2. introduÇÃo (estado da arte) · ˘ ˇˆ˙ ˝ ˝˝ ˆ˛ ! % )-.’ 2 ) $0 % $ ’ $ ). # $ ’...
TRANSCRIPT
������������� �
2. INTRODUÇÃO (ESTADO DA ARTE)
�������������������������������
������������� �
�
�������������������������������
������������� �
�
2.1. ÁCIDOS BILIARES
� !"�#! $� $%�& �% � ' !�(!��)#*� #*�$+ � $� &#��'�&��$�!�#' $�
,�$%-#�' $���� ��*$%���"+ � $��'� $�)�.��#$���%/�� � ��0'� � �$()1& �% �������2�
' !� � )3'%�* �' �4$$ ��$%�).'#��� �!& #%5�'�����$(��%#!���"+ �� �
' �%6% � � #����$! � ,(!�� � � ���!�.�� �!) #�� $%�� ��$$#%�"+ � ��'���
$ )#%( �$ )#���7(0!�'�� $��'� $�)�.��#$�� $�$($��$&'% $����.0%�' $��!��$�
� 8�9��$�&�����$�� � �(% #��+ �& � *�%�#�!�'� ��#2������7(�� 4 #!��
)#*2� ��7(�#�!�% �)� 7(0!�' �7(�/���#�:+ �&�#��$$��%#!���"+ ��
� $� $()1& �% $� $�(��%$� 4�.�#! $� ��)� 7(0!�'�� �$()1& �% � ������� �
)� $0�%$� $� �'� $�)�.��#$� �$()1& �% �������2� � $(�� '�#'(.�"+ ��%# 1& #% 1
,&�%�'�� �$()1& �% �������2� $(& #%� $��(!�' �,'�!�% ��&# 4(�� ��� $(��
$%#(%(#��7(0!�'���%#��!�$� ��.��$()1& �% ���������
�
�!� �8 �1�� � .4� ;���($� �&#$�% (� <� ���*#$��� � =#�)(#� 2�
�.!��,�2� �� $(�� �$$#%�"+ � $ )#� ' .$%# .� �>�)#� �, .$%#��?�2� 7(� .,�
' �'(� �%0%(. �� '�%�@�A��� !"�*���$$�!�(!�$4 #" ���B��� $�&�#��
.('��#�������������������������������!��8�82�;���($��&#')(1
$�7(� � ' &# $%�� .� & ��� $#� 6�� � ' !� 4 #!�"+ � � �'� � ' .5��' 2�(!�
&#'(#$ #�$%#(%(#�.� $��'� $�)�.��#$2�$(#��� ��0��������7(�'#%�!�%� �
' .$%# .�$%�#���>.��� ?2� �& �% ��*�$%��$%#(%(#�.��)� 7(0!�' 2�� $��'� $�
)�.��#$�� �!� �8�C2� #')(� &. $� $($� $4 #" $� !� .('��#� �$� $%#(%(#�$� �
*�#� $�$%#-�$2��#' �,'#���$(��$!.,��"��$%#(%(#�.�' !� �' .$%# .2� �
�#/!� �� ).� ��D(0!�'����.��$� �%0%(. ��� $(��� ).� E'%(#2� &# �(�'����!�
�$% ' .! � �� ��� � �:!)# � � �8�C2� >� �$%�%(%� �� 4� �%# .$� ��� �,�#�
� ��'%� ��F�%,��%,#��()$%��'$��''(##���� �����%(#?� @�A2� �+ ��6�� G*��$�
$ )#� � $(� %#�)�., � �%/� $$� ! !�% 2� � #&#$�%�� (!� ! �(!�% � �
#(�"+ 2�'.�#:�2���!�$��! /$%���@�A����$(�%#�)�., �$()$7(�%�&#!�%�(� �
�$ .�!�% 2��'�#�'%#�:�"+ �! .'(.�#2��%#� (%# $�$%#-�$2��$�*�%�!���$� �
�#(& � �� �.�& $$ .G*�$�2� 7(� !��$� %�#� .* (� <� .('��"+ � �� $(�� 4(�"+ �
)� .-��'��@�A��
�
�������������������������������
������������� �
�!�� &$7(�$�� )�).� �#�4�'�� � � ! % #� � )($'�� H.��� ! $%#�� 7(� �
�#%�� �!��$���%�� 2�#��$%� 2�#4#�%����'� $��$��$�)�.��#$2�4 ��&().�'� �!�
�C8B����0��%/��8CB��'#'���8 ��� $�2���.�%#�%(#��! $%#��7(� $���*$%��� #$�
$%���#�� $� �'�#�!��� $%(�#� �$� (�$� *��$�!%�)-.�'�$2��.%#��%�*�$2�7(�
.*�!�<� ����������������������� ��������� �� ������� @�2� �A2� ��$�
'/.(.�$� � 40�� �� �(#��%� $%� � � 4 #�!� )%��$� % �$� �$� $%#(%(#�$�
7(0!�'�$� $� *�#� $� ' !& $% $� �* .*� $2� &(#�4�'��$� �.�(!�$� �$� �:�!�$�
�* .*��$2�� ���'� (1$���.('��"+ � $�!'���$! $��' �%# . �7(� $��'� $�
)�.��#$2�� (%# $� ' !& $% $2� 6#'!� $ )#�$%�$� *��$�!%�)-.�'�$� �$0�%$��
�$$�'��.!�%2� $%( (1$� � ' �%# . � & #� 4)�'I� 7(� ' ##� �%# � �
,&�%-'�% 2�' !��#�����'�J�'���$ )#� $�*�% $�!%�)-.�' $�7(� ' ##!�� �
'�% &.�$!��� ��!)/!� (#��%� $%� � � $� #' �,'(� �� �!& #%5�'��� ��
��5!�'����'�#'(.�"+ ��%# 1& #% 1,&�%�'�� $��'� $�)�.��#$�@KA�&�#��6&.�'�#�
(!� �G!# � .*� � � &�% . ���$� 7(� .,� $%�*�!� �$$ '���$2� � '.�#�4�'�#� ��
4(�"+ � %#��%� $� �'� $� )�.��#$� (#��%� �� ��$%+ � � � #(#�$2� � ��
�)$ #"+ ���'� $�� # $��*�%�!���$�.�& $$ .G*�$� ���%$%�� �&�#����' ##�%�
$���(0���� �+ � ����� '�#�'%#�:��$� �$� $�%(�"L$� !� 7(� �� )0.�$� &# (:� ���
*$0'(.��)�.��#�'�.'(. $��*�#� $�%�& $�@BA��
�
�!� �8C�2� $(#�� � &#�!�# � �#%�� � $ )#� ��������������
������������ � �'� $�)�.��#$� @�A2� . � � $�(� � !��8C��&. �%#�)�., ��
M�!$� N O#� � ' .�) #� #$� @CA2� 7(� $%(�#�!� � %#��$& #%� � �'� �
%�(# '-.�' � � ��%#� #� �,&�%-'�% �&�#���$�*��$�)�.��#$2��'�#�'%#�:�#�!�&.��
&#�!�#��*:� $�%#��$& #%� #$��* .*� $���!��88�2�H�#��' .�) #� #$�@8A�
'. ��#�!� � '�#�'%#�:�#�!� � %#��$& #%� #2� 7(� � � #�% � /� #$& �$�*.� &.��
'�&%(#�� � �'� $� )�.��#$2� 7(� '�#'(.�!� ��� *��� & #%�2� &�#�� � ��%#� #� �
,&�%-'�% ���������� (' �%!& �& �$�!��88����(.���F$ ���' .�) #� #$�
@� A� '. ��#�!� � '�#�'%#�:�#�!� � %#��$& #%� #� ��%$%���.� ���N��2� 7(� � �
,�!$%#� /� #$& �$�*.� &.�� '�&%(#�� � �'� $� )�.��#$� ' �%� $� � � .G!��
��%$%���.��0. ��2�&�#����' ##�%�$���(0�����*���& #%����
�!��' �$(.%��� �H.���' !��$�&�.�*#�$1',�*�>)�.��'��%#��$& #%#$?�
#������ (!�� .�$%�� � '#'�� � � �C� �#%�� $� � 7(� ! $%#�� 7(� $%� %#�)�., �
' �%��(�2� � !��$� #'�%!�%� $� '�%#�� ��� )($'�� � %#��$& #%� #$�
!!)#���#$� ��%#�1'.(.�#$2� � !��!�%2� �%#� � '�% &.�$!�� � $�
&# 6�$ !�$�@��A��
�������������������������������
��������K���� �
�
�$� �888� �%/�� � &#$�%2�%!1$� ��$�$%� � ���)($'�� $� #'&% #$�
�('.�#$� � !!)#���#$� 7(� $(& #%�!� �� ����� ����������� ��
�����������-'#�� ��&�#�'#�� �� $��'� $�)�.��#$���
�!��8882�#' �,'1$�7(� $��'� $�)�.��#$�$+ �.���� $P�� ��$%�$� �
#'&% #��('.�#�=Q���=�#�$ ��Q��'&% #��@��2���2���2��K2��BA2��7(��%#�*/$�
$%� ' !���!���, ! $%�$� � ' .$%# .2� $� �'� $�)�.��#$2� � $� .0&� $�
!��#�.�@��A��D(�� � $��'� $�)�.��#$�$� .���!�� �#'&% #��('.�#�=Q��$%�
�$&�#���� 6&#$$+ � � #'&% #��('.�#� �R�� ��, #%�R%# �!#� ��#%�#��7(2�
& #� $(��*:2�). 7(��� �� 6&#$$+ � $� ��$��S�������S�CN�� @�CA�������
�S����� ' �4�'�� �� �:�!�� �α1,�# 6�.�$2� 7(� '�%�.�$�� � &�$$ � .�!�%��%� ��
$0�%$���'� $�)�.��#$��7(�� �#&#�!� �#(:���&# ("+ �$%$�' !& $% $�
@�CA�� �� ��� �S�CN�� ' �4�'�� �� �:�!�� ��α1,�# 6�.�$2� 7(� /� �� �:�!��
#$& �$�*.� & #� #�(.�#� �� #�:+ � �'� $� '-.�' P7(� $ 6�'-.�' 2� ' !� $/#��$�
�!&.�'�"L$� ��� �)$ #"+ � ��%$%���.� � �'� $� � # $2� � *�%�!���$� .�& $$ .G*�$�
@�CA�� ��#��% #��#�$%�� '�$'�%��� ' !�� ������!��$� ��%#$$��%2� � ' �%# . �
$%�$�(�$��:�!�$�/������! (.� ��#'%�!�%�&. �#'&% #��('.�#�E�R1��
�E�*#� �'&% #� R ! . �1��2� 7(� %!� ' ! � .���� $� #�'���$� �.�(�$�
4 $4 .0&� $�@�8A���$%�E�R1��/�%�!)/!�#&#�!� 2�7(�� � �����R��/��'%�*� �
@�CA� & #� .*�"+ � �� ' �'�%#�"+ � � �'� $� )�.��#$� !� 6'$$ �� � #� $%��
'�$'�%���#�'"L$2��* .*� �=Q�P�R�PE�R1�2� $��'� $�)�.��#$�' !���!���
, ! $%�$� � ' .$%# .� �&#'(#$ #�� � $� �'� $�)�.��#$� �&# (% $� 4����$� �
'�%�) .�$! � �!$! ���
��)1$� ����� 7(� � E�R1�2� 7(�� � $%�� �($�%� & #� I� 'I (%� (�
���'%�*�"+ 2� &# (:� %+ � $/#��$� ' �$7(J�'��$� 7(� $� #�% $� E�R1�� 1P1�
�, ! :��-%�' $�� �+ �&�$$�!��� 4�$�!)#� ��#��� � *����D(�� ��� 6&#$$+ �
� ��� E�R1�� $%�� ). 7(��� � F�1#�(.�%�� � � ,&�%-'�% � � #�% 2� $�
���!��$��+ �' �$�(!��)$ #*#�' ##'%�!�%�.0&� $2�*�%�!���$�.�& $$ .G*�$��
#�)$ #*#� �'� $� )�.��#$� �� �0*.� ��%$%���.2� & #7(� ��� )0.�$� �� #�:+ � �'� $�
'-.�' P7(� $ 6�'-.�' � $%�� �.%#��� @� A�� �$%�� 4�.%�� � 6&#$$+ � � E�R1��
& �������!&�#���6&#$$+ ��(!���:�!��&��'#�%�'�����E2���#) 6O.��$%#�
E�&�$�� $&'��.�:���!�,�# .�$�#2� � ��0*.� �( � 2� /$%#$� � ' .$%# .2�
%#��.�'/#� $2� 4 $4 .0&� $2� .�$ 4 $4 .0&� $2� /$%#$� � *�%�!���$� .�& $$ .G*�$2�
#%���.�/$%#$��'#�!��$��D(�� ��+ �,��,�#-.�$���%$%���.�&.����E2� $�$($�
$()$%#�% $� 4�* #�% $2� $%$� �+ � $+ � �)$ #*� $2� � $�(!� � $(� #(! � �%/� <�
�������������������������������
��������B���� �
.�!���"+ �4'�.���#�� $�&# (% $��,�#-.�$�$%��#(& ��/$%#$�$+ �*�%��$�
&�#�� �� �(%#�"+ � '.(.�#� @��A2� &�#%�'(.�#!�%� � ' .$%# .2� 7(� *��� & �$� $#�
(%�.�:� ����$0�%$��*�#��$�, #! ��$��
�� E�R1��%!������(!�4�% � �!& #%��%� $ )#� � #% #� �� ' .$%# .2�
. '�.�:� � !� %'� $� &#�4/#�' $2� � � 40�� 2� &�#�� $#� & �$� .�!��� � �
#����$! �$ )���4 #!����'� $�)�.��#$��� !��!�%2�.*�� ��$�&# %0��$�
%#��$& #%� #�$� $� /$%#$� � ' .$%# .2� � �� 6&#$$+ � �$� &# %0��$�
#'&% #�$� 7(� ��� &�#� '.(.�#� � ,&�%-'�% � ' !���!� �� #�%#��� �
' .$%# .� �$%� ���1N�2� $'�*��#� #'&% #� '.�$$� N�%O&� ��� @��A�� �$%� #% #� �
4 #"� � � ' .$%# .� � � 40�� � /� �!& #%��%� &�#�2� & #� 6!&. 2� �!��(�#� ��
4 #!�"+ ��&.�'�$���%# $'.# $�� $�*�$ $�$���(0� $����.�/�$(�#� �&. �
4�'% � � #�% $� ' !�I� 'I (%� � ��� �� &# %0��� ��1N�� �&#$�%�#!� �0*�$�
$���(0� $�.*� $��' .$%# .2��$%�#!�&#�$& $% $�&�#�����%# $'.# $��
$()$7(�%$��4�#%$� �!� '�#� �@� 2���A��
�� #'&% #� �('.�#� E�R1�� ' �%# .�� ����� �� #� *�"+ � �$� '/.(.�$� ��
&�#���%$%���.��'#O&%�'..$��@��A2�)!�' ! � $�&# '$$ $���%�1��4.�!�%-#� $���$�
!$!�$�'/.(.�$�@��A����.�$(�#�(!�&�&.��!& #%��%����#�(.�"+ ���4 #!�"+ �
� %(! #$� ��%$%����$� �& #� 6!&. 2� ' . 1#%��$�2� $� ' ###� (!� 6'$$ � �
�'� $�)�.��#$�7(� .*�<� #&#$$+ � � ���7(� ' �%# .�� � #'&% #� �('.�#�
E�R1�2� &.�� $ )#16&#$$+ � � ��� �R�2� � !��!�%� !� $�%(�"L$� �
' .$%�$�,&�%�'���
��#'&% #��('.�#�E�R1�2��&�#'#���' !� �=Q�2�' �%# .����������0*.�
��%#�'.(.�#2���6&#$$+ � $�%#��$& #%� #$�!!)#���#$���'� $�)�.��#$2���
�0*.� ��%$%���.� ��%#��� &�#�� �� *��� & #%��� � �� �0*.� ,&�%�' � ��%#��� � �
,&�%-'�% ���&�#%�#���*���& #%���!�$$+ �&�#����)0.�$��@� 2��KA���$%�&�&.��
' �%# . � /� ����� 6#'� 2� !� #��!� ' &#�%�* 2� & #� (%# $� �$� #'&% #$�
�('.�#$T� � �Q�� ��#����� Q� �'&% #�� � � ���� �� �$%�%(%�*� ��# $%���
�'&% #��@�KA��
� #�G.%�! 2� � #'&% #��('.�#� E�R1�� /� $$�'��.� &�#�� �� *(.�"+ � @�BA2�
�'%(�� ����.*�"+ � $��0*�$���%#�4 .�'(.�#$��$%#�� .��� 2�& #%��% 2�$#�
' �$�#� �' ! �(!�! (.� #���4#%�.���4!�������(!��.* �#�'��.�
&�#�� �$�, ��� * $�4�#!�' $�(%�.�:�*�$�&�#����' �%#�'&"+ ��
�!�' �'.($+ 2� �#'&% #��('.�#�E�R1�2�#&#�!0*.�& #�.*�"+ � ��6 �
�'� $�)�.��#$P=Q�P�R�2�%!� 4�% $� �!& #%��%$� ��� , ! $%�$� � ' .$%# .�
��#�� ��%# $'.# $�$�#&#�!� ��� $��'� $�)�.��#$��$0�%$��%#��$& #%�2�
�������������������������������
������������� �
��4.(�� � $� $%� $� ��4.�!�%-#� $� ��%$%����$2� &# %�� � ��%$%�� ��� 4 #!�"+ ��
%(! #$2��/�$$�'��.���� *(.�"+ ���#�� �' �%#�'&"+ �$�#&#�!� ���
�!�� �2��&�#'#�!� $�&#�!�# $��#%�� $�$ )#���6�$%J�'��� �#'&% #�
!!)#���#��U�K� �& #� *:$� $���� �& #�U�N�����H1N���� @��2��CA2�7(�/�
$�$0*.�<�&#$�"����'� $�)�.��#$���$%�#'&% #��$$ '�� �<�&# %0���U��U1
' (&.� #'&% #�2� 7(�� � '�&%(#�� �'� $� )�.��#$� &# ! *� (!�� .*�"+ �
��%#�'.(.�#��'�H����O'.�'��� $���H � �, $&,�%����$%2�7(�� �$�.*�2�
��$� '/.(.�$� $� %'� $� ��& $ � ���&-'�% $�� � !($'(.�#$� �!�-'�% $�2� �$&�#��
!'���$! $����$% �� �#���2�(!��*:�7(� � '�H�� ��(:��� �:�!����� ���
� %,O# ���� � ���$�2� 7(� . '�.!�%� ' �*#%� �� , #! ��� ��� !� ���
�, #! ��$� ��%�#-���� �$%�� ��� /� #$& �$�*.� & #� �'.#�#� $� !'���$! $� �
��$% �� �#���� � ' �$(! � � 6��/�� � @�8A� !�%'� $� ��& $ $� '�$%��, $2�
�� $� )$#*��(!� �(!�% � �$� '#�$%�$�!�% ' �#���$� ��$�7(��$� �� �.(' $� /�
%#��$4 #!��� !� �#����� �$%� ��$% � � �#���� ��'� ��.2� & #� �'"+ � �(!��
.*�"+ � � �'� $� )�.��#$� $ )#� � #'&% #� �U�K2� &# * '�� � $� #�% $� (!��
�!��(�"+ ��� )$�����(:����& #��!��(�"+ ��%#��.�'/#� $��'(!(.� $�2��
#(:� �� #$�$%J�'��� '.(.�#� <� ��$(.���2� 7(� � #!�.!�%� $%�� �$$ '���� <�
)$�����$%��#$�$%J�'���<���$(.����/2�& #�$(��*:�#$& �$�*.�&.��$�%(�"+ ��
��)%$�7(�4#7(�%!�%�$%��.�����<� )$������!'���$! �$'#�% �4 ��
#4 #"� �&. �4�'% ��#�% $�4�'��%$�� ����7(�' �4�'�����:�!���������1P1
2� , ! :��-%�' $�� 7(�� � $(3�% $� �� (!�� �%�� ' !� 6'$$ � � � #(#�2� �+ �
!., #�#!���$(��$�%(�"+ �,�$% .-��'��& #���"+ ���'� $�)�.��#$�����2��'� �
%�(# '-.�' �2� *�$(�.�:�� 1$� � � 6�!� !�'# $'-&�' � >) .,�$?� � � #(#��
�'(!(.��$�� ���%#� #� �,&�%-'�% ���. �' �%#�#� 2�!�#�% $�$!�4�'�J�'��� �
���7(�' �4�'�����:�!�������.�!�%� $�' !���!$!���%��' !�6'$$ �
�� #(#�2�7(�� �$�������"+ ���'� $�)�.��#$�/�& $$0*.�*#�(!��!., #���
,�$% .-��'�2�' !�$����4�'�%�*��#("+ ��$��'(!(.�"L$��� #(#��� ���%#� #� �
,&�%-'�% �� �$$� $�&�#'�!�% � � � #(#�� /� �' !&��,� � � (!��
$����4�'�%�*��#("+ � �&$ � $����!��$�$%(� $��'#'���� 9�!� $����$%��
7(�!���#$#*�$���#�����%#��.�'/#� $��/��' !&��,���& #�(!��#("+ �
�$� �:�!�$� �� � �.(' � ��$� ���� ����V2� �, $&, � .� ��#(*�%�
��#) 6OV���$� ���)� �2�7(��#�!��.(' $� �� &�#%�#� � 4 �%$� �.%#��%�*�$� �& #�
6!&. 2���!�� �'� $��@� A����.� �!&���4 #!�"+ ���! ./'(.���#�/%�'��
& #�6'.J�'�����.(' $�2�� �!$! �%!& �7(�4 #"���� 6��"+ � $�%#��.�'/#� $�
�'(!(.� $� ' !� ��$% � � �#����� �� #$(.%� � �. )�.� /� (!�� �!��(�"+ � ��
�������������������������������
��������C���� �
)$��2��(!��' �$7(�%��!��(�"+ ���&# )�)�.���� ' ###���)%$�
�$$ '�����
�+ � �!�#�� & �$2�7(� *�#� $� �(% #$2� $�%�,�!� .��"� � ���)($'�� �
& %�'���$� 4�#!�' $� '�&�:$� � �'%�*�#� � #'&% #� �U�K2� � &# * '�#� (!��
�!��(�"+ �� )$��� @��2���2� ��A�� �$%$� $%( $� �* .*!�7(�$�% $� $�
�'� $� )�.��#$� ' �,'� $� �%/� <� �%�2� )!� ' ! � �.�(�$� (%# $� #�*� $� �
�'� $� )�.��#$� )%� $� & #� $0�%$2� � (%�.�:�!� ! . $� � $%#(%(#�1�'%�*���
�! .'(.�#� 'I����� &�#�� 4���#� �� $%#(%(#�� ��.� @��2� ��A� � (!� & %�%�
�'%�*� #� � #'&% #� �U�K�� �(#� $�!�%2� $� !$! $� �(% #$� %�!)/!� %J!�
��*$%� �� �!$! �%�& �� $%( $�!�$��#��� $� � $� �'%�*� #$� � #'&% #�
�('.�#�=Q��@��2��K2��BA��
�.�(�$� �(% #$� $(�#!� 7(� � �U�K� �#'&% #� !!)#���#�� � � =Q��
�#'&% #��('.�#���%#�'.(.�#��& !�$#� $�. $��.���"+ ��%#����(%#�"+ �� �
!%�) .�$! �@��2�CA���&-$�(!��#4�"+ 2���*$0'(.��)�.��#�/�$%�!(.�����!�%�#�
&�#�� �( � ���)0.�$��#!�:������$%��.�)#%�"+ �4�:��&�#'#�� �$���(��0*�$�
!��$��.% $���'� $�)�.��#$2�& � �' �$%�%(�#�(!�$���.�7(0!�' �&�#��% $� $�
& �% $� � #����$! 2��7(�(!��#4�"+ ��'�)���$#�% !��2��*��� ' ###���
�%#��� ��� '�#'(.�"+ � $���(0��� � �#���� �$ )� �� 4 #!�� � �.(' $�� �
�(%#��%$�� * $���$%�$���.�&#&�#�#����$�'/.(.�$� $�%'� $�&#�4/#�' $�&�#���$�
%�#4�$�7(�$$��$�%(�"+ �6����'���(!����$��'� $�)�.��#$�& !��$$�!�$#�
*�$% $�' ! �� *�$�, #! ��$�����'.(�#�� �$�$%!���-'#�� ��
�� � � �U�K� � � E�R1�P=Q�� #'&% #$� $($'&%0*�$� <� &#$�"�� �
�� ��$%�$� '�&�:$� � $� �'%�*�#2� �%� � 4�% $� ' !&.!�%�#$2� 6�$%� &.��
&#�!�#�� *:� �� & $$�)�.��� � ' �%# .�#� $�!(.%���!�%� �$� 4.��. $� ��
'�*�.�:�"+ � '��%�.2��� )$�������%# $'.# $�@��2��CA�7(�$�&#*J�*�#!���
$#���&#�!�#��'�($���! #%�� �4(%(# �&#-6�! ����$'(%1$������$���#.�"+ �
� �'%�*�"+ � $%$� �$� #'&% #$� �+ � & #�� 4���#� � #�%! � )�$�.� �
!%�) .�$! �@�8A��
� � �� � � � (!� =�.I� �O!& $�(!� @� A2� #�.�:� � !� ��� R���� ���
R .���2�)#(" (1$�$ )#� $�$��# !�$����R��� �1�.', .�'��%�% 1R&�%�%�$2�
,&�%�%��+ 1�.' -.�'��' !�$%�% $�2�%�!)/!�#4#� �& #�*:$�' ! ���=E��
�� �1�.' , .�'�=�%%O� E�*#� ��$�$2� �"�� � 40�� � � # �2� � ��R� ��.' , .�'�
�%�% 1R&�%�%�$2� ,&�%�%� �.' -.�'�� ' !� $%�% $��� �!) $� $� $��# !�$�
�&#$�%�!�' ! �'�#�'%#0$%�'��' !(!����'(!(.�"+ ��� #(#��� ���%#� #� �
,&�%-'�% ����7(��% ���%� . �������R�/�' �,'���������R�/�$' �,'����
�������������������������������
��������8���� �
�'#�%�1$�7(�& $$��$#�*�����*�#� $�& .(�%$� #�5��' $�.�& $$ .G*�$��7(�
��&# ("+ ��� #(#��� ���%#� #� �,&�%-'�% �$#���(!��4$����'/.(.���=�%1
�#�&�2� 7(� �$$�!� �'�&$(.�#��� � �$ .�#��� $� & .(�%$� !� '�($��� �(#��%� �
#4#� � $�!&-$� � 4�' (� � � �#� �� ���� �7(� �+ �,�*���%#�&��� &�#�� ' �%#�#��#�
$$���'(!(.�"+ ��� #(#���
�!�M(�, ��� C� �=�.I��O!& $�(!��BK2�#�.�:� �!��!$%#+ ����
R .���2� * .% (� �� .��"�#� � *�$� &�$%�$� $ )#� $%� �$$(�% �� �#�(�#� �
' .�) #� #$�@��2���2���A�#4#!� �&�&.���%�1��4.�!�%-#� �@��A� ��'� �� #1
(#$ $ 6�'-.�' � �� #1������ � � $�&�#'�!�% � $� &-$�% $� � � #(#��
��%#�'.(.�#�� �#�(�#� � � $(� �#(& � � ' .�) #� #$� @�KA� *+ 2� #'�%!�%2�
!��$� . ��� � ! $%#�!� 7(� (!� ' !& $% � �� ��$%�� � #'&% #� EQ�� �E�*#� Q�
�'&% #$�2����2�1�!%�.1�β1,�# 6�' .��!�����HR���2� �!&����'(!(.�"+ �
� � #(#�� ��%#�'.(.�#� ,&�%�'�� � �� ,�&#%#��.�'#�/!��� '�#'(.��%2� #(:�� �
' �' !�%��%!�%� �� 4 #!�"+ � � &.�'�$� �%# $'.#-%�'�$� � ' .$%# .� ��$�
&�#$���� #%���W ..�#���#�(�#�@�BA2�&().�'�#�!�#'�%!�%��� 8��(!��
#*�$+ � � ' �3(�% � $ )#� �$� & #%(���$� %#�&J(%�'�$2� 7(� $� �.�!� � �
, #�: �%2����.(%��' �%#����' .$%�$�,&�%�'���
�
�� !��$� #'�%� #*�$+ � � ' �3(�% � &().�'��� $ )#� �� �!&.�'�"+ � $�
�'� $�)�.��#$2� � $� #'&% #$��('.�#$� ��7(� $�& !� .���#� �=Q����Q��2�
� $� ���������� ��� ��� ������� �� ���������� �� ����� ������� ���
�������������� �������� �� ������� ��� ����������� �������� �
����������������������������������������������@��A2��)#�(!��
3��.�� ',��� � ��4 #!�"+ � $ )#�(!� %!��!(�% � ��*$%��� �� � � �#�.� & �
�:#1$�7(�.*� $��0*�$���'� $�)�.��#$�$+ ��'%�*� #$� $�!'���$! $�
� �& &% $� '.(.�#� �! #%� $(�'���� �%#�*/$� $� $(� #'&% #$��('.�#$� @�CA2�
$ )#%( �7(�� �!�$�%(�"+ ��' .$%�$����G��' ��'� �)�.��#�7(�&�#'�%#�
(!�4�% �&# %'% #� ' �%#�� �� �& &% $� /� ��'� �(#$ $ 6�'-.�' � @�8A� � � $(�
' �3(�� �' !���%�(#����@K 2�K�2�K�A��
�.�(�$� �(% #$� #4#!�3��(!�� #.�"+ ��#'%���%#��0*�$� .*� $��
�'� $� )�.��#$� �$$ '�� $� �� �%�$� ' !� .*� � % #� !� � #(#�2� � (!��
��'�J�'���.*����'��'# $2�!�,(!�� $2�� �. �� � �%() ���$%�* T�.�#���1
4�#���2�$-4�� 2�$%X!�� 2�&5�'#�$2����%$%�� �@K��2�K�A��
�������������������������������
�������� ���� �
�!�� *:� !��$� % #��1$� ' !&#�$0*.� 7(� $(#3�!� �#(& $� �
��*$%��� #$� �� &# & #� 4�#!�' $� ��%�1�& &%-%�' $2� �'� $� )�.��#$� � $($�
#�*� $2�� �$�%� ��%#�%�#�*�#� $�%�& $��'/.(.�$�'��'# $�$�@KK2�KBA��
�'�%!�%�4 ��#4#� �7(� ��'� �%�(# (#$ $ 6�'-.�' �& �$#�(!�
! (.� #����& &% $�!�'/.(.�$�!(%��%$���(# ).�$% !��!�7(��� �"��
��.:,�!#�$%��6&#$$�2� ���)�� ����'%�*����*�#��$�&# %0��$��* .*��$�
� � &# '$$ � @K 2� K�A�� �� !$! � �'� 2� ' �%� � ��� )0.�$� � (#$ 2� 4 �� �����
#.�'� �� � ' !� $� !'���$! $� '.(.�#$� �& &%-%�' $� � �(# &# %'% #$2�7(�
6&.�'�!� � $(�($ � ��� H�'����%#��'� ��.� ',��$�� &�#�� �� '(#�� �� &#�� �
*�$+ 2�!�$�%(�"L$����#�"+ ���#%����@K�A��
2.1.1. BIOQUÍMICA DOS ÁCIDOS BILIARES
�$� �'� $�)�.��#$� $!&�,�!�(!� &�&.� �!& #%��%� ��� ��$%+ � �$�
� #(#�$2� ��� �)$ #"+ � ��%$%���.� �$()$%5�'��$� .�&0�'�$� ��.�'/#� $� � *�%�!���$�
.�& $$ .G*�$�2��$$�!�' ! ����0*.� �'�%�) .�$! � �' .$%# .��$(��.�!���"+ 2�
7(�� �!�6'$$ �� � #����$! �@KA���
�$� �'� $�)�.��#$�$+ �! ./'(.�$� ��4�&�%�'�$� &# (:��$� � $�,&�%-'�% $2�
�#!�:���$� ��� *$0'(.�� )�.��#� 3(�%�!�%� ' !� (%# $� ' !& ��%$� �� )0.�$2�
��(�#�� � �0� �! !�% � !�7(� $#+ � .��"� $� &�#�� � ( � � �� *+ �
��%#*�#�� �&# '$$ ���$%�* ��$�� #(#�$�@K2�K�A��
� � .G!�� ��%$%���.2� �� 4. #�� )�'%#����2� �0� 6�$%�%2� $�# 6�.�� �
$' �3(��� $��'� $�)�.��#$����*#$�!�%2�%�!)/!� $��'� $�)�.��#$��4'%�!�
�'#$'�!�% ��' �$%�%(�"+ ���& &(.�"+ �)�'%#�����@KCA��
�$��'� $�)�.��#$� .�*#$�& !�$#��*�� $�!� �$��#��$��#(& $T� $�
&#�!�#� $� ��'� $� '-.�' � � 7(� $ 6�'-.�' �� � $� $'(��#� $� ��'� $�
$ 6�'-.�' 2�.�% '-.�' ��(#$ $ 6�'-.�' ��@KCA���
�$� �'� $� )�.��#$� &#�!�#� $� $+ � &# (:� $� � � 40�� � �,&�%-'�% �� �
' �3(�� $�' !����.�'���� (���%�(#���2�$� �6'#%� $�&.��)0.�$���
D(�� �',��!�� � ��%$%�� 2�$+ ��&��$�$' �3(�� $��&�#'��.!�%�
$�# 6�.� $� &.�� 4. #��)�'%#����� !��%� � �� $(�� 4 #!��7(0!�'�� '�#) ����
@KCA���$��'� $�)�.��#$�$'(��#� $�$+ �&# (:� $2�& #%��% 2�� ���%$%�� �%� �
& #�)�$��$�! ./'(.�$���'� $�)�.��#$�&#�!�#� $2��$�7(��$�$+ �$' �3(���$��
$�# 6�.��$� � � '�#) � � �� & #� %#��$4 #!�"+ � )�'%#����� @K�2KCA�� �$$�$�
' ��"L$� � �'� � '-.�' � �#�� � �'� �$ 6�'-.�' � � � �'� �7(� $ 6�'-.�' �
�#�� � �'� � .�% '-.�' �� �� �'� � (#$ $ 6�'-.�' � �+ � /� � #!�.!�%� ��'.(0 �
�������������������������������
������������� �
�$%� �#(& 2� *�$% � 7(� �� $(�� #��!� /� 6%#��� � � #����$! � ,(!�� 2�
� !��!�%�4�#!�' .-��'���
�$�' .�% $���'� �'-.�' � � ��:� 2�7(���'.(!���4 #!��.�*#���$�4 #!�$�
' �3(���$2�� ��:��$���&R�4�$� .-��' ��#&#$�%�!�'#'���& (' �!��$���K9�
�� % %�.��� $� �'� $� )�.��#$� ,(!�� $� '�#'(.��%$�� �$� 7(� $ 6�' .�% $�
�&#$�%�!1$� �(!�� &#'�%��!� & (' � ��4#� #� �� �K92� �7(��% � $�
$ 6�' .�% $�#&#$�%�!2��&# 6�!��!�%2��K9� �% %�.�� $�.�% ' .�% $�� $�
(#$ $ 6�' .�% $��:!�!� $��K92�'���@KCA���
��&# '$$ ����$%+ ��$� � #(#�$�%!���0'� � � �$%X!�� ��%#!����
���& #"+ �&# 6�!�.� ���%$%�� �.�� ���$��'� $�)�.��#$���%#*J!��$%��&�#%�
4���.� �&# '$$ 2�4 #!�� �&7(��$�!�'.�$�' !��.% �% #�!�%#��.�'/#� $�7(2�
7(�� � ,�# .�$� $� &.�$� .�&�$$2� &#!�%!� �� �)$ #"+ � �%#�*/$� �� &�#�
��%$%���.���'� $�� # $��*�%�!���$�.�& $$ .G*�$��
�� !�� #��� $� �'� $� )�.��#$� $+ � �'%�*�!�%� #�)$ #*� $� ��� G.%�!��
& #"+ � � ��%$%�� � �# $$ 2� �%#�*/$� �(!�%#��$& #%� #� &��%� $� �L$�
��Y� � � �#(& � '�#) 6�.�% � � �'� �)�.��#2� $� � #'�'.� $� � ' �(:� $� � �
40�� 2� &#� 1$� �&��$� K9� $� �'� $� )�.��#$� &# (:� $� ��$� 4:$�� ��
40�� � ' �3(��2� � � * 2� $� �'� $� )�.��#$� �%��% � $� &#�!�#� $2� ' ! � $�
$'(��#� $��7(�.,�',��!���*�����%$%���.�' !�%�(#���� (��.�'���2�!�$��+ � $�
#,�# 6�.��@K�2�KCA��
� ! � 3�� 4 �� #4#� 2� $� �'� $� )�.��#$� $+ � #�*� $� � ' .$%# .� �
��4.(�'��!� � ' �%# . � $� $($� �0*�$� $���(0� $�� �$%� 4�'% � #*$%1$� �
&�#%�'(.�#� �!& #%5�'��2� (!�� *:� 7(� �0*�$� .*� $� � ' .$%# .� $%+ �
�$$ '�� $�' !�*�#���$�&�% . ���$2�' ! ����%# $'.# $�@K8A2�����)%$�@B A��
&# ).!�$�'�#� *�$'(.�#$�@K82�B�A���
�������������������������������
������������� �
�
2.1.2. A BIOSÍNTESE DOS ÁCIDOS BILIARES
�� $0�%$� $� �'� $� )�.��#$� &#�!�#� $� ' ##� � � 40�� 2� !��$�
&# &#��!�%���� 4#�'"+ �'�% $-.�'�� $�,&�%-'�% $2� & #� �'"+ ��(!� &# '$$ �
!(.%�1�:�!�%�' ����=��(#����� �� �&#$�%��(!�$7(!�� #$(!� ���)� $0�%$�
$��'� $�)�.��#$2�&.��',�!���*����(%#���
�� &#�!�# � &�$$ � �� $0�%$� /2� %�!)/!2� � &�$$ � %#!����%� ���
*. '����. )�.�$%��*���!%�)-.�'������:�!���α1,�# .�$�'�%�.�$������"+ �
�(!��#(& �α1,�# 6�. �� �'�#) � ��� �' .$%# .�@B�A2�7(�!��$�%�#�%#��(!�
&�&.��!& #%��%����)� %#��$4 #!�"+ ���%$%���.� $��'� $�)�.��#$�&#�!�#� $�!�
$'(��#� $��
��$�(� �&�$$ �/���!��#�"+ ���(&.��.���"+ ��%#� $�'�#) � $�K��B2�
&�#����& $�"+ ��%#� $�'�#) � $����K2�' !���' �' !�%��%�#("+ � �,�# 6�. �
���(!��'% ���@B�A���
�� %#'�# � &�$$ � /� �� ,�# 6�.�"+ � � '�#) � � �� !� & $�"+ � �.4�2� & #�
#("+ ���4(�"+ �'% �����,�# 6�. 2�' !���$�!(.%5���$�%(#�"+ �& #�#("+ �
��(&.�� .���"+ ��%#� $� '�#) � $��� � K� @B�A�� �$%��,�# 6�.�"+ ��#��(!�� .�
�' !��#(& $�α1,�# 6�. �� $�'�#) � $��������(!�%#� .��' !��#(& $�α1,�# 6�. �
� $�'�#) � $��2����������$%��#�'"+ � #��������&#$�"���(!�,�# �/�� �!�
& $�"+ �Kβ�7(�/�'�#�'%#0$%�' ��% $� $��'� $�)�.��#$�,(!�� $��D(�� � �
,�# �/�� ��&�#'�!�& $�"+ �Kα�$%�! $�!�&#$�"���(!��$/#����'� $�
)�.��#$�% %�.!�%��4#�%2�' �,'���& #�$/#���.. 2�7(�4 ��3��$��%%�:���& #�
�..� %%�@B�A��7(��&�#'�' !�4#7(J�'���� $�#/&%�$2�!�&�#%�'(.�#����$&/'��
�.���% #�@B�2�BKA��
�� 7(�#% � &�$$ � /� �� 6��"+ � � �!) $� $� ' !& $% $� �� .P%#� .�� ���
& $�"+ ������'����.�%#�.�@B�A��
��7(��% �&�$$ ��* .*�(!��'(#%�!�% ���'���� .�%#�.������&�#��
���2�' !��&�#'�!�% ��(!��#(& ��'� �'�#) 60.�' �!�& $�"+ ����@B�A���
��#$(.%� �$%�&# '$$ �/���4 #!�"+ � $��'� $�)�.��#$�&#�!�#� $T� �
�'� �7(� $ 6�'-.�' 2� �#� � �� &�#%�#� � � .2� � � �'� � '-.�' 2� )%� � ' !�
#��!�� �%#� .��'�!��#4#� ���
�
�������������������������������
������������� �
=��(#�������Z��$7(!��#$(!� ���4 #!�"+ 2�&.��',�!���*����(%#�2��
'�#'(.�"+ � $��'� $�)�.��#$�!�,(!�� $��
=��(#����&%�����#4#J�'���@BBA��
��*���!%�)-.�'��7(��'�)�! $��$'#*#�/�' �,'���& #�*����(%#���
4 �� �� &#�!�#�� �� $#� $'#�%��� �()$7(�%!�%2� !� �8882� $� %#�)�., $� �
[.�,'*�'� @BBA� ! �$%#�#�!�7(2�7(�� � $� ���)� �&#�!�# � &�$$ �$%��*���
�������������������������������
������������� �
!%�)-.�'�2���)� $0�%$���'� $�)�.��#$�'���&�#��K 9� � #�����.2�7(�� �$�
$&#�*��(!�� ���)�"+ �% %�.�� �$%�� ���)�"+ �&�#'��.� .��" (��� ���� �7(�*#��
,�*#� (!�� *��� �.%#��%�*�� � $0�%$� $� �'� $� )�.��#$�� �$%�� *��� %!� $� �
$������ ' ! �*��� �'��� @B�A�� ��� *�* �$%�!�1$�7(�'���(!���$� (�$� *��$�
�#�� '#'�� � !%�� $� �'� $�)�.��#$� '�#'(.��%$� �& .�� @BBA2� !) #��,�3��
#4#J�'��$� !��$� ��%���$� !�7(� $� �(% #$� �$' #�!� $%�� &#'�%��!� �
�!& #%5�'����$�(�$�*��$�@B�A��
��%$���)�� ��#!� �,&�%-'�% 2� $��'� $�)�.��#$�&#�!�#� $���'� $�
'-.�' � � 7(� $ 6�'-.�' �� $+ � ' �3(�� $� ' !� $� �!�� �'� $� �.�'���� (�
%�(#�������#��7(�%�.� ' ##�2� $��'� $�'-.�' ��7(� $ 6�'-.�' �$+ ��'%�*� $�
&. � ���� � &.�� ' �:�!�� �� 4 #!�� � $� #$&'%�* $� /$%#$� �'%�*� $� �
' �:�!���2�7(�4 #�!�$��%%�:� $��7(�!�'�!�%�'�#�'%#�:� $�& #��..� %%��
' .�) #� #$�@B�A����$�(������.�'����#���' !� $��'� $�)�.��#$��'%�*� $�
�� � #��!2�#$&'%�*�!�%2�� $��'� $��.�' '-.�' ���.�' 7(� $ 6�'-.�' ��
����#�'"+ � ' ###�' !���%�(#���2� $��'� $��#� $�$+ � $��'� $�%�(# '-.�' �
�%�(# 7(� $ 6�'-.�' 2� #$&'%�*�!�%� @BCA�����=��(#����� �2� �&#$�%�! $�
�.�(�$� 6!&. $� � ! ./'(.�$� � �'� $� )�.��#$� �1' �3(�� $� �&#�!�#� $� �
$'(��#� $���
�
�������������������
����� ��� � � �!� "�����"���
� ������#������������
����� ��� � � �!� "�����"���
U.�' (#$ 1�$ 6�'-.�' �
U���� R� �R� R� ��82B� � ��(# (#$ 1�$ 6�'-.�' �
����� R� �R� R� �882��
U.�' '-.�' � U�� �R� R� �R� �BK2B� � ��(# '-.�' � ��� �R� R� �R� K�K2��U.�' 7(� 1�$ 6�'-.�' �
U���� R� R� �R� ��82B� � ��(# 7(� 1�$ 6�'-.�' �
����� R� R� �R� �882��
U.�' 1�$ 6�'-.�' �
U��� �R� R� R� ��82B� � ��(# 1�$ 6�'-.�' �
���� �R� R� R� �882��
U.�' .�% '-.�' � UE�� R� R� R� ���2B� � ��(# .�% '-.�' � �E�� R� R� R� �C�2��
=��(#����� �� Z� �6!&. $� � �'� $�)�.��#$� �.�' � �%�(# ' �3(�� $2� ' !�
���'�"+ ��$�$(�$�!�$$�$�! .'(.�#$��$(�$�$��.�$���%#��'� ���$��
N�$� ����#4#J�'���@B8A��
�
� �.G!����%$%���.2���4. #��)�'%#����2��0�6�$%�%2�$�# 6�.�� �'�#) � �
�� � $' �3(��� $��'� $�)�.��#$� ' !�&#����.�'���� (�%�(#����� �$%�� 4. #�� /�
�������������������������������
��������K���� �
�$$�!� $$�'��.� &�#�� �� %#��$4 #!�"+ � $� �'� $� )�.��#$� &#�!�#� $2� !�
$'(��#� $�@K�2KCA���
�� $�# 6�.�"+ � !� & $�"+ � �α� &�#'� $#� (!� &# '$$ � ���#-)� � �
�##*#$0*.2� ' �(:� � & #� *�#��$� $&/'�$� � )�'%/#��$� ���' .�2� �$( ! ��$2�
N�'%# �$2��()�'%#��2�N�'�..($���. $%#�����@KCA���
�� $' �3(��"+ ���.�'���P%�(#����& �%�!)/!�$#� 4'%(���& #�(!�
.7(2� �.�#�� 2� � !�'# #����$! $� �� 4. #��)�'%#����� ��%$%���.� �N�'%# �$2�
�# %($2�E�'% )�'�..($2��. $%#������%#&% ' ''���@KCA��
�$$�!�' ! � $�!�'# #����$! $��'%(�!�$ )#� $��'� $�)�.��#$2�%�!)/!�
$��'� $�)�.��#$�6#'!���4.(J�'���$ )#���& &(.�"+ �)�'%#�������!��$�� $����
*�%# �*#�4�' (1$�7(� $��'� $�)�.��#$� .�*#$�6#'!�(!�4�% ����)�%-#� �$ )#�
