aulas práticas de biologia celular

8/13/2019 Aulas prticas de Biologia Celular

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Prticas de Biologia CelularPUBLICAO DIDTICA

FARMACIA

Profa. Responsvel: Llian Carla Carneiro

Trindade, GO2!


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2. 1o fi% de cada eQerccio 0 se%pre perguntas s (uais o aluno dever responder,aps discuti;las co% os colegas do grupo ou de acordo co% consultas aos teQtosdas aulas tericas+

. O aluno ) responsvel pelo %aterial (ue l0e ) fornecido: %icroscpio, lS%inas,pin&as, vidraria, etc. eve *elar pela #oa %anuten&'o dos %es%os, le%#rando;sede (ue os colegas de outras tur%as far'o uso desses %es%os %ateriais.

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SUMRIO

Prticas de Biologia Celular................................................................................................1

PUBLICAO DIDTICA.......................................................................................................1ru!o 1...................................................................................................................................."ru!o 2...................................................................................................................................."

ru!o 3................................................................................................................................"ru!o #................................................................................................................................"Aeross$is % &'o (icro!art)culas s$lidas ou l)*uidas co( di(e+s'o a!ro,i(ada de -1e"- *ue !ode( !er(a+ecer e( sus!e+s'o e( co+di/0es ieis !or rias oras..........."ias a4reas de !e+etra/'o...................................................................................................."ia de !e+etra/'o cut5+ea..................................................................................................."Co+ta(i+a/'o ia ocular....................................................................................................."Co+ta(i+a/'o ia oral.........................................................................................................6

Prote/'o i+diidual..............................................................................................................6Prote/'o coletia.................................................................................................................67egras Bsicas de &egura+/a..............................................................................................6Co+sidera/0es 8i+ais............................................................................................................9

Prtica +o 1..................................................................................................................................:Utili;a/'o do (icrosc$!io de lu;................................................................................................:T4c+icas de estudo das c4lulas..................................................................................................1#Prtica +o 2................................................................................................................................13 OR3L Pi!etage( !ela =ocaF =ito de 8u(arF 7oer as u+asF

Co(er de+tro do la=orat$rio. Boas !rticas +o la=orat$rio Laar as ('os a+tes e a!$s a or+ada de tra=aloF ?u+ca !i!ete co( a =ocaF ?'o co(er ou !re!arar ali(e+tosF ?'o =e=er +e( 8a;er igie+e =ocal (a*uilage( de!ila/'o ou =ar=ear%se e roer as u+asF >a+ter os artigos de uso !essoal 8ora do la=orat$rioF ?'o use sa!atos a=ertosF ?'o tra=alar so;i+o +o la=orat$rio.

PROTWXO >1>U>93L Protetor 8acial uso de aleco $culos de segura+/a luas cirErgicas !Gra de =orraca !i!etador auto(tico (scaras

PROTWXO COLT>U3

Protege( o !ro8issio+al e o (eio a(=ie+teH C5(eras de 8lu,o la(i+ar laa olos cueiro de e(ergG+cia

RGR3A B@A>C3A AG9R31W3 Co+eci(e+to dos riscos la=oratoriaisF Trei+a(e+toF A*uisi/'o de (a+ual de segura+/aF Cu(!rir as i+stru/0es de segura+/aF

Usar os e*ui!a(e+tos de !rote/'o i+diidual e coletiaF li(i+ar 8oco de e,!osi/'o ao riscoH >a+ter =a+cadas li(!as e lires rotular o (aterial de estudo li(!ar i(ediata(e+te o derra(a(e+to de (aterial =iol$gico eitar a 8or(a/'o de aeross$is Co(u+icar situa/0es de risco e acide+tes.

PROCEDIMENTO DE DESINFECO EM CASO DE ACIDENTES

1. Derramamento sm!"es #e matera" "$%o 'ontamna#o( 'om !o&'a )orma*+o #eaerosso" ,r&!o #e rs'o 1 e /0

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co=rir a rea a8etada co( toala !a!el colocar o desi+8eta+te a!ro!riado so=re o !a!el aguardar 3- (i+utos re(oer os !a!4is co( !i+/a e coloc%los e( saco !lstico Musar luasN a!licar +oa(e+te o desi+8eta+te es8rega+do%o. Derramamento #e matera" "$%o 'ontamna#o 'om )orma*+o #e aerosss ,E2.0otas 'an#o #a !!eta/0 !re+der a res!ira/'o a=a+do+ar a rea !or algu+s (i+utos !roceder co(o o caso de derra(a(e+to si(!les3. 4&e#a #e '&"t&ras em meo "$%o o& s"#o 'om %&e5ra #e re'!ente0 !re+der a res!ira/'o a=a+do+ar a rea tra+car a !orta coloca+do u( aiso aguardar 3- (i+utos

certi8icar%se da +ature;a do (icroorga+is(o e+olido !ara decidir so=re a !rote/'o+ecessria e desi+8eta+te a ser utili;ado

