Criopreservação do sêmen canino

Criopreservação do sêmen canino

UENFProfª Isabel Candia Nunes da Cunha

Inseminação ArtificialInseminação Artificial

Refrigeração e Congelamento de SêmenRefrigeração e Congelamento de Sêmen

Obtenção dos Oócitos, MIV, FIV e CIVObtenção dos Oócitos, MIV, FIV e CIV

Criopreservação de oócitos e embriõesCriopreservação de oócitos e embriões

Injeção Intracitoplasmática de Espermatozóides Injeção Intracitoplasmática de Espermatozóides

Conservação dos ováriosConservação dos ovários

Biotecnologias que podem ser aplicadas à reprodução caninaBiotecnologias que podem ser aplicadas à reprodução canina

Inseminação artificialé a biotécnica mais

procurada por

proprietários de cães

Inseminação artificialé a biotécnica mais

procurada por

proprietários de cães

Possibilita reprodução entre animais com alterações de comportamento

Supera particularidades raciais que possam dificultar a monta

Possibilita a utilização de técnicas de reprodução assistida

Favorece o melhoramento genético rápido e eficiente

Proporcionar acasalamentos genéticos dirigidos

VantagensVantagensda IA em da IA em

cãescães

Controle de doenças

Prevenção de acidentes que podem ocorrer com a fêmea quando o macho é muito pesado ou agressivo

Uso de machos com problemas adquiridos e impossibilitados de efetuarem a monta

Possibilita acasalamento entre animais que vivem em regiões distantes

Aumento do número de descendentes de um cão

Uso de machos após a morte

VantagensVantagensda IA em da IA em

cãescães

Sucesso em uma IASucesso em uma IA

Óvulo

EspermatozóideEspermatozóide

Encontro dos gametas

Fertilização

Fases do Ciclo EstralFases do Ciclo Estral

Proestro

Estro

Diestro

Anestro

Ciclo Estral nas CadelasCiclo Estral nas Cadelasespermatozóides são capazes de fertilizar por mais de 4 - 6 dias

proestroproestro estro (dias)estro (dias) diestrodiestro0 \ 1 \ 2 \ 3 \ 4 \ 5 \ 6 \ 7 \ 8

proge

steron

a

estrógeno

pico LH

2 diasOvulações ocorrem durante 24 - 96 h

Ovócitos primários levam de 24 - 48 h para se capacitar

Cada óvulo é fertilizável por um período de 12 a 24h

Adaptado de Nelson e Feldman (1996)

Métodos de Detecção da ovulação

Métodos de Detecção da ovulação

Comportamento

Citologia Vaginal

Vaginoscopia

Dosagem de progesterona

Ultra-sonografia

Inseminação Artificial em Cães

Inseminação Artificial em Cães

É a deposição do sêmen no interior do É a deposição do sêmen no interior do trato reprodutivo da fêmeatrato reprodutivo da fêmea

sêmen fresco

sêmen refrigerado

sêmen congelado

Inseminação Artificial com Sêmen à Fresco

Inseminação Artificial com Sêmen à Fresco

Sêmen não diluídoforma mais comumtaxa de concepção de 75 a 80%

Sêmen diluídoenriquecimento do sêmen para prolongar a sua viabilidade para 12 a 48hAumenta o volume do ejaculado

Protocolo para IA com sêmen à fresco

Protocolo Protocolo para IA com sêmen à frescopara IA com sêmen à fresco

detecção do momento da ovulaçãodetecção do momento da ovulação•inseminar no pico céls. Superficiais•repetir a cada 48h

•avaliação• volume de 5 a 10 ml •dose inseminante de 150 milhões de sptz. viáveis

coleta e avaliação do sêmen coleta e avaliação do sêmen

•posteriores da fêmea elevados durante 15 minutos

inseminação no fundo de vagina inseminação no fundo de vagina

Inseminação Artificial em Cães

Inseminação Artificial em Cães

É a deposição do sêmen no interior do É a deposição do sêmen no interior do trato reprodutivo da fêmeatrato reprodutivo da fêmea

sêmen fresco

sêmen refrigerado

sêmen congelado

Finalidades da criopreservaçãoFinalidades da criopreservação

Baixa metabolismo espermático

Aumenta sobrevida do sêmen

Utilização do sêmen no momento desejado

Refrigerado ou CongeladoRefrigerado ou Congelado

Utilidade do sêmen criopreservado

Utilidade do sêmen criopreservado

Mercado PET

Animais que vivem em locais distantes

Utilização de material genético de alto valor zootécnico

Reserva biológica de machos melhoradores

Utilidade do sêmen criopreservado

Utilidade do sêmen criopreservado

Preservação animal

Reserva biológica do país

FrozenZoo

Refrigeração do sêmen de cãoRefrigeração do sêmen de cão

Menores danos à integridade da célula

Sêmen de cão reaquecidoSêmen de cão reaquecido

Alta fertilidadeAlta fertilidadeCurto tempo de preservação!Curto tempo de preservação!

Congelação do sêmen de cãoCongelação do sêmen de cão

Longo período de conservação

Maiores danos à integridade da célula

Sêmen de cão descongeladoSêmen de cão descongelado

Baixa fertilidadeBaixa fertilidadeCurto tempo de utilização!Curto tempo de utilização!