�$� & &(.�"L$� )�'%#����$2� ' !� $&'��.� J�4�$� &�#�� $� �'� $� �,�# 6�.� $�
.�*#$2� ' ! � � �'� � 7(� $ 6�'-.�' �� � � ' �%#�#� 2� $� �'� $� )�.��#$�
' �3(�� $��+ ��&#$�%�!� �!$! �4�% ���$$�!�$� 2�$(&L1$�7(�6�$%�
(!� $�$%!�� �(% 1#�(.�%-#� � $� �'� $� )�.��#$� $ )#� �� 4. #�� )�'%#�����
��%$%���.2� 7(� & � $#� ' �$�#� � ' ! � &�#%� �� '�#'(.�"+ � �%# 1& #% 1
,&�%�'�� @KCA� 7(� !� )#*� $'#*#! $2� !� %�.,�� ��#'� &.�($0*.2�
& #%��% 2� 7(� �� $' �3(��"+ � *� &#'#� � 4�% � ���)�%-#� � $ )#� ��
$�# 6�.�"+ �!�& $�"+ ��α2� �7(��!&.�'�#���7(�$%��$-�$�4�#���$�%�#��(!��
& $�"+ �!��$�%#!���.� ���%$%�� ���
2.1.3. UMA VISÃO DETALHADA SOBRE A ESTRUTURA QUÍMICA DOS
ÁCIDOS BILIARES
�$��'� $�)�.��#$�.�*#$��&#$�%�!�(!��$%#(%(#��7(0!�'��' !�(!�% %�.�
� ��� �% ! $� � '�#) � 2� ' �%� � �$� .!�% $� &#��'�&��$T� (!� $7(.% �
$%#-��' !�(!�,�# 6�. �!�& $�"+ ���(!��'����.�%#�.�'�#) �������$(��
$%#(%(#���#�.�4 ���&#$�%������=��(#�������7(���'.(�����(!#�"+ ��$�*�#��$�
& $�"L$�'�#) ���$���! ./'(.���
�� $7(.% � $%#-�� �$���� � & #� '�'. &�%�� 1&#,�# 4���%#� 2�
=��(#��������/�' �,'� �&.��$(��#$�$%J�'���7(0!�'���$%#(%(#�.���&#$�%����
�#(& $�!%�. �@!�& $�"L$��C��' !�.���"+ �� �'�#) � �� ����8��' !�.���"+ �� �
'�#) � ����A��� $� �'� $�)�.��#$� .�*#$� $%�$7(.% �/�,#� � � ' .$%# .2�
&. �7(� $��'� $�)�.��#$�$+ �' �$�#� $�&# (% $��.�!���"+ P'�%�) .�$! �
�' .$%# .�@K�2�B�A��
�������������������������������
��������B���� �
��'����.�%#�.��K�'�#) � $2���7(�.�%�!)/!���'.(��(!��'� �'�#) 60.�' �
�!�& $�"+ ���2�%#!���.���(!�!%�. �!�& $�"+ �����' !�.���"+ �� �'�#) � �
� �2�$%��.������ ��G'. �$%#-��& #�(!��.���"+ �'�#) � 1'�#) � ��& $�"+ �
����� ����
�
=�'�α�
=��(#�������Z��$%#(%(#��7(0!�'�� $��'� $�)�.��#$�.�*#$��
��&%�����#4#J�'���@� A�
�
��.���"+ �!�'�$��%#� $���/�$����N� �$7(.% �$%#-���� #��!���
(!�� '(#*�%(#�2� ���! ./'(.�2�7(��'�)��& #� 4 #!�#�(!�� ' �'�*�����$� (�$�
4�'$� $%�� !$!�� ' �'�*��� �&#$�%�!� &# &#��$� �4#�%$�� �� 4�'�
'X�'�*���4�'��/�,�# 40.�'��*� �<�&#$�"�� $��#(& $�,�# 6�. ��� ��#(& �
'�#) 60.�' ���'���� .�%#�.��.��&#$�%���. �' �%#�#� 2���4�$�' �*6���4�'�
� /�,�# 4-)�'�� @� A� & #7(� $-��&#$�%���% ! $�� '�#) � ��,�# �/�� �� ��
6'&"+ �/� ��'� �(#$ $ 6�'-.�' 2�7(��&#$�%��(!�,�# 6�. �!�& $�"+ ��β2�
�7(� �' . '�����4�$�β ��! ./'(.�, 4�:� �' !�7(�$%��'� �$3�� �!��$�
,�# 40.�' � $�K��&#$�%� $����=��(#��������
��� *�%(�.��� � $� 4 #!�#!� 0!# $� �%#� ! ./'(.�$� ' �%� �
�'� $�)�.��#$�$#��6&'%�*.�(!����%#�'"+ ��%#�(�$�4�'$�α2�(!���'���
! �-!# ��� ! �$�& � )$#*�#����=��(#������� $��#(& $�,�# 6�. $���4�'�α�
& !� 4 #!�#� �%#� $�� .���"L$� ��%#! .'(.�#$� & #� & �%$� � ,�# �/�� 2�
6& � �� �6%#� #� �0!# ��$�4�'$�β�!��$��& .�#$��,�# '�#) ���$���!��
%�.��$$ '��"+ �% #��#��� �0!# �!� $�$ .G*.�!�$ .*�%$�' ! � ��'% ��%#�. �
2� &#$(!�*.!�%2� !��$� $ .G*.� !� ,�# '�#) �% $� ' ! � � �1,6�� �� � �
�%��% 2�$ .*�%$�' ! � �%�� .2�7(�$+ �' �,'� $�& #�# !&#�.���"L$��%#�
$�! �-!# $��(!�0!# 2�& #��!�$ .()�.�:�#� $�! �-!# $�@��A��
�� .���"+ �!�'�$��%#� $���/�$����N� #�����2�����2���&#$�"���(!�
,�# �/�� ����& $�"+ �K�D(�� ���.���"+ ��%#� $���/�$����N�/�%#��$2��&�#'�
����������� ��� � ��#$ $ 6�'-.�' � �R���� R��-.�' � �R� �R�D(� $ 6�'-.�' � �R� R��$ 6�'-.�' � R� �R�E�% '-.�' � R� R�
=�'�β�
�������������������������������
������������� �
(!� ,�# �/�� � !� & $�"+ � Kα� � $� �'� $� )�.��#$� $+ � $���� $� ' ! �
&#%�'�%$� <� $/#�� >�.. ?� ��.. 1)�.� �'�$�2� 3�� ��%#� #!�%� #4#���� � �
�%��% 2�$%���$$#%�"+ �4 '�#���&��$� $�' !& $% $���$/#��Kβ�.�
\�<$��4#�"�$�7(0!�'�$��40$�'�$��%#��$�(�$�4�'$���! ./'(.��7(�$�
*� � '�#�'%#� ��4�40.�' � ���4�]? �$� .� $?2� 40.�' ]?�%#�0 � & #?2� � � &�$$� �
%�!)/!�$���� �' ! ���4�&�%�' �� $��'� $�)�.��#$�2�' �$7(�%!�%2���
$(��'�&�'���%#��%P!(.$� ���%�@� 2���A��
�$� �4#�"�$��%#� $� *�#� $� �'� $�)�.��#$2� ��'.(0 $� � �5!)�% � $%��
�$$#%�"+ ��#4#� $�� �& �% ��2�+ 1$�� ��0*.��$�,�# 6�.�"L$���! ./'(.��
� $� '�#) � $� �� � ���� �$� ,�# 6�.�"L$� + 1$� $!&#� �(!�� !$!�� 4�'� ��
! ./'(.���4�'���� � #��!���(!�&# (% ���4�40.�' 2� (�$3�2�' !�(!��4�'�
,�# 4-)�'��� (%#��4�'�,�# 40.�'��@K�A����G��'��6'&"+ �<�,�# 6�.�"+ ��&��$�
���4�'�α�/� ��'� �(#$ $ 6�'-.�' 2�7(�& $$(��(!��#(& �,�#-6� �� �'�#) � �
��!�& $�"+ �β2� �!$! �.� ���! ./'(.��!�7(�$%+ � $�%#J$��#(& $�!%�. �
&#$�%$2� �7(� �% #���!� $�,�# 40.�' �7(� $��'� $�)�.��#$�%#�,�# 6�.� $��
!��$�,�# 40.�' �7(� $��,�# 6�.� $�$($�&�#�%$�&#-6�! $���$�*�#� $��0*�$��
,�# 6�.�"+ P& $�"+ � &�#'!� �$$�!� ' �%#�)(�#� &�#�� (!� �.�#�� � $&'%# � �
'�&�'��$� � $ .()�.�:�"+ P!�'.�:�"+ 2� 7(� /� & �$� �&.�'� � �� (!� .7(�
!(�% �*�#�� ��� #(#�$2�' !��$�$ .()�.��$�!��$��*#$�$��
� )#� ��#(& ��'� �'�#) 60.�' �!�& $�"+ ����$+ �& �$�' �3(�� $� $�
�!�� �'� $��.�'���� (�%�(#�����
�$��'� $�)�.��#$�3��' �3(�� $�' !����.�'���2� (���%�(#���2�& !������
�&�#'#����(#����,(!����' �3(�� $����& $�"+ ��α�' !� ��'� ��.('(#-��' 2�
(�$ )���4 #!���$(.4�% $���$%$��' �3(�� $�$+ �6%#!�!�%�$ .G*�$�!�
��(���& #��$$ �$�.�!���!�#�'��.!�%�&.��(#����@��A��
�$� �#(& $� $(.4�% � & !� ����� �&�#'#� .��� $� �� (%#�$� & $�"L$� �
�G'. �$%#-��7(��+ �����N �$�6!&. $��$$ �$+ � $�$(.4�% $����& $�"+ �
�α�@��A��
2.1.4. CIRCULAÇÃO ENTERO-PORTO-HEPÁTICA
� ! �*�! $���%#� #!�%2� $��'� $�)�.��#$�$+ �$��%%�:� $�� �40�� ��
$'#%� $����)0.�$�&�#���$�',�!��$�*��$�)�.��#$��� �$(�&#'(#$ ���'�!��, � �
( � � $ 4#!� (!� �#!�:��!�% � %!& #�#� � ��� ',�!��� *$0'(.�� )�.��#2�
��'(!&#!�(!�&�&.��>#$#*��$%#�%/��'�?�� �� ��%#�#4�"L$��
�������������������������������
��������C���� �
�$��'� $�)�.��#$�$+ �' !& ��%$�!�� #$���)0.�$2�& � ��' �%#�#1
$��(!���%#*�. �#.�%�*�!�%��.�#�� ��' �'�%#�"L$�% %��$�7(�*+ � $���
!! .PE� � $� �K�!! .PE� @KCA� �7(�$%+ �&��%$���7(��%���� ��(��
#�)$ #*���(#��%� ��#!�:��!�% ����*$0'(.��)�.��#��
��� )0.�$� & !� ����� $#� %'%� $2� ' ! � ' !& ��%$� !�� #$2� $�
4 $4 .0&� $� � � ' .$%# .�� � ! � ' !& ��%$� !� #$2� & !� �&�#'#�
&��!�% $� & #40#�' $� �&# (% $� � �#��"+ � �� ,! �. )����2� &# (% $� �
'�%�) .�$! �,&�%�' ���(!# $ $�6� )�-%�' $����'.(�� �4�#!�' $��@K�2�BCA��
�!� #$& $%�� <� ���$%+ � � (!�� #4�"+ 2� �� )0.�$� /� .�)#%��� &�#�� �
( � � & #� ' �%#�'"+ � �� *$0'(.�� )�.��#�� �!�� *:� � � ( � 2� $� �'� $�
)�.��#$� ' �3(�� $2� �.�� ' �%� $2� �3(�!��� $ .()�.�:�#��$� � %0'(.�$� �� #(#��
� � !� � �7( $ 2� &.�� 4 #!�"+ � � !�'.�$� !�$%�$� � %#��.�'/#� $� !� !� �
�7( $ ��!(.$+ �-. �!���(�����
� � ( � 2� $-� (!�� &7(��� 7(��%��� � �'� � $ 6�'-.�' � /�
$' �3(�� � � #�)$ #*� � &�$$�*�!�%2� �7(��% � �� !�� #��� $� �'� $�
)�.��#$� $+ �$' �3(�� $� � $�# 6�.� $� !�& $�"+ ��� � $�(��%/�� �0. ��
�� $+ � & $%#� #!�%� #�)$ #*� $� @KCA�� �$$�!� $� 2� �� !�� #� &�#%� ��
#�)$ #"+ � $��'� $�)�.��#$��1$�� �0. ���4�$�%#!���.� ���%$%�� ��# $$ �2�
�(!�� �.%(#�� !� 7(� �� $(�� '�&�'��� %#��%� 3�� �+ � /� !��$� �'$$�#��2�
& #7(�3��%#!�� (����)$ #"+ ���'� $�� # $��*�%�!���$�.�& $$ .G*�$��
�!� ' �%#�$%� ' !� �� �)$ #"+ � 7(� $� �� � � ( � � ��%#�*/$� � (!�
&# '$$ � � �)$ #"+ � &�$$�*��2� �� �)$ #"+ � ��� !!)#���� �� ) #�(#�� !�
$' *�� �0. ��#$(.%���(!�&# '$$ ��%#��$& #%��'%�* �7(�/�&��%�
� �+ � $-� �� �!�� *:� � � ��%#� #� � �%#-'�% 2� $� �'� $� )�.��#$� $+ �
%#��$& #%� $� & #� *��� '�% $-.�'�� � !�'# $$ !�.� �%/�<� (%#�� 4�'� � �%#-'�% �
��&�$$�!�&�#����'�#'(.�"+ �$���(0���& #%�.2����7(�.��%���!�' �'�%#�"L$�
� 2 ���� 2 ��!! .PE�@KCA��\��%#�*/$���'�#'(.�"+ �& #%�.�7(� $��'� $�)�.��#$2�
3�� &�#'��.!�%�%#��$4 #!� $� !� $'(��#� $� � � .G!�� ��%$%���.2� * .%�!� � �
40�� �7(� $��# (��
�$� �'� $� )�.��#$� 7(� �+ � 4 #�!� �)$ #*� $� �%/� � � 0. �� %#!���.2�
$�(!� � $(� %#�3'% � �%/� � � '-. �� �� ' �%��(�!� �� $ 4##� $�# 6�.�"+ 2�
*� �<��'%�*����:�!�%�'��)�'%#������� �'-. ��$(#��� *�� & #%(�����
�)$ #"+ 2� !�$� �� !�� #��� $� �'� $� )�.��#$� 7(� ',��!� �� $%�� : ��� $+ �
.�!��� $���$� 4:$� @KCA�� � #� $%�� #�:+ � $� �'� $�)�.��#$� &# !����%$���$�
4:$�$+ � $���4 #!��.�*#2�$' �3(�������.�'���� (�%�(#�����
�������������������������������
��������8���� �
�$%�&# '$$ �� #'�#'(.�"+ � $��'� $�)�.��#$� &.�� '�#'(.�"+ ��%# 1
& #% 1,&�%�'���1$��%#�K����K�*:$�& #���2�,�*� �(!��&#����&��$�
K9���7(��%���� �'� $�)�.��#$�!� '�#'(.�"+ ���$%$�K9�' ##$& �!���
(!�� &#�� ��#��� � 2�� �� 2B� �� � �'� $� )�.��#$2� &.�$� 4:$2� 7(� /�
' !&�$��� !� ��(�.� 7(��%��� & #� $0�%$� ,&�%�'�� @K�2� KC2� BCA� $%$�
' !& $% $��
� ! �*�! $��'�!���$�$()$%5�'��$��)$ #*��$��%#�*/$���&�#���%$%���.�
��%#� �$�7(��$� $� �'� $�)�.��#$2� & #4�#���$�� *�#� $� 4�#!�' $�� &�$$�!�&�#�� ��
'�#'(.�"+ � & #%�.� $� � �%+ � ' �(:��$� � � 40�� �� �0� ',���$2� & !� $#�
#! *��$� � $���(� � (!�� 4 #!�� !��$2� (� !� $� 6%�$�2� ' �4 #!� ��
$()$%5�'���!�'�($���D(��% �!��$�6%�$��4 #�$%��#! "+ 2�!��$�*��%�/� �
',�!� �>4�% ��&#�!�#��&�$$��!?����4#�'"+ ��$()$%5�'����+ �#! *���
&�$$�� �� '�#'(.�"+ � & #%�.� &�#�� �� '�#'(.�"+ � $�$%/!�'��� �� 4#�'"+ � #! *��� /�
&# '$$���� � 40�� �� �*����&�#�� �� *���)�.��#� �� '�!��, � �( � 2� ' !�
'�$� ��.��#!�:��!�% �%!& #�#� ����*$0'(.��)�.��#��'�$ �6�$%����
�!� #$(.%� � � (!� !�#'� � 4�% � � &#�!�#�� &�$$��!2� $� �'� $�
)�.��#$��' �%#�!1$��&��$�!�' �'�%#�"L$��%#����C�µ! .PE����'�#'(.�"+ �
&#�4/#�'�� @K�A�� �$%�$� ' �'�%#�"L$� � �'� $� )�.��#$� % %��$� $+ � '#'�� � � �
*:$�!��$�)��6�$�7(��� 6�$%�%���� '�#'(.�"+ �& #%�.� � '#'�� � � � *:$�
!��$�)��6�$�7(��$��' �%#��$����)0.�$����40�� ��'%(���$$�!�' ! �(!�-#�+ �
' �'�%#� #�'�&�:��&�$$�#���' �'�%#�"+ �& #%�.���'� $�)�.��#$��� 1� �
µH�&�#��(!��' �'�%#�"+ �)�.��#��� 1�K �µH�@KC2��KA��
�$�)��6�$�' �'�%#�"L$���'� $�)�.��#$�% %��$�� �$���(�&#�4/#�' ���1C�
µH�� � �� $(�� )��6�� '�&�'��� � �)$ #"+ � � #���"+ � �[2� % #��!� �� $(��
%#!���"+ � 7(��%�%�%�*�� (!� $�4� � %'� .-��' P���.0%�' � &�#%�'(.�#!�%�
��%#$$��%��� ��$%���$$#%�"+ ���#��!�% #� �$$�$�4� ��
2.1.4.1. Capacidade de emulsão de gorduras
� �. �� � ���%$%�� 2� $��'� $�)�.��#$�*+ �!(.$� ��� ��$�� %0'(.�$��
� #(#�2��!��(�� � �$(�%�!��, 2�!�$�%�!)/!��(!�%�� ���#.�"+ ��#���
' �%�'% P* .(!�����#��'#$'�� �* .(!�!��%J!1$�' �$%��%����
��#���$$ 2�4 #!�!�!�'.�$�!�$%�$2�7(��+ �$+ �6'.($�*�!�%�' !& $%�$�
& #� �'� $�)�.��#$�� �$�!�'.�$� &#$�%$����)0.�$� .�)#%���&�#�� � ( � � $+ �
' �$%�%(0�$� & #� �'� $� )�.��#$2� 4 $4 .0&� $� �4 $4�%��.' .����� � ' .$%# .�� � �
',��#!� � � ( � � &�$$�!� �� ��' #& #�#� %�!)/!� %#��.�'/#� $�� �+ � & �$�
�������������������������������
�������� ���� �
�%�'��$� &.�� .�&�$� � &.�� ' .�&�$2� � � ��%$%�� � .�� 2� &�$$�� � �� $#�
' �$%�%(0�$� !�� #�%�#��!�%� & #� �'� $� )�.��#$� � &. $� %#��.�'/#� $� � $($�
&# (% $�����$%+ ���'� $�� # $�.�*#$2�! � �.�'/#� $����.�'/#� $����(%# $�
' !& ��%$2�%��$�' ! �*�%�!���$�.�& $$ .G*�$��$�&#$�%$�����%��2�%�!)/!�
$%�#+ ���' #& #��$���$�!�'.�$�!�$%�$�6�$%�%$�� ���%$%�� �.�� �@K�A��
�� 4 #!�"+ � � !�'.�$� !�$%�$� %!� & #� )3'%�* � �!��(�#� �� �'%�*���
%-6�'����4 #!��! � !/#�'�� $��'� $�)�.��#$2�&#*��� ��$$�!���$%#(�"+ �
��!!)#���� �&�'�.� �$� '/.(.�$� &�%.���$� �� �#* #�)�.��#�����)0.�$2� /�%�!)/!�
$�#�� � % ' 4# .2� (!� & # $ � ��%�1 6���%2� � 4 #!�� �� &#*��#� $%�
!$! ��� ����0*.�!!)#���#2�%��% ����0*.� �&�%/.� �)�.��#�' ! ����0*.� �
&�%/.� ���%$%���.�@K�A���
���% ��$�!�'.�$���)0.�$2�' ! ��$�!�'.�$�&-$1��$%+ ��&#$�%�!�(!��
$%#(%(#�� $!.,��%���+ �$$�'��.!�%�$%#(%(#�$� '�.0�#�'�$2� & #� *:$� ' !�
�&�#J�'��� *#!�4 #!� �*� � � � $(� %�!��, �2� !� 7(� $� .0&� $� & .�#$�
�� #!�.!�%� 4 $4 .0&� $�� $%+ � �$%#�)(0 $� � ! � �� 7(� �� $(�� & #"+ �
,�# 40.�'�� $%3�� �#''� ���� &�#�� �� 4�$� �7( $�2� �7(��% � �� $(�� & #"+ �
,�# 4-)�'�� $� �#''� ��� &�#�� � ��%#� #� �� !�'.��� �$� ! ./'(.�$� � �'� $�
)�.��#$� �$&L!1$� !� '(�,�� &#% � �� $(('�� !�'.�#2� ' !� �� $(�� 4�'�
,�# 4-)�'�� * .%��� &�#�� � ��%#� #� �� !�'.�� � �� $(�� 4�'� ,�# 40.�'�� ��� 7(�
' �%/!� $��#(& $�,�# 6�. ��&�#�� �6%#� #���!�'.���&�#����4�$��7( $��@K�A���
�$� �'� $� )�.��#$� &# !����%$� ��'� � '-.�' � � � �'� �
7(� $ 6�'-.�' ��%J!�(!�*�. #��&V�2��&# 6�!��!�%2�B��� ��%��% 2� �
&V� $%$� �'� $� ��� 4 #!�� ' �3(���� /� $()$%��'��.!�%� �4#�%�� �$� �'� $�
)�.��#$� ' �3(�� $� ' !� �� �.�'���� �&#$�%�!� (!� *�. #� � &V� �
�&# 6�!��!�%��2��7(��% �7(� $��'� $�)�.��#$�' �3(�� $�' !���%�(#����
�&#$�%�!�(!�*�. #��&V���&# 6�!��!�%�����
�� � �$$�!2� $� �'� $� )�.��#$� ' �3(�� $2� ' !� �� �.�'���� (� %�(#���2�
� ��:�!1$�!��$�4�'�.!�%� �7(� $�$($�&#'(#$ #$�.�*#$��E*�� �!�' �%��
7(2�7(��% �!��$�� ��:� �$��' �%#�#� ��'� �)�.��#2�!�� #�/���$(��'�&�'���
%�$� �'%�*�2� $� �'� $� )�.��#$� ' �3(�� $� ' !� �� %�(#���� $+ � �$� 4 #!�$� ' !�
!�� #�'�&�'���%#��%�@BCA��
�$��'� $�)�.��#$�' �3(�� $�$+ �%�!)/!�!��$�#$�$%�%$�<�&#'�&�%�"+ �
&. ����Y� �7(� $��'� $�)�.��#$�.�*#$�@K�A��
�������������������������������
������������� �
2.1.5. POR FIM
�$%�� .�!�%��� #*�$+ � )�).� �#�4�'�� $ )#� �� �!& #%5�'��� '#$'�%� $�
�'� $� )�.��#$� %*� �&��$� �� ��%�"+ � � $().��,�#� �� �!& #%5�'��� � $�
%#!���#� 7(��%�%�%�*�!�%� & #� !/% $� '��� *:� !��$� 6&�% $�� �+ �
,�*� 2� �$%���$$#%�"+ 2�7(�.7(#� *.���� �&# 4(��#� $%�� �!& #%��%�
�#�� �' �,'�!�% 2��+ �#�2�� ��%��% 2�& $$0*.�6&.�'�#� �%!& ��#'(#$ $�
��$% $� � � %#�)�., � 6&#�!�%�.� #�.�:� � $!� $%�� &7(��� ��'(#$+ � !�
'�!& $�7(�$+ �!�#�����$���$%� '(!�% ����#���./!��$$ 2� ��(% #2�7(�$�
' �$�#�� (!� �&#��:� &#!���%2� !) #�� �%�% 2� �� * .("+ � #'�%� ��
�!& #%5�'��� $� �'� $� )�.��#$2� $3�� $().��,�#� 7(� $%�� * .("+ � /� � %�.�
!���#��#�&������%#�$'�&.���#2�7(�����(/!�� �$(��% �3(0: �& ��$$(!�#�
7(� �)�#'�� % � � ' �,'�!�% � �$%�� �#��� �� 4 $$� �'$$�#� � 4�:#� $$��
! �$%#�"+ �)�$%�#��� .#� $�%#�)�., $�#'�%$��� C18����', 3��$�@�82���2�
�CA���#�(�#�@�K2��BA2��%#� (%# $2�$ )#� ��$$(�% ������*:�!��$��$�7(�&�$�
� ��*$%���"+ � $+ � �(!# $�$� � ' �$%�%(0�$� & #� ��*$%��� #$� ' !� *�#��$�
*�.J�'��$��' �,'�!�% ��
�$%�& �% �����! $%#�2�� ��%��% 2�7(��$� & #%(���$����*$%���"+ �
�$%�� �#�� &�#�� 4�#!�'J(%�' $� $+ � &�#%�'(.�#!�%� #�$ �,�$�� ��� 7(0!�'�� �
#�5��'���$0�%$2�'�&�:���#�#�� * $��� ��$%�$��#'&% #$��('.�#$2��%/�
<� 4�#!�' . ���� � 4�#!�' '��/%�'�2� &�$$�� � &.�� %'� . ���� 4�#!�'J(%�'��
�'$$�#���&�#��&# (:�#�� * $�!�'�!�% $�'�&�:$�� .�)#%�#� $�' !& $% $�
&# (:� $� � $� $($� . '��$� � �'"+ � ,�� ��G!#�$� & #%(���$� � %#�)�., �
4(%(# ��
�������������������������������
������������� �
2.2. MÉTODOS INSTRUMENTAIS PARA ANÁLISE DE ÁCIDOS BILIARES
�� $&�#�"+ � � 7(��%�4�'�"+ � � �'� $� )�.��#$� $+ � �$$(�% $� 7(� %J!�
*�� � �� $#� $%(� $� � $� G.%�! $� K � �� $2� ' !� $&'��.� �%�"+ �� �� $(��
(%�.��2� ' ! � 4##�!�%�� � � ����-$%�' � &#' '� � �"�$� ��%$%����$� �
,&�% )�.��#$2�/�#' �,'�����
�$$�!�$� 2�*�#��$��) #���$����.0%�'�$�%J!�$� �4�%�$���$%��$$(�% 2�
#' ##� ����*#$�$�!% . ���$�$!�7(2����#�.��2�$�%�,��' �$�(� �
$%�).'#�(!�!/% � $�!&.$2� #�&� � � ' !� $�$�)�.��� � #&# (%�)�.���
$3��$�� �$� !/% $�3�� &().�'� $� $+ 2� &. � ' �%#�#� 2� .�% $� � ' !&.6 $2�
!) #�2�� ��#�.2��) ��$�$�)�.����#&# (%�)�.����
�$�#�:L$�$%�$��4�'(.�$�&#�!1$2��+ �$-�' !��$�'�#�'%#0$%�'�$�
��%#0�$'�$� $�&#-&#� $��'� $�)�.��#$2�!�$�%�!)/!�' !��$�!�%#�:$�)� .-��'�$�
��$+ �&$7(�$� $���.�(!�$��$�#�:L$�$+ ��$�$�(��%$T�
• N��6�� ' �'�%#�"+ �!�7(� $� �'� $�)�.��#$� $� �' �%#�!� !�
�! $%#�$�)� .-��'�$��.*���' !&.6���!�%#�'��.��' ! �$+ �
6!&. $� �$���(����(#����^�
• �$�&�#%�'(.�#$�'�#�'%#0$%�'�$�40$�' 17(0!�'�$� $��'� $�)�.��#$T�
� �� �#��� *�#��� $� �'� $� )�.��#$� '.���'�!�%�
�!& #%��%$�7(�6�$%!���%(#�.!�%��.�*#$2�' �3(�� $�' !�
�.�'���P%�(#���� !� & $�"+ � ���2� ' �3(�� $� ' !� �'� �
�.('(#-��' 2� (�$(.4�%� $�!�& $�"+ ��α, (������' �3(�� $�
$�!(.%���!�%�!������!��α�^�
� �� $(� '�#�'%#� ��4�40.�' 2� 7(� $� ' . '�� 7(�$� $!&#� ��$�
��%#4�'$��!(.$L$^�
� ��$(��)��6��'�&�'�����)$ #*#�.(:��[̂�
� ���!& $$�)�.����!�%�#�4.( #$'J�'��^�
� ��4#�"���& .�#����%#� $�*�#� $�%�& $���'� $�)�.��#$2�
7(#�$3�!�.�*#$� (�' �3(�� $���4#�%$�4 #!�$^�
� N��6��* .�%�.����% $� $��'� $�)�.��#$^�
� �7(��$� �4#�"�$� �� �0*.� $%#(%(#�.� �%#� ' !& ��%$�
���*�(��$2�' !�*�#� $�'�$ $��4 #!�$��$ !/#�'�$�& $�'� ���$2�
� !��!�%����0*.� $�',�!� $��'� $��,�# 6�.� $��
�������������������������������
������������� �
�
�!� #$(.%� � $%�$� &# &#��$� ��%#0�$'�$� $� �'� $�)�.��#$� @�BA� �
�$�' !&.6�$��! $%#�$�)� .-��'�$�!�7($%+ 2���&$7(�$���$�! ./'(.�$�$%��
'.�$$� /� �40'�.� �! # $�2� #7(#� � *�#� $� &�$$ $� &�#��(!�����.�$� ' !&.%��
$%��!& #%��%��#(& ��)� ! ./'(.�$���
�$� %/'��'�$� '# !�% �#�4�'�$� %J!� $� � �$� 7(� !., #$� #$(.%� $� %J!�
�&#$�%� �������.�$���'� $�)�.��#$2�%��% ����0*.�7(�.�%�%�* �' ! ����0*.�
7(��%�%�%�* �@��2�CA��
�� $�(��� $#�� 4�%�� (!�� )#*� #*�$+ � '#0%�'�� � �.�(!�$� $$�$�
%/'��'�$2�%��$�' ! ���'# !�% �#�4���!�'�!���4������E��2�'# !�% �#�4�����$ $��
�U��2�'# !�% �#�4���!�4.(0 �$(&#'#0%�' ���=����.'%# 4 #$�'�&�.�#�������� #�
4�!�$#��� �$&'��.�J�4�$�<�'# !�% �#�4��� .07(�����.%��&#$$+ ��R�E����
$(��' &.�!�% ��� $&'%# !%#��� �!�$$�� �R�E�1H�� (�R�E�1H�1H��2�(!��
*:�7(�$%�$� $+ ��$�%/'��'�$�7(�&# !%!�� * $� � �!& #%��%$��*��" $����
*. '��� � $�!&.�'��� ' !� 7(� $#�� & $$0*.� ���.�$�#� �$� ' !&.% $� �
�'� $�)�.��#$��
2.2.1. CROMATOGRAFIA EM CAMADA FINA (TLC)
�!�� �$� &#�!�#�$� %/'��'�$� '# !�% �#�4�'�$� �&.�'��$� <� ���.�$� $�
�'� $� )�.��#$� 4 �� �� '# !�% �#�4��� !� '�!��� 4���� ��E�2� �,��� E�O#�
�,# !�% �#�&,O����$%��%/'��'��4 �����'��.!�%�(%�.�:���&�#��$&�#�"+ ���'� $�
)�.��#$�� $��� $��8B 1� �@�8A2�%� �*�� ���$#�&# �#$$�*�!�%��)�� ������
��� *�#��!� � $/'(. � �QQPQQ��� &#�%�'�!�%� $-� �' �%#�� �&.�'�"+ � ���
��%�4�'�"+ � � �'� $�)�.��#$� � ��� ! ��% #�:�"+ � � #�'"L$� � $0�%$� $�
!$! $�@�8A���
�!��88�2� � �..�� %��.�� @C A� $'#*#�!�(!�!/% �7(��.��� ���E��<�
'��%��#�4��P�$�% !%#��� &�#�� �� $&�#�"+ � � %'"+ � � �'� $� )�.��#$�
#�� �'%�*�!�%� !�#'� $�� �%#�*/$� � (!� $�$%!�� #�� 1'# !�% �#�4�' �
&# '1$�<�%#!���"+ � ��G!# ��$��%�#�"L$�& #�!��(% ����!$!��
!��',�� $� �4#�%$� �'� $�)�.��#$� #�� �'%�*�!�%�!�#'� $� ����� (� �R�2�
$%�!�� ��$$�!���$(��' �'�%#�"+ ����*�.���$%�&# '$$ �4 ��' !&# *���
�%#�*/$���' !&�#�"+ � $�$($�#$(.%� $2�' !� $� )%� $�& #�$&'%# $' &���
& #� #�*�"+ � �:�!�%�'�� ��� & $�"+ � �α� �!% . ���� 7(� #4#�#! $� !��$�
����%�2� �&#$�%�� � ����� *��%���$� $ )#� $%�2� %��$� ' ! � (!�� !., #�
#&# (%�)�.��2� �'$$�%�#� � (!� �G!# � !��$� #(:� � � !���&(.�"L$2�
�������������������������������
������������� �
& $$�)�.�%�#� �� �(% !�%�:�"+ � � &# '$$ � � &#!�%�#2� �� &�#%�#� $� � $�
#�� !/%#�' $2�(!�$%( �!��$��&# 4(�� ���'�#'(.�"+ ��%# 1& #% 1,&�%�'��
@C�A���
� � �%��% 2� �($ � � !�%#��.� #�� �'%�* � � .*� � '($% � � �#�(� �
#�$' ��'#$'� ����!���&(.�"+ 2�&�#'!�#.��#�$%��%/'��'��&�#��(!��& $�"+ �
'���*:�!��$�$'(��#����
2.2.2. CROMATOGRAFIA GASOSA SIMPLES (GC) E CROMATOGRAFIA
GASOSA ACOPLADA A ESPECTROMETRIA DE MASSA (GC-MS)
��'# !�% �#�4�����$ $��/���%/'��'���#4#J�'���&�#�������.�$���'� $�
)�.��#$� !� 4.(0 $� )� .-��' $�� � � �%��% 2� � �*�% � � %/'��'�$� #�&��$�
)�$��$� !� R�E�P��E�� �R��,P�.%#�� R��,� �#$$(#� E�7(�� �,# !�% �#�&,O�2�
$ )#%( ��' &.��$�<�$&'%# !%#����!�$$�2�&# !%!�#%�#�#1.,�$$�&�&.�
&# !���%�7(� '(&��$��8B ��
�$�&#�!�# $� $�* .*�!�% $�$%��%/'��'��%��,�!�& #�)�$� �($ ��
' .(��$� � �',�!�% � ' !� �4#�%$� 4�$$� @C�2C�2C�A�� �$%�$� ' .(��$� 4 #�!�
&# �#$$�*�!�%� $()$%�%(0�$�& #� ' .(��$� '�&�.�#$�7(��&#$�%�!�*��%���$�
� �7(��:�#$&�% �<�#$ .("+ ��� �%!& �����.�$� $��'� $�)�.��#$�@CK2CBA��
�!� $� � (%�.�:��2� ' !� $('$$ 2� � � �0*.� � �! $%#�$� !� 7(� ��
' �'�%#�"+ �� �'� $�)�.��#$� /�)��6�2� ' ! �/� � '�$ � � $���(����(#���2�
�&#$�%�� �(!�.*� ��#�(��$&'�4�'����$�$�)�.���@��1�82CB2C�A��
� � �%��% 2� �� &#&�#�"+ � �$� �! $%#�$� �� $#!� ���.�$��$� & #� $%��
%/'��'�� �'$$�%���(!�� . ���� $/#�� �&# '�!�% $�! # $ $� � ' !&.6 $2�
��. )� $��(!��!% . ����7(�& ! $�#4#�#�' ! �>�$&#$�*�?���(�$3�2�
&�#%1$��(!�6%#�'% �G��' � 2��� &�#%�#� $%2� $+ � )%� $�& #� '# !�% �#�4���
!� ' .(��2� *�#� $� $()16%#�'% $� � �' # � ' !� � �0*.� � ��4 #!�"+ �7(� $�
$3��@� #!�.!�%����.�*#$2��.�' ' �3(�� $2�%�(# ' �3(�� $�2�!�$�& � �#1
$� �%/� K� (�!��$� �$� 4 #!� ' �$�#� $� $� �' �3(�� $� ' !� � $(.4�% � � �
�.(' # ��% �A���$%$�$()16%#�'% $�$+ �& �$�!� $� $��'� $�)�.��#$� .�*#$�
�&-$�,�#-.�$� $� �#(& $� ' �3(�� $� � #�*�"+ � �!%�.�"+ � � #�*�"+ � $�
�#(& $�,�# 6�. � ��G'. �$%#-�����
H��$� #'�%!�%� &# '(#�!1$� !% . ���$� �.%#��%�*�$� >�+ 1
�$&#$�*�$?�� �1& %���&#&�#�"+ ���! $%#�$�&�#�����.�$���'� $�)�.��#$2�
7(� $3�!�!��$� #�&��$� � $�!&.$� � 6'(%�#2� ' ! ��7(.�$�7(� $+ � �%!��
'�%#�.�$%���$$#%�"+ ��
�������������������������������
��������K���� �
�� &# '$$ � �$&#$�* � ' !"�� ' !� (!�� 6%#�'"+ � &#/*��� $� �'� $�
)�.��#$���&�#%�#���!�%#�:����! $%#���$ # 2�&.�$!�2�)0.�$2�(#���2�$/!���!�7(�
$%+ � ' �%� $� � (!�� $&�#�"+ � !� *�#��$� '.�$$$� ��'� $� )�.��#$� .�*#$2�
�.�' ' �3(�� $��%�(# ' �3(�� $2�$(.4�%� $2��.(' # � ' �3(�� $��!�$%(#�$�
� *�#� $� ' �3(�� $�2� $�(��� � &# '$$ $� �,�#-.�$� ��� �.�'���2�%�(#���2�
�'� � �.('(#-��' � � $(.4�% �� � #�*�"+ � & #� !%�.�"+ � � �#(& � '�#) 60.�' 2�
$�(��� � 4 #!�"+ � � %#�!%�.$�.�.� /%#$� � (� (%# $� #�*� $�� �� &�#%�#� $�
�#(& $�,�# 6�. �.�*#$2��4 #!���� )%#�! ./'(.�$�* .�%�$��%#! $%�*�$�@�8A���
��� &#�%�'�2� $%�� &#&�#�"+ � ' !&.6�� � ! # $�2� $����4�'�� 7(� $+ �
�'$$�#� $� '#'�� � C� ��$�G%�$� &�#�� $� )%#�(!��.� � ' �'�%#�"L$��
% $� $��'� $�)�.��#$����*�(��$�&#$�%$�!�'����! $%#���
�� 6%#�'"+ � $� �'� $�)�.��#$2� �� &�#%�#� �� !�%#�:� !�7(� $%+ � �� $#�
���.�$� $2� /� �#�.!�%� 4'%(��� �%#�*/$� �� �&.�'�"+ � � (!� &# '$$ � �
6%#�'"+ �!�4�$�$-.�������2�� .���,�$��6%#�'%� ���' �%���!�!�'# ' .(��$�
&.�$%�'�$2�� !��!�%��%#�*/$���(%�.�:�"+ ��(!��',�!�% ���C��
��#%�� � $%� &#�!�# � 6%#�'% 2� �� $&�#�"+ � & #� '.�$$$� /� 4'%(���
�%#�*/$� � (!� $�$%!�� � &#!(%�� �-��'�� ��',�!�% � ' �%� � �#(& $�
&�&#��� ,�# 6�&# &�.2� �&,�6� ER1� 2� (� �R�1ER1� ��� �$%��',�!�% � $%��
!� 4#��' �$�&�#'�!�% �� $% 'I$����0*.�!(���.2� �7(� �% #����40'�.� �
)%#��\�%�!)/!�$�)� 2�& #�' �%�'% $�7(� ��(% #�4 ��!��%� �� � . �� � $�
%#�)�., $� � &#&�#�"+ � $%�� �$$#%�"+ 2� 7(� (!� �G'. � #(:� � �
.�) #�%-#� $�$&'��.�:� $�������.�$���'� $�)�.��#$��7(�#�(2�#'�%!�%2�
(!�� .�#��� & #"+ � � $% 'I� �$& �0*.� �� �0*.� !(���.�� ��.� $�%(�"+ � �!&� ��
�%#��� � � !#'� � � (%# $� .�) #�%-#� $� � ' �%#�'% �7(� $3!� ���.�$�#�
�'� $�)�.��#$��!��%J!��#%�4�'��.!�%��.% 2� �&#" �����.�$��(!���! $%#��
�'#'���K ���������.�$�%(�"+ ��7(�$�! � &-.� �/�!��$�(!�& �% ���4�* #�
� !% . ���$� �.%#��%�*�$� � &#&�#�"+ � � �! $%#�� ' !� '�#�'%#� �+ �
�$&#$�* ��
�&-$��� $&�#�"+ �& #� '.�$$$� /� &#'�$ � &# '#�<�,�#-.�$� $� �#(& $�
' �3(�� $�&�#��.�)#%�#� $��'� $�)�.��#$�.�*#$���!�#.�"+ �<�,�#-.�$����.�'����
�%�(#���2�$%��/�& #�� #!���:�!�%�'�2�#' ##� �<�' .�.�.�'����,�# .�$�@CC2�C82�
8 A�� �� ,�#-.�$� � �#(& $� $(.4�% � � �.(' # ��% � @8�A� /� 4�%�� & #� *��� �'��� ��
&#$$+ �.*��2�!�*�$ $�,�&#)�#�' $���" ��� 6���
� #� 4�!2� $� �'� $� )�.��#$2� 3�� ��� 4 #!�� .�*#2� $+ � �$ .� $� �� !�$%(#��
#�''� ��.� & #� (!�� $�(��� 6%#�'"+ � ����� �$� 6%#�'% $2� ' �%� � �'� $�
�������������������������������
��������B���� �
)�.��#$�.�*#$2�$+ �& �$�#�*� $2���%$��& #!�$#���3'%� $�!�U�2�& #�
(!� $�$�(��%$�!/% $T�
• !%�.� $� �#�.!�%� ' !� ��: !%�� � �'��'#0�� �� �
' �*#%� $�!�%#�!%�.$�.�./%#$1!%�.1/$%#�@CKA2�
• (� !� #�*� $� %#�4.( # �'%�./$%#$1!%�.1/$%#� @C�2C�28�28�2�
8�28KA2�
• (������!�#�*� $�,6�4.( # �$ &# &�./%#1%#�4.( # �'%�.1/$%#�
@�CA���
�$%�G.%�! � /� !��$� *��%�3 $ 2�(!�� *:�7(� �* .*�(!� &# '$$ � !��$�
$�!&.$2��($J�'�����#%4�'% $2�!�� #�$�$�)�.����!., #�#$ .("+ ���
�� %/'��'�� �$&#$�*�� � &#&�#�"+ � � �! $%#�$2� 7(� �'�)�! $� �
$'#*#2�/�)�$���� �%#�)�., � #�����.� ��.!/� ��8���� @8BA�� � $%#� #!�%�
�%',..� �; #%,���% �� ��8C��� @8�A� 4���#�!��$�)�$$� �� 6%#�'"+ � ���'��.� & #�
' .(��$� ��C� � ��" �#�!� � 4#�''� ��!�% � � 6%#�'% � !� ����1ER1� ��
�()$7(�%!�%�!(�% $� (%# $��(% #$�#' ###�!�<�!$!��%/'��'���$&#$�*��
�&#&�#�"+ ����! $%#���#'�%!�%�4 ��&().�'���(!��#*�$+ �$ )#�## $�
���% $� � !%�) .�$! � $� �'� $� )�.��#$� @8CA2� 7(� /� )�$��� � � ($ � $%��
%/'��'���
��#�� �./!� �� ! # $��2� �� ' !&.6��� $%$� &# '$$ $� & � $#�
�����(!��& %�'��.� 4 �%�� ## 2� $&'��.!�%�&�#�� &#� #$� ' !�!� $�
6&#�J�'��2�.�!�%�� ���4�'�J�'���� �$!&�, � �!/% �@�8A���!��$$�$�
4 �%$� � ## � /� �� & $$�)�.��� � $� 4'%(�#� (!��
$&�#�"+ P,�#-.�$P#�*�"+ � ��' !&.%��� ��#���./!��$$ � �!/% �(%�.�:��(!�
#���%� '��'#0�� � ���: !%�� �2� &�#�� � 7(�.� 3�� ,�� �.%#��%�*�$� 7(�
!#'!�$#�$%(��$�@88A���!��.�$�/���(%�.�:�"+ �' ! ����%�!%�.��%� �
�2�1�!% 6O&# &�� � @88A2�7(�&�#'��#�#�!� $� ' !& $% $� $'(��#� $� �
7(� � ��: !%�� �� �$%� ' !& $% � ',��� �� !%�.�#� $� �#(& $� ,�# 6�. $� �$�
& $�"L$� �α� � �α� � �'� � 7(� $ 6�'-.�' � @88A�� ��.� 4�'% � ' �%#�)(�� &�#��
#(:�#� $�*�. #$�%'%� $� �#4#� ��'� 2�!��! $%#�$�)� .-��'�$��
�� � & #� )3'%�* � (!�� $�!&.�4�'�"+ � � &# '$$ $2� �$$�!� ' ! � (!�
!., #�!�% �� $� #$(.%� $� )%� $2� $�* .*#�!1$�!% . ���$� � � 4���.�
$��� $�C �7(�&#!�%!������.�$���.�' ' �3(�� $2�$!����'$$����
&# '#� �� (!�� ,�#-.�$� �� �.�'���� @� 2� �2� �2� �A�� �(1$� %�!)/!� �
�&�#'�!�% ��(!�� * �%�& ��' .(��$�'�&�.�#$�!%�.�'�$2�� !����$��.%#��
�������������������������������
������������� �
�.. O� �$$ '���$� � �($ � � #�*� $� �&# &#�� $�%��$� ' ! � �%#�!%�.$�.�.� /%#�
�H1�H��� (� ��!%�.$�.�.�/%#��H1�H���� $�!%�.�' .�� �% $�@� �A��
� ��%��% 2�&�#��7(�$�& $$��&# '#�<����.�$��' !& $% $�& #�U��
(� U�1H�2� /� �'$$�#� � 7(� $%$� $3�!� * .�%�$�� � ! � $� $�)2� $� �'� $�
)�.��#$� �+ � $+ 2� &.�� $(�� ��%(#:�� 7(0!�'�2� ' !& $% $� * .�%�$2� ��� �� $(��
�!�$+ ��$%#(%(#��! .'(.�#���#(& $�' !�,%# �% ! $���E � 2�/��'$$�#� �
&# '#� <� $(�� %#��$4 #!�"+ � !� ' !& $% $� * .�%�$2� &�#�� 7(� & $$�!� $#�
%'%� $��$%(� $�& #�U���' &.�����$&'%# !%#����!�$$����
� �7(��:�#$&�% �<����.�$�7(�.�%�%�*�2� $�#�*� $�!��$�(%�.�:� $�$+ �
