microscopia especular

MICROSCOPIA ESPECULAR

HOSPITAL ESPÍRITO SANTO, ÉVORA

Maria Inês Rodrigues

Quarta-feira, 16 de Outubro de 13

ENDOTÉLIO NORMAL

DENSIDADE ENDOTELIAL

POLIMEGATISMO

PLEOMORFISMO

APLICAÇÕES CLÍNICAS

TAKE HOME MESSAGES

MORFOLOGIA CELULAR ENDOTELIAL

DETERMINAÇÃO DA ECD

TIPOS DE MICROSCÓPIOS

PRINCÍPIOS ÓPTICOS

INDICAÇÕES

INTRODUÇÃO

IntroduçãoMICROSCOPIA ESPECULAR

É uma técnica de imagem querática não invasiva que permite observar e registar a função e estrutura do endotélio querático.

Permite uma magnificação 100x superior à biomicroscopia convencional.

Todos os microscópios especulares clínicos se baseiam no microscópio desenhado por Maurice, em 1968.

Existem múltiplos aparelhos distintos, cada um com a sua calibração e magnificação próprias.

Todos os microscópios especulares clínicos se baseiam no microscópio desenhado por Maurice, em 1968.

IndicaçõesMICROSCOPIA ESPECULAR

Avaliar córneas patológicas, nomeadamente córnea guttata, irregularidades da Descemet, endoteliopatia por uso de lentes de contacto e distrofias posteriores.

Avaliar a reserva funcional endotelial previamente a qualquer cirurgia intra-ocular.

Avaliação de córneas de dadores previamente a queratoplastia penetrante.

PRÍNCIPIOS ÓPTICOS

Ao atingir uma superfície pode ser reflectida, absorvida ou

transmitida.

CÓRNEA

transmitida.

CÓRNEA

transmitida.

Apresenta múltiplas interfaces com índices refractivos diferentes.

CÓRNEA

REFLEXÃO

transmitida.

Quando o ângulo de reflexão da luz é igual ao ângulo de incidência ocorre reflexão especular da luz, ou seja, como se fosse um espelho.

CÓRNEA

REFLEXÃO

transmitida.

CÓRNEA REGISTO

REFLEXÃO

transmitida.

CÓRNEA REGISTO

A luz reflectida especularmente é capturada pelo microscópio e transformada numa imagem.

REFLEXÃO

transmitida.

Princípios ópticosMICROSCOPIA ESPECULAR

Tipos de microscópiosMICROSCOPIA ESPECULAR

Tipos de microscópios

CONTACTO

NÃO CONTACTO

CONTACTO

NÃO CONTACTO

Consiste num microscópio com uma lente que aplana a córnea, reduzindo assim a sua curvatura e aumentando a área de reflexo especular.

CONTACTO

NÃO CONTACTO

Utilizam tecnologia de focagem de imagem automatizada. A córnea não sofre aplanação.

CONTACTO

NÃO CONTACTO

Utilizam tecnologia de focagem de imagem automatizada. A córnea não sofre aplanação.

CONTACTO

Ambos utilizam sistemas computorizados de captura de imagem e análise da morfologia da célula endotelial.

CONTACTO

CONTACTONÃO CONTACTO

◆ Keeler Instruments model SP-580

◆ HAI Labs model CL-1000xyz

◆ TOMEY Corp. model EM-1000

◆ Keeler Instruments model SP-580

◆ HAI Labs model CL-1000xyz

◆ TOMEY Corp. model EM-1000

◆ Bio Optics Inc. model LMS-12000

◆ Topcon model SP-series

◆ Konan model ROBO SP-series

◆ Nidek model CM-530

Determinação da densidade endotelialMICROSCOPIA ESPECULAR

Método de comparação: comparação com um padrão em favo de mel pré-determinado

Método de moldura: contagem das células numa moldura definida.

Método de canto: localiza a intersecção de bordos celulares e transfere a imagem para um polígono em formato digital de forma a calcular a área celular.

Método do centro: determina área celular de uma célula e das suas adjecentes (center-to-center)

Morfologia normal da célula endotelialMICROSCOPIA ESPECULAR

- Células com 6 lados, hexagonais, regulares.