CO1A>R3WZA ?>13>A Acide+tes s'o causados !or atos i+seguros ou co+di/0es i+segurasF ?u+ca !er(a+e/a e( u( la=orat$rio se( o !ro8essor ou t4c+ico res!o+selF 7eage+tes *u)(icos ou age+te !atogG+icos a!rese+ta( (aior riscoF Te+a o + do tele8o+e do cor!o de =o(=eiros se(!re e( local is)elF &e eu +'o sei algoH P7U?TA7 A Q?ICA &OLUOR

>nstru&-es de La#oratrio, Recon0eci%ento e


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:% &u=st5+cias i+8la(eis dee( ser a*uecidas e( =a+o%(aria ou e( ca!a el4tricaFT9 O 3L91O I9 U13 COLOC3R < R>ACO

3C>1T O L3BOR3TR>O O9 9< COLG3, >C3R@ 13 >AP1A3 O


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!. Conceitos a0ordados

O %icroscpio de lu* ) u% aparel0o utili*ado para o#serva&'o de o#$etos

%uito pe(uenos, i%possveis de sere% eQa%inados, e% detal0es, a ol0o nu. O tipo

de %icroscpio %ais utili*ado nos estudos citolgicos ) o co%posto, (ue )

constitudo #asica%ente por duas lentes convergentes. 1este %icroscpio a lu*

atravessa o o#$eto o#servado e o con$unto de lentes, antes de atingir o ol0o,

for%ando u%a i%age% #idi%ensional. 3ssi%, o o#$eto deve ser delgado o

suficiente para (ue a lu* atravesse;o.

!.!. 1escri*#o dos componentes do microsc%pio

O %icroscpio ) co%posto, #asica%ente por dois siste%as: o %ptico,

for%ado pelas lentes e o mec2nico (ue as sustenta. 3 seguir, encontra%;se

descritas cada u%a das partes desses siste%as.

3. ou Base: ) o suporte do %icroscpio, pe&a (ue sustenta todas as

outras.

B. Corpo ou Bra*o: ) a pe&a (ue liga a #ase parte superior do

%icroscpio.

C. latina ou Mesa: ) u%a pe&a de for%ato retangular, ou arredondada,

disposta paralela%ente dire&'o da #ase do %icroscpio. sta pe&a se destina

recep&'o da lS%ina contendo o %aterial para estudo. 1o centro da platina eQiste u%a

a#ertura para a passage% de lu*. 3ssociada platina, nor%al%ente, encontra;se u%a

pe&a deno%inada 6c0arriot8 cu$a fun&'o ) %ovi%entar a lS%ina no plano 0ori*ontal. Osdois parafusos dispostos lateral%ente platina, u% so#re o outro, pro%ove% a

%ovi%enta&'o do 6c0arriot8. O parafuso %ais eQterno de %enor diS%etro/ per%ite o

desli*a%ento da lS%ina da es(uerda para direita e vice;versa. O parafuso de diS%etro

%aior ) responsvel pelo %ovi%ento da lS%ina para frente e para trs. 3coplada ao

6c0arriot8, 0 u%a presil0a (ue per%ite o encaiQe e fiQa&'o da lS%ina.


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. 3onte de lu/: 0 u%a fonte de lu* apoiada so#re o p) do %icroscpio.

3lguns %icroscpios possue% apenas u% espel0o para refletir a lu* de u%a fonte

eQterna.

. 3iltro: ) u%a placa de vidro colorida a*ul, verde, etc./ fiQada a u%receptculo, (ue torna a lu* %ais apropriada o#serva&'o do %aterial. O filtro a*ul )

usado e% %icroscpio de rotina para transfor%ar a lu* a%arelada da lS%pada e% lu*

#ranca tipo lu* solar.