$��'%�% $2�%#�4.( # �'%�% $�� $�%#�!%�.$�.�.�/%#$� $��'� $�)�.��#$�!%�.� $�
�H1�H��2�$� �$%$�G.%�! $� $�!��$�� &%� $�@�8A���
��� ���.�$� 7(��%�%�%�*�2� !� 7(� �� $�$�)�.��� � $.'%�*��� $+ �
$$�'���$2� &%�1$�&. $�!%�.��'%�% $�' !�� ��:�"+ �& #�� ��:�"+ �7(0!�'�������
@� K2� BA� (�&. $�!%�.�/$%#$� $��.7(�.�!%�.$�.�.�/%#$�@� �2� C2� 8A��
�(!� !/% � #.�%�*�!�%� #'�%� � #�*�"+ 2� 6'(%�1$� (!��
#�*�"+ � $� �'� $� )�.��#$� �1 6 1.%�1�� � �1 6 1.%�1�2B� �� (!� �#(& �
!% 6�!�2� ����� ��%$� �� 6%#�'"+ � $� �'� $�)�.��#$� �� �! $%#��)� .-��'�2�
$' �3(��1$� �:�!�%�'�!�%� $��'� $�)�.��#$� ' �3(�� $� � &# '1$� & #�
4�!� ��(!�� #�*�"+ � $� ' !& $% $� )%� $� !� �!%�.%�.$�.�.� /%#$� � /$%#�
!%�.� �� �$%� !/% � �&#$�%�� ' ! � &#��'�&�.� *��%��!2� !� #.�"+ � � $�
��%#� #$2�(!���!��(�"+ ���&# ("+ �� �#%4�'% $�7(�& !� ��%#4#�#� ���
���.�$����! $%#��@�� A��� ��%��% 2�#(:�����4 #!�"+ � )%���� $�% %��$� $�K�
�'� $� )�.��#$� )�$2� &#� � �� ��4 #!�"+ � #.�%�*�� <$� *�#��$� '.�$$$� �
' �3(�� $2�(!�� *:�7(� ��,�#-.�$� �+ � /� &#'��� �(!�� $&�#�"+ � !�
*�#��$�'.�$$$��
�!�#$(! 2���'# !�% �#�4������$�/�(!��%/'��'������.�$���'� $�
)�.��#$� 7(� /� $�$0*.2� !�$� 7(� �'$$�%�� � (!�� . ���� $/#�� � &�$$ $�
&#&�#�%-#� $� �� �! $%#�2� 7(� $+ � ' !&.6 $2� ! # $ $� � 7(� & !� $#2�
��'.($�*�!�%2�4 �%��## �$� $� &#� #$�%�*#!�& ('��6&#�J�'����$%��
%/'��'���
2.2.3. CROMATOGRAFIA EM FLUÍDO SUPERCRÍTICO (SFC)
�$%�� %/'��'�� '# !�% �#�4�'�� ��(&#'#�%�'�.� =.(�� �,# !�% �#�&,O2� �=���
%!�& #�)�$� �($ �� 4�$$�!-*�$2� � #!�.!�%���$ $�$2���%!&#�%(#�$� �
&#$$L$�'�&�:$��4���#!�' ��"L$� &#�'� ���$��'�!�� �$(�& �% �'#0%�' �
�������������������������������
��������C���� �
�4��0*.��(!����#�!���4�$$�2����',�!���: ���$(&#'#0%�'�����4�$�!-*.�
!��$�(%�.�:���/� ��-6� ��'�#) � �$(&#'#0%�' ���$%��4�$�!-*.�& $$�)�.�%����
$&�#�"+ ��' !& $% $��+ �& .�#$�� (��!(�% �)��6��& .�#������&#$�%��
�� *��%��!�� $#� * .�%�.� . � �7(� $� #�#$$���� ' ��"L$��%!&#�%(#���
&#$$+ ��!)��%$2��� � #��!���6%#�'% $�!(�% �&(# $���
� � '�$ � � $� ' !& $% $� !� $%( � $#!� & .�#$2� ' ! � �.�(�$�
' �3(�� $� $��'� $�)�.��#$2�&# '1$�<���"+ ��(!��&7(���7(��%���
�$ .*�%�& .�#�@���2���A2�' ! � �!%�� .2�<�4�$�!-*.�$(&#'#0%�'���
�� �=�� /� #�.�:��� ��%!&#�%(#�$�)�$%��%� ���%�*�$� �7(� &#!�%� �
$%( ��! ./'(.�$�%#! .�)�$2� (��+ �* .�%�$2�7(�� #!�.!�%�% #��!� �
$(� $%( � & #�U�� �40'�.2� (�!$! � �!& $$0*.�� ��#�� �./!� �$$ 2� �$� .*��$�
&#$$L$� &#�'� ���$��#�!�%!& $�����.�$�7(�& !�$#�)!�!��$�'(#% $�
7(� $��(!�����.�$�' �*�'� ��.�& #�R�E��@���A��
� �7(��:�#$&�% �<����.�$���'� $�)�.��#$2�$%��!% . ����&#!�%�
��$&�#�"+ ���'� $�)�.��#$�.�*#$2��.�' ��%�(# ' �3(�� $��(!��4 #!��!��$�
#�&��� �7(�(!��$&�#�"+ �& #�R�E���4�$� ��*#$�2�' !�(!��$.'%�*���
' !&�#�*.� @�8A2� !�$� �(!�� 4 #!��!� $� #&# (%0*.�7(� & #� R�E��� ��#��
�./!��$$ 2���$&�#�"+ ���$-!# $��,�# 6�.� $�' �3(�� $��+ �/�% %�.!�%�
' �$�(���& #�$%�!/% �@���A��
�!�#$(! 2����=��/�(!��%/'��'��&# !% #��!�$�7(��+ ��&#$�%����
' �$�$%J�'��� �'$$�#��� &�#�� $(&.��%�#� %/'��'�$� � $&�#�"+ � !��$� )!�
$%�).'��$� ' ! ��� U�� � ��R�E��� � � 4(%(#�!�%� *�#� �� $#�($��� &�#�� ��
)%�"+ � #�&��� � 6%#�'% $� ���'���$� � �'� $� )�.��#$2� �� &�#%�#� � �! $%#�$�
)� .-��'�$�' !&.6�$�7(�$3�!2�& �$2�7(��%�4�'� $�& #�U�� (�R�E�2�' !� (�
$!�#'(#$ �<�$&'%# !%#����!�$$���
2.2.4. ELECTROFORESE CAPILAR (CE)
�� .'%# 4 #$� '�&�.�#� ���2� ��&�..�#O� �.'%# &, #$$�� /� (!�� %/'��'��
#'�%��!� $��� ��� $��7(2�����#�� $��'� $�)�.��#$2�%!�$� ��&.�'���
!�$%( $�&#.�!���#$2����$&�#�"+ P#$ .("+ ��$ .("L$�&(#�$��&�#L$2�
(� ��� 7(��%�4�'�"+ � $%$� ' !& $% $� !� 4 #!�$� 4�#!�'J(%�'�$� @���2��KA��
�(#� $�!�%2� $� �'� $�)�.��#$� $%+ �!��$� .��� $�<� ��� ' ! � �3(*��%$� ��
4�$� !-*.2� '�&�:$� � �#�#� !�'.�$2� $� � 6%�$ � � �G!# � � �#%�� $�
&().�'� $�$ )#�$$�%!��@��BA��
�������������������������������
��������8���� �
� �$��#%�� $�#'�%$� �!$! ��#(& ���(% #$�@���2��CA�#& #%�!���
$(��(%�.�:�"+ ����%#!���"+ ���$���'� $�)�.��#$�!�$ # �,(!�� 2�' !�
&�#%�'(.�#� ��'�J�'���� $�'�$ $��' .$%�$�����#�*�:2�7(�.*�!� $�*�. #$�
��'� $�)�.��#$� ���*�(��$�)�$%��%��'�!�� $�$($�*�. #$�� #!��$�����$%1
$2�� ��%��% 2�7(��� #!��$�0����' .(��� $��K��'� $�)�.��#$�$%(� $�
/� &'(.��#2� $ )#%( � $� ' !&�#��� ' !���7(� ' ##�!�U�� (�R�E���� ! �
�#���*��%��!2�$%��%/'��'��' �$�(�#$ .*#� $��K��'� $�)�.��#$�$%(� $�
!� '#'�� � C� !���� � � �%��% 2� � $(� ($ � �4��(#�1$� .�!�%� � <$� $�%(�"L$�
&�% .-��'�$�!�7(�,��(!��(!�% � $��0*�$���'� $�)�.��#$��
�!� $� )$%�'(. $� <� (%�.�:�"+ � �� ��� %!� �� *#� ' !� $� %'% #$�
(%�.�:� $���� 4�'% � $� �'� $�)�.��#$� �&#$�%�!2���� 4 #!�� .�*#� � ' �3(���2�
(!�� )��6�� �)$ #"+ � ! .�#� @�8A� &. � 7(� $� $($� .�!�%$� � %'"+ � & #�
�)$ #"+ � � � �[� $+ � !�$�� � .*� $� 7(�� � ' !&�#� $� ' !� �$�
' �'�%#�"L$�!�7(� ' ##!���$��! $%#�$�)� .-��'�$2�� !��!�%��$ # �
,(!�� ���
�&$�#� �$$ 2�%J!�$� �� $� �.�(�$�&�$$ $� $����4�'�%�* $�7(�&#!�%!�
(!�!., #�!�% �� $�.�!�%$��%'"+ ���'� $�)�.��#$���� &I�%��.��@��8A�
4 #�!�&� ��# $� ���(%�.�:�"+ �� '�'. 6%#���$� ��� 4�$�!-*.� &�#�� �(!�%�#� ��
#$ .("+ � $�*�#� $��'� $�)�.��#$��D(��.���%��.��@�� A���%# (:�#�!� �($ ��
(!� ' !& $% � ' !� �)$ #"+ � �[� ��� 4�$� !-*.2� '(3�� ' �'�%#�"+ � �!��(��
7(�� � ����.�% �&�$$��� �%'% #����($ �$%�' �%#�$%�4 ��& �$�#% !� �
& #�S�#�)�%��.��@���A���
���.�$$�' !&�#�%�*�$��%#�R�E������4 #�!�&().�'��$�& #��'�.���@���A2�
E�%��.��@���A��� ��%��.��@���A��
�$� �'� $� )�.��#$� $� 6%#�'% $� $+ 2� � #!�.!�%2� #�$$ .*� $� � �
%�!&+ � 7(� �'%(�� ' ! � 4�$� !-*.� �� .'%# 4 #$� '�&�.�#�� �$%�� 4�$� /�
4 #!(.���&�#��7(� $��'� $�)�.��#$� 4 #!!�!�'.�$� �!� $ .("+ ��7( $��� �
%�!��, � � �G!# � � ! ./'(.�$� ��#���$2� &��%� �� $(�� $%#(%(#��� ��
4 #!�"+ �$%�$�!�'.�$�&#!�%�#�.�:�#�.'%# 4 #$�'�&�.�#�!�! ��% ��
>.'%# '��/%�'��!�'.�#?�@��KA��
�� ��%# ("+ ��%/'��'�$��%�$�>,�4���$?�' ! ���.'%# 1'# !�% �#�4���
@��BA� � �� ' !)���"+ � �� ��� ' !� �� $&'%# !%#��� � !�$$�� ���1H��� @���A�
&# !%!�(.%#�&�$$�#��.�(!�$��$�.�!�%�"L$������.�$���'� $�)�.��#$�& #����
$�!&.$2�� !��!�%�� �7(��:�#$&�% ���$�$�)�.����$&'�4�'�����
%'"+ �@�8A��
�������������������������������
�������� ���� �
2.2.5. CROMATOGRAFIA LÍQUIDA DE ALTA PRESSÃO (HPLC)
�(%#�� %/'��'�� '# !�% �#�4�'�� 7(� %!2� %�!)/!2� *�� � �� $#� !(�% �
(%�.�:��� /� �� '# !�% �#�4��� .07(��� � �.%�� &#$$+ � �R�E�2� R��,�
�#$$(#P�#4 #!��'� E�7(�� �,# !�% �#�&,O�2� 7(� /� � 4(.'# � �� &#$�%�
�$$#%�"+ ����R�E��4(�'� ���' ! �!/% �$&�#�%�* 2��+ �%� ���'�&�'���
��$%���(�#��!��7(��%�4�'�#� $�' !& $% $�7(�$&�#�����#����7(��%�4�'�"+ 2�
$+ � �' &.� $� �*#$ $� %'% #$� � � $�$%!�� '# !�% �#�4�' 2� � !��!�%�
%'% #$�#4#�'% !/%#�' $2��(.%#�*� .%�$2��4.( #$'J�'��2��:�!�%�' $� (��
$&'%# !%#����!�$$���
�� $&�#�"+ �� �'� $�)�.��#$� & #�R�E�� $-�' �,'(�$�* .*�!�% $�
� $� G.%�! $� %#��%�� � '��' � �� $� ��&-$� �8� ��� �$%�� %/'��'�� %!� (!�� ) ��
'�&�'��� � $&�#�"+ � � ' !& $% $2� !�$� %!� ' ! � $(�� &#��'�&�.�
$*��%��!��+ �%#���'�&�'����7(��%�4�'�"+ �$$$�!$! $�' !& $% $��
��#���$$ �4�'��&��%���'�&�'����7(��%�4�'�"+ � $�%'% #$�7(�.,�
$+ ��' &.� $��
��' !)���"+ ���R�E��' !�(!�%'% #��$&'%# !%#����!�$$��/���
7(�!., #$�&#$&'%�*�$��&#$�%��&�#�������.�$�# %���#����'� $�)�.��#$2�
& �$�! $%#��(!��.*��� $�$�)�.��� �$&'�4�'��2� $!� $� ��' �*���%$�
�! # $��� � ' !&.6���� �� &#&�#�"+ � � �! $%#�$� �7(��$� &�#��U��
@��CA��
[�#� $�!/% $� ���.0%�' $�)�$� $� !�R�E��%J!�$� �$'#�% $�&�#�� ��
7(��%�4�'�"+ ���'� $�)�.��#$���$�!��$�*�#���$�!�%#�:$�)� .-��'�$2�7(#�.�$�
$3�!� �$ # �@�K2� ��82��� 2����2����2� ���2����A2� �&.�$!��@��K2���B2����A2���
(#����@���A2���)0.�$�@���2���C2���82��� 2����A� (� �$(' ���$%#�' �@���A��
2.2.5.1. Fase móvel
�$� 4�$$� !-*�$� &�#�� ���.�$� � �'� $� )�.��#$� & #� R�E�2� �&$�#� �
$#!� &�#%� �!& #%��%� � &# '$$ � $&�#�%�* 2� �+ � �&#$�%�!� �#��$�
�4#�"�$� � � 7(� �:� #$&�% � <� $(�� ' !& $�"+ � 7(�.�%�%�*��� �+ � ��� $(��
��#�.���' !& $%�$2� (�& #�(!��.' .��!%�� .� (��1&# &�� .��P (�& #�(!�
! �4�'� #��4�$���#�.!�%��'% ��%#�. ���& #�(!�%�!&+ �!�4�$��7( $���
[�#��$� $+ ��$� $ .("L$�%�!&+ �7(� & !� 4�:#� &�#%� �� 4�$� !-*.2�
$� � �$� !��$� ' !(�$� �$�7(� ' �%J!� �L$� 4 $4�% � �' !� ' �%#�1�L$� $-� � (�
& %�$$� ����$�7(�' �%J!��'%�% ���!-�� ���$�4 $4�% $�$+ �' !& $% $�!(�% �
& (' �* .�%�$�2�� �'�$ �� �%'% #��' &.� �� �R�E��$#�(!�$&'%#-!%# �
�������������������������������
������������� �
� !�$$�� ' !� � ��:�"+ � & #� %,#! $&#�OP.'%# $&#�O2� ,�� � #�$' � � .$�
&#'�&�%�#!�� )$%#(0#!� ��)(.�:� #� �>3%?���� �%#�#��!�%�� $� 4 $4�% $2� �
�'%�% ���!-�� �/2�<$�' ��"L$��%!&#�%(#���&#$$+ �#(:���(%�.�:��$2�
(!�' !& $% �* .�%�.���+ ��&#$�%��$$�&# ).!��@���2���A��
�����).�������$%+ �$'#�%�$2��(!��4 #!��$('��%�2��$�4�$$�!-*�$��
�.�(�$�!/% $�� ���.�$� � �'� $�)�.��#$� & #�R�E��&().�'��$�� $�G.%�! $�
�� $��
���$� ��� �����%��� /� (!� 4�'% #� �� %#� !� ' �$�#�"+ � 7(�� � $�
�'� $�)�.��#$��+ �$%+ �7(�!�'�!�%�#�*� $2�%� �(!����4.(J�'���'�$�*��
��� #$ .("+ � � �.�(�$� &�' $�� �� &R� �$� 4�$$� !-*�$� �%#�)�., $� ��%#� #$�
$�%(�1$� ��� ��!�� �%#� �2K� � K2��� R�)�%(�.!�%2� $' .,1$� (!� &R� �� 4�$�
!-*.�(!��(���� �'�!�� �&V�� $� �'� $�)�.��#$� !�$%( 2� �! �7(�
$%$�$%3�!�% %�.!�%�� ��:� $�@���A���
� � '�$ � $� �'� $�)�.��#$� .�*#$� � &V��/� 2� �&# 6�!��!�%2� K��� $�
�'� $� �.�' ' �3(�� $� /2� �&# 6�!��!�%2� �28� � $� �'� $� %�(# ' �3(�� $�
�&#$�%�!�(!�&V���%#��������
�!�&R�!��$��'� �' �%#�)(��� #!�.!�%�&�#��(!��!� #�� ��:�"+ � $�
�'� $�)�.��#$��.�' ' �3(�� $2��� � #��!���(!��(!�% � $�$($�%!& $��
#%�"+ �@�� A2�(!��*:�7(� ' ##�(!��(!�% ���,�# 4 )�'�����! ./'(.��
& #�$%���6�#��$%�#�� ��:�����$��'� $�)�.��#$�%�(# ' �3(�� $�%J!�(!�&V�
%+ �)��6 �7(��+ �/�& $$0*.��.%#�#� �$(�$%� �� � ��:�"+ �' !� $�%�!&L$�
' �*�'� ���$� �$& �0*�$� � ' !&�%0*�$� ' !� �� �+ � $%#(�"+ � �$� ' .(��$� �
4�$���*#$��!��$�(%�.�:��$��&R��1C����
D(�� � $��#(& $�'�#) 6�. � $��'� $�)�.��#$�.�*#$���.�' �3(�� $�$+ �
#�*� $� �& #� 6!&. 2� !%�.� $�2� $� �� '�&�'��� � ��4.(�'��#� �
%!& � � #%�"+ � & #� ��4.(J�'��� � &R� �� 4�$� !-*.2� (!�� *:� 7(� $%$�
' !& $% $2�& #�6!&. ����4 #!���/$%#$�!%0.�' $2�3���+ �$+ �� ��:�*�$��
�������������������������������
������������� �
�
��).������1�=�$$�!-*�$�(%�.�:��$�������.�$���'� $�)�.��#$��#��$%��$���$�
&().�'�"L$�!��$�#&#$�%�%�*�$� $�G.%�! $�� ��� $�
&������ &�� '����"%�����%#�'I�%��.��@��KA� �8CK� �1&# &�� .�Y�� !H�%�!&+ �4 $4�% ���B T�� ��R�#�� �%��.��@���A� �8C�� ��Z��'% ��%#�. �Y�%�!&+ �4 $4�% ��� TB ���
N�Z��'% ��%#�. �Y�%�!&+ �4 $4�% ��� TC ��� $$��%��.�@�� A� �8C�� !%�� .�Y�%�!&+ �4 $4�% � 2 ��H�&R�K2�K���KT�K���%',..�%��.��@��CA� �8C8� !%�� .�Y��'%�% ���!-�� � 2��H�&R�K2����KT�K��U %.O�%��.��@���A� �88 � �'% ��%#�. �Y���(���K�T�B��Y�%�!&+ �4 $4�% �Y��'��
�#% 4 $4-#�' �� ��%��.��@��BA� �88�� ��Z��'%�% ���!-����&R�K2��Y�!%�� .���KTBK�^��
N�Z�!%�� .�Y��'%�% ���!-�� ���KT�K����*#����%��.�@���A� �88�� ��(����'% ��%#�. �� ��%��.�@���A� �88K� ��Z�!%�� .��K�!H�Y��'%�% ���!-�� �&R�K2���BBT����Y��
N�Z�!%�� .��K�!H�Y��'%�% ���!-�� �&R�B2 ���KT�K��Y����Z�!%�� .��
U�%%��%��.�@�� A� �88�� �1���(��^��N�Z��'% ��%#�. �Y�!%�� .��B T� ��
�:#�%��.�@��BA� � �� ��Z��'% ��%#�. �Y�!%�� .�Y��(����KT��2CT��2��^��N�Z��'% ��%#�. �
� )�.�$�%��.��@��8A� � �� �'% ��%#�. �Y���(���B T� ���#F��:�%��.�@��8A� � �� �'% ��%#�. �Y���(����T����%!���%��.��@���A� � �� �1���(��^��
N�Z�!%�� .^����Z��'%�% ���!-�� �� �!H2�&R��2K�
���.��' ::��%��.��@�����'�!�A�
� �� ��Z���(��Y��'��=-#!�' �� 2 ��9��Y��'%�% ���!-����K�!H^��N�Z�!%�� .�Y��'��=-#!�' �� 2 ��9��
�$$�#�%��.��@��KA� � �� !%�� .�Y��'%�% ���!-�����K�!H�Y��'���'/%�' �� 2 K9��S�� �%��.��@��CA� � �� � �9��'% ��%#�. �Y�8 �9��!%�� .T4 $4�% ��& %�$$� �B T� ��N(#I�#�%��.�@�KA� � K� ��Z��'%�% ���!-�� �&R��2K�Y��'��=-#!�' �� 2 ��9�^��
N�Z�!%�� .�Y��'��=-#!�' �� 2 ��9���
�
�!� (%# � �$&'% � �� %#� !� ' �$�#�"+ � /� � �(� ��� ���� �%���
���).����������$%�*�����4.(�#�$ )#� �%!& ���6'("+ ������.�$�2�� �!$! �
%!& 2� �'%(�� ��� '�&�'��� � $&�#�"+ P#$ .("+ 2� � !��!�%� $�
�$-!# $�& $�'� ���$��,�# 6�.� $��
�!��#���%��.(�"+ ��&7(� $� ��'#!�% $�� � . �� � �%!& ��
(!��4�$�!-*.��'0�'��&#!�%!���$&�#�"+ �& #�R�E�� $��*#$ $� �$-!# $�
& $�'� ���$� $��'� $�)�.��#$��+ �#�*� $��6!&. T��,�# 6�.� $��&#$�%$�
��� �! $%#�� �(!� $-� �$�� � @���A�� �$� �'� $� )�.��#$� �,�# 6�.� $�
�7(� $ 6�'-.�' � � $ 6�'-.�' �� �$� *�#��$� '.�$$$� �.�*#$2� �.�' ' �3(�� $2�
%�(# ' �3(�� $��$+ �$!&#�(!�) !����'� #��>)�',!�#I?����7(�.����
(!��$&�#�"+ �'# !�% �#�4�'���� #!�.!�%2� $��3($%$��' !& $�"+ ���4�$�
!-*.� $+ � $!&#� 4�% $� ' !� $%$� ' !& $% $� $ )� &#!���%� )$#*�"+ 2�
& #7(�% $� $� (%# $�$�#$ .*!2�,�)�%(�.!�%2�' !�4�'�.����
�������������������������������
������������� �
��).�� ��� �1� =.(6 � �� 4�$� !-*.� � �.�(!�$� %/'��'�$� � ���.�$� � �'� $�
)�.��#$�& #�R�E��
&����� &�� )�������%#�'I�%��.��@��KA� �8CK� K 1� �µEP!���R�#�� �%��.��@���A� �8C�� � �_EP!���� $$��%��.��@�� A� �8C�� � �_EP!����%',..�%��.��@��CA� �8C8� � �_EP!���U %.O�%��.���@���A� �88 � K �_EP!���� ��%��.��@��BA� �88�� 8 �_EP!�����*#����%��.��@���A� �88�� � �_EP!���� ��%��.��@���A� �88K� �2��_EP!���� ��%��.��@���A� �88K� � �_EP!���U�%%��%��.��@�� A� �88�� �� �_EP!���� )�.�$�%��.��@��8A� � �� � �_EP!����#F��:�%��.��@��8A� � �� � �_EP!����%!���%��.��@���A� � �� � �_EP!������.��' ::��%��.��@���A� � �� � �_EP!����$$�#�%��.��@��KA� � �� � �_EP!���S�� �%��.��@��CA� � �� � �_EP!���N(#I�#�%��.��@�KA� � K� � �_EP!���
�
�$� *�. #$� � 4.(6 � 7(� $+ � #& #%� $� ��� .�%#�%(#�� $+ �
6%#� #���#��!�%� *�#��*�$� &. � 7(� ��� &#$�%� �$$#%�"+ � $� &% (� & #�
(%�.�:�#�4.(6 $��� �µEP!��2�7(�$+ �G%�$����!���!�:�"+ � �$4 #" ���7(��$�
) !)�$� $%+ � $(3�%�$� � #&#$�%�!2� &�#�� �./!� �$$ 2� (!�� ' �$�#�*.�
& (&��"��� 4�$�!-*.�� �'#$'�7(2� $%$� *�. #$� � 4.(6 2� $+ �!(�% �!��$�
&#-6�! $� $�4.(6 $���%#���7(� $�$&'%#-!%# $��!�$$��& !��'�%�#2�
$� �$�'$$�#� ���(%�.�:�"+ ��*�.*(.�$�7(��*�!� �4.(6 �!� �$�'����$�
�$&'%#-!%# �� (%# $�%'% #$�P (�$� % ���
�+ � ' �$�(�! $� &#')#� �� *��%��!� � (%�.�:�#� 4.(6 $� !(�% � �.% $�
@��CA� 7(� ' �$�#�! $� (!� $�'� � � 4�$� !-*.2� � !��!�%� $�
$ .*�%$� #�5��' $� &�#�� '# !�% �#�4��� �!%�� .2��'% ��%#�. 2� �1&# &�� .��7(2�
� � �#�(� � &(#:�� #7(#� 2� %J!� (!� '($% � #.�%�*�!�%� .*� �� �� �
)3'%�* �/�4�:#� $�' !& $% $�$�0#!���' .(���!��$�' 2� $��(% #$�*#��!�
�& $%�#�!��$�!�' .(��$�'(#%�$��K�'!�2� (�� �#�3($%���' !& $�"+ ���4�$�
!-*.��
2.2.5.2. Fase estacionária
�� 4�$� $%�'� ��#��� !��$� (%�.�:��� ��� $&�#�"+ � � �'� $� )�.��#$� & #�
R�E�� /� $������ ' ! � 4�$� ��*#$�� � /� ' �$%�%(0�� & #� $0.�'�� #*$%��� �
'���$� '�#) ���$2� !��$� (� !� $� . ���$� ���2��^�C^��C��� \� $������ & #�
��*#$��& #7(�,�$% #�'�!�%�$�' !" (�& #�($�#�$0.�'��' ! �4�$�$%�'� ��#���
�$%��4�' (�' �,'���' ! �4�$�� #!�.����#*$%�!�% ���$0.�'��' !�'���$�
'�#) ���$2�*� � ��*#%#��$�& .�#��$���4�$�!-*.���$ .*�%$� #�5��' $�
�������������������������������
������������� �
&�#�� !� $� &�#'��.!�%� �7( $ $�2� &. �7(� �� $����"+ � � 4�$� ��*#$�� $�
! $%# (��&# &#������
�$� 4�$$� $%�'� ��#��$� !��$�(%�.�:��$2� ��� �#�� $� �'� $�)�.��#$2� $+ �
�%+ � ' !& $%�$� � $0.�'�� #*$%��� ' !� ��C� @�8A�� �$� �4#�"�$� !��$�
�!& #%��%$2�� �7(��:�#$&�% �<�4�$�$%�'� ��#��2�$�%(�!1$��&��$�� ��0*.�
� �5!%# � �$� &�#%0'(.�$� 7(� &#�',!� �$� ' .(��$� 2� ����2� � � �0*.� �
�5!%# � � ' !&#�!�% � �� ' .(��� &# &#��!�%� �%�� ���).�� ��� ���� �6�$%!�
������4#�"�$����& # $����$�&�#%0'(.�$2����$(��'�#����'�#) � ��� �%�& �
�.���"+ �' *�.�%�7(�.���� �#*$%�!�% �'�#) �� �<�$0.�'���
��(%�.�:�"+ ��' .(��$���" ��� 6�' !�(!��5!%# ���%#� #���2B�!!�
�' .(��$� $%���#�� !�%#�!�% ��(!�� ' .(���!�'# ) #� ��5!%# � ��%#� �
�%/� �� !!2� ' !� 4�$� $%�'� ��#��� �� #*$%�#� �$� &�#$� ��%#��$� �� %()��!�
'�&�.�#��%!� �� *��%��!� � �� &#�!�#�� $#� ' �$%�%(0�� & #� !�%#��.� ' !�!��$�
#$�$%J�'��2��&#$�%�� ��$$�!�(!��!�� #�# )($%:��(#�)�.�����
�$� ' .(��$� � �',�!�% � &#!�%!� )%#� #$(.%� $� $(4�'��%!�%�
$�$0*�$���' �4���"��� �7(��:�#$&�% �<�7(��%�4�'�"+ ���'� $�)�.��#$�!�
�! $%#�$� � $���(� @���A�� �$� ' .(��$� !�'# ) #� �'$$�%�!� � '(�� $�
$&'���$�7(��% �<�$(��' �$#*�"+ 2�!�$�$+ �!��$�(%�.�:��$�7(�� � �%'% #�/�
(!�$&'%#-!%# ��!�$$��@���A��
�(!� %#�)�., � $�* .*� � & #� � �� %� �.�� @���A� ' �'.(�1$� 7(2� ��$�
' ��"L$� � !/% � �.� $'#�% 2� �� #("+ � � �5!%# � ��%#� � �� ' .(���
�' !&��,� ��(!��#("+ � �4.(6 2�#$(.%���(!��!��(%�"+ ���#$ .("+ �
� $� %!& $� � #%�"+ � $� *�#� $� &�' $� � ���.�% �� � !� )�$� �$%�
' �,'�!�% 2�!�R�E�1H��($�!1$�� #!�.!�%�' .(��$���5!%# ���%#� �
!� #� ��2�� !!�� &�#�� #(:�#� � '�(�.� � 4�$� !-*.�7(� ',��� � � %'% #�
�4.(6 $� �%/� � � µEP!���2� �7(��% � $� ($�!� ' .(��$� � �2B� !!� &�#�� �
$�* .*�!�% ��!/% $�'# !�% �#�4�' $�$!�%'"+ �& #�$&'%# !%#���
�!�$$���� ! �����%#4�'�' !� �$&'%#-!%# ��!�$$��*���%#��.�!���#� �
$ .*�%2� &�#�� ' . '�#� $� ���.�% $� �!� 4 #!����$ $�2� $ )�&#$$+ � #(:���� � �
��%#� #� ����.�$� #��!�$$�$2�/�*��%�3 $ �7(���7(��%����4�$�!-*.2���
*�& #�#2�$3����!� #�& $$0*.��
�������������������������������
��������K���� �
�
��).������1���!�$L$��$�' .(��$���#��(. !%#��� �!�%#��.���',�!�% �
��.�(�$�!/% $�����.�$���'� $�)�.��#$�& #�R�E���
�#%�� � �� � =�$��$%�'� ��#����' !&#�!�% 2��5!%# ���%#� ���5!%# ���&�#%0'(.���
��%#�'I�%��.��@��KA� �8CK� K �!!�6���!!^�%()(.�#��!�'# ) #��� $$��%��.��@�� A� �8C�� �K �!!�6��2B�!!^�K�_!��%',..�%��.��@��CA� �8C8� �K �!!�6��2B�!!�^�K�_!�U %.O�%��.��@���A� �88 � �K �!!�6��2B�!!^�K�_!�
�K �!!�6��2 �!!^�K�_!���*#����%��.��@���A� �88�� �K �!!�6��2B�!!^�K�_!�� ��%��.��@���A� �88K� � �!!�6��2B�!!^���_!�
�K �!!�6� 2� �!!^���_!�� �!!�6��28�!!^���_!�
U�%%��%��.��@�� A� �88�� �K �!!�6��2B�!!^�K�_!���:#�%��.��@��BA� � �� �K �!!�6��28�!!�� )�.�$�%��.��@��8A� � �� ��K�!!�6���!!^�K�_!��%!���%��.�@���A� � �� �K �!!�6��2��!!^��2K�_!����.��' ::��%��.��@���A�
� �� � �!!�6��2B�!!^���_!�
�$$�#�%��.��@��KA� � �� � �!!�6��2B�!!^�K�_!�S�� �%��.��@��CA� � �� � �!!�6��28�!!^�� _!�N(#I�#�%��.�@�KA� � K� ��K�!!�6���!!^�K_!�
�
2.2.5.3. Extracção de ácidos biliares a partir de amostras biológicas
��#��7(� $��'� $�)�.��#$2�' �%� $���$��! $%#�$�)� .-��'�$2�& $$�!�$#�
' �*���%!�%� ���.�$� $� & #� R�E�� �� & #� (%#�$� !% . ���$� #4#��$�
��%#� #!�%�2� /� �'$$�#� � 7(� .$� $3�!� >$&�#� $?� �� #$%��%� !�%#�:�
)� .-��'�2��4 #!��7(� $�' �$%�%(��%$�$%���+ ���%#4�#�!�' !������.�$��
[�#��$� $+ � �$� �) #���$� 7(� $� % !�!� �$%�� 4�$� � &# '$$ �
&�� � � 7(�.� � 4.(0 � )� .-��' � !� $%( 2� %� � !� ' �$�#�"+ � ��
' �'�%#�"+ � � �'� $�)�.��#$� � � !$! 2� �#�(� � .���"+ �<$� &# %0��$2�)!�
' ! �6%�$+ ��%�& ��' �3(��"+ �@C�A��
�� &# '$$ � � 6%#�'"+ � !� 4�$� $-.��� ������ /� �#�.!�%� � !��$�
�7(� � ��� &#&�#�"+ � � �! $%#�$� � �'� $� )�.��#$� �� &�#%�#� � 4.(0 $�
)� .-��' $� @CB2� ��C2� �� 2� ��8A�� �� �&.�'�"+ � �� %/'��'�� � 6%#�'"+ � .07(� � P�
.07(� ��+ �%!�$� �)!�$('���� �7(��:�#$&�% ����! $%#�$��$ # �@��8A��
�!� �! $%#�$�)� .-��'�$� $-.��$� � &# '$$ � 6%#�'%�* � /� !��$� ' !&.6 2�
$� � �'$$�#� � �� $��#��"+ � ��!�%#�:� �� �! $%#�� & #�, ! ���:�"+ 2�
$�& ��4�'�"+ 2� ��$%+ � �:�!�%�'�� (� .� 4�.�:�"+ 2� ��%$� � $� &# '#� <�
6%#�'"+ �&# &#��!�%��%�� @C�A����$� 4:$2� & #�6!&. 2� �$� �! $%#�$�& !�
$#� &#&�#��$2� �%#� (%# $� &# '$$ $2� & #� 6%#�'"+ � !� 4.(0 � $(&#'#0%�' �
@�K A2� (�!��.' .���8K �̀@�K�A��
�������������������������������
��������B���� �
�!� $�(��� �#! $� �) #�#2� �(!�! � '#0%�' 2� �.�(!�$�!% . ���$�
�6%#�'"+ ��&.�'��$�<����.�$���'� $�)�.��#$��
2.2.5.3.1. Extracção por solventes orgânicos
�� 6%#�'"+ � & #� $ .*�%$�%!� & #�)�$� �� �4#�"�� � $ .()�.��� �
���.�% �!�$%( 2��(!��4�$��7( $����(!��4�$� #�5��'����
�$� �'� $� )�.��#$� $+ � ! ./'(.�$� 7(� %J!� !� ' !(!� (!�� $%#(%(#��
,�# '�#) ���� $%#-�2� $� � �$$�!� ! ./'(.�$� ' !� (!�� 4�'� ,�# 4-)�'���
�$%�� '�#�'%#0$%�'�� *��� �%+ �& $$�)�.�%�#� �� &�$$��!� $��'� $�)�.��#$� �� 4�$�
�7( $����$%�'�$ 2����! $%#��)� .-��'���&�#��(!�$ .*�%� #�5��' ����!�� #� (�
!� #�,�# 4 )���*�����4.(�'��#���4�'�.�����6%#�'"+ ��
�� &#$�"�� � �#(& $� ,�# 6�. � 2� !� !� #� �#�(2� �� ' �3(��"+ � $�
�'� $�)�.��#$�' !����.�'���� (���%�(#���2�*+ ��(!�%�#���& .�#�����! ./'(.��
2�' �$7(�%!�%2��(!�%�#���$(���4�����&�#����4�$��7( $��@C�A��
�(%# � �$&'% � ��%#� !� ' �%�� /� � �#�(� � � ��:�"+ � &�#'��.� � �#(& �
4(�'� ��.� �'� � '�#) 60.�' �� �� � ��:�"+ � &�#'��.� � �#(& � *���% #��#� �� ! ./'(.��
!��$� & .�#2� � 7(� �� % #��� !��$� ,�# 40.�'��� �$$�!2� !� % #��2� &�#�� 6%#��#� $�
�'� $� )�.��#$� &�#�� (!� $ .*�%� #�5��' � �& .�#2� $#��� !��$� *��%�3 $ � ��
�'��4�'�"+ ��� �! $%#��!�$%( 2� �! ���7(� ��#(& � '�#) 60.�' � �+ � $�
� ��:�� ��� &#�%�'�� ' �$%�%�1$� 7(� �� �.'�.���:�"+ � �� �! $%#�� *��� 4�* #'#� ��
6%#�'"+ � $� �'� $�)�.��#$� ��!$!�2� &#$(!�*.!�%�& #� ��%#4#�#� ' !���
$(�� .���"+ �<$� &# %0��$� @�K�2� 8�A�� �� !� � )�$�' � 4�* #'� (!�� 7()#�� �$�
��%#�'"L$� ��%#! .'(.�#$� �%#� � �'� � )�.��#� � �$� &# %0��$� � $ # � � �
(%# $�4.(0 $�)� .-��' $��
� ! � $ .*�%� #�5��' � & ! $� ($�#� � �1)(%�� .� @C�A2� !�$� $� �$�
�! $%#�$�$��&#$�%�#!�' !�(!�.*� �% #��.���"+ �<$�&# %0��$2�& #1
$1��%#� � #' ###� �� $ .("L$� �.' -.�'�$� �,�#-6� $� � $-� � (� & %�$$� �
@8K2�K�2�K�A2� %�� .� �'��4�'� � @�KKA2� % .(� 1�'� � �'/%�' � �.�'��.� @�KBA2�
!%�� .1�'% ���@�K�A��!%�� .1'. # 4-#!� �@�KC2�K8A���
� ��%��% 2�$%$�$�$%!�$��$ .*�%$�& !�&# * '�#�$' �3(��"+ �
&�#'��.� (�$ .*-.�$2� ' !� ' �$7(�%�&#��� ��4 #!�"+ � #.�%�*�� � �%�& ��
' �3(�� $�&#$�%$�����! $%#�� ���'��.�� � !������&# &�'��#� �� 4 #!�"+ ��
�'%�% $�& #��'%�.�"+ � ��#(& �,�# 6�. �P (�' �(:�#�<�$%#�4�'�"+ � ��#(& �
'�#) 60.�' � @C�A�� �� !%�� .� @���A� � � �'% ��%#�. � @���A� & !� %�!)/!� $#�
�������������������������������
������������� �
(%�.�:� $� ' ! � $ .*�%$� #�5��' $2� $ )#%( � $� �� 4�$� �7( $�� %�*#� (!�
.*� �' �%G �!�$��$��
�� !/% � � 6%#�'"+ � & #� $ .*�%$� & � %�!)/!� $#� �&.�'� � <$�
�! $%#�$� $-.��$� �4:$�2� 4�:� � (!�� 6%#�'"+ � !� � 6,.%� (� ' !� #4.(6 �
@�K�2�K82�B A��\�(!�!/% �& (' �(%�.�:� 2�!�$�7(�!$! ��$$�!2�%!�$� ���
�.%#��%�*��<�6%#�'"+ �!�4�$�$-.��2�&�#��$%�%�& ���! $%#�$��� #!�.!�%�
�6%#�'% � )%� �/�& �$�&(#�4�'� 2������!��$2�& #�6%#�'"+ �!�!�'# ' .(��$�
�4�$�$-.����������
2.2.5.3.2. Extracção com resinas neutras
�!� (%# �!/% � � 6%#�'"+ � �!(�% �($� ���%$���8� �� #' ##� ��
' .(��$� ' !� #$���$� � &#!(%�� �-��'�� �(%#�$2� ' ! � �$� �!)#.�%�Q��1�� (�
Q��1��� �$� #��!�% $� � #'(&#�"+ � !��$� .*� $� 4 #�!� ' �$�(� $�
�%#�*/$����&.�'�"+ ���#$����Q��1�2�' !���7(�.�$�' �$�(�#�!�#��!�% $�
�#'(&#�"+ ���� #!� $�CK18 9�@�B�A���
��#�� ��6%#�'"+ �� �'� $�)�.��#$��� &�#%�#� �%'� $2� ' !�*�$%��<�$(��
�*�.��"+ �7(��%�%�%�*�2� /� #' !�� � �($ � � ' .(��$� �!)#.�%�Q��1�� !�
%#�!�% ���6%#�'"+ �& #�$ .*�%$2�&# (:�� �6%#�'% $�#.�%�*�!�%�&(# $�
@�B�A��
� ��%��% 2�,��7(�%#�!��%�"+ �7(�$%��%/'��'���6%#�'"+ �$-�$�
�&.�'��� $��'� $�)�.��#$� .�*#$�@�B�A��7(�$%��&��%� $�!��$�*�#�� $�
4�'% #$�' ! � �&R2� �$ .*�%�(%�.�:� �� �4.(6 ���$ .("+ ��%#�*/$���' .(����
�� �&.�'�"+ � � 4.(6 $� .*� $� !� ' .(��$� Q��1�� #$(.%�� �(!�� #'(&#�"+ �
4�'��%� � �'� $� )�.��#$� .�*#$� & .�#$� @8BA2� ' ! � $� %#�,�# 6�.� $2� & #�
��$(4�'�J�'����%!& ��#$�J�'�����
�$%�!/% �%�!)/!��&#$�%��*�#��"L$�$����4�'�%�*�$����'�&�'����
6%#�'"+ � � . %� &�#�� . %� � #$���2� )$#*�� 1$� �4#�%$� �0*�$� �
�4����� �� !$!�� &�#�� ' !� $� �'� $� )�.��#$� .�*#$2� � 7(� )#���� �� (!��
�4#�"+ � &#/*��� $� #��!�% $� � #'(&#�"+ � ' !� $ .("L$� &�# ��:��$�
@�B�2�B�A��
2.2.5.3.3. Extracção por permuta iónica
�$%�&# '$$ ��6%#�'"+ �(%�.�:���� '�&�'���� � ��:�"+ � $� �'� $�
)�.��#$����$(���4#�%��4�����&�#���$�#$���$��&#!(%���-��'����
�������������������������������
��������C���� �
�+ �%!�%� ��#����&.�'�"+ ����6%#�'"+ ��#'%����'� $�)�.��#$�!�
�! $%#�$� )� .-��'�$� @C�A2� ,�*� � �&��$� �.�(!�$� #4#J�'��$�<� &$7(�$�� �
�'� $�)�.��#$�����#�*�:�@�B�A2� (�!��$$ '��"+ �' !�!/% $��6%#�'"+ �
!�4�$�$-.���@�8A��
2.2.5.3.4. Extracção em fase sólida (SPE)
��6%#�'"+ �!�4�$�$-.�������2�� .�1�,�$��6%#�'%� ���/�, 32��. ��2�
�!/% �6%#�'%�* �!��$�(%�.�:� ����&$7(�$���7(��%�4�'�"+ ���'� $�)�.��#$�
!� �! $%#�$� )� .-��'�$�� �$� !�'# ' .(��$� &#�',��$� ' !� $0.�'�� .����� � �
'%�'�.$�.�� � ���C�2� � #!�.!�%� ' �,'��$� &.�$� $(�$� � !���"L$�
' !#'���$� ��&1��I2� N �1�.(%2� (� !��$� #'�%!�%� ��$�$�2� & !� $#�
�&.�'��$�� �%#�%�!�% ���! $%#�$��$ # 2�)0.�$2�(#�����6%#�'% $�.07(� $��
4:$�$&�#�� �4�'�:!�%� $��'� $�)�.��#$� .�*#$��' �3(�� $��$�!�%#�:$�
��$%+ �' �%� $�@�8A���
E�!�%�*.!�%2� (%#�$� $()$%5�'��$� �-���$2� 7(� �&#$�%�!�
&# &#��$� 40$�' 17(0!�'�$� $!.,��%$� <$� $� �'� $� )�.��#$� �' .$%# .2�
$%#-�$2�)�.�##()����2�$+ �.(0�$�3(�%�!�%�' !� $��'� $�)�.��#$�@�BKA���
�!� $� 4�'% #$�7(� ��4.(�'��� � $!&�, �$%�$�!�'# ' .(��$� /� �
&R� �.(�%��U % �%��.��2�!��8C �@�BBA2�$(�#�#�!�7(���6%#�'"+ ���'� $�
)�.��#$�*#��� ' ###���(!�&R��+ ���4#� #������� ��%��% 2�%#�)�., �& $%#� #�
4��7(�$�& �4'%(�#���6%#�'"+ ���&R���' !�) �$�#'(&#�"L$�@�B�A��
[�. #$��&R�6%#! $�& !�&# * '�#�&#���>).���?���4�$�$%�'� ��#���
(%�.�:���� �&# '$$ �6%#�'%�* �@�BC2�B8A�' !���' �$7(�%�' �%�!���"+ ���
�! $%#���� ��%��% 2� $�' !& $% $�.�)#%� $�$+ �7(�!�'�!�%�&#-6�! $� ���C�
� ��%#4#!2� & #%��% 2�!��$�!�U�� �7(�!�R�E��� �!�U���&�#'!� ' ! �
&�' $� � � '# !�% �#�!�� � !� R�E�� 4�'�!� #%� $� ��� &#/1' .(��� $'�#%�*.2�
' �%�!���� 1���
�!� �.�(�$� '�$ $2� 6'(%�1$� �&��$� �� $&�#�"+ � $� �'� $� �� !�%#�:�
�� $� �' �%#�!2� �7(��% � 7(2� � (%#�$� $�%(�"L$2� $� 4'%(�� %�!)/!� ��
$&�#�"+ � �$� �*#$�$� 4#�'"L$� � �'� $� )�.��#$� �.�*#$P� �.�' ' �3(�� $P�
%�(# ' �3(�� $�����#�� �$$ 2�&# '1$�<�' !)���"+ ��$�!�'# ' .(��$�' !���
4�$� ��*#$�� ��C� ' !� !�'# ' .(��$� ' �%� � (!� $�$%!�� � %# '�� ���-��'��
�*(.��#!�%�' �,'� �& #���Q2��%# ������ ��'�Q',������
�� &# '$$ � � 6%#�'"+ � & #� ��Q� /� )�$%��%� �%#�% � �� *�#��"L$�
