microscopia especular

MICROSCOPIA ESPECULAR

HOSPITAL ESPÍRITO SANTO, ÉVORA

Maria Inês Rodrigues

Quarta-feira, 16 de Outubro de 13

ENDOTÉLIO NORMAL

DENSIDADE ENDOTELIAL

POLIMEGATISMO

PLEOMORFISMO

APLICAÇÕES CLÍNICAS

TAKE HOME MESSAGES

MORFOLOGIA CELULAR ENDOTELIAL

DETERMINAÇÃO DA ECD

TIPOS DE MICROSCÓPIOS

PRINCÍPIOS ÓPTICOS

INDICAÇÕES

INTRODUÇÃO


IntroduçãoMICROSCOPIA ESPECULAR



É uma técnica de imagem querática não invasiva que permite observar e registar a função e estrutura do endotélio querático.



Permite uma magnificação 100x superior à biomicroscopia convencional.






Todos os microscópios especulares clínicos se baseiam no microscópio desenhado por Maurice, em 1968.




Existem múltiplos aparelhos distintos, cada um com a sua calibração e magnificação próprias.


Todos os microscópios especulares clínicos se baseiam no microscópio desenhado por Maurice, em 1968.


IndicaçõesMICROSCOPIA ESPECULAR



Avaliar córneas patológicas, nomeadamente córnea guttata, irregularidades da Descemet, endoteliopatia por uso de lentes de contacto e distrofias posteriores.



Avaliar a reserva funcional endotelial previamente a qualquer cirurgia intra-ocular.




Avaliar a reserva funcional endotelial previamente a qualquer cirurgia intra-ocular.

Avaliação de córneas de dadores previamente a queratoplastia penetrante.




PRÍNCIPIOS ÓPTICOS


LUZ




LUZ



Ao atingir uma superfície pode ser reflectida, absorvida ou

transmitida.


LUZ

CÓRNEA




transmitida.


LUZ

CÓRNEA




transmitida.

Apresenta múltiplas interfaces com índices refractivos diferentes.


LUZ

CÓRNEA

REFLEXÃO




transmitida.



Quando o ângulo de reflexão da luz é igual ao ângulo de incidência ocorre reflexão especular da luz, ou seja, como se fosse um espelho.

LUZ

CÓRNEA

REFLEXÃO




transmitida.




LUZ

CÓRNEA REGISTO

REFLEXÃO




transmitida.




LUZ

CÓRNEA REGISTO

A luz reflectida especularmente é capturada pelo microscópio e transformada numa imagem.

REFLEXÃO




transmitida.



Princípios ópticosMICROSCOPIA ESPECULAR


Tipos de microscópiosMICROSCOPIA ESPECULAR


Tipos de microscópios

CONTACTO



NÃO CONTACTO


CONTACTO



NÃO CONTACTO

Consiste num microscópio com uma lente que aplana a córnea, reduzindo assim a sua curvatura e aumentando a área de reflexo especular.


CONTACTO



NÃO CONTACTO


Utilizam tecnologia de focagem de imagem automatizada. A córnea não sofre aplanação.


CONTACTO



NÃO CONTACTO


Utilizam tecnologia de focagem de imagem automatizada. A córnea não sofre aplanação.


CONTACTO


Ambos utilizam sistemas computorizados de captura de imagem e análise da morfologia da célula endotelial.



CONTACTO



CONTACTONÃO CONTACTO




◆ Keeler Instruments model SP-580

◆ HAI Labs model CL-1000xyz

◆ TOMEY Corp. model EM-1000




◆ Keeler Instruments model SP-580

◆ HAI Labs model CL-1000xyz

◆ TOMEY Corp. model EM-1000

◆ Bio Optics Inc. model LMS-12000

◆ Topcon model SP-series

◆ Konan model ROBO SP-series

◆ Nidek model CM-530


Determinação da densidade endotelialMICROSCOPIA ESPECULAR



Método de comparação: comparação com um padrão em favo de mel pré-determinado




Método de moldura: contagem das células numa moldura definida.





Método de canto: localiza a intersecção de bordos celulares e transfere a imagem para um polígono em formato digital de forma a calcular a área celular.





Método de canto: localiza a intersecção de bordos celulares e transfere a imagem para um polígono em formato digital de forma a calcular a área celular.

Método do centro: determina área celular de uma célula e das suas adjecentes (center-to-center)



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Morfologia normal da célula endotelialMICROSCOPIA ESPECULAR



- Células com 6 lados, hexagonais, regulares.




