universidade federal de santa maria centro de ciÊncias da saÚde curso de farmÁcia biofÍsica...

UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA MARIA

CENTRO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE

CURSO DE FARMÁCIA

BIOFÍSICA MOLECULAR

Sabrina Homrich

Tanise Dalmolin

Vanessa Torbitz

Verônica Dias

O DESENVOLVIMENTO DA MICROSCOPIA ELETRÔNICA

• J.J. Thomson - 1897

• De Broglie – 1924

• Bush – 1926 (Fundamentos da ótica eletrônica)

• Knoll – 1935 (MEV)

• Siemens – 1939 (MET)

MICROSCÓPIO ELETRÔNICO DE TRANSMISSÃO

• Tem sido usado em todas as áreas das ciências Biológicas e Biomédicas devido a sua capacidade de visualização das mais finas estruturas celulares.

• Usa uma bobina em vez de uma lente

• Usa um feixe de elétrons em vez de luz

• Possui um poder de aumento útil de até um milhão de vezes e uma resolução, com espécimes biológicas, de cerca de 2 nm.

• As técnicas de coloração empregadas para observação nestes tipos de microscópio são metais pesados como o ouro, o ósmio, urânio e chumbo.

MICROSCÓPIO ELETRÔNICO DE TRANSMISSÃO – MODELO 906E

MET. Mais simples e mais avançado. ( Empresa Jeol)

MET mais antigo.

PRINCÍPIOS DA MICROSCOPIA ELETRÔNICA

Poder resolvente (ou poder de resolução)

É a capacidade de distinguir, 2 pontos adjacentes. (detalhes)

Comprimento de ondaA natureza da luz LIMITA A QUANTIDADE DE DETALHES

QUE PODE SER RESOLVIDA NUM MICROSCÓPIO.

• Abertura numéricaNa prática, é considerada como sendo a quantidade de luz que

efetivamente penetra na objetiva.

COMPONENTES DO MICROSCÓPIO ELETRÔNICO

• Propriedades ondulatórias dos elétrons

Aumento no PODER RESOLVENTE

• Canhão eletrônicoÉ a fonte de iluminação do microscópio eletrônico e consiste em um

pequeno fragmento de fio em forma de V.Uma ALTA VOLTAGEM é aplicada nesse filamento, FAZENDO COM

QUE UMA CORRENTE FLUA ATRAVÉS DELE, O INCANDESÇA EMITINDO ELÉTRONS.

• Lentes eletrônicas

As lentes eletrônicas consistem basicamente de uma bobina, formada por milhares de voltas de fio através da qual passa uma corrente e focalizam os feixes eletrônicos.

FUNCIONAMENTO DO MICROSCÓPIO ELETRÔNICO DE TRANSMISSÃO

CÁTODO → ÂNODO → AUMENTA VELOCIDADE DOS ELETRONS → FORMAM FEIXES DE ELÉTRONS → DESVIADOS NAS BOBINAS ELÉTRICAS (campo magnético) → LENTE CONDENSADORA (focaliza) → LENTE OBJETIVA (aumenta imagem) → DETECTORES

PROCESSAMENTO BÁSICO DO MATERIAL PARA VISUALIZAÇÃO ATRAVÉS DO MET

• Fixar o material por perfusão e/ou imersão;• O fragmento geralmente é embebido em tetróxido de ósmio,

depois passa por processos de lavagens, desidratado em concentrações crescentes de álcool e imerso em resina, onde

permanece até a polimerização;• O excesso de resina polimerizada é retirado para expor o

material de estudo e permitir o seu fatiamento no ultramicrotomo;

• As fatias ultrafinas são colocadas em telas de cobre ou níquel, e são contracoradas geralmente com uranila e

chumbo;• Após a obtenção de fotografias, caso não haja um sistema

de captação de imagens para CD-Rom, segue-se com a revelação do negativo, revelação e ampliação das fotografias.

• Análise dos dados.

FORMAÇÃO DA IMAGEMFORMAÇÃO DA IMAGEM

A imagem é também uma resultante da absorção diferenciada de A imagem é também uma resultante da absorção diferenciada de elétrons por diversas regiões da amostra, seja por variação de elétrons por diversas regiões da amostra, seja por variação de espessura, seja por interação com átomos de maior ou menor espessura, seja por interação com átomos de maior ou menor número atômico.número atômico.

APLICAÇÃO DA MICROSCOPIA ELETRÔNICA DE TRANSMISSÃO

• Análises morfológicas

• Caracterização de precipitados

• Determinação de parâmetros de rede

APLICAÇÃO DA MICROSCOPIA ELETRÔNICA DE TRANSMISSÃO

Estudo por microscopia eletrônica pode ser a Estudo por microscopia eletrônica pode ser a forma mais efetiva de estabelecer alguns forma mais efetiva de estabelecer alguns diagnósticos diagnósticos 

A neurologia e a nefrologia são as A neurologia e a nefrologia são as especialidades que mais utilizam esse recursoespecialidades que mais utilizam esse recurso

Microscopia eletrônica de biópsia renal mostra podócito hipertrófico com fusão de pedicelos sobre a membrana basal glomerular

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BIBLIOGRAFIA

Galleti , Silvia. INTRODUÇÃO A MICROSCOPIA ELETRÔNICA. Biológico, São Paulo, v.65, n.1/2, p.33-35, jan./dez., 2003

http://www.fleury.com.br/Medicos/SaudeEmDia/RevistaMedicinaESaude/pages/85Estudopormicroscopiaeletr%C3%B4nicapodeseraformamaisefetivadeestabeleceralgunsdiagn%C3%B3sticos.aspx

http://www.neurofisiologia.unifesp.br/eletronica.htm

http://www.youtube.com/watch?v=mYwki_1NkIE