&#�'� ���$2� *� � $%�#�)!� $%�).'� $� $� &�#5!%# $� #$&�%��%$� � �
�������������������������������
��������8���� �
.(�%�(%�.�:� ��4 #"���-��'�2�&R2�* .(!���M��7(��% �<$��4#�"�$� )$#*��$2�
� . %� &�#�� . %� � !�'# ' .(��$2� ���� $� & � 4�:#� @�� A� �7(�� � �� $(��
(%�.�:�"+ �!�# %���2����+ �$#�' !&#�#��#��$�7(��%��$� �!$! �. %��#1
&%�!�:�#� $���&�#5!%# $���'���� * �. %���
��#�� 6%#��#� �'� $� )�.��#$� � �! $%#�$� �7( $�$� 7(� �&#$�%!� (!��
' �'�%#�"+ �$�.�����&#'��*.��' ! �/� �'�$ ���(#����2�/��'$$�#� �&# '#���
(!��#! "+ �&#/*��� $�$��$�@�8A�&�#��$�& #�6'(%�#���$&�#�"+ � $�*�#� $�
�#(& $� � �'� $� )�.��#$� & #� ��Q�� ��#�� $$� 4�!2� �� 6%#�'"+ � &#/*��� !�
!�'# ' .(��$� ��C� /� �� $' .,�� -)*��� &.�� 4�'�.��� � 6'("+ � � .*� $�
#��!�% $��#'(&#�"+ ��
[�#� $� �$&'% $� �$� ' ��"L$� � 6%#�'"+ 2� ' !� $0.�'�� .����� � �
'%�'�.$�.�� 2�4 #�!�$%(� $�& #�;�,./��%��.��@���A�!��! $%#�$��(#�����
�$$�$%( 2�' �'.(�(1$�7(���6%#�'"+ �!�4�$�$-.���' !�!�'# ' .(��$���C�
#$(.%���(!��&#��%'%�*.���'� $�)�.��#$�(&.�!�%�' �3(�� $2�' ! �
$�%�(# 1$(.4�%� $���)$#* (1$�%�!)/!�7(� �($ �� $(.4�% � �%#�%�.�!����
�&#$�%�� (!� !., #� #��!�% � � #'(&#�"+ � � �'� $� )�.��#$� @���A� �
&#!�%� �� #(%�.�:�"+ � $$�$� !$!�$� !�'# ' .(��$2� !� & $�"+ � � � ($ � �
$ .("L$��,�#-6� ��$-� ��.(0 �@�� A��
� � �%��% 2� *� #4#�#1$�7(� �� &#$�"�� �%#�%�.�!���� � � 6%#�'% �
& �.*�#�� ��&�#'�!�% ��&# (% $���$(���#��"+ ���!���$�$'(��#��$�
�&#�!�#��$�2�7(�$+ ��)$ .(%�!�%���%#�%�$���$�#�'"L$��#�*�"+ �#�&���
$'#�%�$� �$%�� �$$#%�"+ �� �$%�� $� ! �$%#�� 7(� �!���$� $'(��#��$� �
&#�!�#��$� #��!� ' !� � � $$ � !�#'� #� 4.( #$'�%� �/$%#� �'%�*� � �
&�%�'. # 4� .� � �'� � &�#� )(%0#�' �� �!��(�� � �� $(��  #!��'� ��$�
#�'"L$� $'#�%�$� �$%�� �$$#%�"+ 2� !� >H�%#��.� � H/% $?� �& �% � ��� �
>�$(.%� $����$'($$+ ?��& �% �K���
2.2.5.4. Constituição geral da aparelhagem HPLC
� ! ����&�#.,��!��R�E��/�, 3�$ )3�!�%�' �,'��2�$%�& �% �
���'��1$�' !�(!��$'#�"+ �$(!�#�����'$$�#��!�%�)#*���!$!�����$(�
G��' � )3'%�* �/�$�$%!�%�:�#���7(�#�#����$'($$+ �7(�$�$�(��
�� =��(#�� ��� �� ! $%#�� �� #����:�"+ � � 4.(6 �#�!�� $� ' !& ��%$�
)�$�' $� �(!�7(�&�!�% ��R�E��7(2�!� $�%� � .�% 2� $� & !� .�$%�#� ��
$�(��%�!���#�T��
• �$#*�%-#� �&�#����4�$�!-*.�
�������������������������������
�������K ���� �
• ��$%!���) !)��!�
• ��3'% #����! $%#��
• � .(����$&�#�"+ �
• �%'% #�$��!�.��,��
• ��$%!����#!�:��!�% ��� $�
• � .'% #��4#�'"L$2� (�$� % ��
• ��&%(#�� � � $� ' !� !�$$+ � � '# !�% �#�!�$� ����#�!�$�
$���.�*#$($�%!& ���
��$�� #$#*�%-#� �$�� �� 4�$� !-*.� ' �%J!� � .(�%2� (� !�$%(#�� �
.(�%$2�7(�*+ �%#��$& #%�#��$�$()$%5�'��$�!����.�$2��%#�*/$� �$�$%!�����
4�$� !-*.� /� !�$%(#��� � !��$�, ! ���!�%� & $$0*.2� �� &�#%�#� $� *�#� $�
.(�%$� 2� � $�(��2� ) !)��� �%#�*/$� � 4�.%# $� �% $� >� �%#��?2� &. �
$�$%!���) !)��!����4�.%#�"+ �$#*�&�#��#! *#�7(��$7(#�!�'# 1&�#%0'(.�$�
!� $($&�$+ �7(� � & $$�!� $%�#� &#$�%$� � &# * '�#� )$%#("+ 2� �����7(�
&�#'��.2� � �.�(!� $� ' !& ��%$� �' !� �5!%# $� '�&�.�#$�� � $�$%!�� & #�
��*���&�$$�#� �.(�%��
��$�(�#�<�) !)�2� (��%# �$%�2�6�$%�(!��*�.*(.��!�$%(#� #��7(�
&#!�%���&#&�#�"+ ��!�$%(#�$� $�*�#� $�.(�%$���%/��2�� $�7(�&�!�% $�
!��$�#'�%$��!�&# & #"L$�*�#��*�$��&# �#�!�*�$�!�4(�"+ � �%!& ��
����3'% #�/� �. '�.���&.�'�"+ ����! $%#���� ��&#$�%�#�(!�. &��
* .(!� 4�6 2� &�#��7(� � * .(!� � �! $%#�� ���.�$� � $3�� � !��$� ' ##'% � �
#&# (%0*.� & $$0*.�� H�$� � $� $�$%!�$� $!� ��3'% #� �(% !�%�' 2� %�!)/!� $�
(%�.�:�!2�' !�4#7(J�'��2�. &$��* .(!�*�#��*.�!�7(�$%�/�' �%# .� �& #�
(!��$#��������3'"+ �!��(�.���
�� �! $%#��/� �%+ ��##�$%���&.�� 4�$�!-*.� !��#'"+ �<�' .(����
$&�#�"+ 2�&�$$�� ���%$2�����2�& #�(!�4�.%# � (�(!��&#/1' .(���$'�#%�*.�
7(� #! *2� & #� �$ #"+ 2� �$� �!&(#:�$�7(� & $$�!� ���4�'�#� (� ' .!�%�#� ��
' .(����$&�#�"+ ��
� � �%#�*$$�#� �� ' .(��2� �� �! $%#�� /� $&�#��� � $� $($� �*#$ $�
' !& ��%$2�!�4(�"+ ��$��4#�"�$���4����� $�' !& $% $�&#$�%$2�
&�#����' .(������4�$�!-*.���$$�!2� $�' !& ��%$�7(�%�,�!�!��$��4�����
&�#����' .(���&#!��'#+ ��.��!��$�%!& 2�$&�#�� 1$�� (%# $�7(�%J!�
!� $��4������7(�.��*+ �$��� �!��$�' ���$%���4�����&�#����' .(���
& � $#� �.%#���&.�� *�#��"+ ��� ' !& $�"+ �7(0!�'���� 4�$�!-*.2� (�& #�
*�#��"L$��%!&#�%(#����!$!���
�������������������������������
�������K����� �
�
�
=��(#�������Z��$7(!��$�!&.�4�'� �' !� $�' !& ��%$��4.(6 �#�!���
(!�7(�&�!�% ��R�E��
�
�&-$� �� $&�#�"+ � 4'%(��� &.�� ' .(��2� $� ' !& ��%$� �� �! $%#��
$�!�$%�����4#�%$�%!& $�� #%�"+ �� $+ ����.�$� $� &. $� %'% #$��
$� 2� � $���.� �.$� �#� 2� ' �(:� � �� (!� $�$%!�� �
�#!�:��!�% P&# '$$�!�% � � � $� �(!� #��$%� #P��%�#� #2� (!��
�!&#$$ #�2�(!�' !&(%� #2�%'�����
�& �$� � ���.�$��� �� �! $%#�2� �$� 4#�'"L$� )%��$� & !� $#�
�#!�:���$� !� $&�#� � & #� (!� ' .'% #� � 4#�'"L$� &�#�� & $%#� #�
!���&(.�"+ � �$� !$!�$� P (� & !� $#� ' �(:��$� �� (!� #'�&��%� &�#��
& $%#� #�.�!���"+ ��#$0( $�7(0!�' $�.07(� $��
��%$� �� ' .(��� ' . '�1$�(!� #�(.� #P$�$ #� � &#$$+ � � #% #� �
��+ � #&#$�%� ����=��(#����� ���7(�&#!�%�*#�4�'�#��� $(��$%�)�.�����$�
*�. #$��&#$$+ ��#% #� �*!�$#�$%�*�$�� � . �� � �%!& �&�#��7(�
% � �$�$%!��'# !�% �#�4�' �$�& $$��' �$�#�#�!�$%� �$%�'� ��#� ���!�
'�$ � � *�. #$� �.%#� $� � &#$$+ � � #% #� � /� & $$0*.2� �$$�!2� (!�
����-$%�' �7(�$��!��% ��& $$0*�$�4�.,�$P�*�#��$� �7(�&�!�% ��
�������������������������������
�������K����� �
�
2.2.5.4.1. Detectores
2.2.5.4.1.1. Detectores Ultra-Violeta e Visível (UV-VIS)
�$� $�$%!�$� � R�E�� �$$ '�� $� �� (!� %'% #� � (.%#�*� .%�1*�$0*.�
�R�E�1�[1[����%J!� $� � �!&.�!�%�(%�.�:� $� � � '�!& � ��7(��%�4�'�"+ � �
�'� $�)�.��#$� @��82�BB2���2���2���2��K2��B2���2��CA2� �&#$�%�� � *��%���$�
!� #.�"+ � <� '# !�% �#�4��� ��$ $�2� (!�� *:� 7(� �$� �! $%#�$� &�#�� $%��
!% . �����+ ��'$$�%�!��$ 4##� �' !&.6 �&# '$$ ��&#&�#�"+ �7(�
�* .*� �$� �! $%#�$� &�#�� U�2� & � 1$� &# '#� <� $(�� %#!���"+ �
�#'%�!�%�@�82�C�A�$��&#$�%�#!��#(& $�7(0!�' $�$($'&%0*�$�� #�����#�
$����4�'�%�*���)$ #"+ ��.(:����#��+ ��[1[�$0*.���
��'# !�% �#�4���R�E�1�[�%!�' ! �&#��'�&��$�$*��%���$�!�#.�"+ �
<�'# !�% �#�4�����$ $�2���$(��)��6��$�$�)�.����$&'�4�'��2�(!��*:�7(�
$� �'� $� )�.��#$� �+ � �&#$�%�!� (!� �#(& � '# !-4 # � � $���.� 4 #%� (� �
'�#�'%#0$%�'�$� G��'�$�� �&#$�%�!� �)$ #*5�'��� ��� : ��� � �[� � )��6 $�
' !&#�!�% $� � ��� ��&# 6�!��!�%� � 1�� � �!�2� !� 7(� �)$ #*!�
%�!)/!��*#$ $�' �%�!����%$� #�5��' $�&#$�%$����!�%#�:����! $%#�� (����
4�$�!-*.��6!&. T��'% ��%#�. 2�%�!&L$��'%�% ��&# %0��$����
��#�� �./!� �$$ 2� � �#� 6�$%�%� ��� '/.(.�� � #4#J�'��� � %'% #�
%�!)/!� �)$ #*� �$$�� : ���� � #� $$�� #�:+ 2� �� '/.(.�� � #4#J�'��� /� !(�%�$�
*:$� &(#���� ' !��#� ��&�#�� �!��(�#� � #(0 � � 4(� �� �(!�%�#� �� #�:+ �
$���.P#(0 �@��KA��
�$$�!� $� 2� &%�1$� ' !� 4#7(J�'��� & #� $� &# '#���(!��#�*�"+ �
�$� ! ./'(.�$� $� �'� $� )�.��#$2� %#��$4 #!�� 1�$2� %+ � 7(��%�%�%�*�!�%�
7(��% �& $$0*.2�!�' !& $% $�7(��&#$�%!�(!���)$ #%�*���! .�#�� ��[1
[���!(�% �$(&#� #�<� $��'� $�)�.��#$� #������$2� (�7(�& $$�!�!�%�#�#���"+ �
&# *���%��'��!�% $��4.( #$'J�'���@�K2���2�� A��
Detecção Directa no UV-VIS
�� %'"+ � �#'%�� � �'� $� )�.��#$� & #� �)$ #*5�'��� � � �[1[��� $-� /�
& $$0*.�&�#�� $��'� $�)�.��#$�' �3(�� $2�(!��*:�7(�$%$��&#$�%�!�(!�
�#(& � '# !-4 # � 7(� & $$(�� �)$ #*5�'��� !�6�!�� � $� � 1�� � �!� @�8A�� � �
' �%#�#� � $%$2� $� �'� $� )�.��#$� .�*#$� �+ � �&#$�%�!� �#(& $� ' !�
'�#�'%#0$%�'�$�7(�&#!�%�!�%'%�#�' !�4��)�.��2�!��! $%#�$�' !&.6�$2���
�������������������������������
�������K����� �
$(���)$ #*5�'���@�8A��$-�!�' ��"L$�6%#� #���#��$����8���!2�' !�&(#����
�#� �� ��� '/.(.�� � #4#J�'��� @��KA��� �-� &�#�� $%�).'#� (!� �#�(� �
' !&�#�"+ 2����)$ #*5�'���� ��[� $��'� $�)�.��#$�' �3(�� $�/�'#'���� ���
� �*:$�$(&#� #�<� $��'� $�)�.��#$�.�*#$�' ##$& ��%$�@�� A��
�$$�!�$� 2�&�#����7(��%�4�'�"+ �$%$�G.%�! $2�/��'$$�#� �#' ###�<�
#�*�"+ � $� �'� $� )�.��#$� .�*#$� %#��$4 #!�� 1 $� 7(��%�%�%�*�!�%� !�
' !& $% $�7(�& $$(�!��#(& $�'# !-4 # $�7(�& $$�)�.�%!���$(��7(��%�4�'�"+ �
& #��[1[��P=.( #$'J�'��2� (�#' ###��� (%#�$�%/'��'�$��%'"+ ����%(#:��
!��$� ��$&'04�'�2�%��$� ' ! � �� �$&#$+ � � .(:� *�& #�%�*�� ��*�& #�%�*� E��,%�
�'�%%#�����%'%� �2��E����@��BA2� (���#4#�% !%#���@��8A��
�$%( $�4'%(� $�& #�U %.O�%��.��@���A�' �'.(0#�!�7(���R�E�1�[1[���
/�(!��!% . ��������.�$�!��$�4�'�:�7(� $���%#� #$�!/% $��:�!�%�' $�
��α1,�# 6�$%#-��$�# ���$�2� ' �$�#� $� � #4#J�'��2� &�#�������.�$�
� �'� $� )�.��#$� ' �3(�� $� �7(� #&#$�%�!� 8C9� $� �'� $� )�.��#$�
�' �%#� $��� �%#�'% ���$%# ��%$%���.�$(&#� #���$%��!% . ���2�� �' �%#�#� �
���:�!�%�'�2��+ �/���4.(�'����&.���.�!�%�"+ �,(!���2�7(�& �' . '�#����
!�%#�:����! $%#��& $$0*�$����)� #$� (��'%�*� #$��:�!�%�' $���
�(!�$%( �4'%(� �& #�� $$��%��.��@�� A2�$%��$'#�% �(!�&# '$$ �
�%'"+ ��7(��%�4�'�"+ �� �'� $�)�.��#$2� ���)0.�$2� & #�R�E�1�[1[��2�7(�
&#!�%�(!�.�!�%��%'"+ ��K��! .���3'%� $���&#$�%��(!���%#*�. ��
.���#���&�#��' �'�%#�"L$��%#� 2 ���� 2K �µ! .PE��
�!��88 2�U %.O�%��.��$'#*!�(!��!% . ��������.�$�& #�R�E�1
�[1[��� � �'� $� )�.��#$2� !� $(' � ��$%#�' 2� 7(� �&#$�%�� (!� ��%#*�. � �
.���#���&�#��' �'�%#�"L$��%#� $�� �� $�� �µ! .PE�@���A��
Detecção após Derivação
��&# '$$ ��#�*�"+ ���'� $�)�.��#$�!�' !& $% $�$($'&%0*�$��
$#� ���.�$� $� & #�R�E�1�[1[��2� �1$� �#�.!�%�& #� #�'"+ ��(!���(�$�
: ��$�$&'04�'�$���! ./'(.�� ��'� �)�.��#���
� � $#� 6'(%���� ��#(& �,�# 6�. �!�& $�"+ ��α1�R� �� � '�$ � $�
�'� $� )�.��#$� .�*#$2� �.�' ' �3(�� $� (� %�(# ' �3(�� $�2� (� � � �#(& �
'�#) 60.�' ��$-�&�#���'� $�)�.��#$�.�*#$���.�' ' �3(�� $��@�8A��
�!� &# '$$ � � #�*�"+ � 3�� ��%#� #!�%� (%�.�:� � &�#�� $� �'� $�
� # $� �7(�& � $#��&.�'� � � $��'� $�)�.��#$2� /��� $%#�4�'�"+ � ��#(& �
'�#) 60.�' � ' !� �� �1)# ! 1�1�'% ��4% ��� @�C A�� �$%� &# '$$ � #$(.%�!�
�������������������������������
�������K����� �
' !& $% $� ' !�(!��#(& � '# !-4 # �7(�%!�(!�!�6�! �� �)$ #*5�'��� � $�
��K��!2� $� � �� #�'"+ � #�.�:��� !��'% ��%#�. � � ���&#$�"���(!�)�$�
#�5��'��' ! ����2�1��$ &# &�.%�.�!������
� )�.�$�%��.��(%�.�:�#�!���#�*�"+ �' !����1)# ! 1��'% 4� ��2�&�#����
%'"+ � �����2� !� $ # 2� ' !�(!� .�!�%��7(��%�4�'�"+ ��K �&! .P!E�
�'#'�� � ���2K���P!E�� �(!� .�!�%��%'"+ ��KB�&! .P!E� �'#'�� � �K�
��P!E��@��8A��
� ! ����%$��#�*�"+ � $��'� $�)�.��#$�� ��#(& ��'� �'�#) 60.�' 2�
& !� ����� (%�.�:�#1$� � )# !% � � �14��'�. 2� �� 1�&1��%# )�:�.�1�2�a1�
��$ &# &�.(#��2� �)# !% ��&1)# ! 14��'�.�� ���1'. # !%�.1�1��%# 4%�.�!��2�
�� � #��!���' !& $% $�' !��)$ #*5�'���� $��K���!��
��#��&# '#�<�#�*�"+ �� ��#(& ��α1,�# 6�. 2�& �4�:#1$�#���#� $�
�'� $�)�.��#$����! $%#��' !����2�1���%# 4��.,�#�:����@�C�A2��� � #��!���
(!�' !& $% �' !��)$ #*5�'���� ��[�� $��B���!��
�����).�������/�4�% �(!�#$(! ���.�(�$� $�#���%$�(%�.�:� $����
#�*�"+ �� �'� $�)�.��#$� &�#�� �� %'"+ �& #�R�E�1�[1[���� ���'�!1$� $�
' !&#�!�% $�� �����)$ #"+ �� ��[1[��� $�#$&'%�* $�#�*� $��
�
��).�������Z�����%$�7(�& !�$#��&.�'� $�� �&# '$$ ��#�*�"+ ��
�'� $�)�.��#$�&�#��%'"+ ������!�� $�(.%#�1*� .%���
��������� *�������+��,�
�� ��������
*�������������������(��)# !% ���14��'�.�� �K�� @�C�A�
1�&1��%# )�:�.�1�2�a1���$ &# &�.(#��� �K�� @�C�2�C�A�)# !% ��&1)# ! 14��'�.�� �K�� @��B2�CK2�CBA��1'. # !%�.1�1��%# 4%�.�!��� �K�� @�CKA�
�1)# ! 1�1�'% ��4% ��� ��K� @��8A�*���������������!αααα-.���(��
�2�1���%# 4��.,�#�:���� �B�� @�C�A�
�
�*!2� � � �%��% 2� $�.��%�#1$� �.�(!�$� .�!�%�"L$� $� !/% $�
' �,'� $� � #�*�"+ �� D(�� � $� #�*�� %� � ' ! � �.* � � �#(& � �'� �
'�#) 60.�' 2� $%+ � �!��%�!�%� 6'.(0 $� �� ���.�$2� $� �'� $� )�.��#$�
' �3(�� $� ' !���%�(#���2�(!��*:�7(��� $(�� '���� .�%#�.� �+ �%#!�����(!�
�'� �'�#) 60.�' 2�!�$�$�!��(!��'� �$(.4-��' ����$%�/��%�.�!���#��$%�*.�
7(2�&�#�� �! �4�'�#2�$+ ��'$$�#��$� ' ��"L$�� #("+ �%+ �#�$%�'�$�7(�
& #��!�.*�#�<�&#�� $��#(& $�,�# 6�. � ��G'. �$%#-���
�������������������������������
�������KK���� �
D(�� � $� #�*�2�%� � ' ! ��.* � � �#(& �,�# 6�. � ���& $�"+ ��α� �
�G'. �$%#-�2�4�'�!��!��%�!�%�6'.(0 $������.�$� $��'� $�)�.��#$�7(�
$3�!�$(.4�%� $��$$��& $�"+ 2�7(�' !"�!���%#��.�(!���!& #%5�'������0*.�
��&�% . ����&��%#�'��@�CCA���
�'#$'� ����� 7(� �� & $�"+ � �α� *� $%�#� .�*#2� &�#�� &#!�%�#� (!��
$&�#�"+ �' !&.%��& #�R�E�2� �% $� $� �'� $�)�.��#$� 2�!�&�#%�'(.�#2� $�
�,�# 6�.� $�� ��G'. �$%#-�����). 7(� � �,�# 6�. ��α�& #�(!��#�*�"+ �
/� (�'��.� &�#�� % �$� �$� %/'��'�$� � $&�#�"+ � & #� R�E�2� �!��(�� � ��
#$ .("+ � $� *�#� $� �'� $� )�.��#$� 2� !� &�#%�'(.�#2� $� �'� $� )�.��#$�
�,�# 6�.� $��
�$%�� '.�#�!�%�!� 4�.%��(!�!/% �7(� &#!�%��(.%#�&�$$�#�% �$� �$�
.�!�%�"L$��'�!�� #4#��$2� &�#��7(�$�& $$�!� #�.�:�#� �$� � ' �'�%#�"+ �
' !&.% $� $!� �'$$��� � 4#�''� ��#� �� �! $%#�� & #� �#(& $� � �'� $�
)�.��#$�� � )#%( � $%�� !� 4�.%��(!�!/% � $�!&.$� � �1& %�� � #�&� 2�7(�
&#!�%�� �� #�*�"+ � � % $� $� �'� $� )�.��#$�� �� )%�"+ � � (!�� %�.�
!% . ����/�(!� $� )3'%�* $�$%���$$#%�"+ ��& �% �����
2.2.5.4.1.2. Detectores de Fluorescência
�$$�!� ' ! � $� �'� $� )�.��#$� �+ � & $$(!� �#(& $� '# !-4 # $� 7(�
�&#$�%!� �)$ #*5�'��� $����4�'�%�*�� � � �[1[��2� %�!)/!� �+ � & $$(!�
&# &#��$�7(0!�'�$�7(�&#!�%�!��� $(��%'"+ ��#'%��& #� 4.( #$'J�'����
H��$� (!�� *:2� /� �'$$�#� � 4'%(�#� (!�� #�*�"+ � $� �'� $� )�.��#$� 7(�
#����� ' !& $% $�7(�& $$(�!�(!��#(& � 4.( #-4 # 2� ��%$��&# '#�<� $(��
$&�#�"+ �& #�R�E��@�C8A���
����).�����K�.�$%���.�(�$� $�#���%$�(%�.�:� $2��%/�, 32����#�*�"+ �
&�#��%'"+ �& #�4.( #$'J�'����
�� �&.�'�"+ � $� !/% $� � %'"+ � & #� 4.( #$'J�'��� /� �$$�!� (!��
��%#$$��%� &# & $%�� ��� ���.�$� $� �'� $� )�.��#$2� *� � <� $(�� .*���
$�$�)�.����6'.�%�$.'%�*���@�8A���
� #� 6!&. 2� �� $%#�4�'�"+ � � �#(& � '�#) 60.�' � ' !� �1�81�'#����.�1
)# ! 1�'%�!��2� &#!�%� .�!�%$� � %'"+ � 7(� *+ � $� � � � $� � � 4! .�
@�8 A2� �7(��% �7(�&�#�� �� ���.�$� � �'� $�)�.��#$� �%�& ����2� �� #�*�"+ �
' !� �1��1)# ! !%�.4��.�1�1�%�.�!�� ' (!�#���� &#!�%� .�!�%$� � %'"+ �
��K� 4! .� ��3'%� $@�8�A�� �$%$� .�!�%$� $+ � '#'�� � � � *:$�!��$�)��6 $�
7(� $��'�!�����'� $�&�#��%'"+ �& #��[1[����
�������������������������������
�������KB���� �
��).�����K�Z�����%$�7(�& !�$#��&.�'� $�� �&# '$$ ��#�*�"+ ��
�'� $�)�.��#$�&�#��%'"+ �& #�4.( #$'J�'����
��������� /(�������+��,�
/������+��,�
0��������������
�� ��������
*�������������������(���1)# ! !%�.1�1!% 6�'(!�#����
�B � �� � �� �4! .� @�CB2�8B2�8�2�8�A�
�1)# ! 1�'%�.&�#� � �� � �� � � �4! .� @��82�8�A��1�81�'#����.�1)# ! 1
�'%�!����K�� K� � � 1� �4! .� @�8 A�
�1��1)# ! !%�.4��.�1�1�%�.�!�� ' (!�#����
� � ��K� �K�4! .� @�8�A�
�1)# ! �'%�.1B1!% 6���4%�.� �
� � �B � � 1� �4! .� @�� 2���A�
*���������������.���(�����������!αααα ���$�.,�#�:���� ��B� K� � K �4! .� @�8�A��1��%# �.1��%#�. � �� � �� � � �4! .� @��K2�8C1� A�
�
�� #�*�"+ � $� �'� $� )�.��#$� � � �#(& � �'� � '�#) 60.�' 2� !� !� �
�7( $ 2� �!&.�'�� � #!�.!�%� �� (%�.�:�"+ � � (!� $�$%!�� !�'.�#� @�8KA�� �� �1
)# ! �'%�.1B1!% 6���4%�.� � @�� 2���A2� � �1)# ! 1�'%�.&�#� � @��8A� � � �1
)# ! !%�.1�1!% 6�'(!�#���� @�8BA� $+ � 6!&. $� $� #���%$� !��$� ($� $�
&�#�� #�*�"+ � ��#(& ��'� � '�#) 60.�' 2�!�!� �!�'.�#2� ' !� 4 #!�"+ ��
#�*� $�4.( #$'�%$���'� $�)�.��#$��7(�&#!�%!���$(��$&�#�"+ �& #�
R�E��' !�%'"+ �& #�4.( #$'J�'�����
U�%%��%��.��@�� A�$�* .*#�!�!��88��(!�!/% �� �7(�.�$�($�� ��1
)# ! �'%�.1B1!% 6���4%�.� ��4 #!����%#��$4 #!�#� $�'�#) 6�.�% $� $��'� $�
)�.��#$� &#$�%$� ��� �! $%#�� !� /$%#$� 4.( #$'�%$�� �$� %�(# ' �3(�� $�
%#+ �&#�!�# �7(�$#�,�# .�$� $��:�!�%�'�!�%2��#�� �(!��!�� �'� ��
(!��'� �)�.��#�'�#) 60.�' �2�$-�& �$2�#�*� $�' !� �!�#'� #�4.( #$'�%��
�$%$�#�*� $��&#$�%�!�(!�.�!�%��%'"+ ���Z��&! .� ��3'%� $2�!�
�! $%#�$��$ # �,(!�� ���$%�*�. #�/�!�$�� ��.% �7(�� �' !&�#� �' !�
(%# $�!/% $��%'"+ �& #� 4.( #$'J�'���� ��7(��%�����1�� &�' ! .$�
��3'%� $�/�'#'���� �*:$�!��$��.%�� �7(� �,�)�%(�.�.�!�%��%'"+ ��
� 1� � 4! .$2� )$#*� � !� (%#�$� %/'��'�$� � 4.( #$'J�'��� @�8 2�8�A�� �$%��
�$'#&5�'��� & � $#� *��� ��(!�� $. '�"+ � � $&'%# � � !�$$+ � P (�
6'�%�"+ � $�#�*� $2� (���(!��&#'�&�%�"+ � $�#�*� $�4.( #$'�%$�!�
!� �!�'.�#���%$� �! !�% ����3'"+ ��
� ��%��% 2�$%�!/% �@�� A�#7(#���$&�#�"+ �&#/*��� $����#(& $�
&#��'�&��$� � �'� $� )�.��#$� �.�*#$2� �.�' � � %�(# ' �3(�� $�2� ,�#-.�$� $�
' �3(�� $� ' !� �� %�(#���2� �� #�*�"L$� ' !� #���%� 4.( #$'�%� $ )#� �
�#(& ��'� �'�#) 60.�' �����$�� $�!�R�E�����$&�#�"+ ���' !&.%��� ���%#� #�
�������������������������������
�������K����� �
��' .(����R�E�� $�*�#� $��#(& $���'� $�)�.��#$2�&�#'�4 #"�#� $��(% #$�
��$%��!% . ����>�$&#$�*�?����.�&�#'�*#1$�<�(%�.�:�"+ ��!%�� .����
4�$�!-*.2�!�*:� ��1&# &�� .T�'% ��%#�. 2�7(�/�)�$%��%�!��$�$.'%�*�����
&# ! "+ � � $&�#�"L$� $� �� �#(& $� � �'� $� )�.��#$2� � !��!�%� $�
�,�# 6�.� $� $�*�#� $��#(& $�@��KA���+ �' �$�(�! $��' �%#�#����.�%#�%(#��
7(�.7(#� #4#J�'��� � � $(� ($ � &�#�� #�*�#� ' !& $% $� 7(� �#!� �!��$�
�&#��'�&�.�&# & $%��$%���$$#%�"+ ���
� �7(��:�#$&�% ���#���%$�7(��'%(�!����0*.� ��#(& �,�# 6�. �� �
'�#) � ��2�& �&# '#1$�<� 6��"+ � ��#(& �,�# 6�. �!�& $�"+ ��α2�& #�
��%#!/� ����:�!��,�# 6�$%#-��$�# ���$2���(!���%#!��#� ��α1 6 �
#���� � $%� & �$� ' !� �� ��$�.,�#�:���� �,�#�:��� K1��!%�.�!�� �1�1
��4%�.� $(.4-��'������#�*� �4 #!� ��&#$�%��(!�.�!�%��%'"+ ��K �
4! .���3'%� $�@�8�A���
���1��%# �.1��%#�. � /�(%�.�:� ����#�*�"+ �� �'� $�)�.��#$� & #� �%�7(�
�#'% � � � �#(& � ,�# 6�. � !� & $�"+ � �α2� �#(& � $%� 7(� /� �!& #%��%� ���
$&�#�"+ �'# !�% �#�4�'�� $��'� $�)�.��#$�' �3(�� $�' !����.�'���� (�' !���
%�(#���� @��KA2� �� � #��!���#�*� $�7(�%!�' ! � .�!�%��%'"+ �� �
4! .���3'%� $�@��K2��8C2��882�� A��
R�� %�!)/!� &# '$$ $� � %'"+ � � �'� $� )�.��#$� )�$� $� !�
#�'"L$��:�!�%�'�$�&�#��%'"+ �& #�4.( #$'J�'���7(�$+ �6'(%� $��&-$���
$&�#�"+ �& #�R�E�� @� �2� � �A� !� #��!��% �>& $%1' .(!�?���� �:�!���'%(��
$ )#� ��'� �)�.��#�' !�4 #!�"+ ��(!��#(& � 6 �2�$�!(.%���!�%2�#(:�
(!�' �:�!������P���R�����' �:�!��#(:� ��#� �/�#$& �$�*.�&. �$���.�
�4.( #$'J�'���$!&#�7(�(!��'� �)�.��#��%#�*$$�� �#�'% #�&-$1' .(����
�$%$� &# '$$ $� $%+ 2� � � �%��% 2� .�!�%� $� &.�� �$& ��)�.���
' !#'��.� �$� �:�!�$��'$$�#��$� &�#�� #(:�#� �$� *�#��$� & $�"L$�,�# 6�.��$�
��α2� �α2� ��α �� � �G'. � $%#-�� �� ! ./'(.�� $� �'� $� )�.��#$�� � #� $$��
#�:+ 2� $-��$� �:�!�$� '�&�:$� � �%�'�#� �� & $�"+ ��α2� $%+ �'�&�:$� � $#!�
(%�.�:��$��H�$� �$(�($ 2�$-�/�& $$0*.�7(�� ���#4#���& $�"+ ���+ �$%��
). 7(��� & #� #�*�"+ � ' !� � �'� � �.(' #-��' 2� (� $(.4�%��2� � 7(� /�
4#7(�%�� �'�$ ��$��! $%#�$��(#����@�CCA��
��#�� �./!� �$� .�!�%�"L$� &�#%�'(.�#$� 3�� #4#��$2� *� * .%�#1$� ��
',�!�#� �� $%� & �% � �$� .�!�%�"L$� �#��$� 7(� 3�� 4 #�!� $�.��%��$� &�#�� $�
!/% $��#�*�"+ ��#� #$��%'"+ �� ��[1[����
�������������������������������
�������KC���� �
D(�� � $� #�*�� %� � ' ! � �.* � � �#(& � �'� � '�#) 60.�' 2� $%+ �
�!��%�!�%�6'.(0 $��� ���.�$� $� �'� $�)�.��#$� ' �3(�� $�&.��%�(#���2�
(!��*:�7(��� $(�� '���� .�%#�.� �+ �%#!�����(!��'� � '�#) 60.�' 2�!�$� $�!�
�(!��'� �$(.4-��' ���$%2�& #�$(��*:2�/�)�$%��%���#%���7(�.7(#�&# '$$ ��
#�*�"+ �7(� ' ##�� !� ' ��"L$� $(�*$��7(��+ �&# * 7(!���&#�� $�
,�# 6�. $� � �G'. � $%#-��� � ! � $� �'�%( (� ��%#� #!�%2� $%$� $+ �
���$&�$�*�$� ��(!��) �� $&�#�"+ � R�E�� $� �'� $�)�.��#$2� ' !� &�#%�'(.�#�
$%�7(�&�#�� $��,�# 6�.� $�@��KA��
D(�� � $� #�*�2�%� � ' ! ��.* � � �#(& �,�# 6�. � ���& $�"+ ��α� �
�G'. �$%#-�2�4�'�!��!��%�!�%�6'.(0 $������.�$� $��'� $�)�.��#$�7(�
$3�!�$(.4�%� $��$$��& $�"+ 2�7(�' !"�!���%#��.�(!���!& #%5�'������0*.�
��&�% . ����&��%#�'��@�CCA���'#$'������7(���& $�"+ ��α�*�$%�#� .�*#2�
&�#�� &#!�%�#� (!�� $&�#�"+ � ' !&.%�� & #� R�E�2� � % $� $� �'� $� )�.��#$�
�,�# 6�.� $�� ��G'. �$%#-��@� �2���KA����$(�). 7(� �& #�(!��#�*�"+ �
/�(�'��.2�&#�%�'�!�%2�&�#��% �$��$�%/'��'�$��$&�#�"+ �'# !�% �#�4�'���
�$%�� '.�#�!�%� !� 4�.%�� (!� !/% � 7(� &#!�%�� (.%#�&�$$�#� $%�$�
.�!�%�"L$2� &�#�� 7(� $� & $$�!� %#�"�#� �$� � ' �'�%#�"+ � ' !&.% $� $!�
�'$$��� � 4#�''� ��#� $� *�#� $� �#(& $� � �'� $� )�.��#$�� ��.� &#!�%�#���
���.�$�#� $� �'� $�)�.��#$� ' !�!�� #� #�&�:� � $�!&.�'���� �$$� /� �$$�!�(!�
$�#�% �$%���$$#%�"+ ��& �% �����
2.2.5.4.1.3. Detectores Enzimáticos (NADP/NAD)
�$�&# '$$ $��%'"+ ��:�!�%�'��$+ ��#�.!�%�4'%(� $��&-$���
$&�#�"+ ��' !& $% $�& #�R�E����
�&-$�$%�� $&�#�"+ 2� $� �'� $�)�.��#$� $+ � ' �(:� $� �%#�*/$� �(!��
$�(��� ' .(��� ��� 7(�.� $� �! )�.�: (� �� �:�!�� �α1,�# 6�$%#-��
$�# ���$� @� �2� KA2� ' ##� 2� �$$�!2� �� 6��"+ � � �#(& �,�# 6�. � !�
& $�"+ ��α� �� �1 6 ����&#$�"�����' %���!��1��������('.-%� � ����Y�2�
�� � #��!������R��4 #!��#(:��������% � $��'� $�)�.��#$� .�*#$�' ! � $�
�'� $�)�.��#$� �.�' � �%�(# ' �3(�� $� & !� $#� ���.�$� $� & #� $%�!/% �
@���2� BA2� $�7(��+ �%�,�!� ��#(& �,�# 6�. � !�& $�"+ ��α�). 7(� �
& #� $(.4�% � (� �.(' # ��% 2� ' ! � 4#7(�%!�%� �' �%'� ��$� �! $%#�$� �
(#����@�CCA���
�$%�� #�'"+ � �:�!�%�'�� & � ����� $#� �' &.��� ' !� %'"+ �
.'%# 7(0!�'��7(�� � $� #��� ����R� ' !�(!�� $ .("+ � �!%�$(.4�% � �
�������������������������������
�������K8���� �
4��:����� � � �%��% 2� �+ � $� #��$%�#�!2� � $� G.%�! $� �� $2� !., #��$�
$����4�'�%�*�$�� �.�!�%��%'"+ �!�' !&�#�"+ �' !� $�!/% $��%'"+ �
& #�4.( #$'J�'���@� �2�� CA��
�� ���R� &# (:� � & � ����� $#� %'%� � & #� $&'%# $' &��� �[�
��� �!��@� B2�� 8A2�4.( #$'J�'���@�� 2�� �A� (�7(�!� .(!��$'J�'���@�� A��
�!��8C�2�R�#�� �%��.��@���A�$'#*#�!�(!�!/% �� �7(�.��&.�'�!� �
' �'�% ���#�*�"+ ��:�!�%�'���%#�*/$����α1,�# 6�$%#-��$�# ���$2�
)%� �(!�&# (% �7(�!�%�4.( #$'J�'���� $��� ��!���$%�!/% �&#!�%2�
!�& (' �!��$��B �!��(% $2����.�$�#� $��'� $�)�.��#$�.�*#$��' �3(�� $�� �
$ # �' !�(!�.�!�%��%'"+ ��� ���2� (�'#'���� �4! .� ��3'%� $��
�$%� .�!�%�/2� � ��%��% 2� !�$�� � �.% � �'#'�� � � � *:$�!�� #��7(�� �
' !&�#� �' !�.�!�%$��%'"+ ���� '�$�� $�� 1� �4! .�3��#��$%� $�&�#��
(%# $�!/% $��%'"+ �& #�4.( #$'J�'������).�����K�����.�&�#'�*#1$�
<� .�%�+ ��� #�'"+ ��:�!�%�'�2�7(��+ �&#!�%�(!�� ' �*#$+ �&#-6�!���
� 9�� �%!& � ��#�'"+ �2�!(�% �'(#% 2�!�7(� �' !& $% �$%���%# ���
' .(��� � #�*�"+ ��:�!�%�'������ &#�%�'��(!�%�.� !/% � $-� & � $#�($� �
' !��! $%#�$��)0.�$� !�7(��� ' �'�%#�"+ �� �'� $�)�.��#$� /�!(�% �!��$�
�.%���
2.2.5.4.1.4. Detectores de Dispersão de Luz após Vaporização
�$� !/% $� � %'"+ � & #� ��$&#$+ � � E(:� �&-$� [�& #�:�"+ �
��*�& #�%�*�E��,%��'�%%#�����%'%� �2��E����)�$��!1$����'�&�'���7(��$�
&�#%0'(.�$�$-.��$�& $$(!���$&#$�#� $�4 %L$�� ��%#�*$$�#�(!�4�6�� .(:�
! � '# !�%�'�� .�$#� @���A�� �� ���.�$� & #� $%�!/% � ' !&#��%#J$� 4�$$T�
�)(.�:�"+ 2�*�& #�"+ ��%'"+ �-&%�'���
��� 4�$� � �)(.�:�"+ � �� 4�$� !-*.� �'�)��� � $��#� �� ' .(���
'# !�% �#�4�'�� �%#�*$$�� (!�� ��(.,�� �7('��� � /� ' !)����� ' !� (!� ��$�
��#%�' ! � ��#� �� (� ��: % ��\��#� �(!��# $$ .�!�7(� �%�!��, ����
4 #!���$�� %0'(.�$�$%+ �&��%$��4�'% #$�' ! ���' !& $�"+ ���4�$�
!-*.�� �4.(6 � ���$��
��1$��%+ ���&�$$��!�<�$�(���4�$� �&# '$$ 2����7(�.� ��# $$ .�
&�$$�� &�#�� (!�� $'"+ � �(!�� $&�#�.� (� (!� %() �2� ��� 7(�.� � $ .*�%� /�
*�& #� 2�4�'�� ��&��$� �#$0( � ����.�% ����%!&#�%(#����7('�!�% �
/�&��%���4�$�!-*.�� ����.�% �!�'�($�2�$� � �$(�*�. #�4��� �
&. � (%�.�:� #�� �$%�� 4�$2� $� %�!&L$� &#$�%$� ��� 4�$� !-*.� *!� $#�
�������������������������������
�������B ���� �
* .�%�$��6!&. 2��'%�% ���!-�� ��&�#��7(��)�� �!� ����.�% �#(:�� �
�$$�!���!�%#�:�7(� ��' !&��,���
�� ���.�% � !� $%( 2� 3�� ��� 4 #!�� � ��� &�#%0'(.�$� $-.��$2� �� �
$�(����%#������'5!�#���%'"+ �-&%�'�� ���%#�*$$��(!�4�6�� .(:�
.�$#2��$&#$�� �(!��&�#%�$$�4�6���� .(:��+ ��$&#$���&.��&�#%0'(.��/�
�%+ �%'%���& #�(!�$�$ #�7(�&# '$$��$$�� ��4 #!�"+ ��4 #!���� )%#�
���'�"+ � �� �!�$+ � � ��7(��%��� �$� &�#%0'(.�$� &#$�%$�� �� �!�$+ �
!/����$�&�#%0'(.�$�/�&��%��$�' ��"L$�����.�$2�� !��!�%���
' �'�%#�"+ ��� �! $%#�2� �� ' !& $�"+ ��� 4�$�!-*.2� � 4.(6 � ���$�� ��
* .�%�.��� �� �! $%#��� ��#�� 7(� $%�� %/'��'�� $3�� 4�'��%� ��� %'"+ 2�
' �*/!� 7(� � ���.�% � �+ � $3�� * .�%�.� � 7(� % $� $� (%# $� ' !& $% $�
&#$�%$2����4�$�!-*.2� �$3�!�����.�% $�&�#'��.!�%�* .�%�$� #�����!�$����$�
)��6 $�!��E��2�& #7(�4 #!�!�!� $�&�#%0'(.�$�$-.��$��=.�:!�%� $��'� $�
)�.��#$� �+ � $+ �* .�%�$� ��$� ' ��"L$� &#�'� ���$�!��$� 4#7(�%$��$%�%�& �
�%'"+ ��
� � � &# '$$ �& �7(�$� ' �$�#�#1$� ' ! �(!���4. !%#��� !�
4�$���$ $���� #�*:$�' �$�#�1$�7(� ��E���/�(!�%'% #��!�$$�2�(!��
*:�7(��� #$& $%��$%�%'% #� /� &��%� �%�!��, ���&�#%0'(.���� �
�%��% 2� $%�� ' �$�#�"+ � /� �#� #�� � ' �4($+ �(!�� *:�7(2� �%#�*/$� �
�E��2��+ �$�' �$�(�%#!���#���!�$$��! .'(.�#� �' !& $% �!����.�$��
��.�$-�/�& $$0*.�!�%'"+ �& #�$&'%# !%#����!�$$���
�$%�!/% �/��7(� �<�%'"+ ��' !& $% $�' !�(!��* .�%�.���
��4#� #�<� �� 4�$� !-*.� � #������(!� $���.2� !$! � ' !� ' !& $% $�7(� �+ �
�&#$�%!�(!��#(& �'# !-4 # � (�4.( #-4 # ���$��'� $�)�.��#$�$+ �! ./'(.�$�
' !�$%�$� '�#�'%#0$%�'�$2� & � � �$$�!� $#� ���.�$��$� & #� �E����� !� �($ �
$%�%'% #2��+ �$-��+ �/��'$$�#� �&# '#�<�#�*�"+ � $��'� $�)�.��#$2�
' ! � $� & !� !&#��#� (%#�$� 4�$$� !-*�$2� � !��!�%� ' �%� �
�'% ��%#�. 2�7(��&#$�%�!�(!���)$ #*5�'���� ��[����!$!��: ���!�7(� $�
�'� $� )�.��#$� �$&'��.!�%� $� �.�' � � %�(# ' �3(�� $� �+ � #�*� $��
�&#$�%�!��)$ #*5�'����� 1�� ��!��@���A��
�$�!/% $��E���& $$�)�.�%�!���%'"+ ��7(��%�4�'�"+ ��!��$���B�
�'� $�)�.��#$� �4#�%$��(!�� $-�' ##��2� ��'.($�*�!�%�� �'� $�)�.��#$� ���
4 #!��.�*#2�$!����'$$����#' ###���&# '$$ $��#�*�"+ 2�' ! �/� �
'�$ ���%'"+ �& #�$&'%# 4 % !%#���� ��[1[���@��BA��� #�*:$2��$$ '��1$�
�%'% #���E����� (%# $�%'% #$2�%��$�' ! �%'% #$��$&'%# !%#���
�������������������������������
�������B����� �
� !�$$�� @���2���A�� � �� %� �.�� !&#��#�!� $%�� �$$ '��"+ 2� & #/!2� $!�
�#���$('$$ �@���A��
�$%� %'% #� /� �&# &#�� � &�#�� �� ���.�$� � �'� $� )�.��#$� !�
' �'�%#�"L$�!�.�! .�#$� � $� 4.(0 $�)� .-��' $� �' ! �/� � '�$ ���)0.�$��7(#�
