cap 1 microorganismos del aire 2014

8/18/2019 Cap 1 Microorganismos Del Aire 2014

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MANUAL PRÁCTICO DE MICROBIOLOGÍA - Tomo II: Microbiología Ambie!al IIMaacor"a A# M#$ Ál%are& A# '#$ Pe&&(llo '# D# ) C(a"ro* D# P# A+o ,./

Capítulo 1

DETERMINACIÓN DE MICROORGANISMOS DEL AIRE

Objetivo

• Poer e e%i"ecia la 0re*ecia "e lo* microorgai*mo* e1i*!e!e* e el aire 2 *(relaci3 co *( (bicaci3 !ra*i!oria e *(0er4icie* "e ma!eriale* 2 "el c(er0o#

Introdui!n Lo* microorgai*mo* *e ec(e!ra 0re*e!e* e !o"o* lo* ambie!e*: e el aire$ e el ag(a$e el *(elo$ e la *(0er4icie "e lo* ob5e!o* e icl(*o *obre (e*!ra 0iel#

El aire$ a"em6* "e 0ar!íc(la* e *(*0e*i3$ e* 0or!a"or "e bac!eria* e 4orma %ege!a!i%a oe*0or(la"a*$ e*0ora* "e 7ogo*$ %ir(*$ e!re o!ro*# La 0oblaci3 microbiaa "el aire e*!6com0(e*!a 0rici0alme!e 0or bac!eria* 2 e*0ora* "e 7ogo*#

El e*!("io "e lo* microorgai*mo* "el aire o 7a e%i"ecia"o la e1i*!ecia "e (a %er"a"eracom(i"a" a8rea$ e el *e!i"o "e (a 0oblaci3 "e microorgai*mo* 9(e %i%e 2 *ere0ro"(ce e e*!e me"io# Lo* microorgai*mo* 9(e *e i"e!i4ica e el aire 0ro%iee "eambie!e* !erre*!re*$ ac(6!ico* o "e o!ro* orgai*mo* %i%o*#

El 7ombre e e*!a"o *ao$ "e*"e el mome!o "e *( acimie!o 2 a lo largo "e !o"a *( %i"aalo5a mile* "e e*0ecie* "e bac!eria* e "i4ere!e* *i!io* "e *( orgai*mo$ e!re ello*: la 0iel$m(co*a*$ boca 2 *ali%a# La* bac!eria* m6* 4rec(e!e* "e e*!o* *i!io* *o coco* gram 0o*i!i%o*$como *er: Staphylococcus aureus 2 Staphylococcus epidermis$ Streptococcus α hemolíticos 2Streptococcus β hemolíticos# Al 7ablar$ !o*er o !ocar ob5e!o*$ lo* microorgai*mo* 9(e 4orma0ar!e "e la 4lora "e (a 0er*oa 0(e"e 0a*ar a o!ro ambie!e (*a"o como %ía "e !ra*0or!eel aire# Tambi8 0(e"e oc(rrir el mecai*mo e *e!i"o i%er*o$ i7alar aire o !ocar *(0er4icie*co!amia"a* co microorgai*mo*#

El coce0!o 7igiee e*!6 %ic(la"o co la* co"icioe* 9(e "ebe !eer ( ambie!e 0ara e%i!ar9(e 8*!e co!ega 4ac!ore* 9(e a4ec!e la *al(" "e la* 0er*oa*# La 4al!a "e lim0ie&a 2"e*i4ecci3 e ( "e!ermia"o *i!io$ 0or e5em0lo e la 0ro"(cci3 "e alime!o*$ 0(e"e a0or!argra ca!i"a" "e bac!eria*$ como !ambi8 la 4al!a "e 7igiee 0er*oal "e lo* mai0(la"ore*0(e"e oca*ioar la co!amiaci3 "e lo* alime!o* co microorgai*mo*$ ca0ace* "e 0ro"(ciri!o1icacioe* e i4eccioe* a !ra%8* "e lo* alime!o*#

