relatório ubiquidade em meios de cultura alternativos

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Departamento Acadêmico de Química Curso Técnico Integrado Disciplina: Microbiologia Industrial Relatório de Aulas Práticas Alunos: Maria Luiza Andrade Aquino Mariana Gabriela de Oliveira Ruslam Romaine Eleutério Subturma: T3 Professora: Fernanda Badotti Meios de Cultura Alternativos 1. Introdução Os microrganismos vivem em hábitat mais amplamente variados na Terra ou até mesmo em outros planetas. Essa ubiqüidade de microrganismos é baseada em três características principais: tamanho reduzido, que permite uma grande capacidade de dispersão; variabilidade e flexibilidade metabólica que permite aos microrganismos usar diversas fontes de energia e carbono e crescer sob muitas condições físicas diferentes além de adaptar e tolerar rapidamente condições ambientais desfavoráveis; e sua grande capacidade de transferência horizontal de genes, que lhes permite recombinar e coletar caracteres positivos e persistir durante um longo tempo adaptando-se a condições ambientais instáveis. O grupo de microrganismos caracteriza-se por ser completamente heterogêneo tendo como única característica comum o pequeno tamanho. Além disso, interagem com outros seres vivos, quer como organismos comensais não induzindo qualquer dano, quer como organismos simbiônticos que ambos se beneficiam da relação ou como organismos patogênicos que causam enfermidades. Acredita-se que metade da biomassa do planeta seja constituída por microrganismos e os outros 50% são distribuídos entre 35% de plantas e 15% de animais.

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Departamento Acadêmico de QuímicaCurso Técnico Integrado Disciplina: Microbiologia Industrial Relatório de Aulas PráticasAlunos: Maria Luiza Andrade Aquino Mariana Gabriela de Oliveira Ruslam Romaine Eleutério Subturma: T3 Professora: Fernanda BadottiMeios de Cultura Alternativos1. Introdução Os microrganismos vivem em hábitat mais amplamente variados na Terra ou até mesmo em outros planetas. Essa ubiqüidade de microrganismos é baseada em três características principais: tamanho reduzido, q

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Page 1: Relatório ubiquidade em meios de cultura alternativos

Departamento Acadêmico de Química Curso Técnico Integrado

Disciplina: Microbiologia Industrial Relatório de Aulas Práticas

Alunos: Maria Luiza Andrade Aquino Mariana Gabriela de Oliveira Ruslam Romaine Eleutério

Subturma: T3Professora: Fernanda Badotti

Meios de Cultura Alternativos

1. Introdução

Os microrganismos vivem em hábitat mais amplamente variados na Terra ou até mesmo em

outros planetas. Essa ubiqüidade de microrganismos é baseada em três características principais:

tamanho reduzido, que permite uma grande capacidade de dispersão; variabilidade e flexibilidade

metabólica que permite aos microrganismos usar diversas fontes de energia e carbono e crescer

sob muitas condições físicas diferentes além de adaptar e tolerar rapidamente condições

ambientais desfavoráveis; e sua grande capacidade de transferência horizontal de genes, que

lhes permite recombinar e coletar caracteres positivos e persistir durante um longo tempo

adaptando-se a condições ambientais instáveis.

O grupo de microrganismos caracteriza-se por ser completamente heterogêneo tendo como única

característica comum o pequeno tamanho. Além disso, interagem com outros seres vivos, quer

como organismos comensais não induzindo qualquer dano, quer como organismos simbiônticos

que ambos se beneficiam da relação ou como organismos patogênicos que causam

enfermidades. Acredita-se que metade da biomassa do planeta seja constituída por

microrganismos e os outros 50% são distribuídos entre 35% de plantas e 15% de animais.

Em 1997, foram publicados relatos das expedições da NASA a Marte, sugerindo a presença de

microrganismos em minerais lá encontrados, sendo que partículas semelhantes foram também

detectadas em meteoritos que atingiram a Terra.

