características gerais dos vírus

CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS

Características Gerais dos Vírus

Dra. Carmen Saramago


1- HISTÓRICO

1886 – Adolf Mayer �� Doença do Mosaico do Tabaco (TMD) :

• era transmissível de uma planta doente para uma saudável;

TMD

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• era transmissível de uma planta doente para uma saudável;

• não era isolado “in vitro” pela técnicas habituais;

1892 – Dmitri Iwanowski �� Agente do TMD era filtrável;

1935 – Wendell Stanley purificou e descreveu as propriedades químicas do Vírus do TMD (facilitou visualização ao microscópio eletrônico)

1932 – Ernest Ruska �� Inventou o Microscópio Eletrônico;


2- DEFINIÇÃO ��São agentes infecciosos com características próprias

� CONSTITUIÇÃO SIMPLES:

Material genético - DNA ou RNA

Capsídeo proteico

Envelope lipídico (alguns)

Vírus Nus

Vírus Envelopados

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Vírus Envelopados


• Passam por filtros que retêm bactérias;

� TAMANHO :

Dimensões, em geral, de 20 a 1000 nm

• Não são visualizados

ao Microscópio Ótico;

nm = nanômetro = 10-9 do metro

µm = micrômetro = 10-6 do metro

mm = milímetro = 10-3 do metro

3 µm

4


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� CRESCIMENTO :

São Parasitos Intracelulares Obrigatórios;

• Não possuem metabolismo próprio;

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• Não são isolados “in vitro” pelas

técnicas de cultura habituais;

• Não possuem enzimas relacionadas à síntese de proteínas ou de energia;

• Só crescem dentro de célula viva;


VIRION �� Partícula viral completa


ESTRUTURA DA PARTÍCULA VIRAL:

Vírus EnvelopadosVírus Nus

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� CORE : Ácido nucleico DNA ou RNA

� CAPSÍDEO : Estrutura rígida formada por

unidades protéicas (capsômeros)

Funções - Proteger o material genético

Dar forma ao vírus

Participar da ligação com a célula hospedeira


� ENVELOPE: Estrutura membranosa formada de lipídeos e proteínas

LIPÍDEOS – originados da célula

hospedeira

da matriz – fazem a ligação

do capsídeo com o envelope

glicoproteínas – projeções

PROTEÍNAS na superfície externa

Ex: Hemaglutinina

Neuraminidase

Hemolisina

CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS11

PROJEÇÕES DO ENVELOPE VIRAL:

Envelope

Enzima Ligação a Receptores

Vírus da Gripe

Ácido Nucléico

Capsídeo


ORIGEM DO ENVELOPE VIRAL:

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Saída da Partícula Viral da Célula Hospedeira por Brotamento


3- MORFOLOGIA DA PATÍCULA VIRAL:

ComplexaPoliédrica Helicoidal

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Adenovírus TMD


MORFOLOGIA DA PATÍCULA VIRAL:

Poliédrica Envelopada Helicoidal Envelopada

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Vírus Varicela-ZosterVírus da Raiva

CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS VÍRUS16

4- MULTIPLICAÇÃO DOS VÍRUS �� no interior de uma célula viva

�Célula Animal (Homem e outros animais)

ESPECIFICIDADE

�Célula Bacteriana

E. coli + Fago T4

TMD

�Célula Vegetal


INFECÇÃO VIRAL

Ciclo lítico Ciclo lisogênico


Ciclo lítico

Ciclo lisogênico


1- Reconhecimento – especificidade

2- Adsorção – estruturas de fixação do vírus

presentes no capsídeo ou envelope

ligam-se a receptores da célula alvo

3- Penetração – por pinocitose ou injeção do AN

4- Desnudamento – destruição do envoltório do AN

5- Transcrição inicial

Tradução inicial – síntese das enzimas

necessárias à replicação do AN viral.

ETAPAS DA REPLICAÇÃO VIRAL

necessárias à replicação do AN viral.

