bromelina biocatalisadores

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  • 7/23/2019 BROMELINA BIOCATALISADORES

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    Extrao, imobilizao e aplicao da enzima bromelina do abacaxi (Ananas comosus) na carne bovina.

    Arthur Prado

    Gabrielle CarolineJaqueline Costa

    Lucas Gabriel

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    AbacaxizeiroO abacaxizeiro uma monocotilednea herbcea perene

    pertencente famlia Bromeliaceae com distribuio

    neotropical. Apresenta cerca de !"! espcies distribudas em

    #$ %&neros.

    O %&nero mais importante de ponto de 'ista econmica da

    famlia Bromeliaceae( o %en&roAnanas( no )ual se en)uadra o

    %&neroAnanas comosus*. +errill.

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    +orfolo%ia,lanta de pe)ueno porte( )ue pode che%ar a -!

    centmetros de altura( com folhas lon%as e duras( dispostas em

    espiral( formando uma roseta.

    uas flores so pe)uenas( )ue 'o de uma colorao

    r/sea ao roxo0p1rpura( a%lomeradas numa haste( formando uma

    espcie de espi%a( )ue mais tarde dar ori%em fruta( )ue 'em

    acompanhada de uma coroa espinhenta.

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    2onte3 4ncaper( 5!"!.

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    6onstituintes 7umicos

    Bromelina

    6inarina

    8riterpenos

    aponinas

    2la'on/ides

    9licosdeos

    acardeos

    8aninos

    +ucila%ens

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    BromelinaA bromelina uma enzima encontrada no talo(

    folhas( razes ( casca e polpa de todas as espcies de

    abacaxi da famlia Bromeliaceae.Onde a mesma( encontra0se no %rupo das proteases(

    na classe das hidrolases.

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    Bromelina A especificidade das proteases ampla e

    classificada de acordo com a constituio de seu stio

    ati'o em tr&s %rupos principais3

    erina protease

    :cido asprtico protease

    Cistena protease

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    6istena ,rotease,ossuem aminocido cistena con;u%ado com

    histidina em seu stio ati'o

    o mais ati'as em p< neutroO mecanismo de ao das cistena protease

    usualmente se%ue uma reao em dois passos3

    Acilao

    =esacilao

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    4mobilizao enzimticaA imobilizao de enzimas representa uma alternati'a

    para a conduo de bioprocessos uma 'ez )ue( os

    biocatalisadores imobilizados ficam retidos para seremutilizados por tempo indefinido.

    >xistem dois tipos diferentes de imobiliza?es3

    7umica

    2sica

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    8cnicas de 4mobilizao

    2onte3 6A@+>*A8O( "#.

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    8cnica por AdsoroA adsoro de enzimas em suportes insol1'eis

    resulta %eralmente em intera?es do tipo inica( polar(

    pontes de hidro%&nio ou hidrof/bicas

    >sses suportes incluem a alumina( resinas de troca

    inica( 'idro( celulose( feltro e outros

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    Vantagens

    Simplicidade

    Nenhum reagente

    Mnimo de passos

    Desvantagens

    p8D.

    E obtido a partir do etileno CetenoD( possuindo alta resist&ncia

    umidade e ao ata)ue )umico.E um dos polmeros mais usados pela ind1stria( sendo muito

    empre%ado na fabricao de3

    2olhas Ctoalhas( cortinas( en'/lucros( embala%ens( sacos de lixo( etcD

    @ecipientes Csacos( %arrafas( baldes etcD

    6anos plsticos( brin)uedos infantis( no isolamento de fios eltricos(

    etc.

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    4mportFncia da Bromelina>st relacionada com a produo de frmacos e a

    sua utilizao na ind1stria alimentcia como3

    6larificao de cer'e;as

    2abricao de )uei;os

    Amaciamento de carnes

    ,reparo de alimentos infantis e dietticos

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    4mportFnciaendo tambm utilizada38ratamento de dist1rbios di%esti'os

    2eridas4nflama?es

    ,reparo de col%enos hidrolisados

    >m ind1strias t&xteis( para amaciamento de fibras

    ,roduo de deter%entes

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    +ateriais AbacaxiG 2acaG B)ueres de "#! m*( 5#! m*G #!! m*G *i)uidificadorG

    Balo 'olumtrico de "!! m*G BalanaG Basto de 'idroG 2ita de p

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    +etodolo%ia1 arte ! "bteno das amostras

    O abacaxi foi ad)uirido no mercado de 4tumbiara( e o

    fruto encontra'a0se em um est%io de maturao ade)uado

    para o consumo.

    Ap/s a hi%ienizao do fruto( este foi separado em

    partes3 casca( polpa e talo e as amostras foram cortadas em

    cubos de aproximadamente " cm para estudo.

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    ,esou0se 5!% de casca( polpa e talo em b)ueres

    separados com a a;uda de uma balana. O restante dasamostras obtidas foram armazenadas em pacotes e

    acondicionadas no con%elador( caso fosse necessrio para

    outros ensaios( a uma temperatura de 0#I6.

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    Ap/s a pesa%em foi le'ado para a bancada e adicionou0

    se #! m* de soluo tampo fosfato "(! + p< H( e deixou

    as amostras em repouso( imersos na soluo por # minutos.