Microrganismos são encontrados em fontes de águas ferventes, outros em minúsculos orifícios

em rochas a um quilômetro ou mais de profundidade. Foram isoladas cerca de 5 mil bactérias de

cada milímetro de neve do Pólo Norte. Existem boas evidências de que bactérias se

desenvolveram em nuvens, a partir de amostras coletadas sobre os picos das montanhas nos

Alpes, um ambiente com temperaturas muito baixas, poucos nutrientes e sujeitos a altos níveis de

radiação UV. Explorações nas profundezas do oceano têm revelado um grande número de

Page 2: Relatório ubiquidade em meios de cultura alternativos

microrganismos que sobrevivem à eterna escuridão e sujeitos a pressões tão altas.

Microrganismos também são encontrados em riachos de montanhas originados do derretimento

de neve e em águas quase saturadas de sais, tais como o Mar Morto. Sabe-se que em cerca de

1013 células de um ser humano podem ser encontradas, em média, cerca de 1014 células

bacterianas.

Os microrganismos formam uma comunidade viva e vibrante no solo. Um solo típico tem milhões

de bactérias em cada grama. Essa população microbiana é maior nos poucos centímetros do topo

do solo e declina rapidamente com a profundidade. Nenhum único meio nutriente ou condição de

crescimento pode encontrar todos os nutrientes e outras exigências necessárias para todos os

microrganismos do solo. Nos ciclos biogeoquímicos, os elementos são oxidados e reduzidos por

microrganismos para fornecer suas necessidades metabólicas. Sem os ciclos biogeoquímicos, a

vida na Terra não existiria.

Os microrganismos do ar podem ter origem do solo que são passados para o ar com o auxílio dos

ventos, através de gotas de água que se desprendem da superfície, através de depósitos de

resíduos, através da respiração e expelição de seres vivos. Os fatores que afetam a microbiota do

ar são: a umidade, a temperatura, a radiação e a densidade populacional. Os principais tipos de

microrganismos encontrados no ar são os esporos de fungos e bactérias esporulantes.

Microrganismos autotróficos crescem em meios quimicamente definidos. Muitas bactéria e fungos

crescem normalmente em meios complexos, que são compostos de nutrientes como extratos de

carnes ou de plantas ou de produtos de digestão protéica dessas ou de outras fontes. A

composição química exata pode conter muitas variações em diferentes culturas dos produtos. No

meio complexo o principal fornecedor de energia, carbono, nitrogênio e enxofre é o componente

protéico. A proteína é uma molécula grande relativamente insolúvel que a minoria dos

microrganismos pode utilizar diretamente. No entanto, por meio de uma digestão parcial dela,

utilizando produtos ácidos ou enzimas, ocorre a produção de pequenas cadeias de aminoácidos

denominadas peptonas. Esses fragmentos pequenos e solúveis podem ser matabolizados pelos

microrganismos e possuem composição desconhecida.

Meios com caldo de cana são ricos em sacarose, o que favorece o crescimento de leveduras, já

que elas utilizam o açúcar para obter energia (ATP). Meios a base de batata são ricos em

carboidratos complexos que os fungos são capazes de matabolizar e que bactérias normalmente

não conseguem utilizar como nutrientes. Meios a base de caldo de carne e frango são utilizados

para o crescimento de bactérias, pois são ricos em proteínas, lipídios e vitaminas que são

indispensáveis para o crescimento bacteriano.

2. Objetivos

Page 3: Relatório ubiquidade em meios de cultura alternativos

Produzir meios alternativos de cultura de menor custo; verificar a existência de diferentes tipos de

microrganismos em diversos ambientes e superfícies; reconhecer e compreender a relação meio

de cultura e tipos de microrganismos e reconhecer a ubiqüidade de microrganismos e a

interferência do tempo de exposição no crescimento microbiano.

3. Materiais necessários

3.1 Reagentes:

Açúcar (glicose)

