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CBCEARA: 45CBO / 15CBFPO /2CBCTP de solos secos prejudica a cultura de abacaxizeiro, por causa do estresse hidrico que essas plantas sofrem. É vantajoso, pois, a realização de técnicas de melhoramento de abacaxi frente ao déficit hídrico, o que pode ser feito por variação somaclonal e seleção in vitro. É necessário estabelecer um protocolo para a seleção in vitro determinando a dose de PEG, agente usado para diminuir o potencial osmótico do meio em relação á planta e avaliar o comportamento de plantas submetidas a esse estresse. Com o intuito de avaliar o comportamento de abacaxizeiro sob estresse hídrico causado por PEG, 40 propágulos de abacaxizeiro com 7 cm foram inoculados em meio MS com PEG nas concentrações: 0,0; -0,1785; -0,375 e- 0,750 mPa. Para cada tratamento foram usados 10 propágulos. O tempo de experimento foi de 45 dias e a cada 15 avaliaram-se os caracteres: altura e número de folhas do propágulo; necrose e taxa de sobrevivência. A avaliação mostrou que com o aumento da concentração de PEG no meio, as médias da altura e do número de folhas dos propágulos sofreram redução e as da necrose, aumento. A taxa de sobrevivência foi 100% em todas as concentrações. Dessa forma, a concentração de -0,750 mPa se mostrou a mais adequada para seleção, uma vez que o causou o maior dano sem, no entanto, reduzir as médias dos caracteres avaliados em mais de 50% em relação ao controle. 1320 Implantação in vitro de caju-de-árvore-do-cerrado [Anacardium othonianum (Rizz.) Anacardiaceae] Tânia Martins Sandirn", Rosimeire Teles Borges'; Francimar Alves Ximenes", Juliana de Fátima Salas", Fabiano Guimarães Stlva", João das Graças Santana" 'Laboratório de Cultura de Tecidos, CEFET - RV, bolsista de IC - Finep/Sectec; 2Biólogo, CEFET - RV; 'Prof. Universidade de Rio Verde (FESURV); 'Prof. Laboratório de Cultura de Tecidos, CEFET - Rio Verde, GO. E-mail: [email protected] O cajueiro-de-árvore-do-cerrado é uma das inúmeras espécies frutíferas nativas do cerrado com enorme potencial de aproveitamento alimentar. Com a abertura de novas áreas agricolas na região do cerrado, essa espécie, assim como várias outras, têm sido dificil de ser encontradas. Este trabalho teve como objetivo implantar a cultura in vitro de caju-de-árvore-do-cerrado (Anacardium othonianum). Para isso, no Laboratório de Cultura de Tecidos Vegetais do CEFET-RV, avaliou-se na germinação in vitro quatro concentrações de sais MS (O, 25, 50 e 100%), suplementados com 100 rnq.L" de inositol e 30g.L -, de açúcar. O meio foi solidificado com 4 q.L:' de agar e pH ajustado para 5,7. Como explantes utilizou- se frutos maduros colhidos no mês de setembro de 2004 no município de Montes Claros-GO. Para a desinfestação, os mesmos foram colocados em água corrente com detergente liquido por 15 minutos, em seguida foram submersos em álcool 70% por 30 segundos e colocados sob agitação em água sanitária por 30 minutos. Em seguida, enxaguados três vezes em água destilada autoclavada. Após 100 dias da germinação, as plântulas foram repicadas para um novo meio MS com 50% da concentração de sais e 2 g.l"' de carvão ativado, por onde permaneceram por mais 84 dias. O método de desinfestação utilizado não foi eficiente, apresentando uma contaminação media de 82,5%. As sementes que não contaminaram, apresentaram 100% de germinação. Constatou-se aos 84 dias após repicagem, que as plântulas apresentaram média de 67% de sobrevivência, comprimento de 1,08 cm, 2,06 folhas, 3,56 gemas e 1,43 brotações. De acordo com os resultados obtidos, o método de desinfestação deve ser melhorado, que pode ser feito por meio do aumento do tempo de permanência em água sanitária e/ou retirar o epicarpo do fruto, facilitando assim, a eliminação de microorganismo na superficie do mesmo. Desconsiderando as sementes contaminadas, os resultados foram bastante satisfatórios, visto que mesmo sem adicionar fitormônios, os segmentos nodais apresentaram crescimento. 1321 Calogênese em explantes foliares de pimenta longa pela utilização de ANA, BAP e 2,4-0 Edson José Artiaga de Santiago'; Renato Paiva 2 ; Raírys Cravo Nogueira 2 '; Gabriela Ferreira Nogueira'; Fernanda Pereira Soaras!" 