Alterada por:- doença- trauma- toxicidade química- lentes de contacto




Alterada por:- doença- trauma- toxicidade química- lentes de contacto

Aumento da área celular

Diminuição da densidade celular

Alteração da morfologia celular


Endotélio normalMICROSCOPIA ESPECULAR



Densidade endotelial (CD): nº células/mm2




Área celular média (AVE) +- SD (μm2)




Forma (6A): percentagem de células hexagonais





Forma (6A): percentagem de células hexagonais

Coeficiente de variação (CV)



Densidade endotelialMICROSCOPIA ESPECULAR



Contagem endotelial de córnea normal: 350.000



Densidade endotelial normal à nascença: 3000-4000 células/mm2






Densidade endotelial normal do adulto: 2400 células/mm2





Densidade endotelial normal do adulto: 2400 células/mm2

Densidade endotelial normal do idoso: 2000 células/mm2


PolimegatismoMICROSCOPIA ESPECULAR



Sinal de disfunção endotelial precoce.




Variação anormal no tamanho das células endoteliais.



Contagem endotelial (CD) diminuída.






Coeficiente de variação (CV) superior a 40(normal 27-28)




PleomorfismoMICROSCOPIA ESPECULAR



Outro sinal de disfunção endotelial precoce.




Variação anormal na forma das células endoteliais.




Indicador da forma (6A) inferior a 50.




Pleomorfismo e PolimegatismoMICROSCOPIA ESPECULAR




- A, células alongadas.





- B, células com bordos arredondados.






- C e D, células redondas.






- E, células quadradas.







- E, células quadradas.


- F, células triangulares.


Densidade endotelial normal com pleomorfismo e polimegatismo





Contagem endotelial normal mas grande variabilidade no tamanho e forma celulares.




Contagem celular sem variáveis da forma celular pode ser enganadora.

Contagem endotelial normal mas grande variabilidade no tamanho e forma celulares.


Aplicações clínicasMICROSCOPIA ESPECULAR



A densidade endotelial decresce com a idade.




Com contagens entre 400 e 800 células/mm2 verifica-se edema querático ocorre.





Verificam-se uma diminuição da contagem endotelial até 30% em cirurgias no segmento anterior.





Verificam-se uma diminuição da contagem endotelial até 30% em cirurgias no segmento anterior.

Para uma cirurgia de segmento anterior segura a contagem endotelial deve ser no mínimo 1200-1500 células/mm2.


Aplicações clínicas - Anomalias váriasMICROSCOPIA ESPECULAR



- A, excrescências isoladas (córnea guttata).




- B, excrescências confluentes.





- C e D, estruturas intra-celulares brilhantes.






- E, depósitos endoteliais pigmentados.






- E, depósitos endoteliais pigmentados.

- F, G e H, estruturas intra-celulares escuras.


Aplicações clínicas - Córnea gutattaMICROSCOPIA ESPECULAR



Envelhecimento



Doença de Fuchs

Envelhecimento



Doença de Fuchs

Envelhecimento

Inflamação


Aplicações clínicas - Implante de LIO CAMICROSCOPIA ESPECULAR


Aplicações clínicas - uso prolongado de lentes de contactoMICROSCOPIA ESPECULAR



TAKE HOME MESSAGES


ENDOTÉLIO


TAKE HOME MESSAGES


ENDOTÉLIO

Análise do reflexo especular


TAKE HOME MESSAGES


ENDOTÉLIO

PLEOMORFISMO



TAKE HOME MESSAGES


ENDOTÉLIO

PLEOMORFISMO


Percentagem das células com 6 lados inferior a 50%


TAKE HOME MESSAGES


ENDOTÉLIO

PLEOMORFISMO



DENSIDADE


TAKE HOME MESSAGES


Normal 2500 células/mm2 (adulto)ENDOTÉLIO

PLEOMORFISMO



DENSIDADE


TAKE HOME MESSAGES



PLEOMORFISMO


POLIMEGATISMO


DENSIDADE


TAKE HOME MESSAGES



PLEOMORFISMO


POLIMEGATISMO

Coeficiente variação > 0.40Percentagem das células com 6 lados inferior a 50%

DENSIDADE


TAKE HOME MESSAGES


OBRIGADA

BOM FIM-DE-SEMANA

Maria Inês Rodrigues [email protected]


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