sessão científica bolsista camila lima - 2015.1
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INFECÇÃO PELO VÍRUS EPSTEIN-BARR EM
INFLAMAÇÃO CRÔNICA DE GRANULOMA PERIAPICAL
UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA
FACULDADE DE ODONTOLOGIA
PROGRAMA DE EDUCAÇÃO TUTORIAL
Bolsista: Camila Lima Silva
INTRODUÇÃOPERIODONTITE PERIAPICAL
Caracteriza-se por danos tecidos de suporte e por progressiva reabsorção óssea alveolar em torno das área apicais de dentes afetados;
É causada por uma infecção bacteriana mista na cavidade oral;
A cárie é considerada uma das principais fontes da infecção;
SIQUEIRA; RÔÇAS, 2009.
NAIR, 2004.
GRANULOMA PERIAPICAL A inflamação crônica devido a
periodontite periapical pode levar a formação de granulomas periapicais;
Tecido granulomatoso contendo células inflamatórias e grande quantidade de microvasos;
O tecido granulomatoso é rodeado por osso alveolar no ápice do dente, e a fonte de infecção é limitada aos canais dos dentes . BRITO et al, 2012 ; TAKEICHI et al, 1998 ; IHAN et al, 2009.
INTRODUÇÃO
Herpesvírus oncogênico
Mononucleose infecciosa , Linfoma de Burkitt, Doença de Hodgkin e Linfoma de células T
Epstein-Barr x Reações inflamatórias
Presença do EBV na periodontite periapical relacionada à injúria do tecido e danos às células
O vírus Epstein-Barr em granulomas periapical parece ser importante na reação imune periapical e na promoção de nova terapia farmacológica
VÍRUS EPSTEIN-BARR (EBV)
KUPPERS, 2003.
SINN; DITTMER, 2009
OBJETIVO O propósito desse estudo foi avaliar se o vírus
Epstein-Barr está presente em granulomas periapicais e em infiltrados inflamatórios.
MATERIAIS E MÉTODOS PACIENTES: 40 pacientes (9 homens e 31 mulheres ; 24-78 anos) encaminhados do Departamento
de Endodontia da Faculdade de Odontologia Hospitalar de Nihon (Tóquio – Japão)
Pacientes apresentavam Periodontite Periapical persistente
Sintomas clínicos: - ausência de dor latejante - dor à palpação da mucosa ao redor do ápice - dor à percussão
Imagem radiolúcida ao redor do ápice de todos os dentes
Pacientes não apresentavam doença sistêmica e não utilizaram antibióticos durante 6 meses prévios.
Extração de tecido gengival saudável de 10 pacientes
MATERIAIS E MÉTODOS EXAME PATOLÓGICO DAS AMOSTRAS Lesões periapicais e tecido gengival saudável removidos
cirurgicamente e mensurados em aproximadamente 0,82 e 0,44cm de diâmetro, respectivamente.
Tecidos preparados e corados com hematoxilina e eosina.
Áreas seccionadas selecionadas aleatoriamente de pelo menos 3 regiões diferentes em cada amostra.
Secções analisadas em microscópio a luz.
MATERIAIS E MÉTODOS
ANÁLISE QUANTITATIVA DO DNA DO EBV O vírus das amostras de granuloma
periapical foram detectados utilizando PCR em tempo real
Para determinação do número de cópias de DNA do EBV foi feita curva padrão, utilizando gráficos de semi-log.
MATERIAIS E MÉTODOS HIBRIDIZAÇÃO IN SITU PARA DETECTAR EBER O EBER é expresso em células latentes infectadas
pelo EBV, utilizado como marcador para detecção do vírus em tecidos
Utilizaram-se sondas específicas para o EBER
Secções de linfomas malignos foram utilizados como controle positivo para a hibidrização do EBER
granuloma periapical n=9 tecido gengival saudável n=5
MATERIAIS E MÉTODOS
ANÁLISE IMUNOHISTOQUÍMICA Determinar localização do LMP-1 nas
células de granulomas periapicais e tecido gengival saudável examinados
Para revelar o LMP-1 foi utilizado sistema de cores
MATERIAIS E MÉTODOS ANÁLISE ESTATÍSTICA Programa SPSS versão 15.0
A comparação entre granuloma periapical e tecido gengival saudável foi feita com o teste Mann-Whitney U
RESULTADOS EXAMINAÇÃO PATOLÓGICA DAS AMOSTRAS amostras. Das 40 leões periapicais, 32 exibiram tecido granulomatoso:
- microvasos
- células inflamatórias
Espécimes diagnósticados como GRANULOMAS PERIAPICAIS
Tecido gengival saudável apresentou mais fibras colágenas e menos células inflamatórias do que os granulomas periapicais
RESULTADOS ANÁLISE QUANTITATIVA DAS CÓPIAS DE DNA DO EBV Dos 32 granulomas periapicais, 25 (78,1%) espécimes exibiram presença do EBV
A média da cópia de DNA do EBV foi aproximadamente 8,688.01/µg.
O DNA do EBV não foi encontrado em tecido gengival saudável
Taxa de detecção do EBV em granulomas periapicais significativamente mais elevada que a taxa de detecção em tecido gengival saudável (p=0.0001)
RESULTADOS HIBRIDIZAÇÃO IN SITU DO EBER E IMUNOHISTOQUÍMICA DO
LMP-1 6 dos 9 granulomas periapicais (66,7%) revelaram expressão positiva
para o EBER
EBER localizado em núcleo e citoplasma de linfócitos B e células plasmáticas
Tecido gengival não apresentou positividade parar o EBER
RESULTADOS HIBRIDIZAÇÃO IN SITU DO EBER E IMUNOHISTOQUÍMICA PARA
O LMP-1 Todos os granulomas periapicais positivos para o EBER
apresentaram coloração positiva para o LMP-1
O LMP-1 foi expresso em linfócitos B e células plasmáticas
DISCUSSÃO
Taxa de detecção do EBV varia de 54, 6% a 85,7%Taxa de detecção do EBV = 78,1%
Diferentes métodos de detecção, estado da doença ou características regionais
Taxa de detecção do EBV relativamente maior
DISCUSSÃOMediana da cópia de DNA do EBV em granulomas = 8,688.01/µg Cópias de DNA do EBV em tecido gengival saudável não foi detectada
Granulomas periapicais incluem níveis extremamente elevados de EBV
O vírus Epstein-Barr pode ser importante na iniciação da inflamação periapical e no prolongamento da inflamação por conta do dano tecidual
Nível elevado de EBV em granulomas contribuem para reações imunes
As lesões inflamatórias localizadas podem ser reservatórios de EBV para infecções sistêmicas