Doutoranda: Cláudia Turra

INTRODUÇÃO

NP magnéticas → agentes de contraste em RM

Óxidos de Fe

FeCo, FePt, FePd → fortes propriedades magnéticasdissolução gradual dosmetais

Marcação celularEntrega de fármacosAgentes de contraste em RMHipertermia magnética localizada

INTRODUÇÃO

NP magnéticas do tipo core shell - revestimento de sílica

NP de FePt@Fe2O3 → imagens in vitro

FePt@Fe2O3 > FePt@Fe2O4

INTRODUÇÃO - OBJETIVOS

Sintetizar NP de FePt@Fe2O3 do tipo core shell revestidas com PEG

Estudos in vitro e in vivo de toxicidade e imagens de RM

Adição de AF (in vitro): estabilidademarcação de células de câncer – morte seletiva

in vivo: contraste para imagens do

tipo T2 de RM toxicidade não observável

http://www.plataformainterativa2.com/coluna/html/revistacoluna/volume1/imagens_ressonancia.htm

METODOLOGIASíntese de NP core shell de FePt@Fe2O3

Síntese de NP de FePtOleyamina (99%)Ácido oleico (99%)1,2-hexadecanodiol (90%)1-octadeceno (99%)Pt(acac)2 98%Fe(CO)5

Sigma-Aldrich

Deposição térmica partindo do Pt(acac)2 e Fe(CO)5 → caroçoCrescimento de uma camada de Fe por injeção de Fe(CO)5

Atmosfera aquecida a 180 ◦C + fluxo de O2 por 2h = oxidação → Fe2O3

Dispersão em diferentes solventes orgânicos

METODOLOGIACultura de células

Células de carcinoma humano do tipo KBCélulas HeLa

Células hepáticasCélulas de câncer de mama

Crescidas em meios de cultura específicos

METODOLOGIAModelos tumorais

Ratos Balb/c injetados com 2x106 células em 60 μL de PBS no ombro direito da fêmeas

Volume de 60 mm3

Dieta livre de folato por duas semanas antes da inoculação do tumor

METODOLOGIAImagens de RM in vivo

Injeção intravenosa com FePt@Fe2O3-PEG ou FePt@Fe2O3-PEG-FA (34 mg/kg de Fe)

Scanner clínico de 3T com bobina especial para pequenos animais

Parâmetros específicos

METODOLOGIAHematoxicilina e eosina

Ratos não tratados (controle) e injetados com as NP foram sacrificados após 1 e 20 dias da injeção

Órgãos (fígado, pulmões, baço, rins, coração e tumores) retirados

Fixados em formalina 4% e coloridos com H e E e PSB

Examinados em microscópio digital

METODOLOGIABioquímica sérica e análise de sangue

Ratos injetados com as NP foram sacrificados após 1, 7 e 20 dias da injeção para coleta de sangue

0,8 mL de sangue por animal foi coletado antes

RESULTADOS E DISCUSSÕESSíntese via Efeito Kirkendall

Difratometria de raios-X: picos característicos de cristal FCC

http://www.nanowerk.com/spotlight/spotid=301.php

RESULTADOS E DISCUSSÕES

Estruturas core shell

2,6 nm 2,3 nm

imagem TEM

RESULTADOS E DISCUSSÕES

51 nm

RESULTADOS E DISCUSSÕES

Caráter superparamagnético15

RESULTADOS E DISCUSSÕES

Imagens de RM T2 de soluções de FePt@Fe2O3-PEG com ≠ [ Fe]

RESULTADOS E DISCUSSÕESCélulas KB Liberação de LDH

RESULTADOS E DISCUSSÕES

+

-

[NP] = 100 μg/mLRM – 3T

Temperatura ambiente

- 26% - 73%

- 25% - 28%

63%

RESULTADOS E DISCUSSÕES

RESULTADOS E DISCUSSÕESpH

= 8

,0

5032

RESULTADOS E DISCUSSÕES

Células KBToxicidade > para NP-PEG-DOX

Células HeLaToxicidade < para NP-PEG-DOX

RESULTADOS E DISCUSSÕES

RESULTADOS E DISCUSSÕES

- 37%

- 14%

- 63%

34 mg/kg de Fe

RESULTADOS E DISCUSSÕESPE

GPE

G+F

A

RESULTADOS E DISCUSSÕES

RESULTADOS E DISCUSSÕESBioquímica

Albumina/globulina

RESULTADOS E DISCUSSÕES

CONCLUSÕES produção e caracterização de NP de FePt@Fe2O3 PEGuiladas

NP do tipo core-shell – material para entrega de fármaco e contraste para RM

in vitro – entrega de fármaco e morte celular seletiva

in vivo – contraste para imagens de RM

baixa citotoxicidade

estudos futuros - efeitos terapêuticos da DOX + citotoxicidade a longo prazo

superfície da NP com engenharia apropriada – potencial agente de contraste para imagens T2 + utilização molecular in vivo + aplicações terapêuticas

OBRIGADA!