Por !o"o ello$ la correc!a 7igiee 0er*oal$ el la%a"o c(i"a"o*o "e la* mao* "e*0(8* "e la(!ili&aci3 "e lo* *er%icio* 2 a!e* "e igerir alime!o* o 0roce*arlo*$ !a0ar*e la boca al !o*er oe*!or("ar$ o geerar 0ol%illo al barrer$ *o alg(a* 0reca(cioe* 9(e *ir%e 0ara e%i!ar la0re*ecia 2 coce!raci3 "e microorgai*mo e el aire "e ambie!e* cerra"o*$ 2 comoco*ec(ecia "i*mi(ir la* 0robabili"a"e* "e !ra*mi*i3 "e e4erme"a"e*#

T"nia# para el an$li#i# %irobiol!&io del aire

E1i*!e "i*!i!o* m8!o"o* 0ara el a6li*i* "el aire: *e"ime!aci3$ 4il!raci3$ c7o9(e e lí9(i"o*2 0reci0i!aci3 elec!ro*!6!ica$ e!re o!ro*#

El m8!o"o "e *e"ime!aci3 e* (o "e lo* m6* *ecillo* 0ara la "e!ermiaci3 "emicroorgai*mo* "el aire# A 0e*ar "e ello$ lo* re*(l!a"o* ob!ei"o* *o orie!a!i%o* "e la*ci4ra* "e microorgai*mo* 0re*e!e* e el aire$ 2a 9(e e*!o* i%ele* %aría e 4(ci3 "e la*corrie!e* "e aire 2 "el !ama+o "e la* 0ar!íc(la* e *(*0e*i3#

Tambi8 e1i*!e "i*!i!o* m8!o"o* 0ara el e1ame microbiol3gico "e *(0er4icie* 0laa* 2 o

0laa*$ 0robableme!e co!amia"a*#

Ca0í!(lo .#- De!ermiaci3 "e Microorgai*mo* "el Aire .


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'roedi%iento#

1( An$li#i# de e#pora# de )on&o# * bateria# por #edi%entai!n

E e*!e e*!("io *e "e!ermiar6 la 0re*ecia "e 7ogo* 2 bac!eria* e el aire "e *i!io* "eambie!e* cerra"o* 2 abier!o*# El a6li*i* *e reali&ar6 e "o* !iem0o* "e *e"ime!aci3"i4ere!e*$ mi(!o* 2 (a 7ora$ a 4i "e e%al(ar el %ol(me "e *e"ime!aci3 "e i3c(lo e( !iem0o 4re!e a o!ro#

Para la "e!ermiaci3 "e 7ogo* *e (!ili&ar6 ( me"io *elec!i%o 0ara el "e*arrollo "e lo*mi*mo*$ el agar 'abo(rea( Gl(co*a"o# Mie!ra* 9(e 0ara la "e!ermiaci3 "e bac!eria* *e(!ili&ar6 agar N(!ri!i%o$ 2a 9(e e* ( me"io com0le!o$ *i i7ibi"ore*$ 9(e 0ermi!e el crecimie!o"e microorgai*mo* 0oco e1igee!e* e *(* re9(erimie!o* (!ricioale*#

A&ar Saboureau Gluo#adoPl(ri0e0!oa . grGl(co*a / grAgar .; grAg(a "e*!ila"a c#*#0 . ml0< 4ial: ;$= > $,

A&ar NutritivoPl(ri0e0!oa ; grE1!rac!o "e care grClor(ro "e *o"io ? grAgar .; grAg(a "e*!ila"a c#*#0 . ml0< 4ial: @$ > $,

• Pre0arar 0laca* co agar 'abo(rea( Gl(co*a"o 2 agar N(!ri!i%o# La ca!i"a" "e 0laca*co ca"a me"io "e c(l!i%o "eber6 *er el "oble "e lo* *i!io* 9(e *e re9(iera aali&ar$ 2a9(e e ca"a (o *e aali&ar6 "o* !iem0o*#

