virologia geral_ métodos de inativaçao e preservação viral

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Inativação e preservação dos vírus

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Page 1: Virologia geral_ métodos de inativaçao e preservação viral

Inativação e preservação dos vírus

Inativação e preservação dos vírus

Page 2: Virologia geral_ métodos de inativaçao e preservação viral

Agentes físicos e químicosAgentes físicos e químicos

Finalidade:

inativação vírus em programas de

desinfecção

inativar vírus em vacinas

preservar vírus em amostras

Page 3: Virologia geral_ métodos de inativaçao e preservação viral

Inativação por agentes físicosInativação por agentes físicos

Temperatura:

Destruição 50oC-60oC / 30’ desnaturação proteíca;

Vírus icosaédricos + estáveis a 37oC;

Vírus envelopados + termolábeis a 37oC.

Vírus desnudos

Vírus envelopados

Page 4: Virologia geral_ métodos de inativaçao e preservação viral

Inativação por agentes físicosInativação por agentes físicos

Temperatura:

Calor úmido

Fervura

Autoclavação

Pasteurização.

Page 5: Virologia geral_ métodos de inativaçao e preservação viral

Inativação por agentes físicosInativação por agentes físicos

Temperatura: Calor seco

Bico Bunsen Defumaç

ão

Estufa

IncineraçãoVassoura de

fogo

Page 6: Virologia geral_ métodos de inativaçao e preservação viral

Inativação por agentes físicosInativação por agentes físicos

Radiações:

Inativaçãodesnaturação do ácido nucléico;

Radiações ionizantes

Raio X Raio gama

Page 7: Virologia geral_ métodos de inativaçao e preservação viral

Inativação por agentes físicosInativação por agentes físicos

Radiações não -ionizantes

Luz UV

Page 8: Virologia geral_ métodos de inativaçao e preservação viral

Inativação por agentes físicosInativação por agentes físicos

pH:

Estabilidade entre pH de 5,0 a 9,0;

Enterovírus (exceção) resistem pH 2,0 – 3,0 inativação por ácidos fortes

Inativação ácidos fracos = hidróxido de Na álcalis = hipoclorito de Na

Page 9: Virologia geral_ métodos de inativaçao e preservação viral

Inativação por agentes químicosInativação por agentes químicos

Agentes químicos:

Utilizaçãodesinfetantes produção de vacinas inativadas;

Ação depende tipo vírustempo de exposição concentraçãopresença ou não de matéria orgânica.

Page 10: Virologia geral_ métodos de inativaçao e preservação viral

Agentes químicos utilizados na inativação viral

Tipos Ação Exemplos

agentes oxidantes oxidação de grupos sulfidrila hipoclorito de sódio, tintura de iodo

agentes alcalinizantes

atravessam a camada protéica e inativam o ácido nucléico

formaldeído, glutaraldeído

agentes proteolíticos

desnaturam a camada protéica

álcoóis,fenóis

agentes desnaturantes

desnaturam o ácido nucléico -propiolactona, acetiletilamina

Inativação por agentes químicosInativação por agentes químicos

Page 11: Virologia geral_ métodos de inativaçao e preservação viral

Inativação por agentes químicosInativação por agentes químicos

Detergentes não iônicos:

Ação desnaturam lipídeos do envelope;

Triton X-100, Nonidet P40Tween 20

Detergentes não-iônicos

Page 12: Virologia geral_ métodos de inativaçao e preservação viral

Inativação por agentes químicosInativação por agentes químicos

Detergentes iônicos:

Ação desnaturam lipídeos e podem romper protéinas

Tipos :

aniônicos, catiônicos

aniônicos Aniônicos (-)

Catiônicos (+)

Ex: derivados quaternários da amônia, lisol (cloridrato benzalcônico) deoxicolato de sódio, éter, clorofórmio

Page 13: Virologia geral_ métodos de inativaçao e preservação viral

Preservação viralPreservação viral

Temperatura:

Ambiente (18 - 22oC) viabilidade viral por dias;

4oC viabilidade viral por semanas;

-20oC / - 70oC ou menos sobrevivência por meses ou anos

Congelamento e descongelamento ou perda da infecciosidade viral.

Page 14: Virologia geral_ métodos de inativaçao e preservação viral

Preservação viralPreservação viral

Sais:

Sais (1 mol/L) estabilidade de muitos vírus:

Estabilidade viral produção de vacinas sais

potência duração de semanas a T.A.

MgCl2 picornavírus, reovírus

– MgSO4 ortomixovírus e paramixovírus

Na2SO4 herpesvírus

CaCl2 rotavírus

Page 15: Virologia geral_ métodos de inativaçao e preservação viral

Preservação viralPreservação viral

Liofilização:

Consiste na retirada total de água;

Preservação

4oC / TA

Page 16: Virologia geral_ métodos de inativaçao e preservação viral

Preservação viralPreservação viral

Glicerol:Álcool polihídrico

Soro fetal bovino:

Componente nutritivo (proteínas e

aminoácidos) tempo da preservação

viral.

Meio cultura celular