renata rodrigues cocco universidade federal de são...
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15/09/2016
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Renata Rodrigues Cocco
Universidade Federal de São Paulo
PROAL – 2004 J Pediatr (Rio J). 2004;80(3):203-10
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PROAL 2004
Desenho do estudo: IgE total /específica para alérgenos inalatórios e alimentares (RAST, UniCAP®,Pharmacia) : 457 crianças (1-12 anos) acompanhadas em serviços de Alergia Pediátrica nas 5 regiões brasileiras + 62 controles pareados. <2 anos = 19,4%; 2 - 3a = 20,9%; 3 - 4a = 14,5%; 4 - 5a = 21,0% ; 5 - 12a = 24,2%.
4 grupos • Lactentes sibilantes (n = 20) ~5% • Alergia Alimentar (n = 16) ~4% • Dermatite atópica (n = 56) ~15% • Alergias respiratórias (n =348) ~76%
Alérgenos avaliados Inalatórios: D. pteronyssinus, D. farinae, Blomia tropicalis, epitélio de cão, epitélio de gato, epitélio de cavalo, epitélio de vaca, fungos, polens (gramíneas) e barata. Alimentares: leite de vaca, ovo, amendoim, trigo, painel de peixes/frutos do mar. Valores >0,35 kU/L: positivos
J Pediatr (Rio J). 2004;80(3):203-10
IgE específica + para inalantes e/ou alimentos: 361/457 (79%) dos pacientes e 16/62 (25,8%) controles
PROAL 2004
Distribuição dos pacientes de acordo com a positividade do teste aos diferentes alérgenos
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IgE específica + para inalantes e/ou alimentos: 361/457 (79%) dos pacientes e 16/62 (25,8%) controles
PROAL 2004
Distribuição dos pacientes de acordo com a positividade do teste aos diferentes alérgenos
PROAL 2004
Pacientes com testes positivos de acordo com o grupo de doença à qual pertencem
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2004
2014
Avanço da Biologia Molecular
- Melhor conhecimento das proteínas alergênicas
- Melhor acurácia no diagnóstico
- Aumento no número de proteínas identificadas, clonadas e disponíveis para análise laboratorial (detecção IgE específica).
- Componentes para diagnóstico (CRD): prognóstico, risco de reações cruzadas, marcadores de reações clínicas, história natural da doença, refinamento de imunoterapias.
2004 – 2014:
- Alteração no padrão de sensibilização da população brasileira?
- Análise da sensibilização aos componentes atualmente disponíveis.
- O padrão de sensibilização varia de acordo com a doença alérgica avaliada?
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“Sensibilização a alérgenos inalantes e alimentares em crianças brasileiras atópicas pela mensuração in vitro de IgE específica– proteínas totais e componentes – Projeto Alergia (PROAL) II” Renata Rodrigues Cocco Carolina Aranda Dirceu Solé Disciplina de Alergia, Imunologia Clínica e Reumatologia – Departamento de Pediatria da Escola Paulista de Medicina - Universidade Federal de São Paulo.
Objetivos: 1. Caracterizar o padrão de sensibilização de pacientes atópicos
acompanhados em diferentes serviços de alergia no Brasil, incluindo a análise dos principais componentes proteicos (CRD).
2. Comparar os dados atuais com os obtidos em 2004 (PROAL I).
3. Avaliar a relação de proteínas totais e seus respectivos componentes.
4. Comparar o método convencional de mensuração de IgE específica (ImmunoCAP®) com a tecnologia do microarray (ImmunoCAP ISAC®).
5. Avaliar a relação entre os resultados de Phadiatop (USA, EU, infant) e a IgE total.
PROAL II – 2014/2016
Métodos: - 500 crianças e adolescentes provenientes de 11 serviços de alergia em diferentes
regiões do país (cerca de 40 pacientes/centro), com idade entre 6 meses e 18 anos: 400 doentes + 100 controles não alérgicos, pareados por gênero e idade.
Critérios de inclusão: - Pacientes atendidos em serviços especializados em alergia de diferentes regiões do país e que tenham como diagnóstico: lactente sibilante, dermatite atópica, asma e/ou rinite alérgica e alergia alimentar, alocados de modo a constituírem grupos homogêneos quanto ao número. Os pacientes e/ou seus familiares foram submetidos a um questionário e a coleta de sangue periférico para análise: 1. Mensuração de IgE total. 2. Mensuração de Phadiatop (EU, USA, infant). 3. Avaliação de IgE específica de 23 fontes alergênicas. 4. Na dependência da positividade das proteínas totais, os respectivos componentes. 5. Mensuração individual do ISAC para avaliação da eficácia clínica.