590 'EMBRAPNCPATU, Belém, Pará; 2Universidade Federal de Lavras, Dep. de Biologia, Setor de Fisiologia Vegetal, C.P. 3037, 37.200- 000. * Bolsista do CNPq; ** Bolsista da CAPES. E-mail: [email protected] Uma das regiões de maior biodiversidade do planeta, a Amazônia, abriga inúmeras plantas detentoras de propriedades fitoquímicas, como a pimenta longa (Piperhispidinervium Candolle, De Candolle), cujas folhas e ramos jovens contêm óleo essencial composto de safrol, A descoberta de uma nova fonte natural de safrol, não agressiva à natureza, poderá viabilizar o atendimento da demanda industrial. A obtenção de calos permite sua utilização em suspensões celulares, visando a produção de metabólitos secundários. Para a indução de calos, utilizou-se o primeíro par de folhas emitidas de plântulas germinadas in vitro, após 28 dias de estabelecimento, seccionado em discos foliares (±1 em"). Procedeu-se à inoculação em tubos de ensaío, contendo meio de cultura MS (Murashige & Skoog, 1962) com 30 g L-' de sacarose, 7 g L-' de ágar e suplementado com diferentes combínações de ANA, BAP e 2,4-D, totalízando 13 tratamentos. Após 30 días de cultivo, avaliou-se a porcentagem da superfície dos explantes coberta por calos, bem como a coloração, a oxidação, a textura, o peso de matéria fresca e o peso da matéria seca dos calos obtidos. Não houve formação de calos quando os reguladores de crescimento não foram adicionados ao meio nutritivo. A interação das auxínas ANA e 2,4- D com a citocinina BAP induziu a formação da massa de calos em mais de 50% dos explantes foliares. Os calos friáveis foram induzidos com alta freqüência quando as concentrações de 27,135J1M e 2,685J1M de 2,4-D e ANA, respectivamente, interagiram com BAP (8,88J1M), apresentando maior peso da matéria fresca e coloração verde. 1322 Obtenção de plantas geneticamente modificadas de Brachiaria brizantha cv. Marandu Cabral, G. B.', Santana, C. G.2, Carneiro, V.T.C.', Ousi, O. M. A' 'Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnología CP 02372, CEP 70770-900, Brastlia-Df-i'Faculdade da Terra de Brasília. Email: [email protected] A braquiária é uma gramínea forrageira introduzida da África que apresenta modo de reprodução assexual denominado apomixia, o embrião se desenvolve sem que haja fertilízação, ocorrendo desta forma, uma clonagem por semente. A transformação genética de plantas é uma ferramenta para o melhoramento que amplia as possibilidades de introdução de novas características. Em plantas apomíticas a tecnologia de transformação pode viabilizar o aporte de qualidades específicas, de difícil obtenção por técnicas convencionais de hibridação. Isto porque embora cruzamentos com plantas apomíticas sejam possíveis, estas só podem atuar como progenitores masculinos, ou fornecedores de pólen para fertilização de plantas sexuais de mesma ploídia. Vísando a obtenção de plantas geneticamente modíficadas de braquiária por biobalística, foi testado o bombardeamento de calos embriogênicos e de calos friáveis de Brachiaria brizantha cv. Marandu. Os calos foram obtidos de sementes maduras em meio de indução de embriogênese somática (MSCLind), e após 15 ou 30 dias, foram bombardeados. Para o bombardeamento foi utilizado o plasmídio pAHUG que carrega o gene gus sob controle do promotor da actina de arroz (Act1) eo gene de seleção hptll dirigido pelo promotor de ubiquitina de milho (ubi1). As condições fisicas usadas no bombardeador foram 900 ou 1200 psi, para a pressão de gás hélio, e a distância da placa contendo os explantes em relação à membrana carreadora foi de 6 cm. Os calos bombardeados foram cultivados na presença de higromicina, em dosagens crescentes, em meios de indução (MSCLind 5mg/L), regeneração (MSCLreg 10mg/L), manutenção (MMP 20 mg/L) e enraizamento (meio B 20 mg/L). Foram obtidas plântulas que foram aclimatadas em vermiculita e transferidas para casa de vegetação. Análises de PCR e Southern blot foram realizadas para verificar a natureza transgênica das plantas. 1323 Efeito de diferentes concentrações dos sais MS na germinação in vitro de sementes de cagaita Katryne R. G. Fernandes'; Juliana F. Sales-; Francimar A. Xlrnenes"; Fabiano G. Silva"; João das Graças Santana" Hortic. bras., v.23, agosto, 2005. Suplemento.