?. Condensador: ) u% con$unto de lentes situado a#aiQo da platina, (ue

concentra e torna paralelo o feiQe lu%inoso, fornecendo a lu* necessria ilu%ina&'o

unifor%e do o#$eto e% estudo. O 6parafuso8 do condensador, locali*ado lateral%ente no

#ra&o do %icroscpio, per%ite a %ovi%enta&'o das lentes condensadoras (ue deve% ser

%antidas na posi&'o %ais elevada para o#ten&'o de u%a ilu%ina&'o unifor%e.

G. 1ia4ragma ou 5ris: ) u%a pe&a associada ao condensador, regulvel

%ediante u%a alavanca, (ue controla a (uantidade de lu* (ue atinge o orifcio da platina.

3 regulage% ade(uada deste diafrag%a oferece u%a i%age% co% %el0or contraste.

. Can#o: ) a parte superior do %icroscpio, dotada de %ovi%ento de

rota&'o constituda por u%a pe&a se%i;esf)rica, ligado a u% tu#o e% cu$a eQtre%idadeencontra;se a lente ocular.

>. Re,%l,er: locali*ado a#aiQo do can0'o. O revlver ) u%a pe&a circular

dotada de %ovi%ento de rota&'o, no (ual se insere% as lentes o#$etivas. O disco do

revlver possui ran0uras para (ue o o#servador possa gira;lo para as %udan&as de

o#$etivas.

E. Ocular: ) a lente superior do %icroscpio (ue se encaiQa no tu#o. Toda

ocular tra* indicado o au%ento (ue proporciona i%age% do o#$eto o#servado.

F. O06eti,as: o %icroscpio possui, geral%ente, (uatro lentes o#$etivas.

Toda o#$etiva tra* gravado o au%ento (ue proporciona do o#$eto o#servado. ste

au%ento ) indicado pelo n[%ero gravado co% caracteres %aiores. O n[%ero gravado co%

caracteres %enores refere;se a a#ertura nu%)rica da lente, u% detal0e da ptica.

1-


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L. ara4uso macromtrico: na lateral do #ra&o eQiste% dois parafusos,

geral%ente, encaiQados u% no outro. O de %aior diS%etro ) o parafuso %acro%)trico,

(ue per%ite grandes avan&os ou recuos da platina e% rela&'o o#$etiva.

dentificar e citar as fun&-es de cada co%ponente do %icroscpio de

lu*.

Relacionar a i%age% for%ada e os au%entos o#tidos co% o

funciona%ento do siste%a ptico.


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Retire da caiQa a lS%ina contendo a letra 9e colo(ue;a so#re a platina, de %odo a

%anter a letra na posi&'o e% (ue ela ) lida,

O#serve a posi&'o da letra na i%age% for%ada pelo %icroscpio co% a o#$etiva de

=\. 3ps a o#serva&'o responda:

a/ ?a&a os es(ue%as da posi&'o e do ta%an0o da letra o#servada, a vista

desar%ada e nos au%entos de "\ e =\.

LS%ina "\ =\

#/ Iual a diferen&a (uanto posi&'o da i%age% da letra vista ao %icroscpio

e% rela&'o a sua posi&'o real o#servada a vista desar%ada_

```````````````````````````````````````````````

c/ Por (ue centrali*ar o %aterial o#servado no ca%po de o#serva&'o, a cada%udan&a de o#$etiva_

