1ª série18

Célula animal – mucosa bucal

Objetivos

• Preparar corretamente, usando coran-tes adequados, as lâminas de esfrega-ço da mucosa bucal.

• Identificaraomicroscópioóptico(M.O.)células da mucosa bucal previamente coradas e reconhecer seus componen-tes (citoplasma, núcleo e limite celu-lar).

Materiais necessários

• Microscópioópticobinocular• Lâminas e lamínulas• Espátula de madeira• Estufa de secagem• Cuba de coloração• Violeta genciana

Procedimentos

a) Com uma espátula demadeira, raspe amucosa bucal.

b)Deslizesuavementeomaterialcolhidocomaespátulasobrea lâminadomicroscópio(emumsósentidoumaúnicavez),forman-doumacamadabemfina(esfregaço).Es-pere secar.

c)Mergulhea lâminanacubadecoloraçãoque contém violeta genciana. Deixe por30s.

d)Levea lâminaatéapia e laveemáguacorrente. Deixe a água escorrer sobre odorso de sua mão e cair suavemente na lâmina para que o material não se solte.

e)Coloquea lâminanaestufaeesperese-car.

f) Leve a lâmina aomicroscópio e observeem aumentos de 40X, 100X e 400X.

Questões propostas

Desenhos

(40x)Descrições

Formato: Coloração dos componentes celulares:Númerodecélulasporcampo:

Desenhos

(100x)

DescriçõesFormato: Coloração dos componentes celulares:Númerodecélulasporcampo:

1. Por que, na lâmina observada, o núcleoapresenta uma coloração mais escura do que o citoplasma?

2. Explique por que não conseguimos visu-alizar a estrutura damembrana plasmática,apesar da lâmina observada nos proporcio-nar uma noção do limite celular.

Anotações

Experimento6

19

Célula animal – Hemograma

Objetivos

• Identificação das hemácias, um dosprincipaiselementosfiguradosdosan-gue.

• Conhecer a estrutura das hemácias, bem como suas principais funções para afisiologiahumana.

• Preparação de uma lâmina por meio da técnica de esfregaço.

Materiais necessários

• Microscópioópticobinocular• Lâminas e lamínulas• Sangue fresco bovino

Procedimentos

a)Comumconta-gotas,pingueumagotadesangue bovina sobre a lâmina.

b)Ponhaalamínulaperpendicularmenteso-brealâminaefaça-adeslizarsobrealâmi-na. Aguarde a secagem.

c)Levealâminaaomicroscópioeobserveashemácias.

Questões propostas

1. Faça um desenho representativo do teci-do sanguíneo em diferentes aumentos do mi-croscópio.

100x400X

2. Caracterize as hemácias visualizadasquanto ao formato e constituição celular.

3. Qual proteína está presente em gran-de quantidade nas hemácias que permite o transportedeoxigênio?

4. Qual é a diferença entre leucocitose e leu-copenia?

5. Qual a função das plaquetas?

Anotações

Experimento7

1ª série20

Célula vegetal

Objetivos

• Preparar corretamente as lâminas da epidermedocatáfilodecebolaedafo-lha de Elodeasp(plantaaquática).

• Identificaraomicroscópioóptico(M.O.)uma célula vegetal.

• Reconhecer os componentes de uma célula vegetal (parede celular, núcleo,provávelregiãodovacúoloecloroplas-tos).

Materiais necessários

• Microscópioópticobinocular• Lâminas e lamínulas• Epidermedecatafilodecebola• Folha de Elodea sp• Palito• Conta-gotas• Iodo ou lugol

Procedimentos

a)Com o auxílio de um palito, coloque so-breumalâminademicroscópioafolhadeElodea sp, tomando cuidado para que não fiquedobrada.

b)Pingueumagotadeáguadoaquáriosobrea folha, cubra com uma lamínula e pres-sione levemente com a unha do dedo in-dicador.

c) Levea lâminaaomicroscópio e observeemaumentosde40x,100xe400x.

d)Retireumpedaçodaepidermeinferiordeumcatáfilodecebolaecoloquesobreumalâmina,tomandocuidadoparaquenãofi-que dobrada.

e)Pingueduasgotasdelugolsobreomate-rial e cubra com a lamínula.

f) Retire o excesso de lugol, encostando aponta de um papel absorvente na lateral da lamínula.

g) Leve a lâmina aomicroscópio e repita oprocedimentodefocalização.

Questões propostas

Células de Elodeasp(400x)

Coloração:Formato:Estruturasvisualizadas:

Epidermedecatáfilodecebola(400x)

Coloração:Formato:Tamanho das células em relação à lâmina an-terior:Estruturasvisualizadas:

1. Escreva o nome e função das estruturas observadas na célula vegetal que não estão presentes na célula animal. 2. Qual é a função dos cloroplastos obser-vados nas células de Elodea? Por que não encontramos essas organelas nas células vi-sualizadasdecatáfilosdecebola?

Experimento8

21

Osmose

Objetivos

• Observar e analisar o estado das cé-lulas vegetais em meios de diferentes concentrações.

• Aplicar os conceitos relacionados à os-mose em célula vegetal.