Ágar Nutriente

Ágar Sabouraud

Água destilada

Caldo de frango ou carne

Extrato de levedura

Extrato de solo

Garapa

Infuso de batata

K2HPO4

Solução de HCl

Solução de NaOH

3.2 Materiais

Alça de Drigalski

Barbante

Bastão de vidro

Béqueres

Caneta permanente de ponta fina

Erlenmeyer

Espátula

Estante para tubos de ensaio

Fita de autoclave

Fósforos

Micropipeta automática

Papel Kraft

Placas de Petri

Ponteiras para pipetas

Proveta

Page 4: Relatório ubiquidade em meios de cultura alternativos

Recipiente de plástico

Saco plástico

Swabs

Tubos de ensaio

3.3 Equipamentos

Autoclave

Balança semi-analítica

Bico de Bunsen

Capela de fluxo laminar

Estufa incubadora

Geladeira

Panela de pressão

4. 1ª etapa: Preparação da atividade prática

4.1 Preenchimento da Ficha Formativa de Reagentes (Tabela 01)

NomesMeios de cultura/

reagentes

Constituintes Composição Química

Descrição Físico-

química

Riscos à saúde/

impacto ambiental

Manuseio Estocagem Referência bibliográ-

fica

Ágar Nutriente

(500 g)

- Digestão Péptica de Tecido Animal (5 g/L)

- Extrato de carne (1,5 g/L)

- Extrato de levedura (1,5 g/L)

- Ágar (15 g/L)

- Cloreto de Sódio (5 g/L)

- polissacarí-

deos (agarose e

agaropectina)

- carboidratos

- maltodextrina

pH: 7,4 ± 0,2

Aparência do pó: amarelo, homogêneo e livre circulante

Solidificação: Firme, comparável com gel de agarose de 1.5%

Coloração: Cor âmbar claro. Transparência: Gel levemente opalescente.

O descarte

do ágar propicia o crescimen-

to de microrga-

nismos em meios

aquáticos

- Balança

- Autoclave

- Bico de Bunsen

- micropi-petador.

- espátula

- uso de jaleco

Deve ser armazenado

no frasco com tampa

rosqueável, a temperatura

ambiente (abaixo de 30 ºC) e após a

preparação do meio, de 2-8

ºC.

Possui validade de 5 anos (meio

não preparado)

-SPLabor.Disponível em: http://www.splabor.com.br/meios-de-cultura/meios-nao-seletivos/agar-nutriente-modelo-m001.html

Page 5: Relatório ubiquidade em meios de cultura alternativos

Meio com caldo de

cana

- Água

- carboidratos

- Vitamina B6

- Vitamina C.

- Ágar

- Extrato de levedura

- cálcio

- fósforo

- ferro

- potássio

- glicose

- polissacarí-

deos (agarose e

agaropectina)

- maltodextrina

- pH 6

- meio homogêneo.

Se descartado no esgoto comum, faz com que os

microor-ganismos

se multipli-quem de

forma excessiva.

- Balança

- Autoclave

- Bico de Bunsen

- micropi-petador.

- espátula

- uso de jaleco

Manter refrigerado

Ver referências bibliográ-

ficas(Item 5.1.4)

Meio com caldo de carne/frango

- Vitaminas B1, B2, B6, B12

- Niacina

- Ácido pantotênico

- Folacina

- Ácidos Graxos

- Ágar

- Mel

- Água

- Ferro

- magnésio

- fósforo

- potássio

- zinco

- selênio

- glicose

- polissacarí-

deos (agarose e

agaropectina)

- pH 7

- meio homogêneo.

Se descartado no esgoto comum, faz com que os

microor-ganismos

se multipli-quem de

forma excessiva.

- Balança

- Autoclave

- Bico de Bunsen

- micropi-petador.

- espátula

- uso de jaleco

Manter refrigerado

Ver referências bibliográ-

ficas(Item 5.1.4)

Meio à base de batata

- Ágar

- Água destilada

- Infuso de batata

- glicose

- proteínas

- carboidratos

(amido)

- fibras alimentares

- glicose

- polissacarí-

deos (agarose e

agaropectina)

- pH 5

- meio homogêneo

Se descartado no esgoto comum, faz com que os

microor-ganismos

se multipli-quem de

forma excessiva.

- Balança

- Autoclave

- Bico de Bunsen

- micropi-petador.

- espátula

- uso de jaleco

Manter refrigerado

Ver referências bibliográ-

ficas(Item 5.1.4)

Extrato de solo

- Solo neutro

- Água destilada

- Ágar

- glicose

- Micro e macro nutrientes vari-ados

- K2HPO4

- fibras

- celulose

- polissacarí-deos (agarose e agaropectina)

- pH entre 5 e 7

- meio homogêneo.

Se descartado no esgoto comum, faz com que os

microor-ganismos cresçam de forma excessiva.