````````````````````````````````````````````````````````````

````````````````````````````````````````````````````````````

2. O#serva&'o de organis%os %icroscpios

% Colo(ue so#re u%a lS%ina u%a gota de gua proveniente

de u% lago.% Cu#ra co% u%a la%nula encostando u%a de suas #ordas

na gota e deiQando;a descer suave%ente, %ini%i*ando a for%a&'o de #ol0as de

ar.

% ?ocali*e.

% O#serve os organis%os e% diferentes ca%pos de

o#serva&'o utili*ando;se os parafusos do 6c0arriot8.

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% esen0e o (ue o#servou.

OBA. Para o#servar organis%os %ais transparentes, di%inua a lu%inosidade

usando o diafrag%a.

?igura " ; O


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A ida 4 gerada !elo meta5o"smo*ue re!rese+ta as rea/0es *u)(icas geradas !elosele(e+tos *u)(icos e,iste+tes de+tro de u(a c4lulaF

Todo ser !luricelular !ro4( de u(a outra c4lula % o ;igoto Todas as c4lulas !ro4( de outra !ree,iste+te

A !artir da) os co+eci(e+tos so=re a c4lula tG( !rogredido !aralela(e+te ao

a!er8ei/oa(e+to dos (4todos e a!arelos de i+estiga/0es !ri+ci!al(e+te ao da (icrosco!ia.Vora( desco=ertas t4c+icas cito*u)(icas !ara a ide+ti8ica/'o e locali;a/'o de diersas(ol4culas co+stitui+tes da c4lulas. Co( o ade+to dos (icrosc$!ios eletr+icos *ue te(gra+de !oder de resolu/'o 8ora( o=serados !or(e+ores da estrutura celular *ue +'o

!oderia( se*uer se i(agi+ados !elos estudos 8eitos co( os (icrosc$!ios $!ticos. >ais ou(e+os si(ulta+ea(e+te co( o uso da (icrosco!ia eletr+ica 8ora( a!er8ei/oados (4todos dese!ara/'o de orga+elas celulares e !ara o estudo i+ itro de suas (ol4culas e res!ectias8u+/0es !er(iti+do (a+i!ular o ge+o(a de+tre outras 8u+/0es.

Esto #e '"&"as ::as ,


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Colora*+es ,itais Iuando se dese$ar corar os %icroorganis%os, se% contudo

%at;los, lan&a;se %'o dos corantes atQicos co%o o a*ul de %etileno, ver%el0o

neutro, etc.... e% solu&'o a(uosa a "b. Pode ser usada a %es%a t)cnica do eQa%e

a fresco, $ descrita, apenas su#%etendo o %aterial a eQa%inar a&'o de u%

corante vital. essa for%a o %aterial aparece corado, se% (ue se$a afetada sua

vitalidade.


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V necessrio fa*er cortes delgados para anlise de estruturas celulares

utili*ando;se para isso o %icrto%o.

Corantes

Iuase todas as organelas s'o transparentes e incolores, o (ue dificulta o seuestudo, para isso ) necessrio utili*ar;se de corantes especficos para visuali*ar

partes especficas de u%a c)lula. Corantes fora% definidos por Langeron co%o

su#stSncias coradas (ue per%ite% trans%itir a propriedade de sua cor a outros

corpos.


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3 %aioria dos corantes co%porta;se co%o #ase ou co%o cido. 1os

corantes #sicos, o grupa%ento responsvel pela cor ) catinico, co%#inando co%

os grupa%entos cidos das %ol)culas celulares. E os corantes cidos s'o

anionicos e co%#ina%;se co% os co%ponentes #sicos celulares.

1:


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rtica no"7cnicas de preparo de materiais para microscopia de lu/

!.Conceitos a0ordadosO estudo dos seres vivos e% nvel citolgico ) li%itado por tr5s fatores

principais: as pe(uenas di%ens-es da %aioria das c)lulas, a falta de contraste

entre as estruturas celulares, a espessura e o ta%an0o dos rg'os (ue se

pretende estudar. % conse(45ncia, a anlise da estrutura e organi*a&'o celular

n'o depende so%ente do uso do %icroscpio, %as ta%#)% de t)cnicas #sicas de

preparo do %aterial #iolgico.1a utili*a&'o do %icroscpio de lu*, a lS%ina de vidro serve co%o u%

suporte para o %aterial. O processa%ento do %aterial #iolgico, desde sua

o#ten&'o at) a %ontage% so#re a lS%ina, consiste de u%a s)rie de passos (ue

concorre%, direta ou indireta%ente, para a %anuten&'o das caractersticas

originais das c)lulas e para u%a #oa o#serva&'o.

