desenvolvimento de fÁrmacos imunoestimulantes para abelhas (apis

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  • 8/3/2019 DESENVOLVIMENTO DE FRMACOS IMUNOESTIMULANTES PARA ABELHAS (apis

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    Doutorando: Idalcio Pacfico da SilvaOrientador : Dr. Benito Soto Blanco

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    Ateno Sanitria Poucas pesquisas com doenas;

    baixo nvel de controle sanitrio dos apirios;

    Importao em 1953

    Warwick E. Kerr

    (Embrapa, 2004)

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    Desaparecimento das abelhas -

    Colony Collapse Disorder (CCD)

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    SINTOMAS

    A populao de abelhas adultas

    desaparecem repentinamente ou

    reduzida a pequeno enxame com rainha,

    sem acmulo de abelhas mortas.

    Por poucas semanas, algumas vzes

    poucos dias

    Em locais onde as abelhas so ativas.

    Presena de Crias, Plem e Mel e as vezes

    da rainha

    Pouca evidncia de saques ou de presena

    de pragas

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    Quem est recebendo o

    impacto da CCD no Mundo ? Grandes apicultores comerciais que fazem apicultura

    migratria Nos USA em maior escala (CA, FL, TX) relatam perdas de

    30-90% Em Utah-USA (2008) houve um caso de umapicultor com 800 colmeias apresentar perda de >90%

    - Europa :Alemanha, Espanha,etc.(mdia escala)- Amrica do Sul :Argentina, BRASIL ( em pequena escala)

    Apicultores comerciais , Pequenos produtores e hobistas Alguns produtores de enxames e de Rainhas

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    PRINCIPAIS CAUSAS PATGENOS: O caro Varroadestructor(o tipo virulento

    originrio da Rssia e o menos virulento originrio do Japo), o

    protozorioNosemaceranae (encontrado no Brasil em 2006 porDejair Message e identificado por Robert Paxton na Inglaterra), ovirus IAPV-Israeli (acute paralysis virus ) (Israel 2002) cujapresena no Brasil foi confirmada por Erica Weinsteinm e JayEvans (USDA) e o virus KBV-Kashmir bee virus , ambos associados

    varroatose (96% dos casos de CCD ) e o besouroAethina tumida(no existente no Brasil).

    INSETICIDAS ALTAMENTE TXICOS. Proibidos em muitospases mas infelizmente j sendo usados no BRASIL.

    MANEJO INADEQUADO: Nutrio (alimentao deficiente)stress (que compromete o sistema imunolgico das abelhas),etc.

    COMBINAO DE VRIOS FATORES (Efeito sinergstico) efatores desconhecidos.

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    Avioneta pulverizando pesticida em cultura

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    DETALHES SOBRE ALGUNS

    PESTICIDAS TXICOS S ABELHAS FIPRONIL- Fabricante: BASF

    Nome comercial: REGENTE TS

    IMIDACLOPRID-Fabricante: BAYER Nome comercial: GAUCHO, CONFIDOR

    THDIOMETHOXAM= ou CRUISER

    CLOTHIANIDINE-Fabricante: BAYER

    Nome comercial: PONCHO

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    Presidente G.Ratia (APIMONDIA2009) apresentando campanha de

    proteo s abelhas e contra osagrotxicos

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    A Apicultura brasileira atual est baseada na explorao dasabelhas Africanizadas (Poli-hbrido AHB ) , as nicasexistentes hoje na natureza e que representam um dos exemplosraros de competio entre as sub-espcies deApis nos insetos (abelhas europias x africanas) com domnio dos caracteres deuma delas (africana =Apism.scutellata )

    ABELHAS AFRICANIZADAS

    AbelhasAfricanizadas

    Abelha

    Africana

    Abelhas

    Europias

    A expanso das abelhas AHB no Brasil e nas Amricas se deve sua elevada capacidade de enxameao e adaptao aos

    distintos climas e ambientes

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    As abelhas africanas A. m. scutellatase cruzaram com asdemais abelhas melferas introduzidas anteriormenteno Brasil DOMINANDO-AS, dando origem sAHB e africanizao dos apirios

    Terminologia AHB adotada para EVITAR asterminologias abelhas brasileiras e killer beescriada pela mdia e que prejudicaram a apicultura.

    Foram feitas PESQUISAS BSICAS, por vriosanos, pelos pesquisadores da USP deRibeiro Preto, auxiliados por colegasde outras Instituies, nos estudos sobrea BIOLOGIA e MANEJO dessas abelhas,sob a orient/ do Prof. Dr. Warwick E.Kerr .

    A TERMINOLOGIAABELHAS AFRICANIZADASOU AHB FOI CRIADA EM 1974

    COM BASE NOS SEGUINTES CRITRIOS:

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    Justificativa Frmacos eficazes

    Ivermectina Mosca, coelho, etc.