- Balança

- Autoclave

- Bico de Bunsen

- micropi-petador.

- espátula

- jaleco

Manter refrigerado

Ver referências bibliográ-

ficas(Item 5.1.4)

Page 6: Relatório ubiquidade em meios de cultura alternativos

Ágar Sabouraud

- Peptona

- dextrose

- Ágar

- Extrato de

levedura

- glicose

- polissacarí-

deos (agarose e

agaropectina)

- maltodextrina

- Pó fino e higroscópico

- meio homogêneo

- pH baixo (5,6)

O descarte do ágar

propicia o crescimen-

to de microrga-

nismos em meios

aquáticos ou em esgoto comum

- Balança

- Autoclave

- Bico de Bunsen

- micropi-petador.

- espátula

- uso de jaleco

Deve ser armazenado

no frasco com tampa

rosqueável, a temperatura

ambiente (abaixo de 30 ºC) e após a

preparação do meio, de 2-8 ºC.

http://www.hexasystens.com.br/ver.asp?Dep=4797&Secao=79584&Cat=6068&Produto=100378

4.2 Planejamento de gastos de soluções/meios de cultura e cálculos para o planejamento

do(a)s mesmo(a)s (Tabela 02)

Meios de cultura/ soluções

Quantidade/ Grupo (em mL)

Quantidade/ Sub-

turma (em mL)

Total por turma (em

mL)

Volume final de

reagente preparado

por T

Volume final de

reagente usadopor T

Custo de reagentes

fornecedores

Custo da

prática/ sub-

turmaMeio à base de batata

20 mL de meio: 0,2 g de glicose;

0,4 g de ágar.

200 mL de meio: 2 g

de glicose; 4 g de ágar.

600 mL de meio: 6 g

de glicose; 12 g de

ágar.

200 mL de meio: 2 g de glicose; 4 g

de ágar

80 mL de meio:

0,8 g de glicose; 1,6 g de

ágar

R$ 2,59/Kg de batata; R$ 119,00/

500 g de ágar; R$

1,35/ g de glicose

R$ 2,75

Meio com caldo de

carne

20 mL de meio: 0,2 g

de mel; 0,4 g de

ágar

200 mL de meio: 0,4 g

de mel; 0,8 g de

ágar

600 mL de meio: 1,2 g

de mel; 2,4 g de

ágar

200 mL de meio: 0,4 g

de mel; 0,8 g de

ágar

80 mL de meio:

0,8 g de mel; 1,6 g

de ágar.

R$ 3,50/200 g de carne; R$

119,00/ 500 g de ágar;

R$ 0,50/4 g de mel

R$ 1,48

Meio com caldo de frango

20 mL de meio: 0,2 g

de mel; 0,4 g de

ágar

100 mL de meio: 1 g

de mel; 2 g de ágar.

300 mL de meio: 3 g

de mel; 6 g de ágar

100 mL de meio: 1 g de mel; 2 g de

ágar.

80 mL de meio:

0,8 g de mel; 1,6 g

de ágar

R$ 2,50/500 g de frango;

R$ 119,00/ 500 g de

ágar; R$ 0,50/4 g

de mel

R$ 1,48

Meio com caldo de

cana

20 mL de meio:

1 mL de

200 mL de meio:

50 mL de

600 mL de meio:

150 mL de

200 mL de meio:

50 mL de

80 mL de meio:

4 mL de

R$ 2,50/500 mL de

garapa;

R$ 0,46

Page 7: Relatório ubiquidade em meios de cultura alternativos

garapa, 0,1 g de

extrato de levedura; 0,2 g de

ágar

garapa; 10 g de

extrato de levedura;

2 g de ágar.

garapa; 15 g de

extrato de levedura;

6 g de ágar

garapa; 10 g de extrato

de levedura;

2 g de ágar.

garapa; 0,4 g de

extrato de levedura; 0,8 g de

ágar.

R$ 119,00/ 500 g de

ágar; R$ 0,13/g de

extrato de levedura

* O Ágar nutriente e o Á gar Sabouraud, usados na ubiqüidade de micro-organismos já estavam distribuídos nas placas

4.3 Cálculos dos meios de cultura/soluções necessárias à execução das práticas

Meio à base de batata, meio com caldo de carne e meio com caldo de cana

Por sub-turma foram preparados 200 mL de cada meio e distribuiu-se 20 mL em cada placa.