$%3�!����4 #!��.�*#� (����4 #!��' �3(����@�8A��� ��%��% 2��+ ��&#$�%��
(!�.�!�%��%'"+ �� ��0*.� $�%'% #$�& #�$&'%# !%#����!�$$�2�7(�
& !� ',��#� � � �0*.� � %'"+ � � 4�% ! .$�� �$%� %'% #� �E���
�&#$�%�2� & #%��% 2� (!� .�!�%� � %'"+ � &#-6�! � � %'% #� �
#4#�% !%#��2�' !���$*��%��!��$#!�7(�&�!�% $�!��$�'�# $��' !�(!�
'($% ��(%�.�:�"+ 2�& #��! $%#�2�!��$�.*� 2�*� �� �($ ��,/.� �' !��#�(�
�&(#:���� ��
2.2.5.4.1.5. Espectrometria de Massa
�!�� �#�� 7(� %!� #��$%� � �#��$� �*��" $� ��� ���.�$� � �'� $�
)�.��#$�/����$$ '��"+ � �R�E��' !���$&'%# !%#����!�$$����
�� $&'%# !%#��� � !�$$�� 4 #�'1� $2� � � ' �%#�#� � � (%# $�
%'% #$2�' ! � $���[1[��2���4 #!�"+ ��!��%���'#'�� �&$ �! .'(.�#��
$ )#� �� $%#(%(#�� �� ! ./'(.�� !� ���.�$�� �#!�%1� $� ����� �$%���(�#� �
7(��%�4�'�#�' !& $% $�7(��+ �%�,�!�$� �% %�.!�%�$&�#� $P#$ .*� $�& #�
R�E�2� $� 7(� �&#$�%!� (!� &$ � ! .'(.�#� (� 4#��!�%�"+ � �4#�%�
@��CA���
�� =��(#�� ��� K� ! $%#�2� !� %#�" $� �#��$2� $� *�#� $� ' !& ��%$� (�
$'"L$� !�7(� $� & � �*��#� ' �'&%(�.!�%� (!�� �&�#.,��!� R�E�1H��
! #���� �.�� $+ � ���'��$� �$� 4(�"L$� �#��$� $� *�#� $� ' !& ��%$� �!�
'�!��� � $+ �� $� 6!&. $� �$� ��%#4�'$� ����&�#%��)��6 ��� 4��(#���!��$�
*:$�#4#��$����.�%#�%(#����$%���$$#%�"+ ��
=�'�<��'$$��� �$�* .*�!�% ��!/% $�$�$0*�$���#�&���
6'("+ 2� $� !/% $� � $&'%# !%#��� � !�$$�� !��$� ��%�� $2� ' ! � ��
$&'%# !%#����!�$$��& #�) !)�#�!�% �#�&� ���% ! $���O��!�'�=�N�
(�=�N1H�2�=�$%��% !�N !)�#!�%�H�$$��&'%# !%#O��@���A����� ��:�"+ �& #�
%,#! $&#�O2� %J!� *�� � �� $#� �)�� �� $� !� 4�* #� � %/'��'�$� !� $�
�/#��'�$�� ��%# (:�#�' !& $% $�!����.�$� #$��!�$$�2�' ! ��� ��%#4�'�
�� ��:�"+ �& #�.'%# $&#�O�������@�B2����A���
�
�������������������������������
�������B����� �
�
=��(#�����K�Z�����#�!���). ' $� $�' !& ��%$��(!�$�$%!��R�E�1
H���
�
�$%����%#4�'�& ������$#��$$ '���������.�$� #$��!�$$��!�$/#��
�%��!�!�$$�$&'%# !%#O�Z�H�PH�� (�H����@���2����2���K2���B2����A���
�$%$� �*��" $� &#!�%!� $ .('� ��#� &# ).!�$2� %��$� ' ! � �� )��6��
* .�%�.������%#! .�)�.��� $��'� $�)�.��#$2�)!�' ! ���%'"+ ��#'%��
��$(��4 #!��& .�#���%�'%�2�'�$ �6�$%���� ��%��% 2��$�%/'��'�$��%'"+ �& #�
$&'%# !%#��� � !�$$�� �+ � %J!� '�&�'��� � �$%���(�#� �%#� $� �*#$ $�
�$-!# $� & $�'� ���$� $� �'� $�)�.��#$� @�BA2� � !��!�%� $� �,�# 6�.� $2�
(!��*:�7(�$%$�' !& $% $�%J!���!$!��!�$$��! .'(.�#��4#��!�%�!��
(!�! �!(�% � $�!�.�#�� � � �%��% 2� $�, (*$$� �4#�"�$� ��� 4#��!�%�"+ �
$� �$-!# $� & $�'� ���$2� �$� %/'��'�$� H�PH�� &#!�%�#��!� %'%�#2� !� '����$�
*�#%(��$� $&�#� $2� $� ' !& $% $� $%� %�& �� E�!�%�*.!�%� %�.� �(�'�� 4 ��
& $$0*.�� �' �3(�% � $��'� $�)�.��#$��
��#���&# *�%�#��$�'�&�'��$��%'"+ ���$&'%# !%#����!�$$��
�$(&#�#� $�&# ).!�$���$%��"+ � $��*#$ $��$-!# $�& $�'� ���$� $��'� $�
)�.��#$2� �$$ '��#�!1$1.,� �$� %/'��'�$� '# !�% �#�4�'�$� ' ! � (!� &�$$ �
$&�#�%�* �&#/*� ��
�� $&'%# !%#��� �!�$$�� /�!(�%�$� *:$� �$$ '����<�U�2�3(�%�� � �
& #�$&�#�%-#� �$%�2�<�$�$�)�.��� �!-(. �H���� ��%��% 2�' ! �3��4 ��
#4#� ���%#� #!�%2���&#&�#�"+ ���! $%#�$�&�#�����.�$2�& #�$%�!/% 2�
/�! # $�� � ' !&.6��������.�% �!�$%( �%!�� $#� * .�%�.� �%#!�'�!�%�
$%�*.�� �$$�!2� �$� �! $%#�$� � �'� $�)�.��#$� #7(#!�(!�� $/#�� � &�$$ $�
&#&�#�%-#� $� �6%#�'"+ 2� $&�#�"+ � & #� �#(& $2� ,�#-.�$� $� ' �3(�� $2�
#�*�"+ � &�#�� * .�%�.�:�"+ �� � ! � �� 7(� & $$�!� $#� ���.�$��$2� ' !�
�������������������������������
�������B����� �
$('$$ 2� & #� U�1H��� �+ � �!�#�2� & �$2� 7(� �� .���"+ � �%#� � R�E�� � �
$&'%#-!%# ��!�$$�2�4 $$�(!�$ �, ���%�� � $�$&'��.�$%�$��$%���#���
���.�$�@��8A��
� !� �$�* .*�!�% ��$� ��%#4�'$��%#� ��R�E��� �$&'%#-!%# �
� !�$$�2� 4 �� & $$0*.� 4�:#� �� �$$ '��"+ � �#'%�� � 7(�&�!�% � R�E�� <�
$&'%# !%#����!�$$��&#!�%�� ������.�$� $��'� $�)�.��#$�!�%!& �#�.�
@��CA��$!�7(�.7(#�#�*�"+ �&#/*����
� $�&#�!-#� $����$$ '��"+ �R�E�1H�2� �4.(�%���' .(�����R�E��#��
� %3� � $ )#�(!�� ' ##��� '�#'(.��%� $!14�!� ���%#4�'�H *����N.%�� $ )#� ��
7(�.� #�� *�& #� � � $ .*�%�� ��(��!�%2� � $ .(% � & $�%� � $ )#� ��
' ##��� &�$$�*�� & #� (!� � ��:� #� �� #�� .�)#%� � � ' !& $% � �#� #� �
$&'%# 2� 7(#� 4 $$� & #� �!&�'% � � (!� 4�6� � .'%#L$� (� & #� � ��:�"+ �
7(0!�'�� @��CA� ' !�) !)�#�!�% � ' !� ' !& $% $� �)��6 � &$ � ! .'(.�#�
��$ )(%�� �� (���$$���#%$��6/� �����
� ��%��% 2�$%�&# '$$ ��&#$�%�*���.�(!�$�$*��%���$T��$&#$+ �
$��(�.����! $%#�����' ##��^��+ �$#�& $$0*.����.�$�#�' !& $% $�7(�4 $$!�
%#! .�)�$� (�7(�$%�*$$!��$$ .*� $��(!��4�$�!-*.�!�7(� �$ .*�%�
4 $$� �+ � * .�%�.^� � �� )��6�� $�$�)�.��2� (!�� *:� 7(� ,�*��� (!�� )��6��
%#��$4#J�'�����! $%#���%#���&�$$��#�P' ##������: ����&#$$+ �#(:���
����.�$� #��!�$$�$�@��CA���
��$�* .*�!�% �� ��%#4�'$�7(�& $$�)�.�%!���&�$$��!��#'%�� �
���.�% � .(0 � &�#�� � $&'%#-!%# � � !�$$�� #$ .*(� �.�(�$� $� &# ).!�$�
�'�!�� '�%� $� @��8A�� ��' �%#�1$� �$%� �#(& � �� ��%#4�'� �.'%# $&#�O� ����2�
�.'%# �&#�O���%#4�'���
�� R�E�� !� ' !)���"+ � ' !� ���� H�1H�� %!� *�� � �� $#� �&.�'��� ���
���.�$� � �'� $� )�.��#$2� !� �! $%#�$� � &.�$!�� @�B2�� A� � !$! � !�
�! $%#�$��)0.�$�@��8A2��&$�#���+ �$#��'$$�#���(!��%/'��'��%+ �$�$0*.�
&�#�� $%� %�& � � �! $%#�2� (!�� *:� 7(� �&#$�%�� (!�� ' �'�%#�"+ �
#.�%�*�!�%�.*��� $����.�% $�!�$%( ��
�$� �&�#.,���$� R�E�1���1H�� �&#$�%�!�(!�� .*��� $�$�)�.��� �
$.'%�*��� @�K2��CA�� �+ � 4�'�.!�%��%���0*�$� .�!�%$��%'"+ ���� Z� � �
&! .2�& #�%'"+ � $� �L$�! .'(.�#$����%�* $�7(�% $� $��'� $�)�.��#$�
�&#$�%�!�� ��#�� %��% 2� )�$%�� (!� G��' � ���.�$� #� � !�$$�� � � %�& �
7(�#(&-. ��&�#��$&�#�#� $��L$�! .'(.�#$��#� $2��(!�&# '$$ �$���� �
& #��R�E�1���1H����� #/!2�$���! ./'(.��%�*#�(!��4#��!�%�"+ �'�#�'%#0$%�'�2�
�������������������������������
�������B����� �
& !��4���#1$� %'"L$�R�E�1���1H�1H�� � �$�7(�#(&-. $� ���.�$� #$� �
!�$$��2�' !�#��$% ��(!��G��'��%#��$�"+ ��!�$$�$�&��14�., 2�7(�&#!�%!�
%'%�#�4�'�.!�%�7(��%��$���4#� #$���K �4! .���
�$$�!�$� 2���' !)���"+ � �& #��$&�#�"+ ���%/'��'��R�E�2�' !�
��$�$�)�.����$.'%�*��� $�%'% #$��!�$$�2��)#�&#$&'%�*�$�!(�% �
��%#$$��%$����%'"+ ��7(��%�4�'�"+ ���'� $�)�.��#$���
�
Métodos de Ionização usados em HPLC-MS
� ���%#� #��� ��%#4�'��%#� �R�E��� ����.�$� #��H�$$�$� ' ##!�
�$� &# '$$ $�� �!� .$� /� �� .�!���"+ � �$� ! ./'(.�$� � $ .*�%2�
� #!�.!�%�!�&# '$$ $�7(��!&.�'�!��)(.�:�"+ �4������4�$�!-*.�' !�(!�
��$��$&#$��%���&.�'�"+ ��*�'( ���� (%# �/���4 #!�"+ �� �L$�' !�'�#���
���%�*�� (� & $�%�*�2� ' !� (� $!� 4#��!�%�"+ � ��! ./'(.�� � ���.�% �� ��#��
% #��#�'.�# � �7(�!��$�<�4#�%��>�$(.%� $����$'($$+ ?2�& �% �K��$�)�%2�
#.�%�*�!�%� <� 4#��!�%�"+ � $� #�*� $� $� �'� $� )�.��#$2� /� G%�.2� �$%�
& �% 2� �$'(%�#2� #$(!��!�%2��.�(�$��$&'% $� �&# '$$ �� � ��:�"+ �� $�
*�#� $�! $�� �6'(%�#��
Ionização por impacto de electrões (EI)
\� � !/% � � � ��:�"+ � !��$� ' !(!2� $� � !(�% � (%�.�:� � &�#��
����-$%�' � � ���.�$� $%#(%(#�.2� & �$� &# (:� (!� &�#+ � *�#�� � �
4#��!�%�"+ 2�& #�*:$��%/�' !�6'$$�*��4#��!�%�"+ ��
�$%�!/% �& � $#�($� ����!�� #��� $� $&'%#-!%# $��!�$$�2�
�&.�'�� �& #�6!&. �(!�4�6��.'%#L$�' !�(!���#������!&�'% ��%#�
� ��� �[�@���2��8A��
Ionização química (CI)
��� ��:�"+ �7(0!�'��/�(!�!/% �!��$�$(�*�7(� ���2��� �(!�&�#+ �
� 4#��!�%�"+ �!��$� #(:� 2�7(� $�%#�(:� �(!� �(!�% � � $�$�)�.���
(!��*:�7(�&# (:�!� #��G!# ���L$��4#�%$2�!�$�'���(!�.$�' !�
!��$� ��%�$������4#��!�%�"+ �/�'�($���& #�(!�4�6��! ./'(.�$� ��#%$�
�6!&. T� !%�� 2� �$ )(%�� ��7(�) !)�#��� � ���.�% � !� : ��� � &#$$+ �
#(:����
�$%�� %/'��'�� /� !� $� (%�.�:��� � 7(� �� ��%#� #2� $� � & #� *:$�
(%�.�:��2� !� &�#�.. 2� ' !� �� ��� @�8A� � � $%( � �� 4#��!�%�"+ � $� *�#� $�
�������������������������������
�������BK���� �
���.�% $�� �!���� $+ � )$#*�*�$� 4#��!�% $�3��!(�% �&7(� $2� �7(��% �7(�
!� ��� $� )$#*�!� 4#��!�% $� !�� #$� (� �($J�'��� � 4#��!�%�"+ �� ���
' �3(��"+ ��$�(�$� )$#*�"L$2�������2�/�& $$0*.�' !"�#�����4#�#�,�&-%$$�
#.�%�*�$�<$� ',�!��$� *��$� � 4#��!�%�"+ 2�7(� $+ � & �$� ' �4�#!��$� & #�
6&#�J�'��$�H�PH�� (�H����� � 4���.2� /� & $$0*.�%#�"�#�(!��*#��#�� >�#* #�
���.-��'�?� $� *�#� $� 4#��!�% $� � %'%�#� $� & �% $� !��$� 4#���$� ��
! ./'(.�� ����.�% �!�$%( ��
�
Bombardeamento atómico rápido/acelerado (FAB, Fast-Atom
Bombardment)
�
�#�%�1$��(!��%/'��'���� ��:�"+ �7(�%!���'�&�'����&# (:�#2�
%��% � �L$� ! .'(.�#$� & $�%�* $�@HYRAY�2� ' ! � �L$� ���%�* $� �@HZRA1�2� (�
$%$��L$��$$ '�� $�� �$-� ���-�� � �$&'%#-!%# P�! $%#�����
�$%� !/% � � � ��:�"+ � �� �! $%#�2� & $�%��� $ )#� (!�� !�%#�:�
*�$' $����.�'#����2�/�) !)�#���& #�(!�4�6���% ! $��6/� ���'.#� $2�
7(� 4 #"���� $�0��&�#�� �� 4�$� ��$ $�2� �� &#$$+ � #(:��2� $� �L$�� ���.�% �
�#� $��
�$%� 4�6� � ��:��%� &# (:� 7(�$� $!&#� �L$� 7(�$�! .'(.�#$� 2�
�#�.!�%2������%#��$4#� �#���� $(4�'��%�<�! ./'(.�� !�$%( 2� &�#��7(�
' ##��(!��.*�4#��!�%�"+ �$()$7(�%�@�8A��
�$��'� $�)�.��#$2�%��% ����4 #!��.�*#�@���A�' ! ����4 #!��' �3(����
@���2���A2� & !� $#� ���.�$� $� & #� $%� &# '$$ 2� 4 #�'� � ��4 #!�"+ �
7(�.�%�%�*�� �'#'�� �� ��%�4�'�"+ � � �'� �)�.��#� !� '�($�2� � !��!�%2� ��
$(��!�$$��! .'(.�#��
� ��%��% 2�$%�&# '$$ �� � ��:�"+ �&# ! *���4 #!�"+ ���('% $�
' !��L$� #�����#� $���!�%#�:�*�$' $����.�'# .2�!��$�4#7(�%��!�($ ����+ �
&#!�%��4#�'��#� $��4#�%$��$-!# $�& $�'� ���$� $��'� $�)�.��#$����#��%�.�
�'$$�%���(!��$&�#�"+ �'# !�% �#�4�'��&#/*���$%$�@�8A2�� !��!�%�
$��'� $�)�.��#$��,�# 6�.� $���
�$$�!� $� 2� �� �$$ '��"+ � �� '�&�'��� $&�#�%�*�� �� R�E�� ' !� ��
%'"+ � & #�=�N� &#!�%�(!��!., #� � !��$� #�&��� ���.�$�7(��%�%�%�*�� $�
�'� $� )�.��#$� &#$�%$� ��� �! $%#�2� 7(�� � ' !&�#� � ' !� � =�N� $�!&.$�
�7(�.�%�%�* �����G��' � ��' �*���%�/� � &#" � $� &�#L$�(%#� $�7(� $�
�������������������������������
�������BB���� �
%!� 7(� ��'� ��#� <� �! $%#�� &�#�� $#� & $$0*.� �� 7(��%�4�'�"+ � & #� �.(�"+ �
�$ %-&�'��@���A��
�*��$� %� �.�� $�* .*#�!2� !� �88�� @��KA2� (!�� %/'��'�� � R�E��
�' &.� ��#'%�!�%�!� 4.(6 � ' �%0�( ���(!�%'% #�=�N�&�#�������.�$� �
�'� $�)�.��#$����(#���2�%��% ����4 #!���.�' ��%�(# ' �3(���2�' ! ����4 #!��
.�*#� � ��� 4 #!�� � 6 � #�*� $2� !�7(��%��$� ��3'%��$� ��� #!� $�
&�' �#�!�$� �: ��� $� 4! .��� �$%� !/% � &#!�%�(� ��%�4�'�#� � 7(��%�4�'�#�
�$-!# $� & $�'� ���$2� � 7(� �&��$� & #� ��3'"+ � �#'%�� !� =�N� �+ � $#���
& $$0*.���
�
Ionização por thermospray
�
�� � ��:�"+ �& #�%,#! $&#�O�' !"�� ' !����)(.�:�"+ P*�& #�:�"+ ��
(!�.07(� �� ��%#�*$$�#�(!�'�&�.�#��7('� 2�4 #!�� ��$$�!�(!�3�'% ��*�& #�
!� 7(� �$� ! ./'(.�$� �+ � * .�%�$� $� �' �%#�!� ��'.(0�$� ��$� � %0'(.�$� �
�# $$ .�� �� 4 #!�"+ � � �L$� ' ##� 3�� ��� 4�$� ��$ $�� � /� &��%� �
!G.%�&. $�4�'% #$2�%��$�' ! ���%!&#�%(#���*�& #�:�"+ 2� �4.(6 � �$ .*�%��
��' !& $�"+ ���4�$�!-*.��
�$%��%/'��'�� � � ��:�"+ � /� ' �$�#���(!��%/'��'�� >$(�*?�(!�� *:�
7(2�!�' !&�#�"+ �' !� (%#�$�%/'��'�$��$& �0*�$2�&# (:�(!��4#��!�%�"+ �
!� $� 6%�$����! ./'(.���\�� � �%��% �!� $� >$(�*?�7(��� � ��:�"+ �& #�
.'%# $&#�O���!��������*��%��!��& #�$#��&.�'�����! ./'(.�$�& .�#$��
�+ �* .�%�$2��.� �7(��+ �/�& $$0*.� & #�U�1H�� $!�6%#�'"+ 2� $&�#�"+ ��
�#(& $2�,�#-.�$��#�*�"+ �@��CA��
� ��%��% �$%��!% . ����%�!)/!��&#$�%��.�!�%�"L$���!�&#�!�# �
.(��#2�!(�%�$��$�4�$$�!-*�$�(%�.�:��$�&�#�����.�$���'� $�)�.��#$�& #�R�E��
�,�)�%(�.!�%� � 4�$� ��*#$��� & !� ' �%#� %�!&L$� ' !� �L$� $-� � (�
4 $4�% �7(�& !�&#'�&�%�#2��%(&�� � �*�& #�:� #���!�*�#%(��$$ 2� &%�1
$2� �#�.!�%2� &.�� (%�.�:�"+ � � (!� %�!&+ � * .�%�.� ' ! � � � �'%�% � �
�!-�� �@���2���A���
��#��7(� $� )%�,�!�) �$� #$(.%� $� /� �'$$�#� �7(��� 4�$� !-*.�
' �%�,��&. �!� $�� 9��4�$��7( $���(!�.*� �' �%G ��.'%#-.�% 2�
� #!�.!�%2� $ )� �� 4 #!�� � (!� %�!&+ �� �$%�$� ' ��"L$� �!� $!&#�
4�* #'!�(!��) ��$&�#�"+ �'# !�% �#�4�'���� ��%��% 2�& 1$2�$!&#�7(�
�������������������������������
�������B����� �
& $$0*.2� &# '#�<���"+ ��$ .*�%$� (�� $ .("L$��.'%#-.�% $� �&-$���
$&�#�"+ ����' .(���@��CA��
��� ��:�"+ � ' ##����4�$���$ $��& #��&.�'�"+ ��(!�4�6��.'%#L$�
(� & #� �&.�'�"+ � � (!�� $'�#��� ./'%#�'�� �' # ��� �$',�#���� � ! � ��
�)(.�:�"+ P*�& #�:�"+ � ' ##� ��%$� �� � ��:�"+ 2� /� & $$0*.� �� (%�.�:�"+ � �
4�$$�!-*�$�' !& $%�$�& #�$ .*�%$� #�5��' $�&(# $2��#�.!�%�(%�.�:� $�!�
R�E���4�$�� #!�.��' .(��$��$0.�'���@��CA��
�%',..��[$%�.�@��CA�&().�'�#�!�!��8C8�(!��#%�� 2�'�%� �' !��#���
4#7(J�'����$%���#�2�$'#*� �&.��&#�!�#��*:�(!��%/'��'��7(�%!�& #�
)�$���R�E�1H��' !���%#4�'�%,#! $&#�O2�&�#���'� $�)�.��#$�' �3(�� $����
��).�����B�.�$%���$�!�$$�$�! .'(.�#$�� $�&�' $�&$( ! .'(.�#$2� $�*�#� $�
�'� $� )�.��#$� �' �%#� $�� � ! � $� & � *#�4�'�#� & #� ' !&�#�"+ � ' !� �$�
!�$$�$� ! .'(.�#$2� � �+ � 4 #!� � 4 �� $!&#� &$( ! .'(.�#2� �+ � $�
)$#*�� �4#��!�%�"+ �$()$7(�%�@��CA��
��).�����B�Z���' $��!�$$�� )%� $�& #�$&'%# !%#����!�$$��' !�� ��:�"+ �
& #�%,#! $&#�O�� �.�(�$� �'� $�)�.��#$� !� $ # 2� �&-$�$&�#�"+ �& #�
R�E���
������������
�"�����"������
�1��2"3$4-�
#���������������+���,�
b'� �%�(# '-.�' � K�K� K��� �2�K�b'� ��.�' '-.�' � �BK� �B�� �2 �b'� �%�(# 7(� $ 6�'-.�' � �88� �8C� 82C��b'� ��.�' 7(� $ 6�'-.�' � ��8� ��C� ��2�K�b'� �%�(# $ 6�'-.�' � �88� �8C� ��2���b'� ��.�' $ 6�'-.�' � ��8� ��C� ��2 B�b'� �%�(# .�% '-.�' � �C�� �C�� �C2�K�b'� ��.�' .�% '-.�' � ���� ���� � 2C��
���' # �' !���#4#J�'���@��A���
Ionização por Electrospray (ESI)
��%'"+ �& #�$&'%# $' &����!�$$��' !�� ��:�"+ �& #�.'%# $&#�O�/�
(!��%/'��'��!��$�$(�*�7(� �%,#! $&#�O���7(���&�#�������.�$��% $�
$� �'� $�)�.��#$� &#$�%$���$��! $%#�$�)� .-��'�$2� ' !�.*��� $�$�)�.���
@��KA��
��$�* .*�!�% ����%#4�'$��%#���R�E��� �H�2�� �. �� ��'#'��
�� ��� $�' �(:�(�� �$�* .*�!�% � �������$%����%#4�'�%�!)/!� ' ##�
(!�� �)(.�:�"+ � �� 4�$� !-*.� � $(�� *�& #�:�"+ 2� ' !� � �(60.� � � ��$$� �
�������������������������������
�������BC���� �
&#$$+ �#(:����� #/!2��$%�'�$ 2� $��L$�3��$%+ �4 #!� $�7(�� � ' ##� �
4�!����)(.�:�"+ P*�& #�:�"+ ��
��!�� #��� $�! #� $�$&'%#-!%# $��!�$$�2�(%�.�:� $�&�#��R�E�1
H�1H�2��&#$�%�������.�$� #$��!�$$��� �%�& �7(�#(&-. ���(!����%#4�'�
.'%# $&#�O���������$%�%�& ��7(�&�!�% $2� $� �L$�&$( ! .'(.�#$�$+ �
$.''� �� $� � � &#�!�# �7(�#(&-. � ���.�$� #� � !�$$�� �D���� � � $�(� �
7(�#(&-. 2� �� '5!�#��� ' .�$+ � ��%#!/��2� �1$��� 4 #!�"+ � $� 4#��!�% $�
7(� $+ 2� & �$2� >4 '� $?� � � %#'�# � 7(�#(&-. � �D��2� ��%$� � ',��#� � �
%'% #���
�!��88K2�� ��%��.��@���A�$�* .*#�!�(!�!/% ��R�E�1H�1H�2�
& #� ���2� ' !� �� '�&�'��� � ���.�$�#2� %��% � �� �0*.� 7(�.�%�%�* � ' ! �
7(��%�%�%�* 2� �'� $� )�.��#$� �.�*#$2� �.�' � � %�(# ' �3(�� $�2� �%����� 1$� (!�
.�!�%� � %'"+ � � �K� &�� �'#'�� � � � 4! .��� �$�� � (!�� %/'��'�� �
�#�7('�!�% � <� '�)"�� (� &#/1' �'�%#�"+ 2� ' �$�(1$� (!� .�!�%� �
%'"+ �$%$��'� $�)�.��#$���� #!� $�K�&���'#'���� �4! .����3'%� $�
@���A����&#/1' �'�%#�"+ �.�!����(!��&�#%�' �$�#�*.� �$ .*�%2�!�7(���
�! $%#��*!��$$ .*��2�#(:�� ����$&#$+ ���)��������.�% �7(��%#����$�
' .(��$� R�E��� �$%�� !� #� �$&#$+ � �#�� (!� $���.� !��$� >' �'�%#� ?2� . � �
!��$�.*� 2�<�',����� �%'% #��
�$�$&'%# $��!�$$�� $��'� $�)�.��#$�' �3(�� $��+ �#�*� $�$+ �
)%� $2��#�.!�%2�!�! ���L$����%�* $2� (�$3�2�& #�4 #!�"+ ���L$�
&$( ! .'(.�#$� @HZRA1�� �$%� ! � �#�� �L$� ' !� $����$� !��$� ��%�$ $� �
$&'%# $�!��$�$�!&.$2� �7(� �! ��4 #!�"+ ���L$�& $�%�* $�@� A2�(!��
*:� 7(� $� �'� $� )�.��#$2� (� 3�� & $$(!� '�#��$� ���%�*�$� ��%�*�$�
�%�(# ' �3(�� $�2� (� $+ � 4�'�.!�%� � ��:�*�$� ����� ��� 4�$� !-*.� �.�*#$� �
�.�' ' �3(�� $�2� ��%$� � ',��#� <� ��%#4�'2� & #� !���&(.�"+ � � &R� ' !�
#'(#$ ���$�$%!�$�%�!&+ �* .�%�$��
� $� $&'%#-!%# $� ' !� ���.�$� #$� � !�$$�� !� $/#�� �%��!�
H�PH��2� ' !� '5!�#�� � ' .�$+ � ��%#!/��2� ,�� ����� �� & $$�)�.��� �
4 #!�"+ � � �L$� & #� 4#��!�%�"+ 2� !� �.�(�$� '�$ $2� *� � <$� $('$$�*�$�
&#�$� � ! ./'(.�$� � ��(�� ' ##$& �� � � � �G!# � � �#(& $�,�# 6�. �
���'��.!�%�&#$�%$����! ./'(.��@��CA2�� (%# $� ' ##� �%�!)/!���&#���
�����$'�#) 6�.�"+ ���R������$'�#) ��%�"+ ��@�BA��
�$� #�:L$�!�$$�P'�#��� $� �L$2� �#� $� & #� 4#��!�%�"+ � $� �'� $�
)�.��#$2�. '�.�:�!1$�� ���%#*�. �� �Z�B �!P:����#' .,���$���.��(!���%#*�. �
�������������������������������
�������B8���� �
�.�#�� � � !�$$�$� #(:� �� $�$�)�.��� � !/% 2� & #7(� � %!& � �
�7(�$�"+ � � $���.� !� '��� *�. #� !P:� 4�'�� !��$� #(:� �� �$$�!� &# '1$�<�
! ��% #�:�"+ �� �L$� ' !� #�:L$�!�$$�P'�#��� $&'04�'�$� �3�� ' �,'��$�� $�
*�#� $� �'� $� )�.��#$2� !� $%( 2� &�#�� �(!�%�#� �� $�$�)�.��� � !/% �
@��CA��
��� ��).�� ��� �� � ��� ��).�� ��� C� $%+ � .�$%� $� $� &�' $� � !�$$�� �
�.�(�$� �'� $�)�.��#$2� )%� $�& #� �4#�%$�!/% $�� � ! � $�& � *#�4�'�#�
& #� )$#*�"+ ��$�#4#��$�%�).�$2� ��+ �4�., � )%� �& #�4#��!�%�"+ � ��+ �
&$( ! .'(.�#� @H1�A1� /� #$&�%��%�� � �!�� �'� � ' !� �7(�.� � �'� �)�.��#�
$%��' �3(�� 2�' ##$& �� ��$$�!� ��+ �4�., �!P:����� �4#��!�% ���.�'����
� $� �L$� 4�., � �� !P:� ���� �%�(#���� ' !&.%��� � �� �82C� ��#(& � $(.4-��' � ��
%�(#����2�� �4#��!�% ��%�(#����@��8A��
�
��).������Z���' $��!�$$�� )%� $���&�#%�#������.�$��(!���! $%#���)0.�$�
& #�R�E�1H�PH��' !�� ��:�"+ �& #�.'%# $&#�O���
����������� "�����"������ 1��5���2"3$4-�
1��'�.�
b'� �%�(# '-.�' � K�K� K��� ����b'� �%�(# 7(� $ 6�'-.�' � �88� �8C� ����b'� �%�(# .�% '-.�' � �C�� �C�� ����b'� ��.�' '-.�' � �BK� �B�� ���b'� ��.�' 7(� $ 6�'-.�' � ��8� ��C� ���b'� ��.�' .�% '-.�' � ���� ���� ���
���' # �' !���#4#J�'���@��8A���
�!�R�E�����1H�1H�� $� �'� $�)�.��#$� �.�' ' �3(�� $� �&#$�%�!�(!�
&�' � � 4#��!�%�"+ � ' !(!� �� !P:� ��282� ' ##$& ��%� <� &#�� � (!��
! ./'(.����.�'������&�#%�#� ��+ �&$( ! .'(.�#�@H1�A1���
�$� �'� $�)�.��#$�%�(# ' �3(�� $� �&#$�%�!�(!� �+ � 4�., � !����%�
� $��82C�!P:��&#���(!��#(& �$(.4-��' 2����1��� �$�!� $���%�$ $�� $�� ��
�����!P:��&#���(!��! ./'(.���%�(#�������
�$��'� $�)�.��#$� .�*#$��&#$�%�!�(!�$&'%# ��!�$$��$�!&.$�' !�
& (' $� �L$�#$(.%��%$���4#��!�%�"+ �& #�&#���! ./'(.�$����(����
�'� �4-#!�' ���$$�!�$� 2� $��'� $�)�.��#$� .�*#$��+ �&# (:!��L$�&# (% �
$&'04�' $� � $%�*�$2� #$(.%��%$� �� 4#��!�%�"+ � � �+ � &$( ! .'(.�#��
�*� � � �%��% � )$#*�#1$� 7(2� � � '�$ � � �'� � .�% '-.�' � �E��2� $!�
,�# 6�. $� !� & $�"+ � �α� � ��α�2� $%� $� ! $%#�� &�#%�'(.�#!�%� #$�$%�%�<�
�������������������������������
�������� ���� �
4#��!�%�"+ ��� �!$! ��#�(!�%�#1$�7(� $�,�# 6�. $� !�& $�"+ ��α� �
��α�*!�%#���4.(J�'���� �!'���$! ���4#��!�%�"+ ���'����.�%#�.�@�BA��
�!�� *:� 7(� $� �'� $� )�.��#$� .�*#$� �+ � �&#$�%�!� 4#��!�% $�
(%�.�:�*�$�7(�� ����.�$� $�&. �&#�!�# �7(�#(&-. 2�#' ##1$���(!��>�(% 1
%#��$�"+ ?�� �$%�� � �+ � &��� �$&�#� � &. � &#�!�# �7(�#(&-. �� � � �+ � 4�., �
�$&�#� � &. � $�(� �7(�#(&-. ��%J!� ��!$!��!�$$�2�(!�� *:�7(� �+ �
' ##� 4#��!�%�"+ � ��� '5!�#�� � ' .�$+ �� �#�%�1$2� � � 4(� 2� � ' �$�#�#�
7(�(!��+ �7(��+ �4#��!�%�2� #������(!��+ ���(�.���$��&#-&#� ���!��*:�7(� �
$&'%#-!%# � $%�� ��%�#�!�%� �'� � �� %'%�#� $%�� >�(% 1%#��$�"+ ?�!�
(�$� G��'�$� #�:L$� !P:2� ' ##!� (!� !�� #� �G!# � � !��$� & #�
!�.�$$�(� 2� �7(�&#!�%�(!�!., #�!�% ���$�$�)�.���!�#.�"+ �� $�
%#��'� ���$�! $��&$7(�$����+ �G��' �@�BA�7(2�� #!�.!�%2� ' ##!�!�
��!�$��.�#���$��*�. #$�!P:���
��).�� ��� C1� �$%#(%(#�� � �'� $� )�.��#$� �.�*#$2� �.�' � � %�(# ' �3(�� $�� �
#$&'%�*�$�%#��$�"L$��-��'�$�&# (:� $�& #�R�E�1H�PH��' !�� ��:�"+ �
& #�.'%# $&#�O��
�
����������� �� ��� � � ��������������������
��������������������������
���������������������������
� � � � �
@H1RA1��
�!P:��
�+ �����
@H1RA1����+ �=�., �
�!P:��
�+ �����
@H1RA1����+ �=�., �
�!P:���-.�' ����� 1�R� 1R� 1�R� � �2�� �B�2�����28� K��2����82C�D(� $ 6�'-.�' ������� 1�R� 1R� 1R� �8�2�� ��C2�� ��28� �8C2�� �82C��$ 6�'-.�' ������ 1R� 1R� 1�R� �8�2�� ��C2�� ��28� �8C2�� �82C��#$ $ 6�'-.�' ������� 1R� 1�R� 1R� �8�2�� ��C2�� ��28� �8C2�� �82C�E�% '-.�' �E���� 1R� 1R� 1R� ��K2�� ���2�� ��28� �C�2�� �82C�
���&%�����#4#J�'���@�KA���
���#������ ��:�"+ � ��'� �)�.��#�.�*#�/�!� #� �7(���7(�%!�7(�
$#�4 #�'���� $��'� $�)�.��#$�' �3(�� $2�(!��*:�7(� $��'� $�)�.��#$�.�*#$�
�+ � 4 #!�!2�& #� 4#��!�%�"+ 2���,(!� �+ � '�#�'%#0$%�' � ��#(& � @��KA����
�%#� $��'� $�)�.��#$�' �3(�� $2����#����� � ��:�"+ ����&.�'�#�� $��'� $�
)�.��#$�%�(# ' �3(�� $� �!� $� * .�%�$�� /2� & #� � #!�2� $(&#� #�<��#���� �
� ��:�"+ ����&.�'�#�� $��'� $�)�.��#$��.�' ' �3(�� $�@�BA��
�������������������������������
������������� �
H��$� (!�� *:2� �� $&�#�"+ � '# !�% �#�4�'�� &#/*��� $!&�,�� &�&.�
4(��!�%�.� �$%� &# '$$ � � ���.�$2� (!�� *:� 7(� %#J$� $� �'� $� )�.��#$�
�,�# 6�.� $� Z� ����2� ����2� ���� Z� 7(#� $3�� ��� 4 #!�� .�*#2� 7(#� ���
�.�' ' �3(���2� (� ��� %�(# ' �3(���2� �&#$�%�!� !�$$�� ! .'(.�#� ��(�.� �
' !& #%�!1$� � !���#�� �J�%�'�� � � &# '$$ � � � ��:�"+ �� �$$�!� $� 2� ��
4�'�'������#$&'%�*��$&�#�"+ �$%��!(�% �&��%� $�%!& $��#%�"+ �
������.�$�& #�R�E��@�KA��
�$� �$-!# $� & $�'� ���$� $� �'� $� )�.��#$� .�*#$2� %��$� ' ! � � �'� �
7(� $ 6�'-.�' �������2�,�# 6�.� �!��α���α�2� ��'� �$ 6�'-.�' �����2�
,�# 6�.� �!������� ��'� �(#$ $ 6�'-.�' ������2�,�# 6�.� �!���
�β�2� �&#$�%�!� �&��$� (!� �+ � #$(.%��%� �� 4#��!�%�"+ 2� �+ � $$� 7(� /�
' !(!� � $�%#J$� ' !& $% $� @HZR��ZRA1� �� !P:� ����� �$$�!� $� 2� �� �$%��"+ �
$%$�%#J$� �$-!# $� 4�'��%�!)/!� &��%� � &# '$$ � '# !�% �#�4�' �� ��
!$! ��' �%'� ' !��$� 4 #!�$� ' �3(���$� $� #4#� $� �'� $�)�.��#$� @�BA2�
' ! �3��4 ��!�'� �� �� �&�#��#�4 ���%#� #��
�������������������������������
������������� �
�
2.3. APLICAÇÕES DA DETERMINAÇÃO DOS ÁCIDOS BILIARES EM
AMOSTRAS BIOLÓGICAS
� ! � *�! $� � $� & �% $� ��%#� #$� $%�� ��%# ("+ 2� �$� ' �'�%#�"L$�
$��'� $�)�.��#$���$�!��$�*�#���$��! $%#�$�)� .-��'�$�$+ 2�!�.�#���!��2�
%#!����$� &.�� '�&�'��� � 40�� �!� $� &# (:�#��6%#��#� �� '�#'(.�"+ �
�%# 1& #% 1,&�%�'���&.��'�&�'�����)$ #"+ ���%$%���.� $�!$! $��
��$$�!�$� 2���%#!���"+ ���'� $�)�.��#$�& �$#�G%�.�� ��0*.� �
����-$%�' 2� &# ��-$%�' � � 4 .. F1(&� � &�% . ���$� #.�'� ���$� ' !� � 40�� 2�
' !� ���%$%�� ��' !�����$%+ ��!%�) .�$! ��$�� #(#�$���
�6�$%�%�!)/!�(!��*#%�%�%#�&J(%�'�� $��'� $�)�.��#$2�(%�.�:�� 1$�
��'� �7(� $ 6�'-.�' �� ��'� �(#$ $ 6�'-.�' �� �%#�%�!�% ��'�.'(. $�
��*$0'(.��)�.��#�����' .$%�$�,&�%�'�2�#$&'%�*�!�%���$$�!�$� 2�#*$%1
$� � &�#%�'(.�#� �!& #%5�'��� �� %#!���"+ � $%$� �'� $� )�.��#$� &�#��
! ��% #�:�"+ ���%#�&J(%�'����$%�%(0��@�K2��K2��8A��
�������� *#%�%�%#�&J(%�'�2��.�(�$�$%( $� ���'�!�7(��� ���.�$� �
�'� $� )�.��#$� & � $#� �&.�'��� <� %'"+ � � #3�"L$� #*#$0*�$� (�
�##*#$0*�$� &-$1%#��$&.��%� ,&�%�' 2� )!� ' ! � ! ��% #�:�#� �� 4�'�J�'��� ��
%#�&J(%�'���!(� $(&#$$�*���&.�'����$%$�'�$ $�@��BA��
2.3.1. VALORES JÁ PUBLICADOS PARA VÁRIOS TIPOS DE AMOSTRA
BIOLÓGICA (HPLC)
��#�� 7(� $� #$(.%� $� )%� $� ��� ���.�$� � �'� $� )�.��#$� %�,�!�
�&.�'�"+ � � & $$�!� $#� )3'% � � ����-$%�' � ��%#&#%�%�* 2� /� �'$$�#� �
' �,'#�7(��$�$+ � $�*�. #$��#4#J�'����($(�.!�%�$���� $2��4 #!��
��' ##'%�2� & #� >� #!��$?�� !� ���*0( $� $�(�*�$2� &�#�� '���%�& �� �! $%#��
!� $%( 2� &�#�� '��� �#(& � %�#� � � !/% � (%�.�:� �� ��#�� $$� 4�% 2�
#' .,!1$� �! $%#�$� � ���*0( $� ' �$�#� $� >$�(�*�$?� � ' !&�#�!1$2�
� 4 #!�� $�$%!�%�'�2� ' !� �$� � ���*0( $� 7(� �&#$�%�!� %#!�����
&�% . �����
�!� $�(��2� $+ � ���'� $� $� *�. #$� )%� $� �� &�#%�#� � ���*0( $�
' �%# . �� #!��$2�&�#���.�(�$�%�& $���! $%#���
�������������������������������
������������� �
� � $ # � ���).�� ��� 8�� � ��� )0.�$� ���).�� ��� � �� �� !�� #��� $� �'� $�
)�.��#$� &#$�%$� $+ � ' �3(�� $2� � � &�$$ � 7(� ��$� �! $%#�$� � (#���� /�
4#7(�%� ��&�#'�!�% � ��'� ��.�' �,�# 6�1! � $(.4�%� $��!P:�K�C2B���
� �'� $� )�.��#$� %%#�,�# 6�.� $� �.�' ' �3(�� $� �!P:� �C 2��� �
%%#�,�# 6�.� $�%�(# ' �3(�� $��!P:�K� 2B���
���).�����8�Z�[�. #$��#4#J�'����!/��^���%#*�. ����'� $�)�.��#$�� �$ # �
�!�_! .PE�� )%� $���&�#%�#���! $%#��!����� ���*0( $�$�(�*�$�
��!) $� $�$6 $�& #�R�E�1H���
������6�����
�0������
�������������
�#������������
#���������7�����
��� 2 8�^� 2 81 2�8�� 2���^� 2 KC1 28��� 2 �8^��1 2���� 2�BB������ 2���^� 2 �C1�2�KC� 2C��^� 2���1�2���� 2 ��^� 2 ��1 2B� � �2�8������ 2�KB^� 2 ��1�2K8B� 2�8K^��1 28 8� 2 B�^��1 2���� 2��������� 2 ��^��1 2���� 2���^��1 2�8B� �^��1 2 ��� 2� ��E��� 2 ��^��1 2 ��� �^��1 2 B � �^��1 2 �� 2 ���� %�.��$�!/��$� 2��K� �2�C�� 2�BK� �2�8����Z��+ �%'%�*.�&. �!/% �(%�.�:� ����&%� ���#4#J�'���@�KA��
�
��$�4:$�$-�$��' �%#�!�!��#�.��'� $�)�.��#$����4 #!��.�*#2�(!��
*:�7(2�(#��%� �%#5�$�% ���%$%���.2� ' ##�(!��7(�$�' !&.%��$' �3(��"+ �
7(�#$(.%��� $��'� $�)�.��#$�.�*#$��!��.�'���� (�%�(#����@��8A��
���).�� ��� � � Z� � �'�%#�"L$� )�.��#$� � �'� $� )�.��#$� �R�E��2� %0&�'�$� �
�.�(!�$� $�%(�"L$� &�% .-��'�$2� ' !&�#��$� ' !� �$� )%��$� !�
* .(�%�#� $�� #!��$���
�������������� )�����������������������
)������������������������
8����������%������
9���������������
����� �2K�c� 2�� �28�c� 28� �2 �c� 2�� �2B�c� 2B���E�� 2��c� 2�� 2��c� 2�� 2K�c� 2�� 2K�c� 2��U���� �2��c� 2�� �2��c��2�� �2 �c� 28� 2��c� 2����� � 2B�c��2�� 82B�c��2K� ��2��c��2K� ��2 �c��2 ��UE�� �2��c� 2�� �2��c� 2�� �2��c� 2�� �28�c� 2C�U�� ��2��c��2�� ��2��c��2C� �82K�c��2K� � 28�c��2������� ��2��c��2�� � 2B�c��2�� � 2C�c��2 � ��2��c��2B����� B2��c� 2�� K2��c��2�� �28�c��2�� �2��c� 2��U���� ��2��c��2�� �K2K�c��2K� �B2��c��2�� �82��c��2��U��� �82��c��28� �K2K�c��2K� ��28�c��2�� 82��c��2B��E�� 2��c� 2�� 2��c� 2�� 2��c� 2�� 2��c� 2��UE�� 2B�c� 2�� 2��c� 2�� 2��c� 2�� 2��c� 2��� � � � �����% %�.� �2��c� 2K� B2��c��2B� �2 �c��2�� �2 �c� 2B���% %�.� ��2��c��2C� ��2 �c��2C� � 2B�c��2�� ��28�c��2K�����% %�.� ��28�c��28� �B2��c��2C� ��2 �c��2�� � 2K�c��2�����% %�.� �B2 �c��2�� � 28�c��2�� �B28�c��2�� ��2��c��28��E��% %�.� �2C�c� 2K� �2��c� 2K� �2��c� 2�� �2��c��2 �E�% %�.� 28�c� 2�� �2 �c� 2�� 2��c� 2�� 2��c� 2��
��%�#� ��#4#J�'���@��BA���$��'� $�)�.��#$�'(3��$��.��/�&#'��T��>�?�$+ �$(.4�%� $����& $�"+ ��α; �>�?�$+ �%�(# ' �3(�� $^��>U?�$+ ��.�' ' �3(�� $���$(.%� $�!�! .9� �% %�.��!/���c�## �&�#+ ���
�
