engenharia bioquÍmica - debiq.eel.usp.brjoaobatista/aula1introducao.pdf · introduÇÃo •...
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INTRODUÇÃOINTRODUÇÃO• O QUE É ENGENHARIA BIOQUÍMICA? O QUE É ENGENHARIA BIOQUÍMICA?
– Engenharia Bioquímica é aplicação dos Engenharia Bioquímica é aplicação dos conhecimentos da Engenharia Química na conhecimentos da Engenharia Química na solução de problemas que se apresentam na solução de problemas que se apresentam na implantação de processos biotecnológicos em implantação de processos biotecnológicos em larga escala e em sua otimização;larga escala e em sua otimização;
– Processos onde ocorre a transformação de Processos onde ocorre a transformação de matérias-primas em produtos através da ação matérias-primas em produtos através da ação de material de origem ou caráter biológico: de material de origem ou caráter biológico: células (microbianas, animais ou vegetais) ou células (microbianas, animais ou vegetais) ou enzimas;enzimas;
INTRODUÇÃOINTRODUÇÃO
• INTERDICIPLINARIDADE:INTERDICIPLINARIDADE:
- O uso desta área de conhecimento O uso desta área de conhecimento atuando em conjunto com diferentes atuando em conjunto com diferentes profissionais, como é o caso dos profissionais, como é o caso dos geneticistas, biologistas moleculares, geneticistas, biologistas moleculares, microbiologistas, bioquímicos e microbiologistas, bioquímicos e engenheiros agrônomos e engenheiros engenheiros agrônomos e engenheiros bioquímicos, permitem aplicar a bioquímicos, permitem aplicar a Engenharia BioquímicaEngenharia Bioquímica
INTRODUÇÃOINTRODUÇÃO• INTERDICIPLINARIDADE:INTERDICIPLINARIDADE:
A Engenharia Bioquímica se encontra em nosso A Engenharia Bioquímica se encontra em nosso cotidiano, e nem damos atenção a isso, vejamos abaixo cotidiano, e nem damos atenção a isso, vejamos abaixo alguns exemplos.alguns exemplos.
CCONHECIMENTO:ONHECIMENTO: Microbiologia, Bioquímica, Genética, Microbiologia, Bioquímica, Genética, Engenharia, Química, Informática;Engenharia, Química, Informática;
BENS:BENS: Alimentos, Bebidas, Produtos Químicos, Energia, Alimentos, Bebidas, Produtos Químicos, Energia, Produtos Farmacêuticos, Pesticidas, etc;Produtos Farmacêuticos, Pesticidas, etc;
AAGENTES BIOLÓGICOS:GENTES BIOLÓGICOS: Microrganismos, Células e Microrganismos, Células e Moléculas (Enzimas, Anticorpos, DNA, etc.);Moléculas (Enzimas, Anticorpos, DNA, etc.);
SSERVIÇOS:ERVIÇOS: Purificação da água, Tratamentos de Purificação da água, Tratamentos de resíduos, Controle de poluição, etc.resíduos, Controle de poluição, etc.
INTRODUÇÃOINTRODUÇÃO• Estes conhecimentos permitem atuar nos:• Projeto de biorreatores;• Estudos de cinética de processos
bioquímicos;• Modelagem e simulação;• Purificação de produtos biológicos;• Transferência de oxigênio e ampliação de
escala;• Análise econômica;• Instrumentação e controle
ORIGEMORIGEM
• Do termo, desde a Segunda Guerra (penicilina);
• Porém, Vinho, Pão, Cerveja, Queijo, Picles, Iogurte, Vinagre, produtos descobertos na antiguidade quase por acaso, já eram conhecidos, e hoje considerados produtos obtidos por processo bioquímicos.