Foram preparadas 4 placas no T3, logo, utilizou-se 80 mL do meio.

1 placa de Petri __________ 20 mL

4 placas ____________ A

A = 80 mL

Supondo que cada sub-turma tenha preparado 200 mL, como são três na turma inteira,

preparou-se 600 mL de cada meio:

1T _________ 200 mL

3T ___________ B mL

B = 600 mL

Meio com caldo de frango

Por sub-turma foram preparados 100 mL de meio e distribuiu-se 20 mL em cada placa

Foram preparadas 4 placas no T3, logo, utilizou-se 80 mL do meio.

1 placa de Petri __________ 20 mL

4 placas ____________ A

A = 80 mL

Supondo que cada sub-turma tenha preparado 100 mL, como são três na turma inteira,

preparou-se 300 mL de cada meio:

1 T _________ 100 mL

3T ___________ C mL

C = 300 mL

Custo da prática

- Meio à base de batata

Para preparar o infuso de batata foram usados 500 g de batata; 1,6 g de ágar e 0,8 g de glicose

1000 Kg ______ R$ 2,59 500 g _____ R$ 119,00 1 g de glicose ___ R$ 1,35

500 g _____ D 1,6 g ____X 0,8 g ________ Y

D = R$ 1,29 X = R$ 0,38 Y = R$ 1,08

Page 8: Relatório ubiquidade em meios de cultura alternativos

- Meios com caldo de frango e carne

No preparo dos caldos, foram usados 200 g de frango e carne; 1,6 g de ágar; 0,8 g de mel

500 g _________ R$ 2,50 4 g de mel ____ R$ 0,50 R$ 1,00 + R$ 0,38 + R$ 0,10

200 g ___________ E 0,8 g _______ Z

E = R$ 1,00 Z = R$ 0,10

- Meio com caldo de cana

No preparo do meio foram usados 5 mL de garapa; 1,6 g de ágar; 0,4 g de extrato de levedura

500 mL _________ R$ 2,50 1 g de extrato de levedura _____ R$ 0,13

5 mL ___________ F 0,4 g _____________ W

F = R$ 0,03 W = R$ 0,05

5. 2ª etapa – Execução da atividade principal

5.1 Procedimentos/metodologia

Técnicas assépticas:

Antes do início da aula, realizar a lavagem de mãos e passar álcool em todas as bancadas. Para

realizar inoculações, utilizar a área em volta de um bico de Bunsen ligado ou a capela de fluxo

laminar.

I) Isolamento de fungos filamentosos

Meio à base de batata:

Pesar 500g de batata e adicionar a 500 mL de água.

Ferver por 15 min, filtrar com gaze e guardar o infuso.

Para cada 100 mL de infuso, adicionar 1g de glicose e 2g de ágar.

Ajustar o pH para 5.

Autoclavar.

De forma asséptica, adicionar o meio na placa Petri e aguardar a solidificação.

II) Isolamento de bactérias

Meios com caldo de carne e de frango

Cozinhar 200g de carne de frango e de boi em 500 mL de água.

Page 9: Relatório ubiquidade em meios de cultura alternativos

Verter o líquido em um recipiente.

Filtrar a água de cozimento, utilizando papel de gaze.

Adicionar 2g de mel para cada 100 mL de caldo.

Adicionar 2g de ágar para cada 100 mL.

Acertar o pH para 7 com solução de NaOH.

Esterilizar o meio em autoclave por 20 min a 121°C e 1atm.

Verter o meio esterilizado em placas de Petri, de forma asséptica.

Identificar a placa de Petri.

III) Isolamento de leveduras

Meio com caldo de cana

Para cada 5mL de caldo de cana, adicionar 0,5g de levedo de cerveja e 2g de ágar.

Completar o volume para 100mL utilizando uma proveta.

Acertar o pH para 6 utilizando as soluções devidas.

Esterilizar o meio em autoclave por 20min a 121°C e 1atm.

Verter o meio esterilizado em placas de Petri junto à chama do bico de Bunsen e deixar solidificar.

Identificar a placa de Petri.

IV) Extrato de solo

Pesar 500g de terra e adicionar a 500 mL de água.

