virologia geral_ métodos de inativaçao e preservação viral
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Inativação e preservação dos vírus
Inativação e preservação dos vírus
Agentes físicos e químicosAgentes físicos e químicos
Finalidade:
inativação vírus em programas de
desinfecção
inativar vírus em vacinas
preservar vírus em amostras
Inativação por agentes físicosInativação por agentes físicos
Temperatura:
Destruição 50oC-60oC / 30’ desnaturação proteíca;
Vírus icosaédricos + estáveis a 37oC;
Vírus envelopados + termolábeis a 37oC.
Vírus desnudos
Vírus envelopados
Inativação por agentes físicosInativação por agentes físicos
Temperatura:
Calor úmido
Fervura
Autoclavação
Pasteurização.
Inativação por agentes físicosInativação por agentes físicos
Temperatura: Calor seco
Bico Bunsen Defumaç
ão
Estufa
IncineraçãoVassoura de
fogo
Inativação por agentes físicosInativação por agentes físicos
Radiações:
Inativaçãodesnaturação do ácido nucléico;
Radiações ionizantes
Raio X Raio gama
Inativação por agentes físicosInativação por agentes físicos
Radiações não -ionizantes
Luz UV
Inativação por agentes físicosInativação por agentes físicos
pH:
Estabilidade entre pH de 5,0 a 9,0;
Enterovírus (exceção) resistem pH 2,0 – 3,0 inativação por ácidos fortes
Inativação ácidos fracos = hidróxido de Na álcalis = hipoclorito de Na
Inativação por agentes químicosInativação por agentes químicos
Agentes químicos:
Utilizaçãodesinfetantes produção de vacinas inativadas;
Ação depende tipo vírustempo de exposição concentraçãopresença ou não de matéria orgânica.
Agentes químicos utilizados na inativação viral
Tipos Ação Exemplos
agentes oxidantes oxidação de grupos sulfidrila hipoclorito de sódio, tintura de iodo
agentes alcalinizantes
atravessam a camada protéica e inativam o ácido nucléico
formaldeído, glutaraldeído
agentes proteolíticos
desnaturam a camada protéica
álcoóis,fenóis
agentes desnaturantes
desnaturam o ácido nucléico -propiolactona, acetiletilamina
Inativação por agentes químicosInativação por agentes químicos
Inativação por agentes químicosInativação por agentes químicos
Detergentes não iônicos:
Ação desnaturam lipídeos do envelope;
Triton X-100, Nonidet P40Tween 20
Detergentes não-iônicos
Inativação por agentes químicosInativação por agentes químicos
Detergentes iônicos:
Ação desnaturam lipídeos e podem romper protéinas
Tipos :
aniônicos, catiônicos
aniônicos Aniônicos (-)
Catiônicos (+)
Ex: derivados quaternários da amônia, lisol (cloridrato benzalcônico) deoxicolato de sódio, éter, clorofórmio
Preservação viralPreservação viral
Temperatura:
Ambiente (18 - 22oC) viabilidade viral por dias;
4oC viabilidade viral por semanas;
-20oC / - 70oC ou menos sobrevivência por meses ou anos
Congelamento e descongelamento ou perda da infecciosidade viral.
Preservação viralPreservação viral
Sais:
Sais (1 mol/L) estabilidade de muitos vírus:
Estabilidade viral produção de vacinas sais
potência duração de semanas a T.A.
MgCl2 picornavírus, reovírus
– MgSO4 ortomixovírus e paramixovírus
Na2SO4 herpesvírus
CaCl2 rotavírus
Preservação viralPreservação viral
Liofilização:
Consiste na retirada total de água;
Preservação
4oC / TA
Preservação viralPreservação viral
Glicerol:Álcool polihídrico
Soro fetal bovino:
Componente nutritivo (proteínas e
aminoácidos) tempo da preservação
viral.
Meio cultura celular