Materiais necessários

• 3 lâminas• 3 lamínulas• Conta-gotas• Água destilada• Solução salina concentrada• Béquer com folhas de Elodea sp con-

tendosoluçãoisotônica(águadeaquá-rio)

• Microscópioóptico

Procedimentos

a)AcrescenteumafolhadeElodeaemcadapla-ca de Petri. Aguarde, pelo menos, 15 min.

b) Coloque uma folha de Elodea sp sobrecada lâmina.

c)Acrescente 3 gotas da solução de águadestilada sobre a folha na lâmina 1 e cubra-a com a lamínula.

d)Acrescente3gotasdesoluçãosalinacon-centrada sobre a folha na lâmina 2 e cubra-a com a lamínula.

e)Acrescente3gotasdeáguadoaquárioso-bre a folha na lâmina 3 e cubra-a com a lamínula.

f)Observe as lâminas em aumento de 400X.

Questões propostas

Emcada lâmina, identifiqueoestadoosmó-tico das células, denomine-as e descreva a imagem,tomandocomoreferênciaaprimeiradescrição (considere sempre a distribuiçãodoscloroplastos).

Provável regiãodo vacúolo

Cloroplastos

Paredecelular

Lâmina 1

Oscloroplastos(emverde)estãobemdistri-buídos pela célula.Observa-seaparedecelularbemdefinida.Oespaçocentral,commenorquantidadedecloroplastos, corresponde à provável região dovacúolohídrico.Meioisotônico,célulaflácida.

Paredecelular

Cloroplastos

Provável regiãodo vacúolo

Lâmina 2

Meio:célula:

Cloroplastos

Parede celular

Lâmina 3

Meio:célula:

1. Como devemos proceder para recuperar o turgor de uma folha de Elodea sp que sofreu plasmólise? Como denominamos esse pro-cesso?

Experimento9

1ª série22

Osmosemicroscópica2. Por que a célula vegetal no estado de tur-gor não sofre lise?

3.Expliqueoquedeveriaocorrercomashe-máciasdeumindivíduo,casofossemdeixa-das em uma solução de água destilada.

Anotações

Experimento9

23

Mitose

Objetivos

• A prática tem como objetivo a visuali-zaçãodefasesdiferenciadasdemitoseemcélulasderaizdecebola.

Materiais necessários

• Raízesnovasdecebola• Solução de orceína acética 1%• Lâminas• Lamínulas• Pinças• Lâmina de barbear ou bisturi• Pipetas Pasteur ou conta-gotas• Papel absorvente, papel toalha ou pa-

pelfiltro• Placa de Petri ou pires de material re-

sistente ao calor• Lamparina a álcool, vela, bico de Bun-

sen ou fogareiro• Pinça de madeira• Microscópio óptico que proporcione

uma ampliação total de pelo menos 100x

• Oleo de imersão

Procedimentos

a)Cortetrêsouquatroraízesemtamanhosde1a2cmapartirdaregiãoapical(meriste-maapical)eastransfiraparaumaplacadePetricontendoorceínaacética(corante).Aorceína acética é um corante formado por orceínaeácidoacético.Oácidoacéticoéumfixadorquetemcomofunçãomanteraintegridade das estruturas celulares. A or-ceínacoraoscromossomos,fazendocomque se destaquem das outras estruturas, e podemserfacilmenteidentificadosaomi-croscópio.

b)AqueçaaplacadePetricomumalampa-rina a álcool até a emissão de vapores, sem deixar ferver; nesse processo, ape-naspasseaplacadePetrialgumasvezessobre a chama, sem deixá-la por muitotempo em contato com o fogo. Segurança: Aqueçaasraízesdacebolacomaorceínaacética perto de janelas, em capela ou em local com corrente de ar para eliminar os vapores que se desprendem do corante. Utilizeumapinçademadeira,umpedaço

de pano ou papel espesso no manuseio da placa de Petri para evitar queimaduras.

c)Pegueasraízescomumapinçadepontafina,coloque-assobreumalâminalimpaeseccione a região do meristema, que re-presenta um pedacinho de cerca de 1 a 2 mmapartirdoápice.Desprezeorestodaestrutura;

d)Pingueumagotadeorceínaacéticasobreo meristema seccionado e, com muito cui-dado,cubraomaterialcomalamínula;

e)Comumpedaçodepapelabsorvente,eli-mineoexcessodecorante;

f)Cubraalamínulacomopapelabsorventee, cuidadosamente, pressione com o po-legaratévisualizarumacamadaúnicadecélulasaomicroscópioóptico.

g) Coloque a lâmina no microscópio e vi-sualize as células emdivisãomitótica.Oaumento de 1000x proporciona melhorvisualização.Oaumentoécalculadomul-tiplicando-se o aumento da lente objetiva pelo aumento da lente ocular. Para objeti-vas,apartirdoaumentode100x,deveráserusadoóleodeimersão.Oóleodeimer-são é uma interface líquida que possui o mesmo índice de refração da objetiva. Ele deve ser usado para a objetiva de 100x,pois fará com que os raios luminosos não se dispersem ao atravessarem o conjunto lâmina-óleo,permitindoaentradadeumgrandeconedeluznaobjetiva,oqueme-lhoraavisualizaçãodomaterial.Parausodoóleodeimersão,pingueumapequenagotadoóleoemcimadalamínulasomentequando forvisualizá-lacomaobjetivade100x.Coloquealâminanomicroscópioeposicione a objetiva. Sendo a maior lente, aobjetivade100xquasetocanalamínu-la.

h)Senãoencontrarcélulasemmitose,pre-pareoutra lâmina, certificando-sedequesejautilizadoumfragmentosituadoaape-nas1ou2mmdoápicedaraiz.

Experimento10