Ácidos nucleicos

18
MONITORIABIOQUIMICA CURTA-NOS NO FACEBOOK: WWW.FACEBOOK.COM/LGBIOQ

Upload: hugo-eduardo

Post on 10-Jul-2015

103 views

Category:

Education


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: Ácidos Nucleicos

MONITORIABIOQUIMICA

CURTA-NOS NO FACEBOOK:WWW.FACEBOOK.COM/LGBIOQ

Page 2: Ácidos Nucleicos

Ácidos NucleicosUniversidade Federal do Maranhão

Page 3: Ácidos Nucleicos

Introdução

• Os ácido nucleicos ocorrem em todas as célu-las vivas e são responsáveis por:

• Armazenamento e transmissão de informação genética;

• Tradução dessa informação genética, expressa pela síntese precisa das proteínas característi-cas.

Page 4: Ácidos Nucleicos

Introdução• Os ácidos nucleicos são biopolímeros de

mononucleotídeos ou nucleotídeos, de alto peso molecular, unidos por ligações covalentes do tipo fosfodiéster entre C5 de um mononucleotídeo e C3 do mononucletídeo seguinte, em sentido vertical - daí ser 5’-3’.

• Cada mononucleotído ou nucleotídeo é composto de:

• Açúcar;

• Base nitrogenada;

• Fosfato.

Nucleosídeo

Page 5: Ácidos Nucleicos

SEN

TID

O V

ERT

ICA

L

SENTIDO HORIZONTAL

TERMINAL3’

TERMINAL5’

TERMINAL3’

TERMINAL5’

Page 6: Ácidos Nucleicos

Introdução• As diferenças entre os ácidos nucleicos re-

side no nucleosídeo:

• O ácido desoxirribonucleico (ADN) apresenta o açúcar 2-desoxirribose e as bases nitrogenadas guanina (G), citosina (C), adenina (A) e timina (T).

• O ácido ribonucleico (ARN) apresenta o açúcar D-ribose e as bases nitrogenadas guanina (G), citosina (C), adenina (A) e uracila (U).

Page 7: Ácidos Nucleicos

• A 2-desoxirribose ou D-desoxirribose é uma aldopentose.

D-Ribose vs. 2-Desoxirribose

• A D-ribose também é uma aldopentose.

x

2 2

Page 8: Ácidos Nucleicos

ADN• O ADN é composto de uma dupla-fita unida

através de ponte de hidrogênio entre bases nitrogenadas em sentido horizontal.

• Existem 2 pontes de hidrogênio entre A e T e 3 pontes de hidrogênio entre G e C, sendo estas, portanto, mais estáveis.

• Na célula humana existe:

• ADN celular em maior concentração;

• ADN mitocondrial, de origem materna.

Page 9: Ácidos Nucleicos

Pontes dehidrogênio

Page 10: Ácidos Nucleicos

ARN

• O ARN é composto de fita simples, sinteti-zada a partir de mecanismos de transcrição.

• O ARN possui diferentes classes:

• ARN mensageiro ou ARNm;

• ARN ribossômico ou ARNr;

• ARN transportador ou ARNt;

• Pequenas moléculas de RNA.

Page 11: Ácidos Nucleicos

ARNm

• O ARNm transmite a informação genética ao ribossomo partir de ADN.

Page 12: Ácidos Nucleicos

ARNr

• O ARNr é um dos componentes do ribossomo, decodificando o ARNm.

• O ARNr da subunidade grande do ribossomo ou atua como ribozima para formação de liga-ções peptídicas.

• O ARNr possibilita a síntese de aminóacidos únicos ou de cadeias peptídicas diversas.

Page 13: Ácidos Nucleicos

ARNt

• O ARNt é responsável pelo transporte de aminoácidos únicos ou cadeias peptídicas de tamanhos diversos aos sítios celulares de carência.

Page 14: Ácidos Nucleicos

Extração de ADNAlquilbenzeno linear sulfonado

Cloreto de sódio

Álcool etílico 95GL (álcool etílico a 95%) a frio

❖ Fundamento teórico: sob a ação lítica do alquilbenzeno linear sulfonado, as bicamadas lipídicas das membranas celular e nuclear são rompidas, de forma a facilitar a ação neutralizante do cloreto de sódio sobre as cargas negativas dos grupos fosfatos dispotos na molécula de ADN, assim diminuindo sua solubilidade e induzindo seu agregamento. O álcool etílico a frio potencializa a indução de agregamento do cloreto de sódio.

Page 15: Ácidos Nucleicos

Procedimentos Práticos

100mL deágua destilada

60mL dedetergente

5g de NaCl

ESMAGARAD

ICIO

NAR AO

BÉQU

ER PREPARADO

Banho termostáticopor cerca de 15min

Page 16: Ácidos Nucleicos

Procedimentos Práticos

Banho de gelopor 5min

Filtração emnovo recipiente

Adicionar 100mL de álcool etílico a frio

vagarosamente pelas bordas do novo

recipiente

Fazer movimentoscirculares

Page 17: Ácidos Nucleicos

Procedimentos Práticos❖ Após a devida realização do experimento espera-se o aparecimento de

material biológico agregado, caracterizado como ADN.

O alquilbenzeno linear sulfonado é um surfactante aniônico presente em detergentes e cuja citotoxicidade reside em seu anel aromático estar muito próximo da extremidade de sua longa cadeia alquila, isto é, seus grupamentos polar e apolar são próximos; assim, há pertubações nos fosfolípides das membranas plasmática e nuclear e lise. O cloreto de sódio é diponibilizador de cátions, que logo se associam aos grupamentos fosfato, que se comportam como ânions, neutralizando a molécula de ADN e diminuindo sua solubilidade. Por fim, o álcool etílico a frio desidrata a molécula de ADN, diminuindo ainda mais sua solubilidade, que então se retira da solução e se precipita.

Page 18: Ácidos Nucleicos

Referências

• HIRANO, ZMB et al. Bioquímica - Manual Prático. 1 ed. Blumenau: Edifurb, 2008.

• DOS SANTOS, APSA et al. Bioquímica Prática. Disponível em: <http://www.repositorio.ufma.br:8080/jspui/handle/1/445>. Acesso em: 3 set 2013.