Ferver por 15 min, filtrar com gaze e guardar o infuso.

Para cada 100 mL de infuso, adicionar 1g de glicose e 2g de ágar.

Ajustar o pH para 5.

Autoclavar.

De forma asséptica, adicionar o meio na placa Petri e esperar até que solidifique.

V) Inoculação nos meios alternativos:

Com o swab em mãos, ir ao local escolhido e recolher os microorganismos.

De forma asséptica, inocular os microorganismos nas placas já preparadas.

No caso do meio a base de extrato de terra, realizar diluições de 10 -4 e realizar a técnica de pour plate com as diluições a menos 2 e menos 4.

Incubar à temperatura de

Page 10: Relatório ubiquidade em meios de cultura alternativos

VI) Ubiquidade de micro-organismos:

Com duas placas de ágar sabouraud e duas de ágar nutriente em mãos, ir ao local desejado.

Abrir as placas ao ar livre. Ao final de 5 minutos, fechar uma de cada. Ao final de 15 minutos, fechar as restantes

Incubar as placar de ágar sabouraud à 37°C e as de ágar nutriente à temperatura ambiente.

5.1.1 Leitura e interpretação dos resultados

Como é possível observar na Tabela 03, o meio à base de batata favorece o crescimento de

fungos filamentosos, pelo fato de possuir amido em sua constituição e seu pH estar em torno de 5.

No vestiário masculino, no entanto, observou-se um crescimento de incontáveis colônias de

aspecto mucoso, isso pode ser devido ao grande número de bactérias presentes neste local.

Os meios com caldo de carne e frango favorecem o crescimento de bactérias, pois seu pH está

em torno de 7 e esses contêm proteínas, carboidratos e vitaminas, principalmente. Portanto,

observa-se na Tabela 03, que não houve (se sim, foi pequeno) crescimento de colônias com

aspecto filamentoso, enquanto, em sua maioria, o número de colônias com aspecto mucoso foi

incontável, apresentando diversas morfologias.

O meio com caldo de cana favorece o crescimento de leveduras, principalmente, pois seu pH está

em torno de 6 e esse possui em sua composição glicose em grande quantidade. Logo, é possível

concluir, a partir de observações da Tabela 03, que o vestiário masculino e o bebedouro possuem

micro-organismos dessa classe

No extrato de solo, analisado na Tabela 04, apesar de na maioria das placas não haver

crescimento, na placa com amostra de terra do vaso de planta do corredor do 4º andar é possível

observar o crescimento de colônias com aspecto mucoso, típico de bactérias; portanto, pode-se

concluir que esse meio de cultura alternativo favorece o crescimento dessas, isso pode ser devido

à sua constituição e seu pH.

Na ubiqüidade de microorganismos (Tabela 05) observou-se que no Agar nutriente houve

crescimento de colônias com aspecto mucoso, isso se deve ao fato desse meio favorecer o

crescimento de bactérias. Já o Ágar Sabouraud favorece o crescimento de fungos filamentosos e

leveduras, logo, observou-se que o número de colônias com aspectos característicos desses

micro-organismos foi maior. Apesar disso, observou-se que nas placas com Ágar Sabouraud

expostas no rampa apresentaram colônias de aspecto filamentoso, isso pode ser devido ao fato

de esse local se de grande circulação, estando susceptível à maiores contaminações bacterianas.

Page 11: Relatório ubiquidade em meios de cultura alternativos

Em ambos meios, o tempo de exposição influenciou no número de colônias observadas, sendo

que as placas expostas em 15 minutos apresentaram um maior número de colônias e mais

diversificadas.

Tabela 03. Preparação de meios de cultura alternativos

Local escolhido para coleta de material

Placa/Condição Nº de colônias com aspecto filamentoso e

descrição

Nº de colônias com aspecto mucoso e descrição

Vestiário masculino Meio à base de batata

2 colôniasUma de coloração

marrom e outra esbranquiçada. Ambas

opacas, com centro negro e bordas claras.

Incontável5 morfologias diferentes:

Colônias de tamanhos e cores variados: róseas, alaranjadas, esbranquiçadas, centro negro

e bordas claras.