    Adicionou0se inicialmente a casca com a soluo

    tampo fosfato "(! + ,h H( no li)uidificador domstico e

    homo%eneizou por " minuto na 'elocidade mxima e

    transferiu0se para um b)uer( coando0a com uma peneira

    fina.

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    >m se%uida( fez0se a homo%eneizao da polpa(

    adicionando0a( com a soluo tampo fosfato "(! + p< H(no li)uidificador domstico e homo%eneizou0se por "

    minuto na 'elocidade mxima e transferiu0se para um

    b)uer( coando0a com uma peneira fina.

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    ,or fim( transferiu0se o talo com a soluo tampo

    fosfato "(! + p< H( para o li)uidificador domstico e

    homo%eneizou0se por " minuto na 'elocidade mxima e

    transferiu0se para um b)uer( coando0a com uma peneira

    fina.

    Assim )ue coou0se as solu?es homo%eneizadas(

    resultou0se em amostras com aproximadamente ! m* dcasca( $! m* de talo e ## m* de polpa( de aspecto um pouco

    espesso. >m se%uida( mediu0se o p< de cada soluo e

    obte'e0se3

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    Parte do abacaxi pH

    Polpa 6

    Talo 7

    Casca 6

    8abela "0 p< das solu?es de cada amostra( antes de neutralizar.2onte3 pr/prio autor

    ,osteriormente( o p< de cada meio foi a;ustado para H(#

    com a base aO< "(! +( utilizando0se al%umas %otas desta.Ap/s ter a;ustado o p

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    # arte ! $mobilizao enzim%tica

    Ktilizou0se como suporte para imobilizao o tecido feltro de

    colao branca( e com este fez0se $ suportes( para as placas de

    petri de 'idro no esterelizadas( com $ cm de diFmetro e outras

    para as placas de petri de plstico estrelizadas( com cm de

    diFmetro.

    >m cada placa de petri de 'idro no esterilizada( colocou0se o

    feltro como imobilizador( e adicionou0se aproximadamente #

    m* de cada amostra( polpa( talo e casca em cada uma das

    placas.

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    as placas de petri de plstico esterilizada( colocou0se o

    feltro como imobilizador( e adicionou0se aproximadamente"! m* de cada amostra( polpa( talo e casca em cada uma das

    placas.

    ,osteriormente le'ou0se todas as placas de petri ao

    dissecador com slica para a seca%em total do material( para

    )ue as amostras no sofressem nenhuma alterao

    pro'eniente do meio externo( )ue pudessem interferir de

    modo si%nificati'o na ati'idade enzimtica da bromelina.

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    & arte ! 'este enzim%tico

    Ap/s uma semana acondicionadas no dissecador( as placas

    de petri foram retiradas e le'adas para a bancada( encontrando0

    se todas secas.

    Obte'e0se $ bifes de carne bo'ina( sendo acm e antes de

    colocar a enzima em contato com a carne( obser'ou0se seus

    aspectos( como colorao( presena de %ordura e ner'os e

    ri%idez.

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    >m se%uida( fez0se um corte trans'ersal na parte interna

    de cada bife e adicionou0se a enzima imobilizada no feltroCcasca( polpa e taloD contido nas placas de petri e deixou0se em

    repouso durante " hora.

    ,or fim( temperaram0se as carnes e le'ou0se ao cozimento

    para a de%ustao realizada pelos docentes do $I perodo de

    farmcia e pela discente +aria +adalena de AlcFntara.

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    @esultados e =iscuss?esAp/s repouso por uma hora na carne bo'ina( a

    ati'idade enzimtica da bromelina foi confirmada( pelos

    docentes e discente( atra's da de%ustao das mesmas.,orm( sua efeti'idade se deu somente nas placas de

    petri )ue esta'am esterilizadas( concluindo )ue a

    presena de poss'eis impurezas e micro0or%anismos

    interfira na ati'idade deste biocatalizador inibindo0a.

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    Alm disso( hou'e melhor eficcia da enzima ad)uirida da

    casca( podendo constatar )ue h maior presena desta na

    casca do fruto.

    >m cada amostra de carne( foi a'aliada a presena de

    %ordura e iner'ao( aspectos )ue tambm interferiram naati'idade enzimtica( atrapalhando esta( pois partes das

    carnes )ue continham maior )uantidade de %ordura e

    iner'ao no ad)uiriram a maciez dese;ada( ; )ue esta uma enzima proteoltica e no apresenta ati'idade )uando

    aplicada em cidos %raxos.

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    6onclusoO material utilizado para imobilizao apresentou

    resultado satisfat/rio( onde se pde constatar a ati'idade

    enzimtica da bromelina na carne bo'ina.

    6oncluiu0se tambm )ue a eficcia da ati'idadeenzimtica depende de fatores externos )ue acabam por

    pre;udicar( inibindo a ao da enzima bromelina.

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    @efer&nciasA@O( @. ,apain. 4n3 ,>@*+A( 9.G *O@A2( *. etods in

    Enzimolog*. o'a LorM3 Academic ,ress( p. 55$05JJ("H!.

    BA>N( N.

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