PROAL II – 2014/2016
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PROAL II - 2016
Centros participantes: 1. Coordenação: UNIFESP Dr. Dirceu Solé Dra Carolina Aranda Dra Renata R. Cocco 2. Instituto da Criança/USP Dr. Antonio Carlos Pastorino 3. Universidade Federal de Passo Fundo Dr. Arnaldo Porto 4. UFRJ Dra. Ekaterini Goudouris 5. UFPE Dr. Emanuel Sarinho 6. Hospital Nipo-Brasileiro/SP Dr. Flávio Sano 7. UFSE Dra Jackeline Motta Franco
8. Clínica de Alergia de Goiânia Dra. Letícia Chavarria 9. UFMT Dra Lillian Moraes 10. UFPR Dr. Nelson Rosário 11. FMABC Dra Neusa Wandalsen Dra Márcia Mallozi
Passo 1: Submissão do projeto ao comitê de ética (CEP) respectivo de cada centro
Passo 2: Seleção dos pacientes e assinatura do termo de consentimento:
Passo 3: Preenchimento da ficha clínica
Passo 4: Coleta de sangue.
Passo 5: Após a finalização das coletas – envio das fichas clínicas + soros (UNIFESP)
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1. D. pteronyssinus (d1)
2. D. farinae (d2)
3. B. tropicalis (d201)
4. Mix castanhas: pecan, castanha de
caju, pistache, nozes (fx22)
5. P. americana (i206)
6. Epitélio de gato (e1)
7. Epitélio de cavalo (e3)
8. Epitélio de vaca (e4)
9. Epitélio de cão (e5)
10. Mix de gramíneas (gx2)
11. Mix de polens (wx1)
12. Mix de fungos (mx1)
13. Mix de pólens de árvores (tx3)
14. Ascaris lumbricoides (p1)
15. Clara de ovo (f1)
16. Leite de vaca (f2)
17. Peixe (f3)
18. Trigo (f4)
19. Milho (f8)
20. Amendoim (f13)
21. Soja (f14)
22. Camarão (f24)
23. Castanha de caju (f202)
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PROTEÍNAS TOTAIS AVALIADAS
inalantes alimentos parasita
1. f424 rGad c 1 Parvalbumina (peixe)
2. f416 rTri a 19 Omega-5 Gliadina (trigo)
3. f433 rTri a 14 nLTP (trigo)
4. f98 Gliadina (trigo)
5. f422 Ara h 1 (amendoim)
6. f423 Ara h 2 (amendoim)
7. f424 Ara h 3 (amendoim)
8. f352 Ara h 8 PR-10 (amendoim)
9. f427 Ara h 9 nLTP (amendoim)
10. f353 rGlym4 PR-10 (soja)
11. f431 rGly m 5 Beta-conglicinina (soja)
12. f432 rGly m 6 Glicinina (soja)
13. f233 nGal d 1 Ovomucoide (ovo)
14. f232 nGal d 2 Ovalbumina (ovo)
15. f323 nGal d 3 Conalbumina (ovo)
16. f76 nBos d 4 Alfa-lactalbumina (leite)
17. f77 nBos d 5 Beta-lactoglobulina (leite)
18. f78 nBos d 8 Caseina (leite)
19. e204 nBos d 5 albumina sérica bovina
(leite/epitélio de animais)
20. d202 Der p 1 (ácaro)
21. d203 rDerp 2 (ácaro)
22. d205 Der p 10 Tropomiosina (ácaro)
23. rPen a 1 Tropomiosina (camarão)
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COMPONENTES AVALIADOS MEDIANTE POSITIVIDADE DA FONTE ALERGÊNICA
inalantes alimentos
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PROAL I vs II: semelhanças e diferenças
PROAL I PROAL II
Faixa etária 6m-12 anos 6m-18 anos
Distinção fenótipos Predominância alergias respiratórias (~76%)
