GenéGenética tica ForeForensense

• Todo indivíduo possui um perfil genético único (exceto gêmeos monozigóticos).

• Vínculos genéticos entre amostras-questionadas e amostras-referência: determinação da origem individual de cada evidência → reconstruir parcial ou totalmente a dinâmica do ato infracional.

• Identificação de suspeitos em casos de crimes sexuais (estupro, atentado violento ao pudor com ato libidinoso diverso de conjunção carnal e outros);

• Identificação de restos mortais, ossadas e outros;

• Relação entre instrumentos lesivos e vítimas, (sangue, esperma, pêlos, pele e outros presentes em anteparo ou objeto encontrado em local de crime ou a ele relacionado);

Alguns Exemplos

ANÁLISEANÁLISECRIMINALCRIMINAL

Ossos carbonizados Ossos carbonizados Ossadas ou dentes Ossadas ou dentes Manchas de materialManchas de material

biológico (sangue,biológico (sangue,líquido seminal,líquido seminal,saliva) em materialsaliva) em materialtêxtiltêxtil

Bulbo capilar, pêlos eBulbo capilar, pêlos eunhas unhas

Material Material anatomopatológicoanatomopatológico

Tecido biológico emTecido biológico emestado de putrefação estado de putrefação

• Investigação de paternidade nos casos de gravidez resultante de estupro, estudo de vínculo genético (investigação de paternidade, anulações de registros civis de nascimento, raptos e seqüestros de crianças, tráfico de menores e outros);

• Identificação de cadáveres abandonados nos casos de aborto provocado, em casos de infanticídio e de falta de assistência ao parto;

• Identificação de animais, plantas e microorganismos.

•• Grupos sangüíneos eritrocitários Grupos sangüíneos eritrocitários (ABO, Rh e MN);(ABO, Rh e MN);

•• Complexo HLA Complexo HLA (histocompatibility leucocyte (histocompatibility leucocyte antigen): antígenos na antigen): antígenos na superfície dos leucócitos → superfície dos leucócitos → genes polimórficos (6p);genes polimórficos (6p);

•• Mnissatélites (VNTR) Mnissatélites (VNTR) “impressões digitais” de DNA;“impressões digitais” de DNA;

Marcadores Moleculares na Genética Marcadores Moleculares na Genética ForenseForense

Certas regiões cromossômicas emCertas regiões cromossômicas emque uma pequena seqüência deque uma pequena seqüência deDNA é repetida várias vezes -DNA é repetida várias vezes -marcadores genéticos. marcadores genéticos.

Seqüências que se repetemSeqüências que se repetem(tandem repeats).(tandem repeats).

Regiões estão localizadas entreRegiões estão localizadas entresítios de corte de enzimas desítios de corte de enzimas derestrição. restrição.

• Microssatélites (STR): TPOX, D3S1358, D5S818, FGA, CSF1PO, D7S820, D8S1179, TH01, vWA, D13S317, D16S539, D18S51 e D21S11, STRs do cromossomo Y e o gene a amelogenina;– Segmento do intron 1 do gene

Amelogenina: – O alelo do cromossomo X gera um

fragmento amplificado de 330 pb e o alelo do cromossomo Y gera um fragmento de 280 pb.

Vantagens na utilização do DNA

• Qualquer quantidade de material biológico.• Potencial discriminatório:

– ABO → discriminar um em três indivíduos na população;

– Marcadores sorológicos adicionais → um em alguns milhares;

– DNA → um em alguns bilhões ou mais.• Resistência aos fatores ambientais: ácidos, álcalis

e detergentes.• DNA do espermatozóide separado por lise

diferencial.

Coleta, Identificação, Manipulação, Coleta, Identificação, Manipulação, Preservação e Envio do materialPreservação e Envio do material

Material: ossos carbonizadosMaterial: ossos carbonizadosColeta: coletar a área mais Coleta: coletar a área mais

protegida e guardar em saco protegida e guardar em saco plástico limpoplástico limpo

Armazenamento: Armazenamento: -4ºC (freezer)-4ºC (freezer)Material: ossadas ou dentesMaterial: ossadas ou dentesColeta: Coleta: coletar os ossos mais coletar os ossos mais

longos ou dentes molares e longos ou dentes molares e guardar em saco plástico limpoguardar em saco plástico limpo

Armazenamento: Armazenamento: -4ºC (freezer)-4ºC (freezer)

Coleta, Identificação, Coleta, Identificação, Manipulação, Preservação Manipulação, Preservação

e Envio do materiale Envio do material

Material: Manchas de material Material: Manchas de material biológico em tecido (sangue, biológico em tecido (sangue, líquido seminal, saliva)líquido seminal, saliva)

Coleta: guardar o tecido em saco Coleta: guardar o tecido em saco plástico limpoplástico limpo