Um tipo específico, incolor, cresceu sob forma de tapete

sobre a placa. Todas as colônias apresentaram

aspecto brilhoso.

Meio com caldo de carne

Nenhuma colônia

Incontável- 9 morfologias diferentes: Uma colônia grande, com centro claro e bordas mais

escuras, sobre outras colônias; uma grande,

enrugada, com aspecto de cérebro; diversas colônias

translúcidas, esbranquiçadas, disformes, com borda irregular; duas

colônias róseas, com borda irregular, sobre outras colônias, apresentando falhas; um tipo branco,

pequeno; outro alaranjado, pequeno, com colônias

espalhadas por toda a placa; três colônias brancas,

irregulares e côncavas; um tipo rosa claro, pequeno; outro grande, branco e

translúcido.

Meio com caldo de frango

1 colôniaEsbranquiçada, apresentando

crescimento na falha do meio de cultura

Formação de um tapete sobre a placa com colônias

esbranquiçadas e pequenas

Page 12: Relatório ubiquidade em meios de cultura alternativos

Meio com caldo de cana

Não houve crescimento

Incontável- 4 morfologias diferentes:

Colônias rosa claro, pequenas; colônias

esbranquiçadas, pequenas, sobre toda a placa; três

colônias de tamanho médio, esbranquiçadas; duas colônias pequenas e

amareladas.

Maçaneta da porta da sala 406

Meio à base de batata

3 colônias Não houve crescimento

Meio com caldo de carne

Não houve crescimento 15 colôniasDuas colônias de coloração

amarela, brilhante e arredonda.

Doze colônias de coloração branca, brilhante e arredonda.

Uma colônia transparente, brilhante com borda irregular.

Meio com caldo de frango

Não houve crescimento Não houve crescimento

Meio com caldo de cana

Não houve crescimento Não houve crescimento

Bebedouro do corredor do 4º andar

Meio à base de batata

Incontável- 5 morfologias diferentes: Formação de um tapete de

micro-organismos de cor acinzentada.

Meio com caldo de carne

Incontável- 3 morfologias diferentes: Formação de um tapete de

micro-organismos de cor acinzentada e aspecto estriado e algumas colônias com aspecto mucoso e brilhantes.

Meio com caldo de frango Não houve crescimento

Meio com caldo de cana

IncontávelHouve crescimento abundante de micro-organismos de

morfologias de variados aspectos, que cobriram completamente a placa.

Mouse do computador do laboratório de

Informática

Meio à base de batata

1 colônia- borda branca e o centro

verde, bem rugoso (aspecto semelhante a um algodão). Tamanho

médio.

Meio com caldo de carne Não houve crescimento

4 colôniasDuas colônias brancas com

aspecto brilhante, uma

Page 13: Relatório ubiquidade em meios de cultura alternativos

colônia amarelo claro com aspecto brilhante e uma

colônia branca com forma distorcida

Meio com caldo de frango Não houve crescimento Não houve crescimento

Meio com caldo de cana

1 colôniaColônia com coloração

branca e com um tamanho relativamente grande em relação às

demais colônias

7 colôniasAs colônias apresentavam uma coloração branca e

amarela. Eram brilhantes e apresentavam um tamanho

pequeno.

Tabela 04. Isolamento de bactérias do solo – meio de cultura alternativo: Extrato de solo

Amostra Nº de colônias e descrição

Terra do vaso de planta do corredor do 4º andar 9 colônias com aspecto mucosoObservou-se 2 morfologias diferentes com

formação de tapete sobre a placa.- Encontrou-se micro colônias brancas brilhantes.

Terra do vaso de uma planta do corredor Não houve crescimento

Solo do bosque Não houve crescimento

Solo do bosque 8 colônias - 1 morfologia com aspecto brilhante, incolor e pequenas

Tabela 05. Ubiquidade de micro-organismos

Local Meio de cultura

Tempo de exposição

(min)