�������������������������������
������������� �
2.3.2. TRANSPLANTES HEPÁTICOS
2.3.2.1. Situação portuguesa
�� %#��$&.��%� ,&�%�' � /� (!� &# '�!�% � '�#G#��' � 4'%(� �
&#$�%!�%2� ' !� �.�(!�� #�(.�#��2� !� !(�%�$� ��$%�%(�"L$� , $&�%�.�#$�
$&�.,��$�& #�% � �!(� ���
�� �' # � ' !� $� � $� �� �#����:�"+ � � #%(�($�� � �#��$&.��%$�
@���A� 6�$%!� !� � #%(��.� %#J$� '�%# $� � %#��$&.��%� ,&�%�' T� R $&�%�.� �
���% ���%-�� �������� #% �^�R $&�%��$������*#$����� �!)#���� �!)#��^�� �
R $&�%�.� �(##O� ��)#�.2� ���� �E�$) ���� �!� � K2� #�.�:�#�!1$� !� � #%(��.� �CK�
%#��$&.��%$�,&�%�' $T�B��� �� #% 2��8�!�� �!)#���C��!�E�$) ��@���A���!�
� B2� G.%�! � �� � &�#�� � 7(�.� 6�$%!� � $� �$& �0*�$2� #�.�:�#�!1$� !�
� #%(��.� ��K� %#��$&.��%$� ,&�%�' $T� ��� � � � #% 2� �8� !� � �!)#�� � � �� !�
E�$) ��@���A�����' # ������' !� �!$! �#.�%-#� 2� ��G!# ��%#��$&.��%$�
,&�%�' $�#�.�:� $�%J!�*�� ���'#$'#���(!�#�%! �' �$%��%2����'��� 1$�' !�
����!��88���%#!���� �!�� B�' !���K�%#��$&.��%$�4'%(� $�@���A����.�
#&#$�%�� (!� ��'#!�% � ��(�.� !/� � � B2�K9�� � � �%��% 2� �$� .�$%�$� �
$&#��&�#��$%�%�& ��'�#(#����' �%��(�!���6�$%�#2�' ! ��.��$�!�7(�$�% $�
$�&�0$$� �!(� ��
2.3.2.2. Em que circunstâncias é recomendado o transplante
hepático
��%#��$&.��%�,&�%�' � /� � &# '�!�% � #' !�� � $!&#�7(� $�
*#�4�7(� (!�� % %�.� �$4(�"+ � ,&�%�'�� ��1$%��� .�*#� �$�$�� @�B�A�� ��.�
$�%(�"+ � ' ##� �%#� (%# $� !� '�$ $� T� '�## $2� �"�� ,&�%�'�� ' !�
' .$%�$2� �%#$��� )�.��#� 6%#�1,&�%�'�2� �'# $� ,&�%�'�2� �"�� !%�)-.�'��
,&�%�'�2�'�#'�� !��,&�%�' �@��CA��
2.3.2.3. Importância da quantificação de ácidos biliares no
transplante hepático
= �� &().�'��� � � �� � � � @��8A�(!�� . ���� � !(�% � ' !&.%�� .�$%�� �
!�#'� #$2� $(�#� $� ' ! � �!& #%��%$� ��� �#�� $� %#��$&.��%$� ,&�%�' $��
�$%�� .�$%�� $%+ � ��'.(0 $� $� �'� $� )�.��#$� � $� %$%$� )� 7(0!�' $� !��$�
%#��'� ���$� ��!�� �'�.%#��$4#�$$� (� %#��$�!���$$2� γ1�.(%�!�.%#��$&&%��2�
4 $4�%�$��.'�.���2�)�.�##()���$2�%'���
�������������������������������
��������K���� �
� $�&�#��#�4 $�$�(��%$�4�.�#1$1��$$�'��.!�%���'� $�)�.��#$����
�#�� $�%#��$&.��%$�,&�%�' $2�!�$��+ �$#��$7('�����' !&�#�"+ �' !� $�
%$%$�)� 7(0!�' $�!��$�%#��'� ���$��
2.3.2.3.1. Avaliação de fígados de dadores durante a fase de colheita
do órgão
[�#� $��#%�� $�@��82��� 2����A�%J!�$(�#� ���7(�.��� �&#-&#� �-#�+ �
%#��$&.��%� � ' ! � (!� 4�'% #� �!& #%��%� �� %#� !� ' �%�� 7(�� � $� $3��
!�6�!�:�#��$�%�6�$��$ )#*�*J�'��� $� �%$�%#��$&.��%� $���
�*� �<�$'�$$:��-#�+ $��$& �0*�$2�' �%#�$%�� �' !�(!��'���*:�
!�� #��'$$���$%$�&�#��%#��$&.��%$2�#' ##1$�'���*:�!��$���-#�+ $�
'.�$$�4�'�*�$� ' ! � � 7(�.��� ��4#� #� @���2�� A�� �$%$� -#�+ $2� %�!)/!�
(4!�$%�'�!�%� � !��� $� ' !� �$� 6&#$$L$� ���.$�$� >$()1 &%�!�.?� (�
>!�#����.?� !� �.�(�$� $%( $2� �&#$�%�!� (!�� !�� #� ��'�J�'��� �
' !&.�'�"L$� &-$1%#��$&.��%� @���A�� �� '.�$$�4�'�"+ � /� 4�%�� *�$(�.!�%� &. �
'�#(#��+ �7(�4�:���' .,�%�2�%� �!��%�"+ � ��#�(��$%�% $���'(!(.�"+ �
�� #(#����4�)# $� �-#�+ 2�%#!�����!�4(�"+ ���$(��' #��%6%(#���
�$%�$%( $�@���A� $��(% #$�(%�.�:�#�!�(!��� *��%/'��'���' .,�%��
�)0.�$2�7(�3��%��,�!�$'#�% ���%#� #!�%�@�� A��7(�!���!�:������%##(&"+ �
�� '�#'(.�"+ � �%# 1& #% 1,&�%�'��� �$%�2� �� *$0'(.�� )�.��#� /� ' . '���
%!& #�#��!�%����$�%(�"+ ��$.�����$%��'�#'(.�"+ ����)0.�$�/�#' .,���
�%#�*/$��(!�%() �$%���#2�& #��'"+ ����#�*����
� ��#%�� �&().�'� �& #�H.�:�%��.��@���A�!�� �2� )$#* (1$�7(�
� 9� $� ���*0( $� 7(� #')#�!� 40�� $� '.�$$�4�'� $� ' ! � >$()1 &%�!�.?�
$�* .*!� &�$-� $� � �$4(�"+ � &-$1%#��$&.��%� ,&�%�' �� �. � ' �%#�#� 2�
�$$�!$! �$%( 2���,(!� $����*0( $�7(�#')(�(!�40�� �'.�$$�4�'� �
' ! �>� #!�.?��(!�40�� ��7(�.���$(&#� #�� $�>$()1 &%�!�.?��$�* .*(�
&�$-� $���$4(�"+ �&-$1%#��$&.��%�,&�%�' ��
��!�#.�"+ �<�%�6���$ )#*�*J�'��� $����*0( $� )3'% ��%#��$&.��%�
� �$%( ��H.�:�%��.��@���A2�$%��#���B�9�� $����*0( $�7(�%��,�!�
$�* .*� � &�$-� $� � �$4(�"+ � &-$1%#��$&.��%� ,&�%�' � � � 8B9� !�
���*0( $� ' !�(!�&-$1 &#�%-#� � $!� ' !&.�'�"L$�� $� ��!$$�� � B�9��
�C9�#$&'%�*�!�%2�� $�� �!$$���$$�!�$� 2�*#�4�'�1$�7(� �6'$$ ��
! #%�.��2� � � �#(& � 7(� !���4$% (� &�$-� $� � �$4(�"+ � &-$1%#��$&.��%�
,&�%�' 2� ' ##�$ )#%( �� $�&#�!�# $���!$$� �&-$1 &#�%-#� ��
�������������������������������
��������B���� �
��4 #!�����4#�#���7(�.��� �-#�+ �7(�*���$#�%#��$&.��%� 2������
��%$� �� ' .,�%�� $%2� & !2� ��.�(�$� '�$ $2� 6'(%�#1$� �.�(!�$�
! ��% #�:�"L$2�� �� #�@�� A���
� � 7(� �:� #$&�% � � � 4.(6 � � )0.�$� &# (:��2� /� !� �#�.� !(�% �
$!.,��%�&�#��-#�+ $�>� #!��$?��>$()1 &%�!�.?���$$�!2�$%�/�(!�&�#5!%# �
7(��+ �&#!�%����*�.��"+ ���7(�.��� �-#�+ �!�'�($��@���2��� A���
� ��%��% 2����%�6���&# ("+ �% %�.���'� $�)�.��#$������'%�*���
' .#/%�'�� �&�#�%� �&�#5!%# �7(� #.�'� ��� � 4.(6 � �)0.�$� &# (:��� ' !� ��
%�6���&# ("+ �% %�.� � �'� $�)�.��#$2�� � . �� � �%!& �2�3�� $� )$#*�!�
�4#�"�$�$%�%�$%�'�!�%�$����4�'�%�*�$��%#� $� �$�%�& $��-#�+ $���
�!�� #$�' !�-#�+ $�>$()1 &%�!�.?���!/�����%�6���&# ("+ �% %�.�
��'� $�)�.��#$�/�$(&#� #�<�!/�����%�6���&# ("+ �% %�.���'� $�)�.��#$�
!� � #$� ' !� 40�� $� '.�$$�4�'� $� ' ! � >� #!��$?� ��2KB� _! .P!��� � 2B��
_! .P!��2� #$&'%�*�!�%��� �$%�� �4#�"�� /� $%�%�$%�'�!�%� $����4�'�%�*��
�&] 2 ��2�H���1;,�%�O�:]�2 8����
�!� #.�"+ �<��'%�*��� ' .#/%�'�� �&�#�%2� �� $(��!/��� �&#$�%�1$�
#(:��� !� � #$� ' !� -#�+ $� >$()1 &%�!�.?� �C�2� � _EP_! .�� 7(�� �
' !&�#��� ' !� $� � #$� ' !� 40�� � >� #!�.?� �� 2K�� _EP_! .��� �$%��
�4#�"�� /2� !��$� (!�� *:2� $%�%�$%�'�!�%� $����4�'�%�*�� �&] 2 ��2� H���1
;,�%�O�:]�2����@���A��
� � 7(� �:� #$&�% � � � �.� � ' �'�%#�"L$� $� �#(& $� �.�*#$� Y�
�.�' ' �3(�� $�Y�%�(# ' �3(�� $����'� $�)�.��#$����)0.�$2�$%��&#$�%�1$�
$�!�.�#� �%#� (!� 40�� � >� #!�.?� � (!� 40�� � >$()1 &%�!�.?2� <� 6'&"+ � �$�
' �'�%#�"L$� % %��$� $� �'� $� '-.�' � ����� � 7(� $ 6�'-.�' � �������� �$�
&# & #"L$� $%$� �$� �'� $� �' �%#�!1$� ��*#%��$2� $� � � � '�$ � �(!�
40�� � >$()1 &%�!�.?� � �89������ ��9��������� � '�$ ��(!� 40�� �
' �$�#� �?� #!�.?���K9�������89�������@���A��
�$$�!�$� 2�(!��#�:+ ���P�����!�� #� �7(��� �� �'�$ � �%#�)�., �
�H.�:�%��.����#�:+ �4 ����2���� ���'���7(�$%�! $����&#$�"���(!�
40�� �>$()1 &%�!�.?2��7(��% �$�*#�4�'��(!�#�'� ���P�����!� #�7(����� �
%#�)�., ��H.�:�%��.�2� 4 ��� 2CC��� �'�$ ��(!�40�� �>� #!�.?���$%�$�
�4#�"�$� $+ � $%�%�$%�'�!�%� $����4�'�%�*�$� �&] 2 �82� %$%� V#($I�.1;�..�$2�
χ�]�2��2�&�#�����#�(��.�)#���@���A��
�$%���*�.��"+ � �-#�+ ���%#��$&.��%�#�$-�& #��*�#���$#��!&.!�%��2�
4(%(#�!�%2�$�4 #�& $$0*.�7(��%�4�'�#��(!��4 #!��#�&����!� $����, #�$��
�������������������������������
������������� �
�$�#�:L$���P�����#4#��$���'%(�.!�%�$%�$%( ��7(�.��� �-#�+ �/�
4�% �#%# $&'%�*�!�%2�$� � �#$(.%� �' �,'� �!(�% �& �$� �-#�+ �3��
$%�#��!&.��%� ���$$�!�$� 2�����4 #!�"+ �#.*��%�$-�/�' �,'���7(�� �3��
�+ �& �$#�($������'�$+ ��%#��$&.��%�#� (���(�#�#� & #�!., #�-#�+ ��
D(�� � �&#" ���&���#�& #�(!�## ����'�$+ �& �$#����'$$����(!�
4(%(# � #%#��$&.��%� 4�'�.!�%� $� ' �'.(�� $ )#� �� �'$$��� (#��%� �$�
%/'��'�$�7(�$+ �&# & $%�$��$%���$$#%�"+ 2�&�#��7(���'�$+ 2�!��!)��%�
�(#�J�'���!/�'�2�$3�� �!��$��'#%���& $$0*.���
��.�/2������!��$�*�%�.2�7(�� � �� #�$%��*�* ��*��� �#�(!��&�#%� �
$(�40�� T�*�.#����&���4�:#� �%#��$&.��%� (� �-#�+ ���%#��$&.��%�#�/��&� #�
7(�.���7(��7(.�7(�*��� $#� $()$%�%(0 �� � $�'#�40'� � /� *+ �� ' . '�� !�
#�$' � � � #d��$%� '�$ � ����� � & &(.�#� >D(!�*J�'�#�$� �+ �*J�' #�"L$?�
& � $#� #' �*#%� � &�#�� >D(!� *J� '�#�$� �+ � *J� 40�� $?�� �!� *�$%�� �
&�% . ���$�,&�%�'�$� $�.�'� $�$2� ' ! ����R� @� A2� $%����� � #' �*#%� � 4�:�
% � � $�%� �� �� '�$+ � $-� & � $#�% !��� �&-$�7(��%�4�'�"+ � #�&��� $�
�'� $�)�.��#$2�(!��*:�7(� � #'&% #� �-#�+ �$%�2� & #� *:$2� !� $�%(�"+ �
'#0%�'���*����
2.3.2.3.2. Detecção de episódios de disfunção do enxerto no período
pós-operatório
�&$�#���%#�&J(%�'���!(� $(&#$$ #����%�$�*���&.�'����$%$�'�$ $��
�% $� $�$%( $�&#/*� $��' !&�%�)�.����%#� �-#�+ ���$#�%#��$&.��%� �
� �#'&% #�$$�!$! �-#�+ 2�*#�4�'�!1$2�' !��.�(!��4#7(J�'��2�&�$-� $�
� �$4(�"+ � � �-#�+ �%#��$&.��%� � (� �6#% �� �. � !� $� �$�%#" $� $�
���*0( $�%#��$&.��%� $�!���4$%�!�(!�&�$-� � ��$4(�"+ �,&�%�'�� ��U=2�
�#�!�#O� U#�4%� ��$4(�'%� ��� @���2���2��KA�� �$%$� &�$-� $� & !� '.�$$�4�'�#1$�
����� !� �$� �#��$� $()�#(& $T� �+ 14(�'� ��!�% � &#�!�#� � ���=2� �#�!�#O�
� �1=(�'%� ��2� !� 7(� � -#�+ � �+ � #% !�� �$� $(�$� 4(�"L$� � #!��$� �&-$�
#*�$'(.�#�:�"+ 2� � 7(� 4.�:!�%� /� #�# 2� !�$� )#���� � #!�.!�%� � �
#%#��$&.��%���'(#% �&#�: ^�����$4(�"+ �&#' '� ��6#% 2���U�2���#.O�U#�4%�
��$4(�'%� ���7(�� #!�.!�%�/�#*#$0*.�&.��!�'�"+ �' !���%�1��4.�!�%-#� $�
$%#-�$�� ��.�(�$� '�$ $2� %�!)/!� #�# $2� �� �$4(�"+ � &#' '� & � $#�
#$�$%�%� � � ($ � � $%#-�$� 2� �%+ 2� #' ##1$� �� (!�� %#�&J(%�'��
�!(� $(&#$$�*�2�� !��!�%2���(!���%�' #& �! � '. ��.�' �%#�� �#'&% #�
�������������������������������
��������C���� �
���� �� &�#� '.(.�#� �$� '/.(.�$� �� ,(!���$� ��V���2� (� �� �. )(.���$� ��%�1
.��4 '�%�#��$���U��$%# �1#$�$%��%��@��BA���
� � '�$ � � $� $%�#� &#��%�(!�� $�%(�"+ � � �$4(�"+ �,&�%�'�� &-$1
&#�%-#��2�/�$$�'��.�(!����%#*�"+ �%#�&J(%�'��#�&�����7(��2�$%�� �
$%�� '�$+ � &��%� � (!� ����-$%�' � �%!&� � �. � � #�&� �� �
�4#�'�� ��\� $�)� �7(��� ���'"+ �& 2� �$%$� '�$ $2� '($%�#�� �&�'��%���
&#�� ��6#% 2�' !� �' �$7(�%�#�$' ��! #%2��$$ '�� �@���A��
� �7(��:�#$&�% �<��*�.��"+ ���4(�'� ��.��� ��6#% �� �� �
&-$1 &#�%-#� 2� � &#��'�&�.� !/% � � ����-$%�' � ' �'#% � � &�$-� $� �
�$4(�"+ 2�, 3�!���2�/���)� &$���,&�%�'�2�(!�!/% ���*�$�* �@���2����2����2�
��K2� ��C2� ��82� �� 2� ���2� ���A�7(� �+ � & � $#�(%�.�:� � &�#�� ! ��% #�:�"+ �
��#��� �� 4(�'� ��.��� � �6#% �� � � ��� �� ��� $%�� �*�.��"+ 2� $� %$%$�
)� 7(0!�' $��4(�"+ �,&�%�'��$+ � $�!��$�(%�.�:� $2�!) #������4 #!�"+ 2�7(�
4�'(.%�!2�$3��.�!�%����
�$�%$%$��4(�"+ �,&�%�'��&�#'!��+ �&#!�%�#��$%���(�#�(!�&�$-� �
� #3�"+ � ���=2� �#�!�#O� � �1=(�'%� ��� � (!� &�$-� � � ' .$%�$� �+ �
$&'04�'�� ��U�2� ��#.O� U#�4%� ��$4(�'%� ���� �$� %#!���"L$� � (%# $�
!�#'� #$� ,&�%�' $2� %��$� ' ! � �� )�.�##()���� % %�.2� �� �.)(!���2� �� 4 $4�%�$�
�.'�.���� ����2� �� ���� ��$&�#%�% � �!�� � %#��$4#�$�2� �� �E�� ��.������ �!�� �
%#��$4#�$�����e1U���e1�.(%�!�.%#��$4#�$���+ �$+ �$(4�'��%!�%�$�$0*�$2�
�!�$(4�'��%!�%�$&'04�' $�&�#��7(�$�& $$�!�(%�.�:�#����&#*�$+ �$%�$�
!���4$%�"L$� @�� 2� ���A�� ��� ��).�� ��� ��� $%+ � $'#�% $� $� ���'� #$� �
7(�.��� $%$� %$%$� )� 7(0!�' $� �:�!�%�' $2� ' !&�#� $� ' !� $� �'� $�
)�.��#$� ���*�(��$2� ��� %'"+ � � &�$-� $� � �$4(�"+ � ,&�%�'�� &-$1
%#��$&.��%��
�� &#�!�#�� !���4$%�"+ � 4�$� .-��'�� � 7(� � %#��$&.��%� � 40�� � 4 ��
)!�$('� 2� /� �� &# ("+ ��)0.�$� ' !��$&'% �� 4.(6 � $(�� ��#�$��D(�� �
$%�� �&#$�%�� (!� �$&'% � $' #� 2� ��(� � (� ' !� 4.(6 � #(:� 2� /�
���'�%�* ��7(�$�& �$%�#2���'(#% �&#�: 2�&#��%�(!�&�$-� ���$4(�"+ �
,&�%�'��@���A���
�!��*:�7(� $�&#�!�# $��'� $�)�.��#$���$#!�$��%%�:� $�$+ � ��'� �
'-.�' � � ��'� �7(� $ 6�'-.�' � �7(2�& $%#� #!�%2� $+ � ' �3(�� $� ' !�
�.�'���� (�%�(#���2� � � ��%#� #� �� '/.(.��,&�%�'�2� �� ! ��% #�:�"+ � $� *�. #$�
$%$� �'� $� � #$&'%�* $� ' �3(�� $2� & � $#� (%�.�:��� &�#�� �*�.��"+ � ��
#% !���4(�"+ � �-#�+ �%#��$&.��%� ���
�������������������������������
��������8���� �
�
���).�� ��� ��� Z� ��$�)�.��2� $&'�4�'��� � *�. #� &#�'%�* � �& $�%�* � �
���%�* �� ��7(��%�4�'�"+ � ���*�(�.� � �'� $�)�.��#$� ��� %'"+ � �
�$4(�"+ � ,&�%�'�� &-$1 &#�%-#��2� !� ' !&�#�"+ � ' !� (%# $� %$%$�
)� 7(0!�' $�# %���# $2�%� �& #�)�$�(!�' �3(�% ��� ��! $%#�$��C�
���*0( $��
#�����6�:������ ��������������+;,�
/����� ���������+;,�
9���5����������5������+;,�
9���5����������<�������+;,�
U��Y�U���� � � � � � � � ���P����� � � � � � � � �N�.�##()���� C�� ��� ��� K ��.)(!���� K � � K � ���� K � � K � ����� B�� � K�� ��E�� C�� � B�� �e�ZU�� C�� ��� ��� K �
�#�)�., �#�.�:� �& #��:#�%��.�@��BA���$�*�. #$�%�).� $�$+ �&# )�)�.��$�����4 #!���9�2�. � ��#��:�$���!�$� ���$��
�
�� %#!���"+ �� �'� $�)�.��#$�% %��$� $/#�' $� !� $#$�,(!�� $2� � �
5!)�% ����*�.��"+ ���4(�"+ �,&�%�'��� �&-$1 &#�%-#� ��(!�%#��$&.��%2�4 ��
$%(���& #�R###��%��.��!��8C8�@���A��H��$�%�#2�H(#�'��%��.��*�.��#�!�
$%� $%( 2� �&.�'�� 1 � %�!)/!� <� ! ��% #�:�"+ � �� #�'"+ � $� ���*0( $�
%#��$&.��%� $� ' !��$4(�"+ �,&�%�'��<�%#�&J(%�'�� $%#-��� ��%�1#3�"+ �
@��BA��� ��%��% 2���%#!���"+ ���'� $�)�.��#$�% %��$��+ �&#!�%�4'%(�#�
�� �$%��"+ � �%#� (!� &�$-� � � #3�"+ � ��(�� � -#�+ � ���=�2� � (!��
$�%(�"+ ���$4(�"+ �&#' '�,&�%�'����U���@��BA��
�� ���.�$� � �'� $�)�.��#$� ���*�(��$� &#!�%2� �+ � $-� �� �*�.��"+ � ��
'�&�'��� � $0�%$� � �'� $� )�.��#$� @��KA2� !�$� %�!)/!� �� �*�.��"+ � ��
4�'�J�'��� $�4�-!� $��%#��$& #%2�' �3(��"+ �' !��!�� �'� $2�$'#"+ �
'���.�'(.�#2�)!�' ! �����%�#�����'�#'(.�"+ ���%#�,&�%�'��@��BA��
��' �'�%#�"+ ���.�(�$��'� $�)�.��#$����*�(��$����#�:+ � (�$ !���
' �'�%#�"+ � � �.�(�$� .$� & !� $#� (%�.�:� $� ' ! � ��$%#(!�% $� �
����-$%�' ��4#�'��.���
� � '�$ � � $�(�!�% � � � � &-$1 &#�%-#� � � $�%#��$&.��%$� �
40�� 2� �� %#!���"+ � � �'� $� )�.��#$� ���*�(��$� $/#�' $� &#!�%� %'%�#�
&#' '!�%���$%���(�#�&�$-� $��#3�"+ ���(���&�$-� $���$4(�"+ �
,&�%�'�2�&. �!� $��C�, #�$���%$� $�!/% $�)� 7(0!�' $�' �*�'� ���$��
�&#$�%�!�(!��$�$�)�.����$&'�4�'����� 9����).���������@��BA���$�
!/% $� )� 7(0!�' $� #4#� $� �&#$�%�!� ' !� 4#7(J�'��� #$(.%� $�
�������������������������������
�������C ���� �
' �%#��%-#� $� � �+ � &#!�%!� �� �$%��"+ � �%#� &�$-� $� � #3�"+ � ��(��
���=��� &�$-� $� ��$4(�"+ �&-$�%#��$&.��%�,&�%�' � ��U��2�<�6'&"+ ���
4 $4�%�$��.'�.���������7(�!���4$%���.%#�"+ �������C,��&-$�$#�& $$0*.� �$(�
����-$%�' �& #����.�$�,�$% .-��'��@��BA2�!�$�$+ ���$&'04�' $��
�. � ' �%#�#� 2�(!�� ���.�$� ���*�(�.�:��� �� ' �'�%#�"+ � $� �'� $�
)�.��#$�$/#�' $�&#!�%2�' !�)�$%��%�$�(#��"�2����$%��"+ ��%#�&�$-� $��
#3�"+ � ��(�� � � �$4(�"+ � ,&�%�'�2� '#'�� � ��1�C,� ��%$� $� !/% $�
)� 7(0!�' $� ' �*�'� ���$2� & $$�)�.�%�� � �$$�!� � � !/�' � �'%(�#� !�
' �4 #!��� � �%!&��!�%� @��BA�� ��.�3��.�� �%!& � /� &�#%�'(.�#!�%�
�!& #%��%�& #� $� $�)#�7(� �%#�%�!�% � ' !�(!��G��'�� $�� $%#-�$�
& �* .*#2� !���,2� $� �'� $�)�.��#$� ���*�(��$�<� $(�� .��,���)�$�&#/1
�$4(�"+ �,&�%�'��@��BA��
�$� '�#(#��L$� #' �,'!� 7(� � � � � &-$1 &#�%-#� � (!�� �$�
&#��'�&��$� $�%(�"L$� � !#�J�'��� /� �� ' ##J�'��� �(!�� �$4(�"+ �,&�%�'���
� $� '�$ $� � �$4(�"+ � ,&�%�'�� &-$1%#��$&.��%� *#�4�'�1$� (!�� .*�"+ � �
*�. #� � $ !�%-#� � �$� ' �'�%#�"L$� � �'� � �.�' '-.�' � � � �'� �
�.�' 7(� $ 6�'-.�' � �U�� Y� U����� � �� #�:+ � �%#� �$� ' �'�%#�"L$� $�
�'� $�%�(# '-.�' ��%�(# 7(� $ 6�'-.�' ����P�����2�!�' !&�#�"+ �' !� $�
*�. #$� )%� $� !� ���*0( $� 7(� 4'%(�!� � %#��$&.��%� $!� 7(�.7(#�
' !&.�'�"+ �� �$%$� &�#5!%# $� �&#$�%�!1$� ! �4�'� $� &. � !� $� ��1�C�
, #�$� ��%$� �� %'"+ � �� #3�"+ 2� &. $� !/% $� )� 7(0!�' $� %#��'� ���$�
@��BA��
�!�� *:� %'%���(!�� �$4(�"+ �,&�%�'�� ' �*J!� $�)#� �7(�%�& �
$#��� ��#�� %'%�#� &#' '!�%� � �$%���(�#� �%#� (!� &�$-� � � #3�"+ �
��(�� &-$1 &#�%-#��� ���=�� � (!� &�$-� � � �$4(�"+ � ,&�%�'�� #*#$0*.�
��U��2� & !� (%�.�:�#1$� (%# $� ���'� #$� #.�%�* $� � $� �'� $� )�.��#$�
���*�(��$���
�:#� ��88��� %� �.� #& #%�!� 7(� � $� &�$-� $� � #3�"+ � ��(�2� �
$ !�%-#� ��$�' �'�%#�"L$� $��'� $��.�' $ 6�'-.�' ��$ 6�'-.�' ��U���Y�
���� $� �&#$�%�� .*� � �7(��% � 7(� $%� !$! � $ !�%-#� � $� !��%/!�
� #!�.� � � '�$ ��(!���$4(�"+ �,&�%�'�� #*#$0*.� @��BA��H��$�%�#� ��88B��
��$ ��%��.�@���A�#& #%�!�7(��+ �%'%�#�!�*�#��"+ ��$%�&�#5!%# ��U���
Y� ����� �!�� ���.�$� !��$� &# 4(��� $� �$� �#%�� $� #*.�� 7(� ��$ �� %� �.�
!�#�!��'� $�)�.��#$����*�(��$�!�$��&��$�(#��%� $�&#�!�# $�K���$���#�2�
/� $�)� � 7(� �$%� � � �� & .� '�#'(.��%� $%$� �$� �'� $� )�.��#$�
�������������������������������
�������C����� �
$'(��#� $�/�*�#%(�.!�%�$*�:����&. $�&# '�!�% $��#' .,�� $�-#�+ $�
%#��$&.��%� $� �($+ � ' !� $ .(% � ���*#$��� � ;�$' $���� � &.��
��%##(&"+ � �� '�#'(.�"+ � �%# 1& #% 1,&�%�'��� �$$� $*�:��!�% � �� & .�
'�#'(.��%2�7(�/�' �4�#!� �&. �&#-&#� ���$ ��@���A2�$-�$�&�#'�� �4�!��
�� ��$� ' !� � #% #� � �� '�#'(.�"+ � �%# 1& #% 1,&�%�'�� � �'� $�)�.��#$� ��
(!��$�%(�"+ ��7(�.0)#� � @��CA�' �4 #!�#& #%� �&. $�!$! $��(% #$�� �
�� ���%#� #���88K����!�' �%#�$%2��:#�%��.��#& #%�!������$��4 .. F1(&� $�
�'� $� )�.��#$� ���*�(��$� @��BA� � #4#!� $%� &�#5!%# � �U��Y���� ' ! �
$� �$����4�'�%�* ��&��$���&�#%�#���$�(���$!����&-$1%#��$&.��%��
��#�� �./!� �$$ 2� �:#� %� �.�� 4���#�!� 7(2� 7(�� � �� #�:+ � �%#� �$�
' �'�%#�"L$� $� �'� $� '-.�' � � 7(� $ 6�'-.�' � ���P����� �&#$�%�� (!�
*�. #� .*� 2� ���'��7(�$%�! $�&#��%�(!�� $�%(�"+ ���$4(�"+ �,&�%�'��
#*#$0*.���U����� �' �%#�#� 2�(!�*�. #�)��6 �$%��#�:+ ����'��7(� ����*0( �
$%���(!��$�%(�"+ ��#3�"+ ���(�� �-#�+ �%#��$&.��%� ����=��@��BA��
���% � � $ !�%-#� � U��Y��� ' ! � �� #�:+ � ��P���� �&#$�%�!1$�
$����4�'�%�*�!�%� �4#�%$� $� *�. #$� � .��,�� � )�$� ��1�C,� ��%$� $�
%$%$�)� 7(0!�' $�' �*�'� ���$�@��BA���
� ��%��% 2�&�#���#���$&��% �� $$ 2��$����$�6&#$$�$��$%��#%�� �
'�0#�!�� �$7('�!�% ���+ �,�2����.�%#�%(#�2�7(�.7(#�#4#J�'�����$%( ��
!��$� �%$�%#��$&.��%� $2�&�#���./!� $�C�'�$ $�7(�$+ �#& #%� $�@��BA2�
7(#� & #� &�#%� $� !$! $� �(% #$2� 7(#� � (%# $� 7(� %�,�!� $�(� � ��
!$!��.��,����+ �$�)! $�$����+ �' �%��(�"+ � �%#�)�., �$�*�� �$G)�% �
$�&�#'�!�% ���.�%#�%(#���#4 #!��d�! #%�d�� �$(��(% #�!��$�$/�� #����.�
�%�'O�2�!�$�$�)! $�7(��:#�&�$$����&().�'�#��(!�� (%#���#������'%�'����
N� 7(0!�'��2� )!� �$%��%�� $� �'� $� )�.��#$�� ��.� '�$(0$%�'�� �4��(#�1$1� $�
!�$�� �& )#�&�#��7(��$�' �'.($L$�*�.� $�$�.��6%#�0��&#!�%�!�(!�($ �
��#� � � $�$%!�%�' � $� �'� $�)�.��#$� $/#�' $� ���*�(��$2� !� %#�!�% � $�
%$%$��:�!�%�' $�!��$� # %���# $� ��!�� %#��$4#�$$� P%#��$�!���$$2� 4 $4�%�$�
�.'�.�����7(� $+ �)!�!� $��$&�� $ $� � � 4�'�.� 6'("+ �!� .�) #�%-#� $�
� ���.�$$� '.0��'�$�� �$� ���$�6&#$$�$� &. $� �(% #$� &�#'!� $#� *��%�3 $�$2�
!�$���&# *��$$��*��%��!�#7(#�$%( $�!��$��&# 4(�� $����.��"�!�% �
� !/% $� #�&� $� � 7(��%�4�'�"+ � � �'� $� )�.��#$� $/#�' $� ���*�(��$�
&# !%�(!�#% #� �<�#���.�$�4(%(#��$%$�!�#'� #$��
�$�*�. #$��0��'$� .��� $���' �'�%#�"L$���'� $�)�.��#$�& !2�
����2� $#�(%�.�:� $� &�#�� ��! ��% #�:�"+ ��� 4�'�'��� ��%#�&J(%�'�� @��8A2� � �
�������������������������������
�������C����� �
%#�%�!�% � �� �$4(�"+ � &-$1%#��$&.��%� ,&�%�' 2� (!�� *:� 7(� $� $3��
$!&#� $�)#� 7(�� � �� $�%(�"+ � ,&�%�'�2� 7(� �# (� � �.�#!2� #�#$$�� � �
� #!�.��H(#�'���' .�) #� #$�@��BA�� %�#�!���4�'�.���' !�7(��$�$�%(�"L$�
��$4(�"+ �,&�%�'�� #*#$0*.� ��U���& ��!� $#� ' �%# .��$�� �4'%�*�!�%2�
�&-$�(!��G��'���!���$%#�"+ ��$%#-�$2� �*�. #� $�!�#'� #$�.��� $�� $�
�'� $�)�.��#$����*�(��$�#�#$$�2�!���,2���*�. #$�' �$�#� $�� #!��$��
�$� ' �'.($L$� �&#$�%��$� & #� �:#� %� �.�� @��BA� ' �4�#!�!� � 7(�3��
%��,�� $� � & $%(.� � !� �8CC� & #� E�(%�$',.��#� %� �.�� @�K A�� ��(� � $$�
$%( 2� $� ���'� #$�)� 7(0!�' $�%#��'� ���$� �&��$� ���'��!� �� &#$�"�� �
�$4(�"+ � '#'�� � �1K� ��$� �&-$��� %'"+ � &.�� ���.�$�,�$% .-��'�� � $!� ��
'�&�'��� � �$%���(�#� �%#�(!�� �$4(�"+ � #*#$0*.� ��U��� �(!�� #3�"+ �
��(�����=����
� � 7(� �:� #$&�% � <� ���.�$� �$� �!�� %#��$4#�$$2� !) #�� $3�!�
(%�.�:��$� !(�%�$� *:$� ' ! � ���'� #� � 4(�"+ � ,&�%�'�� ��� &#�%�'�� '.0��'�2�
$%�$� #4.'%!� �� ��%�#��� �$� !!)#���$� $� ,&�%-'�% $� � �+ � %��% � ��
4(�'� ��.��� $� !$! $2� �� �(!�� #$& $%��!��$�%�#��� �&. � !� $� �C�
, #�$�@��BA�� �7(������.�$����*�(�.�:�����'� $�)�.��#$�@�K�2��K�A���./!�
�$$ 2���.*�"+ � $��0*�$��$��!�� %#��$4#�$$�� ���� �%#��$&.��%2�& �
*#1$�� �&#-&#� �&# '$$ ��' .,�%�2� (��#($+ � �-#�+ �@�K�A2�&.��
&#$�"�� � (!�� ��4'"+ � & #%(��$%�� @��BA2� (� <� '.($+ � � (!�� �#%/#���
,&�%�'��@���A��
[�#� $� !�#'� #$� �!(� .-��' $� @�K�2� �KK2� �KB2� �K�2� �KCA� 4 #�!�
$(�#� $� ' ! � !�#'� #$� � �$4(�"+ � ,&�%�'�� &-$1%#��$&.��%2� !�$� �%/�
�� #��$!��#��$�$('$$ $�@��BA��
�$$�!�$� 2������.�$����*�(�.���'� $�)�.��#$�&#!�%�(!��%'"+ �
��%'�&����$�%(�"L$��#3�"+ ���(�� (��$4(�"+ �,&�%�'��#*#$0*.�&-$1
%#��$&.��%2� &. � !� $� ��1�C� , #�$� ��%$� @��BA� �� )%��� &. $� !/% $�
�:�!�%�' $�' �*�'� ���$����#���./!��$$ �/�(!��%/'��'���+ 1��*�$�*�2�7(�� �
' !&�#���' !������.�$�,�$% .-��'���)� &$���,&�%�'��2�7(�&#!�%����$%��"+ �
�%#� $� �$�%�& $� � �$4(�"+ �3�� #4#� $� ���=� � �U��� � � $�(�!�% � � �
. �� � � %!& � � &# '$$ � %#�&J(%�' � @��8A2� ' !� #% #� � $� 0��'$� �
�'� $�)�.��#$���*�. #$�� #!��$��
�. � �'�!�� 6& $% � $� &#')� 7(� $� '�#(#��L$� #$& �$�*�$� & #�
%#��$&.��%$�,&�%�' $�&# '(#!2�'���*:�!��$2�!/% $�#�&� $�����.�$��
�'� $� )�.��#$� @��8A�� �$%� %�& � � $�%(�"L$� � !#�J�'��� !/�'�� (!��
�������������������������������
�������C����� �
#$& $%�� #�&��� & � 4�:#� % �� �� �4#�"�� #.�%�*�!�%� <� 4�'�'��� �
%#�%�!�% ���
��%#�)�., � $�* .*� � �$%�� �$$#%�"+ ��&# 6�!�1� $� '��� *:� !��$�
$�!/% $�#�&� $�7(�$#+ �'#%�!�%��&#'�� $�� ��& � �<�&#�%�'��'.0��' 1
'�#G#��'�� $�%#��$&.��%$�,&�%�' $�@��8A��
2.4. BIBLIOGRAFIA
�
���������������������������������������� ���
��U# I�;��Z�� .4�;���($���C�B1�8K8�����'.(0 �� ��# �#�!�� �QQ���%#��%� ��.�N�.�
�'�� H%���1N�.� �'�� N� . �O� ��� �,#�&(%�'� �'%� �$� �=�.I� �O!& $�(!� � �̀=>���
�().�'� �&.��=�.I�= (��%� ���[2�=#�)(#� 2��.!��,���� C���
�� ;���($� �� 1� � �$%�%(%� �� 4� $%# .$� ��� %,�#� ' ��'%� �� F�%,� %,#� $()$%��'$�
''(##���� ��� ��%(#�� � ).� E'%(#� �8�C2� ��'.(0�� !� � ).� E'%(#$2� �,!�$%#O�
�8��1�8��2��.$*�#��().�$,����� !&��O2��!$%#�!2���8BB���
�� N3 #I!� ��Z�H',���$!$� 4�)�.� �'��)� $O�%,$�$� ���!�!!�.���� .�*#�� �().�'� �!�
�%# .$����N�.��'�$2� �%� �& #�����.$$ ��R2��3 *�..� M2� &�#�� ���.$*�#� �'��'�
�()2��!$%#�!���8CK������
�� �,4#� �2� �,��� =;2� ��O�.� N2� R�($#� �2� ���%� U�� ��.�� U2� H $)�',� �R�� �� �K1
,O# 6O.�%� ��&�%,F�O� 4�', .�'��'�����)� $O�%,$�$����!������#�%��M��.������*$%��
>?T���8CB��C8�18 ��
K� E��($$ ��=2�V #!���HU2�R 4!����=�Z��O��!�'$� 4�%,��%# ,&�%�'� '�#'(.�%� �� 4�
)�.��'�$��� $%&#����.�$#(!�' �'�%#�%� �$� 4�' �3(��%$� 4�', .�'��'�����,�.%,2�
', .'O$%'% !�:�&�%��%$2����&�%��%$�F�%,�)�.��'��!�.�)$ #%� ����F����.���
M�� 4�H�'��� @�T���8����BC81B8��
B��!�#���;R2��!�..��H�1��,�&,O$�' ',!�'�.�)�$�$� 4�', .$%# .���..$% ��4 #!�%� ��
���!����M��.�����*$%��A?2�KT���8BC��� ��1K���
��* ����&&��2�E*O���1��,�#�'%#�:�%� �� 4�%,�)�.��'��%#��$& #%�$O$%!����� #!�.����
%#��$4 #!�,&�% 'O%$���, % �44���%O�.�).���� 4�%,�%�(# ', .�%�'�##�#�&# %����M�
N� .��,!���KC2��AT���8C���CC8B18 ���
C�H�#��M2��%�H�#1�)%��2�N�##%%��2�N O#�ME�1�H',���$!$� 4�%�(# ', .�%�%#��$& #%����
'���.�'(.�#� ��� )�$ .�%#�.� #�%� .�*#� &.�$!�� !!)#��� *$�'.$�� �*��'� 4 #� ���
.'%# ���'�'���.�'(.�#� #����'���� ��'�##�#��M�N� .��,!�� >@2��BT���8C���� B��1
����
�������������������������������
�������C����� �
���������������������������������������� ���������������������������������������� �����������������������������������
8�R���)(',�N2��%��#�N2�= �(%�H2�Ef))#%�R2�H�#��M�1�=(�'%� ��.�6&#$$� ��'. �����
��� ',�#�'%#�:�%� �� 4�%,�,&�% 'O%���YP)�.��'�� ' %#��$& #%�$O$%!���# '���%.�
�'���'���BB����T���88���� B�81����
� � ; ��� HR2� �.I#$� �2� �#� 'I� �E2� ��F$ �� ��� 1� �6&#$$� �� '. ����� ���
',�#�'%#�:�%� �� 4�%,�,�!$%#� �.�.� $ �(!1&��%�)�.� �'��%#��$& #%#�� M�N� .�
�,!�� =@2��T���88������ 1���
����!)�':�V�2��..�' # ��2�; (�)#��M2�*�����R(*.�=�M2�H $,���R2�=�)#�V��Z�
��%#�'..(.�#�%#��$& #%� 4�)�.��'�$����'.(0 �� �E�*# ���$(! $� �QQ���%#��%� ��.�
N�.� �'�� H%���1N�.� �'�� N� . �O� ��� �,#�&(%�'� �'%� �$� �=�.I� �O!& $�(!�
� �̀=>����().�'� �&.��=�.I�= (��%� ���[2�=#�)(#� 2��.!��,���� C������
�����#I$��M2�N.��',�#��U2�N.$ ��V2��,��#��U2�� �$.#��U2�V.�F#���2��%�!!.�MN2�
;�..$ ���H2�W�*�'I���H2�H #���2�E,!����MH�1�N�.��'�$T���%(#�.� .����$�4 #����
#&,����('.�#�#'&% #���'��'�� BA2�K��CT���888����BK1C��
���H�I�$,�!��H2��I�! % ��S2��&��MM2��(�R2�E�#���H2�E(I��2�R(..�H[2�E($%���V�2�
H���.$ #4��M2��,���N�1���%�4�'�%� �� 4����('.�#�#'&% #�4 #�)�.��'�$���'��'��
BA2�K��CT���888����B�1K��
���;���� R2� �,�� M2� R ..�$%#�V2� � F#$� E�2�= #!��� NH� 1� �� �� ($�)�.� �'�$� �#�
.����$�4 #�%,��('.�#�#'&% #�=Q�PN����H .��..��!2�KT���888��K��1K���
�K� N(#I�#2� ��2� * �� �'I�#$%��2� ��2� ��%$,2� V�� H�� Z� ��44#�%��%� 7(��%�4�'�%� �� 4�
,(!���)�.��'�$����$#(!�)O�,��,1 #!��'�.�7(��',# !�% �#�&,OZ%��!�!�$$�
$&'%# !%#O��M (#��.� 4��,# !�% �#�&,O�N��B =T��� K�����Z�K8��
�B� �.#4��� ;�2� U�..� �V� 1� N�.� �'�� �#��$& #%#$T� �%#('%(#2� =(�'%� �2� ��(.�%� �� ���
��%, &,O$� . ��'�.��!&.�'�%� �$���,�#!�'(%�'�.��$�#',2� A�� �T��� ����C �1����
��� ��% � R2� H�'',��#(. � �2� �, !�$� �2� U� �.. � �2� ��� H2� R 4!���� �=2� ��.���� �2�
�', �3��$� V2� �..�''��#�� �2� �(F#6� M� 1� � *.� & %�%� ��� $.'%�*� )�.� �'��
#�*�%�*$� �$� �U�K� �� ��$%$T� )� . ��'�.� $'#����2� $%#('%(#1�'%�*�%O� #.�%� �$,�&$2�
���! .'(.�#�! .����$%(�$��M�H��,!��>�2�BT��� C���C��1����
�C�U F���N2�M �$���2��#�'���2�;�%$ ��H�2�H'V���2�H #�EN2�U�.�#���2�;�.$ ��
MU2�EF�$�H�2�� %,�H�2�H�. �O���2�;�..$ ���H2�V.�F#����1���#�(.�% #O�'�$'��
4�%,��('.�#�#'&% #$�=Q�2��R�1�2����E�R1��#&#$$$�)�.��'��)� $O�%,$�$��H .�
�..��=2��T��� ��K��1�B��
�8� E�SV2� H #���� 1� E�*#� #'&% #�, ! . �1�2� ��� !#����� !%�) .�'� ! (.�% #��
=# �%�N� $'����!T��� C��K8K 1C�
� �H�%�I���2�H����#�N�2�R (%���H2�����' %%�M�2��#�!�����2��, !�$��2��*#!�#$�R2�
V(.�I� ;2� H%:�#� �2� �(F#6� M2� �', �3��$� V� 1� � !&# !�$� ��%$%���.� .�&��
�)$ #&%� �� ���!�'�F�%,��� .�*#1$&'�4�'� 4�'��'O� 4� .�*#� #'&% #�, ! . �����H .�
�..�N� .�� ?2���T��� ���C�� 18��
�������������������������������
�������CK���� �
���������������������������������������� ���������������������������������������� �����������������������������������
���=�O�#��2��', �3��$�V2�����' %%�M�2��(F#6�M�1�E�*#�#'&% #�, ! . ����' �%# .$�
