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Sandra Heidtmann2010
DefiniDefiniçções:ões:
Pequena parte ou porção de alguma coisa que se dá para ver, provar ou analisar, a fim de que a qualidade do todo possa ser avaliada ou julgada;
Amostra:
Coleta:
Ato de "pegar“ , retirar, isolar, ou tomar uma alíquota do que se deseja conhecer analiticamente.
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O coletador
Peça fundamental para a confiabilidade analítica.
Quem deve fazer a coleta das Quem deve fazer a coleta das amostras? amostras?
Nunca deve ter certeza, mas sim, ter clareza
- amostra confiável;
- perspicaz e sensível;
- metodologia.
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� Alimentos�No mínimo 100 gramas de amostra; �Embalagens (frascos ou sacos estéreis)�Preferencialmente em condições assépticas�Respeitar o volume e a capacidade dos frascos ou embalagens; �Utensílios esterilizados;�Cuidado com a parte externa da embalagem ou frasco;�Abrir as embalagens somente pelo tempo necessário para a introdução da amostra;
�Cuidado ao manusear as amostras (risco de contaminação)�Verificar se a amostra pode ou não ser congelada.
Água
�Limpar a parte externa da saída da tubulação com etanol 70%, se resistente ao fogo flambar, �Deixar escorrer uma quantidade do produto, antes de iniciar a coleta. �Amostras de água clorada, necessário neutralizar o cloro residual
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� Amostras oriundas de:
Embalagens individuais;
Embalagens não individuais;
Surtos;
Superfícies;Contaminação superficial
Águas
Exposição ambiental
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Coletar a própria embalagem original fechada e intacta,
Quantidade em torno de 200g ou mL de amostra;
* se necessário várias embalagens
Alimentos em embalagens individuais:
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Porções representativas
Sempre que possível, mistura de toda massa de alimento,
- Amostras líquidas devem ser agitados;- Amostras moídas ou em pó devem ser revolvidos;- Amostras armazenados em reservatórios;- Amostras gordurosas;
* Quando não for possível, compor a unidade de amostra com porções de diferentes partes do conteúdo;
Alimentos em embalagens não individuais
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- Linhas de abastecimento - Reservatórios;- Poços artesianos;- Rios e lagos - Água engarrafada
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Técnica de esfregaço (zaragatoa (swab) ou esponja);
- Se necessário fazer neutralização; - utilizar delimitadores de área; e
diluentes adequados para a finalidade do teste.
Amostras cuja contaminação é predominantemente superficial
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Técnica de enxágüe - Utilizar diluente adequado para a finalidade do ensaio.
Amostras cuja contaminação é predominantemente superficial
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� Exposição de placas com meios de cultura
� Captação de ar através de equipamentos
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- amostra deve ser coletada o mais rápido possível,
• se não houverem sobras, coletar: - dos utensílios onde as refeições estavam acondicionadas, - das matérias-primas utilizada na preparação das refeições- das amostras das refeições similares preparadas posteriormente sob as mesmas condições.
* amostras de alimentos que tenham sofrido abuso de T°C ou que estejam deteriorados, não serão úteis nesse caso.
Alimentos envolvidos em surtos de toxinfecções alimentares:
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A identificação da amostra deve ser planejada, contendo no rótulo as informações necessárias, de forma sucinta e que não permita dúvidas ou perdas de informação
�Descrição da amostra�Data de fabricação e data da amostragem� Responsável pela Coleta� Lote� Local de amostragem� Solicitante � Condições de coleta� Objetivo da amostra:� Ensaios a serem realizados
IdentificaIdentificaçção das amostrasão das amostras::
1414
-
PreservaPreservaçção das amostrasão das amostras::
- Preservar a amostra é:
- evitar que a mesma altere suas características: físicas, químicas ou biológicas. - garantir do modo mais confiável possível que o produto a ser analisado estará presente nas mesmas condições que no local original.- reduzir a cinética de degradação do analito ao máximo.
