forma de p5, a sua utilização pode

ser explorada considerando que o material está prontamen­te disponível por baixo custo, para reduzir o potencial dos fungos patogênicos do feijoeiro.

Palavras-chave: C. cWuvtuÁ , controle de f itopatõgenos , feijoeiro.

148_________________ REVISTA DE AGRICULTURA_______________________

SUmARY

EEFECT OF THE MEDICINAL HERBAGE Cymbopogon c W lo tu i

ON CONTROL OF PHYTOPATHOGENIC FUNGI IN BEAN CROP

Studies were carried out to determine the effect of

the medicinal herbage Cymbopogon altAcUa& Staph (lemon

grass) on control of FuòaAÍum i>otanJi f.sp. phcutoti (Fs) ,

RhizoctorUa. iolanl (Rs), ScldAotlYÚa &clin.otioA.um (Ss) and ScZíAot^um Aot^ò-ôi (Sr), in bean crop (Fha6e.oZu6 vui-

gOÂÁA), using the essencial oil isolated from leaves of

C. (uXAatuò (10% in aqueous suspension) and ground lemon

grass leaves (dry and fresh) incorporated in soil (30 g/ kg of soil) 2 days after inoculation of fungi. To eva­

luate the efficiency and fungitoxicity of extract in v i ­

tro the agar diffusion method (PDA) was used and measured

the inhibition of micelial growth of pathogens. In green­house an assay in pot was carried out comparing the seed

treatment with extract with ground lemon grass incorpored

in soil. The results obtained showed that the extract of

leaves of C. (UJAatuA inhibited completely the micelial

growth of Fs, Ss and Rs, while Sr showed to be less sensi tive. The oil,at the concentration used, was found to bê^

phytotoxic with respect to emergency while the ground

lemon grass increased the emergency (96.7%) against 73.0%

CONTROLE DE FITOPATOGENOS DE FEIJOEIRO____________ U 9

and 86.7% in soils only infested with Rs and Fs, respect­

ively. Since the leaves of C. CÃtACltaò showed their anti-

fungal potency when incorporated to the soil, they may be also exploited as a cheap and readily available source for

the reduction of phytopathogenic fungi.

Key words; C. CÁtUcutuÁ , control of phytopathogenic fungi,

bean crop.

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150_________________REVISTA DE AGRICULTURA_______________________