Aspectos químicos e analíticos
Gabriela Duarte DiasLuryê Soria
Rafaela RodriguesSamara Dias
Nutrição Matutino 2013
Universidade de São PauloBromatologia básica – FBA-201
Agenda• Introdução
• Propriedades físico-químicas das vitaminas
hidrossolúveis
• Principais métodos de análises das
vitaminas hidrossolúveis
• Conclusão
• Considerações Finais
• Referências
Introdução
Ácido ascórbico Vitamina C
Poderoso agente redutor o qual é oxidado muito rapidamente
TiaminaVitamina B1
• Propriedades físico-químicas
RiboflavinaVitamina B2
• Propriedades físico-químicas
NiacinaVitamina B3
Ácido nicotínico Nicotinamida
• Propriedades físico-químicas
O triptofano é metabolizado a niacina
PiridoxinaVitamina B6
CianocobalaminaVitamina B12
Grupo de estruturas complexas
• Propriedades físico-químicas
Biotina• Propriedades físicas e químicas:
Ácido Pantotênico
• Propriedades físicas e químicas:
Ácido Fólico
• Propriedades físicas e químicas:
Método Fluorimétrico
• Descrição do método: Técnica utilizada na
determinação qualitativa ou quantitativa
de substâncias nas quais ocorre o fenômeno
da fluorescência
Vitaminas analisadas pelo método
Vitamina C
Tiamina (Vitamina B1)
Riboflavina (Vitamina B2)
Método Microbiológico• Princípio: uso da vitamina como micronutriente essencial
para microrganismos cultivados• De acordo com o crescimento da cultura de bactérias,
determina-se a quantidade de vitamina da amostra• Pode ser usado para todas as vitaminas do complexo B
• Algumas das espécies utilizadas são: Enterococcus faecalis, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus casei
Método CLAE• Descrição do método: técnica utilizada
para a separação dos componentes de uma mistura, através da distribuição dos componentes entre uma fase estacionária e uma fase móvel, pela afinidade das substâncias com cada fase.
Vitaminas analisadas pelo método
Vitamina C
Tiamina (Vitamina B1)
Riboflavina (Vitamina B2)
Niacina (Vitamina B3)
Piridoxina (Vitamina B6)
Ácido Fólico
Ácido Pantotênico
Biotina
Método CLAE
Cromatografia Normal
Cromatografia de Fase Reversa
Fase Estacionária Polar Apolar
Fase Móvel Apolar Polar
Compostos com maior tempo de retenção
Polares Apolares
Método Espectrofotométrico• Descrição do método: Método analítico que se baseia na
interação da matéria com a energia radiante• A absorbância é proporcional à concentração da espécie
química absorvente
Vitamina analisada pelo método
Vitamina C
• O método CLAE é o mais utilizado para a análise de vitaminas hidrossolúveis apesar de seu alto custo
• Existem métodos mais baratos que também são eficazes (ex: Microbiológico)
Conclusão
Considerações Finais
Referências• GREENFIELD. H., SOUTHGATE, D.A.T. Food composition data:
Production, management and use. 2ed. Food and Agriculture Organization of United Nations (FAO), Rome, 2003. Cap 7: Review of methods of analysis (p. 127-147 )
• PENTEADO, M.V.C. Vitaminas: aspectos nutricionais, bioquímicos, clínicos e analíticos. Barueri: Manole, 2003
• SANTOS, Diego Ives de Vilas Boas; GIL, Eric de Souza. FLUORIMETRIA NA ANÁLISE FARMACÊUTICA: UMA REVISÃO. Revista Eletrônica de Farmácia, Goiânia, n. , p.01-16, 02 mar. 2010
Obrigada !
Método Fluorimétrico
Vitaminas Particularidades
Ácido Ascórbico Vitamina C
• Utilizado na ausência de ácido eritórbico• Oxidação: ácido ascórbico + ácido dehidroascórbico + o-
fenilenodiamina = derivado fluorescente• Mede as duas formas ativas do ácido ascórbico
Tiamina Vitamina B1
• Oxidação a tiocromo em meio alcalino, pois a tiamina não é naturalmente fluorescente
Riboflavina Vitamina B2
• Apresenta fluorescência, portanto não há necessidade de derivatização
Método Microbiológico
Vitaminas Particularidades
TiaminaVitamina B1
• Procedimento de extração de modo que a tiamina seja obtida na forma livre• Lactobacilus fermentum
RiboflavinaVitamina B2
• Lactobacilus casei• Enterococcus faecalis• Ensaio turbidimétrico
NiacinaVitamina B3
• Lactobacilus plantarum• Não consegue diferenciar entre ácido nicotínico e nicotinamida
PiridoxinaVitamina B6
• Saccharomyces carlsbergensis• É necessário que as vitaminas estejam na forma livre
CianocobalaminaVitamina B12
• Lactobacillus leichmanii• Tamponamento• Leitura da absorbância de luz UV
Biotina• Lactobacillus plantarum• “Quantificação” através da turbidimetria ou da titulação
Ácido Pantotênico• Extração prévia com éter para retirar os ácidos graxos• Lactobacillus plantarum
Ácido FólicoVitamina B9
• Uso de ácido ascórbico• Lactobacillus rhamnosis
Método CLAE
Vitaminas Particularidades
TiaminaVitamina B1
• Preferível detecção em fluorescência
RiboflavinaVitamina B2
• Purificação do extrato antes da injeção do cromatógrafo
NiacinaVitamina B3
• Não há particularidades
Vitamina B6• Resultados mais confiáveis e mais sensíveis do que o
microbiológico
CobalaminaVitamina B12
• Não há particularidades
Biotina• Extração preliminar com ácido seguido por tratamento com
papaína