ORIGEMORIGEM
ORIGEMORIGEM• FATOS IMPORTANTES:
• 8000 A.C.: vinhos, cervejas e vinagres;
• 4000 A.C.: surgem os laticínios;
• 500 A.C: processo de salga e picles;
Monges: Utilização do lúpulo
IDADE MÉDIA (476dC-1453dC)
ORIGEMORIGEM• FATOS IMPORTANTES:
• 1808 D.C: cerveja chega ao Brasil;
• 1861 D.C: Pauster desenvolve a pasteurização;
• 1990 D.C: enzima para fabricação de queijo (primeiro produto modificado EUA);
EVOLUÇÃOEVOLUÇÃO• Final da segunda guerra devido a quantidade
de feridos, existe a necessidade do desenvolvimento de novas técnicas para obtenção de probióticos e em grande escala;
• As técnicas usadas até aquele momento, com o cultivo de fungos em superfície não supria a demanda;
• O conhecimento da Engenharia de Processos oriundo dos processos químicos tradicionais é utilizada para aumentar a produção de antibióticos;
EVOLUÇÃOEVOLUÇÃO
• A produção de penicilina em larga escala revoluciona o processo descoberto por Alexander Fleming em 1928;
• A humanidade passa então a beneficiar-se de produtos com propriedades organolépticas mais requintados, obtidos pela ação de microrganismos, dentre eles o queijo, pão, iogurte, cerveja, vinhos e destilados;
EVOLUÇÃOEVOLUÇÃO• Antes do inicio da segunda guerra os
processos fermentativos não dispertavam interesse porque os produtos não alimentícios, como os solventes e ácidos orgânicos já eram produzidos por processos químicos;
• A colaboração de profissionais da área de engenharia e da área biológica permitiu o desenvolvimento de novas técnicas de obtenção de novos produtos usando a ação de microrganismos;
EVOLUÇÃOEVOLUÇÃO• Inicialmente, os cultivos foram realizados em
frascos em plataformas giratórias, mas existia a limitação na transferência de oxigênio;
• O uso de frascos agitados e aerados usados como fermentadores em 1947, foi o primeiro biorreator utilizando os conhecimentos da Engenharia Química, Biologia e Bioquímica, produzido pela americana New Brunswick;
• Ainda em 1947 a Merck é premiada por produzir o antibióticos estreptomicina surgindo então oficialmente o termo Engenharia Bioquímica;
EVOLUÇÃOEVOLUÇÃO• Novos produtos passaram a ser produzidos por
processos bioquímicos;• Considerando aspectos como ampliação de
escalas, preparação de meio de cultura (Bioquímica, Microbiologia e Engenharia);
• Conclui-se que a Engenharia Bioquímica está inserida na Biotecnologia Industrial e tem características multidisciplinares necessitando de conhecimentos como Biologia, Química, Engenharia, Bioquímica, Biologia Molecular, Matemática e Computação.
EVOLUÇÃOEVOLUÇÃO
EVOLUÇÃOEVOLUÇÃOPRODUTOS OBTIDOS A PARTIR DESTE PRODUTOS OBTIDOS A PARTIR DESTE
PROCESSOS BIOQUÍMICOS:PROCESSOS BIOQUÍMICOS: - enzimas (utilizadas amplamente nas indústrias - enzimas (utilizadas amplamente nas indústrias
têxtil e de alimentos);têxtil e de alimentos);– ácidos orgânicos (com aplicações diversas na ácidos orgânicos (com aplicações diversas na
indústria química);indústria química);– antibióticos, vacinas e hormônios (utilizados na antibióticos, vacinas e hormônios (utilizados na
área de saúde humana e animal);área de saúde humana e animal);– anticorpos (utilizados em kits de diagnóstico);anticorpos (utilizados em kits de diagnóstico);– fermento (para uso caseiro e na indústria fermento (para uso caseiro e na indústria
alimentícia);alimentícia);– aminoácidos.aminoácidos.
EVOLUÇÃOEVOLUÇÃOPRODUTOS OBTIDOS A PARTIR DESTE PRODUTOS OBTIDOS A PARTIR DESTE
PROCESSOS BIOQUÍMICOS:PROCESSOS BIOQUÍMICOS:
Etanol Combustíveis;Etanol Combustíveis;
Etanol produzido por fermentação do caldo de Etanol produzido por fermentação do caldo de cana ou hidrolisados amiláceoscana ou hidrolisados amiláceos
EVOLUÇÃOEVOLUÇÃOBEBIDAS OBTIDAS A PARTIR DE PROCESSOS BEBIDAS OBTIDAS A PARTIR DE PROCESSOS
BIOQUÍMICOS:BIOQUÍMICOS:
Etanol em BebidasEtanol em Bebidas Bebidas Fermentadas:Bebidas Fermentadas: Caxiri;Caxiri; Cervejas;Cervejas; Vinhos;Vinhos; Fermentados de frutas;Fermentados de frutas; Sidras;Sidras;
EVOLUÇÃOEVOLUÇÃOBEBIDAS OBTIDAS A PARTIR DE PROCESSOS BEBIDAS OBTIDAS A PARTIR DE PROCESSOS
BIOQUÍMICOS:BIOQUÍMICOS: Bebidas Destiladas:Bebidas Destiladas: Aguardentes;Aguardentes; Cognac;Cognac; Destilados de vinhos;Destilados de vinhos; Graspa;Graspa; Pisco;Pisco; Rum;Rum; Tequila;Tequila; Tiquira;Tiquira; Uísque.Uísque.