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CBCEARA: 45CBO / 15CBFPO /2CBCTP

de solos secos prejudica a cultura de abacaxizeiro, por causa doestresse hidrico que essas plantas sofrem. É vantajoso, pois, arealização de técnicas de melhoramento de abacaxi frente ao déficithídrico, o que pode ser feito por variação somaclonal e seleção invitro. É necessário estabelecer um protocolo para a seleção in vitrodeterminando a dose de PEG, agente usado para diminuir o potencialosmótico do meio em relação á planta e avaliar o comportamentode plantas submetidas a esse estresse. Com o intuito de avaliar ocomportamento de abacaxizeiro sob estresse hídrico causado porPEG, 40 propágulos de abacaxizeiro com 7 cm foram inoculadosem meio MS com PEG nas concentrações: 0,0; -0,1785; -0,375 e-0,750 mPa. Para cada tratamento foram usados 10 propágulos. Otempo de experimento foi de 45 dias e a cada 15 avaliaram-se oscaracteres: altura e número de folhas do propágulo; necrose e taxade sobrevivência. A avaliação mostrou que com o aumento daconcentração de PEG no meio, as médias da altura e do número defolhas dos propágulos sofreram redução e as da necrose, aumento.A taxa de sobrevivência foi 100% em todas as concentrações. Dessaforma, a concentração de -0,750 mPa se mostrou a mais adequadapara seleção, uma vez que o causou o maior dano sem, no entanto,reduzir as médias dos caracteres avaliados em mais de 50% emrelação ao controle.

1320Implantação in vitro de caju-de-árvore-do-cerrado [Anacardiumothonianum (Rizz.) Anacardiaceae]Tânia Martins Sandirn", Rosimeire Teles Borges'; FrancimarAlves Ximenes", Juliana de Fátima Salas", Fabiano GuimarãesStlva", João das Graças Santana"'Laboratório de Cultura de Tecidos, CEFET - RV, bolsista de IC -Finep/Sectec; 2Biólogo, CEFET - RV; 'Prof. Universidade de RioVerde (FESURV); 'Prof. Laboratório de Cultura de Tecidos, CEFET- Rio Verde, GO. E-mail: [email protected] cajueiro-de-árvore-do-cerrado é uma das inúmeras espéciesfrutíferas nativas do cerrado com enorme potencial deaproveitamento alimentar. Com a abertura de novas áreas agricolasna região do cerrado, essa espécie, assim como várias outras, têmsido dificil de ser encontradas. Este trabalho teve como objetivoimplantar a cultura in vitro de caju-de-árvore-do-cerrado (Anacardiumothonianum). Para isso, no Laboratório de Cultura de TecidosVegetais do CEFET-RV, avaliou-se na germinação in vitro quatroconcentrações de sais MS (O, 25, 50 e 100%), suplementados com100 rnq.L" de inositol e 30g.L -, de açúcar. O meio foi solidificadocom 4 q.L:' de agar e pH ajustado para 5,7. Como explantes utilizou-se frutos maduros colhidos no mês de setembro de 2004 nomunicípio de Montes Claros-GO. Para a desinfestação, os mesmosforam colocados em água corrente com detergente liquido por 15minutos, em seguida foram submersos em álcool 70% por 30segundos e colocados sob agitação em água sanitária por 30minutos. Em seguida, enxaguados três vezes em água destiladaautoclavada. Após 100 dias da germinação, as plântulas foramrepicadas para um novo meio MS com 50% da concentração desais e 2 g.l"' de carvão ativado, por onde permaneceram por mais84 dias. O método de desinfestação utilizado não foi eficiente,apresentando uma contaminação media de 82,5%. As sementesque não contaminaram, apresentaram 100% de germinação.Constatou-se aos 84 dias após repicagem, que as plântulasapresentaram média de 67% de sobrevivência, comprimento de 1,08cm, 2,06 folhas, 3,56 gemas e 1,43 brotações. De acordo com osresultados obtidos, o método de desinfestação deve ser melhorado,que pode ser feito por meio do aumento do tempo de permanênciaem água sanitária e/ou retirar o epicarpo do fruto, facilitando assim,a eliminação de microorganismo na superficie do mesmo.Desconsiderando as sementes contaminadas, os resultados forambastante satisfatórios, visto que mesmo sem adicionar fitormônios,os segmentos nodais apresentaram crescimento.

1321Calogênese em explantes foliares de pimenta longa pelautilização de ANA, BAP e 2,4-0Edson José Artiaga de Santiago'; Renato Paiva2; Raírys CravoNogueira2'; Gabriela Ferreira Nogueira'; Fernanda PereiraSoaras!"