Ex: polimerases

- síntese de proteínas que paralisam o

metabolismo da célula hospedeira

6- Replicação do ácido nucléico viral

7- Transcrição posterior

Tradução posterior – síntese dos componentes

estruturais da partícula viral

8 - Maturação

9 - Liberação – por lise da célula ou por

brotamento (vírus envelopados)


� Inoculação em ovos embrionados de galinha com 3 – 5 dias

5- ISOLAMENTO E CULTIVO DOS VÍRUS EM LABORATÓRIO:

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� Evidenciação do crescimento do vírus em ovo embrionado:

“Pocks”

Focos Hemorrágicos

Morte do embrião

Sorologia


Preparo da vacina contra Febre Amarela em ovos embrionados

FioCruz - RJ


� Inoculação em Cultura de Células

ISOLAMENTO E CULTIVO DOS VÍRUS EM LABORATÓRIO:

Células com grande capacidade de multiplicação

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Frasco de Cultura de Células

Microscópio Invertido Efeito Citopatogênico


Células

de linhagem primária �� embrionárias

Ex: Fibroblastos

de linhagem contínua �� tumorais

Ex: HeLa

Hep 2Hep 2

Vero

Evidenciação do crescimento do vírus em cultura de células:

CPE (Efeito Citopatogênico) �� Lise

Formação de sincício

Arredondamento

Corpúsculos de inclusão


Cultura de Células Vero


Cultura de Fibroblastos

� Em Cultura de Células

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Poliovirus tipo 1 Herpes Simplex Virus



Camundongo Recém-Nascido (Baby) Primatas

� Em animais de laboratório :

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Evidenciação do crescimento do vírus em animais:

Paralisia flácida ou espástica

Morte


VÍRUS DNAVÍRUS DNAVÍRUS DNAVÍRUS DNA

• POXVIRIDAE - Varíola, VacíniaMolusco contagioso

• HERPESVIRIDAE - Herpes simples 1, 2

Herpesvírus humano 3 � Varicela-zoster

6- CLASSIFICAÇÃO DOS VÍRUS: Herpes labialHerpes genital

Catapora ou Varicela

Zoster

Herpesvírus humano 3 � Varicela-zoster

Herpesvírus humano 4 � Epstein-Barr

Herpesvírus humano 5 � Citomegalovírus

Herpesvírus humano 8 � Sarcoma de Kaposi

• HEPADNAVIRIDAE - Hepatite B

• ADENOVIRIDAE - Adenovírus

• PAPILLOMAVIRIDAE - HPV


VÍRUS RNAVÍRUS RNAVÍRUS RNAVÍRUS RNA

•REOVIRIDAE - Rotavírus•TOGAVIRIDAE - Rubéola•FLAVIVIRIDAE - Febre amarela, dengue

Hepatite C•PARAMYXOVIRIDAE - Parainfluenza

CaxumbaSarampoRespiratório Sincicial

•ORTHOMYXOVIRIDAE - Influenza A, B, C

Rubéola Congênita �catarata,

•ORTHOMYXOVIRIDAE - Influenza A, B, C•FILOVIRIDAE - Ebola•RHABDOVIRIDAE - Raiva•BUNYAVIRIDAE - Hantavirus•RETROVIRIDAE - HTLV-1, HTLV-2, HIV•PICORNAVIRIDAE - Enterovirus

RhinovirusHepatovirus � Hepatite A

•DELTA – Hepatite Delta•NOROVIRIDAE – Calicivírus ( Hepatite E )

Vírus Norwalk

Rubéola Pós-Natal�catarata, glaucoma, surdez,cardiopatia,microcefalia, retardo mental.

Caxumba

Sarampo


• Vírus invade a célula

• Vírus causa alterações funcionais e estruturais

7- PATOGENICIDADE:

Lise Sincício

Inclusões


8- IMUNIDADE:

• HUMORAL � Não desempenha papel na interrupção da infecção,mas é importante na prevenção de re-infecção

• CELULAR � Importante na interrupção da infecção.Célula infectada é reconhecida e destruída

• INTERFERON

� Células NK� Citotoxicidade mediada por células Ac dependentes:

fagócitos, células NK� Linfócitos T citotóxicos (TDC8)


INTERFERONSINTERFERONSINTERFERONSINTERFERONS

São glicoproteínas de baixo PM, secretadas pelas células eucariotas de animais vertebrados, em resposta a diversos estímulos, dentre eles as infecções virais.