Armazenamento: Armazenamento: -4ºC (freezer)-4ºC (freezer)Material: Fios de cabelo, pêlos e Material: Fios de cabelo, pêlos e

unhas unhas Coleta:coletar as amostras de fio de Coleta:coletar as amostras de fio de

cabelo e pêlo, com o bulbo cabelo e pêlo, com o bulbo capilar, e guardar em recipiente capilar, e guardar em recipiente limpo limpo

Armazenamento: Armazenamento: -4ºC (freezer)-4ºC (freezer)

INVESTIGAÇÃO INVESTIGAÇÃO DE DE

PATERNIDADEPATERNIDADE

Sangue periférico Sangue periférico da mãe, do filho da mãe, do filho e do suposto paie do suposto pai

Raspagem de Raspagem de mucosa bucal da mucosa bucal da mãe, do filho e mãe, do filho e do suposto paido suposto pai

Bulbo capilar, Bulbo capilar, pêlos epêlos eunhasunhas

O estupro de uma menina de quatro anos ocorrido O estupro de uma menina de quatro anos ocorrido em meados de 1997, em um município do norte do em meados de 1997, em um município do norte do estado do Paraná, ilustra bem o benefício estado do Paraná, ilustra bem o benefício proporcionado por exames de DNA à Justiça. proporcionado por exames de DNA à Justiça. Nesta ocasião, o Instituto de Criminalística de Nesta ocasião, o Instituto de Criminalística de Curitiba recebeu da autoridade policial uma peça Curitiba recebeu da autoridade policial uma peça de vestuário íntimo feminino apresentando de vestuário íntimo feminino apresentando manchas, visando a pesquisar a presença de manchas, visando a pesquisar a presença de esperma, até então, o único recurso laboratorial esperma, até então, o único recurso laboratorial disponível. O exame microscópico detectou a disponível. O exame microscópico detectou a presença de raros exemplares de gameta presença de raros exemplares de gameta masculino humano. Passado quase um ano, o Juízo masculino humano. Passado quase um ano, o Juízo de Direito restituiu a peça de vestuário em de Direito restituiu a peça de vestuário em questão, desta vez para se submeter a análises de questão, desta vez para se submeter a análises de vínculo genético (DNA), tendo como meta o vínculo genético (DNA), tendo como meta o confronto do perfil genético obtido a partir dos confronto do perfil genético obtido a partir dos vestígios, com o perfil do réu. O referido material vestígios, com o perfil do réu. O referido material encaminhado foi reexaminado com auxílio de encaminhado foi reexaminado com auxílio de iluminação ultravioleta, sendo, então, verificadas iluminação ultravioleta, sendo, então, verificadas manchas remanescentes com fluorescência manchas remanescentes com fluorescência característica daquela apresentada por sêmen. O característica daquela apresentada por sêmen. O acusado encontrava-se livre devido a absoluta acusado encontrava-se livre devido a absoluta falta de provas contundentes.falta de provas contundentes.

11 corresponde ao padrão doDNA do fragmento A (amostraproveniente do sêmenencontrado na calcinha davítima);22 corresponde ao padrão deDNA do fragmento A (amostraproveniente do acusado);33 corresponde ao padrão deDNA do fragmento B (amostraproveniente do sêmenencontrado na calcinha davítima);44 corresponde ao padrão deDNA do fragmento B (amostraproveniente do acusado).

1 2 4 3

1 corresponde ao padrão do DNA do fragmento C (amostra proveniente do sêmen encontrado na calcinha da vítima);

2 corresponde ao padrão de DNA do fragmento D (amostra proveniente do acusado);

3 corresponde ao padrão de DNA do fragmento D (amostra proveniente do sêmen encontrado na calcinha da vítima);

4 corresponde ao padrão de DNA do fragmento C (amostra proveniente do acusado).

22 11 33 44

Pai 0

1

Mãe

01

Filho

01

Pai 0

2

Mãe

02

Filho

02

No final de 1986, em um hospital do interior do estado do Paraná, teria ocorrido uma troca entre dois bebês, hipótese levantada diretamente pelos seus pais em função de dúvidas quanto a traços fisionômicos das crianças, que, por ocasião da análise, já possuíam mais de dez anos de idade. As duas crianças envolvidas e seus respectivos pais legais cederam material hematológico para o esclarecimento da dúvida comum de ambas as partes, situação de certa repercussão na imprensa local.Quem é filho de quem?

Quais são os alelos paternos e quais Quais são os alelos paternos e quais são os alelos maternos? Houve são os alelos maternos? Houve exclusão de paternidade?exclusão de paternidade?

Houve exclusão de paternidade? Por Houve exclusão de paternidade? Por que?que?

Índice de PaternidadeFreqüência

populacional do alelo paterno

Mãe Criança Possível pai Índice de Paternidade

0,365 20,21 21,24 24,25 1,370,179 16,19 16 16,17 2,790,258 7,11 7,9 8,9 1,940,071 16,19 16,18 16,18 7,040,709 5,7 7,8 8,9 0,7050,021 6,7 7,13 8,13 23,809

0,4221 26,27 27,29 29 2,369