• De*!a0ar la* 0laca* co agar 'abo(ra(" Gl(co*a"o 2 co agar N(!ri!i%o$ e ( l(garc(2o i%el "e co!amiaci3 *e "e*ee e1amiar# De5arla* "e*!a0a"a* "(ra!e "i4ere!e*i!er%alo* "e !iem0o: mi(!o* 2 . 7ora#

• Tra*c(rri"o el !iem0o$ !a0ar la* 0laca* e ic(bar "(ra!e ,/-/? 7ora* a , C#• Ob*er%ar el "e*arrollo "e coloia*#

I!er0re!aci3 "e lo* re*(l!a"o*:Cla*i4icar la* 0laca* "e ac(er"o al *i!io "e e*!("io$ !iem0o "e *e"ime!aci3 2 me"io "e c(l!i%o#Ob*er%ar la* coloia*$ 2 *(* carac!erí*!ica*$ 9(e "e*arrolla e ca"a me"io "e c(l!i%o# Aali&ar*i e1i*!e correlaci3 e!re lo* !iem0o* "e *e"ime!aci3 2 la ca!i"a" "e coloia*"e*arrolla"a*$ como a*í !ambi8 la "i4erecia "e ca!i"a" 2 !i0o "e coloia* *e"ime!a"a* eambie!e* cerra"o* 2 abier!o*#

+( An$li#i# de #uper,iie# plana# por %edio de plaa# de ontato

Para e*!e e*!("io *e (!ili&a 0laca* "e Pe!ri e*0eciale*$ llama"a* 0laca* RODAC Re0lica!eOrgai*m* Direc! Agar Co!ac$ *eg AP


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coloia* Fig# .#.# El me"io "e c(l!i%o a (!ili&ar e* agar N(!ri!i%o 2 *e (*a a"7eri"o a la 0lacae 4orma "e *ello$ 0ara 0o"er a0o2ar el me"io *obre la *(0er4icie 0laa a aali&ar#

• Pre0arar la* 0laca* RODAC co agar N(!ri!i%o# a*eg(r6"o*e 9(e 9(e"e la *(0er4icieele%a"a "el bor"e 2 0(e"a 4(cioar como *elloH# El me"io "e c(l!i%o (a %e& 4("i"o 2 a!em0era!(ra cercaa a la "e *oli"i4icar /; C$ *e %ier!e e la* 0laca* "e maera 9(e

*obre*alga "el bor"e "e la mi*ma$ *i %olcar 2 9(e 0(e"a 4(cioar como *elloH$ 0ara4acili!ar el co!ac!o co la *(0er4icie a e1amiar# De5ar e4riar#• Pre*ioar *(a%eme!e la 0laca *obre la *(0er4icie elegi"a$ a*eg(r6"o*e el co!ac!o

"e e*!a co el agar#• Ic(bar la* 0laca* "(ra!e ,/-/? 7*# a , C#• Co!ar la* coloia* 0re*e!e* e la 0laca#

I!er0re!aci3 "e lo* re*(l!a"o*:Ca"a c8l(la microbiaa %iable e* ca0a& "e origiar (a coloia macro*c30ica 9(e *er6(!ili&a"a 0ara reali&ar el rec(e!o$ 0or ello *e la* "eomia Ui"a"e* Forma"ora* "e Coloia*UFC# Lo* c(a"ra!e* 4acili!a el co!eo# La 0laca !iee (a *(0er4icie "e ,; cm ,$ 0or lo !a!o*e "eber6 reali&ar la co%er*i3 a"ec(a"a 0ara e10re*ar el re*(l!a"o 4ial como UFCcm,#

El 0rici0al ico%eie!e "e e*!e m8!o"o e* *( ie4icacia e *(0er4icie* m(2 co!amia"a* 2la 0o*ibili"a" "e o ob!eer !o"o* lo* microorgai*mo* 0re*e!e* e la *(0er4icie# 'iembargo$ e lo* ca*o* e lo* 9(e la carga microbiaa e* ba5a "a b(eo* re*(l!a"o*#