EVOLUÇÃOEVOLUÇÃOBEBIDAS OBTIDAS A PARTIR DE PROCESSOS BEBIDAS OBTIDAS A PARTIR DE PROCESSOS
BIOQUÍMICOS:BIOQUÍMICOS: Bebidas Retificadas:Bebidas Retificadas: Vodka;Vodka; GinGin Bebidas Obtidas por MisturasBebidas Obtidas por Misturas Licores;Licores; Sangria;Sangria; Cooler;Cooler;
FONTE: BEBIDASFONTE: BEBIDAS1. CERVEJA. DRAGONE, G.,
ALMEIDA e SILVA, J.B. Capítulo 2. p. 15-50, 2010
2. PRODUÇÃO DE CERVEJA PELO PROCESSO CONTÍNUO. DRAGONE, G., BRÁNYIK, T., TEIXEIRA, J.A., ALMEIDA e SILVA, J.B. Capítulo 3. p.51-67, 2010.
3. CERVEJA SEM ÁLCOOL. SILVA, D.P., BRÁNYIK, T., TEIXEIRA, J.A., ALMEIDA e SILVA, J.B. Capítulo 4. p.69-84, 2010.
4. UÍSQUE. DRAGONE, G., FLOREZ, M.D.G., GARCIA, M.A.V., ALMEIDA e SILVA, J.B. Capítulo 20. p.385-410, 2010
EVOLUÇÃOEVOLUÇÃOPROCESSOS BIOQUÍMICOS:PROCESSOS BIOQUÍMICOS: -Passa-se então a estudar a utilização de células -Passa-se então a estudar a utilização de células
vegetais e animais com objetivo de obter produtos de vegetais e animais com objetivo de obter produtos de estruturas mais complexas e maior valor agregado;estruturas mais complexas e maior valor agregado;
-Melhoria significativa na produtividade e no -Melhoria significativa na produtividade e no rendimento dos processos em função de projetos rendimento dos processos em função de projetos com novas configurações dos biorreatores, meios de com novas configurações dos biorreatores, meios de cultura e cepas mais produtivas;cultura e cepas mais produtivas;
-A este progresso duas novas áreas do conhecimento -A este progresso duas novas áreas do conhecimento foram extremamente importantes: Informática e foram extremamente importantes: Informática e Biologia MolecularBiologia Molecular
EVOLUÇÃOEVOLUÇÃOPROCESSOS BIOQUÍMICOS:PROCESSOS BIOQUÍMICOS: - O uso de computadores permitiram o uso de modelos O uso de computadores permitiram o uso de modelos
matemáticos para o estudo cinético dos processos;matemáticos para o estudo cinético dos processos;
- A tecnologia de DNA recombinante permitiram A tecnologia de DNA recombinante permitiram modificar a capacidade dos m.o;modificar a capacidade dos m.o;
- Surge também as técnicas de Down-Stream que Surge também as técnicas de Down-Stream que permitiram conhecimentos de operações unitárias permitiram conhecimentos de operações unitárias mais requintados facilitando a obtenção de produtos mais requintados facilitando a obtenção de produtos mais puros e com alto valor agregado, como os mais puros e com alto valor agregado, como os hormônios, vacinas, reagentes, produtos obtidos hormônios, vacinas, reagentes, produtos obtidos pela química fina para uso alimentícios e pela química fina para uso alimentícios e farmacêuticos. farmacêuticos.