Alterada por:- doença- trauma- toxicidade química- lentes de contacto

Aumento da área celular

Diminuição da densidade celular

Alteração da morfologia celular

Endotélio normalMICROSCOPIA ESPECULAR

Densidade endotelial (CD): nº células/mm2

Área celular média (AVE) +- SD (μm2)

Forma (6A): percentagem de células hexagonais

Coeficiente de variação (CV)

Densidade endotelialMICROSCOPIA ESPECULAR

Contagem endotelial de córnea normal: 350.000

Densidade endotelial normal à nascença: 3000-4000 células/mm2

Densidade endotelial normal do adulto: 2400 células/mm2

Densidade endotelial normal do idoso: 2000 células/mm2

PolimegatismoMICROSCOPIA ESPECULAR

Sinal de disfunção endotelial precoce.

Variação anormal no tamanho das células endoteliais.

Contagem endotelial (CD) diminuída.

Coeficiente de variação (CV) superior a 40(normal 27-28)

PleomorfismoMICROSCOPIA ESPECULAR

Outro sinal de disfunção endotelial precoce.

Variação anormal na forma das células endoteliais.

Indicador da forma (6A) inferior a 50.

Pleomorfismo e PolimegatismoMICROSCOPIA ESPECULAR

- A, células alongadas.

- B, células com bordos arredondados.

- C e D, células redondas.

- E, células quadradas.

- F, células triangulares.

Densidade endotelial normal com pleomorfismo e polimegatismo

Contagem endotelial normal mas grande variabilidade no tamanho e forma celulares.

Contagem celular sem variáveis da forma celular pode ser enganadora.

Contagem endotelial normal mas grande variabilidade no tamanho e forma celulares.

Aplicações clínicasMICROSCOPIA ESPECULAR

A densidade endotelial decresce com a idade.

Com contagens entre 400 e 800 células/mm2 verifica-se edema querático ocorre.

Verificam-se uma diminuição da contagem endotelial até 30% em cirurgias no segmento anterior.

Para uma cirurgia de segmento anterior segura a contagem endotelial deve ser no mínimo 1200-1500 células/mm2.

Aplicações clínicas - Anomalias váriasMICROSCOPIA ESPECULAR

- A, excrescências isoladas (córnea guttata).

- B, excrescências confluentes.

- C e D, estruturas intra-celulares brilhantes.

- E, depósitos endoteliais pigmentados.

- F, G e H, estruturas intra-celulares escuras.

Aplicações clínicas - Córnea gutattaMICROSCOPIA ESPECULAR

Envelhecimento

Doença de Fuchs

Envelhecimento

Doença de Fuchs

Envelhecimento

Inflamação

Aplicações clínicas - Implante de LIO CAMICROSCOPIA ESPECULAR

Aplicações clínicas - uso prolongado de lentes de contactoMICROSCOPIA ESPECULAR

TAKE HOME MESSAGES

ENDOTÉLIO

TAKE HOME MESSAGES

ENDOTÉLIO

Análise do reflexo especular

TAKE HOME MESSAGES

ENDOTÉLIO

PLEOMORFISMO

TAKE HOME MESSAGES

ENDOTÉLIO

PLEOMORFISMO

Percentagem das células com 6 lados inferior a 50%

TAKE HOME MESSAGES

ENDOTÉLIO

PLEOMORFISMO

DENSIDADE

TAKE HOME MESSAGES

Normal 2500 células/mm2 (adulto)ENDOTÉLIO

PLEOMORFISMO

DENSIDADE

TAKE HOME MESSAGES

PLEOMORFISMO

POLIMEGATISMO

DENSIDADE

TAKE HOME MESSAGES

PLEOMORFISMO

POLIMEGATISMO

Coeficiente variação > 0.40Percentagem das células com 6 lados inferior a 50%

DENSIDADE

TAKE HOME MESSAGES

OBRIGADA

BOM FIM-DE-SEMANA

Maria Inês Rodrigues mariainesrodrigues@gmail.com

microscopia especular

Health & Medicine

fundamentos microscopia teoria da pratica

microscopia novo

aula microscopia

escrita especular, gênero e sexualidade na · escrita...

alta resolução microscopia 4

apostila de microscopia 1

microscopia aplicada a polímeros

ricardo holzchuh - usp · 2011. 12. 1. · ricardo holzchuh...

aulas 01-histórico-e-microscopia

microscopia eletrÔnica de varredura prof

aula de microscopia

workshop microscopia de contraste em campo escuro erisa...

microscopia - edisciplinas.usp.br

técnicas de imunologia prof.doutor josé cabeda microscopia...

microscopia de polarização

microscopia forca atomica

efeito de entorno urbano especular na iluminaÇÃo …...

estudo das amostras endoteliais de ......ii melo, cinthia...

técnicas em microscopia reforço

estereoquímica fábio herbst florenzano. isomeria...