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Investigação de micro-organismos por meio de cultivo e observação de fungos e bactérias – Aula 3 EXPERIMENTO ORIGEM E EVOLUÇÃO DA VIDA HIPÓTESES SOBRE A ORIGEM DA VIDA E A VIDA PRIMITIVA Versão: março 30, 2010 6:24 PM

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Investigação de micro-organismos •por meio de cultivo e observação de fungos e bactérias – Aula 3

EXPERIMENTO

origem e evoluçãoda vida

Hipóteses sobre a origem da vida e a vida primitiva

versão: março 30, 2010 6:24 pm

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1. resumoesse experimento visa demonstrar a existência de micro-organismos no ambiente através do cultivo de fungos e

bactérias em meios nutritivos, permitindo uma discussão sobre a teoria da abiogênese e os experimentos de pasteur. o protocolo experimental proposto permitirá abordar as relações entre o metabolismo dos microrganismos, as condi-ções do meio de cultivo e o conceito de esterilização. Nesta terceira aula, os alunos irão acompanhar o desenvolvi-mento dos microrganismos que foram inoculados na aula anteiror.

2. o experimento 2.1 materiais

placas de petri com meios de cultivo inoculados na aula anterior;•vasilhas com legumes cozidos preparados na aula anterior•

2. 2 Procedimento 2.2.1 Protocolo experimental

1) observar o crescimento de colônias isoladas no meio de cultivo inoculadas na aula anterior;

Nos nossos testes, observa-se o crescimento de colônias de bactérias que apresentam aspecto leitoso, com superfície arredondada.

Figura 1: Culturas inoculadas com material de mucosa da boca.

Figura 2: Culturas inoculadas com material retirado do dinheiro (A) e de suspensão de solo (B)..

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É possível que algumas colônias adquiram colorações diferentes no meio, como foi o caso, no nosso teste, das

bactérias inoculadas da cédula de dinheiro. (Figura 2a)

Como o repolho roxo adicionado ao meio atua como um indicador de pH, a mudança de cor indica diferentes pH. para auxiliá-lo, realizamos um ensaio relacionando a cor do extrato e o pH. aferimos o pH de vários tubos de ensaio contendo soluções de extrato de repolho em meio ácido, neutro e básico. a Figura 3 mostra a escala obtida, que po-derá ser usada na análise dos resultados deste experimento.

2)CompararacoloraçãodascolôniascomaescaladepHfornecidaparaverificaraproduçãodeácidoseálcalis;

se o meio deixar de ser sólido, as bactérias estão produzindo substâncias proteolíticas, ou seja, que degradam a gelatina, composta essencialmente de proteínas.

3) observe que nos potes de plástico desenvolveram-se fungos com cores e formas diferentes (Figuras 4 e 5).

A B

Figura 3: Indicador de pH. Ensaio com repolho roxo, adicionando ácido e base (A). Escala de cores feita a partir do ensaio com repolho roxo (B).

Figura 4: Crescimento de microrganismos cultivados em papel filtro com cenoura

Figura 5: Crescimento de microrganismos cultivados em papel filtro com beterraba.

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segurança: Não abrir as placas e os potes. os fungos soltam esporos que podem ser inalados. para descarte do ma-terial, vede os potes de plásticos (Figura 6) e jogue no lixo. Caso queira reutilizar as placas de petri, abra o mínimo possível e insira álcool. deixe por alguns minutos para só depois lavá-las.

professor, você pode discutir com os alunos o porquê dos alimentos estragarem. Na geladeira o alimento conserva-sepormaistempoporqueabaixatemperaturaretardaocrescimentodemicrorganismos.Estragar,portanto,significaque houve uma proliferação de microrganismos num meio nutritivo, no caso, no alimento. discuta com eles também porque é aconselhável que os alimentos guardados na geladeira sejam mantidos em recipientes tampados.

aproveite para relacionar a atividade com o desenvolvimento de doenças e com os hábitos de higiene ao manipular alimentos.

Finalize perguntando: “os microrganismos surgem da matéria inerte, do “nada”, ou da reprodução de outros pré-existentes?

3. Sugestão de roteiro de trabalhoa seguir, sugerimos um roteiro de trabalho para ser utilizado na íntegra ou adaptado e que poderá ser entregue

aos alunos. ele contém todas as orientações necessárias para o desenvolvimento da aula prática e também algumas questões que auxiliarão no fechamento da atividade.

Figura 6: Vedação do material para descarte

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PRÁTICA LABORATORIAL DE BIOLOGIAInvestigação de micro-organismos através de cultivo e observação de fungos

e bactérias – Aula 3

Nome: __________________________ N°_____ Série: _____ Data: ________

Objetivo da aula prática: observação dos micro-organismos cultivados na aula anterior.

Protocolo ExperimentalMateriais:

placas de petri com meios de cultivo inoculados na aula anterior;•

vasilhas com legumes cozidos preparados na aula anterior.•

Procedimento:

1. observar o crescimento de colônias isoladas no meio de cultivo inoculadas na aula anterior. você

deverá observar se houve alteração nos meios de cultivo em cada placa de petri. as tampas não podem

ser abertas, pois se trata de material biológico contaminante.

para ajudá-lo na observação, sugerimos que preencha a tabela abaixo.

tabela 1-resultados observados nas culturas com placa de petri.