Refrigeração do sêmen de cãoRefrigeração do sêmen de cãoManutenção do sêmen a uma temperatura de 5ºC por no máximo 72h

Ideal para o transporte de sêmen

Menores danos à integridade da célula

Taxas de concepção de aproximadamente 80%

Manejo do ciclo estral e técnica de inseminação mais fáceis e baratos

Inseminação Artificial com Sêmen Congelado

Inseminação Artificial com Sêmen Congelado

Manutenção do sêmen a temperatura de -196ºC por período de tempo indefinido

Baixas % de motilidade ao descongelamento

Diluídor adequado que deve conter crioprotetor

Dose inseminante de 150 milhões de sptz. viáveis

Sobrevida de 18 a 24 horas após o descongelamento

Técnicas de deposição do Sêmen no Trato Reprodutivo da cadela

Técnicas de deposição do Sêmen no Trato Reprodutivo da cadela

Fundo de Vagina- com pipeta plástica rígida e seringa plástica *

Transcervical – catéter Norueguês *

Endoscopia - utilizado para a cateterização cervical*

Intra uterina - laparoscopia ou laparotomia*

Taxas de concepção com sêmen congelado

Taxas de concepção com sêmen congelado

IA intra vaginal - 0 a 60%

IA intrauterina - 46 a 83%

Preparo do sêmen canino para o transporte

Preparo do sêmen canino Preparo do sêmen canino para o transportepara o transporte

Transporte do sêmen refrigeradoTransporte do sêmen refrigeradoSoluciona problemas de distância entre a Matriz e o Reprodutor

Possibilita várias inseminações em um mesmo ciclo com uma coleta de sêmen

Mais de uma cadela pode ser inseminada com uma mesma remessa de sêmen

Amplia a diversidade racial e familiar em uma região longínqua do país

Transporte do sêmen refrigeradoTransporte do sêmen refrigerado

Evita a quarentena e diminui o contágio de doenças

Possibilita o transporte de sêmen de animais de cativeiro entre zoológicos.

Possibilita remessa de sêmen para análise em centros distantes de onde se encontra o macho

Diluidores para transporte de sêmen canino

Diluidores para transporte Diluidores para transporte de sêmen caninode sêmen canino

TRIS sem glicerol

Glicina Gema sem Glicerol

Meio á base de leite desnatado e glicose

(Cunha, 1997; Rota, 1997)

Diluidor á base de leite desnatado e glicose (Kenney, 1975)

Diluidor á base de leite desnatado e glicose Diluidor á base de leite desnatado e glicose (Kenney, 1975)(Kenney, 1975)

Glicose..........................................................4,9gLeite Molico...................................................2,4gBicarbonato de sódio (solução a 7,5%).........2mlSulfato de gentamicina (50mg/ml).................2mlÁgua destilada..............................................92ml

Osmolaridade = 375 ± 2pH= 6,99 ± 0,02

Cuidados com o equipamento para o transporte sêmen

Cuidados com o equipamento para o transporte Cuidados com o equipamento para o transporte sêmensêmen

O sêmen deve ser acondicionado em recipientes resistentes.

A temperatura do equipamento de transporte não pode ser NUNCA inferior a zero.

Deve haver um sistema de refrigeração para manter e a temperatura entre (0 a 18ºC).

O equipamento de transporte deve indicar o seu conteúdo diminuindo o risco de que este seja violado.

Transporte de sêmen

refrigerado

Transporte de Transporte de sêmen sêmen

refrigeradorefrigerado

Transporte de sêmen refrigerado

Transporte de sêmen Transporte de sêmen refrigeradorefrigerado

Os tubos de transporte devem ser devidamente

marcados com:

Doador (nome do certificado)

Raça

Diluidor utilizado

Data e hora da coleta

Local da coleta

Veterinário responsável

Identificação do sêmen para o transporte sêmen

Identificação do sêmen para o Identificação do sêmen para o transporte sêmentransporte sêmen

O Veterinário responsável pela O Veterinário responsável pela

refrigeração deverá expedir um relatório refrigeração deverá expedir um relatório

detalhado do processo de refrigeração, detalhado do processo de refrigeração,

facilitando, desta forma, a correta facilitando, desta forma, a correta

utilização do sêmen pelo Veterinário que utilização do sêmen pelo Veterinário que

realizará as IAs.realizará as IAs.

O doador de sêmen e a matriz deverão atender as

exigências genéticas, zootécnicas, sanitárias

(Brucelose e Leptospirose com validade de 30 dias) ,

andrológicas e de identificação segundo o CBKC.

O doador e a matriz devem ter certificado de DNA

expedido por laboratório credenciado pelo CBKC.

Exigências do CBKC para o transporte sêmen

Exigências do CBKC para o Exigências do CBKC para o transporte sêmentransporte sêmen

CBKC – Confederação Brasileira de Cinofilia

Obrigada!Obrigada!cunhaicn@uenf.br

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*Slide 22

LaparotomiaLaparotomiaLaparotomia

LaparoscopiaLaparoscopiaLaparoscopia

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