EVOLUÇÃOEVOLUÇÃOPROCESSOS BIOQUÍMICOS:PROCESSOS BIOQUÍMICOS: - Muitos desafios e potenciais de aplicação ainda Muitos desafios e potenciais de aplicação ainda
existem:existem:- Obtenção de produtos com valor agregados;Obtenção de produtos com valor agregados;- Tratamentos biológicos de efluentes;Tratamentos biológicos de efluentes;- Obtenção de produtos com custos mais Obtenção de produtos com custos mais
competitivos;competitivos;- Substituição de processos e produtos agressivos ao Substituição de processos e produtos agressivos ao
meio ambiente;meio ambiente;- Desenvolvimento de processos e equipamentos Desenvolvimento de processos e equipamentos
mais produtivos;mais produtivos;- Uso de matérias-primas alternativas;Uso de matérias-primas alternativas;- Tratamento biológicos de efluentes;Tratamento biológicos de efluentes;- Tecnologia mais limpa;Tecnologia mais limpa;- Inovação.Inovação.
ProdutividadeProdutividade: proporcionará a redução de custos é : proporcionará a redução de custos é o grande motivador da busca de maior o grande motivador da busca de maior produtividade, tanto no nível da operação quanto produtividade, tanto no nível da operação quanto no nível tecnológico;no nível tecnológico;
QualidadeQualidade: a melhoria continua da qualidade é a : a melhoria continua da qualidade é a chave para o sucesso industrial, pois é melhorando chave para o sucesso industrial, pois é melhorando a qualidade que se consegue diminuir os custos e a qualidade que se consegue diminuir os custos e aumentar a produtividade;aumentar a produtividade;
TecnologiaTecnologia: a importância do desenvolvimento : a importância do desenvolvimento
tecnológico leva a obtenção de vantagem tecnológico leva a obtenção de vantagem competitiva.competitiva.
INOVAÇÃO BUSCAINOVAÇÃO BUSCA
Adotar estratégias e tecnologia para gerar lucros;Adotar estratégias e tecnologia para gerar lucros; Gerar conhecimento, globalização e competição Gerar conhecimento, globalização e competição
para manter-se no mercado diante da para manter-se no mercado diante da competitividade das empresas;competitividade das empresas;
A globalização fez com que os países permitissem a A globalização fez com que os países permitissem a abertura da economia e muita empresas abertura da economia e muita empresas aproveitaram disto;aproveitaram disto;
A elaboração de estratégia competitiva ganha A elaboração de estratégia competitiva ganha maior relevância em decorrência do acirramento da maior relevância em decorrência do acirramento da concorrênciaconcorrência . .
INOVAÇÃO BUSCAINOVAÇÃO BUSCA
Fusão da Companhia Antarctica Paulista e a Companhia Fusão da Companhia Antarctica Paulista e a Companhia Cervejaria Brahma, Cervejaria Brahma,
Hoje a empresa Companhia de Bebidas das Américas, possuí Hoje a empresa Companhia de Bebidas das Américas, possuí mais de 70% de participação no mercado nacional de mais de 70% de participação no mercado nacional de bebidas;bebidas;
Continuam adotando as estratégias para manter sua Continuam adotando as estratégias para manter sua participação no mercado de bebidas;participação no mercado de bebidas;
Fusões com a belga Interbrew e com a americana Anheuser-Fusões com a belga Interbrew e com a americana Anheuser-Busch, produzindo 25% de toda a cerveja produzida no Busch, produzindo 25% de toda a cerveja produzida no
mundo.mundo.
EXEMPLOS DE INOVAÇÃOEXEMPLOS DE INOVAÇÃO
Para o sucesso da inovação, muitas pesquisas tem Para o sucesso da inovação, muitas pesquisas tem que ser conduzidas:que ser conduzidas:
Pesquisa básicaPesquisa básica: trabalho criativo realizado para : trabalho criativo realizado para ampliar o conhecimento científico. Este esforço não ampliar o conhecimento científico. Este esforço não é direcionado a um objetivo específico ou prático;é direcionado a um objetivo específico ou prático;
Pesquisa aplicadaPesquisa aplicada: pesquisa original dirigida a um : pesquisa original dirigida a um alvo prático ou objetivo prédeterminado. Pode alvo prático ou objetivo prédeterminado. Pode representar a articulação da pesquisa básica com representar a articulação da pesquisa básica com sua forma prática;sua forma prática;
Desenvolvimento experimentalDesenvolvimento experimental: representa o uso : representa o uso do conhecimento científico para produzir novos do conhecimento científico para produzir novos produtos ou materiais, dispositivos, processos, produtos ou materiais, dispositivos, processos, sistemas ou serviços melhorados sistemas ou serviços melhorados substancialmente.substancialmente.