2. Caso tenha ocorrido proliferação de microrganismos, assinale na tabela abaixo o que pode ser ob-

servado:

tabela 2- observações decorrentes da proliferação de microrganismos

Local de coleta Coloração inicial do meio de cultivo

Coloraçãofinaldomeiode cultivo

Houve proliferação de microrganismos?

Local de coletamicrorganismos origi-naram estruturas com

aspecto leitoso?

microrganismos origi-naram estruturas com aspectofilamentoso?

microrganismos origi-naram estruturas com bordas arredondadas?

Notou a presença de mais de um tipo de estrutura se de-senvolvendo? Quantas eram?

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3. escolha 2 colônias cultivadas e esquematize, indicando as cores. Compare a coloração das colônias

das placas com a escala de pH abaixo. se as cores do repolho se alteram com o pH, houve mudança

de pH nas colônias observadas? indique os pH das colônias nos esquemas.

Figura 1: Escala de pH feita a partir de extratos de repolho roxo, um indicador natural de pH. Em cada valor de pH, representado pelos números, o extrato adquire uma cor diferente.

Local de coleta de microrganismos (inóculo 1): ____________________

Local de coleta de microrganismos (inóculo 2): ____________________

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Questões:

4. Observe o crescimento dos microrganismos nos potes plásticos. Qual o tipo de microrganismos

predominante (bactéria ou fungo)? Quais as estruturas observadas que o levaram a essa conclusão?

5. Com os experimentos que você fez, proponha explicações para o apodrecimento dos alimentos.

6. Com os nossos experimentos, podemos derrubar a teoria da geração espontânea. De onde provie-

ram, então, os micro-organismos cultivados?

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4. referências complementares1. Pasteur e a microbiologia. artigo que apresenta uma análise histórica sobre os experimentos de L. pasteur e o surgimento da microbiologia.

portoCarrero, v. revista da sociedade brasileira de História da Ciência (sbHC), v. 5, 1991.

disponível em: http://www.mast.br/arquivos_sbhc/215.pdf

acesso em: 11/09/2009

2. Cinco Chaves para uma alimentação mais segura: manual. documento do departamento de segurança ali-mentar, Zoonoses e doenças de origem alimentar da organização mundial de saúde (oms).

disponível em: http://www.who.int/foodsafety/consumer/manual_keys_portuguese.pdf

acesso em 15/09/2009

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FiCHa TÉCNiCa

eXeCução

oBJeTo de aPreNdiZagem

universidade estadual de Campinas reitor: Fernando Ferreira Costa.vice-reitor: edgar salvadori de decca.Pró-reitor de pós-graduação: euclides de mesquita Neto.

instituto de Biologia diretor: paulo mazzafera. vice-diretora: shirlei maria recco-pimentel.

Projeto emBriaoCoordenação geral: eduardo galembeck.

Coordenação de mídia - audiovisuais: eduardo paiva. Coordenação de mídia - Software: eduardo galembeck. Coordenação de mídia - experimentos: Helika a. Chikuchi, marcelo J. de moraes e bayardo b. torres.

apoio logístico/administrativo: eduardo K. Kimura, gabriel g. Hornink, Juliana m. g. garaldi.

Identificação de micro-organismos por meio de cultivo e observação de fungos e bactérias - aula 3

redação: bianca Caroline rossi rodrigues, maurício aurélio gomes Heleno, Helika a. Chikuchi, miritis maria gianciani Ferraz , maria sílvia v. gatti e eduardo galembeck.Pesquisa: bianca Caroline rossi rodrigues, maurício aurélio gomes Heleno e roney vander dos santos.revisão de Conteúdo: daniela Kiyoko Yokaichiya e marcelo J. de moraes.Testes de Bancada e Captura de imagens: gislaine Lima marchini e roney vander dos santos.edição de imagem: Florencia maría piñón pereira dias.adequação linguística: Lígia Francisco arantes de souza, raquel Faustino e marina gama.diagramação: Henrique oliveira e thais goes.

Laboratório de tecnologia educacionaldepartamento de bioquímica

instituto de biologia - Caixa postal nº 6109Universidade estadual de Campinas – UNiCamp

Cep 13083-970, Campinas, sp, brasil

a Universidade estadual de Campinas autoriza, sob licença Creative Commons – atribuição 2.5 brasil - cópia, distribuição, exibição e execução do material desenvolvido de sua titularidade, sem finscomerciais,assimcomoacriaçãodeobrasderivadas,desdequeseatribuaocréditoaoautororiginaldaformaespecificadaporeleoupelolicenciante.TodaobraderivadadeveráterumaLicença idêntica a esta. estas condições podem ser renunciadas, desde que se obtenha permissão do autor. o não cumprimento desta licença acarretará nas penas previstas pela Lei nº 9.610/98.