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- Transportar as amostras de alimentos, preferencialmente da mesma forma que serão comercializadas;
- Evitar contaminação com outros alimentos e/ou produtos; - Alimentos comercialmente estéreis em embalagens herméticas, transportar em temperatura ambiente, protegendo de temperaturas superiores a 45°C;
- Alimentos com baixa atividade de água transportar em Tºambiente e protegido de umidade;
-
Transporte das amostrasTransporte das amostras: regras gerais : regras gerais
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Transporte das amostras: Transporte das amostras: regras gerais regras gerais
- Alimentos perecíveis refrigerados ou congelados, swab, esponjas ou enxágüe, transportar em caixa isotérmicas com gelo em gel (por até 24-30h). Se for por um período mais prolongado = gelo seco;
- Proteger as amostras de forma a não perder a sua identificação e sofrer alterações
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O laboratório deve checar no momento do recebimento da amostra se:
- está acompanhada da ficha de solicitação de ensaios.- as embalagens estão em condições adequadas;- estão identificadas; - as condições do transporte foram adequadas;
Recebimento das amostrasRecebimento das amostras::
-O laboratório deve ter: - procedimento em caso de anomalias- registro para anomalias e ações corretivas,- identificação unívoca
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Se não for possível :
- Amostras refrigeradas: mantidas sob refrigeração (máximo 36 h entre coleta e ensaio); - Amostras congeladas: mantidas sob congelamento (<18ºC) - Não perecíveis: estocadas em lugar fresco, protegidas da umidade e da luz; - Água: mantidas sob refrigeração (máximo 8 h entre coleta e ensaio);
Estocagem das amostras antes Estocagem das amostras antes dos ensaiosdos ensaios
Preferencialmente analisar assim que a amostra der entrada no laboratório .
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•Assegurar a limpeza da área de trabalho;
•Lavar as mãos e/ou calçar luvas;
•Preferencialmente trabalhar no interior da capela de fluxo laminar ou próximo ao bico de Bunsen;
•Proteger a área de trabalho com panos embebidos com solução desinfetante;
•Utilizar balanças calibradas;
•Limpar a área externa das embalagens (desinfetar) antes da abertura;
•Checar se todos os utensílios e instrumentos estão disponíveis e esterilizados.
Preparo das amostrasPreparo das amostras::algumas recomendaalgumas recomendaççõesões
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Diferentes objetivos:
- Ensaios de Presença ou ausência; - Ensaios Quantitativos;- Ensaios especiais; - Contra-prova
- Cuidado com a velocidade e tempo de homogeneização
Preparo das amostras: 1Preparo das amostras: 1ºº passo passo homogeneizahomogeneizaçção e retirada da unidade ão e retirada da unidade
analanalíítica tica
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HomogeneizaHomogeneizaçção e retirada da ão e retirada da unidade analunidade analíítica:tica:
Amostras em pó
2222
HomogeneizaHomogeneizaçção e retirada da ão e retirada da unidade analunidade analíítica: tica:
amostras samostras sóólidaslidas
2323
HomogeneizaHomogeneizaçção e retirada da ão e retirada da unidade analunidade analíítica: tica:
amostras samostras sóólidaslidas
2424
HomogeneizaHomogeneizaçção e retirada da ão e retirada da unidade analunidade analíítica: tica:
amostras samostras sóólidas (empanados)lidas (empanados)
2525
HomogeneizaHomogeneizaçção e retirada da ão e retirada da unidade analunidade analíítica: tica:
amostras pastosasamostras pastosas
2626
HomogeneizaHomogeneizaçção e retirada da ão e retirada da unidade analunidade analíítica:tica:
amostras lamostras lííquidasquidas
2727
* fundir em banho-maria 40ºC/ 15’
HomogeneizaHomogeneizaçção e retirada da ão e retirada da unidade analunidade analíítica: tica:
amostras gordurosasamostras gordurosas
2828
HomogeneizaHomogeneizaçção e retirada da ão e retirada da unidade analunidade analíítica: tica: amostras heterogêneasamostras heterogêneas
2929
HomogeneizaHomogeneizaçção e retirada da ão e retirada da unidade analunidade analíítica: tica:
zaragatoa; zaragatoa; áágua e enxgua e enxáággüüee
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Normalmente partimos de uma diluição inicial de 1: 10
ex: 25g + 225 mL
- Caldos de pré- enriquecimento; - Caldos diferenciados; - Para os demais
• solução água peptonada 0,1%• solução salina 0,85%• tampão fosfato pH 7,2• solução salina peptonada
Preparo das amostras: 2Preparo das amostras: 2ºººººººº passo passo preparo da primeira diluipreparo da primeira diluiççççççççãoão
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� Diluições 1:9�solução peptona 0,1%�solução salina 0,85%�tampão fosfato pH 7,2�solução salina peptonada
* cuidado com o intervalo de tempo entre as diluições;
* se necessário manter em refrigeração;
* cuidado com as pipetas