INOVAÇÕES TECNOLÓGICASINOVAÇÕES TECNOLÓGICAS
Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística (IBGE), Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística (IBGE), apresenta os seguintes conceitos para o processo de apresenta os seguintes conceitos para o processo de inovação:inovação:
Inovação tecnológicaInovação tecnológica como a fase de implementação de como a fase de implementação de produtos (bens ou serviços) ou processos tecnologicamente produtos (bens ou serviços) ou processos tecnologicamente novos ou substancialmente aprimorados;novos ou substancialmente aprimorados;
Implementação da inovaçãoImplementação da inovação é fase em que o produto é é fase em que o produto é introduzido no mercado ou quando o processo passa a ser introduzido no mercado ou quando o processo passa a ser operado pela empresa;operado pela empresa;
Produto tecnologicamente novoProduto tecnologicamente novo é aquele cujas características é aquele cujas características fundamentais diferem significativamente de todos os fundamentais diferem significativamente de todos os produtos previamente produzidos pela empresa.produtos previamente produzidos pela empresa.
INOVAÇÕES TECNOLÓGICASINOVAÇÕES TECNOLÓGICAS
Etanol de primeira geração: produzido a partir de Etanol de primeira geração: produzido a partir de caldo de cana (leveduras selecionadas, alteraçao da caldo de cana (leveduras selecionadas, alteraçao da relação bagaço/caldo;relação bagaço/caldo;
Etanol de segunda geração: produzido a partir de Etanol de segunda geração: produzido a partir de materiais lignocelulósicos;materiais lignocelulósicos;
Etanol de terceira geração: produzido a partir de Etanol de terceira geração: produzido a partir de hidrolisado de macroalgas marinhas;hidrolisado de macroalgas marinhas;
INOVAÇÕES TECNOLÓGICASINOVAÇÕES TECNOLÓGICAS
Vodka gaseificada;Vodka gaseificada;Cervejas aromatizadas (abacaxi, compota de Cervejas aromatizadas (abacaxi, compota de
frutas e manjericão, pêssegos, limão, frutas e manjericão, pêssegos, limão, chocolate, rosas);chocolate, rosas);
Cerveja produzidas como os vinhos, que Cerveja produzidas como os vinhos, que trazem no rótulo a safra, e envasadas em trazem no rótulo a safra, e envasadas em garrafas com rolhas que podem ser garrafas com rolhas que podem ser guardadas em adegas por muitos anos;guardadas em adegas por muitos anos;
Cervejas com adjuntos não convencionais Cervejas com adjuntos não convencionais (arroz preto, banana, pupunha, pinhão, (arroz preto, banana, pupunha, pinhão, melaço de cana);melaço de cana);
INOVAÇÕES TECNOLÓGICASINOVAÇÕES TECNOLÓGICAS
ENGENHARIA BIOQUÍMICAENGENHARIA BIOQUÍMICA
ENGENHARIA BIOQUÍMICAENGENHARIA BIOQUÍMICA• INTRODUÇÃO À ENGENHARIA BIOQUÍMICAINTRODUÇÃO À ENGENHARIA BIOQUÍMICA• CINÉTICA DAS REAÇÕES ENZIMÁTICASCINÉTICA DAS REAÇÕES ENZIMÁTICAS
• 2 - MICRORGANISMOS E MEIOS DE CULTURA PARA 2 - MICRORGANISMOS E MEIOS DE CULTURA PARA UTILIZAÇÃO INDUSTRIALUTILIZAÇÃO INDUSTRIAL 2.1. Introdução 2.1. Introdução 2.2. Fontes de microrganismos de interesse 2.2. Fontes de microrganismos de interesse 2.3. Características desejáveis de microrganismos e meios de cultura para aplicação 2.3. Características desejáveis de microrganismos e meios de cultura para aplicação industrialindustrial 2.4. Considerações finais 2.4. Considerações finais
