Doutoranda: Cláudia Turra
INTRODUÇÃO
NP magnéticas → agentes de contraste em RM
Óxidos de Fe
FeCo, FePt, FePd → fortes propriedades magnéticasdissolução gradual dosmetais
Marcação celularEntrega de fármacosAgentes de contraste em RMHipertermia magnética localizada
INTRODUÇÃO
NP magnéticas do tipo core shell - revestimento de sílica
NP de FePt@Fe2O3 → imagens in vitro
FePt@Fe2O3 > FePt@Fe2O4
INTRODUÇÃO - OBJETIVOS
Sintetizar NP de FePt@Fe2O3 do tipo core shell revestidas com PEG
Estudos in vitro e in vivo de toxicidade e imagens de RM
Adição de AF (in vitro): estabilidademarcação de células de câncer – morte seletiva
in vivo: contraste para imagens do
tipo T2 de RM toxicidade não observável
http://www.plataformainterativa2.com/coluna/html/revistacoluna/volume1/imagens_ressonancia.htm
METODOLOGIASíntese de NP core shell de FePt@Fe2O3
Síntese de NP de FePtOleyamina (99%)Ácido oleico (99%)1,2-hexadecanodiol (90%)1-octadeceno (99%)Pt(acac)2 98%Fe(CO)5
Sigma-Aldrich
Deposição térmica partindo do Pt(acac)2 e Fe(CO)5 → caroçoCrescimento de uma camada de Fe por injeção de Fe(CO)5
Atmosfera aquecida a 180 ◦C + fluxo de O2 por 2h = oxidação → Fe2O3
Dispersão em diferentes solventes orgânicos
METODOLOGIACultura de células
Células de carcinoma humano do tipo KBCélulas HeLa
Células hepáticasCélulas de câncer de mama
Crescidas em meios de cultura específicos
METODOLOGIAModelos tumorais
Ratos Balb/c injetados com 2x106 células em 60 μL de PBS no ombro direito da fêmeas
Volume de 60 mm3
Dieta livre de folato por duas semanas antes da inoculação do tumor
METODOLOGIAImagens de RM in vivo
Injeção intravenosa com FePt@Fe2O3-PEG ou FePt@Fe2O3-PEG-FA (34 mg/kg de Fe)
Scanner clínico de 3T com bobina especial para pequenos animais
Parâmetros específicos
METODOLOGIAHematoxicilina e eosina
Ratos não tratados (controle) e injetados com as NP foram sacrificados após 1 e 20 dias da injeção
Órgãos (fígado, pulmões, baço, rins, coração e tumores) retirados
Fixados em formalina 4% e coloridos com H e E e PSB
Examinados em microscópio digital
METODOLOGIABioquímica sérica e análise de sangue
Ratos injetados com as NP foram sacrificados após 1, 7 e 20 dias da injeção para coleta de sangue
0,8 mL de sangue por animal foi coletado antes
RESULTADOS E DISCUSSÕESSíntese via Efeito Kirkendall
Difratometria de raios-X: picos característicos de cristal FCC
http://www.nanowerk.com/spotlight/spotid=301.php
RESULTADOS E DISCUSSÕES
Estruturas core shell
2,6 nm 2,3 nm
imagem TEM
RESULTADOS E DISCUSSÕES
51 nm
RESULTADOS E DISCUSSÕES
Caráter superparamagnético15
RESULTADOS E DISCUSSÕES
Imagens de RM T2 de soluções de FePt@Fe2O3-PEG com ≠ [ Fe]
RESULTADOS E DISCUSSÕESCélulas KB Liberação de LDH
RESULTADOS E DISCUSSÕES
+
-
[NP] = 100 μg/mLRM – 3T
Temperatura ambiente
- 26% - 73%
- 25% - 28%
63%
RESULTADOS E DISCUSSÕES
RESULTADOS E DISCUSSÕESpH
= 8
,0
5032
RESULTADOS E DISCUSSÕES
Células KBToxicidade > para NP-PEG-DOX
Células HeLaToxicidade < para NP-PEG-DOX
RESULTADOS E DISCUSSÕES
RESULTADOS E DISCUSSÕES
- 37%
- 14%
- 63%
34 mg/kg de Fe
RESULTADOS E DISCUSSÕESPE
GPE
G+F
A
RESULTADOS E DISCUSSÕES
RESULTADOS E DISCUSSÕESBioquímica
Albumina/globulina
RESULTADOS E DISCUSSÕES
CONCLUSÕES produção e caracterização de NP de FePt@Fe2O3 PEGuiladas
NP do tipo core-shell – material para entrega de fármaco e contraste para RM
in vitro – entrega de fármaco e morte celular seletiva
in vivo – contraste para imagens de RM
baixa citotoxicidade
estudos futuros - efeitos terapêuticos da DOX + citotoxicidade a longo prazo
superfície da NP com engenharia apropriada – potencial agente de contraste para imagens T2 + utilização molecular in vivo + aplicações terapêuticas
OBRIGADA!