1os estudos citolgicos pode;se utili*ar %ateriais frescos ou fiQados.ssa escol0a dever atender aos o#$etivos do tra#al0o.

3. 3>A ?R:ACOA

9tili*a%;se prepara&-es a fresco (uando n'o eQiste interesse na sua

preserva&'o. O %aterial ) preparado i%ediata%ente aps sua o#ten&'o e, depois

de o#servado, ) descartado LS%inas n'o per%anentes/. Co%o eQe%plo destasprepara&-es pode%os citar: esfrega&o de l(uidos corporais, cortes feitos a %'o

livre e% tecidos vegetais, entre outros.

B. 3>A ?>\3OA

3 fiQa&'o ) u%a opera&'o %uito i%portante e crtica, sendo e%pregada

na(ueles %ateriais (ue ser'o preservados por longos perodos de te%po. la

1


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". 1escri*#o geral das etapas de prepara*#o de l2minas

2.". Coleta

3 coleta do %aterial deve ser precedida de estudos (ue garanta% ao#ten&'o do o#$eto de estudo e% %el0or condi&'o possvel. Iuando se pretende

estudar in vivo a anlise ) feita i%ediata%ente aps a coleta+ preservando assi%,

as condi&-es do %aterial. Ae o estudo for in vitroaps a coleta o %aterial deve

ser fiQado.

2.2. ?iQa&'o3 fiQa&'o consiste no trata%ento de c)lulas ou tecidos co% agentes (ue

esta#ili*e% as estruturas co%o se as %es%as estivesse% vivas. eve se levar e%

considera&'o na escol0a do fiQador:

o poder de penetra&'o,

capacidade de causar %orte,

n'o altera&'o %orfolgica das c)lulas e tecidos e,

propiciar #oa conserva&'o do %aterial.

A'o eQe%plos de fiQadores:for%ol b+ lcool !b+ tetrQido de s%io+

cido cr%ico+ cido ac)tico =b al)% de %isturas.

2.. Cortes

Os cortes s'o i%prescindveis e% %ateriais %ulticelulares, co%o

tecidos vegetais e ani%ais, para per%itir a passage% de lu* pelo %aterial pr);

re(uisito #sico para a preserva&'o do %aterial ao %icroscpio/ e o estudo de

estruturas co%pleQas, por possi#ilitar u%a vis'o a%pla das ca%adas %ais internas

e a individuali*a&'o de c)lulas.

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2..". >nterpreta&'o de cortes

V i%portante notar (ue, u% [nico corte n'o per%ite resolver a for%a

de u%a dada estrutura. 1o eQe%plo (ue se segue, u%a sec*#o ori/ontalde tr5s

o#$etos diferentes, apresenta a %es%a configura&'o.

O#$etos

Pode;se, no entanto, o#ter infor%a&-es adicionais, o#servando;se

cortes do %es%o o#$eto e% diferentes dire&-es. >sto re(uer, natural%ente, (ue

se dispon0a de %ais de u% eQe%plar do o#$eto. % u% corte longitudinal, os

o#$etos 3, B e C apresentaria%, respectiva%ente, as seguintes configura&-es:

22

A B C

AB C

A B C


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23


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Os cortes pode% ser de = tipos: transversal (uando feito paralela%ente

ao %enor co%pri%ento do %aterial/, Longitudinal (uando feito paralela%ente ao

%aior co%pri%ento do %aterial/+ O#l(uo (uando a dire&'o do corte n'o est

relacionada a nen0u% eiQo/ e parad)r%ico paralelo superfcie do rg'o 7

o#ten&'o de epider%es/.

stes diferentes cortes s'o i%portantes para (ue possa%os construir

a vis'o tridi%ensional das estruturas celulares. eve;se ter e% %ente (ue afigura (ue se v5 representa apenas u%a sec&'o do o#$eto. ssa figura )

#idi%ensional, e as estruturas t5% tr5s di%ens-es. Por esse %otivo, para

constru&'o do %odelo tridi%ensional das estruturas o#servadas, utili*ando a

%icroscopia, deve;se ou fa*er vrios tipos de cortes ou, fa*er u%a s)rie de

cortes se(4enciais. 3l)% disso, algu%as estruturas, devido sua locali*a&'o, n'o

2#


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s'o reveladas e% todos os tipos de corte, devendo;se verificar o tipo de corte

ade(uado para cada estudo.

2.=. Colora&'oIuando o %aterial a ser o#servado ) transl[cido, ou, (uando se (uer

o#servar estrutura especfica torna;se necessrio o uso de corantes, (ue s'o

su#stSncias capa*es de transferir cor a outras su#stSncias, propiciando

contraste entre as estruturas e o %eio.

8. O06eti,os

escrever as %etodologias co%u%ente utili*adas no preparo de %ateriaiscitolgicos+

