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Termogênese nos Seres Vivos
Papel da SERCA na termogênese maligna observada em animais tratados com Ecstasy
Thiago Sá e Amanda R. R. Vicentino
Introdução
Ecstasy - metilenodioximetanfetamina (MDMA)
Sintetizado pelo químico alemão Anton Kölisch em Darmstadt
Patenteado pela Merck em 1914
Função em militares (contra sono e frio)
Efeitos tóxicos iniciais pelos militares Norte-americanos
Abandonada – causava empatia por estranhos
Redescoberto em 1970 em festas e raves
Proibido inicialmente em 1977 no Reino Unido e 1985 nos EUA
2ª maior droga ilicita utilizada no mundo (cerca de 8,3 milhoes já experimentaram)
Introdução Ação no SN
Principais efeitos na via da serotonina, tendo também transmissão via dopamina e norepinefrina
Liga-se a todos os 3 transportadores de monomaminas, com mais alta afinidade a 5-HT
Liga-se a receptores clássicos, com alta afinidade a 5-HT2, α2-adrenérgico, M1 muscarinico
Baixa afinidade a M2, α1 e β-adrenergicos e 5-ht1
Aumenta 5-HT extracelular:
Aumento da liberação pelas vesiculas sinápticas Bloqueio da recaptação Inibição da MAO Pode causar depleção de 5-HT por até 12 meses em ratos
Rápida liberação de Dopamina
Introdução
Efeitos não neuronais Respostas negativas cerebrovasculares Efeito inibidor do sistema imune
Efeitos psicológicos Sensação de euforia Mudanças na percepção (luz e som) Redução na posição defensiva Abertura emocional Empatia Redução na inibição Aumento na agressividade Depressão
Introdução
Hipertermia maligna
Principal causa morte em indivíduos usuários de ecstasy
Ocorre em decorrência do excessos de monoaminas no SNC
É causada em virtude da síndrome serotoninérgica causada principalmente quando há associação com outras drogas
SERCA
Proteína de 110Kda
Bombeia cálcio do Cito(sarco)plasma para dentro do retículo Cito(sarco)- plasmático com a ajuda da hidrólise do ATP
Em baixas concentrações (100nM)
Hidrólise de ATP desacoplada ao transporte de cálcio produz calor
Introdução
Produção de calor especialmente em fibras de músculo branco
Estudos mostram que essa bomba pode responder a estímulos adrenérgicos e de hormônios tireóideos
Avaliar mudanças na expressão de SERCA-1 e SERCA-2 em músculos brancos e vermelhos de ratos em tratamentos agudos e crônico
Avaliar alterações nas atividades ATPase, captação de cálcio e produção de calor nas fibras brancas e vermelhas
Avaliar possível efeito sinérgico da dose aguda de MDMA com exposição aguda ao frio
Objetivos
Tratamento 1
Hipertermia aguda
Grupo 1 = ControleGrupo 2 = MDMA Grupo 1 = ControleGrupo 2 = MDMA
28°C
4°C
Tratamento 2
Hipertermia crônica
Grupo 3 = ControleGrupo 4 = MDMA Grupo 3 = ControleGrupo 4 = MDMA
28°C
4°C
1 dia
14 dias
Tratamento
Análise comparativa de SERCA e produção de calor
Metodologia
Análise dos níveis de SERCA-1 e SERCA-2:
Western Blot das vesículas retiradas de músculos vermelhos e brancosAnálise realizada 3h após injeção de MDMA (tratamento agudo) ou após os 14 dias (tratamento crônico)
Tratamento dos animais:
Ratos Winstar (250-300g) mantidos em 24°C e 4°C com acesso livre a água e comidaCiclos de 12:12 (luz a partir de 7:00)Tratamento com injeção aguda de MDMA na dose de 7,5 mg/Kg ou salina (1,0 mL/Kg) (injeções dadas as 13:00) ou injeção crônica de MDMA na dose de 7,5 mg/Kg durante 14 dias uma vez ao dia;
Controle da temperatura corporal:
Temperatura medida por via retal A temperatura corporal será medida 30 min e 1h após injeção para ambos tratamentos
Metodologia
Análise da Captação de Cálcio:
Será medida a partir de filtração segundo de Meis, L., 2001;Análise realizada 3h após injeção de MDMA (tratamento agudo) ou após os 14 dias (tratamento crônico).
Análise da Atividade ATPase :
A atividade da ATPase será medida através da liberação de 32Pi oriundo do [γ -32P]ATP(de Meis, 2003);Análise realizada 3h após injeção de MDMA (tratamento agudo) ou após os 14 dias (tratamento crônico).
Análise da Produção de Calor:
A produção de calor será medida por calorimetria segundo de Meis, L., 2003;Análise realizada 3h após injeção de MDMA (tratamento agudo) ou após os 14 dias (tratamento crônico).
Tratamento 3
Hipertermia aguda
Grupo 1 = ControleGrupo 2 = MDMAGrupo 3 = MDMA + Thapsigargina 1 dia
Tratamento
Todos os parâmetros avaliados anteriormente serão repetidos neste experimento
Uma vez a SERCA estando aumentada nos músculos esqueléticos durante a hipertermia aguda e crônica em animais tratados com MDMA ...Objetivo: Verificar se o uso de inibidor da SERCA (thapsigargina) reverte a hipertermia aguda causada por MDMA.
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