Divisão homogênea (asma/rinite, lactente sibilante, DA, AA)
Alérgenos completos avaliados
10 aeroalérgenos, 5 alimentos
12 aeroalérgenos, 10 alimentos, 1 parasita
Componentes (CRD) avaliados
Nenhum 23
Centros brasileiros envolvidos
13 11
Valor de referência IgE específica (kU/L)
0,35 0,1
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1. Aplicação ficha clínica
- 120 questionários: 1-18 anos de idade
• Média de idade do início dos sintomas: 7,8 meses
• Média de idade na data da avaliação: 56,5 meses (4,7 anos)
• Prevalência dos alérgenos alimentares mais referidos:
1. Ficha clínica: avaliação parcial dos resultados
Aceito para apresentação no Food Allergy and Anaphylaxis Meeting, Roma, out/2016
leite
ovo
trigo
soja
amendoim
frutos do mar
86%
2,5%
2,5%
3,3%
4,1%
32%
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1. Ficha clínica: avaliação parcial dos resultados
AA única 72%
AA múltipla 28%
Número de alérgenos alimentares referidos
44
29
22,5
2,5 1,7 05
101520253035404550
Sintomas referidos
Aceito para apresentação no Food Allergy and Anaphylaxis Meeting, Roma, out/2016
leve 33%
moderada 29%
grave 38%
Gravidade dos sintomas
(17% com hospitalizações decorrentes da AA)
1. Ficha clínica: avaliação parcial dos resultados (todos os grupos)
História familiar alergia
73,1%
26,9%
47,3% 52,7%
92,5%
7,5%
91,4%
8,6%
Não Sim Não Sim Não Sim Não Sim
Asma Rinite AA DA
47.5% : asma e/ou RA.
TPO para diagnóstico
0,0%
10,0%
20,0%
30,0%
40,0%
50,0%
60,0%
70,0%
80,0%
Nãorealizou
Realizou Negativo Positivo
TPO Resultado TPO
36%
64% 72,7%
27,3%
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11
76,3%
23,7%
77,4%
22,6%
93,5%
6,5%
0,0% 20,0% 40,0% 60,0% 80,0% 100,0%
1
Tabagismo gestacional
Tabagismo
Tabagismo passivo
Não
Não
Não
89,2%
10,8%
0,0%
10,0%
20,0%
30,0%
40,0%
50,0%
60,0%
70,0%
80,0%
90,0%
100,0%
Não Sim
Prematuridade
93,4%
6,6%
68,1%
31,9%
Não
Sim
Não
Sim
Presença de animais domésticos
Não
Não Gato
Cão
1. Ficha clínica: avaliação parcial dos resultados (todos os grupos)
Aceito para apresentação no Food Allergy and Anaphylaxis Meeting, Roma, out/2016
Histórico Familiar de asma 100,0%
Não 73,1% Sim 26,9%
Histórico Familiar de rinite 100,0%
Não 47,3% Sim 52,7%
Histórico Familiar de DA 100,0%
Não 92,5% Sim 7,5%
Histórico Familiar de AA 100,0%
Não 91,4% Sim 8,6%
Tabagismo 100,0% Não 76,3% Sim 23,7%
Tabagismo passivo 100,0% Não 77,4% Sim 22,6%
Tabagismo gestacional 100,0% Não 93,5% Sim 6,5%
Animais 100,0% Não 64,5% Sim 35,5%
Gato 100,0% Não 93,4% Sim 6,6%
Cão 100,0% Não 68,1% Sim 31,9%
Outro 100,0% Não 98,9% Sim 1,1%
Prematuridade 100,0% Não 89,2% Sim 10,8%
- Fatores de risco associados: • História familiar de RA (OR=4.1; 95%CI=1.41-4.5),
• História familiar de asma (OR=2.5; 95%CI=1.5-3.7)
• Tabagismo (OR=1.4; 95%=1.1-2.0).
