Camila Indiani de OliveiraSeminário de Avaliação PRODOCs 1 e 2

Responsável Institucional: Mitermayer G. dos Reis

Instituição: CPqGM/FIOCRUZ

Departamento: LIP

Área/Subárea: Parasitologia/Parasitologia Humana

Título do Projeto:Caracterização dos componentes da glândula salivar de Lutzomyia intermedia e de Lutzomyia whitmani e caracterização de suas propriedades imunomoduladoras

Introdução I

Fonte: WHO/TDR e MS/SVSFonte: WHO/TDR e MS/SVS

Prioridade nos programas de controle da OMS

Introdução II

Introdução III

Lesão tecidual

Hemostasia

Vasoconstrição

Agregação Plaquetária

Coagulação

Modificação do microambiente: estabelecimento da Leishmania?

Saliva

Introdução IV

• Vacinação com proteína da saliva protege contra a leishmaniose. (Valenzuela et al., 2002).

• Vacinação com DNA que codifica a mesma proteína protege contra a leishmaniose.

Objetivo do Projeto

• Estudar a saliva dos flebótomos Lutzomyia whitmani e Lutzomyia intermedia, os principais vetores da Leishmania braziliensis (espécie causadora da leishmaniose tegumentar) na Bahia.

• Identificar os componentes da saliva destes vetores.

Hipótese: proteínas da saliva do vetor são capazes de proteger contra a leishmaniose causada por L. braziliensis.

Resultados alcançados

Utilizando um modelo experimental de LTA:

• Caracterização da resposta imune contra a saliva de Lu. Intermedia.

• A pré-exposição à saliva protege contra a leishmaniose.

• Quais os componentes da saliva responsáveis por este fenômeno?

A resposta imune contra a saliva é mista: indução de mediadores pró-inflamatórios e anti-inflamatórios.

CD4

CD8

IFN

IL4 IL10

%

% d

e c

élu

las

% d

e c

élu

las

Resultados alcançados

Utilizando um modelo experimental de LTA:

• Caracterização da resposta imune contra a saliva de Lu. Intermedia: Resposta mista.

• A pré-exposição à saliva protege contra a leishmaniose?

• Quais os componentes da saliva responsáveis por este fenômeno?

A imunização com saliva não protege contra a leishmaniose.

SGS

Resultados alcançados

Utilizando um modelo experimental de LTA:

• Caracterização da resposta imune contra a saliva de Lu. Intermedia: Resposta mista.

• A pré-exposição à saliva protege contra a leishmaniose? Ñão.

• Quais os componentes da saliva responsáveis por este fenômeno?

Massive Sequencing of Full-Length Salivary Gland cDNA library

Salivary gland cDNA database

Sequence Analysis

Select candidates and clone into VR2001

Assembler output SequenceBest match to NR protein database Species

Average Result Status

LI-contig7-asb LIM P5 B07 SL1 protein Lu.longipalpis SIG VR2001

LI-contig13-asb LIL P3 B02 SL1 protein Lu.longipalpis SIG VR2001

LI-contig14-asb LIS P9 E07 D7 salivary protein Lu.longipalpis SIG VR2001

LI-contig17-asb LIS P9 F01 anticoagulant Lu.longipalpis SIG VR2001

LI-contig18-asb LIS P9 F05 SL1 protein Lu.Longipalpis SIG VR2001

LI-contig25-asb LIL P2 C06 SIG VR2001

LI-contig41-asb anticoagulant Lu.longipalpis SIG incomplete

LI-contig43-asb LIL P4 A03 antigen 5-related protein Lu.longipalpis SIG

LI-contig44-asb LIM P6 F11 SIG VR2001

LI-contig45-asb LIL P2 H08 SIG VR2001

LI-contig49-asb LIM P6 G12 anticoagulant Lu.longipalpis SIG VR2001

LI-contig53-asb LIL P2 E05 SL1 protein Lu.longipalpis SIG VR2001

LI-contig60-asb LIS P8 B10 gastric mucin (clone PGM-2A) SIG

LI-contig62-asb putative yellow related-protein Lu. longipalpis SIG incomplete

LI-contig73-asb LIS P9 C10 SIG VR2001

LI-contig85-asb putative apyrase Lu. longipalpis SIG incomplete

LI-contig100-asb LIS P8 C09 putative yellow related-protein Lu. longipalpis SIG VR2001

LI-contig103-asb LIS P9 G07 SIG VR2001

Conclusão I

• Divulgação: Publicações

de Moura TR, Novais, FO, Oliveira, F, Clarencio, J,Noronha, A, Barral, A, Brodskyn C, de Oliveira CI. Toward anovel experimental model of infection to study Americancutaneous leishmaniasis caused by Leishmania braziliensis.Infect. Immun. (2005) 73:5827-34.

Saliva de Lu. intermedia: Resposta imune emcamundongos e ausência de proteção contra desafio comL. braziliensis.

Resposta inflamatória induzida pela saliva: modelo da bolsade ar.

Conclusão I

• Divulgação: Publicações

•Intraspecific polymorphisms of Brazilian isolates of Leishmania amazonensis revealed by DNA sequencing, PCR-based analyses and molecular karyotyping. J.P.C. de Oliveira et al., enviado para publicação. Acta Tropica.

•Involvement of TCR V12 in the human immune response against Leishmania amazonensis. J. Clarêncio et al., aceito para publicação. Infec. Immun.

Conclusão II

• Impactos: Formação de recursos humanos

Iniciação Científica:Fernanda Novais (concluído) Marcia Weber (em andamento)Renata Andrade (em andamento)

Mestrado:Tatiana de Moura (concluído)João Paulo S. C. de Oliveira (concluído)Fernanda Novais (em andamento)Maria José Menezes (em andamento)Sarah Falcão (em andamento)

Doutorado:Tatiana de Moura (em andamento)

Agradecimentos

• Fiocruz – Dra. Aldina Barral et al.

• FAPESB – Bolsa de Pos Doc.

• NIAID – Dr. Jesus Valenzuela.