%,�6&#$$� �� 4�'�#) 6O.�$%#�.�&�$��M�N� .��,!�� ?B2���T��� ����K��K1����
��� �', �3��$�V2�����' %%� M�2�R()O��2�N %#(�� ���2�=�O�#��2����S2��,�&!��� M2�
�(F#6� M� 1� E�*#� #'&% #� , ! . �� �� ' �%# .$� %,� 6&#$$� �� 4� %,� $'�*��#�
#'&% #�'.�$$�N�%O&�����HN���&��!2���T��� �����C�1���
��� �', �3��$� V2� �()(7( O� E2� H)�$� M2� =�O�#� �2� ;�.���� �2� R�)O� �2� U) $� V2�
�(F#6� M� 1� E�*#� #'&% #� , ! . �� �� ' �%#�)(%$� % � ��%$%���.� %(! #� 4 #!�%� ��
%,# (�,� 44'%$� �� '..� 'O'.� ��� ��4.�!!�%� ��� �# '� ��%.� �'�� �'�� ���� �C 2� BT�
�� K��� KC1B��
���� $%��2��()(7( O�E2�N�#� (����2�����' %%�M�2�H����#�N2�� %%��H2�� #�::���2���%�.�
H�2� H%:�#� �2� �$#(!�(6� �2� N#(��#� �2� �(F#6� M2� �', �3��$� V� 1� E�R1�1
!��%� �.(' ' #%�' �� $O�%,$�$� ��� �%# 'O%$� &# %'%$� �����$%� ��4.�!!�% #O�
) F.��$�$���# '���%.��'���'�������CA2���T��� ����� 8C1� ��
�K���(!��#%�#�U��1�H�'�.�%#�%!�%� 4�', .$%�%�'�.�*#��$�$$T�=# !�&�%, )� . �O�
% �&,�#!�' . ��'�.�%�#�%$��; #.�M�U�$%# �%# .�� 2��CT��� B�����K1K���
�B��(���*�%,���2�[ ..��R2�H�%�I���2���%�.�H�2�H$$�7��2��(F#6� M2�H(#&,O�N�2�
�', �3��$�V�1�E�*#�#'&% #�, ! . �����$�$$�%��.�4 #� *(.�%� ���U�$��*�� 2�
��T��� C���C��1B��
���H�#(O�!���2�H�O�! % �S2���I�!(#���2���!���S2��I���R2��(��O�!���2���I�!(#���2�
�%�����R2�����I��V� 1� ��%�4�'�%� �� 4�!!)#��1%O&� #'&% #� 4 #�)�.� �'�$� �H1
N�����N� ',!�N� &,O$��$�� !!(��� @B2�KT��� ������18��
�C�V�F�!�%��S2�=(3����2�R $ O��H2�R�#���H2�S $,���R2�H�F��H2�=(I($(!���2�R�)�%��
S2��% ,��2��,��%����S2�R��(!���2�=(3�$�F��S2�=(3�� �H�1���U�&# %��1' (&.�#'&% #�
#$& �$�*�% �)�.��'�$��M�N� .��,!� ?B2���T��� ���8��K1� �
�8�;�%���)�H2�R (%���H2�H�%�I���2��,#�$% 44 .%�H�2�V�!�N;2���% �R2�H$$�7��2�
R�#�O� M;2� �:�I�� �2�V �!�� �2� �', �3��$�V2�N���' � ��2� �(F#6� M� 1� N�.� �'�$�
��('� �#�O� 6&��%(#� )O� &# ! %���� ��%#�'..(.�#� %,O# �� , #! �� �'%�*�%� ���
��%(#��A!@2�� �KT��� B���C�18��
� ���=�)������2�H�%# ��2�U�.�#��=2���#($ ��2�U�..��U2��#$%����H��1�� #���%�' �%# .� 4�
', .$%# .�'�%�) .�$!�% �)�.��'�$���� 4��.(' � ��$�$�*������ *.�!',���$!� 4�
%#��$'#�&%� �� #�(.�%� �� .��I� % � %,� 4�$%1% 14� 'O'.�� M� N� .� �,!� ?B2� � T�
�� ����8���1����
����..�''��#���2���% �R2�U� �.. ��2�� $%��%�� �U2�H�'',��#(. ��2����,& (#�NH2�U� #���
U2� �', �3��$� V2� �(F#6� M� 1� � ��� !�'� �'%� �$� 4� )�.� �'�$�� �O�%,$�$� ���
&#.�!���#O�',�#�'%#�:�%� �� 4���1����B2��1�.IO.1$()$%�%(%�)�.��'��#�*�%�*$��$�
$.'%�*�! (.�% #$�4 #�%,�U1&# %���' (&.�#'&% #��U�K��M�H��,!�>C2��CT�
�� �����BK1C��
�������������������������������
�������CB���� �
���������������������������������������� ���������������������������������������� �����������������������������������
��� ��% � R2� H�'',��#(. � �2� �, !�$� �2� U� �.. � �2� ��� H2� R 4!���� �=2� ��.���� �2�
�', �3��$� V2� �..�''��#�� �2� �(F#6� M� 1� � *.� & %�%� ��� $.'%�*� )�.� �'��
#�*�%�*$� �$� �U�K� �� ��$%$T� )� . ��'�.� $'#����2� $%#('%(#1�'%�*�%O� #.�%� �$,�&$2�
���! .'(.�#�! .����$%(�$��M�H��,!�>�2�BT��� C���C��1����
���H�'',��#(. ��2�U� �.. ��2��, !�$��2�H�$$�# %%���2��(%���2�� $�%..�� �2� ��))�%���� �2�
�', �3��$�V2��(F#6�M2��..�''��#����1�H .'(.�#�=�.����.O$�$������1D(��%�%�%�*�
�%#('%(#1�'%�*�%O��.�%� �$,�&��%(O��H=����1D�������*�.�� *.�=�%(#$� 4�N�.�
�'���' ���%� ���%��U�K��M��,!���4�H .�AB2�8T��� C����8�1�C ���
��� �..�''��#���2�=� #(''�� �2���!�� ��� �2��.#�'�� �2�� $%��%�� �U2�H�. �O���2�H #..�� �2�
��#I$��M2�;�..$ ���H�1�B�.&,�1%,O.1',� 6O', .�'��'���B1������2���& %�%����
$.'%�*�=Q�� �� ��$%� � F�F�%,� ��%�', .$%�%�'� �'%�*�%O�� M� H� �,!�A>2� ��T�
�� ����KB81����
�K� �..�''��#�� �2� � $%��%�� � U2� ��!�� ��� �2� ���,& (#� NH2� ��%#��� �2� ;�..$ �� �H2�
=� #(''�� �2��.#�'�� �2�U� �.. ��� 1�N�.��'��#�*�%�*$� �$�.����$� 4�%,� 4�#�$ ��Q�
#'&% #���O�%,$�$2�*�.(�%� �2����$%#('%(#1�'%�*�%O�#.�%� �$,�&� 4���$#�$� 4�) O�
��� $�� ',����! �4�� ���. �($� 4� ',� 6O', .�'��'��� M�H��,!�A?2� �CT�
�� ����KK81B8��
�B� �..�''��#���2�U� �.. ��2�� $%��%�� �U2����,& (#�NH2���:: �U2�HO#��2���#I$��M2�
��%#��1U(��6� �2�=� #(''�� �� 1� N�'I� #� ! (.�%� �� 4�%,� 4�#�$ ��Q� #'&% #T�
$���2� $O�%,$�$2� ��� )� . ��'�.� *�.(�%� �� 4� �� $#�$� 4� $�� ',���� ! �4��
',� 6O', .�'��'��#�*�%�*$��M�H��,!�A@2���T��� B���� C1�K��
����, !�$��2��(F#6�M2��', �3��$�V�1�N�.��'�$����%,�!!)#���)�.��'��#'&% #�
�U�K11' ��'%�����(%#�%� �����!%�) .�$!���,O# ���B2��T��� C���B�1����
�C� �, !�$��2� �..�''��#���2��#(:��$I��H2��(F#6� M2� �', �3��$�V� 1���#�%����)�.1�'��
$����..����4 #�!%�) .�'��$�$$����%��*��#(����$' *�?2�CT��� C��B�C18���
�8� V�!� N� 1� �,O# �� , #! �� �$� �� %#!����%� 4� �#�O� 6&��%(#� ��� %,� )�$�.�
!%�) .�'�#�%���,O# ���B2��T��� C�����1���
� � M�!$� �=;�� ����� $�$� 4� � �1�.' , .�'� $%�% ,&�%�%�$�� �# '���$� 4� %,� =�.I�
�O!& $�(!� ���2� ��%� � & #� E($',�#� �2� M�!$� �=;2� � ���'O��#� R2� V.(#�
�'�!�'��().�$,#$2�N[���,��%,#.��$�� ���
��� �#�(�#�H2�=�'I#%��2�H ($%�4���2�=(',$)�',.#��2��.�(.��2�R�.�.)�$�'��2�V#�%IO��2�
��I� R� Z� � %�%��.� # .� 4� (#$ 6O', .�'� �'�� ��� �%$� $�1',���� ! �4��
#�*�%�*$� ��� %,� %#�%!�%� 4� � �1�.' , .�'� 4�%%O� .�*#� �$�$� ��� �$$ '��%�
�%,# $'.# $�$���# '���$� 4�%,�=�.I��O!& $�(!�� �̀BK��QQ���%#��%� ��.�N�.��'��
H%���1N�.��'��N� . �O�����,#�&(%�'��'%� �$�����%� �& #�V&&.#��2�N(#$��2�
�%�,.��2��#�(�#�H���().�'� �& #��&#���#2�� ##',%2��%,#.��$��� C���K��
�������������������������������
�������C����� �
���������������������������������������� ���������������������������������������� �����������������������������������
���R�.�.)�$�'��2�=�'I#%��2�=� # %% ��2�H�#$',�..�R�2�H ($%�4���2�=(',$)�',.#��2�U(!, .�
M2���.)#%��2�E����#��2�H��%#���2���I�R2��%#�::�) $' �H2��#�(�#�H�Z���1',����
! �4�'�%� �� �$� '#�%�'�.� %#!����%� 4� %,� %,#�&(%�'� &# &#%�$� 4� ��1
� #(#$ 6O', .�'� �'�� ��� H#���)')��� I� 'I (%� !�'�� �# '���$� 4� %,� =�.I�
�O!& $�(!� � �̀BK� �QQ� ��%#��%� ��.� N�.� �'�� H%���1N�.� �'�� N� . �O� ���
�,#�&(%�'� �'%� �$��� ��%� � & #� V&&.#� �2� N(#$� �2� �%�,.� �2� �#�(�#� H��
�().�'� �& #��&#���#2�� ##',%2��%,#.��$��� C���K��
��� H��%:� �2� ��I� U�2�;�!!#��2��($%� �2� ��*#��::�� �2�=#����($$� �2�;��#$��M2�
=(',$)�',.#��2�=�'I#%��2��#�(�#�H2�R 4!�����=2�N(#$���Z�� .� � $�1',����
�!��%� �� 4 #� %,� ��%�', .$%�%�'� �'%� �� 4� � #(#$ 6O', .�'� �'�� ��� #�%� .�*#��
�# '���$� 4�%,�=�.I��O!& $�(!�� �̀BK��QQ���%#��%� ��.�N�.��'��H%���1N�.�
�'��N� . �O�����,#�&(%�'��'%� �$��� ��%� �& #�V&&.#��2�N(#$��2��%�,.��2�
�#�(�#�H���().�'� �& #��&#���#2�� ##',%2��%,#.��$��� C���B��
����#�(�#�H2�=�'I#%��2�R�.�.)�$�'��2�H ($%�4����Z�E$$ �$�4# !�%,�% 6�'�)�.�' �'&%�
4 #� %,� &�%, ��$�$� ��� %#�%!�%� 4� ', .$%�%�'� .�*#� �$�$$�� ;��� H�
; ',�$',#���>B2��81� T��� C��K��1K�C��
�K�V#�%:#��2�N(',)�#�H2��4�4#��2�N'I#��H2��#�O�U2�H�O�:�I��H2�H�O�:�I�1��:����2�
�)�#� N2� �,���I� �U2� V��!� ��2� U�.�O�#� �2� ��%,I� �2� �,�!!#� R2� �� *�'� N2�
�#�(�#�H2�R 4.#�U2�V !&..���N2�=�(.#�U2� E*��H2� E*�I1=#��I��2�V $%�#�UH2�
V#�%IO� �� Z� �O�%,%�'� EQ�� �� ��$%� �%%�(�%$� &.�7(� 4 #!�%� �� ��� �& �1P1� !�'�
F�%, (%� ��('���� .�*#� $%�% $�$� ��� ,O&#%#��.O'#�!���� M�� E�&�� �$�#',2� >CT�
�� 8�����1��B��
�B�W ..�#�U2��#�(�#�H�Z��('.�#� #'&% #$� �$�%,#�&(%�'�%�#�%$���� ', .$%�%�'� .�*#�
�$�$$��N#�%�$,�M (#��.� 4��,�#!�' . �O2��>=T��� 8���1����
���W�!)#��2�U$&�',��� 1�N�.� �'�$����#�*�%�*$2�%,�#� �('.�#� #'&% #$�=Q�2��Q��
��� .����$T� # .� ���,�.%,�����$�$����%,�#�%,#�&(%�'�& %�%��.����%�'��'#�
���%$�H��,!�B2�KT��� C��K� 1B���
�C� � .���2��!�#�.� M�2��#��,��HH2��%#��M2�� #��($��H� 1�H (.�%� �� 4�,&�% 'O%�
�& &% $�$T� '# $$1%�.I� )%F�� )�.� �'�$� ��� �('.�#� $%# �� #'&% #$�� �(##� H�
�,!���!��K�T��� B��� �81K���
�8� � .�� �2� �#��,�� HH2� �%#� �M2� � #��($� �H� 1� U�!� ��� &.�O#$T� !�% ', �#��.�
�& &% $�$����%,�%,#�&(%�'�& %�%��.� 4�(#$ 6O', .�'��'����(##��$$($�H .�N� .�
@2��T��� ������1�C�
K � ��!�., � �H2� N ##�., � �H2� ��$%# � ��2� � .�� �2� �%#� �M2� � #��($� �H� 1�
��(# (#$ 6O', .�'��'��! (.�%$�&K�1!��%��& &% $�$�����.:,�!#g$��$�$�
!(%��%��(# ).�$% !��'..$��M��(# ',!�@B�K�T��� B���B� 1C��
�������������������������������
�������CC���� �
���������������������������������������� ���������������������������������������� �����������������������������������
K����!�., ��H2�[������M2�E F�;�2��%#��M2�� #��($��H�1�N�.��'�$�����& &% $�$�
! (.�%� �T����!#�����# .����6&#�!�%�.��.:,�!#g$��$�$���#�$�H .�H�
�A2��T��� C��K�1B���
K���N �%#��,%�MR2�H #�����U2�H'�.# O��2��,�..�&$�HM2�� �[�2��,����N2�R�F$��E2�N O�
��2� ���O� ��2� �%F�#%���2� H���#� ��2� �,�(,(#O��2� ���*�%%��[�2�� #��($� �H2�
�%#� �M2� ��'I#$ �� MH2� ��#(� H�� 1� � .� 4# !� ��'��%� &,�#!�' & ��� &#*�%$�
*�$� ��. $$��H .�[�$�� T��� B���� B1����
K��H�#.�H2�E# O���1��.���'�.2�'..(.�#2����! .'(.�#��$&'%$� 4�'��'#���*�$� ����,O$� .�
�*�B!2��T��� ������1�B��
K�� N#�$%��� R2� N#�$%��� �2� ��O�� �H2� �* #�I *�� V2� U�#F�.� R� 1� N�.� �'�$� �$�
'�#'�� ��$����,(!�����$%# ��%$%���.�'��'#$��H(%�%��$�>B@2��T��� K����1BK��
KK�V�!���2��!���2��, ��SR2�S �SR�1��O�%,%�'�)�.��'�$T�� *.�!��% #$� 4��& &% $�$��
M�N� ',!�H .�N� .�!>2��T��� ������1����
KB� V�!� ��2� �!� �2� S � SR2� �, �� SR� 1� H (.�%� �� 4� %,� '..� 'O'.� ��� ��('%� �� 4�
�& &% $�$����,(!���'��'#�'..$�)O�$O�%,%�'�)�.��'�$���(##����'#��#(����#�%$�=2�
CT��� B��BC�18��
K�� R 4!���2� ��� =�� Z� N�.� �'�$T� �,� � 2�%,� )�2� ��� %,� (�.O�� �F$� �,O$� . �O�
�'��'���AD���888����1�8��
KC�=. ',2� H�� R�� Z�N�.� $�.%$2� ��%$%���.� !�'# 4. #�� ��� �%# ,&�%�'� '�#'(.�%� ��� ���$%�
E�*#���$��!A2��T��� ����K�1�K���
K8� U%:� U�2���# �� ���Z� �(%#�%� ����� '�#� *�$'(.�#� �$�$�� �#%#� $'.#�� �,# !)��
[�$'��N� .�� ?T��� �����881K B�
B �U�..� ��R2�;�.%$,�#��2�� ���,(�V��Z���%�4O����',�.#���%�&�#%�'(.�#�#�$I� 4�. ��1
%#!���)%$�' !&.�'�%� �$�����%#����)%$�BT��� ���� 1C�
B�� �# $&'%�*� �%(�$� � .�) #�%� �2� EF���% �� �2� ;,�%. 'I� U2� �.�#I� �2� �,#.�I#� �2�
�!)#$ ��M2�R�.$O�M2�D�:�.)�$,��2��% ��2�� ..��$���Z�N. �', .$%# .����*�$'(.�#�
! #%�.�%O�)O���2�$62����). �&#$$(#T���!%�1���.O$�$� 4����*�(�.��%��4# !�B��
&# $&'%�*�$%(�$�F�%,�KK� �*�$'(.�#��%,$��E��'%�!?CT��� ����C�81�8�
B�� �%',..� V��� Z� ��$ ##$� 4� N�.� �'�� �O�%,$�$�� �().�'� � !� ���%#�'�
U�$%# �%$%���.� ��$�$T� ��%, &,O$� . �O2� ����� $�$� ��� H����!�%��[ .(!� �2�
&�#%� ��2� ��88B�� 88�1� ��2� N���� �'I#� ��'2� �,�.�.&,��2� � # �% �� ��%� � & #�
;�.I#�;�2��(#����2�R�!�.% ��M�2�;�.I#1�!�%,�M�2�;�%I��$�MN��
B��� ..�N;2�� �$O����M#2��..� %%�;R�Z�N�.��'�$���C��� �*#$� �� 4�K1', .$%��1�2�1� .�
% ��.. �)�.��'�$�)O�%,�#�%��M�E�&���$���AT���8�����CK18 �
�������������������������������
�������C8���� �
���������������������������������������� ���������������������������������������� �����������������������������������
B�� ���%�U�2���O�.�N2�N�%%���V2��,4#��2� M �����2�H'��$� E2� ��.��U�Z�N�.��#O�)�.�
�'�$2�)�.��.' , .$2����$%# .$� 4��..���% #�!�$$�$$�&��$�$��M��E�&���$�� �T���8C ��
�� 1��
BK�V�,�#��V2��I�! % ��2�R $,�%����Z���%�4�'�%� �� 4��F������������N�.��'�$����%,�
)�.� 4��..���% #�!�$$�$$�&��$�$��M�N� ',!��� IO ���C�T���8C�������1C��
BB�[.�,'*�'�W�2�ROI.! ���N2��%#�*�%:���2�R(!����H2�����I�;H�Z��,�#�(.�%� �� 4�
�44#�%�)�.� �'��)� $O�%,%�'�&�%,F�O$����%,�#�7(��%�%�%�*� ' �%#�)(%� ��% �)�.�
�'��$O�%,$�$���!�>N�.��'�$�����, .$%�$�$�Z�=�.I��O!& $�(!��CB?2��%� �& #�
��(!��#%�#�U2� �%�,.��2�U# I�;2�V&&.#��2� E(',�#�����().�'� �& #�V.(F#�
�'�!�'��().�$,#$2�� ##',%2�R .���2��8882���1�C��
B�� �)) %%���2��',.�#!�����2���%#�'I��R2���.��H2��..� %%�;R�Z�N�.� �'�$�� EQQ����R��,1
 #!��'� .�7(�� ',# !�% �#�&,�'� ���.O$�$� 4� )�.� �'�� ' �:O!� �� #�*�%�*$��
���.��N� ',!���A=T���8CK�����1���
BC�R 4!�����=�1��,�� �%��(�����!& #%��'� 4�N�.��'�$����E�*#������%$%���.���$�$��
�#',����%#���H���>@T���888���B��1KC��
B8�H�!$2���2�R#'(.$2����Z�D(��%�4�'�%� �� 4�)�.��'�$��#'%.O�4# !�&.�$!��)O�H�E��1
��=1H������.�N� ���.��,!��!?BD��� �������1���B��
� �W,(2�Q�2���',�4 #2�H��Z�� .O!#�'�!�%#��.$�' �%�������)�.��'�$���'' (�%$� 4��,!�'�.�
�$�#',��!>D��� ���K�81K�B��
����*��$��=2�;��#$%# !�R���,�� .. ��.�� !���T;,#��,O$�'$2��,!�$%#O2�N� . �O�
��� �',� . �O�H%��[�R� �().�$,#$2� �F�S #I2� �88��� ��'.(0 � !� �*��'$� ���
��%#4�'��.�����#����$#�$����N�1� T��1KB C�1K�K1B����&0%(. ��2�&�����$��1�K��
��� � ',�� MH�� 1� �&.�'�"L$� � ���%$� %�$� �'%�* $� !� )� %'� . ����� N .%�!� ��
� '���� #%(�($���N� %'� . ����=AT���888��K1����
��� �,��V���2� �� (�S2��$,�H2�V(,�#����Z���!&.����7(��%�%�%�*����.O$�$� 4�(#���#O�
%�(# 1� ��� �.O' �,O# 6O', .�'� �'�$� ��� ��4��%� F�%,� ', .$%�$�$� )O� .'%# $&#�O�
� ��:�%� ��!�$$�$&'%# !%#O��M���,# !�% �#�N����.O%��',� .�N� !�E�4��'���B>>T�
�� ���� �1C�
��� U�#%�#� �2� U $#� �2� �%�,.� �2� ��$',� �2� ; .I 44� �;� Z� �#��$& #%� 4�
',� $ 6O', .�'��'������%$��1�.&,������1�.&,��$(.4�%$�)O��$ .�%�($�#�%�
.�*#��R&�% . �O�� T���88 ����C1����
�K� R 4!���� �=� 1� �,� �%# ,&�%�'� '�#'(.�%� �� 4� )�.� �'�$� ��� !�!!�.$T� 4 #!� ���
4(�'%� �$��=# �%�N� $'����AT��� 8���KC�18C��
�B����.��' ::�2���2�H ::�2���=�2���$%%�2�N�2�N#%(''�2���2�N��#���2���2��.� 2���2��#)���2���2�
=#�'�2� U�� Z� D(��%�%�%�*� ���.O$�$� 4� )�.� �'�$� ��� ,(!��� &.�$!�� )O� .�7(��
',# !�% �#�&,O1.'%# $&#�O�%��!�!�$$� $&'%# !%#OT��� $�!&.� ��� #�&�� �1
$%&�!%, ���.����,!�E�)�H��A��+� ,D��� ����B��1�B����
�������������������������������
�������8 ���� �
���������������������������������������� ���������������������������������������� �����������������������������������
����'�.��2����Z�N�.��'��$&�#�%� ���M (#��.� 4��,# !�% �#�&,O�N��=?�D���88K���881�����
�C�N�%%�2���2���.�2�U��Z�U�$�',# !�% �#�&,O� 4�)�.��'�$��M (#��.� 4��,# !�% �#�&,O�N��
? !D���888���1�B��
�8� � �2� ��2� ���::�2� =�2� N�#�.���2� H�� Z� �&�#�%� �� %',��7($� 4 #� )�.� $�.%$� ���.O$�$��
M (#��.� 4��,# !�% �#�&,O�N��?�?D���88C���B�1��C��
C �� �..�2���2�U�%%�*'',��2���2�H�::..�2�U�2�� �2����Z�N�.��'��I��%�'$����!���$%(��
)O� #�� � %,��1.�O#� ',# !�% �#�&,O� ��� �$�% !%#O� ' (&.����� M (#��.� 4�
�,# !�% �#�&,O�N��?CCD���88���K81BB��
C�� H'U#�F2� ��2� �..�� #2�S�2� R()�2� M�� Z��4#�'� #���$� 4 #�% %�.� $#(!�)�.� �'�$� ���
��4��%$���.����,!��A T���88B���� ���
C�� ��# %,2���2� �3 *�..2� M�2� >�,�N�.��'�$?2�[ .���2� �.�(!��#$$2��F�S #I2� E � �2�
�8��2�&�����Z�BC����%� �& #�����#2���2�V#�%',*$IO2�����
C��R4%!���2����Z��,# !�% �#�&,O� 4��%# �$��M (#��.� 4��,# !�% �#�&,O�E�)#�#O��BT�
��8�B����1����
C���..� %%2�;�2�;�.$,2�E�N�2�H(�2�H�H�2��, #�2�H���2����4#�2���H��Z�N�.��'�$��QQ[�����
U�$� ',# !�% �#�&,O� 4� �F� )�.� �'�$� ��� %,�#� #�*�%�*$�� M�� �,# !�% �#�� AAD�
��8B8���K�1�B���
CK��%',..�V��2�E�F$ ���H2��������2��3h*�..�M�Z�U�#�.�!%, $�4 #�%,����.O$�$� 4�
!%�) .�'� &# 4�.$� 4�)�.� �'�$� ��� #.�%� ' !& (�$� ��� 4'$�� M�� E�&���$�� AD�
��8C���� CK1�� ��
CB��%',..2�V�����2�H�%$(�2����Z��#(!�)�.��'�����.O$�$���.�����,�!���'%���� ?D���8C���
�1����
C���%#%2�M�H�2��#�44 #2���M�R�2�H�I��2�R�E�M��Z��,�7(��%�%�%�*�$%�!�%� �� 4�)�.��'�$�
���%,�#�' �3(��%$����,(!���)� . ��'�.�4.(�$��M��E�&���$�� AD���8C����8�1K����
CC�N�%%�2��V� 1��()$%#�%1$&'�4�'�%O� 4� ', .O.�.O'���,O# .�$� 4 #�%,�,O# .�$�$� 4�)�.1
�'��' �3(��%$��=#�%� ���# '���$�A�����T���8C���K�K1K�K��
C8�N�%%�2��V� 1��()$%#�%1$&'�4�'�%O� 4� ', .O.�.O'���,O# .�$� 4 #�%,�,O# .�$�$� 4�)�.1
�'��' �3(��%$���.���'�.��$�#',�!C����T���8C�����8K��
8 �N�%%���V2���.��U2��,4#���1� �()$%#�%1$&'�4�'�%O� 4�', .O.�.O'���,O# .�$�4 #�%,�
,O# .�$�$� 4�)�.1�'�� ' �3(��%$�� M (#��.� 4�N� . ��'�.��,!�$%#O� >@� ����T� ��8C���
�K �K1�K �8��
8���.!/2�N�2�N#!!.���#2���2��3h*�..2�M�2��, !�$$�2����Z����.O$�$� 4�!%�) .�'�&# 4�.$�
4�)�.��'�$����(#���($������.�& &,�.�'���� ��6',���#����' !&(%#�:���$1.�7(��
',# !�% �#�&,O1!�$$�$&'%# !%#O��M��E�&���$���BD���8������81�B���
8�� H�I�%�2� H���2�;..$2�;�;�� Z�D(��%�%�%�*� ���.O$�$� 4� 4'�.�)�.� �'�$�)O� ��$1.�7(��
',# !�% �#�&,O�����.��N� ',!���,O$� .��>D���8B���K����
�������������������������������
�������8����� �
���������������������������������������� ���������������������������������������� �����������������������������������
8��V(I$�$2���2�U # �2�N����Z�D(��%�%�%�*���$1.�7(��',# !�% �#�&,O� 4�$.'%�)�.��'��
$%#$� ����1� 2�D=1�2� ���Q�1B � $�.�' ��& .O!#$������� M�� N� ',!���,O$� .��A�D��
��8B�����KK1��BB��
8�����)#�2���R�2��3h*�..2�M�2��3h*�..2�V�2��(#�#2������Z�H�$(#!�%� 4�,(!���$#(!�
)�.��'�$�)O���$1.�7(��',# !�% �#�&,O��M��E�&���$��=D���8BK����C�1�8���
8K�U#(�O2���H�2��,#�$�M#�2���R�2�H�%%���2������Z�D(��%�%�%�*��$ .�%� �������$1.�7(��
',# !�% �#�&,�'����.O$�$� 4�% %�.�4'�.�)�.��'�$��M��E�&���$��=D���8BK����8�1�� ��
8B��.!/2�N�2�N#!!.���#2���2��3h*�..2�M�2��, !�$$�2����Z����.O$�$� 4�!%�) .�'�&# 4�.$�
4�)�.��'�$����(#���($������.�& &,�.�'���� ��6',���#����' !&(%#�:���$1.�7(��
',# !�% �#�&,O1!�$$�$&'%# !%#O��M��E�&���$���BD���8������81�B���
8���%',..2�V�����2�; #%,���% �2�M��Z���#�&��!%, �4 #�%,�7(��%�%�%�*�6%#�'%� �� 4�
)�.� �'�$� ���%,�#� ' �3(��%$� 4# !� $#(!�($���� ' !!#'��..O� �*��.�).� #*#$1
&,�$� '%�'O.$�.���) �� $�.�'�� '�#%#��$���.�����,�!���'%���� >D� ��8C�����K1
�����
8C�R()��M�2��%',..�V�2�N *�V��Z���) #��## #$� 4�)�.��'��!%�) .�$!���!���E�*#�
��$�� ?T��� ����C�18��
88� �,�F� �2� �..� %%� ;R� Z� N�.� �'�$� �[�� �2�1��!%, 6O&# &��T� ��� $%#�4O���� ���%�
##�% ���: !%,���4 #�',� 6O', .�'��'���M�E�&���$���@T���8�C���C�1��
� � �%#%2� M�2� �%',..2� V������ Z� �,# !�% �#�&,�'� !%, $� 4 #� )�.� �'�� ���.O$�$�
@#*�FA��N� !���,# !�% �#�� D���8CC����81�����
� �����2���2��% ,2���2�R���F�#�2�V�2��,���2�=���2�U % 2�M�2���!)�#�2����Z���!%, �4 #�
%,� $�!(.%�� ($� ���.O$�$� 4� (�' �3(��%� ��� �.O'��1' �3(��%� )�.� �'�$� )O�
'�&�..�#O���$1.�7(��',# !�% �#�&,O��E�&�$�� AD���8C8��� K�1� KK��
� �� ���2���2� ��!�#(2���2��,���2�=���2�U % 2� M�2���!)�#�2���� Z��#&�#�%� �� 4� �.O'��1
' �3(��%�)�.��'�$����%,�#���$P.�7(��',# !�% �#�&,�'����.O$�$� ������.(!��(!1
'.��4.6�).�4($�$�.�'��'�&�..�#O�' .(!���N� !���,# !�% �#��=D���88����1C��
� �� ���2� ��2� ��!�#(2� ��2� �,���2� =���2� U % 2� M�2� ��!)�#�2� ��� Z� � %�%��.� )�.� �'��
!%�) .�%$�� Q[����� �O�%,$�$� 4� $%# �$ !#�'� �2B2���.4�1%#�,�# 6O1Ki1', .�� �'�
�'�$��M���,# !�% �#��>>BD���88���B�81BKC��
� �� ���2� ��2� ��:�F�2� ��2� ��!�#(2� ��2� U % 2� M�2� ��!)�#�2� ��� Z� U�$� ',# !�% �#�&,�'�
$&�#�%� �� 4�)�.��'���1�.(' $�$�����1�.('(# ��$�F�%, (%�&#� #�' �3(��%� ��
����$%���.$$1$%.�'�&�..�#O�' .(!���M���,# !�% �#�����=B@D���88K����1C���
� K� �:':&���I2� ����2� R�',O2� ��E�2�V.��2� ����� Z� �,�#�'%#�:�%� �� 4�)�.� �'�� !%,O.�
$%#� �'%�%� #�*�%�*$� ($���� ��$1.�7(�� ',# !�% �#�&,O2� .'%# �� �!&�'%2� ���
',!�'�.�� ��:�%� ��!�$$�$&'%# !%#O��M��E�&���$���?D���8�B�����1�����
�������������������������������
�������8����� �
���������������������������������������� ���������������������������������������� �����������������������������������
� B�V(#�O�!�2�V�2�N��2�S�2���I�$,�!�2���2�H(#�%�2���� Z���!(.%�� ($�%#!���%� �� 4�
)�.��#O� '�.� �'�$� ��� #�%T� .'%# �� �!&�'%� ��� �!! ���� ',!�'�.� � ��:�%� �� !�$$�
$&'%# !%#�'����.O$$� 4�)�.��'�$���%# �$��!AD���8�8�����1��C��
� �� H�O�:�I�2� R�2� �$,�)�$,�2� H�2� S�!�$,�%�2� V�� Z� �$� 4� �� �F� $�.O.�%���� ���%� 4 #�
$&�#�%� �� 4�)�.��'�$����', .$%# .�)O�$.'%�� ��! ��% #����F�%,�%,�' !&(%#�
' �%# ..���%�$�%O�!�%',����%',��7(��N� !��H�$$��&'%# !��>D���8�C���B81��B��
� C� =(I(����2� ��2� R�%%�2� S�2� �$,�)�$,�2� H�2� S�!�$,�%�2�V�� Z� U�$� ',# !�% �#�&,O� 4�
�!%,O.�.IO.$�.O.� %,#�#�*�%�*$� 4�)�.��'��!%,O.�$%#$�� M���,# !�% �#���@CD�
��8C ����81��K��
� 8���#$$ �2���R�U�2��3h*�..2�M��Z��#&�#�%� �� 4�� .1%#%�1)(%O.�!%,O.$�.O.����!�6�
%#%�1)(%O.�!%,O.$�.O.1%#�!%,O.$�.O.� %,#$� 4 #� ��$� ',# !�% �#�&,O1!�$$�
$&'%# !%#O� 4�$%# �$����)�.��'�$��M���,# !�% �#�� B@D���8C����8K1� B��
�� � �(:(I�2� H�2� H(#��2� ��2� S $,�!(#�2� ��2� V�!(#�2� ��2� V(# $�F�2� ��2� �, !�2� H�� Z�
�%#!���%� �� 4� �1 6 1 �1� ��� �1 6 1 �2B1)�.� �'�$� ��� #.�%� ' !& (�$� ���
)� . ��'�.� 4.(�$� 4� ��4��%$� F�%,� ', .$%�$�$� )O� ��$� ',# !�% �#�&,O1!�$$�
$&'%# !%#O��M���,# !�% �#��N��=@!D���88�����1����
����Q�2�E�D�2�H�#I�$2�V���2�E2�H��Z�N� !�'�.��&&.�'�%� �$� 4����.O%�'�.�$(&#'#�%�'�.�
4.(��$&�#�%� ��%',��7($�����.��N� ',!�� CCD���88����1�8��
���� N�#%.2� V���2� >�(&#'#�%�'�.� =.(�� �,# !�% �#�&,O?2� � O�.� � '�%O� 4� �,!�$%#O2�
E � �2��8CC2���&0%(. ������%� �& #��!�%,2���H����
���� �'�.��2� ��2� U�!$2� ����� Z� ���.O$�$� 4� ' �3(��%� )�.� �'�$� )O� &�'I1' .(!��
$(&#'#�%�'�.�4.(��',# !�% �#�&,O��M���,# !�% �#��>?AD���88����8�1� ���
���� �,���� RS2� V( � �R2� �(�� �;�� 1� �%#!���%� �� 4� (#$ 6O', .�'� �'�� ���
&,�#!�'(%�'�.�&#&�#�%� �$�)O�'�&�..�#O�.'%# &, #$�$�F�%,����#'%��[�%'%� ���M�
�,�#!�N� !����.��! ��1K�T��� ���8�81KB�
��K�R(�W2�R�E�2�W,����M2�E( �U��1��%#!���%� �� 4�%,#�)�.��'�$�����#%�4�'��.���.'(.($�
N *�$� ��� �%$� !�'���.� &#&�#�%� �$� )O� !�'..�#� .'%# I��%�'� '�&�..�#O�
.'%# &, #$�$�� M��,# !�% �#�N����.O%��',� .�N� !�E�4��'���B!?��1��T� �� B��
��1���
��B� �. %,�#� MU� M#2� ��.O� EH2� � !..���� ��� 1� �44'%$� 4� )�.� $�.%� $%#('%(#� �� ',�#�.�
$&�#�%� �$� F�%,� !�6� !�'..$� 4� )�.� $�.%$� ��� & .O 6O%,O.�� %,#$� ($����
!�'..�#� .'%# I��%�'� '�&�..�#O� ',# !�% �#�&,O�� M� �,# !�% �#� N� N� !� �&&.��
=B!���T���88B����1�K��
������$%�j �U2�E('���� .���2�� I �����2�H$7(���H2�E!)#���2�����'�.��H2�=#��',���2�
��#(''���2��#�& ��[��1�N�.��'��&# 4�.$�)O�'�&�..�#O�.'%# &, #$�$� �����%#�,&�%�'�
', .$%�$�$� 4�&#����'O���.����'���E ������C���T��� B���K81BK��
�������������������������������
�������8����� �
���������������������������������������� ���������������������������������������� �����������������������������������
��C��#�& ��[�2�E('���� .����2��'� $'����E2���#(''������1���!(.%�� ($�%#!���%� �� 4�
4#� ��� ' �3(��%� )�.� �'�$� ��� $#(!� )O� 'O'. 6%#��1! �4�� !�'..�#�
.'%# I��%�'� ',# !�% �#�&,O�� M� �,# !�% �#� N� ���.O%� �',� .� N� !� E�4� �'���
?B>���T��� ������1KK��
��8��� &I2�M�2�V(.!��$ *<2���2�M.��I2���2��, ��.2�M�2�V.�� %2�M�2�V.�� % *<2����Z��$� 4�
'O'. 6%#��$� ��� �$ %�', &, #$�$��[��� �O'. 6%#��$� �$� .����� .'%# .O%� ��%�*$�
4 #�%,�$&�#�%� �� 4�)�.��'�$��M���,# !�% �#��A>CD���8CC�����1��8��
�� �D(��.��2� H�U�2�=�#���2� ��2� N $$k2� ��2� �..a�7(�.�2� ��2� � . 2� ��� Z� �,� ���#'%��[�
%'%� �����%,����.O$�$� 4�(#$ 6O', .�'��'�����#.�%�' !& (�$�)O�R�����M��
�,�#!��N� !�����.���=D���88����C�1�CK��
����S�#�)�RR2��,�!$����2�;�#�#��H�1���&�..�#O�: ��.'%# &, #$�$� 4�)�.��'�$�F�%,�
���#'%�&, % !%#�'�%'%� ������.��,!��?C���T���88C������1C��
�����'�.�����1�N�.��'��$&�#�%� ���M��,# !�% �#�N�N� !��&&.��=?���1��T���88K���881
�����
����E�NE2��F��E2��������1�� !&�#�%�*����.O$�$� 4�' �3(��%�)�.��'�$����,(!���
$#(!�($����,��,1 #!��'�.�7(��',# !�% �#�&,O����'�&�..�#O�.'%# &, #$�$��M�
�,# !�% �#�N�N� !��'���&&.��?CA��1��T���88����K1����
���� � �� �2� ���::�� =2� N�#�.���� H� 1� �&�#�%� �� %',��7($� 4 #� )�.� $�.%$� ���.O$�$�� M�
�,# !�% �#�N�N� !��'���&&.��?�?��1��T���88C���B�1�C��
��K�� �2���2�R 4!���2���=�2�HO$.$2�V�M��Z��,���4.(�'� 4�)�.�$�.%�$%#('%(#� ��$.41
�$$ '��%� ������7( ($�$ .(%� �$��M��N� .���,!�� >BD���8C���B�B�1B�� ��
��B�V� 62�M�R�2�U#��%2���R��Z�H����%(#�:�%� �����&#$$(#����.'%# � $! %�'�..O�#�*��
.�7(�� ',# !�% �#�&,OT� $ !� %, #%�'�.� ' �$�#�%� �$�� �,# !�% �#�&,���� AD�
��8C�����K1�����
���� D(� �R2� V �$� �2� N�I#� �U2� � * %�O� H[� 1� ���.O$�$� 4� )�.� �'�$� ��� %,�#�
' �3(��%$� )O� '�&�..�#O� .'%# ',# !�% �#�&,OP.'%# $&#�O� � �� %#�&� !�$$�
$&'%# !%#O�����.��,!��? ����T��� ���� �1� ��
��C� �%',..� V��2� [$%�.� �R� Z� �,#! $&#�O� � ��$�%� �� .�7(�� ',# !�% �#�&,O1!�$$�
$&'%# !%#OT����F����,��,.O�$&'�4�'�%',��7(� 4 #�%,����.O$�$� 4�)�.��'�$�� M��
E�&���$��!CD���8C8����K81��B8��
��8�� )�.�$2�H�2�� (#2�H�2�V(�l2�M�2�V &'Im2�M�2�V*n%���2�M�2��* ) �2�W�2��.�I *�2�V�2�
[ #%.2� M�Z� R��,1 #!��'� .�7(�� ',# !�% �#�&,�'� %#!���%� �� 4�
(#$ 6O', .�'� �'�� �4%#� $ .�� &,�$� 6%#�'%� �� 4� ). � $#(!� ��� %'%� �1
#��%� #�*�%�:�%� ��� M (#��.� 4� �,�#!�'(%�'�.� ��� N� !�'�.� ���.O$�$�� AD�
�� ���8��18�B��
�������������������������������
�������8����� �
���������������������������������������� ���������������������������������������� �����������������������������������
�� � U�%%�2� ��2� � �2� ��2� �##2� ��2� N ��::�2� ��2� ��*#���2� [�� Z� R�E�Z4.( #$'�'�
%#!���%� �� 4� ���*�(�.� 4#� ��� ' �3(��%� )�.� �'�$� ��� ,(!��� $#(!��
N� !�'�.��,# !�% �#�&,O����D���88�����1�K��
���� � �2� ��2� U� �'',���2� ��H�2� �##o2� ��2� N�#�.���2� H�� Z� R��,1 #!��'� .�7(��
',# !�% �#�&,�'1.'%# $&#�O�!�$$�$&'%# !%#�'����.O$�$� 4�)�.��'�$����)� . ��'�.�
4.(�$��M���,# !�% �#��N��==>D���88K���C�1�8���
����R�#�� 2�S�2�H�O�:�I�2�R�2�R���$,��%2���2���I�O�!�2�=��Z����.O$�$� 4��1$(.4�%����
� �$(.4�%� )�.� �'�$� )O� �1$%&� $ .* .O$�$� ��� ,��,�  #!��'� .�7(��
',# !�% �#�&,O��M��E�&���$�� BD���8C����K��1�K�8��
����N#�%$2���2�� #��($2���H���2�*��1W..#2�R�2�N#�% 2���2���.*�2����Z��.*��'� 4�$#(!�
)�.��'��&# 4�.����%,����� $�$� 4� ��%#�,&�%�'�', .$%�$�$� 4�&#����'O�������,��,�
��'��'��#�T�� #%(��.���(#��M���)$%%��UO�' .���&# ��N� .��BCD���88C����1�C��
�����%!��2���2�� )#%$ �2�U�2�� (.%#2���2�E�.2����Z�=14 #F�#�#�(.�%� �� 4�)�.�
�'��% 6�4�'�%� ��)O��S������M��N� . ����,!�� ?@�����T��� �������B1�������
��K� �$$�#2� ��2���#��'I2� E�2�W,(2�W��Z�R��,1 #!��'� .�7(�� ',# !�% �#�&,�'�!�$$�
$&'%# !%#�'�!%, � 4 #�%,�%#!���%� �� 4�(#$ 6O', .�'��'����� �%$��.O'���
��� %�(#��� ' �3(��%$� ��� ,(!��� &.�$!��� M (#��.� 4� �,# !�% �#�&,O� N�� ?@BD�
�� ����8K1� ���
��B��:#2���2�H'��(�,��2�U�2��%�'O2����Z����.O�%#!���%� �� 4� ���*�(�.�$#(!�)�.�
�'�$� �.. F$� �#.O� %'%� �� 4� ,&�%�'� �.. �#�4%� O$4(�'%� ��� R&�% . �O�� C�B�T�
��88�����KC1��B���
�������.��' ::�2���2�H ::�2���=�2���$%%�2�N�2�N#%(''�2���2�N��#���2���2��.� 2���2��#)���2�
��2� =#�'�2� U�� Z� D(��%�%�%�*� ���.O$�$� 4� )�.� �'�$� ��� ,(!��� &.�$!�� )O� .�7(��
',# !�% �#�&,O1.'%# $&#�O�%��!�!�$$� $&'%# !%#OT��� $�!&.� ��� #�&�� �1