TIPOS DE INTERFERONS

TIPO 1

αααα - produzidos por células epiteliais e leucócitos em resposta a infecções

virais, bacterianas e por protozoários

ββββ - produzidos por fibroblastos

TIPO 2

γγγγ - produzidos por linfócitos TH1 e células “ natural-killer” em resposta a

antígenos, mitógenos e ativadores de células T


ATIVIDADE DOS INTERFERONS

• ATIVIDADE ANTIVIRAL � principalmente α e β

Bloqueio de diversas etapas da replicação viral - estado “anti-viral”

• ATIVIDADE IMUNOMODULADORA � principalmente γ

Ativação generalizada do sistema imune


Estado“anti-viral”

Produção de

Duraçãode 2 – 3 dias

Produção de Moléculas Efetoras

Anti-Virais(MEAVs)


USO TERAPÊUTICO � INTERFERON αααα

• Atividade só em células da mesma espécie• Produzido em E. coli através de DNA recombinante• Contra-indicado para indivíduos < 12 anos e > 65 anos• Não pode ser administrado por via oral

APLICAÇÕES

•Hepatite B, C e Delta•AIDS•HPV•Herpes simples ( uso tópico )•Viroses respiratórias ( spray nasal ) – uso profilático

EFEITOS INDESEJADOS � Febre, calafrios, cefaléia, mialgia, artralgia,

náuseas, vômitos, diarréia


• Microscopia eletrônica – só em laboratórios de pesquisa

• Citologia � Evidenciação de CPE na amostra de tecidoEx: Sincícios - HSV, VZV

Corpúsculos de inclusão - Raiva, CMV• Isolamento e Cultivo para identificação do vírus

• Detecção de material genético viral

Ex: Hibridização in situ com sondas de DNA – CMV, HPV

9- DIAGNÓSTICO DAS VIROSES:

Ex: Hibridização in situ com sondas de DNA – CMV, HPV

Dot blot – detecção de DNA viral em solução

Southern blot – caracterização de DNA viral após clivagem por endonuclease de restrição

Northern blot - caracterização de RNA viral após clivagem por endonuclease de restrição

PCR - detecção de vírus DNA

RT-PCR - detecção de vírus RNA

• Sorologia � Detecção de anticorpos IgM contra o vírus TÉCNICAS : Imunofluorescência, Elisa, Western blot


• Amantadina - Inibe a penetração e desnudamento do vírus• Aciclovir (ZOVIRAX) - Inibe DNA polimerase• Penciclovir• Valaciclovir• Zidovudina (AZT, RETROVIR) - Inibe a transcriptase reversa• Didanosine (DDI) - Inibe a transcriptase reversa

10- AGENTES ANTIVIRAIS :

• Didanosine (DDI) - Inibe a transcriptase reversa• Idoxuridine (HERPESINE) - Inibe replicação de vírus DNA• Ribavirina (VIRAZOLE) - Interfere na síntese de RNAm viral• Saquinavir (INVIRASE) - Inibe a protease• Lamivudina (EPIVIR) - Inibe a transcriptase reversa• Oseltamivir - Inibe neuraminidase do vírus Influenza• Interferon α (Intron A) - Inibe síntese de proteínas virais


TARV

INIBIDORES DA TRANSCRIPTASE REVERSA

⇒ ANÁLOGOS DE NUCLEOSÍDEOS : Zidovudina, Didanosina, Lamivudina, Estavudina, Abacavir

⇒ ANÁLOGOS DE NUCLEOTÍDEOS : Tenofovir⇒ ANÁLOGOS DE NUCLEOTÍDEOS : Tenofovir

⇒ NÃO-ANÁLOGOS DE NUCLEOSÍDEOS : Efavirenz, Nevirapina

INIBIDORES DA PROTEASE

Amprenavir, Indinavir, Atazanavir, Nelfinavir, Ritonavir, Saquinavir,

Norvirapina


OUTROS USOS

⇒LAMIVUDINA : Hepatite B

⇒ RIBAVIRINA : Hepatite C Viroses respiratórias (Influenza, Respiratório sincicial)

AerosolAerosol

⇒AMANTADINA, RIMANTADINA : Influenza A

⇒ACICLOVIR : Herpes simplesHerpes zoster

⇒INTERFERON αααα : Hepatite B, C, DeltaAIDS


FIM

características gerais dos vírus

Documents

vrus envelopados

viroses respiratrias

estado anti

efeito citopatognico

infeces virais

envelope viral

interferon

viral