CROMOSSOMOS

DA CÉLULA EUCARIÓTICA

BIOLOGIA

Prof. Dr. Feresin

Cromossomosdas células eucarióticas

são longos fios constituídospor uma molécula de DNA

associada a diversas proteínas

Cromossomo DNA + Proteínas

DNA

Durante o período em quea célula não está se dividindo, os filamentos cromossômicos

encontram-se emaranhados no interior do núcleo, constituindo

a CROMATINA

CROMOSSOMOS

Melhor observados durante a divisão celular - condensados

- Uma única e enorme molécula de DNA linear com proteínas associadas

- Proteínas dobram e empacotam a fina fita de DNA

Cromossomos -

Molécula de DNA + Proteínas associadasHistonas

Não-histonas

Nucleossomos

Compactação do

cromossomo

Cromossomo Metafásico X Cromatina Interfásica

Regiões Cromossômicas

Regiões Cromossômicas

Permite que uma cópia de cada cromossomoduplicado seja puxado para cada célula-filhaquando a célula se divide

CINETOCORO complexo de proteínas queassegura a união dos cromossomos duplicadosàs fibras do fuso mitótico

Regiões Cromossômicas

Telômeros

Telômeros

São as regiões finais dos cromossomos

Contém sequências de nucleotídeos repetidas(TTAGGG) que permitem que as regiõesterminais dos cromossomos sejam replicadoscorretamente

Regulação da Estrutura da Cromatina

Eucromatina / Heterocromatina

Estudos microscopia de luz nos anos 1930s distinguiram esses 2 tipos de cromatina no núcleo interfásico

Acreditava-se que os genes estivessem presentes na região eucromática(mas existem genes na região heterocromática também)

Diferentes padrões de eucromatina estão distribuídas ao longo dos cromossomos

Heterocromatina foi reconhecida por Heitz em 1928 centrômeros, telômeros e regiões reguladoras

Eucromatina / Heterocromatina

Eucromatina / Heterocromatina

Heterocromatina DNA com poucos genes, e os genes nessaregião estão “desligados”

Alto grau de compactação

Presença de DNA repetitivo – DNA satélite, Transposons

Centrômeros

Classificação dos cromossomos

Classificação dos cromossomos

Classificação dos cromossomos

Cromossomos Metafásicos

Cromossomos Metafásicos

Cromossomos Politênicos

Cromossomos Plumosos

Bandeamento Cromossômico

O Que é Bandeamento Cromossômico?

Bandeamento é uma variação ao longo do cromossomos de propriedades de colorações

Independente de qualquer variação estrutural óbvia

Por que é importante?

Pode revelar um certo grau de organização cromossômica

Identificar cromossomos e partes de cromossomos

Origem dos métodos de Bandeamento

1894 – Metzner observou corpos na região centromérica decromossomos de Salamandra, que provavelmente corresponderiamaos cinetocoros

Nos próximos 40 anos, mais pesquisadores observaram as mesmasregião em cromossomos de plantas e animais

1928 – Heitz – introduziu o conceito de cromatina: eucromatina eheterocromatina. As regiões visíveis depois da telófase

heterocromatina

Tipos de Bandeamento

Método Definição

C Métodos que demonstram regiões de heterocromatina. A banda C é a unidade da cromatina corada por esses métodos

Q Métodos que usam quinacrina para demonstrar bandas ao longo dos cromossomos

G Demonstra bandas ao longo do cromossomo usando mistura de corante Giemsa

R Reverso do método coloração por Giemsa. Revela padrões opostos de intensidade daqueles obtidos pela banda G

Banda-C centromérica

Banda-C intersticial

Banda-C próxima regiãoterminal

Coloração por Fluorocromos

Objetivo Caracterizar as regiões cromossômicas ricas emsequências A-T ou C-G

Pode ser feita após o bandeamento C caracterização dasregiões heterocromáticas

Fluorocromos mais utilizados: DAPI – 4’- 6-diamino-2-fenilindoleMM - MitramicinaCMA3 –Cromomicina A3

QuinacrinaHoechst 33258

Bandeamento Q

Flurocromo Quinacrina que intercala no diferencia regiões ricas em AT e CG Regiões mais fortes – ricas em AT

DAPI CMA3

Banda C DAPI CMA3

Comparação mesma metáfase com fluorocromos após bandeamento C

Bandeamento G• Método de bandamento mais utilizado• Coloração é permanente• Muito usado para citogenética clínica humana e também para estudos em

mamíferos

Incubação em tripsina em solução salina

Coloração por Giemsa

(Seabright, 1971)

Cromossomos Humanos

Bandas G claras Bandas G escuras

DNA rico em GC DNA rico em AT

Replicação rápida Replicação lenta

Muitos genes Poucos genes

• Alguns animais e plantas não apresentam resultados positivos para bandamento G

Bandamento R

• Padrão complementar ao do bandamento G• Normalmente, regiões terminais estão geralmente coradas limites dos

cromossomos

Incubação em tampão fosfato 85 a 90°C

Coloração por Giemsa

Gosden, 1994; Barch et al., 1997; Sumner e Leith, 1999; Czepulkowski, 2001; Rooney, 2001.

Bandamento R

• Padrão complementar ao do bandamento G• Normalmente, regiões terminais estão geralmente coradas limites dos

cromossomos

Metáfase de humanos

Até a próxima aula...

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