$%&�!%, ���.����,!�E�)�H��A������T��� ����B��1�B����
��C�S�� 2�H���2�U �:�.:2�[�2��##�� 2���2���.&��2���2�H�#%0�:2�H���2�H�#%0�:1[�'% #��2�
��2�H�j�$2�H��Z��44'%� 4�%,�%O&� 4��%�#O�4�%� ��)�.��#O�.�&��' !& $�%� �����)�.�
.�%, ���'�%O����,(!��$�F�%,�', .$%# .���..$% ���$�$���(%#�%� ��� �D��� K����81
�����
��8��#F��:2���2��(',F)#2�N�2�H����(.%2���2�U�.�%2���2�S ($42���H��Z��%#!���%� �� 4�
)�.� �'�$� ��� )� . ��'�.� 4.(�$� )O� .�7(�� ',# !�% �#�&,O1.'%# $&#�O� %��!� !�$$�
$&'%# !%#O��M��E�&���$��A D��� ������1��8��
�� �� $$�2� ����2�� �*#$2� M�E�2�R 4!���2���=��Z�R��,�&#$$(#�.�7(�� ',# !�% �#�&,�'�
���.O$�$� 4�' �3(��%�)�.��'�$����,(!���)�.T�$�!(.%�� ($�#$ .(%� �� 4�$(.4�%�
���(�$(.4�%�.�%, ', .O.��!��%$����%,�' !! ��' �3(��%�)�.��'�$��M��E�&��
�$�� BD���8C���KC81K8K��
�������������������������������
�������8K���� �
���������������������������������������� ���������������������������������������� �����������������������������������
���� [ �I2� ��M�2� V�&I�$2� ��H�=�2� R�*����2� ��2� V(�&#$2� =�2� N�3.*.2� ��H���� Z�
��%# ,&�%�'�'�#'(.�%� �����!������$�!&.�!%, �4 #�%#!���%� �� 4�( ��.�)�.�
�'�$��M��E�&���$�� ?D���8CB��8 �18 ���
����U %.O2�����2�H #���2�����2�� �H�M��Z��F�%',��7(�4 #����.O$����' �3(��%�
)�.��'�$������$%#�'�3(�'��M���.������%, .��A!D���88 ��8��18�C��
����N.�'I.O2�����2�[$%�.2�H�E��Z��,#! $&#�O���%#4�'�4 #�.�7(��',# !�% �#�&,OP!�$$�
$&'%# !%#O�����.���,!��>>D���8C����K 1�K���
����[$%�.2�H�E��Z�R��,� #!��'�.�7(��',# !�% �#�&,O1!�$$�$&'%# !%#O���'��'��
=D���8C�����K1�C���
��K���%#�'I��R2��..� %%�;R�Z�N�.��'�$��EQQ[������.O$$� 4�)�.��'�$����$%# .$�)O�,��,1
 #!��'� .�7(�� ',# !�% �#�&,O�F�%,���!�'# ) #� ' .(!��� M��,# !�% �#��!A?T�
��8CK���KK1B��
��B�� �2���2��##o2���2���! ��2���2�� .�!��2���2�[�''�#�2���2���$%�.. 2����Z��%#!���%� ��
4� 4#� ��� �!��%� )�.� �'�$� )O� ,��,1 #!��'� .�7(�� ',# !�% �#�&,O�F�%,�
*�& #�%�*�.��,%1$'�%%#����!�$$�%'%� ���M��E�&���$��!!D���88�����8�1�� ���
���� ��*#���2� [�2� U�%%�2� ��2� � �2� ��2� �##o2� ��2� � *#$�2� ��� Z� R�E�14.( #$'�'�
%#!���%� �� 4�)�.� �'�$� ���&,�#!�'(%�'�.$� ���)�.� �4%#�#�*�%�:�%� ��F�%,��1
)# ! �'%O.1B1!%, 6O��&,%,�.���M���,�#!��N� !�����.����D���88����B�1�� ��
��C�E2�N�E�2��F2���E��Z�� !&�#�%�*����.O$�$� 4�' �3(��%�)�.��'�$����,(!���$#(!�
($���� ,��,1 #!��'� .�7(�� ',# !�% �#�&,O� ��� '�&�..�#O� .'%# &, #$�$�� M��
�,# !�% �#��N��?CAD���88����K1����
��8� V�!��2� ��2� H��2� H�2� �$(3�2� ��� Z� =.( #$'�'� ,��,1 #!��'� .�7(��
',# !�% �#�&,�'�%#!���%� �� 4�4#����' �3(��%�)�.��'�$����$#(!����)�.�
($�����1)# ! �'%O.&O#���$���.�).����#���%��M���,# !�% �#��N�� ? D���8C���
�81����
�K ��,�(,(#O2���2��,�&.��2�H�=��Z��%#!���%� �� 4�)�.��'�$����,(!���4�'�.�$�!&.$�
($���� $(&#'#�%�'�.� 4.(��6%#�'%� �����,��,1 #!��'� .�7(�� ',# !�% �#�&,O�� M��
�,# !�% �#��N��? =D���888����1�C��
�K���#F��:��2�H����(%��2��(',F)#�N2�S ($4��H�Z���&������!&# *�!%, �4 #�
%,�%#!���%� �� 4�)�.��'�$����,(!���4'$�($����H���E�&�$�!?T��� ���� 8�1� �
�K��R�II���2�M�2�H��$%($%�2���2�S. $%�. 2���2�M���2����Z��,���$����$#(!�)�.��'��
' �'�%#�%� �$�(#����� #!�.�&#����'O2����&�%��%$�F�%,���%#�,&�%�'�', .$%�$�$� 4�
&#����'O� ��� ��� &#����%�F !��F�%,� �%',����� M�� �)$%%�� UO��' .��BBD� ��8C���
�� 1��K��
�K���(!��2���2�V��..2�=���� Z�N�.��'�� ' �%�%� 4�,(!��� $#(!�� ���� �,�)������ 4�
', .���'��'�$�)O�,(!���&.�$!��&# %��$��M���.������*$%��!=D���8K���K�C1K����
�������������������������������
�������8B���� �
���������������������������������������� ���������������������������������������� �����������������������������������
�K���I�$,� 2���2����#2�����2�U # �2�H��Z��,�!�'# 7(��%�%�%�*�$&�#�%� �� 4�'..(.�#�)�.�
�'�$�)O���$1.�7(��',# !�% �#�&,O��N� ',!��M���C D���8B���BK�1BK8��
�KK� H��$2� M���2� �',��#2� ��E�� Z� �6%#�'%� �� 4�)�.� �'�$� 4# !� �'�$� 4# !� #�%� 4'$�
' �%�������', .$%O#�!����M�E�&���$��� D���8������B1�����
�KB��*#�#2���2�M��$$�2�U��Z�U�$1.�7(��',# !�% �#�&,�'�%#!���%� �� 4�,(!���4'�.�
)�.��'�$��M��E�&���$��@D���8BC����B1��B��
�K�� N#(($���#2� ��� Z�D(��%�%�%�*� %#!���%� �� 4�%,�!�3 #� �1,O# 6O�)�.� �'�$� ���
)� . ��'�.�!�%#��.��4%#�%,��1.�O#�',# !�% �#�&,�'�$&�#�%� ����.�����,�!���'%��� BD�
��8� ���8K1K ���
�KC� = .',2� M�2� E$2� H�2� �%��.O2� U�R���� Z� �� $�!&.� !%, � 4 #� %,� �$ .�%� �� ���
&(#�4�'�%� �� 4�% %�.�.�&�$�4# !����!�.�%�$$($��M��N� .���,!�� =D���8K����8�1K 8��
�K8���# %,2���2�R..$%# !2�V�2��3h*�..2�M��Z���!%, �4 #�7(��%�%�%�*�%#!���%� �� 4�
)�.��'�$����,(!���4'$���'%���,!���'���� D���8BC�����81������
�B � N,#2�;���2� �%#���I$2���2� E��2�U�M�2� ���4�.2� M�� Z���&�����.O$�$� 4�,(!��� 4'�.�
)�.��'�$���%# �$��!BD���8C����C�1�8K��
�B��*���N#��R�� (F�2�U���2�R 4!���2���=��Z���$�!&.�)�%',��$ #&%� ��&# '(#�
4 #�%,��$ .�%� �� 4�$(.4�%����� �1$(.4�%�)�.��'�$�4# !�$#(!���.�����,�!���'%���
?!D���8�B���B81�����
�B�� �(& �%2� M�2� �,2� ��S�2� M��$$�2� ��2� >�,� N�.� �'�$� Z� �,!�$%#O2� �,O$� . �O� ���
H%�) .�$!?2�[ .��!2��.�(!��#$$2��F�S #I2�E � �2��8��2�&����1�C����%� �& #�
���#2���2�V#�%',*$IO2�����
�B�� N#(($���#2���2� �p#�$�2�R�� �O.*$%2� M�� Z�����$O�&# '(#� 4 #� %#!���%� �� 4�
! .�#��'%�*�%O�� #�$&'�4�'��'%�*�%O�� 4�)�.��'�$����)�.���.�����,�!���'%���@@D���8�8��
���1�K���
�B���3h*�..2�V�2��3h*�..2�M��Z��#(!�)�.��'�$����&#����'O�F�%,�&#(#�%�$���.�����,�!���'%���
�!D���8BB��� �1�����
�BK��'�.��2����Z�U# (&�$&�#�%� �� 4�4#����' �3(��%�)�.��'�$�)O�&�'I���� �1
6',����'�#%#��$��M���,�#!��N� !�����.��!D���88 ����K1�����
�BB�U % 2� M�2�V�% 2�R�2� ��#(%�2�S�2���!)�#�2���� Z��&�#�%� �����%#!���%� �� 4�)�.�
�'�$����,(!���)�.�)O�,��,�&#$$(#�.�7(��',# !�% �#�&,O��M��E�7���,# !�% �#��!D�
��8C ��88�1� ���
�B��U, $2�S�2��(%�#%$2���2�[��%#�&&�2�U��Z��,�($� 4��&1&�Iq���C�'�#%#��$����%,�
&#&�#�%� �� 4�)�.� �'��!%,O.�$%#��'%�%$�� M�� E�7���,# !�% �#�� >D� ��8C�����K1
�CB��
�������������������������������
�������8����� �
���������������������������������������� ���������������������������������������� �����������������������������������
�BC� �3h*�..� M2� �%',..�V��� Z� �',��7($� 4 #� 6%#�'%� �� ��� �# (&� $&�#�%� �� 4�)�.�
�'�$�� ��'.(0 �!��,�N�.��'�$2�[ .��A2� �.�(!��#$$2��F�S #I2��8CC2� &�� �1����
��%� �& #����#2���2�V#�%',*$IO2����
�B8�;,�%���2�H�M��Z���'�(%� �����%,�($� 4� '%�'O.1$�.��1) ��$�.�'��'�#%#��$�4 #�
%,�6%#�'%� �� 4�)�.��'�$�4# !�$#(!���.�����,�!���'%����A�D���8C����B�1�BK��
�� �� #��($2� ��H�2� �%',..2�V������ Z� �#4 #!��'� ',�#�'%#�$%�'$� 4� #*#$1&,�$�
) ��$�.�'��'�#%#��$�4 #�$#(!�)�.��'��6%#�'%� ���N� !���,# !�% �#���C����T�
��88B���1K��
����;�,./�2� ��2� ��!�$�F�2� ��2� �',�!�O�2� R�2� ��$%�2� N2� �3h*�..2� M�� Z� � ��%� �$� 4 #�
$ .�1&,�$�6%#�'%� �� 4�(#���#O�)�.��'�$�F�%,� '%�'O.$�.��1) ��$�.�'���M��E�&��
�$��!>D���88����8 �1�8 B��
������I�O�!�2�=�2���I���I�2�H�� Z�D(��%�%�%�*�%#!���%� �� 4�)�.��'�$����)�.�F�%,�
#*#$1&,�$� ,��,1 #!��'� .�7(�� ',# !�% �#�&,O�� M�� �,# !�% �#�� �B!D�
��8C ���C�1�8���
�����()�2�����2�*���N#��R�� (F�2�U����Z���$�!&.�#*#$1&,�$�,��,�&#$$(#�
.�7(�� ',# !�% �#�&,�'� %#!���%� �� 4� ' �3(��%� )�.� �'�$� ��� $#(!� ��� )�.�
($������� *.� #���.� ' !&#$$� �� $&�#�%� �� $O$%!���.�����,�!���'%�����@D���8C����
��1K ��
������##�$2�������%#!���%� �� 4�4#����' �3(��%�)�.��'�$��$�(.%#�*� .%1�)$ #)����
� ��&��#$�)O�#*#$1&,�$�,��,1 #!��'�.�7(��',# !�% �#�&,O�����.��N� ',!��
�CCD���8�8���B 1�B���
��K�U % 2�M2����% 2�H�2��,�I��2���2�U % 2���2���!)�#�2����Z��%(�$� ��$%# �$���EQQQ[����
�%#!���%� �� 4�$#(!�)�.��'�$�)O�,��,1 #!��'�.�7(��',# !�% �#�&,O�F�%,�
4.( #$'�'�.�).�����M���,# !�% �#�� ?=D���8C����C81� ��
��B� H���# �2� U�2� U#' 2� ��[�� Z� �*#$1&,�$� ,��,1 #!��'� .�7(��
',# !�% �#�&,�'� $&�#�%� �� ��� 7(��%�4�'�%� �� 4� ���*�(�.� ,(!��� )�.� �'�$�� M��
�,# !�% �#���B!D���8C �����1�CB��
���� R 4!���2� ��=�2� � �2� ��� Z� �,O$�' ',!�'�.� &# &#%�$� 4� )�.� �'�$� ��� %,�#�
#.�%� �$,�&�% �)� . ��'�.�&# &#%�$T���� *#*�F� 4�%,�&# ).!��M��E�&���$�� � >D�
��8C�������1��C8��
��C� � �2� ��2� H��(%.. 2� ��2� ���. %%�2� H���2� =���2� ��� Z� N�.� �'�� $%#('%(#1�'%�*�%O�
#.�%� �$,�&T� *�.(�%� �� 4� )�.� �'�� .�& &,�.�'�%O� ($���� �1 '%�� .PF�%#� &�#%�%� ��
' 44�'��%����#*#$�&,�$�R�E���M��E�&���$��!�D���88 ������1������
��8��,�F��2��..� %%�;R�Z�N�.��'�$�QE[������&�#�%� �� 4�' �3(��%�)�.��'�$�)O�,��,1
&#$$(#�.�7(��',# !�% �#�&,O�����.O%�'�.�N� ',!�$%#O�?AT���8�B�����1�C��
�������������������������������
�������8C���� �
���������������������������������������� ���������������������������������������� �����������������������������������
�C � � � H�M�2� ��#$2� H�;�� Z� �%#!���%� �� 4� . ��� ',���� 4�%%O� �'�$� �$� �1
��&,%,�'O.�$%#$�)O�,��,�&#$$(#�.�7(�� ',# !�% �#�&,O����!�$$� $&'%# !%#O��
���.���,!��A=D���8�����C�81�CK���
�C���I(O�!�2���2��!(#�2���2�R�#�%�2�S��Z��!&# *�!%, � 4�,��,1 #!��'�.�7(��
',# !�% �#�&,�'�$&�#�%� �� 4����*�(�.�)�.��'�$T�4#�����.O'���' �3(��%�)�.�
�'�$���,!��E%%����8�8���B�1�B���
�C�� �%..�#2�=�2�R�',O2���E�2�V.��2� ����� Z��&�#�%� �� 4�)�.��'�$� �$�%,�#� &,��'O.�
$%#$�)O�,��,1&#$$(#�.�7(��',# !�% �#�&,O�����.��N� ',!��B?D���8�C���K81�BB��
�C�� �I(O�!�2� ��2��!(#�2� ��2� R�#�%�2�S�� Z� R��,1 #!��'� .�7(�� ',# !�% �#�&,�'�
���.O$�$� 4����*�(�.�)�.��'�$T�4#2��.O'���' �3(��%����%�(#���' �3(��%�)�.�
�'�$��N(..���,!��� '��M�&��> D���8�8�����1��B��
�C���,��I,2�N�2�� �%:#2���M�2�H .���2�M���2�V.$O2�H����Z��&�#�%� �����%'%� �� 4�(*1
�)$ #)���� #�*�%�*$� 4� 4'�.� )�.� �'�� !%�) .�%$� )O� ,��,1 #!��'� .�7(��
',# !�% �#�&,O�����.��N� ',!��B?D���8�C����1KK��
�CK����2���2��,�(I�2�S�2��,���2�=���2�U % 2� M�2���!)�#�2����Z�R��,� #!��'�.�7(��
',# !�% �#�&,�'�$&�#�%� �� 4�$%# �$ !#�'�)�.��'�$��$�%,�#��[1$�$�%�*�$%#$��
E�&�$�� CD���8CK���C�1�8���
�CB��I(O�!�2���2��!(#�2���2�R�#�%�2�S��Z��!&# *�!%, � 4�,��,1 #!��'�.�7(��
',# !�% �#�&,�'�$&�#�%� �� 4����*�(�.�)�.��'�$T�4#�����.O'���' �3(��%�)�.�
�'�$���,!��E%%����8�8���B�1�B���
�C�� ��2� H�2� R�#��2� M�2� H�I�!�2� ��2� R $,�%�2� ��� Z� R��,1 #!��'� .�7(��
',# !�% �#�&,�'� $&�#�%� �� 4� (.%#�*� .%1�)$ #)���� )�.� �.' , .� #�*�%�*$�� M��
�,# !�% �#��N��=B D���88B���K�1�B���
�CC�R(����;H2��()#%���2�� ��..O�MU2�E�(�H2�M�*�%%��N�Z���%#�,&�%�'�', .$%�$�$� 4�
&#����'OT�%'%� ��F�%,�(#���#O�)�.��'���$$�O$��M���#���%��H��!>T��� ����CB1
8��
�C8� U % 2� M�� �%'%� �1�#��%� �#�*�%�:�%� �� �',��7($� ��� E�7(�� �,# !�% �#�&,O2�
H�#'.��II#2��F�S #I2��88 2�&�����1�KC����%� �& #�E���!��$2�R�2���#)#�2�
;�M�H��
�8 � �..�!�#I2� ��2� �,.!��$I�1N#%�.$$ �2� H�2� �, !&$ �2� ����� Z� �1�81�'#���O.�1
)# ! �'%�!�� Z� �� & F#4(.� #���%� 4 #� &,�$1%#��$4#1'�%�.O:� 4.( #$'�'�
.�)..���� 4�'�#) 6O.�'��'�$�4 #� .�7(��',# !�% �#�&,O�����.��N� ',!���B>D���88 ��
��81�CK��
�8�� V(# $�F�2� ��2� ��% 2� R�2� ��I',�2� R�2� H�',��2� H�2� �, !�2� H�� Z� ���.O$�$� 4�
$%# �$ !#�'� ���1)�.� �'�$� )O� ,��,�  #!��'� .�7(�� ',# !�% �#�&,O� F�%,�
4.( #$'�'�%'%� ���M���,�#!��N� !�����.���>D���88������K1��C���
�������������������������������
�������88���� �
���������������������������������������� ���������������������������������������� �����������������������������������
�8�� �,�!��2�V�2�V !��2�S�2��2���� Z��,# !�% �#�&,�'�),�*� (#� 4�)�.� �'�$�($����
�O'. 6%#��� ��� ! )�.� &,�$� 4� ,��,1 #!��'� .�7(�� ',# !�% �#�&,O�� M�� E�7��
�,# !�% �#��� D���8C8���8�1K ��
�8����# .���2�=�2�N�.2�����2�� * %�O2�H��Z��%#!���%� �� 4�$#(!�!%�) .�'�&# 4�.$�
4�)�.� �'�$�)O�!�'# ' .(!�� .�7(�� ',# !�% �#�&,O� .�$#1��('� 4.( #$'�'�� M��
R��,��$ .(%���,# !�% �#�2��,# !�% �#��� !!(�����D���8CC��� 1����
�8�� �I�F�2� ��2� H�O�I�2� H�2� H(#�2� ��2� �I�(',�2� H�� Z� R��,1 #!��'� .�7(��
',# !�% �#�&,�'14.( #$'�'� %#!���%� �� 4� ,(!��� 4�'�.� )�.� �'�$�� M��
�,# !�% �#��ACCD���8C�����81�B���
�8K� [��� #� R #$%2� =���E�2� � $%2� H�R�2� R .%,(�$2� M�M�H�� Z� �%(O� 4� %,� ��4.(�'� 4�
�7( ($� !�'..�#� $O$%!$� �� %,� #�*�%�:�%� �� 4� (�'O.��'� �'�� F�%,� �1
)# ! !%�.1�1!% 6�' (!�#����M���,# !�% �#��A>=D���8CC��� �1��C��
�8B�;���2�U�2��%�'O2���R�2���#.2�M��Z��%#!���%� �� 4����*�(�.�)�.��'�$����$#(!�)O�
,��,� #!��'�.�7(��',# !�% �#�&,O��N� !���,# !�% �#��AD���88 ����B1�� ��
�8�� V�F�$�I�2� ��2� H��2� H�2� �$(3�2� ��� Z� �!! )�.�:� �1�.&,�1,O# 6O$%# ��
,O# ���$������$O.�,O#�:����$���.�).����#���%�4 #�F�%,�4.( #$'�'�
%'%� �� 4�)�.��'�$��M���,# !�% �#�� ? D���8C����B�1�BC��
�8C�U % 2� M�2�U���2���2�H�(#�2�R�2���!)�#�2���� Z��%(�$� �� $%# �$�� ����� �&�#�%� ��
��� ',�#�'%#�:�%� �� 4� ��K� &�!#$� 4� (�' �3(��%� ��� ' �3(��%�
%#�,O# 6O', .$%�� �'� �'�$� ��� (#��� 4# !� �� &�%��%� F�%,�W..F�#� $O�# !� )O�
,��,1 #!��'� .�7(�� ',# !�% �#�&,O�� M�� E�7�� �,# !�% �#�� ��� #.�%�
�',� . ��$�� D���8C8��� �K1� C���
�88� U % 2� M�2� �,�I��2� ��2� ��!)�#�2� ��� Z� �%(�$� �� $%# �$�� ��QQ[���� �&�#�%� �����
%#!���%� �� 4�)�.� �'���1� �����1$(.&,�%$����(#���)O�,��,1 #!��'� .�7(��
',# !�% �#�&,O�F�%,�4.( #$'�'�.�)..�����M���,# !�% �#��A�>D���8C�����81�B���
� � U % 2� M�2� ��� 2� S�2� �$(',�O�2� V�2� ��!)�#�2� ��� Z� �%(�$� �� $%# �$�� ��QQQ�����
�&�#�%� �� ��� ',�#�'%#�:�%� �� 4� )�.� �'�� �$(.&,�%$� ��� ,(!��� (#��� )O� ,��,1
 #!��'�.�7(��',# !�% �#�&,O��M���,# !�% �#��A >D���8CC��K81BB��
� �� ��I�I(#�2� R�2� V�!(#�2� ��2� ��I�2� R�2� V !�%$(2� R�2� �$,�:�I�2� V�2� ����%�2� ��� Z�
��!(.%�� ($�%#!���%� �� 4�)�.��'�$����#�%�.�*#�%�$$(�)O�,��,1 #!��'�.�7(��
',# !�% �#�&,O��M���,# !�% �#��N��?�BD���88C����1� ��
� �� S $,��2� ��2� H(#��2� R�2� R�# $2� ��� Z� ��&�� ��� $�$�%�*� �1.��� &#' .(!��
&(#�4�'�%� �� ��� ,��,1 #!��'� .�7(�� ',# !�% �#�&,�'� �$$�O� 4 #� )�.� �'�$� ���
$#(!��M���,# !�% �#��A!�D���8CC����1�B��
� ���,�F��2���*%���H2��..� %%�;��Z�N�.��'�$��EQ������.�$,� �$,�&�)%F��%,�! )�.�%O�
��#*#$1&,�$�,��,1 #!��'�.�7(��',# !�% �#�&,O����%,�$%#('%(#� 4�)�.�
�'�$��M��,# !�% �#���� C T���8C �����1�B��
�������������������������������
�������� ���� �
���������������������������������������� ���������������������������������������� �����������������������������������
� ���$,��2���2�H(#�%�2���2���I(',�2����Z����.O$�$� 4�)�.��'�$�)O�!�'# �,��,1 #!��'�
.�7(��',# !�% �#�&,O�F�%,�& $%' .(!���:O!�#�'%� �����4.( # !%#�'�%'%� ���
M���,# !�% �#�� B D���8C���KB81K�����
� K� ��I�O�!�2� =�� Z� D(��%�%�%�*� !�'# ���.O$�$� 4� )�.� �'�$� ��� )� . ��'�.� $�!&.$��
� ..�) #�%�*�$%(O��M���,# !�% �#��A> D���8CC���881� C��
� B� �% #O2� M���2�=(#(! % 2���M�� Z�N�.� �'�� ���.O$�$T�!%, $����&# ).!$���(# &���
M (#��.� 4����'#��#*�%� ������(&&.����T���88����81����
� ��V�!��2� ��2� H��2� H�2� �$(3�2� ��2��!:�F�2�S�2�V(#�,�$,�2�=�� Z� �&�#�%� �����
%#!���%� �� 4� )�.� �'�$� )O� ,��,1 #!��'� .�7(�� ',# !�% �#�&,O� ($����
�!! )�.�:���α1,O# 6O$%# ��,O# ���$�������.'%# ',!�'�.� %'% #�� M��
�,# !�% �#�� !@D���8C������1�C���
� C� ��$�)#�2� ��M�2� �(�O2� V���� Z� �!&# !%#�'� ,��,1 #!��'� .�7(��
',# !�% �#�&,�'� %'%� �� 4� ���R� �%� �� )�$1�'%�*�%� �.�$$O� '�#) �� .'%# ��
���.���,!��=!D���88���C�K1C����
� 8� R�$��F�2� ��2� �� O�!�2� ��2� ��I�2� ��� Z� �� ,��,.O� $�$�%�*� %#!���%� �� 4�
���*�(�.� $#(!� )�.� �'�$� ($���� ,��,1 #!��'� .�7(�� ',# !�% �#�&,O� F�%,�
�!! )�.�:��:O!��M���,# !�% �#�� ?BD���8C����K1����
�� � �$(3�2� ��2� H��2� H�2� �#�I�F�2� R�� Z� �,!�.(!��$'�%� �$$�O� 4� ' 14�'% #$�� M��
N� .(!�����,!�.(!����AD���8C8���K�1�B���
����R &�����2��..�.�����[1H�Z�� !&�#�$ �� 4�%,��*�& #�%�*�E��,%��'�%%#�����%'% #�
��E��������4#�'%�*���6��%'% #����������.�&�����.O$�$��M��E�7���,# !�% �#�&,O�
r��.�%��',� . ��$��=T���88�����B81��C��
���� S��� �V2� ;(� S;2� E�(� �R2� W,���� ;�� Z� � !&�#�%�*� $%(O� �� !�3 #� )� �'%�*�
' !& ��%$������%(#�.2��#%�4�'��.2������1*�%# �'(.%(#���('(.($�N *�$���,!��,�#!��
N(..���� IO ��>>T��� �����C1���
���� �'I#$2� ��2� �F2� ����2� ��$%2� ��N�2� R�$I��$2� ��M�� Z� �,� ($� 4� %��!� !�$$�
$&'%# !%#O�4 #�%,��44#�%��%� �� 4�)�.��'�$��$ !#$����4 #�%,���%�4�'�%� �� 4�
)�.��'�$����)� . ��'�.�6%#�'%$����&��� !!(��H�$$��&'%# !��AD���88 ����81K���
����E�)#%���2�R#!��$���2��#�O�M�2�*���R 4�=2�� I�.��2��R 44!������Z�N�.��'�$�
��� ' �3(��%$� ��%�4�� ��� !%�) .�'� �$ ##$� )O� 4�$%� �% !� ) !)�#!�%� ���
%��!�!�$$�$&'%# !%#O���.�����,!��!?D���88����� �1��� ��
��K�H�..$2�V���2�H($,%�72���2�M ,�$ �2���;�2�;,�%4�.2�����2��.�O% �2������Z���!%, �4 #�
%,� 7(��%�%�%� �� 4� ' �3(��%� )�.� �'�$� ��� #�� ). � $& %$� ($���� .'%# $&#�O�
� ��:�%� �1!�$$�$&'%# !%#O�����%#���$��A!D���88C���B�1�BC��
��B�H($,%�72� ��2� E ���2���2�H ##�$2�H�2� M ,�$ �2���;�2�;�2���H�2�V..O2���2��.�O% �2�
����� Z� �'#����� 4� �F) #�� ��4��%$� 4 #� ', .$%�%�'� ,&�% )�.��#O� �$�$� F�%,�
%��!�!�$$�$&'%# !%#O��N#��H��M��!�@D���888�����1�����
�������������������������������
�������� ����� �
���������������������������������������� ���������������������������������������� �����������������������������������
���� M ,�$ �2� ��;�2�%��N#��I2� R�M�2� �',(�%2�����2� M�I )$2� ��� Z���&�� ���7(��%�%�%�*�
���.O$�$� 4�(�' �3(��%�����)�.��'�$����&.�$!�����). �$�!&.$�)O�%��!�!�$$�
$&'%# !%#O��M��E�&���$��A D��� ������1��8��
��C�=��2�����2�R�#��2�����2�[$%�.2�H�E��Z���#'%�' !&�#�$ �� 4�$' ��#O�� �����.�$#�
$ #&%� �� !�$$� $&'%# !%#O� �� )�.� #����'� ! .'(.$� ��� �� ! *���� ).%� .�7(��
',# !�% �#�&,O1!�$$�$&'%# !%#O�$O$%!�����.���,!��>=T���8C����C� 1�C�B��
��8� �#&�� 2� ��M�2� ��FI��$2� N�U�2� H'E�44#%O2� =�;�� Z� �� .�7(�� ',# !�% �#�&,O1!�$$�
$&'%# !%#O�$O$%!�&# *�����' �%��( ($�! ��% #����F�%,���� �#�!$�$�$�%�*�%O��M��
�,# !�% �#���'���� D���8����K��1K�C��
�� � N %$!�2� ��R�2� �*#!�#$2� R�2� *��� � �32� ��2� *��� E��%2� ����2� ;��#$2� ��M�2� *���
U���&2���R�2�[#I�2���� Z���&�����.O$�$� 4� ' �3(��%�)�.��'�$����&.�$!��($����
.'%# $&#�O� %��!� !�$$� $&'%# !%#OT� �&&.�'�%� �� 4 #� $.'%�*� $'#����� 4�
&# 6�$ !�.��$ ##$��M����,#�%��H%�)����$�� D���888��� �1�� ��
���� �,�F� �2� �..� %%� ;R� 1� N�.� �'�$�� E�[�� H�$$� �&'%#�� 4� � �3(��%� N�.� �'�$��
N� !�'�.�H�$$��&'%# !%#O�>2��T���8�C�����1��C�
����;,�%�O2�M���2��,�.#2�H�H�2�N.��'I#%2�N�.��'�$�����, .$%# .����R�.%,���$�$2�
H�����#$$2�E��'�$%#2����.��2��8C�2�&���������%� �& #���(!��#%�#2�U�2��%�,.2�
��2�U# I2�;��
����;,�%�O2� M���2� U#(�)#�#2� ��2�� �%!��2� ��2� E���2�[�2�S���2�S�H�2�� $�%,�.2� ��2�
N(#.����!2� ��E�2� !� >�# '���$� ���� ���(�.� � �4#�'� �� H�$$� �&'%# !%#O�
����..��� &�'$?2��!#�'���� '�%O�4 #�H�$$��&'%# !%#O2�������% �� ���Q�2��8C�2�
&���������%� �& #��!#�'���� '�%O�4 #�H�$$��&'%# !%#O�
���� =##�#�� R���2� N�## $� �H�=2� � !���($� �H2� �!� � =HE� 1� ��&�� =�N1H��
7(��%�%�%� �� 4� U.O' ', .�'� �'�� ($���� $%�).� �$ % &$�� E�*# � � �$(! $� � Q[�
��' �%# ���'� ��.� ��� '���� #%(�($���D(0!�'�2� #�.�:� �������*#$���
�� #% 2��!���#� � �[�.�#2�� #% ����%� �& #�� '���� #%(�($�$��D(0!�'�2�
�88B��
��K��*��$2�M���2�U, $,2���2��*��$2�N���2���% F�':2�H����Z��'#�����%',��7($�4 #�%,�
%'%� �� 4���) #��## #$� 4�)�.��'��!%�) .�$!�)O��#'%���3'%� �����!�'# 1,��,�
 #!��'� .�7(�� ',# !�% �#�&,O1' �%��( ($� 4. FP4�$%� �% !�) !)�#!�%�!�$$�
$&'%# !%#O��N� .��H�$$��&'%# !�� D���88������1�����
��B� R�O2� ��;�2� ��,�.��2� H�M�2� ��! 4O*�2� ��2� ��#O2� H���� Z� H .'(.�#� $&'�$� 4�
.'�%,��$����,(!�����..).�#�)�.��M��E�&���$��!AD���88����K81�B���
���� �#����:�"+ � � #%(�($�� � �#��$&.��%$�� �.�%-#� � � �'%�*��$� � K1� B��
��%� �& #�H���$%/#� �����G����&G).�'��� #%(�($��!�� B��
��C� ��:� M=2� �$',#� �E� Z� E�*#� %#��$&.��%�%� �� 4 #� � �*�#�.2� � �!�.�����%� �$�$$T�
&# ).!� 4�#'(##�'��; #.�M���(#�� =T��� ������1�KB�
�������������������������������
�������� ����� �
���������������������������������������� ���������������������������������������� �����������������������������������
��8�H.�:�R[2��.��H2�H(#&,O�U2�R�% ����Z��$$$$!�%� 4��#�4%� 4(�'%� ��)4 #�
.�*#�%#��$&.��%�%� ���D($%�4 #�%,�. $%��#Id��#��$&.��%�%� ��?CT��� ��KB 1KBK�
�� �H.�:�R[2�U�.������2�� ',#���N�2��.��H2�H(#&,O�UH2�R�% �����Z���*�.��%�
%',��7(� 4 #� %,� ���.O$�$� 4� )�.��#O� )�.� �'�� $'#%� �� ��� � #� .�*#$� &#� #� % �
%#��$&.��%�%� ����#��$&.���%����T���88C����B1�����
���� R���$!�� �N2� R(�:���� M�2� [ �I� �M� Z� � !& $�%� �� 4� )�.� �4%#� #%, % &�'� .�*#�
%#��$&.��%�%� ����'���M�U�$%# �%# .� T���8C���� �8��
����H.�:2�R�[�2��.�2�H�2��%',..2�V�����2�H(#&,O2�U�H�2�R�% �2������Z�N�.��'�$�
���.O$�$T���% .�% ��$$$$��#�4%�4(�'%� �����,(!���.�*#�%#��$&.��%�%� ����#��$&.����%��
�?D��� ����CB1�8���
���� �� *#2�����2� ��).O2���V�2�=#$2���V�2� �,�#&2�R�E�2�N. !#2� M���2���3�#���2� M���2�
�$',#2���E��Z��#%, % &�'�.�*#�%#��$&.��%�%� �T����&�%, . ��'�.�$%(O� 4�B��$#��.�.�*#�
)� &$�$� 4# !� ��� &�%��%$� F�%,� $&'��.� #4#�'� % � %,� ���� $%�'� 4�%(#$� ���
��%(#�.�,�$% #O� 4�#3'%� ���R&�% . �O��AD���8C�������s������
�����!%#�$2���M�2� E�$IO2���2�[����,�.2���R�2� �%�#:.2� ����2��II#2���� Z���%, . �O� 4�
,&�%�'�%#��$&.��%�%� �T���#*�F� 4�B���(.%��.. �#�4%�#'�&��%$��!!(� $(&&#$$�
F�%,�'O'. $& #��P$%# ��#��!����!��M����%, .����BD���8CK���K�1�B���
��K� U#��%2� ��2� ;�..2� ;�2� U,�%2� ��2� �(442� M�2� V(%%2� M�2� �%�..#2� ��2� =#�2� M�� Z� E�*#�
%#��$&.��%�%� �T�%,�&# ).!� 4�#3'%� ����#��$&.��%���# '���B�$(&&.���T���8CB���B�1
�BB��
��B� H(#�'�2� H�� Z� �#(!� )�.� �'�$� ��� $%#�4�� )�.�##()��� ��� �#.O� %'%� �� ���
�44#�%��.����� $�$� 4�,&�%�'�O$4(�'%� ��4 .. F���� #%, % &�'�.�*#�%#��$&.��%�%� ���
M��R&�% .���?D���88������1��K��
����V.�#� �2� �,�.!��� E2�R 44!����[2� R 4!����;2�V#�($� �2� H,#�)�� �2�R#4�#%,� �� Z�
H ��% #���� 4� ��%�1#3'%� ��%,#�&O�)O�$#(!�)�.� �'�$� �4%#� .�*#�%#��$&.��%�%� ���
�#��$&.��# '���$�!CT���88C���KB�1�KB8��
��C�V�#)O2���H�2�H'H�$%#2� ��2��.!�%$2���2�R()$',#2� ��U�2����#�$���2� E�2� ��.O2�H�2�
U(�$ �2� N�V�� Z� �#%, % &�'� .�*#� %#��$&.��%�%� �T� & $%1 &#�%�*� ' !&.�'�%� �$� ���
%,�#�!����!�%��N#��M���(#���?AD���8C����1����
��8� �,�F2�N�;�� M#�2�U # �2�����2� �F�%$(I�2���2� �%�#:.2������ Z��%#��$&.��%�%� �� 4�%,�
.�*#���!����E�*#���$��>D���8CK���8�1� ���
�� � ���I�#O2� R���2�;�..��!$2� M�;�2�= $%#2� ��=�� Z� ���� .�*#� 4(�'%� ��%$%$� �44#�%��%�
#3'%� �� 4# !� %,#� '�($$� 4� .�*#� �$4(�'%� �� �4%#� ,&�%�'� %#��$&.��%�%� �d�
�#��$&.��%���# '�� C��(&&.���T���8CC��BB81B� ��
���� �#$$ �2�R�2�V�#.)#�2� ��2� �*�$$ �2�V�2� �%�7*�$%2��2� E(�, .!2�V�2���#$ �2���2�
=#�$I2�N��Z���&�����'�%� �� 4��.. �#�4%�4(�'%� �����.�*#�%#��$&.��%�%� ����#��$&.��%��
�# '���@D���8C����K�K1�K�C��
�������������������������������
�������� ����� �
���������������������������������������� ���������������������������������������� �����������������������������������
����� #%#2�V����Z���%, . �O� 4�%,� #%, % &�'�, ! �#�4%����,%# �#�4%2�!��6&#��'�
���,&�%�'�%#��$&.��%�%� �2�;�N����(�#$2� �,�.�.&,��2� �8B82� &�� ���1�������%� �
& #��%�#:.2������
����H(� :2���M�2�=#�!��2�E����Z�E�*#�%#��$&.��%�%� ���H���.����� #%,��!��?!D���8C8��
� ��1� �8��
����R###�2�M�2�� ' 2���2�H #�2�����2��#�#�2�=�2�M�#�2���2���# 2�=�2����4(� $2�M����
Z�N�.� �'��&# 4�.� �$�����#.O� ���'�% #� 4� �.. �#�4%� 4(�'%� ��(#���� #%, % &�'� .�*#�
%#��$&.��%�%� ����#��$&.��%���# '�� �D���8C8������1������
��K� H(#&,O2� U�H�� Z� �#(!� )�.� �'�$� ��� �,� )�.� �'�$T� ',!�$%#O2� &,O$� . �O� ���
!%�) .�$!��[ .�A��H%, $�����&&.�'�%� �$2��.�(!��#$$2��F�S #I2��8CC2���81
� �����%� �& #��%',..2�V�����2�V#�%',*$IO2���2����#2������
��B�R 4!���2���=��Z��,��!�� &O#��!%,O.�%� ��)#�%,�%$%����%,�$#(!�)�.��'�$�
.*.$T�� !���%�)(%�� %�O%�.'%�% �3 ���%,�' !! ��.�*#�%$%$��R&�% . �O�� D�
��8C���K��1K����
������$ ��U2����.�' �H2�N�� '',��E2���$%#���2���$����=2�U������2�� !��� .��M2���$.! �
�2� ��$'����� ��� Z� ��%%#�$� 4� )�.� $�.%$� ��� )�.��#O� .�&�$� �#.O� �4%#� .�*#�
%#��$&.��%�%� �� �44#�%��%� &�%��%$� F�%,� (�4�* (#�).� �#�4%� (%' !��
�#��$&.��%�%� ���# '���$� BT���88B���BKK1�BKB�
��C�N�� '',��E2���$ ��U2���$%#���2���$����=2���$.! ��2�U������2����.�' �H2���$'�����
���Z��7(�%��.� ',���$� ��� $#(!����)�.��#O�)�.��'�$��4%#� .�*#�%#��$&.��%�%� ���
�#��$&.��%�%� ���# '���$� ?T���88K���K �1�K ��
��8�M���R2�E�����2��#,�#�M2��$%��U2�H�.��#-�H2�M����2����.#�=;2�N# .$',����
Z� �#(!�)�.� �'�$� ��� .�*#�%#��$&.��%�%� �1�#.�#� ���'�% #� 4 #� �'(%� #3'%� �� ���
! ��% #�4 #���%�#3'%� ��%,#�&O���#��$&.���%���AT��� �����81�����
�K �E�(%�$',.��#2���2�R 'I#$%%2�V�2��, ��2�M�2��I.(�2�N�2��$ ��!�2�R�2�V #$)�'I2�
��2��%%#$$ �2����Z�=��1�.��$&�#�%� ��)� &$O����! ��% #���� 4� .�*#��.. �#�4%������
�&.�'�%� �$�% �,(!���.�*#��.. �#�4%$���#��$&.��%�%� ���A=D���8CC����1K���
�K���.#! �%2���M�2��,�.!#$2������Z��,�%#��$�!���$�%$%$����.�*#��$�$��H�'����
A=D���8B����8�1� ���
�K����..�2���2��#�#2�M�H�2�;�..��!$����Z��#(�$����%,�.�*#�Z��$%����.�*#�4(�'%� ���
N� &,�#!���#(����$& $��� D���88����K�1�K8��
�K�����:��$2�[�M�2� �',�2�����2�[����,�.2���R�� Z�H�'�.� &# ).!$�)4 #� ����4%#�
%#��$&.��%�%� ���U�$%# �%# .���.����� #%,��!���?D���8CC���81����
�K��� � 2���2�H ��2�H�2�S $,�:�I�2�V�2�[�.�*��2�E���2���I�� 2�S�2�U % ,2�H�2��,:�% 2�
R�2� � I�2�S�2� ���%�2� ��2�V�$,�! % 2� ��� Z� ��%#.(I��1B� .*.$� ���)�.� 4 .. F���� .�*#�
%#��$&.��%�%� ����#��$&.��%���# '�� !D���88���B� 1B����
�������������������������������
�������� ����� �
���������������������������������������� ���������������������������������������� �����������������������������������
�KK� � )#%�2� ��2� E�)#!��2� V�2� �',F�#%:2� H�2� ��$!��2� E�2� H�..#2� ��� Z� N�.� 'O% . �O�
*#$($� $#(!� $�E1��� 4 #� ! ��% #���� 4� �'(%� .�*#� �.. �#�4%� #3'%� �$�� �.����
�#��$&.��%��?D���88�����1����
�KB���!$2���R�2�N(#�%%2���2��% 'I.O2�����2�R()$',#2���U�2�H'H�$%#2���2��.��$2����Z�
N�.��#O�i�1!�'# �. )(.������.�*#��.. �#�4%�#3'%� ���R&�% . �O��BD���8CC���KBK1�K� ��
�K�� U#��%2� ��2� ;�..2� ;�2� �%�..#2� ��2� V F�2� ��2� �(442� M�2� U,�%2� ��� Z� �!!(� . ��'�
! ��% #����4 #�#3'%� ���4%#�.�*#�%#��$&.��%�%� ����#��$&.��%���# '���BD���8CB�����1
�����
�KC� �#I��$2� M���2� �.$ �2� ��E�2� ��I.�2� M�2� U#�!)$',2� ��H�2� V# !2� ����� Z� � .().�
��%#.(I��1�� #'&% #� .*.� �$� ��� ���'�% #� 4� .�*#� �.. �#�4%� #3'%� ���
�#��$&.��%�%� ���A?D���8C8����1C���