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'EMBRAPNCPATU, Belém, Pará; 2Universidade Federal de Lavras,Dep. de Biologia, Setor de Fisiologia Vegetal, C.P. 3037, 37.200-000. * Bolsista do CNPq; ** Bolsista da CAPES. E-mail:[email protected] das regiões de maior biodiversidade do planeta, a Amazônia,abriga inúmeras plantas detentoras de propriedades fitoquímicas,como a pimenta longa (Piperhispidinervium Candolle, De Candolle),cujas folhas e ramos jovens contêm óleo essencial composto desafrol, A descoberta de uma nova fonte natural de safrol, nãoagressiva à natureza, poderá viabilizar o atendimento da demandaindustrial. A obtenção de calos permite sua utilização em suspensõescelulares, visando a produção de metabólitos secundários. Para aindução de calos, utilizou-se o primeíro par de folhas emitidas deplântulas germinadas in vitro, após 28 dias de estabelecimento,seccionado em discos foliares (±1 em"). Procedeu-se à inoculaçãoem tubos de ensaío, contendo meio de cultura MS (Murashige &Skoog, 1962) com 30 g L-' de sacarose, 7 g L-' de ágar esuplementado com diferentes combínações de ANA, BAP e 2,4-D,totalízando 13 tratamentos. Após 30 días de cultivo, avaliou-se aporcentagem da superfície dos explantes coberta por calos, bemcomo a coloração, a oxidação, a textura, o peso de matéria frescae o peso da matéria seca dos calos obtidos. Não houve formaçãode calos quando os reguladores de crescimento não foramadicionados ao meio nutritivo. A interação das auxínas ANA e 2,4-D com a citocinina BAP induziu a formação da massa de calos emmais de 50% dos explantes foliares. Os calos friáveis foram induzidoscom alta freqüência quando as concentrações de 27,135J1M e2,685J1M de 2,4-D e ANA, respectivamente, interagiram com BAP(8,88J1M), apresentando maior peso da matéria fresca e coloraçãoverde.

1322Obtenção de plantas geneticamente modificadas de Brachiariabrizantha cv. MaranduCabral, G. B.', Santana, C. G.2, Carneiro, V.T.C.', Ousi, O. M. A''Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnología CP 02372, CEP70770-900, Brastlia-Df-i'Faculdade da Terra de Brasília. Email:[email protected] braquiária é uma gramínea forrageira introduzida da África queapresenta modo de reprodução assexual denominado apomixia, oembrião se desenvolve sem que haja fertilízação, ocorrendo destaforma, uma clonagem por semente. A transformação genética deplantas é uma ferramenta para o melhoramento que amplia aspossibilidades de introdução de novas características. Em plantasapomíticas a tecnologia de transformação pode viabilizar o aportede qualidades específicas, de difícil obtenção por técnicasconvencionais de hibridação. Isto porque embora cruzamentos complantas apomíticas sejam possíveis, estas só podem atuar comoprogenitores masculinos, ou fornecedores de pólen para fertilizaçãode plantas sexuais de mesma ploídia. Vísando a obtenção de plantasgeneticamente modíficadas de braquiária por biobalística, foi testadoo bombardeamento de calos embriogênicos e de calos friáveis deBrachiaria brizantha cv. Marandu. Os calos foram obtidos desementes maduras em meio de indução de embriogênese somática(MSCLind), e após 15 ou 30 dias, foram bombardeados. Para obombardeamento foi utilizado o plasmídio pAHUG que carrega ogene gus sob controle do promotor da actina de arroz (Act1) e ogene de seleção hptll dirigido pelo promotor de ubiquitina de milho(ubi1). As condições fisicas usadas no bombardeador foram 900 ou1200 psi, para a pressão de gás hélio, e a distância da placacontendo os explantes em relação à membrana carreadora foi de 6cm. Os calos bombardeados foram cultivados na presença dehigromicina, em dosagens crescentes, em meios de indução(MSCLind 5mg/L), regeneração (MSCLreg 10mg/L), manutenção(MMP 20 mg/L) e enraizamento (meio B 20 mg/L). Foram obtidasplântulas que foram aclimatadas em vermiculita e transferidas paracasa de vegetação. Análises de PCR e Southern blot foramrealizadas para verificar a natureza transgênica das plantas.

1323Efeito de diferentes concentrações dos sais MS na germinaçãoin vitro de sementes de cagaitaKatryne R. G. Fernandes'; Juliana F. Sales-; Francimar A.Xlrnenes"; Fabiano G. Silva"; João das Graças Santana"

Hortic. bras., v.23, agosto, 2005. Suplemento.