• 4 - ESTERILIZAÇÃO DE MEIOS DE FERMENTAÇÃO POR AQUECIMENTO COM VAPOR4 - ESTERILIZAÇÃO DE MEIOS DE FERMENTAÇÃO POR AQUECIMENTO COM VAPOR 4.1. Introdução 4.1. Introdução 4.2. Descrição sumária dos processos de esterilização por calor úmido 4.2. Descrição sumária dos processos de esterilização por calor úmido 4.3. Cinética da destruição térmica de microrganismos 4.3. Cinética da destruição térmica de microrganismos 4.4. Destruição de nutrientes do meio como consequência da esterilização 4.4. Destruição de nutrientes do meio como consequência da esterilização 4.5. Considerações gerais a respeito do cálculo do tempo de esterilização 4.5. Considerações gerais a respeito do cálculo do tempo de esterilização 4.6. Cálculo do tempo de esterilização por processo descontínuo 4.6. Cálculo do tempo de esterilização por processo descontínuo 4.7. Cálculo do tempo de esterilização por processo contínuo 4.7. Cálculo do tempo de esterilização por processo contínuo
ENGENHARIA BIOQUÍMICAENGENHARIA BIOQUÍMICA• 6 - CINÉTICA DE PROCESSOS FERMENTATIVOS6 - CINÉTICA DE PROCESSOS FERMENTATIVOS
6.1. Introdução 6.1. Introdução 6.2. Parâmetros de transformação 6.2. Parâmetros de transformação 6.3. Cálculo das velocidades 6.3. Cálculo das velocidades 6.4. A curva de crescimento microbiano 6.4. A curva de crescimento microbiano 6.5. Classificação dos processos fermentativos 6.5. Classificação dos processos fermentativos 6.6. Influência da concentração do substrato sobre a velocidade específica de 6.6. Influência da concentração do substrato sobre a velocidade específica de crescimentocrescimento
• 9 - FERMENTAÇÃO DESCONTÍNUA9 - FERMENTAÇÃO DESCONTÍNUA 9.1. Introdução 9.1. Introdução 9.2. Inóculo 9.2. Inóculo 9.3. Mosto 9.3. Mosto 9.4. Classificação 9.4. Classificação 9.5. Número de dornas 9.5. Número de dornas
• 10 - FERMENTAÇÃO DESCONTÍNUA ALIMENTADA10 - FERMENTAÇÃO DESCONTÍNUA ALIMENTADA 10.1. Introdução 10.1. Introdução 10.2. Aplicações 10.2. Aplicações 10.3. Classificação 10.3. Classificação 10.4. Modelos matemáticos 10.4. Modelos matemáticosReferências bibliográficasReferências bibliográficas
ENGENHARIA BIOQUÍMICAENGENHARIA BIOQUÍMICA• 11 - FERMENTAÇÃO SEMICONTÍNUA11 - FERMENTAÇÃO SEMICONTÍNUA
11.1. Definição 11.1. Definição 11.2. Produtividade do processo semicontínuo 11.2. Produtividade do processo semicontínuo 11.3. Comentários finais 11.3. Comentários finais
• 12 - FERMENTAÇÃO CONTÍNUA12 - FERMENTAÇÃO CONTÍNUA 12.1. Conceitos básicos 12.1. Conceitos básicos 12.2. Vantagens e desvantagens do processo contínuo em relação ao descontínuo 12.2. Vantagens e desvantagens do processo contínuo em relação ao descontínuo 12.3. Formas de operação no sistema contínuo 12.3. Formas de operação no sistema contínuo 12.4. Formação de produtos no sistema contínuo 12.4. Formação de produtos no sistema contínuo
• 14 - AGITAÇÃO E AERAÇÃO EM BIORREATORES14 - AGITAÇÃO E AERAÇÃO EM BIORREATORES 14.1. A importância da transferência de oxigênio 14.1. A importância da transferência de oxigênio 14.2. Sistemas para a transferência de oxigênio 14.2. Sistemas para a transferência de oxigênio 14.3. Concentração de oxigênio dissolvido em soluções saturadas 14.3. Concentração de oxigênio dissolvido em soluções saturadas 14.4. Transferência de oxigênio e respiração microbiana 14.4. Transferência de oxigênio e respiração microbiana 14.5. Transferência de oxigênio em sistemas agitados e areados 14.5. Transferência de oxigênio em sistemas agitados e areados 14.6. Considerações finais 14.6. Considerações finais