influência do genótipo no potencial regenerativo de feijão-caupi cultivado in vitro

Influência do genótipo no potencial regenerativo de feijão-caupi cultivado

in vitro

Dra. Laureen Michelle Houllou-KidoLab. Genética Molecular - UFPE

Cultura de tecidos no gênero Vigna• V. radiata, V. mungo, V. vexillata, V. sinensis,

etc

• Tecidos vegetais– Cotilédones– Eixo embrionário– Ápices caulinares– Folhas jovens

• Recalcitrância

Dados gerais

• Quantidade de fitorregulador (BAP, TDZ)– 2 a 35 mg.L-1

• Percentual de regeneração– De 1 a 52%

• Número de plantas por explante– De 1 a 12 / explante

Cultivares testadas

• IPA 206• IPA 207• IT 85F• BR 14 Mulato• Guariba

Taxas de regeneração

IPA 206 Cotilédone 65% Eixo Emb. 70%

IPA 207 Cotilédone 40% Eixo Emb. 35%

BR 14 Mulato Cotilédone 5% Eixo Emb. 10%

Demais Cotilédone 0% Eixo Emb. 0%

Indução de regeneração

• Fitorregulador: – BAP ou TDZ (sugestão – tratamento durante

15 dias com 15 mg.L-1 de BAP com posterior transferência para meio zero)

• β-arabinogalactan (efeito estimulatório da regeneração via cotilédone)

Necessidade de fitorregulador• IPA 206 e IPA 207

– Regeneração ocorre na ausência de fitorregulador

– BAP acelera o processo regenerativo e estimula a regeneração.

• Demais cultivares testadas– Necessitam de um estímulo (BAP) para iniciar

a regeneração

• Hipóteses:

– Diferença nas quantidades endógenas de fitorregulador

– Diferença na quantidade dos receptores na membrana celular (Células responsivas)

Características indicadoras de potencial regenerativo

• Intumescimento do tecido

• Alteração da coloração– Parcial ou total

Regeneração via cotilédones

• Início– Com aproximadamente três semanas

• Região do explante– Área em que foi retirado o embrião

Regeneração via cotilédones

IPA 206IT85F

Regeneração de meristema

Diferentes momentos da regeneração in vitro de feijão-caupi a partir de cotilédones

Cotilédone

Organogênese direta

Organogênese indireta

• Regeneração via cotilédones

– Associada a restos da epiderme do embrião

– Observada, na maioria dos casos, em apenas um dos cotilédones

Regeneração via eixo embrionário

• Início– Com aproximadamente quatro semanas

• Região do explante– Próxima a região do meristema apical

(polaridade da regeneração)

Meristemas

Organogênese direta

IPA206

IPA207

Eixo embrionário

Indução de calos organogênicos

• Ambos explantes respondem ao 2,4 –D

• Resposta também é cultivar específica

• Coloração esverdeada do calo indica potencial regenerativo

• Efeito do NaCl

Indução de calos

IPA 206

Aclimatação

• Baixa taxa de sobrevivência (20%)

• Alternativa – alteração do hormônio para indução do

desenvolvimento do sistema radicular– Alteração do substrato utilizado na

aclimatação

Desenvolvimento in vivo das plantas regeneradas

• Todas as plantas produziram flores e sementes (não afetou a fertilidade)

• Variação somaclonal – Novas características (porte, precocidade)

• Características variantes são herdáveis (S2).

Agradecimento

• UFPE• EMBRAPA

• IPA• UPE

• FACEPE• BNB

• FINEP