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2. Subdivisão em 4 grupos + 100 controles
- Lactente sibilante
- Asma/rinite alérgica
- Dermatite atópica
- Alergia Alimentar: 92 pacientes – perfil:
Média DP Mínimo Máximo 1° Quartil Mediana 3° Quartil N Média (IC95%)
Idade atual (meses) 54,48 (4,5a)
42,76 6,00 204,00 (17a)
24,00 (2a)
36,00 (3a)
84,00 (7a)
92 54,48 (45,62 - 63,33)
Idade de início (meses) 6,66 5,34 1,00 24,00 4,00 5,00 7,00 92 6,66 (5,56 - 7,77)
N %
Gênero 92 100,0
Feminino 44 47,8
Masculino 48 52,2
Classificação da doença principal
92 100,0
Leve 25 27,2
Moderada 37 40,2
Grave 30 32,6
GêneroClassificação da doença principal
Chi-Square ,174a 2,370b
df 1 2
Asymp. Sig. ,677 ,306
18,5%
35,9%
41,3%
43,5%
43,5%
45,7%
56,5%
70,7%
83,7%
peixe
castanha caju
camarão
milho
soja
amendoim
trigo
clara de ovo
leite
Prevalência alérgenos alimentares
RESULTADOS PRELIMINARES PROAL II - 2016
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13
29,3%
30,4%
37,0%
38,0%
44,6%
52,7%
54,3%
67,4%
70,7%
72,5%
81,5%
cavalo
fungo mix
barata de esgoto
gramíneas
ascaris
gato
Blomia tropicalis
cão
D fariane
D pteronyssinus
vaca
Prevalência outros alérgenos
RESULTADOS PRELIMINARES PROAL II - 2016
0,00 5,00 10,00 15,00 20,00 25,00 30,00
fungo mix
castanha caju
soja
barata de esgoto
cavalo
peixe
milho
amendoim
ascaris
gramíneas
trigo
camarão
cão
gato
clara de ovo
vaca
Blomia tropicalis
leite
D fariane
D pteronyssinus
0,19
0,67
0,88
0,99
1,05
1,07
1,20
1,60
1,89
2,04
2,81
3,11
3,49
3,98
6,02
6,38
12,12
17,89
20,13
28,46
MÉDIAS DOS VALORES SÉRICOS DE IgE ESPECÍFICA (kU/L)
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14
62,50
50,00
43,80
18,00
12,50
6,30
62,50
6,30
6,30
6,30
18,80
50,00
68,80
31,30
12,50
18,80
12,50
72,7
70,7
54,3
37
52,7
38
81,5
67,4
29,3
30,4
18,5
70,7
83,7
56,5
45,7
43,5
43,5
D.pt
Df
Blomia
Barata
Gato
Gramíneas
Vaca
cão
cavalo
fungos
peixe
ovo
leite
trigo
amendoim
soja
milho
PROAL I vs PROAL II: sensibilização do grupo com alergia alimentar
RESULTADOS PRELIMINARES PROAL II – 2016
ISAC
trop. camarão Barata trop. ácaro Ovoalbumina ASB Βlac Caseína αlac Camarão (AQ) Anisakis Ácaro Blomia D. farinae D. farinae D. pteronyss. D. pteronyss.
trop. camarão Barata
trop. ácaro Ovoalbumina
ASB Βlac
Caseína αlac
Camarão (AQ) Anisakis
Ácaro Blomia
D. farinae D. farinae
D. pteronyss. D. pteronyss.
(n=93) (n=123)
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• Análise dos componentes: • Presença de marcadores de reatividade clínica (ex, Ara h 1,2,3; ω-5
gliadina, ovomucoide);
• Identificação da sensibilização a albumina sérica bovina ImmunoCAP (reatividade cruzada leite e epitélio de vaca?)
• Perfil brasileiro de sensibilização aos componentes proteicos (ImmunoCAP/ISAC).
• Avaliação do perfil de sensibilização de cada um dos grupos, comparação entre si e com o grupo controle.
• Identificação de possíveis marcadores de sensibilização
• lactente sibilante: asma? DA? AA?
...Girassol 2017, 2018, 2019, 2020.....................................................
PROAL II – A SEGUIR...........
AGRADECIMENTOS
Dr. Dirceu Solé Dra Carolina Aranda Felipe Pierotti
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AGRADECIMENTOS
Dr. Dirceu Solé Dra Carolina Aranda Felipe Pierotti Dr. Antonio Carlos Pastorino Dr. Arnaldo Porto Dra. Ekaterini Goudouris Dr. Emanuel Sarinho Dr. Flávio Sano Dra. Jackeline Motta Franco Dra Lillian Moraes Dra. Márcia Mallozi Dra. Maria Letícia Chavarria Dr. Nelson Rosário Dra. Neusa Wandalsen
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