    Levamizole ruminantes, humanos, etc.

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    Justificativa Aumentar a resistncia e a introduo de novas doenas

    bactrias, fungos, vrus (principalmente em larvas)

    e por protozorios, caros e insetos (abelhas adultas),

    Prejuzos diretos pelo aumento da mortalidade, tanto de crias

    como de abelhas adultas

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    Justificativa O presente projeto o primeiro estudo a investigar o

    efeito de drogas veterinrias na reposta imune de

    Abelhas (Apis mellifera), avaliando a atividade da

    fenoloxidase (PO) na hemolinfa, a concentrao sub-

    letal de imunomoduladores e possveis resduos nomel.

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    HipteseA. mellifera pode ser imunoestimulada atravs da

    administrao de frmacos imunomoduladores.

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    Objetivos Geral

    Desenvolver frmacos com efeito imunoestimulantes emApis

    mellifera.

    Especficos

    Determinar a toxicidade dos frmacos para abelhasA.mellifera

    Avaliar os efeitos imunoestimulantes dos frmacos emA. mellifera.

    Identificar possvel resduo dos imunoestimulantes no mel

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    Material e Mtodos Experimento 1:

    Comparao da atividade de PO de diferentes espciesde abelhas 20 animais de cada uma das espcies de abelhas:

    A. mellifera,

    Melipona subnitida

    eXylocopa sp. (mamangava)

    Sero quantificadas as atividades de PO de cada um dosanimais coletados.

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    Material e Mtodos Experimento 2:

    Determinao da toxicidade da ivermectina para abelhasA.mellifera

    Ser preparada a dieta artificial candi, que ser adicionadacom ivermectina nas concentraes: 0 (controle), 0,5, 1,0 ou 3,0 g/kg.

    As solues com ivermectina sero preparadas pela dissoluode ivermectina em gua destilada e adicionadas ao alimento.

    (Strong e James, 1993).

    (Biomectina, Biofarm, Jaboticabal, SP)

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    Experimento 3: Avaliao da atividade imunoestimulante da ivermectina

    em abelhas Sero coletas abelhas nos perodos de 24, 48 e 72 horas aps o

    incio do tratamento.

    Os animais sero aleatoriamente separados: determinaes da massa corporal

    teor de gordura quantificao da atividade de PO,

    10 abelhas para cada teste em cada perodo de coleta.

    (mtodo de Sundstrom, 1995, modificado

    por West; Tracy, 2009).

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    Experimento 4: Avaliao do resduo de ivermectina no mel

    Uma comia deA. Mellifera - tratada com candi contendoivermectina. Concentrao

    A soluo padro ser obtida pela mistura da ivermectina(0,1 mg) em 10 ml de metanol.

    Antes do tratamento e aps 30 dias, sero coletadas amostrasde mel para determinao da concentrao de ivermectina,

    (MARTINS, 2008).

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    Bioensaio de toxicidade em

    abelhasAs abelhas sero obtidas na fazenda Experimental

    Rafael Fernandes (Alagoinha), da UFERSA.

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    Operrias recm emergidas, sero selecionadas no favode cria.

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    Vinte abelhas sero acondicionadas em 12 caixas, Cada caixa medindo 11 cm de comprimento x 11 de largura e 7 cm

    de altura e orifcios nas laterais fechados com tela de nylon para

    ventilao, previamente forradas com papel filtro e com tampas.

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    Adio do frmaco ao candi, que servir de alimentopara as abelhas (MESQUITA et al., 2010; VALE DASILVA et al., 2010).

    A gua e o alimento sero oferecidos ad libitum. Em cada caixa sero colocadas a dieta em um pequeno

    recipiente plstico e gua embebida em um chumao dealgodo em outro recipiente, que sero completadosdiariamente

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    As caixas com as abelhas sero acondicionadas a umaestufa BOD com temperatura ajustada a 32 C eumidade de 70%. Diariamente, s 10:00hs, ser feita a

    vistoria de cada caixa, fazendo a contagem e remoodas abelhas mortas. A contagem continuar at queocorra a morte da ltima abelha.

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    Anlise estatstica As anlises estatsticas sero realizadas com o auxlio do

    programa GraphPad Prism v.4 para Mac.

    Os dados sero comparados pelo teste de anlise de

    varincia ANOVA,

    Diferenas entre as mdias pelo teste de Dunnett

    O nvel de significncia ser estabelecido em 5%.

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    AtividadesAtividades previstas

    2011

    Jan Fev Mar Abr mai jun jul Ago Set Out Nov Dez

    Elaborao do Pr-projeto x x

    Pesquisa e Reviso de

    literatura.x x x x x x

    Determinao datoxicidade daivermectina

    A.mellifera

    x x x