Con0ecer os passos do preparo de lS%inas per%anentes e $ustificar ospropsitos de cada u%.

>nterpretar i%agens de cortes 0istolgicos e reconstruir for%astridi%ensionais a partir delas.

D. 9ti,idades de 4ixa*#o

3.


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rtica no8Mtodos de estudo da clula e mor4ologia celular


3 #iologia celular e %olecular estuda o#$etos %uito pe(uenos, por issodepende inteira%ente do aperfei&oa%ento dos instru%entos e das t)cnicas depes(uisa. 3lguns %)todos para estudo da c)lula: %icroscopia, fraciona%ento celular,%)todos cito(u%icos, %)todos i%unocito(u%icos e radioautografia.

3#aiQo s'o apresentados diferentes nveis de estrutura #iolgica adaptado dee Ro#ertis e Ro#ertis Er., 2/:

Dimenso rea de Estudo Estruturas Mtodos para Visualizao0,1 mm (100m)ou mais

Anatomia rgos Olho humano; lentes simples

100-10m Histologia Tecidos Microcpios pticos

10-0,!m(!00nm)

"itologia "#lulas, $act#rias Microscopia de raios %

!00-1nm Mor&ologiasu$microscpica eultra-estruturamolecular

"omponentes celularese 'rus

Microscopia de polaria*o;Microscopia eletr+nica

Menos de 1nm strutura molecular eat+mica

isposi*o dos .tomos i&ra*o de raios %

". Mtodos de estudo da clula".!. Microscopia

Microsc%pio %ptico co%p-e;se de uma parte mec2nica, (ue serve desuporte, e uma parte %ptica, constituda por tr5s siste%as de lentes: ocondensador, a o06eti,ae a ocular.

O con0eci%ento atual so#re as c)lulas foi o#tido nos [lti%os 2 anos

aps o desenvolvi%ento da %icroscopia eletrnica. 3 principal vantage%

conferida por esse e(uipa%ento ) seu %aior poder de resolu&'o (ue

per%itiu o estudo da ultra;estrutura ou %orfologia su#;%icroscpica da

c)lula.

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Os cortes para o#serva&'o no %icroscpio eletrnico


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3igura ". Princpio de funciona%ento do %icroscpio de lu*

oder de resolu*#o 7 O ter%o poder de resolu*#orefere;se capacidade de u%

siste%a tico de discri%inar a i%age% de u% o#$eto (ue se encontra e% seu

ca%po de vis'o. Por eQe%plo, a#aiQo de u% certo li%ite %ni%o ,"%%/, o ol0o

0u%ano n'o identifica a ocorr5ncia de dois o#$etos distintos, eventual%ente

visuali*ando;os co%o u% [nico o#$eto.

=imite de resolu*#o 7 %enor distSncia (ue deve eQistir entre dois pontos para

(ue eles apare&a% individuali*ados

2:

7eti+aLe+te dos olos

Le+tes da ocular

I(age( 8or(ada !elao=etia Mreal (aior ei+ertidaN

Le+tes da o=etia

O=eto so=re a l5(i+aLe+tes do co+de+sador

Vo+te de lu;


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rtica no DOrganelas e %acro%ol)culas pode% ser separadas por centrifuga&'o


O estudo #io(u%ico dos co%ponentes celulares re(uer a separa&'o e o

isola%ento cuidadoso das vrias organelas e %acro%ol)culas celulares. A a partir

de organelas ou de seus vrios co%ponentes %oleculares purificados ) possvel

estudar co%o esses co%ponentes interage% entre si para pro%over o

funciona%ento de u%a organela. esta for%a, as %etodologias e%pregadas para o

fraciona%ento celular e %olecular s'o funda%entais para o estudo da organi*a&'o

%olecular e do funciona%ento da c)lula.

3s c)lulas pode% ser ro%pidas de vrias %aneiras+ por eQe%plo, por

inter%)dio de c0o(ue os%tico, pelo uso de vi#ra&-es ultra;snicas e por

%)todos %ecSnicos (uando s'o for&adas a passar por u% pe(ueno orifcio ou s'o

0o%ogenei*adas. 3 aplica&'o cuidadosa desses procedi%entos per%ite (ue

organelas co%o n[cleo, %itocndrias, co%pleQo de Golgi e peroQisso%os fi(ue%

intactos e ta%#)% (ue %uitas vesculas derivadas do retculo endoplas%tico,

c0a%adas de %icrosso%os, %anten0a% %uito de suas propriedades #io(u%icas

originais.

Co%o os co%ponentes resultantes do ro%pi%ento celular apresenta%

grandes diferen&as de ta%an0o, eles pode% ser separados por centrifuga&'o.Postos e% u% tu#o a girar e% alta rota&'o, as diferentes organelas v'o sofrer a

a&'o da for&a centrfuga. struturas %aiores co%o c)lulas intactas e n[cleos v'o