Fig# .#.: Placa RODAC Re0lica!e Orgai*m* Direc! Agar Co!ac

-( An$li#i# de #uper,iie# no plana#. %"todo del )i#opo

E*!e *i*!ema e* el m6* a!ig(o 2 el m6* (!ili&a"o e el e1ame microbiol3gico "e *(0er4icie*$2a 9(e *ir%e 0ara el a6li*i* !a!o "e *(0er4icie* 0laa* como "e o 0laa*#

• Delimi!ar la *(0er4icie 9(e *e %a a aali&ar me"ia!e (a 0la!illa "e 0a0el al(miioe*!8ril co (a aber!(ra "e "ime*i3 "e cm,#

•


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La ca!i"a" "e coloia* ob*er%a"a* corre*0o"e a (a *(0er4icie "e cm ,# El mero 7alla"o"eber6 *er e10re*a"o como UFCcm,$ 0or lo !a!o "eber6 reali&ar*e la co%er*i3 a"ec(a"a#

/( An$li#i# de %anipuladore#

El ob5e!i%o "e ( a6li*i* a mai0(la"ore* e* com0robar 9(e la 0er*oa e*!6 e co"icioe* "e

7igiee a"ec(a"a* 0ara o co!amiar lo* alime!o* "(ra!e *( mai0(laci3#

Para e*!e a6li*i* *e (!ili&ara "i4ere!e* me"io* "e c(l!i%o *elec!i%o*$ "a"o 9(e 7a2 "i4ere!e*g8ero* bac!eriao* relacioa"o* a e4erme"a"e* !ra*mi!i"a* 0or lo* alime!o*# 'i bie0er!eece al gr(0o "e la* bac!eria* me*34ila* !o!ale*$ !iee la carac!erí*!ica "e *er 0a!3gea*0ara el 7ombre#

/(1 'ara an$li#i# de enterobateria#

A&ar 0ioleta Rojo ili# Gluo#a 20RG3Pe0!oa "e care @$ grE1!rac!o "e le%a"(ra $ grClor(ro "e *o"io ;$ grGl(co*a .$ grMe&cla "e *ale* biliare* .$; grRo5o Ne(!ro $ grJiole!a cri*!al $, grAgar .;$ grAg(a "e*!ila"a c#*#0 . ml0< 4ial: @$ > $.Ua %e& me&cla"o* lo* igre"ie!e* *e "e5are0o*ar ; mi(!o* 2 cale!ar a eb(llici3 "e . a ,mi(!o*# E4riar a /; C 2 %er!er e 0laca*# Ua%e& 0re0ara"o "ebe (*ar*e "e ime"ia!o# Noa(!ocla%ar#

• Co!ar co 0laca* e*!8rile*# Pre0arar (a 0laca 0or ca"a *(0er4icie a e%al(ar#•


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e*!im(lar "ic7a 4erme!aci3 "e la gl(co*a 2 *(0rimir el crecimie!o "e la* bac!eria* gramega!i%a* o 4erme!a"ora* "(ra!e la *iembra *e le agreg3 (a *eg("a ca0a "e me"io# La*coloia* "e Escherichia coli 2 Salmonella *00# !iee ( crecimie!o b(eo e e*!e me"io 2 *(*coloia* *o ro5a*#

/(+ 'ara an$li#i# de e#ta,ilooo#

A&ar Manitol SaladoE1!rac!o "e care .$ grPl(ri0e0!oa .$ grD-mai!ol .$ grClor(ro "e *o"io @;$ gr

Agar .;$ grRo5o 4eol $,; grAg(a "e*!ila"a c#*#0 . ml0< 4ial: @$/ > $,

• Pre0arar la* 0laca* "e Pe!ri co agar Mai!ol 'ala"o# Co!ar co (a 0laca 0or ca"a*(0er4icie a e%al(ar#

•

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