Nº de colônias e descrição

Com aspecto filamentoso Com aspecto mucoso

Incontável

Page 14: Relatório ubiquidade em meios de cultura alternativos

Rampa do 3º andar

Ágar nutriente 5 Não houve crescimento Todas as colônias de mesma morfologia

15 Não houve crescimento Incontável

Todas as colônias de mesma morfologia

Ágar Sabouraud

5 8 colônias- 5 morfologias diferentes

11 colônias6 morfologias diferentes

15 Não houve crescimento Incontável

15 morfologias diferentes, típicas de leveduras

Bosque Ágar nutriente

5 Não houve crescimento 23 colônias- 6 morfologias diferentes

15Não houve crescimento

67 colônias- 7 morfologias diferentes

Ágar Sabouraud

5 45 colônias- 17 morfologias diferentes

Não houve crescimento

15 Incontável - 25 morfologias diferentes

Não houve crescimento

HallÁgar nutriente

5 Não houve crescimento

15 colônias- arredondadas, transparen-tes em seu centro e brancas

nas bordas.

15Não houve crescimento

24 colônias- arredondadas, com bordas mais escuras que o centro

Ágar sabouraud

5 24 colônias

- colônias arredondadas, transparentes em seu centro e brancas nas

bordas

1 colônia- pequena e arredondada

15 29 colônias- Diferentes formas e cores,

colônias sobrepostas.

Não houve crescimento

Cantina Ágar nutriente5

Não houve crescimento 3 colôniasColônias brancas, leitosas e brilhantes.

15

Não houve crescimento

15 colôniasDuas morfologias: uma com

o mesmo aspecto das apresentadas na placa

exposta por cinco minutos e a outra amarela e brilhante.

Ágar Sabouraud

5

4 colôniasTrês morfologias: uma é

rosa, com bordas brancas; outra é cinza com a borda

cinza claro; a outra é

4 colôniasDuas morfologias: uma é

branca e brilhante e a outra é bege claro e brilhante.

Page 15: Relatório ubiquidade em meios de cultura alternativos

laranja.

15 6 colôniasCinco morfologias: uma é rosa, com bordas brancas; outra é cinza com a borda cinza claro; outra é cinza

com a borda bege; outra é laranja claro com a borda

laranja mais claro; e a última é toda branca.

6 colôniasTrês morfologias: uma bege claro e brilhante; outra cinza e leitosa; e a última branca e brilhante

5.1.2 Apresentação de propostas de minimização, reutilização, tratamento e descarte dos

resíduos gerados

Os meios utilizados podem ser reaproveitados transformando estes em alimentos para animais e

adubos. Para a produção dos alimentos e adubos seria necessário o tratamento dos produtos

gerados pela degradação do meio e pelo metabolismo das bactérias. Porém, não foram

encontradas pesquisas nessa área. O tratamento existente consiste na combustão dos meios, o

que gera muita poluição por gás carbônico e resíduos sólidos não identificados.

5.1.3 Conclusão

Foi possível concluir que, mesmo em situações de pouco recurso, é possível a cultura de

microrganismos através de meios alternativos, feitos com substâncias comuns do nosso dia a dia;

que microrganismos estão em todos os lugares e é notória a diferença de tempo de exposição

para o crescimento dos mesmos; e que é de extrema importância conhecer os meios de cultura

para o crescimento de cada tipo de microrganismo para conseguirmos um bom resultado. Foram

utilizadas técnicas já aprendidas antes e foi possível o reconhecimento da importância das

técnicas apresentadas.

5.1.4 Bibliografia

- MICHAEL J. PELCZAR JR. & E.C.S. CHAN & NOEL R. KRIEG.   Microbiologia: Conceitos e

Aplicações - vol. 1. 2ª Ed.

- TORTORA, Gerard J., FUNKE, Berdell R. e CASE, Christine L. Roberta Marchiori Martins. Microbiologia. Porto Alegre: Artmed, 2005.

- Introdução à microbiologia. Disponível em: <http://vsites.unb.br/ib/cel/microbiologia/intromicro/intromicro.html> Acessado em: 8 mai. 2010.

Page 16: Relatório ubiquidade em meios de cultura alternativos

- http://www.hexasystens.com.br/ver.asp?Dep=4797&Secao=79584&Cat=6068&Produto=100378. Acessado em: 10 de maio de 2010.

- http://users.med.up.pt/cc04-10/MicroTextosApoio/Meios_de_cultura.pdf. Acessado em: 10 de maio de 2010.

- http://www.biocendobrasil.com.br/meio_Sabouraud.asp. Acessado em: 10 de maio de 2010.