sedi%entar pri%eiro no fundo do tu#o. Por eQe%plo, %inutos de centrifuga&'o a

" rp% Rota&-es or Minuto/ ) suficiente para separar este %aterial.

Centrifuga&-es co% %aior n[%ero de rp% e por %aior te%po por eQe%plo, "

%inutos a 2. rp%/ far'o sedi%entar co%ponentes u% pouco %enores, co%o

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%itocndrias, lisosso%os e peroQisso%os. 3ltas rota&-es e% te%po ainda %aiores

J. rp% por 0oras/ sedi%enta% ri#osso%os e grandes %acro%ol)culas.

%#ora n'o se$a possvel, por inter%)dio do uso de u%a centrfuga co%

pe(uena capacidade rp%, reali*ar as separa&-es necessrias para o isola%ento

eficiente das diversas organelas, as atividades apresentadas a segui possi#ilita%

(ue a a&'o da centrifuga&'o, no isola%ento de alguns co%ponentes celulares, se$a

vivenciada de %odo concreto e discutida co% #ase nos resultados o#servados.

Material necessrio

?ol0as de Tradescantia purpureaf

Gral e pistilo pode ser pires e col0er/

Tu#os de centrfuga

Pipetas de Pasteur

Centrfuga

etergente de lou&a l(uido ou gel/

@gua acidulada 2 a gotas de vinagre 7 cido ac)tico 7 e% %ais ou

%enos " %L de gua/

rocedimentos

". Colo(ue %L de gua acidulada e% u% gral ou e% u% pires/+

2. s%ague nessa solu&'o 2 a fol0as de Tradescantia co% u% pistilo ou u%a

col0er/+

. Transfira co% u%a pipeta de Pasteur a parte l(uida do 0o%ogenei*ado

para u% tu#o de centrfuga e centrifugue rapida%ente " seg./ para retirar

fi#ras de celulose e outros resduos %aiores+

=. Transfira o so#renadante para u% tu#o novo. O#serve (ue o l(uido te%

cor %arro%. Centrifugue por %inutos.

3-


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rtica no )Comparando clulas procari%ticas e eucari%ticas


Os seres vivos pode% ser classificados e% dois grandes grupos: os

procariontes e os eucariontes, confor%e a organi*a&'o da c)lula (ue os co%p-e. O

o#$etivo desta prtica ) o de co%parar c)lulas procariticas e eucariticas,

esta#elecendo se%el0an&as e diferen&as.

3o %icroscpio ptico, o (ue %ais c0a%a a aten&'o ) a grande diferen&a de

ta%an0o entre as c)lulas eucariticas e procariticas tpicas. V claro (ue se pode

encontrar c)lulas procariticas, co%o algu%as cianofceas, cu$o ta%an0o est

prQi%o ou %es%o ) %aior (ue algu%as c)lulas eucariticas. ntretanto, a regra )

(ue os procariontes geral%ente t5% c)lulas %uito %enores (ue os eucariontes.

Outra diferen&a #e% %arcante ) a presen&a do n[cleo nos eucariontes e

sua aus5ncia nos procariontes. >nterna%ente, n'o s a presen&a do n[cleo difere

nos dois tipos de c)lulas, %as ta%#)% a intensa co%parti%entali*a&'o das

diversas fun&-es celulares e% organelas envoltas por %e%#ranas 7 o siste%a de

endo%e%#ranas 7 caracterstico das c)lulas eucariontes.

>nfeli*%ente, o siste%a de endo%e%#ranas ) de difcil visuali*a&'o ao

%icroscpio ptico, sendo %ais #e% o#servado ao %icroscpio eletrnico. >sto

restringe o elenco de atividades prticas possveis co% o uso de %icroscpios

co%uns, e a o#serva&'o da caracterstica %ais notvel para diferenciar os dois

tipos de organi*a&'o celular fica, geral%ente, li%itada o#serva&'o de

presen&aaus5ncia de n[cleo co%o eQce&'o a esta generali*a&'o pode;se citar a

visuali*a&'o de vac[olos contrteis e digestivos e% ciliados 7 e e% prepara&-es

de lS%inas per%anentes co% colora&-es especiais para visuali*ar retculo

endoplas%tico, co%pleQo de Golgi ou %itocndrias/.

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9%a for%a #e% didtica de evidenciar as diferen&as e% rela&'o s

di%ens-es das c)lulas ) colocar lado a lado c)lulas #acterianas e c)lulas da

%ucosa da #oc0ec0a.

". Material necessrio LS%inas e la%nulas

Palitos

Placa de Petri co% colnias de #act)rias

3l&a de platina

La%parina

@lcool !b Corante a*ul de %etileno ,b

Papel;filtro

?rasco co% capacidade de 2 %L


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Iuest-es para discuss'o

"/ Por (ue fiQa%os as #act)rias pelo calor e as c)lulas

eucariticas co% lcool !b_

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2/ Iual a fun&'o do corante a*ul de %etileno_

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/ Iuais as principais diferen&as o#servveis entre as c)lulas

das #act)rias e as da #oc0ec0a_

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=/ Iuais as principais diferen&as internas (ue n'o pudera% ser

o#servadas ao


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pronta%ente co% a solu&'o filtrada, for%ando duas fases na superior fica o

lcool/. ntre as duas fases ) possvel o#servar a for%a&'o de u% precipitado

co% aspecto de 6fiapos8 es#ran(ui&ados, (ue s'o os cidos nucl)icos.

K. Co% a a$uda do #ast'o, principal%ente se eQistir u% ganc0o na ponta, )

possvel enrolar os cidos nucl)icos (ue est'o precipitando.

!. 9%a ve* enrolados no #ast'o, os cidos nucl)icos deve% secar por alguns

%inutos ao ar deiQar evaporar o lcool/+ depois, o %aterial deve ser transferido

da eQtre%idade do #ast'o para u% tu#o co% , %L de gua.

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rtica no H


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rtica no O0ser,ando osmose nas clulas ,egetais

Material necessrio

LS%inas e la%nulas

Aolu&'o de a*ul de %etileno ,b

Ce#ola

LS%ina de #ar#ear

Conta;gotas

@gua destilada

Aolu&'o 0ipertnica Aolu&'o saturada de 1aCl eou a&[car, o %ais

eficiente ) fa*er u%a solu&'o saturada de sal e a&[car/

Papel;filtro

rocedimento

". Retire a epider%e de u%a esca%a de ce#ola e colo(ue so#re u%a

LS%ina co% u%a gota de a*ul de %etileno, cu#ra co% a la%nula e o#serve ao


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>ndi(ue no seu es(ue%a os locais onde ocorre% a fotofosforila&'o e o ciclo deCalvin.

rtica no !'Tema - Ctoes%&e"eto

aN ,a(i+e a la(i+a de es!er(ato;$ide u(a+o.

4&est8es !ara Ds'&ss+o- Re"a'one 'entr$o"os( )"ae"os e '$"os.- Comentar as estr&t&ras :s&a"7a#as nos es!ermato7#es.

DISCUSSO0

CONC6US>ES0

#2


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rtica no !!Mitose


O cresci%ento e o desenvolvi%ento dos organis%os vivos depende% do

cresci%ento e da divis'o de suas c)lulas. 1os organis%os unicelulares a divis'o

celular resulta nu%a verdadeira reprodu&'o, originando novos indivduos. 3o

contrrio, nos organis%os pluricelulares, (ue prov5% de u% *igoto, repetidas

divis-es desta c)lula inicial leva% ao desenvolvi%ento e cresci%ento do indivduo.

3 g5nese de novas c)lulas constitui u% fen%eno cclico deno%inado ciclo

celular. 3 %aior parte do ciclo celular ) co%preendida pela int)rfase, perodo entre

o final de u%a divis'o e o co%e&o de outra.

9%a s)rie de eventos per%ite, para fins de estudo, identificar e caracteri*ar

u%a se(45ncia de (uatro fases no processo %ittico, apesar de n'o eQistire%

li%ites precisos entre elas. stas fases s'o con0ecidas co%o prfase, %etfase,

anfase e telfase.

3 %itose garante ao longo do processo proliferativo celular, a %anuten&'o da

identidade das c)lulas, por %eio da transfer5ncia da #agage% g5nica de u%a c)lula

s suas descendentes.

". rocedimentos: 1esta aula Uoc5 far a identifica&'o de fases da %itose e%lS%inas per%anentes contendo cortes longitudinais e transversais de ra*es. %seguida Uoc5 vai preparar lS%inas te%porrias de pontas de rai*, pelo %)todo dees%aga%ento e colora&'o pelo car%i%.

". LS%inas per%anentes de ra*es de ce#ola 3lliu% cepa/. Co% a o#$etiva de "\focali*e a regi'o %eriste%tica .

#3


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#/ Co% a o#$etiva de =\ identifi(ue as fases da %itose. esen0e;as. escreva ascaractersticas principais de cada fase.

##

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P7XVA&

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LS%inas te%porrias de c)lulas de ponta de rai* de ce#ola.

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aulas práticas de biologia celular

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